TUGAS KELOMPOK

REVIEW JURNAL

FAT

(FLOURESCENT ANTIBODY TEST)

KELOMPOK 14

A. SUCI RAMADHANI PO.71.4.203.17.1.001

ASTIKA INAYAT ASKAR PO.71.4.203.17.1.010

ZAKIA RAHMATIKA PO.71.4.203.17.1.044

MAHGFIRAH ZULHIJJAH PO.71.4.203.16.1.014

AYU GUSTI PO.71.4.203.20.2.005

PRODI D4 SARJANA TERAPAN

JURUSAN ANALIS KESEHATAN

POLTEKKES KEMENKES MAKASSAR

KEMENTETERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA

2020
 REVIEW JURNAL KESEHATAN INTERNASIONAL

FAT (FLOURESCENT ANTIBODY TEST)

Jurnal 1

Judul Evaluasi Teknik Antibodi Fluoresen untuk

Diagnosis Rabies dari Sampel yang Membusuk
Penulis Tessy D.L., Arun G., Julie B., Sabore P.I , Rayne
J., Sunanda C. dan Prejit N.
Kata Kunci Rabies, Teknik Antibodi Fluoresen,
Pembusukan, Diagnosis.
Tahun 2018
Volume dan Halaman Volume 06 dan Halaman 01-04
Tanggal 14 September 2018
Abstrak Seringkali, sampel untuk diagnosis rabies akan
dikirimkan ke laboratorium setelah berbagai
tingkat pembusukan. Batasan dalam hal logistik
dan transportasi, jarak dan akses ke laboratorium
adalah hal biasa dalam alasan keterlambatan
pengiriman sampel. Tes positif dianggap sebagai
infeksi rabies yang sebenarnya, tetapi hasil tes
negatif tidak dianggap dapat diandalkan.
Penelitian ini dirancang dengan tujuan untuk
mempelajari stabilitas antigen virus rabies dalam
penguraian sampel otak anjing untuk diagnosis
berdasarkan FAT. Saat sampel otak positif rabies
yang terjadi pembusukan selama penyimpanan di
laboratorium pada suhu kamar menjadi sasaran
FAT, tujuh dari delapan sampel positif diuji
memberikan hasil positif pada hari ke-8. Pada
hari ke-16, antigen virus rabies hanya dapat
dideteksi dalam enam sampel. Semua enam
sampel negatif pada FAT. Pada hari ke-40
terjadi pembusukan. FAT bisa menjadi alat yang
andal, saat bangkai dikirim segar atau pada tahap
awal pembusukan. Pembusukan hingga satu
minggu tidak akan mempengaruhi hasil tes
ketika sampel otak dikenai FAT untuk diagnosis
rabies.
Tujuan Penelitian Tujuan penelitian ini adalah untuk mempelajari
stabilitas antigen virus rabies dalam penguraian
sampel otak anjing untuk diagnosis berdasarkan
FAT.
Population Sample/Problem Studi evaluasi FAT untuk diagnosis rabies dari
sampel otak yang membusuk dilakukan selama
bulan Juli 2015 hingga November 2015. Bangkai
anjing yang diterima di Institut Negara untuk
Penyakit Hewan di Palode di
Thiruvananthapuram distrik untuk diagnosis
post-mortem digunakan untuk penelitian ini.
Sampel otak yang dinyatakan positif virus rabies
digunakan untuk studi eksperimental ini.
Delapan sampel anjing segar dibawa ke
laboratorium dan dinyatakan positif rabies pada
FAT dipilih untuk penelitian ini. Satu sampel
negatif juga dimasukkan sebagai kontrol negatif.
Porsi otak besar dikumpulkan dari sampel dan
disimpan pada suhu kamar yang berada dalam
kisaran 25 °C hingga 32 °C. Sampel diuji oleh
FAT pada hari ke-0 (hari presentasi di
laboratorium), kemudian pada hari ke-4. Teknik
Antibodi Fluoresen dulu dilakukan dengan
konjugat anti-nukleokapsid rabies diproduksi
oleh BIORAD, Prancis dan hasilnya adalah
dinilai berdasarkan skor evaluasi standar yang
digunakan sebelumnya (Tepsumethanon et al.,
1997).
Hasilnya menjadi sasaran analisis dengan
prosedur statistic standar.
Metode Penelitian Menggunakan metode eksperimen
Pendahuluan Rabies adalah penyakit mengerikan yang
menyerang zoonosis manusia dan hewan yang
disebabkan oleh virus RNA. Diagnosa penyakit
ini sangat relevan untuk mengadopsi penting
tindakan pencegahan untuk bertahan hidup dalam
kehidupan kontak terkena infeksi. Virus Rabies
seharusnya sangat tidak stabil dan pengiriman
sampel segar ke laboratorium dianggap penting
