HPLC KADAR GULA PEREDUKSI

Penentuan jenis dan kadar gula (sukrosa, glukosa dan fruktosa) dilakukan dengan
menggunakan alat HPLC. Sebanyak 0.3 gram sampel dilarutkan dalam 100 ml air dan
disaring dengan kertas millipore berdiameter 0.45 mikrometer. Lalu 10 p1 filtrat disuntikkan
ke dalam kolom yang sudah disiapkan, dengan menggunakan pelarut High Pure Water.
Analisa dilakukan dengan kondisi alat pada laju aliran fase mobil 0.50 mllmenit, tekanan 33
bar, dan detektor yang digunakan adalah RID (Refractive Index Detector). Dari hasil
penyuntikan tersebut akan timbul kurva berupa peak yang menunjukkan adanya gula tertentu.
Untuk mengetahui jenis gula pada contoh, dilakukan perbandingan dengan waktu retensi
kurva standar. Kadar masing-masing jenis gula dapat dihitung dengan rumus:
Tc
x Cs x Df x 100 %
Ts
G
Keterangan: Tc = Tinggi peak contoh Ts = Tinggi standar Cs = Konsentrasi standar Df = Faktor
pengenceran G = Berat contoh