Pewarnaan dan Morfologi Mikroorganisme_7_5005211061
Pewarnaan dan Morfologi Mikroorganisme
R. Adawiyah, Nengah D. Kuswytasari, dan Arif L. Hakim
Departemen Biologi, Fakultas Sains dan Analitika Data, Institut Teknologi Sepuluh Nopember
Jl. Arief Rahman Hakim, Surabaya 60111 Indonesia
e-mail: robiyatuladawiya37@gmail.com
Abstrak—Isolasi mikroba adalah proses pemisahan
atau pemindahan mikroba tertentu yang terdapat d
alam dan ditumbuhkan pada medium yang telah
dibuat sehingga dapat memperoleh kultur dan biakan
mikroba murni. Tujuan dari dilakukannya praktikum
adalah untuk mempelajari cara cara mengisolasi
bakteri dari suatu campuran dengan metode sebar,
tebar, dan tuang sampai mendapatkan biakan murni,
dan juga untuk mencirikan dan mengidentifikasi suatu
spesies tertentu. Metode yang digunakan pada isolasi
mikroba, yaitu dengan metode gores (streak plate
method), metode tuang (pour plate method), metode
sebar (spread plate method) dan metode tangkap. Hasil
dari dilakukannya praktikum yaitu berupa
mendapatkan kultur mikroorganisme yang didapatkan
dengan 3 metode isolasi yaitu, metode gores, metode
tangkap, dan metode tuang. Serta mikroorganisme yang
didapat dari 3 metode dapat diamati bentuk,
permukaan, tepi, ukuran dan warna koloni pada
mikroorganisme seperti Bacillus subtilis (bakteri),
jamur, dan khamir.
Kata Kunci—Isolasi, Metode, Mikroba.
I.PENDAHULUAN
P ewarnaan pada mikroba adalah proses pewarnaan pada
mikroba sehingga dapat mengidentifikasi dan
menentukan morfologi suatu mikroorganisme [1].
Pewarnaan ini memudahkan untuk proses
pengidentifikasian suatu mikroorganisme sehingga antar
mikroorganisme dapat dibedakan [1].
Jenis jenis pewarnaan pada mikroba yaitu terdiri dari
simple staining atau pewarnaan sederhana, differential
staining dan special staining atau pewarnaan khusus.
Pewarnaan sederhana adalah pewarnaan pada mikroba
yang menggunakan satu jenis zat pewarna, contohnya pada
pewarnaan positif atau langsung dan pewarnaan negative
atau tak langsung [2]. Sedangkan pewarnaan diferensial
adalah pewarnaan pada mikroba dengan menggunakan
lebih dari satu zat pewarna, contohnya untuk penggolongan
bakteri dan juga penampakan struktur tubuh sel bakteri [3].
Penggolongan bakteri contohnya pewarnaan gram,
sedangkan penampakan struktur tubuh sel bakteri termasuk
jenis pewarnaan special yang khusus untuk mewarnai
flagel, spora, dan kapsul [2].
Pewarnaan pada mikroorganisme ini sangat penting
dilakukan agar dapat mengamati mikroorganisme tersebut
secara lebih efektif dan efisien, seperti yang diketahui
bahwa mikroorganisme yang ada di bumi ini memiliki
1
ukuran yang sangat kecil dan warna yang transparan [4].
Pewarnaan pada mikroorganisme ini berfungsi untuk
membantu proses pengamatan dan pengidentifikasian
mikroba sehingga antara mikroorganisme satu dan lainnya
dapat dibedakan [1].
Perbedaan antara morfologi mikroorganisme yaitu
antara yeast, bakteri dan jamur. Pada bakteri secara
morfologi berukuran lebih kecil, serta memiliki warna
transparan dan memiliki bentuk basil, kokus serta spiral
[4]. Sedangkan pada yeast memiliki ciri morfologi dengan
bentuk sel bulat, oval, atau silindris, dan memiliki hifa [5].
Kemudian pada jamur secara morfologi yaitu memiliki hifa
dan biasanya membentuk miselium seperti kapas, serta
memiliki spora yang besar dan berwarna hitam [6].