untuk diagnosis yang tepat. Tetapi antigen virus
dapat dideteksi dalam pembusukan bangkai
terinfeksi yang disimpan dalam rantai dingin. Tes
standar emas untuk diagnosis rabies adalah
Fluorescent Antibody Test (FAT) (Meslin et al.,
1996; OIE manual, 2012).
Oleh karena itu, dalam penelitian ini, keandalan
 FAT untuk diagnosis rabies dari sampel yang
telah mengalami beberapa derajat pembusukan
dievaluasi. India sangat endemik untuk rabies
dan kesehatan masyarakat serta signifikansi
ekonomi penyakit tersebut sangat relevan
(Alakes et al., 2014; Sajna dan Roshni, 2014).
Penting untuk menyerahkan bangkai yang
dicurigai di bawah 'rantai dingin' ke laboratorium
diagnostik untuk mendapatkan diagnosis yang
andal. Namun, hal ini tidak selalu
memungkinkan karena kendala logistik dan
transportasi. Jadi, bangkai dapat diterima di
laboratorium diagnostik dalam berbagai tahap
pembusukan. Padahal seharusnya virus rabies
menjadi sangat tidak stabil, antigen virus dapat
dideteksi pada bangkai yang terinfeksi disimpan
dalam rantai dingin. Namun, ada variasi yang
signifikan dalam temuan para sarjana yang
berbeda sehubungan dengan durasi penelitian
dan hewan yang digunakan untuk penelitian juga
berbeda (Beltrán et al., 2014; Rojas et al., 2006;
Lewis dan Thacker, 1974) .
Hasil Penelitian Studi tersebut mempresentasikan bahwa, delapan
sampel yang menjalani uji antibodi fluoresen,
pertama atau hari ke-0, tujuh sampel positif
dengan skor evaluasi 3+ dan sampel sisanya
memberikan skor 2+. Pada hari ke-4, semua
sampel tetap positif kecuali pada sampel 2. Pada
hari ke-8, derajat kepositifan tetap sama pada 2
sampel dan menurun 1 skor pada 5 sampel. Satu
sampel yang pada awalnya memberikan skor 2+
memberikan hasil negatif. Pada hari ke 12, skor
tetap sama seperti pada hari ke-8 dalam tiga
sampel dan menurun satu skor di semua 4 sampel
positif lainnya. Sampel yang memberikan hasil
negatif pada hari ke-8 juga diuji ulang dan
ditemukan negatif. Pada hari ke-16, skor tetap
sama seperti pada hari ke-12 dalam 3 sampel,
menurun 1 skor pada 2 sampel dan satu sampel
memberikan hasil negatif. Menariknya, skor
tersebut meningkat 2 dalam satu sampel.
Tes tidak dapat diulang karena jaringan yang
tersedia tidak mencukupi pada beberapa sampel.
Namun, pada pengulangan tes dengan jaringan
yang tersedia pada sampel lain, hasil positif
dapat diperoleh dalam satu sampel bahkan pada
 hari ke-32. Persentase positif tetap 100% hingga
hari ke-4, menurun menjadi 87,5% dalam hari
ke-12 dan hari ke-16 itu diturunkan menjadi
75%. Satu sampel kontrol negatif, yang
dimasukkan dalam penelitian, tetap negatif
selama periode penelitian. Jadi, dalam semua
delapan kasus, ada penurunan umum dalam hal
positif hasil tes yang ditunjukkan dengan
penurunan bertahap dalam nilai evaluasi dari
hasil tes sebelumnya. Namun, terdapat beberapa
pengecualian dimana skor tes memberikan
peningkatan positif dibandingkan hasil tes
sebelumnya. Teknik Antibodi Fluoresen
mendeteksi keenam kasus rabies dengan akurasi
persen pada hari ke-0 dan pada hari ke-4. Setelah
itu pengujian dilakukan pada hari ke-8 pasca-
pembusukan di mana salah satu sampel otak
berubah menjadi negatif.
Kesimpulan Kesimpulan dalam penelitian ini adalah bahwa
antigen nukleokapsid virus rabies relatif stabil
dalam sampel otak yang membusuk untuk
didiagnosis dengan FAT. Temuan penelitian
menunjukkan bahwa, FAT dapat digunakan
sebagai tes standar emas ketika sampel otak
diterima segar atau dalam beberapa hari pertama
pembusukan. Bahkan bangkai yang digali dapat
dijadikan subjek pengambilan sampel untuk
diagnosis rabies oleh FAT yang dapat
memberikan hasil yang terdepan.
Jurnal 2

