Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Akses Publik HHS

Naskah penulis
Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.
Naskah Pengarang

Diterbitkan dalam bentuk edit akhir sebagai:

Diferensiasi. September 2016 ; 92(3): 108–115. doi:10.1016/j.diff.2016.05.007.

Fibroblas Otot Rangka dalam Kesehatan dan Penyakit

Mark A. Chapman1,Rachel Meza2, DanRichard L. Lieber1,3,4,5,*

1Departemen Bioteknologi, Universitas California San Diego, 9500 Gilman Drive, La Jolla, CA,
92093

2Departemen Biologi, Universitas California San Diego, 9500 Gilman Drive, La Jolla, CA,
92093
Naskah Pengarang

3Departemen Bedah Ortopedi, Universitas California San Diego, 9500 Gilman Drive, La Jolla,
CA, 92093-0863

4Departemen Urusan Veteran, 9500 Gilman Drive, La Jolla, CA, 92093-0863

5Institut Rehabilitasi Chicago, 345 East Superior Street, Chicago, IL 60611

Abstrak
Sebagai penghasil utama protein matriks ekstraseluler (ECM) dalam otot rangka, fibroblas
memainkan peran penting dalam memberikan dukungan struktural pada otot. ECM otot rangka
sangat penting untuk transduksi gaya dari sel otot ke tendon dan tulang untuk menciptakan
gerakan. Koneksi ECM inilah yang memungkinkan gerakan yang dibuat di otot untuk
ditransmisikan ke kerangka kita. Ulasan ini membahas bagaimana fibroblas berpartisipasi dalam
Naskah Pengarang

mempertahankan ECM yang sehat ini di dalam otot rangka. Selain itu, dari perspektif sains dasar,
kami membahas metode terkini untuk mengidentifikasi dan mempelajari fibroblas otot rangka,
karena ini sangat penting untuk meningkatkan pemahaman kita tentang sel-sel penting ini.
Akhirnya, fibrosis otot rangka dibahas, yang dapat menjadi kondisi klinis yang merusak yang
ditandai dengan kelebihan produksi ECM di dalam otot rangka.

Perkenalan
Mayoritas matriks ekstraseluler otot rangka (ECM) diproduksi oleh fibroblas yang berada di ruang
interstitial antara serat otot (Archile-Contreras et al., 2010; Gatchalian et al., 1989; Gillies dan
Lieber, 2011; Kuhl et al. , 1984; Sanderson et al., 1986; Sasse et al., 1981). Meskipun fibroblas
Naskah Pengarang

membentuk sebagian kecil sel otot rangka, mereka memainkan peran penting dalam
mempertahankan struktur otot dan terlibat dalam fibrosis. Mengingat dampak luar biasa yang
mereka miliki terhadap kesehatan otot rangka, struktur dan kontribusinya terhadap penyakit otot,
ulasan tentang fibroblas pada otot rangka disajikan.

*
Penulis korespondensi. Institut Rehabilitasi Chicago, Fakultas Kedokteran Universitas Northwestern, 345 East Superior Drive,
Chicago, IL 60611. Tel.: +312 238-6260. rlieber@ric.org .
Penafian Penerbit:Ini adalah file PDF dari manuskrip yang belum diedit yang telah diterima untuk diterbitkan. Sebagai layanan kepada pelanggan
kami, kami menyediakan naskah versi awal ini. Naskah akan mengalami penyalinan, penyusunan huruf, dan peninjauan bukti yang dihasilkan sebelum
diterbitkan dalam bentuk akhir yang dapat dikutip. Harap dicatat bahwa selama proses produksi kesalahan dapat ditemukan yang dapat
mempengaruhi konten, dan semua penafian hukum yang berlaku untuk jurnal terkait.
 Chapman dkk. Halaman 2

Meskipun sebagian besar penelitian otot rangka berfokus pada sifat kontraktil aktif otot,
terbukti bahwa ECM otot rangka penting secara struktural dan fungsional. Secara khusus,
Naskah Pengarang

otot rangka ECM memberikan stabilitas mekanik serat otot, pembuluh darah dan saraf
(Kjaer, 2004). Selain itu, ECM pada otot rangka sangat penting untuk transmisi gaya
longitudinal dan lateral dari serat otot ke tendon (Kjaer, 2004; Purslow, 2002; Tidball, 1991).
Oleh karena itu, sel-sel penghasil ECM dan ECM otot rangka bisa dibilang sama pentingnya
dengan serat otot rangka dalam memberikan fungsionalitas pada otot.

Elemen ECM sangat responsif terhadap perubahan penggunaan, penyakit, dan bahkan dapat mencegah
rehabilitasi otot setelah cedera (Kjaer et al., 2006; Sato et al., 2014; Voermans et al., 2008). Karena
fibroblas adalah salah satu produsen utama protein ECM, perubahan ECM ini kemungkinan disebabkan
oleh perubahan pada fibroblas otot penduduk. Mengingat peran fibroblas dalam memproduksi ECM otot
dalam kesehatan dan penyakit, identifikasi molekuler fibroblas merupakan tujuan penting bagi para
ilmuwan. Kami meninjau teknik pelabelan fibroblast saat ini serta teknik baru yang sedang
Naskah Pengarang

dikembangkan. Metode baru ini memiliki potensi untuk meningkatkan pengetahuan kita tentang peran
sel ini dalam homeostasis otot dan penyakit.

Fibrosis, akumulasi kelebihan ECM, hadir dalam berbagai kondisi otot rangka yang mengakibatkan
kelemahan otot yang signifikan dan penurunan rentang gerak pasif (Klingler et al., 2012; Zumstein
et al., 2008). Mengingat bahwa fibroblast menghasilkan mayoritas ECM otot rangka, kami juga
meninjau proses yang mengarah ke fibrosis dan terapi penargetan sel potensial untuk
memperbaiki kondisi disfungsional ini.

ECM pada otot rangka

Banyak jenis sel dalam otot rangka bekerja sama untuk membuat jaringan
komposit. Selain myofibers, otot rangka terdiri dari berbagai jenis sel yang
Naskah Pengarang

memainkan peran pendukung dalam menjaga struktur dan kesehatan jaringan.

Mungkin yang paling penting dari sel pendukung ini adalah fibroblas, karena sel
ini bertanggung jawab atas sebagian besar integritas struktural dan hubungan
mekanis yang disediakan oleh produksi protein ECM (Gillies dan Lieber, 2011;
Kjaer, 2004). Pada otot rangka, protein ECM diatur secara rumit di seluruh ECM
otot rangka yang secara tradisional kami bagi menjadi endo-, periand epimysium
berdasarkan lokasi anatomis (Gbr. 1).

Komposisi molekuler dari setiap lapisan ECM pada otot rangka dewasa terutama didominasi oleh
kolagen tipe I dan III (Kjaer, 2004; Light and Champion, 1984). Molekul-molekul fibrillar ini
Naskah Pengarang

menanggung tekanan yang luar biasa di dalam otot dan memberikan ECM otot rangka dengan
kemampuan untuk mengirimkan kekuatan ke tendon. Kolagen IV juga ditemukan pada otot
rangka yang terkonsentrasi pada membran dasar (Kjaer, 2004). Membran basement adalah unik
dalam arti bahwa ada kelompok protein ECM yang beragam, seperti laminin dan kolagen IV, yang
tidak ditemukan dalam ECM fibrillar (Gillies dan Lieber, 2011; Grounds et al., 2005; Voermans et
al. , 2008; Yurchenco dan Patton, 2009). Molekul unik ini berikatan langsung dengan kompleks
protein otot rangka (misalnya kompleks distroglikan

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.