II. METODOLOGI
A. Waktu dan Tempat
Praktikum pewarnaan dan morfologi mikroorganisme ini
dilakukan di Laboratorium Dasar 2 Biologi Institut
Teknologi Sepuluh Nopember Surabaya pada tanggal 11
Oktober 2022 pukul 09.20 WIB sampai jam 11.00 WIB.
B. Alat dan Bahan
Alat dan bahan yang digunakan pada praktikum
pewarnaan dan morfologi mikroorganisme ini yaitu pada
alat pewarnaan langsung, pewarnaan tak langsung,
pewarnaan gram dan morfologi mikroorganisme terdiri dari
ose, bunsen atau lampu spirtus, dan kaca objek.
Pada bahan pewarnaan langsung yang dibutuhkan terdiri
dari kultur murni bakteri umur 24 jam, zat pewarna basa
(metilen blue, safranin, kristal violet), dan alkohol 96%.
Bahan pada pewarnaan tak langsung terdiri dari, kultur
murni bakteri umur 24 jam, zat pewarna asam (nigrosin
atau tinta cina), dan alkohol 96%. Pada bahan pewarnaan
gram terdiri dari, biakan murni bakteri E. Coli dan Bacillus
subtilis umur 24 jam, zat pewarna asam (crystal violet,
iodine atau lugol, dan safranin), dan alkohol 96%. Pada
pengamatan morfologi mikroorganisme terdiri dari,
Bacillus cereeus, Aspergilus niger, Saccharomyces
cerevisiae, lactofenol-cotton blue dan alkohol 96%.
C.Cara Kerja
Cara kerja dari praktikum pewarnaan dan morfologi
mikroorganisme adalah sebagai berikut yang pertama pada
pewarnaan langsung yaitu pertama tama diteteskan air pada
bagian tengah kaca objek yang bersih dan tidak berlemak.
Lalu jarum ose dipijarkan, setelah itu sedikit bakteri
diambil pada biakan bakteri, dicampurkan dan digeser
geserkan pada air di kaca objek dengan diameter kurang
lebih 1 cm sampai rata dan dibiarkan kering di udara atau
digoyang goyangkan di atas api spirtus sampai kering.
Pewarnaan dan Morfologi Mikroorganisme_7_5005211061
Kemudian, diteteskan zat pewarna safranin sebanyak 5
tetes selama 3-10 detik. Setelah itu dicuci kelebihan zat
pewarna dengan hati hati. Dikeringkan kaca objek dengan
cara diletakkan diatas kertas saring atau tisu. Selanjutnya
ditetesi minyak imersi pada apusan yang sudah diwarnai,
lalu diamati menggunakan mikroskop.
Pada cara kerja pewarnaan tidak langsung yaitu yang
pertama nigrosin/ tinta cina diteteskan pada kaca objek.
Diambil sedikit bakteri pada biakan bakteri dengan jarum
ose yang telah dipijarkan. Nigrosin / tinta cina
diinokulasikan pada kaca objek dengan bakteri. Satu kaca
objek diambil, lalu diletakkan ujungnya dengan kedudukan
miring di pinggir tetesan zat pewarna yang telah
diinokulasikan bakteri. Kaca objek didorong sehingga
tetesan nigrosine / tinta cina tersebar merata membentuk
apusan tipis di permukaan kaca objek pertama. Apusan
dibiarkan kering di udara terbuka, jangan dipanaskan dan
disentukan kertas tisu. Diamati apusan dengan
menggunakan minyak imersi di bawah mikroskop.
Pada cara kerja pewarnaan gram yaitu yang pertama
pada bagian tengah kaca objek ditetesi air. Diambil sedikit
bakteri pada biakan bakteri dengan jarum ose yang telah
dipijarkan, lalu dicampurkan campurkan sedikit dan
digeser geserkan pada air di kaca objek dengan diameter
kurang lebih 1 cm sampai rata dan dibiarkan kering di
udara atau digoyang goyangkan diatas api spirtus sampai
kering. Kemudian, pewarna dasar kristal violet dan
dibiarkan terendam selama 1-2 menit. Lalu kelebihan
pewarna dicuci dengan air dengan hati hati. Setelah itu
apusan ditetesi dengan lugol atau iodin, dibiarkan selama
1-2 menit. Kelebihan reagen dibuang, jangan dicuci dengan
air. Apusan direndam dalam alcohol 96% selama 30 detik.