Judul Penggunaan Metode Enzim Linked

Immunosorbent Assay (ELISA) dan Direct
Fluorescent Antibody (DFA) untuk Diagnosis
Giardia intestinalis
Penulis Funda Dogruman Al, Semra Kustimur, Tuncer
Ozekinci, Neriman Balaban, dan Mustafa Necmi
Ilhan
Kata Kunci Giardia intestinalis, ELISA, Metode Antibodi
Fluoresen Langsung
Tahun 2006
Volume dan Halaman Volume 30 dan Halaman 275-278
Tanggal 25 Desember 2006
Abstrak Tujuan dari penelitian ini adalah untuk
mengevaluasi nilai teknik direct fluorescent
antibody (DFA) yang dilaporkan memiliki
sensitivitas dan spesifisitas yang tinggi serta uji
enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)
yang digunakan untuk menentukan antigen
dalam sampel tinja dalam diagnosis rutin Giardia
intestinalis. Ketika 44 sampel feses di mana kista
G. intestinalis dan / atau trofozoit telah terlihat
selama pemeriksaan Lugol asli diselidiki,
kepositifan terdeteksi dengan metode pewarnaan
trikrom, metode ELISA dan metode DFA
monoklonal ditemukan menjadi 37 (84,0%), 39
(88,6%) dan 35 (79,5%) masing-masing. DFA
mendeteksi Crytosporidium parvum kista selain
G. intestinalis dalam satu sampel. 27 (61,4%)
sampel positif dengan ketiga metode tersebut.
Jika dibandingkan dengan metode DFA, metode
ELISA memiliki sensitivitas 88,6%, spesifisitas
88,8%, nilai prediksi positif 79,5%, dan nilai
prediksi negatif 20,0% sedangkan metode
pewarnaan trichrome memiliki sensitivitas
85,7%, spesifisitas 77,8%, nilai prediksi positif
81,1% dan nilai prediksi negatif 22,2%. Tidak
ada perbedaan yang signifikan secara statistik
antara tes DFA dan ELISA dan antara tes DFA
dan metode pewarnaan trichrome untuk
mendiagnosis G. intestinalis (p> 0,05).
Tujuan Penelitian Tujuan dari penelitian ini adalah untuk
mengevaluasi nilai teknik direct fluorescent
antibody (DFA) yang dilaporkan memiliki
sensitivitas dan spesifisitas yang tinggi serta uji
enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)
yang digunakan untuk menentukan antigen
dalam sampel tinja dalam diagnosis rutin Giardia
intestinalis.
Population Sample/Problem Giardiasis terlihat di seluruh dunia dan pada
semua kelompok umur meskipun lebih sering
ditemukan pada anak-anak. Beberapa penelitian
dari Turki pada waktu yang berbeda telah
melaporkan kejadian faktor penyebab sebesar
1,9-37,7%. Infeksi asimtomatik atau diare akut
dalam waktu yang singkat dapat terjadi. Sebagian
besar kasus mengeluhkan tinja lunak berminyak,
perut kembung, gas, kram perut, dan nyeri tekan
epigastrium. Perubahan kualitas dan jumlah
lendir di jejunum terlihat pada pasien yang
terinfeksi G. intestinalis. Perubahan patologis
bersamaan yang disebabkan oleh parasit di
mukosa usus menyebabkan gambaran klinis
malabsorpsi. Pasien yang diagnosisnya belum
dibuat dan pengobatan yang tidak tepat diberikan
