Brebes, 20 April 2022

BBTKL PP Yogyakarta
E. Kristanti
•ž APD (sarung tangan, masker)
• Skalpel (tangkai pisau ukuan no 3 dan
ž pisau no 15)
•ž Lampu spiritus(bunsen)
• Kapas alkohol, Plester bulat
•ž Obyek glass
• Pensil
• Pinset
• Mikrotube 2 ml, Alkohol, Label, Parafilm
ž Ambil kerokan jaringan dari 2 atau 3 tempat
(Cuping telinga kanan dan kiri,kelainan kulit
/lesi yang aktif)
ž Tetapi jika dirasa dari 1 tempat sudah
memenuhi jumlah sampel yang dibutuhkan
bisa diambil dari 1 tempat saja.
• Pemeriksaan ulang dilakuan ditempat
kelainan kulit yg sama
ž Petugas memakai APD, kemudian mempersiapkan
peralatan yang dibutuhkan.
ž Menyiapkan obyek glass, memberi nama atau label pada
slide, menyiapkan microtube yang berisi alkohol 70 %
ž Pasang bisturi kedalam scalpel.
ž Bagian yang diambil dibersihkan dgn kapas alkohol
ž Bagian tersebut dijepit dengan ibu jari dan jari telunjuk
sehingga kulit kelihatan menjadi pucat, supaya
kemungkinan perdarahan sedikit sekali.
ž Dengan lancet dibuat sayatan sepanjang ±1/2 cm sedalam
2 mm
ž Darah yang keluar pertama dibersihkan, kemudian sisa luka
dan dasar luka dikerok dengan scaplel.
ž Keroklah beberapa kali untuk mendapatkan sampel usap
dan sampel molekuler
ž Siapkan obyek glass yang bersih dan bebas lemak
dengan membakar pada lampu bunsen
ž Beri kode/sampel yang diambil
ž Bubur Jaringan yang sudah diambil dipulas ke
obyek glass
ž Sehingga diperoleh smear yang tidak tipis/tidak
tebal diameter 1-1,5 cm
ž Biarkan kering udara
ž Fiksasi sediaan dengan melewatkan diatas api
Bunsen sebanyak 2-3 kali selama 1-2 detik
ž Ulangi Langkah diatas untuk lokasi apusan yang
lain.
ž Siapkan tabung ulir atau cryotube 2 ml steril
ž Isi 600 µl buffer salin/PBST atau Alkohol 70%

ž Kerokan kulit/bubur jaringan dimasukkan

sekaligus dengan pisaunya.
ž Sampai didapatkan cairan PBST/Alkohol
terlihat keruh
o
ž Suhu penyimpanan 4 C untuk jangka waktu
penyimpanan singkat atau kurang dari 1
bulan. Atau suhu -20 oC untuk jangka waktu
lama.
ž Preparat dipastikan sudah Ziehl
Neelsen (periksa dibawah Mikroskop)
Tempatkan di rak preparat dicat
ž Konfirmasi PCR
- Mikrotube yang siap dikirim, disimpan
dalam cool box yg mengandung blue
gel ice atau ice pack
ž Letakkan slide di atas bak
ž Genangi slide dengan carbol fuksin (pewarna utama)
ž Hangatkan dengan cara dipanaskan dengan api hingga
sedikit asap putih
ž Biarkan selama 3-5 menit, tambahkan carbol fuksin
jika cairan mulai mengering
ž Angkat slide bilas dengan air bersih hingga tidak ada
lagi cat yang terbawa air bilasan.
ž Tuangi slide dengan decolorizer/asam alkohol selama
3-5 detik
ž Bilas tuangi cat dengan counterstain, methilen blue,
selama 1 menit kemudian bilas.
ž Keringkan slide dengan diangin-angin
ž Baca dibawah mikroskop perbesaran 100x
ž BI Negatif : tidak dijumpai BTA
Positif 1: Ditemukan 1-10 BTA/100 LP
Positif 2 : Ditemukan 1-10 BTA/10 LP
Positif 3 : Ditemukan 1-10 BTA/1 LP
Positif 4 : Ditemukan 1-100 BTA/1 LP
Positif 5 : Ditemukan 100-1000 BTA/1 LP
Positif 6 : Dtemukan >1000 BTA/1 LP
ž Indeks Morfologi (MI)
Jumlah bakteri utuh X 100 %
Jumlah bakteri utuh + tidak utuh
Contoh :
Bakteri utuh : 200
Bakteri tidak utuh : 20
200 X 100 %
220
: 90 %
Morfologi Indek : 90 %
Bahan dan Alat
üWadah Primer : tempat berulir, sesuai dengan jumlah
sampel
üWadah Sekunder : melindungi wadah primer, wadah
anti bocor, tahan air (rapat)
üWadah terluar: kotak styrofoam dengan kardus
kaku yang kedap air /cool box.
üKantong plastik (Sebaiknya Zip Lock)
üTisu
üParafilm
üIce Pack
üPengganjal : kertas koran, plastik gelembung,
potongan styrofoam, dll
üLakban
• Label berisi: nama, usia, jenis kelamin, tempat/asal
fayankes
• Bungkus/lilit dengan parafilm
• Sisipkan kertas/tisu penyerap cairan
• Masukkan dalam plastik kedap air
• Masukkan seluruh spesimen ke dalam cool
box/sterofoam yang berisi ice pack yang terlebih
dahulu dibekukan. Suhu pengiriman dijaga 2-8℃

• Ice pack sebaiknya ditempatkan pada sisi-kiri

kanan (ditambahkan juga bagian atas-bawah jika
memungkinkan)
PENYIMPANAN SLIDE PREPARASI
Sebelum masuk ke box pengiriman kemas dalam plastik
Siapkan data-data specimen yang lengkap beserta
formulir.

• Identitas pengirim (nama jelas, alamat jelas, kode pos,

Kab/Kota, Provinsi, No.Telp)
• Identitas Penerima
• Cargo yang akan mengirim (Operator) spt : JNT, JNE,
PT Pos, dll
• Label :
• Pemeriksaan Laboratorium Kesehatan
• Jangan dibalik
• Mudah Pecah
• Segera simpan di lemari es (4-8 oC)*
 Pemeriksaan Laboratorium
Kesehatan
Kepada:
Emanuel Kristanti (081328296652)
Laboratorium Mikrobiologi
Balai Besar Teknik Kesehatan Lingkungan dan
Pengendalian Penyakit (BBTKLPP Yogyakarta)

d/a
Jln. Imogiri Timur Km.7,5,
Grojogan, Wirokerten,
FRAGILE/Mudah Banguntapan, Bantul 55194
Pecah Telp:(0274) 371588, 4295270

Pengirim:
Dinkes. ………. . Prov……..
RS/Pkm ……………
(Kota……………….)
Telp:……….………..