Pengendapan HDL

Reagen io untuk penentuan in vitro olesterol baik (HDL-C) sesuai dengan metode PAP
pada system fotometrik.
Ukuran ki Infrmasi
Cat. No. Ukuran kit
1 3540 90 885 250 mL pengendapan reagen
1 1350 99 10 021 5x 25 mL + 1x3 mL standar
11350 99 10 026 6x 100 mL
1 350 99 10 023 1x 1000 mL
1 1300 99 10 030 6x 3 mL Standar
Prinsip
Chylomicrons, VLDLdan LDL diendapankan dengan menambahkan sam fosfotungsat dan
ion magnesium sampel. Sentrifiugase hanya enyisakan HLD dalam supernatan knsentrasi yang
ditentukan secara enzimatik dengan menggunakan Diasys Cholesterol FS.
Reagen

Komponen dan konsentrasi

Asam Phospotungstic 1,4 mmol/L

Magnesium klorida 8,6 mmol/L

Petunjuk Penyimpanan dan Stabilitas reagen

Reagen stabil sampai akhir bulan kadaluwarsa yang ditunjukkan, jika disimpa pada shu 15-
25C dan dontaminasi dihindari.

Peringatan dan prasyarat

1 dalam kasus yang sangat jarang, sampel pasien dengan gammopathy mungkin memberi hasil
yang palsu.
1 Silakan lihat lembar data keselamatan dan ambil tindakan pencegahan yang diperlukan untuk
penggunaan reagen laboratorium. Untuk tujuan diagnostik, hasilnya harus selalu dinilai dengan
riwayat kesehatan pasien, pemeriksaan klinis dan temuan lainnya.
2 untuk penggunaan profesional saja!
Penanganan limbah
Silakan merujuk ke persyaratan setempat
Persiapan reagen
Presipitant siap digunakan
Bahan yang dibutuhkan tapi tidak disediakan
NaCl-solution 9 g / L
Peralatan laboratorium umum
Spesimen
Serum, plasma heparin atau plasma EDTA
Stabilitas [5]: 2 hari dalam 20-25oC
7 hari dalam 4-8oC
3 bulan dalam -20oC
Hanya dibekukan sekali!
Buang spesimen yang terkontaminasi!

Prosedur Pegujian
Presipitasi/Pengendapan

Sampel / standar 200 L

Reagen Presipitasi 500 L
Campur dan inkubasi selama 15 menit pada suhu kamar, lalu centirifuge selama 20
menit dalam 2500 g. dalam 2 jam setelah dicentrifuge, transfer 0,1 mL supernatan
yang jernih ke larutan reaksi untuk penentuan kadar kolesterol.

Setelah dicentrifuge, supernatant harus jernih. Serum atau plasma dengan kandungan
Trigliserida > 1000 mg/dL cenderung menghasilkan supernatant yang keruh atau presipitat yang
terapung. Dalam hal ini encerkan sampel 1+1 dengan larutan NaCl (9 g/L) dan setelah itu lakukan
presipitasi. Kalikan hasilnya dengan dua.
Penentuan Kadar Kolesterol
Panjang Gelombang 500 nm, Hg 546 nm
Jalur Optik 1 cm
Suhu 20-25 oC , 37 oC
Pengukuran terhadap reagen blank (kosong)

Standar Sampel
Supernatan - 100 L
Standar 100 L -
Reagen kolesterol 1000 L 1000 L
Campur dan imkubasi selama 10 menit pada suhu kamar atau 5 menit dalam suhu
37 oC. Lalu ukur absorbansi sampel atau standar terhadap nilai reagen blank/kosong
dalam 45 menit.

Kalkulasi
Dengan Standar
A Sampel mg
HDL Kolesterol [mg/dL] = A Standar x Konsentrasi Standar [ dL ]

Konsentrasi standar adalah konsentrasi kolesterol total di dalam larutan standar kolesterol.

Faktor Konversi
Kolesterol [mg/dL] x 0,02586 = kolesterol [mmol/L]

Kontrol
Untuk pengendalian kualitas internal, diaSys TruLab L control harus diuji. Setiap laboratorium
harus melakukan tindakan korektif jka terjadi penyimpamgan dalam pengendalian pemulihan.