menyebabkan menderita diare intermiten dengan
periode buang air besar normal selama berbulan-
bulan. Kasus yang sembuh secara spontan terus
mengeluarkan kista dan menjadi sumber infeksi.
Teknik diagnostik pertama yang digunakan
adalah pemeriksaan mikroskopis tetapi metode
ini mungkin tidak memadai karena ekskresi
bentuk kista parasit bersifat intermiten.
Enterotest, biopsi duodenum dan evaluasi sampel
sikat merupakan metode invasif dan sulit
digunakan, terutama pada anak-anak.
Metode Penelitian Menggunakan metode analisis perbandingan
Pendahuluan Diagnosis Giardia intestinalis (G.intestinalis)
pada orang yang terinfeksi dilakukan dengan
mengamati kista atau trofozoit. Secara
mikroskopis pada tinja atau cairan duodenum
atau dengan pemeriksaan sampel usus kecil dan
biopsi. Metode tradisional seperti itu
membutuhkan banyak tenaga dan staf
berpengalaman. Metode ini juga menyebabkan
hasil yang salah pada 10-50% kasus ketika
sampel tinja tunggal diperiksa karena kista dapat
 dikeluarkan dalam tinja dan jumlah kista dalam
tinja rendah. Ketika infeksi diketahui ada, tidak
mungkin untuk mendeteksi parasit pada 20-50%
kasus bahkan ketika metode konsentrasi
digunakan selain metode pemeriksaan tinja rutin.
Ini telah mengarah pada pengembangan metode
yang cepat dan andal untuk diagnosis giardiasis.
Metode ELISA di mana antibodi monoklonal
yang dimurnikan digunakan untuk mendeteksi G.
intestinalis antigen kista dalam tinja (sensitivitas
88-99%, spesifisitas 100%) dan antibodi
fluoresen langsung (DFA) di mana antibodi
monoklonal fluoresen mengikat khusus pada G.
intestinalis kista digunakan (sensitivitas 100%,
spesifisitas 100%) adalah tes yang telah
digunakan baru-baru ini untuk diagnosis.
Hasil Penelitian Dari 44 sampel feses yang diduga terdapat G.
intestinalis kista atau trofozoit pada pemeriksaan
lugol native, 37 (84%) positif dengan metode
pewarnaan Trichrome, 39 (88,6%) dengan
metode ELISA monoklonal dan 35 (79,5%)
dengan tes DFA monoklona. DFA menunjukkan
Crytosporidium parvum kista bersama dengan G.
intestinalis dalam satu sampel. Hanya 27
(61,4%) sampel positif pada ketiga metode. Jika
dibandingkan dengan metode DFA dimana
fluorescent monoclonal antibodies mengikat
khusus pada G. intestinalis kista maka metode
ELISA mempunyai sensitivitas 88,6%,
spesifisitas 88,8%, nilai prediksi positif 79,5%
dan nilai prediksi negatif 20% sedangkan metode
pewarnaan Trichrome memiliki sensitivitas
85,7%, spesifisitas 77,8%, nilai prediksi positif
81,1% dan nilai prediksi negatif 22,2%. Tidak
ada perbedaan yang signifikan secara statistik
antara tes DFA dan ELISA dan antara tes DFA
dan metode pewarnaan Trichrome untuk
mendiagnosis G. intestinalis (p>0,05)
Pembahasan Metode ELISA dan DFA telah digunakan untuk
diagnosis giardiasis Di berbagai studi di Turki