 Chapman dkk. Halaman 3

dan integrin) di sarcolemma dan berfungsi sebagai perantara penting antara myofibers dan
fibrillar ECM (Voermans et al., 2008).
Naskah Pengarang

Endomisium otot adalah lapisan ECM yang paling dipahami dalam hal ultrastruktur (Purslow dan
Trotter, 1994; Trotter dan Purslow, 1992). Memindai mikrograf elektron dari otot berserat seri, di mana
serat tidak menjangkau seluruh panjang otot, mengungkapkan selubung yang kompleks dan sangat
berorientasi di sekitar otot. Pada otot-otot ini ECM endomisial menjadi elemen penting yang
mentransfer ketegangan antara serat otot yang tumpang tindih. Melalui pengamatan mereka terhadap
deformasi fibril kolagen endomisial selama peregangan otot dan penggunaan teori komposit berserat,
penulis menyimpulkan bahwa gaya antara serat otot ditransmisikan melalui geseran trans-laminar
sebagai lawan dari tegangan dalam bidang.

Perimisium dipahami pada tingkat yang lebih rendah dibandingkan dengan endomisium, mungkin
karena fakta bahwa perbedaan antara lapisan tidak jelas. Perimysial ECM bersebelahan dengan
Naskah Pengarang

tendon, sehingga berteori bahwa ini adalah mekanisme utama dimana gaya ditransmisikan dari
otot ke tendon untuk menciptakan gerakan (Passerieux et al., 2007). Perimysial ECM didominasi
oleh apa yang disebut 'kabel' perimysium yang merupakan kumpulan tebal yang terutama terdiri
dari fibril kolagen I dan III yang padat (Borg dan Caulfield, 1980; Light and Champion, 1984).
Mikroskop elektron baru-baru ini telah mencitrakan struktur ini dengan sangat rinci dan bahkan
memungkinkan pembuatan rekonstruksi 3 dimensi (3D) yang bertujuan untuk lebih memahami
peran perimysium dalam otot rangka (Gillies dan Lieber, 2011; Gillies et al., 2014). . Lokasi dan
struktur bergelombang yang diamati dalam rekonstruksi 3D kabel perimysial menunjukkan bahwa
kabel ini bertindak sebagai elemen elastis paralel di dalam otot untuk menahan beban pasif (Gbr.
2). Selain gambar yang sangat rinci yang dihasilkan dengan mikroskop elektron, mikroskop cahaya
terpolarisasi telah digunakan untuk memahami kepadatan ECM dan orientasi kolagen pada otot
jantung dan rangka (Pierard, 1989; Rich dan Whittaker, 2005; Smith dan Barton, 2014; Whittaker et
Naskah Pengarang

al ., 1994). Meskipun resolusi metode ini tidak cukup tinggi untuk mencitrakan kabel kolagen
individu, penilaian keseluruhan ECM dapat dicapai, terutama yang berkaitan dengan orientasi
serat kolagen. Teknik pencitraan ini dapat berguna dalam kondisi dengan produksi ECM yang
berlebihan, seperti fibrosis.

Epimysium otot rangka mengelilingi seluruh perut otot dan dapat dengan mudah diisolasi
dari jaringan otot (Gillies et al., 2014). Karena kemudahan diseksi ini, sifat mekanik epimysial
mudah diukur dan penelitian terbaru telah menggambarkan bundel kolagen besar di
epimysium dan juga model elemen hingga yang menggambarkan sifat nonlinier ECM
epimysial (Gao dan Kostrominova, 2008; Gao et al. , 2008).

Pentingnya ECM pada otot rangka yang sehat

Naskah Pengarang

Serat otot rangka membentuk sekitar 95% dari luas penampang otot dan ECM, hanya sekitar
1-9% (Light and Champion, 1984). Dengan demikian, ECM jauh lebih kaku daripada serat otot
karena tekanan terkonsentrasi di ECM selama kontraksi otot. Selain hubungan panjang-
tegangan aktif yang dijelaskan dengan baik yang dijelaskan untuk serat otot rangka, otot
rangka memiliki komponen mekanik pasif yang kurang dipahami (Lieber, 2010). Eksperimen
terbaru menunjukkan bahwa ECM, bukan serat otot

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.

 Chapman dkk. Halaman 4

sendiri, sebenarnya menanggung sebagian besar beban otot pasif (Meyer dan Lieber, 2011). Studi
ini menguji kekakuan mekanik serat otot rangka tunggal, kelompok serat di mana banyak serat
Naskah Pengarang

tunggal dikelompokkan bersama, dan bundel otot rangka, termasuk ECM di antara serat. Terlihat
bahwa ECM memberikan sebagian besar kekakuan pasif otot rangka karena bundel tersebut
secara signifikan meningkatkan kekakuan jaringan dibandingkan dua kelompok lainnya (Meyer
dan Lieber, 2011).

Meskipun telah ditunjukkan bahwa beban pasif ditanggung oleh ECM, belum mungkin untuk
membangun hubungan kuantitatif antara komponen ECM dan kekakuan. Sementara pada fibrosis
otot rangka, terdapat kelebihan ECM, kelompok penelitian telah mengukur kandungan kolagen
dalam jaringan dan menemukan sedikit atau tidak ada korelasi dengan sifat mekanik jaringan
(Chapman et al., 2014; Smith dan Barton, 2014; Smith et al. ., 2011). Baru-baru ini dilaporkan bahwa
ikatan silang kolagen ditemukan mendikte kekakuan pada otot jantung (López et al., 2012).
Dengan demikian, kami mengukur ikatan silang kolagen pada otot rangka tetapi tidak ada
Naskah Pengarang

hubungan langsung antara ikatan silang kolagen dan kekakuan jaringan yang ditemukan
(Chapman et al., 2015). Perbedaan antara temuan otot jantung dan rangka bisa disebabkan oleh
perbedaan fungsional antara bagaimana kedua jenis otot ini berkontraksi. Produksi kekuatan otot
rangka terutama uniaksial, namun mekanisme kontraksi jantung melibatkan deformasi
multidimensi (Buckberg et al., 2008). Mengingat perbedaan dalam cara kerja jaringan ini, ada
kemungkinan ikatan silang kolagen mengubah mekanisme jaringan di jantung tetapi tidak pada
otot rangka. Selanjutnya, López, et al. kekakuan dihitung dari tekanan pengisian jantung dan tidak
langsung dari jaringan jantung seperti yang dilakukan pada otot rangka. Perbedaan eksperimental
ini juga dapat menjelaskan perbedaan dalam peran ikatan silang kolagen dalam kekakuan
jaringan. Kami menyarankan bahwa parameter lain,
Naskah Pengarang

Produksi ECM
Fibroblas menghasilkan sejumlah besar protein ECM, seperti kolagen, fibronektin, matriks
metaloproteinase, dan proteoglikan. ECM otot rangka terutama terdiri dari kolagen I dan III,
menunjukkan bahwa fibroblas otot rangka terutama mengeluarkan dan merakit isoform
kolagen fibrilar ini (Bailey et al., 1979; Light and Champion, 1984). Kolagen IV juga diproduksi
oleh fibroblas, yang merupakan komponen utama lamina basal pada otot rangka (Kuhl et al.,
1984). Selanjutnya, fibroblas juga memproduksi dan merakit jenis kolagen lain yang kurang
umum yang penting untuk fungsi otot, seperti kolagen VI, yang menyediakan hubungan
penting antara lamina basal dan ECM fibrilar (Bateman et al., 2009; Pace et al., 2008 ). Ketika
perakitan kolagen VI terhambat, yang dapat terjadi dengan adanya mutasi glisin, hasil
distrofi otot kolagen VI yang ditandai dengan kelemahan otot dan kontraktur sendi. Jenis sel
Naskah Pengarang

lain, seperti mioblas otot rangka, juga telah terbukti menghasilkan kolagen, tetapi
keberadaan fibroblas sangat penting untuk perakitan kolagen ini menjadi ECM fungsional
(Kühl et al., 1982; Lipton, 1977a, 1977b).

Mekanisme molekuler di balik produksi kolagen dipelajari dengan baik, dan ini telah
ditinjau dalam literatur (Ghosh, 2002; Gillies dan Lieber, 2011; Lieber dan Ward, 2013).
Singkatnya, produksi kolagen, khususnya kolagen I dan III, dimulai dengan gen

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.

