Machine Translated by Google
Jurnal Studi Entomologi dan Zoologi 2019; 7(6): 946-950
E-ISSN: 2320-7078
P-ISSN: 2349-6800
JEZ 2019; 7(6): 946-950
© 2019 JEZS
Diterima: 01-09-2019
Diterima: 05-10-2019
Dharmaveer Singh
Pengajar, LRS, Nohar,
Rajasthan, India
Pramod Kumar
Asisten Profesor, Departemen
Ginekologi Hewan dan
Kebidanan, Fakultas Kedokteran
Hewan dan Ilmu Hewan, Bikaner,
Rajasthan, India
KS Nehra
Profesor Madya, Perwira
Incharge, LRS, Nohar,
Rajasthan, India
Ajay Kumar
Konsultan Budidaya dan
Pertanian Terpadu, Nohar,
Rajasthan, India
Penulis yang sesuai:
Dharmaveer Singh
Pengajar, LRS, Nohar,
Rajasthan, India
Teknologi semen bergender pada sapi: Sebuah
teknik revolusioner dalam industri susu India
Dharmveer Singh, Pramod Kumar, KS Nehra and Ajay Kumar
Abstrak
Jenis kelamin yang diinginkan baik perempuan maupun laki-laki yang dihasilkan dari semen yang mengandung sperma
X atau Y disebut sexed semen. Sexed semen meningkatkan kemajuan genetik dalam suatu kawanan dengan
meningkatkan jumlah sapi betina unggul dan plasma nutfah jantan yang baik dari pejantan elit yang digunakan untuk
program pemuliaan di masa depan. Berbagai metode dikembangkan berdasarkan sentrifugasi gradien densitas atau
swim-up, antibodi spesifik jenis kelamin, elektroforesis aliran bebas, dan sitometri aliran yang secara efisien
memisahkan semen sapi menjadi fraksi yang mengandung konsentrasi sperma kromosom X atau Y yang lebih tinggi.
Flow cytometry adalah satu-satunya metode yang terbukti untuk sexing semen yang layak secara komersial dengan akurasi lebih d
Metode lain untuk pemilahan jenis kelamin sperma (Albumin Gradient/ Percoll gradient/ Gradient swim down, distribusi
arus balik sentrifugal, elektroforesis aliran bebas, Identifikasi antigen HY, pendekatan Genetik, dll.) juga telah muncul
meskipun teknik ini lebih lanjut memerlukan penyempurnaan untuk kelayakan komersial . Makalah ini bertujuan untuk
meninjau metodologi sexed semen, kegunaan semen sortir sex, manfaat dan keterbatasan semen sortasi sex.
Kata kunci: Flow cytometry, sexed semen, pemilahan sperma
Pendahuluan
Sektor peternakan saat ini telah menjadi usaha komersial di banyak negara berkembang. Ini
memainkan peran yang sangat penting dalam pertumbuhan nasional serta generasi mata
pencaharian penduduk pedesaan. Teknik sexed semen komersial sekarang dianggap sebagai
teknik paling maju untuk produksi susu dan produk sampingan hewan. Kemajuan semen sexed
komersial dan perannya dalam peternakan dirangkum oleh (Garner dan Seidel, 2008; Schenk et
al., 2009 dan Kumar et al., 2017). Upaya pertama dilakukan pada tahun 1976, untuk memisahkan
sperma X dan Y dengan metode analitis flow cytometry [22]. Secara singkat, teknologi dasar
dikembangkan pada awal 1980-an di Laboratorium Lawrence Livermore Departemen Energi
Amerika Serikat di California menggunakan prosedur yang membutuhkan sperma de-membran,
menghasilkan sperma yang tidak dapat hidup [19] . Pedet pertama yang diseleksi berdasarkan
jenis kelamin lahir pada tahun 1999 dengan menggunakan semen sexed yang dibekukan melalui
IB. Proses ini tersedia secara komersial pada tahun 2004 melalui 'Sexing Technologies' dengan
laboratorium di Texas, Ohio, Wisconsin, dan Brasil. Di India, organisasi pemerintah Benggala
Barat, paschim Banga Go Sampad Bikash Sanstha (PBGSBG), penyortir semen berkecepatan
tinggi atau flow cytometer (Influx, Becton Dickinson, Biosciences, San Jose, CA, USA) memulai
pemilahan semen dipasang pada 15 Agustus , 2009 di bawah RKVY dengan total pengeluaran
Rs.2.90 crores, selama 2007 dan selesai pada November, 2009 di Frozen Semen Bull Station,
Haringhata. Mereka melaporkan anak sapi jantan pertama Shreyas lahir pada 1 Januari 2011
dengan menggunakan air mani bergender. Setelah itu anak sapi betina juga berhasil dilahirkan
dari semen yang telah di-sex [2]. Kemurnian semen yang disortir-X ditemukan lebih tinggi
penerapan sexed semen, pedet betinadibandingkan
dipastikan pada
dengan
sekitar
semen
90% kasus
yang disortir-Y
berbeda dengan
[4]. Dengan
frekuensi rata-rata 49% [13, 35]. Semen sexed saat ini digunakan untuk banyak sapi yang diperoleh denga
Metode sexing sperma Ada
beberapa pendekatan sexing sperma dan signifikan di antaranya tercantum sebagai berikut: 1.