telah melaporkan 136 (96,4%) dari 141 sampel
feses mereka telah mendeteksi kista G.
intestinalis dan / atau trofozoit dengan
mikroskop langsung sebagai positif dengan
metode ELISA. Metode ELISA memiliki
sensitivitas 96,4% dan spesifisitas 80,8% pada
penelitian ini. Ada perbedaan yang signifikan
secara statistik antara kedua metode tersebut.
Gödekmerdan et al. telah menemukan
G.intestinalis kista dan / atau trofozoit pada 20%
sampel tinja dari 260 pasien dengan berbagai
keluhan gastrointestinal melalui mikroskop
langsung. Mereka mencari G.intestinalis antigen
dengan metode ELISA pada sampel tersebut dan
menemukan antigen pada 25,4%. Metode ELISA
memiliki sensitivitas 100% dan spesifisitas 93%
tetapi tidak ada perbedaan yang signifikan secara
statistik antara kedua metode tersebut. Yılbaz
dkk. telah melaporkan sensitivitas 92,5% dan
spesifisitas 97,7% untuk metode ELISA
sedangkan tingkat yang sama masing-masing
adalah 98% dan 92% dalam studi oleh Değerli
dan Özçelik.
Di antara studi asing, Schunk et al. menemukan
22 dari 276 sampel feses positif dengan metode
ELISA dan ditemukan kista parasit / trofozoit
pada 21 sampel dengan pemeriksaan
mikroskopis. Mengambil pemeriksaan
mikroskopis sebagai metode referensi, mereka
melaporkan sensitivitas 100% dan spesifisitas
99,6% untuk metode ELISA. Aldeen dkk.
mengevaluasi sembilan yang diperoleh dari
pasien yang diduga menderita giardiasis dan
melaporkan sensitivitas 88,6-100% dan
spesifisitas 99,3-100%.
Hanya ada sedikit penelitian Turki tentang
penggunaan metode DFA untuk mendiagnosis
giardiasis. Taylan Özkan dkk. telah mendeteksi
G.intestinalis kista dan trofozoit pada 11% dari
272 sampel pasien yang diduga menderita
G.intestinalis dengan metode DFA dan pada 9%
dengan metode pewarnaan Trichrome.
Di antara penelitian asing, Alles et al. telah
menemukan kista parasit / trofozoit pada 4,4%
dari 2696 sampel tinja oleh DFA dan pada 2,9%
dengan pemeriksaan mikroskopis rutin dan telah
melaporkan sensitivitas tes masing-masing
99,2% dan 66,4% dan spesifisitas 100% untuk
kedua tes. Mereka menyatakan bahwa ada
perbedaan yang signifikan secara statistik untuk
diagnosis antara DFA dan pemeriksaan
mikroskopis.
 Garcia dan Shimizu telah menggunakan
berbagai kit ELISA dan DFA komersial dan
melaporkan sensitivitas metode ELISA dalam
diagnosis giardiasis sebesar 94-100% dan
spesifisitas 100% sedangkan kedua angka
tersebut 100% untuk DFA.
Kesimpulan Kesimpulan dalam penelitian ini, 44 sampel tinja
di mana Giardia intestinalis kista dan / atau
trofozoit dicurigai dengan pemeriksaan lugol asli
diperiksa, metode pewarnaan Trichrome, metode
ELISA monoklonal dan DFA monoklonal
(dilaporkan memiliki sensitivitas tinggi dan
metode spesifisitas) ditemukan 37 ( 84%), 39
(88.6%) dan 35 (79.5%) sebagai positif masing-
masing.
Jurnal 3