 Chapman dkk. Halaman 5

aktivasi oleh faktor transkripsi tertentu, seperti TGF-β, NF-κβ, dan TNF-α (lihat Ghosh et al untuk
tinjauan faktor transkripsi yang terlibat dalam sintesis kolagen I). Setelah aktivasi gen, sintesis
Naskah Pengarang

rantai pro-α terjadi diikuti oleh berbagai modifikasi pasca-translasi yang memungkinkan rantai α
untuk merakit diri menjadi tiga heliks prokolagen (Alberts et al., 2008). Prokolagen kemudian
disekresikan oleh sel tempat pro-peptida dibelah dan molekul-molekul ini merakit diri menjadi
fibril kolagen. Pada otot rangka, fibril kolagen yang dihasilkan ini beragregasi untuk membentuk
epi-, peri- dan endomisium.

Identifikasi fibroblas pada otot rangka

Definisi yang tepat dari fibroblast sulit. Ambiguitas ini menjadi penting ketika mencoba mengidentifikasi fibroblas secara eksperimental. Berbagai metode

digunakan untuk mengidentifikasi fibroblas, seperti produksi kolagen, morfologi sel, lokasi sel, dan ekspresi seluler dari penanda permukaan. Secara umum,

fibroblas dapat diidentifikasi sebagai penghasil kolagen, sel berbentuk spindel yang berada di ECM yang positif untuk vimentin protein filamen menengah

(Baum dan Duffy, 2011; Fernandez-Madrid et al., 1981; Goodpaster et al., 2008) . Meskipun ini adalah definisi yang berguna, namun tidak sepenuhnya spesifik
Naskah Pengarang

untuk fibroblas. Pada otot rangka, pengidentifikasi ini juga akan mengklasifikasikan myofibroblast dan pericytes ke dalam kategori yang sama (Mann et al.,

2011; Ricard et al., 2014). Myofibroblast didefinisikan sebagai penghasil ECM, sel kontraktil yang bernoda positif untuk α-smooth muscle actin (α-SMA) (Baum

dan Duffy, 2011; Mayer dan Leinwand, 1997). Sel-sel ini menjadi penting dalam perkembangan fibrosis otot, yang dibahas di bawah ini. Perisit berbeda dari

fibroblas jaringan ikat karena mereka berada di membran basement mikrovaskulatur dan mendukung pengembangan dan remodeling vaskular (Armulik et

al., 2005). Namun, setelah kerusakan otot, sel-sel ini terlibat dalam produksi ECM ketika mereka bermigrasi dari ceruknya ke ECM interstitial (Birbrair et al.,

2013). Meskipun fibroblast, pericytes, dan myofibroblast diklaim sebagai populasi sel yang berbeda, kemampuan untuk membedakan sel-sel ini satu sama lain

sulit karena setiap jenis sel menghasilkan protein ECM, berada di ECM dan positif untuk α-SMA dan vimentin (Armulik et al. ., 2005; Mann et al., 2011; Mathew

et al., 2011; Ricard et al., 2014). Reaktivitas silang penanda ini dengan masing-masing sel penghasil ECM di otot menantang pemahaman kita tentang populasi

ini dan mempertanyakan apakah mereka benar-benar populasi sel yang berbeda. Bahkan telah disarankan bahwa myofibroblast mungkin tidak ada sama

sekali di otot rangka, sebaliknya mereka bisa menjadi fibroblast dewasa yang mengekspresikan protein ECM (Mann et al., 2011). Selain itu, telah ditemukan

bahwa subpopulasi pericyte berdiferensiasi menjadi myofibroblast selama fibrosis otot, seperti yang dibahas di bawah (Birbrair et al., 2013; Dulauroy et al.,

2012). Silsilah bersama ini dapat menjelaskan kesamaan di antara populasi sel ini dan kesulitan dalam mengidentifikasi secara positif populasi fibroblas yang
Naskah Pengarang

homogen. Reaktivitas silang penanda ini dengan masing-masing sel penghasil ECM di otot menantang pemahaman kita tentang populasi ini dan

mempertanyakan apakah mereka benar-benar populasi sel yang berbeda. Bahkan telah disarankan bahwa myofibroblast mungkin tidak ada sama sekali di

otot rangka, sebaliknya mereka bisa menjadi fibroblast dewasa yang mengekspresikan protein ECM (Mann et al., 2011). Selain itu, telah ditemukan bahwa

subpopulasi pericyte berdiferensiasi menjadi myofibroblast selama fibrosis otot, seperti yang dibahas di bawah (Birbrair et al., 2013; Dulauroy et al., 2012).

Silsilah bersama ini dapat menjelaskan kesamaan di antara populasi sel ini dan kesulitan dalam mengidentifikasi secara positif populasi fibroblas yang

homogen. Reaktivitas silang penanda ini dengan masing-masing sel penghasil ECM di otot menantang pemahaman kita tentang populasi ini dan

mempertanyakan apakah mereka benar-benar populasi sel yang berbeda. Bahkan telah disarankan bahwa myofibroblast mungkin tidak ada sama sekali di

otot rangka, sebaliknya mereka bisa menjadi fibroblast dewasa yang mengekspresikan protein ECM (Mann et al., 2011). Selain itu, telah ditemukan bahwa

subpopulasi pericyte berdiferensiasi menjadi myofibroblast selama fibrosis otot, seperti yang dibahas di bawah (Birbrair et al., 2013; Dulauroy et al., 2012).

Silsilah bersama ini dapat menjelaskan kesamaan di antara populasi sel ini dan kesulitan dalam mengidentifikasi secara positif populasi fibroblas yang

homogen.
Naskah Pengarang

Untuk sepenuhnya memahami dan mengkarakterisasi fibroblas pada otot rangka, penting untuk
mengembangkan metode identifikasi fibroblas. Seperti disebutkan di atas, metode pelabelan
seluler tradisional sulit digunakan karena kurangnya penanda fibroblast yang pasti (Mathew et al.,
2011). Secara klasik, fibroblas telah diidentifikasi secara histologis dengan pewarnaan positif untuk
vimentin protein filamen menengah ditambah dengan morfologi seperti gelendong dan
pewarnaan negatif untuk jenis sel mesenkimal lainnya (Chang et al., 2002; Goodpaster et al., 2008).
Sayangnya, definisi ini tidak cukup spesifik karena

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.

 Chapman dkk. Halaman 6

banyak jenis sel menodai vimentin sehingga sulit untuk membedakan antara jenis sel (Goodpaster et
Naskah Pengarang

al., 2008). Mengingat kurangnya penanda yang tepat, ada upaya untuk menentukan pengidentifikasi
fibroblast spesifik.

Untuk digunakan dalam flow cytometry, penanda permukaan dianggap sebagai cara paling efisien untuk

memberi label dan memisahkan sel. Namun, saat ini, ada kekurangan penanda eksternal untuk fibroblas di otot

rangka, yang menjadi penghalang untuk memahami sel-sel penting ini secara menyeluruh. Namun, beberapa

penanda seluler internal telah digunakan, dan ER/TR7 digunakan sebagai label fibroblas retikuler (Tsujie et al.,

2000). Mempelajari fibroblas retikuler ini, bagaimanapun, mungkin tidak memiliki relevansi khusus karena

mereka terutama menghasilkan kolagen III, yang kurang menonjol daripada kolagen I pada otot rangka. Sebuah

studi baru-baru ini menunjukkan bahwa Faktor Transkripsi 4 (Tcf4) sangat diekspresikan dalam fibroblas jaringan

ikat dan dapat digunakan untuk memberi label pada sel (Mathew et al., 2011). Namun, Tcf4+sel juga diwarnai

positif untuk penanda pericyte, NG2, penanda myofibroblast, α-SMA, dan vimentin. Selanjutnya, ekspresi Tcf4

ditemukan, meskipun pada tingkat yang lebih rendah, pada mioblas, menunjukkan bahwa penanda ini mungkin
Naskah Pengarang

tidak secara khusus menandai fibroblas. Selain itu, penggunaan penanda internal, dan khususnya faktor

transkripsi, tidak memberikan pewarnaan yang baik karena pelabelan yang kurang efisien dan tingkat ekspresi
faktor transkripsi yang relatif rendah. Mengingat hal ini, pekerjaan masih diperlukan untuk mengembangkan

penanda aliran sitometri yang andal untuk fibroblas. Namun, karena sifat fibroblas yang heterogen, mungkin

tidak menjadi kenyataan untuk secara efisien memberi label semua fibroblas dalam sampel tertentu (Fries et al.,

1994; Sorrell dan Caplan, 2004).