[15]
Gradien Albumin [14]
2. Identifikasi antigen HY 3.
[28]
Elektroforesis aliran bebas [5]
4. Deteksi protein spesifik jenis kelamin 5.
Distribusi arus counter sentrifugal [36]
~ 946 ~
Machine Translated by Google
Jurnal Studi Entomologi dan Zoologi
6. Perbedaan Volumetrik [48]
7. Percoll density gradient 8.
Flowcytometry Untuk memisahkan
spermatozoa X dari Y dalam skala besar flow cytometry adalah
metode yang paling efisien [38, 45] . distribution (CCD) berdasarkan penemuan [1] diperlukan untuk
Gradien albumin
Prinsip dasar metode Gradient swim down adalah perbedaan
kemampuan spermatozoa pembawa X dan Y untuk berenang turun
dalam larutan gradien. Metode ini tergantung pada pergerakan alami
spermatozoa. Pertama-tama media albumin serum sapi yang terputus-
putus disiapkan.
Media ini menjadi semakin kurang terkonsentrasi bergerak dari atas
ke bawah. Sampel semen diletakkan di atas media, dan tabung
diinkubasi pada suhu 37 °C selama satu jam. Sperma yang paling
motil bergerak ke bawah menuju gradien selama migrasi. Karena
ukurannya yang kecil, spermatozoa yang mengandung kromosom Y
memiliki motilitas yang tinggi dan menunjukkan kecepatan berenang
ke bawah yang lebih besar daripada spermatozoa yang mengandung
kromosom X. Oleh karena itu isolasi fraksi semen dari bagian tertentu
dari gradien albumin menunjukkan proporsi spermatozoa X atau Y
yang lebih tinggi pada gradien yang berbeda tetapi tingkat
keberhasilan dilaporkan sekitar 75% [3
30] .
Identifikasi Antigen HY Identifikasi
antigen HY juga merupakan salah satu metode untuk sortasi sperma.
Dalam metode ini antibodi spesifik (terhadap protein permukaan) dari
spermatozoa yang mengandung kromosom Y (terhadap antigen HY)
juga digunakan pilihan untuk menyortir sperma melalui kromatografi
afinitas atau manik magnetik. Teknik pemilahan sperma ini diterapkan
dalam skala besar dengan keberhasilan yang diamati oleh banyak
pekerja [25, 24, 23, 5, 30] . perkol: Kepadatan sedimentasi spermatozoa yang mengandung
Pemilahan sperma dengan prosedur swim-
up Spermatozoa dengan kromosom Y ukuran kecil berenang lebih
cepat daripada spermatozoa dengan kromosom X dan perbedaan ini
Dalam hal ini digunakan oleh berbagai ilmuwan untukadalah
metode[50, 36].
.
penyortiran sperma, tercatat 81% tingkat keberhasilan [10, 30]
Pemilahan sperma dengan elektroforesis aliran bebas
Perbedaan muatan permukaan pada spermatozoa (spermatozoa
dengan kromosom X bermuatan negatif sedangkan spermatozoa
dengan kromosom Y bermuatan positif) digunakan dalam pemisahan
[34, 28, 30] .
medan listrik untuk penyortiran sperma.