Judul Perbandingan Real-Time PCR, Kultur

Bakteriologis dan Tes Antibodi Fluoresen untuk
Deteksi Leptospira borgpetersenii dalam Urine
Sapi yang Terinfeksi Secara Alami
Penulis Jarlath E.Nally, Ahmed AA Ahmed, Ellie J.
Putz, Debra E. Palmquist dan Marga GA Goris
Kata Kunci Penyakit ternak; Leptospira; leptospirosis; urine
Tahun 2020
Volume dan Halaman Volume 7, 66 dan Halaman 1-6
Tanggal 15 Mei 2020
Abstrak Sapi rentan terhadap infeksi multi serovar
leptospira patogen, mengakibatkan abortus, lahir
mati, lahir prematur, gagal reproduksi dan
sindrom penurunan susu. Sapi juga berperan
sebagai inang reservoir L. borgpetersenii serovar
Hardjo yang diekskresikan dari ginjal tubulus
melalui urin ke lingkungan di mana ia bertahan
dalam kondisi lembab yang sesuai dengan yang
sebelumnya. Ini menunjukkan bahwa 7% sampel
urin dari sapi potong positif L. borgpetersenii
serovar Hardjo dengan kultur dan / atau uji
antibodi fluoresen (FAT). Dalam studi ini, uji
real-time PCR (rtPCR) diterapkan untuk
menentukan kinerja relatif deteksi berbasis
rtPCR L. borgpetersenii serovar Hardjo
dibandingkan dengan teknik kultur dan FAT
yang dilaporkan sebelumnya. Dari 42 sampel
urin sapi yang positif leptospira melalui kultur
dan / atau FAT, 60% (25/42) positif oleh rtPCR.
Dari 22 sampel kultur-positif, 91% (20/22)
adalah rtPCR-positif. Dari 32 positif FAT
sampel, 50% (16/32) positif rtPCR. Untuk 10
sampel yang kultur-positif tetapi FAT-negatif,
90% (9/10) adalah rtPCR-positif. Untuk 20
sampel yang FAT-positif tetapi budaya-negatif,
25% (5/20) adalah rtPCR-positif. Secara kolektif,
hasil ini menunjukkan bahwa tidak ada uji
tunggal yang optimal, dan penggunaan lebih dari
satu uji untuk mendeteksi leptospira dalam urin
dari sapi yang terinfeksi secara alami
direkomendasikan.
Tujuan Penelitian Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui
Perbandingan Real-Time PCR, Kultur
Bakteriologis dan Tes Antibodi Fluoresen untuk
Deteksi Leptospira borgpetersenii dalam Urine
Sapi yang Terinfeksi Secara Alami
Population Sample/Problem Patogen Leptospira menjajah tubulus ginjal dari
inang reservoir infeksi, termasuk spesies hewan
domestik dan liar, dari mana mereka
diekskresikan melalui urin ke lingkungan dan
bertahan dalam kondisi lembab yang sesuai.
Kontak dengan sumber lingkungan yang
terkontaminasi, atau langsung dengan urin dari
hewan yang terinfeksi, dapat mengakibatkan
infeksi akut pada inang insidental, karena
patogen Leptospira dapat menembus permukaan
mukosa atau kerusakan kulit. Lebih dari 1 juta
kasus penyakit manusia diperkirakan terjadi
setiap tahun, dengan hampir 60.000 kematian.
Pasien hewan dan manusia yang menderita akut
leptospirosis dapat terus mengeluarkan leptospira
dalam urin meskipun gejala klinisnya sudah
sembuh. Pada hewan peliharaan, kerugian
ekonomi terbesar timbul dari infeksi kronis,
menyebabkan reproduksi pemborosan. Penularan
penyakit dari semua patogen Leptospira
dipertahankan oleh reservoir asimtomatik inang
dimana terdapat keseimbangan biologis yang
unik antara inang hewan dan serovar spesifik
Leptospira, dan seperti yang dicontohkan oleh
Leptospira borgpetersenii serovar Hardjo pada
sapi di populasi seluruh dunia.
Metode Penelitian Menggunakan metode eksperimen