Selanjutnya diwarnai dengan safranin selama 1 menit
sebagai warna pembanding. Safranin yang berlebih dicuci
kembali dalam air yang mengalir lalu dikeringkan. Diamati
apusan di bawah mikroskop.
III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Pewarnaan Langsung pada Bakteri
Bakteri yang dipakai untuk pewarnaan positif atau
pewarnaan langsung pada praktikum ini yaitu bakteri
Eschericia coli. Bakteri ini secara morfologi memiliki
karakteristik yaitu memiliki bentuk seperti batang atau
basil dan pada koloninya berbentuk regular dengan
permukaan yang agak cembung, yang dimana bakteri ini
dapat tumbuh dengan cepat apabila terdapat di kondisi
yang mendukung pertumbuhannya secara optimal, serta
bakteri ini juga menghasilkan enzim yang banyak [7].
Selain itu, bakteri E. coli memiliki ukuran panjang sel
sekitar 2 mikrometer, ukuran diameter 0,5 mikrometer,
serta volumenya berkisar 0,6 -0,7 m 3 [15].
Pewarnaan langsung pada bakteri adalah dapat disebut
juga pewarnaan positif dengan menggunakan satu jenis zat
pewarna yaitu kromogen positif misalnya metilen blue
yang bertujuan untuk meningkatkan kontras sampel
biologis dan mengidentifikasi bakteri [8]. Pewarnaan
posistif ini berguna untuk dapat menentukan morfologi sel
bakteri. Prinsip kerja dari pewarnaan langsung yaitu
dengan mewarnai apusan bakteri menggunakan satu jenis
zat pewarna sederhana yang sifatnya basa selama beberapa
2
detik atau menit, sesuai dengan jenis pewarna yang dipakai
[9].
Mekanisme dari penempelan pewarnaan positif yaitu
pada pewarnaan positif menggunakan kromogen kationik
bermuatan positif untuk mengikat asam nukleat dan
komponen komponen tertentu dari dinding sel bakteri yang
bermuatan negatif. Pada prosesnya, terjadi ionisasi pada
bagian kromogen menunjukkan muatan positif, hal ini
menyebabkan kromogen memiliki afinitas yang kuat untuk
konstituen negative sel. Muatan negative pada permukaan
bakteri akan menolak sebagian besar noda asam dan hal ini
akan mencegah penetrasi noda asam bakteri masuk ke
dalam selnya [10]
Fungsi perlakuan pada praktikum pewarnaan langsung
yang dilakukan yaitu yang pertama meneteskan air pada
bagian tengah kaca objek berfungsi untuk transportasi
sementara untuk inokulasi bakteri. Lalu dilakukan
pemijaran jarum ose yang berfungsi untuk mensterilisasi
jarum ose sehingga mikroorganisme yang terdapat pada
jarum ose dapat mati [13]. Selanjutnya, ambil sedikit
bakteri pada biakan murni bakteri Eschericia coli,
berfungsi agar didapatkan mikroba yang paling sederhana
dan mempermudah proses identifikasi [14]. Selanjutnya
meneteskan safranin pada kaca objek yang sudah berisi
bakteri Eschericia coli sebanyak 5 tetes dan biarkan zat
pewarna tersebut menutupi seluruh permukaan apusan
selama 3-10 detik, hal ini berfungsi untuk mewarnai
bakteri dengan safranin yang bersifat basa dengan
komponen kromofornya yang bermuatan positif, sehingga
bakteri mudah mengikat satu sama lain dari waktu ke
waktu [9]. Selanjutnya yaitu, kelebihan zat pewarna dicuci
dengan air secara hati hati kemudian dikeringkan dengan
cara meletakkannya diatas tisu, hal ini berfungsi untuk
meluruhkan pewarna yang berlebihan dan untuk
mengeringkan kaca objek agar dapat diamati dengan
mudah di mikroskop, terakhir diamati di bawah mikroskop
untuk mengetahui mofrologi dari bakteri yang telah
diwarnai [9].