Deteksi protein spesifik jenis kelamin
Deteksi protein spesifik jenis kelamin (SSP) pada sperma X atau Y
dapat digunakan untuk mengembangkan metode imunologi untuk
pemisahan sperma. Profil protein sperma X dan Y adalah ekspresi
protein yang berbeda. Protein dengan ekspresi diferensial ini dapat
mempengaruhi fenotip, fungsi sperma, interaksi antara oosit dan
sperma, dan [11, 31, 30]. Perkembangan berbeda dari ekspresi protein
digunakan sebagai penanda molekuler
embrio
untukzigotik
membedakan
ini dapatsperma X
dan Y dan juga menyortir. Di masa mendatang, ekspresi protein yang
berbeda yang terkandung dalam membran sperma dapat mampu
mengembangkan metode baru untuk sexing sperma dan juga untuk
mengidentifikasi sperma X dan Y.
Distribusi arus counter sentrifugal
Upaya pertama untuk memfraksinasi populasi sperma X dan Y
.
dilakukan dengan menggunakan Counter current distribution (CCD) [8]
http://www.entomoljournal.com
Counter current distribution (CCD) adalah proses kromatografi
dengan fase gerak (atas) dan fase stasioner (bawah). Sampel sel
dibagi secara sistematis dengan 1 sistem dan 2 fase, dikontakkan
dengan fase berlawanan yang segar. Mesin counter current
metode ini.
Peralatan dengan 60 ruang diatur dalam lingkaran, yang
memungkinkan transfer fase atas (bergerak) relatif ke fase bawah
(diam). CCD dapat dicapai selama sentrifugasi dengan menjaga
bagian bawah dengan fase yang lebih padat di bagian luar sedangkan
fase yang lebih ringan (atas) berada di bagian dalam setiap ruang.
Karena tidak ada elusi atau pemompaan fase apa pun yang terjadi,
proses keseluruhan terdiri dari transfer multilangkah sirkular dari 60
fase kelompok atas ke atas 60 fase kelompok bawah.
Setiap transfer dalam CCD yang ditingkatkan sentrifugal ini mencakup
pengocokan fase pada gravitasi satuan untuk mencampurnya secara
menyeluruh dan kemudian memisahkannya dengan sentrifugasi
(1000g). Setelah fase terpisah dan saat masih berputar dengan
kecepatan penuh (1000g), fase atas (dalam) dipindahkan ke ruang
berikutnya. Siklus baru dapat dilakukan setelah perlambatan.
, Perbedaan volumetrik
Perbedaan volume antara kepala sperma yang mengandung
kromosom X dan Y yang tidak terwarnai dapat dideteksi dengan
menggunakan mikroskop interferensi dalam cahaya tampak.
Mikroskop kontras interferensi diferensial (DIC) digunakan untuk
mengukur perbedaan volume ini. Tidak diperlukan pewarnaan, dan
[49, 50,
pengukuran dilakukan dengan menggunakan cahaya tampak 550 nm
48].
Penyortiran sperma dengan metode gradien kepadatan
kromosom X lebih tinggi dan mengendap di bagian bawah kolom
sedangkan spermatozoa yang mengandung kromosom Y tetap dalam
proporsi yang tinggi di bagian atas kolom selama penyortiran sperma.
.
Tingkat keberhasilan dilaporkan dari 86% menjadi 94% [32, 47]
Penyortiran sperma dengan flow
cytometry Flow cytometry adalah teknik yang berguna dalam
penyortiran sperma dan didasarkan pada fakta bahwa sperma X-bearing
(wanita) mengandung DNA 3,8 persen lebih banyak daripada sperma Y-
bearing (pria) [27] . Pewarna fluoresen sitometri aliran digunakan untuk
menodai [7,
DNA39]
DNA
dalam
selpenyortiran
sperma individu,
sperma.
jenis
Dengan
kelamin
mengukur
keturunan
kandungan
masa
depan dapat ditentukan sebelumnya seolah-olah mengandung
kromosom X yang lebih besar atau kromosom Y yang lebih kecil.
Awalnya teknik ini, sperma diwarnai dengan pewarna pengikat DNA
yang tidak beracun (Hoechst 33342) dan kemudian dipompa dalam
aliran di depan sinar laser UV yang memiliki panjang gelombang 351
- 364 nm dan fluoresensi biru terang yang dipancarkan dideteksi dan
dianalisis. [26]. Spermatozoa individu dalam aliran tetesan individu
dipecahkan oleh penggetar kristal dan spermatozoa yang diterangi
memancarkan fluoresensi terang yang diukur dengan cepat oleh
tabung pengganda foto saat sperma mengalir dalam satu file [20] .