Pendahuluan Leptospirosis adalah penyakit zoonosis global.
Leptospirosis merupakan penyebab morbiditas
dan mortalitas yang signifikan pada hewan
peliharaan, termasuk sapi, anjing, domba, babi
dan kuda, yang dapat menjadi insidental dan
reservoir inang, tergantung pada spesies dan
serovar Leptospira yang terlibat. Gejala klinis
berkisar dari demam ringan hingga penyakit
ikterik yang lebih parah dan perdarahan paru
masif, yang mencerminkan sistemik penyebaran
dari serovar yang berbeda ke seluruh inang.
Leptospirosis sapi dapat menyebabkan aborsi,
lahir mati, kelahiran prematur, kegagalan
reproduksi dan sindrom penurunan susu. Sapi
rentan terhadap infeksi beberapa Leptospira
spesies dan serovar termasuk L. borgpetersenii
serovar Hardjo, L. interrogans serovar Pomona,
L. kirschneri serovar Grippotyphosa dan L.
noguchii. Namun, serovar paling menonjol yang
terkait dengan sapi adalah Hardjo, yang
menyebabkan kegagalan reproduksi. Pada sapi
seropositif untuk Hardjo, rata-rata waktu dari
beranak hingga konsepsi (132,6 hari) secara
signifikan lebih lama dari pada waktu untuk sapi
seronegatif (95,4 hari). Sapi yang seropositif
terhadap serovar Hardjo dua kali lebih mungkin
gagal untuk hamil dari pada sapi yang
seronegatif. Studi seroprevalensi menunjukkan
bahwa hingga 49% ternak terkena patogen
serovar. Hewan seronegatif juga dapat
mengeluarkan Leptospira.
Tes definitif untuk mengidentifikasi sapi yang
mengeluarkan leptospira dalam urin adalah
kultur, yang menghasilkan isolat Leptospira yang
dapat sepenuhnya dikarakterisasi pada tingkat
genetik dan serovar, dan tersedia untuk
digunakan dalam panel diagnostik uji aglutinasi
mikroskopis (MAT) atau dimasukkan dalam
vaksin berbasis bakteri. Namun, budaya bisa
memakan waktu berminggu-minggu hingga
berbulan-bulan, dan membutuhkan sangat khusus
media sebagai alternatif, tes antibodi fluoresen
(FAT) dapat dilakukan relatif cepat dengan
menggunakan antibodi yang memberikan
spesifisitas untuk mendeteksi leptospira patogen
sertavisual konfirmasi dari morfologi leptospira
utuh yang secara aktif diekskresikan dalam urin.
Namun, FAT tidak memberikan identifikasi
serovar atau spesies. Tes molekuler seperti PCR
dapat dilakukan secara relatif cepat dan
digunakan untuk menyimpulkan adanya
leptospira dalam sampel urin; keuntungan
termasuk sensitivitas, kuantifikasi, dan
kemampuan untuk mengurutkan produk yang
diperkuat yang dapat digunakan untuk
mengidentifikasi spesies patogen yang terlibat.
Berbagai faktor dapat mempengaruhi pilihan
pengujian yang digunakan untuk mendeteksi
keberadaan leptospira dalam sampel urin,
termasuk ketersediaan sumber daya, keahlian,
 waktu, tujuan diagnostik, dan aplikasi hilir.
Sebelumnya telah dilaporkan bahwa penggunaan
setidaknya dua teknik deteksi diperlukan untuk
mendeteksi L. borgpetersenii serovar Hardjo
dalam urin ternak yang terinfeksi secara
eksperimental.
Penelitian ini menunjukkan bahwa 7% (43/600)
kasus sampel sapi potong secara aktif
mengeluarkan leptospira dalam urin seperti yang
dideteksi oleh kultur dan / atau FAT . Dari 43
sampel tes-positif, 13 positif dengan kultur dan
FAT, sedangkan 10 positif hanya dengan kultur,
dan 20 positif hanya oleh FAT. Dalam studi saat
ini menilai manfaat penerapan waktu nyata
