SOP PENGERJAAN MASTER MIX DAN DETEKSI

1. Keluarkan reagen deteksi dari freezer

2. Diamkan selama 30 menit di suhu ruang sampai reagen mencair dengan sempurna.
(Reagen jangan dipaksa untuk mecair !)
3. Siapkan PCR Tube/STRIP TUBE dan Microtube 1.5uL sesuai kebutuhan. Di
sarankan untuk di UV terlebih dahulu selama 15 menit
4. Spindown Reagen Reaction solution, Enzyme mix selama 10 detik
5. Lalu mix kedalam microtube 1.5mL sesuai kebutuhan.
Contoh :
Komponen reagen Untuk
3DMED 1 tes
RT PCR REACTION 8,5uL
MIX

ENZYME MIX 1,5uL

Total volume 10uL

6. Disarankan untuk dilebihkan 1 sampai 2 test untuk menghindari pippete error

7. Setelah kedua komponen reagen di mix, vortex selama 10 detik dan spindown selama
10 detik. Pastikan tidak ada gelembung
8. Pippete 10uL Master mix, Tambahkan 10uL RNA sample, Tambahkan 10uL control
negative dan control positive kedalam masing masing PCR Tube. Total volume
dalam masing masing PCR Tube adalah 20uL.
9. Tutup PCR Tube lalu spindown selama 10 detik. Pastikan tidak ada gelembung
10. Masukan PCR Tube kedalam alat PCR
11. Pilih experiment sesuai dengan reagen yang di gunankan
12. Mapping sesuai posisi sample
13. Klik star/run lalu tunggu sampai proses deteksi selesai.

NOTE :

 Votex dahulu selama 10 detik Kontrol Negative dan Kontrol Positive sebelum
di tambahkan ke dalam PCR Tube.