Untuk memastikan pencahayaan yang memadai, aliran sperma
diorientasikan pada sudut yang tepat untuk pengukuran yang akurat
dari perbedaan fluoresensi 4% [46]. Fluoresensi relatif dari populasi
sperma yang mengandung kromosom X dan Y dianalisis dengan
komputer berkecepatan tinggi dan kemudian diurutkan berdasarkan
kandungan DNA dengan memperkenalkan muatan yang berlawanan
pada droplet yang mengandung sperma yang mengandung kromosom
X daripada
. atau sperma yang mengandung
kromosom Y Tetesan ini jatuh pada defleksi bermuatan
piring sehingga
sebelumnya
dipisahkan menjadi dua aliran dan kemudian dikumpulkan secara
terpisah. Dengan menggunakan elektrostatis
~ 947 ~
Machine Translated by Google

Jurnal Studi Entomologi dan Zoologi http://www.entomoljournal.com

pemisahan defleksi droplet bantalan kromosom X dan Y dilakukan Keterbatasan sex-sorted semen 1.
dan dikumpulkan secara terpisah untuk diproses lebih lanjut [44]. Faktor biaya dan tingkat konsepsi yang
Tetesan yang tidak bermuatan melewatinya sebagai limbah dan rendah Karena biaya mesin yang tinggi, dosis sex-semen mahal
dibuang [41]. Tetesan yang tidak bermuatan mungkin mengandung dan dibandingkan dengan semen konvensional, tingkat konsepsi
banyak sperma, bahan yang rusak, atau sel yang tidak sejajar 10-20% lebih rendah pada sexed-semen yang dipilah [35 , 30].
dengan arah yang benar [30,. 33]
Metode penyortiran spermatozoa Laju dosis rendah dan tekanan fisik atau kimiawi pada sperma
berdasarkan jenis kelamin ini adalah yang paling populer dan selama proses sortasi menurunkan laju konsepsi dalam semen
secara konsisten terbukti efektif di antara berbagai metode. sexed [17]. Tekanan penyortiran termasuk tingkat pengenceran
yang tinggi, pewarnaan dengan pewarna, kekuatan mekanik, sinar
Tabel 1 Perbedaan antara spermatozoa X dan Y laser UV, dan tekanan cairan yang lebih tinggi selama proyeksi ke
Parameter Perbedaan
dalam tabung pengumpul dan sentrifugasi [18]. Selain faktor-
faktor tersebut, tempat pengendapan semen di organ genital juga
Ukuran sperma X Lebih besar
kandungan DNA mempengaruhi angka konsepsi pada semen sex. Tingkat konsepsi
Kurang dalam sperma Y
Adanya antigen permukaan sel antigen HY sperma Y lebih banyak ketika sexed semen disimpan dalam tubuh rahim
.
(45%) daripada tanduk rahim (32%) pada sapi dara kerbau [6]
Muatan permukaan sperma X Negatif
Motilitas sperma Y Lebih cepat

2. Ketersediaan non-komersial dari teknologi penyortiran

Keterbatasan jenis kelamin sperma yang disortir oleh Merupakan batasan utama bahwa nosel pengarah yang merupakan
flow cytometry Kecepatan proses yang lambat relatif terhadap produk paten tidak tersedia secara komersial.
jumlah sperma yang layak yang diperlukan untuk inseminasi
buatan adalah batasan utama flow cytometry. Saat sperma individu 3. Efisiensi dan kecepatan mesin
melewati nosel yang dianalisis oleh detektor, ada batasan fisik Kecepatan sortasi mesin rendah (6000 sperma per detik) dan jika
dalam berapa banyak sperma yang dapat dievaluasi secara akurat dijalankan selama 24 jam dosis maksimum (2X 106 sperma per
[21]. Saat ini kecepatan perjalanan sekitar 80Km/jam dimana dosis) yang dapat dihasilkan adalah 259,2 [27]. Jika diproduksi
sekitar 30.000 sperma dapat dievaluasi per detik dalam kondisi semen beku maka dapat dihasilkan 129 dosis (4 X 106 sperma per
ideal. Dengan demikian, diperlukan waktu 1-2 jam untuk menyortir dosis). Hal ini disebabkan deteksi konten DNA yang tidak presisi,
jumlah sperma dalam dosis inseminasi buatan yang khas [45] sekitar 30% sperma/ejakulasi selama proses sexing akan ditolak
. dan dari sperma yang mengandung Y yang terdeteksi adalah 50%;
Semen sapi jantan yang memiliki keunggulan genetik yang baik
Strategi yang digunakan dalam prosedur flow cytometry untuk dengan dosis pemanenan 70% akan dikurangi melalui metode ini.
