● Lac operon E.coli mengandung gen yang terlibat dalam metabolisme laktosa. Ini
diekspresikan hanya ketika laktosa hadir dan glukosa tidak ada.
● Dua regulator menghidupkan operon "on" dan "off" sebagai respons terhadap tingkat
laktosa dan glukosa:lac represor dan protein aktivator katabolit (CAP).
● Lac represor bertindak sebagai sensor laktosa. Biasanya memblokir transkripsi operon,
tetapi berhenti bertindak sebagai penekan ketika laktosa hadir. Lac represor indra
laktosa tidak langsung, melalui isomer alolaktosa.
● Catabolite activator protein(CAP) bertindak sebagai sensor glukosa. Ini mengaktifkan
transkripsi operon, tetapi hanya ketika kadar glukosa rendah. CAP merasakan glukosa
secara tidak langsung, melaluimolekul "sinyal lapar"cAMP.
Pendahuluan
Laktosa: ini untuk makan malam! Meskipun itu mungkin kedengarannya tidak enak
bagi kami (laktosa adalah gula utama dalam susu, dan Anda mungkin tidak ingin
memakannya dengan lahap), laktosa bisa menjadi makanan yang sangat baik
untukbakteri E. coli. Namun, mereka hanya akan melahap laktosa ketika gula lain yang
lebih baik - seperti glukosa - tidak tersedia.
Dengan itu untuk konteks, apa sebenarnya operasilac? Thelacoperon adalahoperon,atau
sekelompok gen dengan promotor tunggal (ditranskripsikan sebagai mRNA tunggal).
Gen-gen dalam operon mengkode protein yang memungkinkan bakteri untuk
menggunakan laktosa sebagai sumber energi.
Apa yang membuatlacoperonmenyala?
Bakteri E. colidapat memecah laktosa, tetapi itu bukan bahan bakar favorit mereka. Jika
glukosa ada, mereka lebih suka menggunakannya. Glukosa membutuhkan lebih sedikit
langkah dan lebih sedikit energi untuk memecah daripada laktosa. Namun, jika laktosa
adalah satu-satunya gula yang tersedia,E. coliakan langsung digunakan dan
menggunakannya sebagai sumber energi.
Untuk menggunakan laktosa, bakteri harus mengekspresikanlakgen operon, yang
menyandikan enzim kunci untuk penyerapan dan metabolisme laktosa. Agar seefisien
mungkin,E. coliharus mengekspresikan operasilachanya ketika dua kondisi terpenuhi:
● Laktosa tersedia,dan
● Glukosatidaktersedia
Bagaimana tingkat laktosa dan glukosa terdeteksi, dan bagaimana perubahan level
mempengaruhilacoperasitranskripsi? Dua protein pengatur terlibat:
● Satu,lacpenekan, bertindak sebagai sensor laktosa.
● Yang lainnya, protein aktivator katabolit (CAP), bertindak sebagai sensor glukosa.
Protein-protein ini berikatan dengan DNAlacoperondan mengatur transkripsi
berdasarkan laktosa dan kadar glukosa. Mari kita lihat bagaimana ini bekerja.
Strukturlacoperon
Thelacoperon mengandung tiga gen:lacZ,lacY,danlacA.Gen-gen ini ditranskripsi
sebagai mRNA tunggal, di bawah kendali satu promotor.
Gen dalamlacoperonmenentukan protein yang membantu sel memanfaatkan
laktosa.lacZmengkodekan enzim yang memecah laktosa menjadi monosakarida (gula
satuan tunggal) yang dapat dimasukkan ke dalam glikolisis. Demikian
pula,lacYmengkodekan transporter tertanam-membran yang membantu membawa
laktosa ke dalam sel.
[Lebih detail]
Selain tiga gen,lacoperonjuga mengandung sejumlah sekuens DNA pengatur. Ini adalah
daerah DNA tempat protein pengatur tertentu dapat mengikat, mengendalikan
transkripsi operon.
Panel atas: Tidak ada laktosa. Ketika laktosa tidak ada,lacrepresormengikat erat ke
operator. Itu menghalangi RNA polimerase, mencegah transkripsi.
Panel bawah: Dengan laktosa. Allolactose (rearranged lactose) berikatan
denganlacrepresordan membuatnya melepaskan operator. RNA polimerase sekarang
dapat menyalin operon.
_Gambar dimodifikasi dari "Regulasi gen prokariotik: Gambar 3," oleh OpenStax
College, Biology (CC BY 4.0) ._
Perubahan padalacpenekanini disebabkan oleh molekul kecilalolaktosa, isomer (versi
yang disusun ulang) dari laktosa. Ketika laktosa tersedia, beberapa molekul akan
dikonversi menjadi allolaktosa di dalam sel. Allolactose berikatan
denganlacrepresordan membuatnya berubah bentuk sehingga tidak bisa lagi mengikat
DNA.
Allolactose adalah contohinduser, molekul kecil yang memicu ekspresi gen atau
operon. Thelacoperon dianggapoperon diinduksikarena biasanya dimatikan (ditekan),
namun dapat diaktifkan di hadapan alolaktosa inducer.