Gambar 1. Pewarnaan safranin pada Eschericia coli
(Dokumentasi Pribadi, 2022)
Berdasarkan praktikum pewarnaan langsung bakteri
Eschericia coli dengan safranin yang telah dilakukan
diperoleh hasil bahwa bakteri Eschericia coli memiliki
karakteristik morfologi yang bentuk selnya seperti batang
atau dapat disebut juga basil. Hal ini sesuai dengan
literature, yang mengatakan bahwa bakteri Eschericia coli
memiliki bentuk sel seperti batang atau basil, dan
koloninya berbentuk regular dengan permukaan yang agak
cembung [7]. Selain itu, bakteri E. coli memiliki ukuran
panjang sel sekitar 2 mikrometer, ukuran diameter 0,5
mikrometer, serta volumenya berkisar 0,6 -0,7 m 3 [15].
B. Pewarnaan Tidak Langsung pada Mikroba
Pewarnaan tidak langsung adalah dapat disebut juga
pewarnaan negatif dengan menggunakan satu jenis zat
Pewarnaan dan Morfologi Mikroorganisme_7_5005211061
pewarna yaitu kromogen negative misalnya nigrosin atau
tinta cina yang bertujuan untuk mengidentifikasi mikroba
[8]. Pada prinsip kerja dari pewarnaan tak langsung yaitu
dengan mewarnai apusan mikroba pada kaca objek dengan
menggunakan zat pewarna asam yang memiliki kromogen
bermuatan negatif [8].
Mekanisme terjadinya pewarnaan tidak langsung pada
bakteri, yaitu pewarna yang digunakan termasuk pewarna
asam yang dimana pewarna tersebut tidak dapat menembus
dan menetrasi ke dalam sel bakteri hal ini karena
komponen dari kromofiknya bermuatan negative [11].
Sehingga hal tersebut menyebabkan pewarna hanya bisa
mewarnai latar belakang dari lingkungan sel bakteri yang
ada, dan sel bakterinya akan terlihat terang pada bidang
yang terwarnai [11].
Fungsi perlakuan pada praktikum pewarnaan tidak
langsung yang dilakukan yaitu, pertama diteteskan nigrosin
atau tinta cina pada kaca objek, nigorin disini berfungsi
sebagai reagen dimana mempunyai muatan negative, dan
hanya akan mewarnai pada bagian latar belakang [12].
Lalu dilakukan pemijaran jarum ose yang berfungsi untuk
mensterilisasi jarum ose sehingga mikroorganisme yang
terdapat pada jarum ose dapat mati [13]. Selanjutnya,
ambil sedikit bakteri pada biakan murni bakteri Bacillus
subtilis, berfungsi agar didapatkan mikroba yang paling
sederhana dan mempermudah proses identifikasi [14].
Selanjutnya, meneteskan tinta cina pada kaca objek yang
sudah berisi bakteri Bacillus subtilis dan biarkan zat
pewarna tersebut menutupi seluruh permukaan apusan, hal
ini berfungsi untuk mewarnai latar belakang sel bakteri
yaitu kaca objek, yang disebabkan karena reagen atau tinta
cina bermuatan negatif dan membran sel bakteri bermuatan
negatif sehingga reagen tidak dapat masuk pada sel bakteri
tetapi mewarnai kaca objek [12]. Kemudian dikeringkan di
udara terbuka, hal ini berfungsi untuk mengeringkan kaca
objek agar dapat diamati dengan mudah di mikroskop,
terakhir diamati di bawah mikroskop untuk mengetahui
mofrologi dari bakteri yang telah diwarnai [9].
Gambar 2. Pewarnaan tinta cina pada Bacillus subtilis
(Dokumentasi pribadi, 2022)
Berdasarkan praktikum pewarnaan tidak langsung
bakteri Bacillus subtilis dengan tinta cina yang telah
dilakukan diperoleh hasil bahwa bakteri Bacillus subtilis
memiliki karakteristik morfologi yang bentuk selnya
seperti batang atau dapat disebut juga basil. Hal ini sesuai
dengan literature, yang mengatakan bahwa bakteri Bacillus
subtilis memiliki bentuk sel seperti batang atau basil, dan
koloninya berbentuk bulat dan tidak beraturan dengan
warna koloni putih [16]. Bakteri Bacillus subtilis
3
merupakan bakteri gram positif, dan juga bakteri ini
memiliki endospora [16].