Seperti disebutkan sebelumnya, penggunaan modalitas pencitraan canggih, seperti mikroskop elektron transmisi (TEM) dan pemindaian mikroskop elektron (SEM) digunakan

untuk memahami ECM (Gillies et al., 2014; Starborg et al., 2013). Dengan menggunakan teknik pencitraan baru ini, sel-sel di ruang interstitial dijelaskan. Berdasarkan morfologi

dan penempatan sel, dihipotesiskan bahwa sel-sel ini adalah fibroblas yang berada di ruang ekstraseluler otot rangka. Menggunakan metode baru pencitraan wajah blok serial

(Denk dan Horstmann, 2004), para peneliti membuat rekonstruksi 3D terperinci dari ECM otot rangka serta fibroblas. Gambar-gambar dan rekonstruksi 3D ini menggambarkan
Naskah Pengarang

hubungan dekat antara fibroblas dan ECM, serta menunjukkan bahwa sel-sel ini tersebar pada jarak biologis yang sangat jauh ~100 µm ((Gillies et al., 2014); Gambar. 2 & 3),

menunjukkan bahwa fibroblas berpotensi terlibat dalam deposisi/remodeling kabel kolagen. Dari data ini, jelas bahwa kolagen berhubungan erat dengan fibroblas dan bahwa

sel dan prosesnya dapat meluas hingga ratusan mikron sepanjang serat otot. Ini hanyalah awal dari pemeriksaan ECM otot rangka pada tingkat yang mendetail ini, dan

mudah-mudahan pekerjaan ini akan menjelaskan bagian struktur otot rangka yang belum dipelajari. Perlu dicatat bahwa karena sel-sel ini hanya diidentifikasi berdasarkan

morfologi dan lokasi, pekerjaan lebih lanjut diperlukan untuk mengidentifikasinya secara positif sebagai fibroblas. jelas bahwa kolagen berhubungan erat dengan fibroblas dan

bahwa sel-sel dan prosesnya dapat meluas ratusan mikron sepanjang serat otot. Ini hanyalah awal dari pemeriksaan ECM otot rangka pada tingkat yang mendetail ini, dan

mudah-mudahan pekerjaan ini akan menjelaskan bagian struktur otot rangka yang belum dipelajari. Perlu dicatat bahwa karena sel-sel ini hanya diidentifikasi berdasarkan

morfologi dan lokasi, pekerjaan lebih lanjut diperlukan untuk mengidentifikasinya secara positif sebagai fibroblas. jelas bahwa kolagen berhubungan erat dengan fibroblas dan

bahwa sel-sel dan prosesnya dapat meluas ratusan mikron sepanjang serat otot. Ini hanyalah awal dari pemeriksaan ECM otot rangka pada tingkat yang mendetail ini, dan

mudah-mudahan pekerjaan ini akan menjelaskan bagian struktur otot rangka yang belum dipelajari. Perlu dicatat bahwa karena sel-sel ini hanya diidentifikasi berdasarkan

morfologi dan lokasi, pekerjaan lebih lanjut diperlukan untuk mengidentifikasinya secara positif sebagai fibroblas.
Naskah Pengarang

Selain pelabelan antibodi dan pencitraan SEM/TEM, pelabelan genetik dapat digunakan untuk memberi
label subset fibroblas. Pelabelan genetik sel pengekspres Tcf4 telah berhasil digunakan untuk memberi
label fibroblas jaringan ikat pada otot dengan protein fluoresen hijau (GFP) (Mathew et al., 2011). Seperti
disebutkan sebelumnya, myoblas juga mengekspresikan Tcf4, jadi
Tcf4GFP/Cre+neomouse diciptakan untuk secara khusus melabeli fibroblas jaringan ikat otot dan
bukan sel miogenik. Ini dilakukan dengan menyebabkan Cre hanya aktif di dalam sel

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.

 Chapman dkk. Halaman 7

dengan ekspresi Tcf4 yang tinggi, dan karena mioblas memiliki tingkat ekspresi Tcf4 yang relatif rendah, hanya
Naskah Pengarang

fibroblas yang secara genetik diberi label dengan GFP.

Penelitian tentang fibrosis hati mengarah pada pengembangan model tikus baru di mana semua sel
yang memproduksi kolagen tipe I, kontributor utama bekas luka fibrotik di banyak jaringan, juga
menghasilkan GFP (Yata et al., 2003). Ini dilakukan dengan memasukkan kaset GFP ke bagian hilir
promotor kolagen 1(α1). Perkembangan tikus ini memudahkan identifikasi sel-sel spesifik yang
berkontribusi pada produksi kolagen di hati. Seperti dibahas di atas, fibroblas menghasilkan kolagen I
pada otot rangka, sehingga model tikus yang sama ini dapat digunakan untuk mempelajari fibroblas otot
rangka pada otot rangka yang sehat dan fibrotik.

Pekerjaan ini sedang berlangsung dan kami telah berhasil membiakkan model fibrosis otot rangka
yang ada (tikus knockout ganda nesprin-desmin (Chapman et al., 2014)) dengan tikus reporter
kolagen-GFP (Yata et al., 2003). Kami menemukan bahwa ada peningkatan jumlah sel penghasil
Naskah Pengarang

kolagen pada otot rangka fibrotik yang ditentukan dengan mikroskop (Gbr. 4) dan penyortiran sel
teraktivasi fluoresensi (FACS). Menariknya, ketika melakukan analisis FACS, kami menentukan
bahwa sel penghasil kolagen dalam otot rangka bersifat heterogen dan terdiri dari fibroblas, sel
progenitor fibro/adipogenik, dan sel progenitor otot rangka. Temuan ini lebih lanjut menyoroti
fakta bahwa penggunaan penanda tunggal (misalnya, produksi kolagen I) tidak cukup untuk
secara khusus memberi label pada fibroblas. Selain itu, dengan menggunakan model genetik ini,
kami dapat menunjukkan bahwa ketiga populasi sel penghasil kolagen menunjukkan peningkatan
jumlah yang signifikan, sedangkan komposisi sel penghasil kolagen dan ekspresi gen umumnya
tetap sama antara otot WT dan DKO. Hasil ini menunjukkan heterogenitas sel penghasil kolagen I
pada otot sehat dan fibrotik. Pengetahuan ini dapat mengarah pada pengembangan terapi yang
bertujuan untuk menekan proliferasi sel kolagen I dan deposisi kolagen I (Chapman et al., 2016).
Naskah Pengarang

Fibroblas dalam regenerasi otot rangka

Seperti disebutkan sebelumnya, telah ditunjukkan bahwa, meskipun myoblast mengeluarkan protein
ECM, fibroblast diperlukan untuk perakitan yang tepat dari protein tersebut menjadi ECM fibrillar
fungsional. Kebalikannya juga telah ditunjukkan dalam penelitian terbaru yang menunjukkan bahwa
fibroblas diperlukan untuk regenerasi otot rangka yang tepat oleh sel-sel satelit (Murphy et al., 2011).
Dalam penelitian ini, garis tikus dikembangkan di mana mereka mampu mengikis sel-sel satelit secara
induksi dengan menargetkan sel penghasil Pax7, atau semua fibroblas jaringan ikat dengan mengikis
Tcf4 secara induksi.+sel (Murphy et al., 2011). Mungkin tidak mengherankan, ketika sel-sel satelit
dihilangkan, regenerasi otot rangka terhambat. Namun, ketika fibroblas jaringan ikat diablasi, dinamika
sel satelit juga berubah, menghasilkan diferensiasi prematur sel satelit dan serat otot yang beregenerasi
buruk dengan diameter yang berkurang. Para penulis mengusulkan suatu mekanisme dimana kehadiran
Naskah Pengarang

fibroblas mencegah diferensiasi prematur sel-sel satelit yang memungkinkan ekspansi sel satelit, dan
dengan demikian regenerasi otot yang tepat. Kesetimbangan dinamis antara fibroblas dan sel satelit
memiliki implikasi yang signifikan karena banyak kondisi mengakibatkan penipisan sel satelit (lihat
bagian 'Fibroblas pada fibrosis otot rangka').

