PENDAHULUAN
Ekspresi atau aktivasi gen pada sel dapat dibedakan menjadi 2 macam yakni pada sel
prokariotik dan sel eukariotik. Ekspresi gen pada bakteri (prokariotik) terbatas hanya untuk
kepentingan siklus hidup. Sedangkan ekspresi gen pada sel eukariotik lebih kompleks,
selain untuk respon terhadap lingkungan juga karena adanya respon terhadap stimulus
internal yang sebagai contoh metabolisme sehingga gen yang diaktivasi sesuai dengan
kebutuhan masing-masing sel. Sel prokariotik pengontrolan aktivitas gen dapat dilakukan
dengan cara induksi enzim, represi enzim, represi katabolik dan operon.
Operon adalah sekumpulan gen yang berhubungan erat dalam mengatur dan
menentukan polimerisasi asam amino menjadi polipeptida. System operon terdiri dari 4
komponen yaitu gen regulator, promotor, operator dan gen struktur. System ini
dikembangkan oleh Jacques monod dan francois Jacob (1990). Gen regulator adalah gen
yang mensintesis protein repressor. Promotor berfungsi mengikat enzim RNA polymerase
dan memulai inisiasi transkripsi. Operator memodulasi aktivitas promotor, sedangkan gen
struktur adalah kumpulan gen yang ditranskripsikan bersamaan melalui satu RNAm dan di
translasi menjadi beberapa macam protein. E. coli merupakan contoh yang paling banyak
digunakan pada aktivitas gen dengan cara operon. Berikut adalah salah satu model aktivitas
gen lac operon.
C. REGULASI NEGATIF
Lac operon memiliki molekul kecil spesifik yang dapat mematikan repressor yang disebut
dengan induser. Induser lac operon adalah allolaktosa, isomer laktosa yang terbentuk dalam
jumlah kecil dari laktosa yang memasuki sel. Dengan tidak adanya laktosa (karena adanya
allolaktosa), represor lac dalam bentuk aktif dan mengikat operator; dengan demikian, gen
lac operon tidak aktif (Gambar a). Jika laktosa ditambahkan ke lingkungan sel, allolaktosa
berikatan dengan represor lac dan mengubah bentuknya sehingga represor tidak dapat lagi
mengikat ke operator. Tanpa represor lac terikat, operon lac ditranskripsi menjadi mRNA,
dan enzim untuk menggunakan laktosa dibentuk (Gambar b). Dalam konteks pengaturan
gen, enzim jalur laktosa disebut sebagai enzim yang dapat diinduksi karena sintesisnya
diinduksi oleh sinyal kimia (allolactose). Dengan memproduksi enzim yang tepat hanya
ketika nutrisi tersedia, sel menghindari pemborosan energi dan prekursor membuat protein
yang tidak diperlukan. Regulasi ini melibatkan kontrol negatif gen karena operon dimatikan
oleh bentuk aktif dari masing-masing protein penekannya. Allolaktosa menginduksi
sintesis enzim bukan dengan langsung mengaktifkan operon lac, tetapi dengan
membebaskannya dari efek negatif dari represor
D. REGULASI POSITIF
Ketika glukosa dan laktosa keduanya ada di lingkungan, E. coli secara istimewa
menggunakan glukosa. mekanisme regulasi positif tergantung pada interaksi protein
pengatur allosterik dengan molekul organik kecil, AMP siklik (cAMP), yang terakumulasi
ketika glukosa tidak ada. Protein pengatur, disebut cAMP receptor protein (CRP), adalah
aktivator, protein yang berikatan dengan DNA dan menstimulasi transkripsi gen. Ketika
cAMP berikatan dengan protein pengatur ini, CRP mengasumsikan bentuk aktifnya dan
dapat menempel pada lokasi tertentu di ujung hulu promotor lac (Gambar a). Dengan
memfasilitasi pengikatan RNA polimerase ke promotor dan dengan demikian
meningkatkan laju transkripsi operasi lac, perlekatan CRP ke promotor secara langsung
merangsang ekspresi gen. Oleh karena itu, mekanisme ini memenuhi syarat sebagai
peraturan positif. Jika jumlah glukosa dalam sel meningkat, konsentrasi cAMP turun, dan
tanpa cAMP, CRP terlepas dari operon lac. Karena CRP tidak aktif, RNA polimerase
berikatan kurang efisien dengan promotor, dan transkripsi operasi lac hanya menghasilkan
pada tingkat yang rendah, bahkan ketika terdapat laktosa (Gambar b). Dengan demikian,
operon lac berada di bawah kontrol ganda: kontrol negatif oleh represor lac dan kontrol
positif oleh CRP. Keadaan penekan lac menentukan apakah transkripsi gen operon lac
terjadi atau tidak sama sekali; keadaan CRP mengontrol laju transkripsi. Seolah-olah
operon memiliki saklar on-off dan kontrol volume.