C.Pewarnaan Gram
Pewarnaan gram adalah pewarnaan dengan
menggunakan lebih dari satu jenis zat pewarna yaitu zat
pewarna asam yang terdiri dari cristal violet, iodine atau
lugol, dan safranin dan fungsinya untuk mengidentifikasi
mikroorganisme [8]. Pewarnaan gram dapat terbagi
menjadi du ajika dikaitkan dengan jenis bakterinya yaitu
pewarnaan gram positif dan pewarnaan gram negatif.
Pewarnaan gram positif adalah pewarnaan dengan
menggunakan lebih dari satu jenis zat pewarna untuk
mewarnai bakteri gram positif atau bakteri yang memiliki
lapisan peptidoglikan yang tinggi [17]. Sedangkan
pewarnaan gram negative adalah pewarnaan dengan
menggunakan lebih dari satu jenis zat pewarna untuk
mewarnai bakteri gram negative atau bakteri yang
memiliki lapisan peptidoglikan tipis [17].
Prinsip pewarnaan gram positif dan gram negative,
yaitu berdasar pada perbedaan besar kecil kemampuan
dinding sel untuk dapat mengikat warna berupa zat
pewarna asam, setelah dilakukannya pencucian [17].
Mekanisme penempelan warna pada gram positif yaitu
pada bakteri gram positif memiliki dinding sel yang
kandungan lemaknya lebih sedikit jika dibandingkan
dengan peptidoglikannya yang lebih tebal sehingga apabila
diberi pewarna kristal violet sebagai warna primer maka
dinding sel bakteri akan mengikat warna kristal violet.
Sedangkan mekanisme penempelan warna pada gram
negarif yaitu pada bakteri gram negative memiliki dinding
sel dengan yang kandungan lemaknya banyak jika
dibandingkan dengan peptidoglikannya yang tipis sehingga
apabila dicuci menggunakan alcohol warna primer kristal
violet akan meluruh dan akan mengikat warna pembanding
yaitu safranin [18].
Gambar 3. Perbedaan struktur dan komposisi dinding sel
bakteri gram positif dan negative [19]
Fungsi perlakuan pada praktikum pewarnaan gram yang
dilakukan yaitu, yang pertama pada bagian tengah kaca
objek ditetesi air, hal ini berfungsi untuk transportasi
sementara untuk inokulasi bakteri. Diambil sedikit bakteri
pada biakan bakteri dengan jarum ose yang telah
dipijarkan, hal ini berfungsi untuk mensterilisasi jarum ose
sehingga mikroorganisme yang terdapat pada jarum ose
dapat mati [13]. Lalu dicampurkan campurkan sedikit dan
digeser geserkan pada air di kaca objek dengan diameter
kurang lebih 1 cm sampai rata dan dibiarkan kering di
udara atau digoyang goyangkan diatas api spirtus sampai
kering. Kemudian, pewarna dasar kristal violet dan
dibiarkan terendam selama 1-2 menit, hal ini berfungsi
untuk memberi warna primer pada bakteri, kristal violet
Pewarnaan dan Morfologi Mikroorganisme_7_5005211061
merupakan pewarna yang memiliki sifat basa, jika ia
berikatan dengan bakteri yang bersifat asam, maka bakteri
tersebut akan terwarnai oleh kristal violet menjadi warna
ungu [20]. Lalu kelebihan pewarna dicuci dengan air
dengan hati hati. Setelah itu apusan ditetesi dengan lugol
atau iodin, dibiarkan selama 1-2 menit, hal ini berfungsi
untuk memperkuat pengikatan warna primer atau kristal
violet pada dinding sel bakteri [20]. Apusan direndam
dalam alcohol 96% selama 30 detik, hal ini berfungsi untuk
membilas dan melunturkan zat warna primer pada bakteri
yang kurang menempel [20]. Selanjutnya diwarnai dengan
safranin selama 1 menit sebagai warna pembanding,
penambahan safranin berfungsi untuk mewarnai sel bakteri
menjadi merah karena warna kristal violet yang larut saat
pencucian sehingga bakteri mengikat zat warna keduanya
yaitu safranin [21].