meningkatkan kesuburan Karena pewarna, trauma fisik dan
paparan sinar laser sperma [18] dan karena kerusakan akrosom
membran juga rusak yang mengakibatkanini selama proses pemilahan
penurunan motilitas 4. Perlunya standarisasi dalam kondisi India Saat ini
[9]. Berbagai strategi seperti itu mengurangi tekanan penyortiran dalam kondisi India, ada kebutuhan untuk menstandarkan dosis
dan penggunaan laser pulsa mengurangi kerusakan sperma dan spermatozoa yang lebih rendah dan tempat pengendapan untuk
meningkatkan kesuburan. Kemajuan dalam protokol pengawetan inseminasi buatan dengan tingkat konsepsi yang baik. Standarisasi
[40] teknik sehubungan dengan ras sapi dan kerbau asli yang berbeda
semen selama peningkatan
dan setelah
angka
penyortiran
kehamilan
dapat
[37]menyebabkan
. juga diperlukan karena efektivitas pemanfaatan perbedaan
kandungan DNA antara sperma yang mengandung kromosom X
Keuntungan menggunakan sexed semen pada sapi dan Y tidak hanya bergantung pada perbedaan DNA relatif, tetapi
perah • Hal ini juga memungkinkan ekspansi kawanan yang cepat juga pada kemampuan untuk secara tepat mengarahkan gamet
tanpa risiko masuknya penyakit yang terjadi pada hewan yang dibelitersebut pada saat pengukuran di flow cytometer/cell sorter [18]
[42] .

• Rasio perempuan terhadap laki-laki dipastikan 90:10 atau sebaliknya .

[35] .

• Mengurangi distosia dengan mencegah produksi laki-laki 5. Rendahnya Jumlah Pejantan Elit Pribumi
betis [16] . Rendahnya jumlah pejantan elit pribumi dan kualitas ejakulasi
• Produksi pejantan unggul. • Biaya yang kurang baik dari sapi dan kerbau pribumi akan membatasi
program pengujian progeni lebih rendah dan meningkatkan nilai pilihan sexing semen.
penanda genetik transfer embrio
[12] . 6. Membutuhkan tenaga kerja yang
• Pemusnahan selektif. sangat terampil Untuk hasil yang sangat baik, teknisi AI yang
• Dengan menggunakan sexed semen, intensitas seleksi dapat berpengalaman dan terbukti diperlukan untuk inseminasi. Selain
ditingkatkan dengan memilih induk pengganti yang unggul itu, kinerja catatan yang optimal dan kondisi manajemen penting
secara genetik yang mempercepat laju keuntungan genetik yang akan mendukung keberhasilan IB dengan sexed semen.
pada ternak sapi perah . [51, 29] • Manfaat utama penggunaan
sexed semen adalah produksi Strategi optimalisasi angka konsepsi dengan menggunakan sexed
[43, 12]
anak sapi dengan jenis kelamin yang diinginkan . semen
• 1. Implementasi sexed semen pada betina siklus sehat dengan
Dimungkinkan untuk mengurangi timbulnya kesulitan pada
pedet pertama (pedet dara lebih ringan dari pedet jantan) dan skor kondisi tubuh yang baik dan hewan betina yang sangat
dara pengganti tambahan untuk ekspansi kawanan dapat subur (memiliki tingkat kebuntingan IB dengan semen
menawarkan manfaat dalam hal biosekuriti yang lebih baik konvensional ÿ 60%) akan bermanfaat [33] .
dengan meningkatkan ukuran kawanan sambil mempertahankan kawanan . 2. Akantertutup
lebih bermanfaat
[51 ] bila sexed semen digunakan oleh teknisi
AI berpengalaman. Berhati-hatilah dengan

~ 948 ~
Machine Translated by Google
Jurnal Studi Entomologi dan Zoologi
penyimpanan, penanganan dan pencairan sedotan.
3. Saat menggunakan AI waktu tetap, pastikan persentase hewan
yang tinggi dalam keadaan berahi sebelum melakukan AI.