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.

 Chapman dkk. Halaman 8

Temuan ini memiliki implikasi untuk pengobatan patologi otot rangka di mana regenerasi yang tepat
Naskah Pengarang

terhambat, seperti distrofi otot dan kelumpuhan otak. Pekerjaan ini menunjukkan bahwa fibroblas dan
sel satelit mungkin ada dalam semacam keseimbangan yang diperlukan untuk menjaga kesehatan
otot yang tepat. Ini harus diperhitungkan ketika terapi baru sedang dikembangkan untuk memerangi
fibrosis karena terapi yang ditujukan untuk menekan fibrosis dengan menargetkan fibroblas jaringan
ikat mungkin gagal dan menyebabkan regenerasi jaringan berkurang.

Fibroblas pada fibrosis otot rangka

Fibrosis otot rangka terjadi akibat kondisi cedera akut (misalnya stroke atau trauma
otot) dan kronis (misalnya distrofi otot dan kelumpuhan otak). Dengan akumulasi ECM
yang berlebihan pada otot rangka, pasien mengalami penurunan produksi kekuatan
otot dan penurunan rentang gerak pasif (Klingler et al., 2012; Zumstein et al., 2008).
Naskah Pengarang

Pada penyakit kronis, hasil fibrosis otot rangka sebagai respon terhadap kondisi primer.
Misalnya, pasien yang menderita Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) kekurangan
distrofin, yang melemahkan integritas sarkolemmal, mengakibatkan kerusakan
myofiber yang diinduksi oleh kontraksi (Petrof et al., 1993). Menanggapi kerusakan ini,
otot berusaha untuk beregenerasi, namun otot yang beregenerasi masih kekurangan
distrofin, yang pada akhirnya menyebabkan nekrosis myofiber. Kerusakan myofibrillar
yang terjadi pada pasien ini menghasilkan kaskade respon inflamasi yang melibatkan
invasi dan aktivasi sel inflamasi (misalnya makrofag, eosinofil) ke dalam jaringan yang
cedera (Mann et al., 2011; Wynn, 2008). Sel-sel inflamasi ini melepaskan sitokin seperti
TGF-β dan TNF-α yang mendorong produksi ECM dalam fibroblas. Selain itu,
peradangan kronis akibat distrofi otot menghasilkan pelepasan umpan balik positif dari
sitokin inflamasi ini dari fibroblas dan produksi ECM tambahan (Lieber dan Ward, 2013;
Naskah Pengarang

Mann et al., 2011; Wynn, 2008). Peradangan terus-menerus menghasilkan aktivasi

kronis fibroblas otot rangka yang pada akhirnya menyebabkan kelebihan produksi ECM
pada otot yang sakit, menyebabkan fibrosis otot. Fibroblast yang 'diaktifkan' ini disebut
myofibroblast, tetapi,

Terlepas dari apakah sel-sel ini adalah miofibroblas atau hanya fibroblas dewasa, menentukan
asalnya sangat penting untuk memahami mekanisme fibrosis dan untuk mengembangkan terapi
antifibrotik. Dalam studi penelusuran garis keturunan yang elegan, para peneliti menunjukkan
bahwa mayoritas myofibroblast dapat dilacak ke subset sel perivaskular yang mengekspresikan
disintigrin dan metalloproteinase 12 (ADAM12) selama pengembangan (Dulauroy et al., 2012).
Setelah cedera otot rangka, ketika sel-sel ADAM12 diablasi secara genetik, terjadi penurunan
Naskah Pengarang

fibrosis yang signifikan, menunjukkan bahwa pengurangan ADAM12+sel dan keturunannya dapat
memperbaiki fibrosis otot rangka. Menggunakan penanda sel perivaskular terpisah, Nestin−/ NG2+
sel perivaskular juga terlibat sebagai sumber fibrosis otot rangka pada tikus tua (Birbrair et al.,
2013). Mengingat bahwa teknik ablasi genetik untuk sel-sel ini belum dikembangkan, masih harus
dilihat apakah fibrosis dapat dicegah tanpa adanya jenis sel ini.

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.

 Chapman dkk. Halaman 9

Selain perisit, laporan terbaru mengidentifikasi sel prekursor otot rangka yang dapat berdiferensiasi menjadi fibroblas atau adiposit, disebut
Naskah Pengarang

sebagai sel progenitor fibro/adipogenik (FAP) (Joe et al., 2010; Uezumi et al., 2011). FAP ditentukan dengan pewarnaan negatif untuk CD31 dan

CD45 dan pewarnaan positif untuk CD34 dan Sca-1. Para penulis dalam kedua studi yang dikutip menunjukkan bahwa, setelah cedera otot, sel-

sel FAP dengan cepat berdiferensiasi dan membantu regenerasi. Penemuan sel-sel ini cocok untuk penciptaan teknik terapi baru untuk

memerangi kondisi dengan produksi jaringan fibrotik dan lemak yang berlebihan, seperti robekan manset rotator atau patologi otot tulang

belakang lumbar. Pasien dengan manset rotator robek sering hadir dengan tingkat jaringan fibrotik yang signifikan dan infiltrasi lemak pada

otot manset rotator (Meyer et al., 2004; Ward et al., 2006; Zumstein et al., 2008). Dengan ditemukannya sel-sel FAP, kemungkinan dapat

dikembangkan suatu terapi yang ditujukan untuk mengurangi kemampuan sel-sel FAP memasuki siklus sel dan menghasilkan jaringan fibrotik/

lemak. Dalam hubungannya dengan teknik pembedahan, terapi ini dapat meningkatkan kekuatan dan kelenturan pasien dengan robekan

rotator cuff. Dalam mengembangkan terapi ini, perawatan harus dilakukan hanya untuk menekan proliferasi FAP yang berlebihan, karena sel-

sel ini juga dapat meningkatkan regenerasi otot. terapi ini dapat meningkatkan kekuatan dan fleksibilitas pasien dengan robekan rotator cuff.

Dalam mengembangkan terapi ini, perawatan harus dilakukan hanya untuk menekan proliferasi FAP yang berlebihan, karena sel-sel ini juga

dapat meningkatkan regenerasi otot. terapi ini dapat meningkatkan kekuatan dan fleksibilitas pasien dengan robekan rotator cuff. Dalam
Naskah Pengarang

mengembangkan terapi ini, perawatan harus dilakukan hanya untuk menekan proliferasi FAP yang berlebihan, karena sel-sel ini juga dapat

meningkatkan regenerasi otot.

Membuat terapi anti-fibrotik sangat penting untuk mencapai regenerasi otot pada miopati dengan
fenotipe fibrotik. Hal ini menjadi semakin jelas dengan publikasi studi terbaru yang menunjukkan
bahwa lingkungan mikro otot penting untuk regenerasi jaringan yang tepat (Boldrin et al., 2015;
Meng et al., 2015). Biasanya, dinyatakan bahwa kumpulan sel satelit menjadi 'habis' pada miopati
tulang kronis dan jumlah sel satelit yang berpartisipasi dalam regenerasi jaringan berkurang
(Sacco et al., 2010). Selain penurunan jumlah sel regenerasi ini, lingkungan mikro otot rangka tidak
lagi mampu mendukung diferensiasi sel yang tepat, dan engraftment menjadi kurang efisien
(Boldrin et al., 2015; Meng et al., 2015). Penelitian ini menyimpulkan bahwa sel-sel satelit yang
berada di jaringan distrofi mampu melakukan regenerasi jaringan ketika ditempatkan di
lingkungan mikro yang sehat. Dengan demikian, terapi yang melibatkan transplantasi sel satelit /
Naskah Pengarang

myoblast saja tidak dapat memperbaiki kondisi tersebut. Penting bahwa perawatan ini
digabungkan dengan terapi antifibrotik untuk mencapai hasil terbaik. Ini bisa menjadi alasan
bahwa terapi sel pada DMD telah menghasilkan pengerjaan sel yang tidak efisien dan sedikit
manfaat fungsional (Gussoni et al., 1997; Mendell et al., 1995; Skuk et al., 2007, 2006, 2004).