Gambar 4. Pewarnaan gram pada Bacillus subtilis
(Dokumentasi pribadi, 2022)
Berdasarkan praktikum pewarnaan gram bakteri
Bacillus subtilis dengan kristal violet, iodine atau lugol,
dan safranin yang telah dilakukan diperoleh hasil bahwa
bakteri Bacillus subtilis pada pewarnaan mengikat warna
safranin yaitu berwarna merah, sehingga Bacillus subtilis
merupakan jenis bakteri gram negatif. Lalu juga memiliki
karakteristik morfologi yang bentuk selnya seperti batang
atau dapat disebut juga basil. Hal ini sesuai dengan
literature, yang mengatakan bahwa bakteri Bacillus subtilis
memiliki bentuk sel seperti batang atau basil, dan
koloninya berbentuk bulat dan tidak beraturan dengan
warna koloni [16]. Bacillus subtilis juga termasuk jenis
bakteri gram negatif karena pada pewarnaan gram tidak
dapat mempertahankan warna kristal violet sehingga
berwarna merah karena mengikat safranin, hal ini
disebabkan karena pada dinding selnya memiliki
kandungan lemak yang banyak dan peptidoglikan yang
tipis [22].
D.Pengamatan Morfologi Mikroba
Pengamatan morfologi mikroba dapat didasarkan pada
pengamatan karakteristik yang terdiri dari bentuk dari
koloni, tepi koloni, elevasi koloni, permukaan koloni, dan
warna koloni dari mikroorganisme [23]. Maka dari itu,
pengamatan morfologi mikroba perlu dan penting
dilakukan untuk dapat mengidentifikasi jenis bakteri
berdasarkan karakteristik morfologinya, serta dapat
membedakan karakteristik morfologi mikroba satu dengan
mikroba lainnya [24].
Perbedaan antara bakteri, yeast, dan jamur yaitu pada
bakteri memiliki karakteristik morfologi terdiri dari 3
4
bentuk sel yaitu bentuk bulat, batang, dan lengkung dan
pada umumnya bakteri berukuran 0,5-10, kemudian
morfologi bakteri pada cawan petri biasanya memiliki
warna transparan, dan berbentuk bulat dalam bentuk
koloninya [25]. Pada yeast yang merupakan fungi
uniseluler memiliki warna yang lebih keruh dibandingkan
dengan bakteri, serta pada yeast juga memiliki struktur hifa
yang berupa miselium atau hifa semu [17]. Pada jamur
yang merupakan kelompok fungi multiseluler memiliki
karakteristik yang berbeda dengan yeast dan bakteri, yaitu
memiliki macam ukuran makro dan juga mikro serta
hifanya berupa hifa yang sejati [25].
Gambar 5. Pengamatan Morfologi Mikroba pada
Cawan Petri (Dokumentasi pribadi, 2022).
Berdasarkan praktikum pengamatan morfologi mikroba
pada cawan petri yang telah dilakukan diperoleh hasil pada
cawan petri terdapat bakteri yang memiliki ciri morfologi
warna yang transparan dan berbentuk bulat serta berukuran
kecil. Dan juga pada cawan petri ditemukan yeast yang
memiliki ciri morfologi berwarna kuning dan lebih keruh
dibandingkan bakteri, dan terdapat hifa. Namun pada
cawan petri tidak ditemukan adanya jamur. Hal tersebut
sesuai dengan literature, bahwa pada bakteri memiliki
karakteristik morfologi terdiri dari 3 bentuk sel yaitu
bentuk bulat, batang, dan lengkung dan kemudian
morfologi bakteri pada cawan petri biasanya memiliki
warna transparan, dan berbentuk bulat dalam bentuk
koloninya [25]. Pada yeast yang merupakan fungi
uniseluler memiliki warna yang lebih keruh dibandingkan
dengan bakteri, serta pada yeast juga memiliki struktur hifa
yang berupa miselium atau hifa semu [17].
