Oleh : Adisti Dilarina

P ercobaan 2
Penetapan Kadar Vitamin C dalam Jus Buah Dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis.
1. Mahasiswa dapat menetapkan kadar Vitamin C
dalam Jus Buah
2. Mahasiswa dapat memahami prinsip penetapan
kadar Vitamin C dalam Jus Buah dengan metode
Spektrofotometri UV-Visible
Acidum Ascorbicum / Vitamin C
Hablur atau serbuk putih atau agak kuning. Oleh pengaruh
cahaya lambat laun menjadi berwarna gelap. Dalam keadaan
kering stabil di udara, dalam larutan cepat teroksidasi.
Melebur pada suhu 190º. (FI Ed.IV)

Struktur Kimia : C6H8O6

 Kenapa menggunakan
Spektrofotometri???

Metode analisis dalam penetapan kadar asam askorbat dengan

spektrofotometri UV-Vis merupakan metode yang baik
digunakan, relative murah dan mudah yang dapat menghasilkan
ketelitian dan ketepatan yang tinggi (Wardani, 2012)
ALAT DAN BAHAN PERCOBAAN

• Spektrofotometer
• Acidum Ascorbicum
• Timbangan analitik
(Vitamin C)
• Kertas saring
• Aquabidest
• Corong
• Sampel minuman jus
• Botol semprot buah yang tertera
• Mikropipet kadar vitamin C nya
• Peralatan gelas
Bahan
Alat
SKEMA KERJA

Pemilihan panjang gelombang maksimal

Pembuatan kurva baku

Pengukuran serapan sampel

Perhitungan kadar Vitamin C dalam sampel

PENENTUAN LAMBDA MAX
Timbang 25 mg dengan seksama, masukkan
labu takar 250 ml, tambah aqua bidestilata
sampai tanda (kadar 100 ppm)

Membuat kurva kalibrasi Vitamin C

konsentrasi 2, 4, 6, 8 ppm (v/v)

Serapan dibaca pada panjang gelombang

antara 200-400 nm

Panjang gelombang diambil dengan serapan

yang tinggi dan stabil
 PEMBUATAN KURVA BAKU
Buat seri larutan baku dengan kadar
2 ppm 4 ppm 6 ppm 8 ppm

Masukkan dalam labu takar 10 ml

Baca serapan pada panjang gelombang

maksimum

Buatlah kurva baku hubungan antara kadar larutan baku

vitamin C (X) dengan absorbansinya (Y)
PERHITUNGAN PEMBUATAN
SERI KONSENTRASI
• Contoh perhitugan kadar 2 ppm
• V1 x N1 = V2 x N2
10 ml x 2 ppm = V2 x 100 ppm
V2 = 10 ml x 2 ppm
100 ppm
V2 = 20 ml
100
= 0,2 ml = 200 mcl
ad 10 ml
TABEL KURVA BAKU
Konsentrasi Volume Aquabidest Absorbansi
(ppm) (ml)
2 ppm .......... ..........

4 ppm .......... ..........

6 ppm .......... ..........

8 ppm .......... ..........

Carilah nilai A, B, dan r dengan regresi

linier...................
 PENGUKURAN SERAPAN SAMPEL

Preparasi sampel, kemudian disaring, ambil 1 ml,

encerkan dalam labu takar 100 ml, dihomogenkan

Ukur absorbansi pada panjang gelombang maksimal

yang diperoleh

Masukkan data absorbansi ke dalam persamaan kurva

baku

Hitung kadar vitamin C menggunakan persamaan

regresi linier dari kurva baku

Lakukan Replikasi 3x
TUGAS !!
1. Sebutkan fungsi dari vitamin C di dalam tubuh manusia!
2. Hitunglah berapa ppm larutan stock vitamin C, jika diketahui serbu vit.c 50 mg
dilarutkan dalam 250 ml aquades!