Panel atas: Glukosa rendah. Ketika kadar glukosa rendah, cAMP diproduksi. CAMP
menempel pada CAP, memungkinkannya untuk mengikat DNA. CAP membantu RNA
polimerase berikatan dengan promotor, menghasilkan transkripsi tingkat tinggi.
Panel bawah: Glukosa tinggi. Ketika kadar glukosa tinggi, tidak ada cAMP dibuat. CAP
tidak dapat mengikat DNA tanpa cAMP, jadi transkripsi hanya terjadi pada level rendah.
_Gambar dimodifikasi dari "Regulasi gen prokariotik: Gambar 3," oleh OpenStax
College, Biology (CC BY 4.0) ._
CAP tidak selalu aktif (dapat mengikat DNA). Sebaliknya, itu diatur oleh molekul kecil
yang disebutAMP siklik(cAMP). cAMP adalah "sinyal lapar" yang dibuat olehE.
coliketika kadar glukosa rendah. cAMP berikatan dengan CAP, mengubah bentuknya
dan membuatnya dapat mengikat DNA dan mempromosikan transkripsi. Tanpa cAMP,
CAP tidak dapat mengikat DNA dan tidak aktif.
[Bagaimana cAMP dibuat, dan bagaimana cara melaporkan kadar glukosa?]
● \Panah kanan kanan
● =kanan kanan panah
CAP hanya aktif ketika kadar glukosa rendah (kadar cAMP tinggi). Dengan
demikian,lacoperonhanya dapat ditranskripsi pada level tinggi ketika glukosa tidak ada.
Strategi ini memastikan bahwa bakteri hanya menyalakanlacoperondan mulai
menggunakan laktosa setelah mereka menggunakan semua sumber energi yang disukai
(glukosa).
Jadi, kapanlacoperonbenar-benarmenyala?
Thelacoperon akan diekspresikan pada tingkat tinggi jika dua kondisi terpenuhi:
● Glukosa harus tersedia:Ketika glukosa tidak tersedia, cAMP mengikat CAP, membuat
CAP mampu mengikat DNA. Bound CAP membantu RNA polimerase menempel
padalacpromotor operon.
● Laktosa harus tersedia: Jika laktosa tersedia,lacpenekanakan dilepaskan dari operator
(dengan mengikat allolaktosa). Ini memungkinkan RNA polimerase untuk bergerak
maju pada DNA dan menyalin operon.
Dua peristiwa ini dalam kombinasi - pengikatan aktivator dan pelepasan represor -
memungkinkan RNA polimerase mengikat kuat pada promotor dan memberikan jalan
yang jelas untuk transkripsi. Mereka menyebabkan transkripsi yang kuat dari
operasilacdan produksi enzim yang diperlukan untuk pemanfaatan laktosa.
Menyatukan semuanya
Sekarang setelah kita melihat semua bagian yang bergerak darilacoperon, mari kita
pelajari apa yang telah kita pelajari bersama untuk melihat bagaimana operon bereaksi
terhadap berbagai kondisi yang berbeda (ada atau tidaknya glukosa dan laktosa).
● Glukosa hadir, tidak ada laktosa: Tidak ada transkripsi operasilacterjadi. Itu
karenalacrepresortetap terikat pada operator dan mencegah transkripsi oleh RNA
polimerase. Juga, tingkat cAMP rendah karena kadar glukosa tinggi, sehingga CAP
tidak aktif dan tidak dapat mengikat DNA.
Glukosa hadir, tidak ada laktosa: Tidak ada transkripsi operasilacterjadi. Itu
karenalacrepresortetap terikat pada operator dan mencegah transkripsi oleh RNA
polimerase. Juga, tingkat cAMP rendah karena kadar glukosa tinggi, sehingga CAP
tidak aktif dan tidak dapat mengikat DNA.
_Gambar dimodifikasi dari "Regulasi gen prokariotik: Gambar 3," oleh OpenStax
College, Biology (CC BY 4.0) ._
● Glukosa hadir, laktosa hadir: Transkripsi tingkat rendah
darilacoperonterjadi.Lacrepresor dilepaskan dari operator karena inducer yang
(alolaktosa) hadir. tingkat cAMP, bagaimanapun, rendah karena glukosa ada. Dengan
demikian, CAP tetap tidak aktif dan tidak dapat berikatan dengan DNA, sehingga
transkripsi hanya terjadi pada level rendah, bocor.
Tidak ada glukosa, tidak ada laktosa: Tidak ada transkripsi operasilacterjadi. Tingkat
cAMP tinggi karena kadar glukosa rendah, sehingga CAP aktif dan akan terikat dengan
DNA. Namun,lacpenekanjuga akan terikat pada operator (karena tidak adanya
allolaktosa), bertindak sebagai penghalang bagi RNA polimerase dan mencegah
transkripsi.
_Gambar dimodifikasi dari "Regulasi gen prokariotik: Gambar 3," oleh OpenStax
College, Biology (CC BY 4.0) ._
● Glukosa tidak ada, hadir laktosa:
Transkripsi yang kuat darilacoperonterjadi.Lacrepresor dilepaskan dari operator karena
inducer yang (alolaktosa) hadir. Level cAMP tinggi karena glukosa tidak ada, sehingga
CAP aktif dan terikat pada DNA. CAP membantu RNA polimerase berikatan dengan
promotor, memungkinkan transkripsi tingkat tinggi.