IV. KESIMPULAN
Berdasarkan praktikum pewarnaan dan morfologi
mikroorganisme yang telah dilakukan maka dapat
disimpulkan bahwa pada praktikum ini dilakukan untuk
mempelajari dasar kimiawi dan teoritis pewarnaan bakteri
yaitu secara kimiawi zat pewarna untuk sel bakteri terdiri
dari komponen organic yang mengandung cincin benzene
dilengkapi dengan gugus kromofor dan auksokrom. Selain
itu, untuk dapat mempelajari cara pewarnaan sederhana
dan pewarnaan bertingkat, dimana cara pewarnaan
sederhana yaitu dengan menggunakan satu jenis zat
pewarna baik itu pewarnaan langsung maupun tak
langsung, sedangkan cara pewarnaan bertingkat dengna
menggunakan lebih dari satu jenis zat pewarna, contohnya
pewarnaan gram. Lalu untuk mengetahui perbedaan
morfologi bakteri yang memiliki warna transparan, bentuk
bulat, dan ukuran kecil, morfologi jamur yang terdiri dari
Pewarnaan dan Morfologi Mikroorganisme_7_5005211061
struktur hifa yang sejati, dan morfologi yeast yang
memiliki warna lebih keruh daripada bakteri dan terdapat
hifa berupa miselium atau hifa semu.
DAFTAR PUSTAKA
[1] B. Ihsan, Dasar Dasar Mikrobiologi, Kota Baru:
Penerbit Insan Cendekia Mandiri, 2021.
[2] T. R. Johnson and C. L. Case, Laboratory
experiments in microbiology, Boston: Pearson, 2013.
[3] J. P. Harley and L. M. Presscot, Laboratory
Exercisesto Accompany Microbiology, North
America: McGraw-Hill, 2001.
[4] F. Ariyani, M. Inggriani and N. A. Ilsan,
"PERBEDAAN HASIL DETEKSI PEWARNAAN
BAKTERI TAHAN ASAM DAN RAPID ANTIGEN
PADA PASIEN DIAGNOSA TUBERKULOSIS
PARU," Jurnal Mitra Kesehatan, vol. 1, no. 2, pp.
111-116, 2018.
[5] S. H. Jumiati, I. Bintari and Mubarok, " Isolasi dan
Identifikasi Khamir Secara Morfologi Di Tanah
Kebun Wisata Pendidikan Universitas Negeri
Semarang," Biosantifika, vol. 4, no. 1, pp. 28-35,
2012.
[6] R. S. Dewi and S. Aziz, " Isolasi Rhizopus
oligosporus Pada Beberapa Inokulum Tempe di
Kabupaten Banyumas," Molekul, vol. 6, no. 2, pp. 93-
104, 2011.
[7] J. Jang, H. G. Hur, M. J. Sadowsky, M. J.
Byappanahalli, T. Yan and S. Ishii, "Environmental
Escherichia coli: ecology and public health
implications a review," Journal of applied
microbiology, vol. 123, no. 3, pp. 570-581, 2017.
[8] D. F. Barreto and O. M. Barth, "Negative and Positive
Staining in Transmission Electron Microscopy for
Virus Diagnosis," Journal Microbiology in
Agriculture and Human Health, vol. 5, no. 1, pp. 57-
65, 2015.
[9] Y. Jiwintarum, Rohmi and I. D. Prayuda, "Buah Naga
(Hylocereus polyrhizus) sebagai Pewarna Alamiuntuk
Pewarnaan Bakteri," Jurnal Kesehatan Prima, vol.
10, no. 2, pp. 1726-1734, 2016.
[10] J. G. Cappucino and C. Weish, Microbiology a
Laboratory Manual 10th Edition, England: Pearson,
2017.
[11] M. H. Putri, Sukini and Yodong, Mikrobiologi,
Jakarta: Kementrian Kesehatan RI, 2107.
[12] J. P. Kaltenbach, M. H. Kaltenbach and B. Lyons,
"Nigrosin as a Dye for Differentiating Live and Dead
Ascites Cells," Experimental Cell Research, vol. 15,
no. 1, pp. 112-117, 1958.
[13] M. E. Sambuaga, S. N. J. Londong and H. Manoppo,
""Sensivitas Ekstrak Tanaman Kemangi
(Ocimumsactum) Terhadap Bakteri Aeromonas
hydrophila," Budidaya Perairan, vol. 6, no. 1, pp. 1-
7, 2018.