Terapi anti-fibrotik yang menargetkan jalur inflamasi TGF-β juga sedang dikembangkan untuk
mencegah produksi berlebih ECM oleh fibroblas pada otot yang cedera (Foster et al., 2003; Zhu et
al., 2007). Namun, ketika teknik ini digunakan pada model hewan dengan distrofi otot, an
ditingkatkanrespon inflamasi terjadi, mempertanyakan penerapannya sebagai terapi yang layak
(Andreetta et al., 2006). Mengingat hal ini, penelitian yang ditujukan pada target spesifik dalam
jalur TGF-β proinflamasi sedang dikembangkan untuk terapi yang lebih sensitif. Salah satu
Naskah Pengarang

contohnya adalah sistem yang baru-baru ini dijelaskan di mana menekan microRNA-21, pengatur
penting dari sistem aktivator plasminogen inflamasi, mampu memperbaiki fibrosis terkait distrofi
dalam model tikus (Ardite et al., 2012).

Kesimpulan
Fibroblas otot rangka memainkan peran penting dalam menjaga kesehatan mekanik dan
biologis otot. Namun, fibroblas juga terlibat dalam penyakit otot saat sudah berakhir

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.

 Chapman dkk. Halaman 10

aktivitas menghasilkan fibrosis yang melemahkan. Hal ini penting untuk diperhatikan saat
merancang terapi baru untuk mengobati penyakit otot, karena pengamat yang tampak pada otot
Naskah Pengarang

rangka ini ternyata penting untuk regenerasi jaringan yang tepat. Teknik-teknik baru, seperti
pelabelan genetik dan mikroskop elektron canggih, mulai menjelaskan peran ganda fibroblas
dalam homeostasis dan penyakit otot rangka dan sangat menjanjikan untuk pengembangan
terapi seluler dan molekuler baru.

Referensi
Alberts, B.; Johnson, A.; Lewis, J.; Raff, M.; Roberts, K.; Walter, P. Biologi Molekuler Sel.
Kelima. Ilmu Garland; 2008.
Andreetta F, Bernasconi P, Baggi F, Ferro P, Oliva L, Arnoldi E, Cornelio F, Mantegazza R,
Confalonieri P. Imunomodulasi TGF-beta1 pada tikus mdx menghambat proliferasi jaringan ikat
pada diafragma tetapi meningkatkan respons peradangan : Implikasi untuk terapi antifibrotik.
J.Neuroimmunol. 2006; 175:77–86. [PubMed: 16647144]
Naskah Pengarang

Archile-Contreras, aC; Mandell, IB.; Purlow, PP. Perbedaan fenotipik pada matrix metalloproteinase 2
aktivitas antara fibroblas dari 3 otot sapi. J. Anim. Sains. 2010; 88:4006–4015. [PubMed:
20802142]
Ardite E, Perdiguero E, Vidal B, Gutarra S, Serrano AL, Muñoz-Cánoves P. MIR-21 yang diatur PAI-1
mendefinisikan jalur fibrogenik terkait usia yang baru dalam distrofi otot. J. Sel Biol. 2012;
196:163–175. [PubMed: 22213800]
Armulik A, Abramsson A, Betsholtz C. Interaksi endotel/pericyte. Sir. Res. 2005; 97:512–
523. [PubMed: 16166562]
Bailey AJ, Restall DJ, Sims TJ, Duance VC. Kelembutan daging: Lokalisasi imunofluoresen dari
bentuk isomorfik kolagen pada otot sapi dengan berbagai tekstur No Title. J.Sci. Pertanian Pangan.
1979; 30:203–210.
Bateman JF, Boot-Handford RP, Lamandé SR. Penyakit genetik jaringan ikat: seluler dan
efek ekstraseluler dari mutasi ECM. Nat. Pendeta Genet. 2009; 10:173–183. [PubMed: 19204719]
Baum J, Duffy HS. Fibroblast dan myofibroblast: apa yang kita bicarakan? J. Kardiovaskular.
Naskah Pengarang

Pharmacol. 2011; 57:376–379. [PubMed: 21297493]

Birbrair A, Zhang T, Wang ZM, Messi ML, Mintz A, Delbono O. Tipe-1 pericytes berpartisipasi
deposisi jaringan fibrosa pada otot rangka tua. Saya. J. Physiol. Fisik Sel. 2013; 305:C1098–
C1113. [PubMed: 24067916]
Boldrin L, Zammit PS, Morgan JE. Sel-sel satelit dari otot distrofi mempertahankan kapasitas regeneratif.
Res Sel Punca. 2015; 14:20–29. [PubMed: 25460248]
Borg K, Caulfield B. MORFOLOGI JARINGAN OTOT RANGKA PENGHUBUNG. Jaringan
Sel. 1980; 12:197–207. [PubMed: 7361300]
Buckberg G, Hoffman JIE, Mahajan A, Saleh S, Coghlan C. Mekanika jantung ditinjau kembali: The
hubungan arsitektur jantung dengan fungsi ventrikel. Sirkulasi. 2008; 118:2571–2587.
[PubMed: 19064692]
Chang HY, Chi J-TJ, Dudoit S, Bondre C, van de Rijn M, Botstein D, Brown PO, Rijn M, Van De,
Botstein D, Brown PO. Keanekaragaman, diferensiasi topografi, dan memori posisi pada fibroblas
manusia. Proses Natl. Acad. Sains. 2002; 99:12877–12882. [PubMed: 12297622]
Chapman MA, Mukund K, Subramaniam S, Brenner D, Lieber R. Tiga Sel Otot Rangka Berbeda
Naskah Pengarang

Jenis Ekspresikan Kolagen untuk Relung Berbeda Selama Fibrosis. 2016 Diserahkan.
Chapman MA, Pichika R, Lieber RL. Pengikatan silang kolagen tidak mendikte kekakuan pada transgenik
model tikus dari fibrosis otot rangka. J. Biomech. 2015; 48:375–378. [PubMed: 25529136]
Chapman MA, Zhang J, Banerjee I, Guo LT, Zhang Z, Shelton GD, Ouyang K, Lieber RL, Chen J.
Gangguan pada nesprin 1 dan desmin menyebabkan defek penjangkaran nukleus dan fibrosis pada otot
rangka. Bersenandung. Mol. Kejadian 2014; 23:5879–5892. [PubMed: 24943590]

Denk W, Horstmann H. Serial block-face scanning electron microscopy untuk merekonstruksi tiga
struktur nano jaringan dimensi. PLoS Biol. 2004; 2

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.

 Chapman dkk. Halaman 11

Dulauroy S, Di Carlo SE, Langa F, Eberl G, Pelacakan garis keturunan Peduto L. dan ablasi genetik
Sel perivaskular ADAM12(+) mengidentifikasi sumber utama sel profibrotik selama cedera jaringan
Naskah Pengarang

akut. Nat. Kedokteran 2012; 18:1262–1270. [PubMed: 22842476]

Fernandez-Madrid F, Noonan S, Riddle J. Tubuh "berbentuk gelendong" dalam fibroblas: kolagen intraseluler
fibril. J. Anat. 1981; 132:157–166. [PubMed: 7275796]
Foster W, Somogyi G, Huard J. Gamma interferon sebagai agen antifibrosis pada otot rangka. J.
Ortop. Res. 2003; 21:798–804. [PubMed: 12919866]
Fries KM, Blieden T, Looney RJ, Sempowski GD, Silvera MR, Willis RA, Phipps RP. Bukti dari
Heterogenitas Fibroblast dan Peran Subpopulasi Fibroblast dalam Fibrosis. Klinik. Imunol.
Imunopatol. 1994; 72:283–292. [PubMed: 7914840]
Gao Y, Kostrominova T. Perubahan terkait usia pada sifat mekanik epimysium pada kerangka
otot tikus. J. …. 2008; 41:465–469.
Gao Y, Waas AM, Faulkner Ja, Kostrominova TY, Wineman AS. Pemodelan mikromekanik dari
epimysium otot rangka. J. Biomech. 2008; 41:1–10. [PubMed: 17904147]
Gatchalian CL, Schachner M, Sanes JR. Fibroblas yang berkembang biak di dekat situs sinaptik denervasi di
otot rangka mensintesis molekul perekat tenascin(J1), N-CAM, fibronektin, dan
Naskah Pengarang

proteoglikan heparan sulfat. J. Sel Biol. 1989; 108:1873–1890. [PubMed: 2469680]