molekuler alternatif uji PCR (rtPCR) untuk
mendeteksi leptospira di 42 sampel urin sapi
positif uji untuk menentukan kinerja relatif dari
setiap pengujian dalam sampel dari sapi yang
terinfeksi secara alami.
Hasil Penelitian Dari 42 sampel urin sapi yang diketahui positif
Leptospira melalui kultur dan / atau FAT, 60%
(25/42) positif oleh rtPCR. Dari 22 sampel
kultur-positif, 91% (20/22) adalah rtPCR-positif
dan dari 32 sampel FAT-positif, 50% (16/32)
adalah rtPCR-positif. Hanya 26% (11/42) dari
semua sampel yang positif kultur, FAT dan
rtPCR. Semua kontrol negatif, negatif dengan
rtPCR. Persentase yang diamati untuk gabungan
hasil positif dan negatif antara rtPCR dan kultur
hasil adalah 86,5% dan 51,9% untuk rtPCR dan
FAT, masing-masing. Kappa Cohen dilakukan
untuk mengevaluasi tingkat kesepakatan antara
metode rtPCR dan kultur yang dilaporkan
sebelumnya dan deteksi FAT. Nilai Kappa
Cohen 0,74 menunjukkan kesepakatan
substansial antara rtPCR dan budaya, sementara
nilai Kappa Cohen 0,04 antara rtPCR dan FAT
menunjukkan hanya sedikit kesepakatan, hampir
setara dengan peluang acak.
Pembahasan Secara kolektif, hasil penelitian ini menunjukkan
bahwa tidak ada uji tunggal untuk mendeteksi
leptospira dalam sampel urin sapi yang optimal.
Dalam studi ini, kami menganggap pengumpulan
dan pemprosesan sampel sedekat mungkin dalam
pengaturan non-eksperimental: urin dikumpulkan
langsung dari kandung kemih dengan jarum dan
 spuit pada saat penyembelihan dan segera
digunakan untuk kultur. Selain itu, sampel urin
dibawa ke laboratorium pada suhu kamar dan
diproses untuk FAT dan rtPCR dalam waktu 3
jam setelah pengambilan. Ada banyak
kemungkinan alasan untuk variabilitas dalam
hasil positif yang diamati untuk setiap pengujian,
termasuk variabilitas dalam komposisi urin dari
hewan turunan, serta jumlah leptospira yang
ditumpahkan per mL urin, seperti yang
diharapkan dengan sampel lapangan. Namun
demikian, perbandingan berdampingan dari
masing-masing teknik dengan sampel lapangan
yang identik menyoroti adanya variabel melekat
dan faktor yang dapat mempengaruhi hasil tes-
positif untuk mendeteksi leptospira dalam sampel
urin sapi. Pada beberapa sampel, rtPCR positif
sedangkan FAT negatif, sebaliknya ketika rtPCR
negatif FAT positif. Hasil tersebut menekankan
kesulitan dalam menentukan benar uji referensi
untuk sampel lapangan.
Dalam penelitian sebelumnya, tujuan utama
adalah untuk mendapatkan dan mengidentifikasi
isolat sapi Leptospira, yang semuanya
diklasifikasikan sebagai L. borgpetersenii.
Identifikasi spesies dimungkinkan dengan isolat
yang dibudidayakan tetapi tidak dengan FAT.
Dalam studi ini, penggunaan rtPCR memberikan
nilai yang identik di semua sampel positif rtPCR,
dan yang sebelumnya ditetapkan untuk L.
borgpetersenii. Meskipun kultur dianggap
sebagai tes diagnostik standar emas untuk deteksi
langsung Leptospira, pada dasarnya sulit, dan
hanya dilakukan oleh laboratorium spesialis.
Jadi, penerapannya terbatas pada studi lapangan
dianjurkan untuk menggunakan lebih dari satu
alat tes untuk mendiagnosis pelepasan leptospira
melalui urin pada sapi.
Kesimpulan Penggunaan lebih dari satu uji diagnostik
direkomendasikan untuk mendeteksi dan
mendiagnosis L. borgpetersenii dalam urin sapi.