Cat No. Ukuran Kit

TruLab L Level 1 5 9020 99 10 065 3 x 3 mL
TruLab L Level 2 5 9030 99 10 065 3 x 3 mL
Karakteristik Kinerja
Rentang Pengukuran
Tes telah dikembangkan untuk menentukan konsentrasi HDL-Kolesterol hingga 400 mg/dL. Bila
nilai melebihi kisaran ini, sampel harus diencerkan 1 + 4 dengan larutan NaCl (9 g/L ) dan hasilnya
dikalikan dengan 5.
Spesitifitas/ interferensi
Bilirubin dan Hemoglobin mengganggu konsentrasi rendah. Untuk futher informasi tentang
campuran zat yang disebut dengan DS [6].
Batas deteksi
Batas bawah deteksi adalah 2 mg/dL.

Presisi
Antar-tes Berarti SD CV
n=20 [mg/dL] [mg/dL] [%]
Sampel 1 29 0.06 2.1
Sampel 2 61 0.86 1.4
Sampel 3 105 1.49 1.4

Antar-tes Berarti SD CV
n=10 [mg/dL] [mg/dL] [%]
Sampel 1 27 0.80 3.0
Sampel 2 45 0.51 1.1
Sampel 3 56 1.34 2.4

Perbandingan metode
Perbandingan antara Diasys Cholesterol Fs + HDL precipitant (y) dengan uji HDL endapan HDL
yang tersedia secara komersial dengan menggunakan 60 sampel memberikan hasil sebagai berikut:
0,98 x 165 mg/dL; r=0.996.

Rentang referensi[4]
HDL- cholesterol 35 mg/dl (0,9 mmol/L)
Setiap laboratorium harus memeriksa apakah rentang referensi dapat di pindah tangankan ke
populasi pasiennya sendiri dan tentukan rentang referensi sendiri jika perlu.
INTERPRETSI HASIL
Studi epidemiologi telah mengamati bahwa konsentrasi kolestrol HDL rendah 39 mg / dL (0,9
mmol / L) pada pria dan 43 mg / dL. (1,0 mmol / L) pada wanita, terutama jika dikaitkan dengan
trigliserida puasa 180 mg / dL (2 mmol / L), memprediksi risiko tinggi penyakit jantung koroner.

European Task Force on Coronary Prevention merekomendasikan untuk menurunkan konsentrasi

TC menjadi kurang dari 190 mg / dL (5,0 mmoL) dan kolestrol LDL menjadi kurang dari 115 mg
/ dL (3,0 mmol / L).

DAFTAR PUSTAKA

1. Rifai N, Bachorik PS, Albers JJ. Lipids dan apolipoprotein. Di: Burits CA, Ashwood ER editor.
Tietz textbook of clinical chemistry. 3ed. Philadelphia: W.B Saunders Company; 1999.
Hal.809-61.

2. Rekomendasi dari Joint tesk Force kedua dari European dan societies lainnya mengenai
pencegahan penyakit coroner. Pencegahan penyakit jantung jantung coroner dalam praktik
klinis. Eur Heart J 1998, 19: 1434-503

3. Lopes-Virella MF, Batu P, Ellis S, Colwell JA. Penentuan kolesterol pada high-density
lipoprotein di pisahkan oleh tiga metode yang berbeda. Clin Chem 1977; 23.882-4.

4. Schaefer EJ, McNamara J. gambaran umum diagnosis dan pengobatan gangguan lipid. Di; Rifai
N, Warnick GR, Dominiczak MH, eds. Buku pegangan uji lipoprotein. Washington: AACC
Press 1997. Hal 25-48.

5. Guder WG, zawta B et al. Kualitas sampel diagnostic GIT Verlag: ed Darmstadt: 2001 hal. 22-
3

6. Young DS. Efek Narkoba Dalam Laboratorium Klinik Tes. 5 tahun. volume 1 dan 2
Washington, DC: The Ammerican Association For Klinical Chemistry Press. 2000

7. Beakker AJ, Mucke M. Gangguan Gamma Pthy Dalam Uji Kimia Klinis, Deteksi Mekanisme
Dan Pencegahan.