Ghosh AK. Faktor-faktor yang terlibat dalam pengaturan ekspresi gen kolagen tipe I: implikasi dalam
fibros. Exp. Biol. Kedokteran 2002; 227:301–314.
Gillies AR, Bushong Ea, Deerinck TJ, Ellisman MH, Lieber RL. Rekonstruksi Tiga Dimensi dari
Ultrastruktur Matriks Ekstraseluler Otot Rangka. Microsc Mikroanal. 2014:1–6. [PubMed:
24503288]
Gillies AR, Lieber RL. Struktur dan fungsi matriks ekstraseluler otot rangka. Otot
Saraf. 2011; 44:318–31. [PubMed: 21949456]
Goodpaster T, Legesse-Miller A, Hameed MR, Aisner SC, Randolph-Habecker J, Coller HA. Sebuah
metode imunohistokimia untuk mengidentifikasi fibroblas dalam jaringan tertanam parafin yang difiksasi
dengan formalin. J Histochem Cytochem. 2008; 56:347–358. [PubMed: 18071065]

Grounds MD, Sorokin L, White J. Kekuatan pada antarmuka matriks-otot ekstraseluler. Pindai. J.Med.
Sains. Olahraga. 2005; 15:381–391.

Gussoni E, Blau H, Kunkel L. Nasib myoblas individu setelah transplantasi ke dalam otot
Naskah Pengarang

pasien DBD. Nat. Kedokteran 1997; 3:970–977. [PubMed: 9288722]

Joe AWB, Yi L, Natarajan A, Le Grand F, So L, Wang J, Rudnicki Ma, Rossi FMV. Cedera otot
mengaktifkan progenitor fibro/adipogenik yang memfasilitasi miogenesis. Nat. Bio Sel. 2010;
12:153–63. [PubMed: 20081841]
Kjaer M. Peran Matriks Ekstraseluler dalam Adaptasi Tendon dan Otot Rangka ke Mekanik
Memuat. Fisik. Wahyu 2004; 84:649–98. [PubMed: 15044685]
Kjaer M, Magnusson P, Langberg H. Adaptasi matriks ekstraseluler tendon dan otot rangka
latihan Sintesis tendon dan kolagen. J. Anat. 2006; 208:445–450. [PubMed: 16637870]
Klingler W, Jurkat-Rott K, Lehmann-Horn F, Schleip R. Peran fibrosis pada otot Duchenne
distrofi. Acta Myol. 2012; 31:184–195. [PubMed: 23620650]
Kuhl U, Ocalan M, Timpl R, Mayne R, Hay E, von der Mark K. Peran fibroblas otot dalam
pengendapan kolagen tipe-IV di lamina basal myotube. Diferensiasi. 1984; 28:164– 172.
[PubMed: 6396135]
Kühl U, Timpl R, von der Mark K. Sintesis kolagen dan laminin tipe IV dalam kultur kerangka
sel-sel otot dan perakitan mereka pada permukaan myotubes. Dev. Biol. 1982; 93:344–354.
Naskah Pengarang

[PubMed: 7141102]
Lieber, RL. Struktur otot rangka, fungsi, dan plastisitas. 3. Philadelphia, PA: Lippincott
Williams & Wilkins; 2010.
Lieber RL, Ward SR. Mekanisme Seluler Fibrosis Jaringan. 4. Struktural dan fungsional
konsekuensi dari fibrosis otot rangka. Saya. J. Physiol. Fisik Sel. 2013; 305:C241–C252.
[PubMed: 23761627]
Cahaya N, Juara AE. Karakterisasi otot epimysium, perimysium dan endomisium
coliagens. Biochem J. 1984; 219:1017–1026. [PubMed: 6743238]

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.

 Chapman dkk. halaman 12

Lipton BH. Sintesis kolagen oleh sel termodulasi normal dan bromodeoxyuridine dalam miogenik
budaya. Dev. Biol. 1977a; 61:153–165. [PubMed: 590621]
Naskah Pengarang

Lipton BH. Analisis struktur halus sel normal dan termodulasi dalam kultur miogenik. Dev. Biol.
1977b; 60:26–47. [PubMed: 20383]
López B, Querejeta R, González A, Larman M, Díez J. Pengikatan silang kolagen tetapi bukan jumlah kolagen
berhubungan dengan peningkatan tekanan pengisian pada pasien hipertensi dengan gagal jantung
stadium C: peran potensial lisil oksidase. Hipertensi. 2012; 60:677–683. [PubMed: 22824984]

Mann CJ, Perdiguero E, Kharraz Y, Aguilar S, Pessina P, Serrano AL, Muñoz-Cánoves P. Aberrant
perbaikan dan perkembangan fibrosis pada otot rangka. Kerangka. Otot. 2011; 1:21. [PubMed:
21798099]
Mathew SJ, Hansen JM, Merrell AJ, Murphy MM, Lawson Ja, Hutcheson Da, Hansen MS, Angus-Hill
M, Kardon G. Fibroblas jaringan ikat dan Tcf4 mengatur miogenesis. Perkembangan. 2011;
138:371–384. [PubMed: 21177349]
Mathewson, Ma; Lieber, RL. Patofisiologi kontraktur otot pada cerebral palsy. Kedokteran Fisika
Klinik Rehabilitasi N Am. 2015; 26:57–67. [PubMed: 25479779]
Mayer DCG, Leinwand LA. Ekspresi gen sarkomer dan kontraktilitas pada myofibroblast. J. Sel
Naskah Pengarang

Biol. 1997; 139:1477–1484. [PubMed: 9396753]

Mendell J, Kissel J, Amato A, Raja W, Signore L, Sebelum T, Sahenk Z, Benson S, McAndrew P, Beras R,
Nagaraja H, Stephens R, Lantry L, Morris G, Burghes A. Transfer myoblast dalam
pengobatan distrofi otot duchenne. N.Engl. J.Med. 1995; 333:832–838. [PubMed: 7651473]
Meng J, Bencze M, Asfahani R, Muntoni F, Morgan JE. Pengaruh lingkungan otot pada
kapasitas regeneratif sel punca otot rangka manusia. Kerangka. Otot. 2015; 5:11. [PubMed:
25949786]
Meyer DC, Hoppeler H, Rechenberg B, Von, Gerber C. Konsep patomekanis menjelaskan otot
kehilangan dan perubahan otot berlemak setelah pelepasan tendon bedah. J.Orthop. Res. 2004; 22:1004–
1007. [PubMed: 15304272]
Meyer, Ga; Lieber, RL. Penjelasan mekanika matriks ekstraseluler dari serat otot dan serat
bundel. J. Biomech. 2011; 44:771–773. [PubMed: 21092966]
Murphy MM, Lawson Ja, Mathew SJ, Hutcheson Da, Kardon G. Sel satelit, jaringan ikat
fibroblas dan interaksinya sangat penting untuk regenerasi otot. Perkembangan. 2011;
138:3625–3637. [PubMed: 21828091]
Naskah Pengarang