[14] B. Xu, B. Hu , J. Wang, Y. Lan, Y. Zhu, X. Dai, L.
Huang, Y. Huang and W. Du, "Virgibacillus indicus
sp. non. and Virgibacillus profundi sp. nov.
TwoModerately Halophilic Bacteria Isolated From
MarineSediment by Using Microfluidic Streak
5
Plates," International Journal of Systematic and
EvolutionaryMicrobiology, vol. 68, no. 1, pp. 2015-
2023, 2018.
[15] L. I. Sutiknowati, "BIOINDIKATOR PENCEMAR,
BAKTERI Escherichia coli," Oseana, vol. 41, no. 4,
pp. 63-71, 2016.
[16] F. Puspita, M. Ali and R. Pratama, "Isolasi dan
Karakterisasi Morfologi dan Fisiologi Bakteri
Bacillus sp. Endofitik dari Tanaman Kelapa Sawit
(Elaeis guineensis Jacq.)," Jurnal Agrotek, vol. 6, no.
2, pp. 44-49, 2017.
[17] A. N. Campbell, J. B. Reece, A. L. Urry, L. M. Cain,
A. S. Wasserman , V. P. Minorsky and B. R. Jackson,
Biology 12th Edition, New York: Cengage Learning,
2020.
[18] P. Chan, Dasar Dasar Mikrobiologi, Jakarta: UI Press,
2011.
[19] N. P. Saxena and D. K. Awasthi, Microbiology, India:
KRISHNA Prakashan Media, 2003.
[20] Y. A. Prasetya, I. Y. Winarsih, K. A. Pratiwi, M. C.
Hartono and D. N. Rochimah, "(ESBLS) Pada Sampel
Makanan Di Krian Sidoarjo," Life Science, vol. 8, no.
1, pp. 75-85, 2019.
[21] R. Hidayat and A. Fatri, "Identifikasi
StreptococcusEqui dari Kuda yang Diduga Menderita
Strangles," Jurnal Ilmu Pertanian Indonesia, vol. 17,
no. 3, pp. 199-203, 2012.
[22] L. N. Hayati, W. Tyaningsih, R. N. Praja, S. Chuniati,
N. Yunita and P. A. Wibawati, "Isolasi dan
Identifikasi Staphylococcus aureus pada Susu
Kambing Peranakan Etawah Penderita Mastitis
Subklinis di Kelurahan Kalipuro, Banyuwangi,"
Jurnal Medik Veteriner, vol. 2, no. 2, pp. 76-78, 2019.
[23] D. Dwijoseputro, Dasar Dasar Mikrobiologi, Jakarta:
Djembatan, 2005.
[24] H. Walida, A. Permadi, F. S. Harahap and B. A.
Dalimunthe, ""Isolasi Daun Uji Antagonis
Mikroorganisme Lokal (Mol) Rebung Bambu
Terhadap Cendawan Fusarium sp," Jurnal
Agroplasma, vol. 6, no. 2, pp. 7-12, 2019.
[25] Y. Suryani and O. Taupiqurrahman, Mikrobiologi
Dasar, Bandung: UIN Sunan Gunung Djati, 2021.
Pewarnaan dan Morfologi Mikroorganisme_7_5005211061 6
Pewarnaan dan Morfologi Mikroorganisme_7_5005211061 7

_____________ _____________ _____________

Bakteri

Metode Isolasi Metode gores Metode tangkap Metode tuang

Bentuk Koloni Circular Circular Irregular
Permukaan Koloni Flat Convex Hilly
Tepi Koloni Entire Undulate Lobate
Ukuran Koloni Kecil Kecil Besar
Warna Koloni Putih Kuning Putih

48 JAM
Pewarnaan dan Morfologi Mikroorganisme_7_5005211061 8

Bakteri _____________ _____________ _____________

Metode Isolasi Metode gores Metode tangkap Metode tuang

Bentuk Koloni Circular Circular Irregular
Permukaan Koloni Flat Convex Hilly
Tepi Koloni Entire Undulate Lobate
Ukuran Koloni Kecil Kecil Besar
Warna Koloni Putih Kuning Putih