4. Di atas segalanya, penggunaan teknologi sexing yang optimal
membutuhkan manajemen hewan yang sangat baik dan hati-
hati (nutrisi, pengendalian penyakit, deteksi estrus, penanganan
[33] .
semen, dan teknik inseminasi)
Kesimpulan
Flow cytometry adalah teknik yang paling umum dan baik untuk
sexing sperma. Saat ini pemerintah terutama berfokus pada teknologi
ini dan sejumlah besar penelitian akan dilakukan untuk
mengembangkan teknik ini bekerja sama dengan laboratorium lain
agar dapat dilakukan di India. Selain itu, kendala terkait biaya tinggi
dan kesuburan rendah membatasi penggunaannya secara lebih luas
di seluruh negeri. Air mani yang berjenis kelamin harus dimanfaatkan
pada ternak yang sangat subur dan pada betina bersepeda yang
sehat dengan skor kondisi tubuh yang baik. Ketika biaya semen
yang disortir berdasarkan jenis kelamin menurun dengan tingkat
kesuburan yang cukup maka teknologi ini akan diterima sebagai
teknik paling populer di banyak wilayah di India.
Pengakuan Para
penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada Dewan Penelitian
Pertanian India, New Delhi dan VC, Universitas Kedokteran Hewan
dan Ilmu Hewan Rajasthan, Bikaner, untuk menyediakan semua
fasilitas yang diperlukan untuk melaksanakan pekerjaan ini.
Referensi 1.
Akerlund HE. Alat untuk distribusi arus berlawanan dalam bidang
percepatan sentrifugal. Jurnal Metode Biokimia dan Biofisika,
1984; 9:133-141.
2. Anshuman Anshuman, Vineeth MR, Sinha R, Singh RK, Thakur A,
Gupta SJ. Status saat ini, ruang lingkup, dan kendala semen
seks- Perspektif India.
Tinjauan Pertanian. 2016; 37(3):240-244.
3. Beernink FJ, Dmowski WP, Ericsson RJ. Pemilihan jenis kelamin
melalui pemisahan albumin sperma.
Kesuburan dan Kemandulan. 1993, 59:382-386.
4. Biswas J, Chakraborti A, Saha K, Das US, Pal M, Pathak P, Mandal
A. Pemilahan sitometrik aliran semen sapi jantan Sahiwal
ditambah dengan inseminasi buatan pada kawanan terorganisir.
Jurnal Ilmu Hewan India. 2013; 83:1275-1278.
5. Blecher SR, Howie R, Li S, Detmar J, Blahut L. Pendekatan baru
untuk sexing imunologi sperma.
Teriogenologi. 1999. 52:1309-1321.
6. Campanile BG, Gasparrini D, Vecchio G, Neglia EM, Senatore A,
Bella GA dkk. Tingkat kebuntingan setelah inseminasi buatan
dengan semen seks pada sapi dara kerbau Italia mediterania
(Bubalusbubalis). Teriogenologi. 2011; 76:500-506. https://
doi.org/10.1016/j.theriogenology.2011.02.029 7. Caroppo E.
Penyortiran sperma untuk pemilihan sperma sehat: apakah aman
dan bermanfaat? Kesuburan dan Kemandulan. 2013;
100(3):695-696. doi:10.1016/j.fertnstert.06.006.
8. Cartwright EJ, Harrington PM, Cowin A, Sharpe PT.
Pemisahan sperma BovineX dan sperma Y berdasarkan
perbedaan permukaan. Reproduksi dan Pengembangan
Molekuler. 1993; 34:323-328.
9. Carvalho JO, Sartori R, Machado GM, Mourão GB, Dode MAN.
Penilaian kualitas sperma sapi cryopreserved setelah sexing
dengan flow cytometry dan penggunaannya dalam produksi
embrio invitro. Teriogenologi. 2010;
~ 949 ~
http://www.entomoljournal.com
74:15211530.
10. Cek JH, Shanis BS, Cooper SO, Bollendorf A. Pemilihan jenis
kelamin pria: teknik swim-up dan inseminasi wanita setelah
induksi ovulasi. Lengkungan andrologi. 1989; 23:165-166.
11. Chen X, Zhu H, Wu C, Han W, Hao H, Zhao X dkk .
Identifikasi protein yang diekspresikan secara berbeda antara
spermatozoa X dan Y banteng. Jurnal Proteomik. 2012; 77:59-67.
12. De Vries A, Overton M, Fetrow J, Leslie K, Eicker S et al.
Menjelajahi dampak sexed semen pada struktur industri susu.
Jurnal Ilmu Susu. 2008; 91:847-856.
13. DeJarnette JM, Nebel RL, Marshall CE. Mengevaluasi keberhasilan
sexsorted semen pada peternakan sapi perah AS dari catatan
peternakan. Teriogenologi. 2009; 71(1):4958.
14.Eichwald EJ, Silmer CR. Komunal. Buletin Transplantasi. 1955;
2:148-149.
15. Ericsson RJ, Langevan CN, Nishino M. Isolasi fraksi kaya Y
spermatozoa. Alam. 1973; 245:421- 424.
16. Fetrow JM, Overton, Eicker S. Sexed semen: ekonomi teknologi
baru. Prosiding Konferensi Manajemen Susu Barat. Reno, NV.
2007, 7-9.
17. Frijters ACJ, Mullaart E, Roelofs RMG, Van Hoorne, Moreno RP,
Moreno JF dkk. Lebih mempengaruhi kesuburan semen sapi
jantan, dosis sperma rendah atau proses penyortiran?
Teriogenologi. 2009; 71:64 69.
18. Garner DL. Sexing sitometrik aliran sperma mamalia.
Teriogenologi. 2006; 65:943 957.
19. Garner DL, Gledhill BL, Pinkel D, Lake S, Stephenson D.
Kuantifikasi spermatozoa pembawa kromosom X dan Y pada
hewan domestik dengan flow cytometry.
Biologi Reproduksi, 1983; 28:312-321 20. Garner
DL, Seidel GE. Sejarah komersialisasi sexed semen untuk sapi.
Teriogenologi. 2008; 69:886-895 21. Garner DL, Evans KM,
Seidel GE. Sperma pemilah jenis kelamin menggunakan flow
cytometry/cell sorting. Metode dalam Biologi Molekuler. 2012;
927:279-295.
22. Gledhill BL, Lake S, Steinmetz LL, Grey JW, Crawford JR, Dekan
PN. Analisis mikro fluoro metrik aliran konten DNA sperma:
efek bentuk sel pada distribusi fluoresensi. Jurnal Fisiologi
Seluler. 1976; 87:367- 376. https://doi. org/10.1002/jcp.1040870312
23. Hendriksen PJM. Apakah spermatozoa X dan Y berbeda
dalam protein? Teriogenologi. 1999; 52:1295-1307.
24. Hendriksen PJM, Welch GR, Grootegoed JA, Vander Lende T,
Johnson LA. Perbandingan membran
protein terlarut dariterlarut deterjen
aliran yang dan
disortir
secara sitometrik kromosom X dan Y yang mengandung
spermatozoa babi dengan elektroforesis 2 - D beresolusi tinggi.
Reproduksi dan Pengembangan
Molekuler. 1996; 45:342-450.
25. Hoppe PC, Koo GC. Mereaksikan sperma tikus dengan antibodi
HY monoklonal tidak mempengaruhi rasio jenis kelamin telur
yang dibuahi secara in vitro. Jurnal Imunologi Reproduksi. 1984;
6:1-9.
26. Johnson LA, Welch GR. Preseleksi jenis kelamin: Penyortiran
sitometri aliran kecepatan tinggi dari sperma X dan Y untuk
efisiensi maksimum. Teriogenologi. 1999; 52(8):1323-1341.
27. Johnson LA. Sexing sperma mamalia untuk produksi keturunan:
negara - of -the art. Ilmu Reproduksi Hewan. 2000; 60-61:b93-107.
28. Kaneko S, Oshiro S, Kobayashi T, Itzuka R, Mohri H.
Machine Translated by Google

Jurnal Studi Entomologi dan Zoologi http://www.entomoljournal.com

Sperma pembawa X dan Y manusia berbeda dalam
kandungan asam sialat permukaan sel. Komunikasi Riset
Biokimia dan Biofisika. 1984; 124:950-955.
29. Khalajzadeh S, Nejati-Javaremi A, Yeganeh HM. Pengaruh
meluas dan terbatasnya penggunaan sexed semen terhadap
kemajuan genetik dan penampilan reproduksi sapi perah.
Satwa. 2012; 6:1398-1406.
30. Kumar N, Gebrekidan B, Gebrewahd TT, Hadush B.
Teknologi sexed semen pada sapi. Jurnal Kesehatan Hewan
India. 2017; 56(2):157-168.
31. Li CJ, Wang D, Zhou X. Proteom sperma dan teknologi
reproduksi pada mamalia. Ilmu Reproduksi
173:1-7. [PubMed] [GoogleHewan. 2016;
Cendekia]
seks sperma. Teriogenologi. 2009; 71(1):4-10.
47. Van Kooij RJ, Van Oost BA. Penentuan rasio jenis kelamin
spermatozoa dengan asam deoksiribonukleat - probe dan
pewarnaan quinacrine: perbandingan. Kesuburan dan
Kemandulan. 1992; 58:384-386.
48. Van Munster EB. Interferometri dalam aliran untuk menyortir
spermatozoa banteng yang mengandung kromosom X dan Y yang tidak tern
sitometri. 2002; 35:125-128. https://doi.org/10.1002/
cyto.10064 49. Van Munster EB, van Vliet LJ, Aten JA.
Rekonstruksi distribusi panjang jalur optik dari gambar yang
diperoleh dengan mikroskop kontras interferensi diferensial
bidang lebar. Jurnal Mikroskopi. 1997; 188:149-157.

Evaluasi
50. Van EB, Winter EK, Aten JA.
32. Lizuka R, Kaneko S, Aoki R, Kobayashi T. Sexing sperma berbasis Pengukuran Munster dari distribusi panjang jalur
manusia dengan gradien kepadatan Percoll terputus-putus optik yang direkonstruksi dari gambar kontras interferensi
dan aplikasi klinisnya. Reproduksi Manusia. 1987; 2:573-575. diferensial yang disimulasikan. Jurnal Mikroskopi. 1998;
191:170-177.
33. Manzoor A, Patoo RA, Akram T, Shah AA, Nazir T. 51. Weigel KA. Menjelajahi peran sexed semen dalam sistem
Sexing Sperma dan Kegunaannya dalam Produksi Ternak produksi susu. Jurnal Ilmu Susu. 2004; 87:E120-130.
Komersial: Sebuah Tinjauan. Kemajuan dalam Ilmu Hewan
dan Kedokteran Hewan. 2017; 5(7):293-298.
34. Mohri H, Oshio S, Kaneko S, Kobayashi T, Lizuka R.
Pemisahan dan karakterisasi sperma pembawa X dan Y
mamalia. Perkembangan pertumbuhan dan diferensiasi.
1986; 28(1):35-36.
35. Norman HD, Hutchison JL, Miller RH. Penggunaan sexed
semen dan pengaruhnya terhadap tingkat konsepsi, seks
betis, distosia, dan kelahiran mati Holsteins di Amerika Serikat.
Jurnal Ilmu Susu. 2010; 93(8):3880-3890 36. Ollero
M, Perez Pe R, Gargallo I, Morlanes S, Osada J.
Pemisahan spermatozoa jantan yang mengandung
kromosom X dan Y dengan distribusi arus berlawanan
sentrifugal dalam sistem dua fase berair. Jurnal Andrologi,
2000; 21:921-928.
37. Rath D, Moench-Tegeder G, Taylor U, Johnson LA.
Peningkatan kualitas sperma berdasarkan jenis kelamin:
Prasyarat untuk aplikasi komersial yang lebih luas.
Teriogenologi. 2009; 71:22-29.
38. Rath D, Barcikowski S, De Graaf S, Garrels W, Grossfeld R,
Klein S et al. Pemilihan jenis kelamin sperma pada hewan
ternak: laporan status dan prospek perkembangan.
Reproduksi. 2013; 145:R15-R30.
39. Ribeiro S, Sartorius G, Geyter C. Penyortiran spermatozoa
dengan flow cytometry. Kesuburan dan Kemandulan. 2013;
100(3): doi:10.1016/j.fertnstert.2013.06.039.
40. Schenk JL, Cran DG, Everett RW, Seidel, Jr GE.
Tingkat kehamilan pada sapi dara dan sapi dengan sperma
jenis kelamin cryopreserved: efek jumlah sperma per
inseminasi, tekanan penyortiran dan penyimpanan sperma sebelum penyortiran.
Teriogenologi. 2009; 71:717-728.
41. Seidel Jr GE. Sekilas tentang sexing sperma.
Teriogenologi. 2007; 68:443-446.
42. Seidel Jr GE. Sexing mamalia spermatozoa dan embrio -
canggih. Jurnal Suplemen Reproduksi dan Kesuburan. 1999;
54:477-487 43. Seidel Jr GE. Sekilas tentang sexing sperma.

Teriogenologi. 2007; 68(3):443-446.

44. Seidel Jr GE, Garner DL. Status Sexing Reproduksi saat ini.
spermatozoa mamalia. 2002;
124(6):733-743.
45. Seidel Jr GE. Pembaruan pada teknologi sexed semen di
ternak. Satwa. 2014; 8:160-164.
46. Sharpe JC, Evans KM. Kemajuan dalam flow cytometry untuk

~ 950 ~