Pace RA, RA Gambut, Baker NL, Zamurs L, Mörgelin M, Irving M, Adams NE, Bateman F, Mowat D,
Smith NJC, Lamont PJ, Moore SA, Mathews KD, KN Utara, Lamandé SR. Mutasi kolagen VI glisin:
perakitan yang terganggu dan spektrum keparahan klinis. Ann. Neurol. 2008; 64:294– 303.
[PubMed: 18825676]
Passerieux E, Rossignol R, Letellier T, Delage JP. Kontinuitas fisik perimysium dari
myofibers ke tendon: keterlibatan dalam transmisi gaya lateral pada otot rangka. J. Struktur. Biol.
2007; 159:19–28. [PubMed: 17433715]
Petrof BJ, Shrager JB, Stedman HH, Kelly aM, Sweeney HL. Dystrophin melindungi sarcolemma
dari tekanan yang dikembangkan selama kontraksi otot. PNAS. 1993; 90:3710–3714. [PubMed:
8475120]
Phan SH. Biologi fibroblast dan myofibroblast. Proses Saya. Toraks. Soc. 2008; 5:334–337.
[PubMed: 18403329]
Pierard GE. Metode Polarisasi Sirius Merah Berguna untuk Memvisualisasikan Organisasi Penghubung
Jaringan tetapi bukan Komposisi Molekuler dari Polimer Berseratnya. Matriks. 1989; 9:68–71.
Naskah Pengarang

[PubMed: 2710035]
Purslow P, Trotter J. Morfologi dan sifat mekanik endomisium dalam serat seri
otot $: variasi dengan panjang otot. J. Otot Res. Motil Sel. 1994; 308:299–308.
PP Purslow. Struktur dan signifikansi fungsional dari variasi dalam jaringan ikat di dalamnya
otot. 2002; 133:947–966.
Ricard N, Tu L, Le Hiress M, Huertas A, Phan C, Thuillet R, Sattler C, Fadel E, Seferian A, Montani
D, Dorfmüller P, Humbert M, Guignabert C. Peningkatan cakupan pericyte yang dimediasi oleh
endotheliaderived fibroblast growth factor-2 dan interleukin-6 merupakan sumber sel mirip otot polos pada
hipertensi pulmonal. Sirkulasi. 2014; 129:1586–1597. [PubMed: 24481949]

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.

 Chapman dkk. Halaman 13

Rich L, Whittaker P. Collagen dan pewarnaan merah picosirius: penilaian cahaya terpolarisasi dari rona fibrillar
dan distribusi spasial. J. Morphol Brasil. Sains. 2005; 22:97–104.
Naskah Pengarang

Sacco A, Mourkioti F, Tran R, Choi J, Llewellyn M, Kraft P, Shkreli M, Delp S, Pomerantz JH,
Artandi SE, Blau HM. Model Telomer Pendek dan Kelelahan Sel Punca Duchenne Muscular
Dystrophy pada tikus mdx / mTR. Sel. 2010; 143:1059–1071. [PubMed: 21145579]
Sanderson RD, Fitch JM, Linsenmayer TR, Mayne R. Fibroblast mempromosikan pembentukan
lamina basal kontinu selama miogenesis in vitro. J. Sel Biol. 1986; 102:740–747. [PubMed:
3949876]
Sasse J, von der Mark H, Kühl U, Dessau W, von der Mark K. Asal kolagen tipe I, III, dan V di
kultur otot rangka unggas. Dev. Biol. 1981; 83:79–89. [PubMed: 7016635]
Sato EJ, Killian ML, Choi AJ, Lin E, Esparza MC, Galatz LM, Thomopoulos S, Ward SR. Kerangka
fibrosis otot dan kekakuan meningkat setelah cedera tendon rotator cuff dan kompromi
neuromuskular pada model tikus. J.Orthop. Res. 2014; 32:1111–1116. [PubMed: 24838823]
Skuk D, Goulet M, Roy B, Chapdelaine P, Bouchard J, Roy R, Dugre FJ, Sylvain M, Lachance J,
Ekspresi Desche L. Dystrophin pada Otot Pasien Distrofi Otot Duchenne Setelah Injeksi
Kepadatan Tinggi Sel Myogenic Normal. J. Neuropathol. Exp. Neurol. 2006; 65:371– 386.
Naskah Pengarang

[PubMed: 16691118]
Skuk D, Goulet M, Roy B, Piette V, Côté CH, Chapdelaine P, Hogrel JY, Paradis M, Bouchard JP,
Sylvain M, Lachance JG, Tremblay JP. Tes pertama dari protokol "injeksi kepadatan tinggi" untuk
transplantasi sel miogenik di seluruh volume otot yang besar pada pasien distrofi otot Duchenne:
tindak lanjut delapan belas bulan. Neuromuscul. Gangguan. 2007; 17:38–46. [PubMed: 17142039]

Skuk D, Roy B, Goulet M, Chapdelaine P, Bouchard J, Roy R, Dugre FJ, Lachance J, Desche L,
Sylvain M, Tremblay JP. Ekspresi Dystrophin pada Myofibers Pasien Distrofi Otot Duchenne
Mengikuti Injeksi Intramuskular dari Sel Myogenic Normal. Mol. Ada. 2004; 9:475– 482.
[PubMed: 15038390]
Smith LR, Barton ER. Kandungan kolagen tidak mengubah sifat mekanik pasif fibrotik
otot rangka pada tikus mdx. Saya. J. Physiol. Fisik Sel. 2014; 306:C889–C898. [PubMed:
24598364]
Smith LR, Lee KS, Ward SR, Chambers HG, Lieber RL. Kontraktur hamstring pada anak dengan
cerebral palsy spastik dihasilkan dari matriks ekstraseluler yang lebih kaku dan peningkatan panjang sarkomer
Naskah Pengarang

in vivo. J. Physiol. 2011; 589:2625–2639. [PubMed: 21486759]

Sorrell JM, Caplan AI. Heterogenitas fibroblas: lebih dari kedalaman kulit. J. Sel Sci. 2004; 117:667–675.
[PubMed: 14754903]
Starborg T, Kalson NS, Lu Y, Mironov A, Cootes TF, Holmes DF, Kadler KE. Menggunakan transmisi
mikroskop elektron dan 3View untuk menentukan ukuran fibril kolagen dan organisasi
tiga dimensi. Nat. Protokol. 2013; 8:1433–1448. [PubMed: 23807286]
Tidball JG. Memaksa transmisi melintasi membran sel otot. J. Biomech. 1991; 24:43–52. [PubMed:
1791181]
Trotter J, Purslow P. Morfologi Fungsional dari Endomysium di Seri Serat Otot. J.
Morfol. 1992; 122:109–122.
Tsujie M, Isaka Y, Ando Y, Akagi Y, Kaneda Y, Ueda N, Imai E, Hori M. Penargetan transfer Gene
fibroblas interstisial oleh virus hemaglutinasi tipe amplop virus buatan dari metode
liposom Jepang. Ginjal Int. 2000; 57:1973–1980. [PubMed: 10792616]
Uezumi A, Ito T, Morikawa D, Shimizu N, Yoneda T, Segawa M, Yamaguchi M, Ogawa R, Matev
Naskah Pengarang

MM, Miyagoe-Suzuki Y, Takeda S, Tsujikawa K, Tsuchida K, Yamamoto H, Fukada S. Fibrosis dan

adipogenesis berasal dari progenitor mesenkimal yang umum pada otot rangka. J. Sel Sci. 2011;
124:3654–3664. [PubMed: 22045730]
Voermans NC, Bönnemann CG, Huijing PA, Hamel BC, van Kuppevelt TH, de Haan A, Schalkwijk J,
van Engelen BG, Jenniskens GJ. Tumpang tindih klinis dan molekuler antara miopati dan penyakit jaringan
ikat yang diturunkan. Neuromuscul. Gangguan. 2008; 18:843–856. [PubMed: 18818079]
Ward SR, Hentzen ER, Smallwood LH, Eastlack RK, Burns Ka, Fithian DC, Friden J, Lieber RL.
Arsitektur otot manset rotator: implikasi untuk stabilitas glenohumeral. Klinik. Ortop. Relat. Res.
2006; 448:157–163. [PubMed: 16826111]

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.

 Chapman dkk. halaman 14

Whittaker P, Kloner R, Boughner D, Pickering J. Penilaian kuantitatif kolagen miokard dengan

pewarnaan merah picrosirius dan cahaya terpolarisasi sirkuler. Resolusi Dasar. Cardiol. 1994; 89:397–410.
Naskah Pengarang

[PubMed: 7535519]

Wynn TA. Mekanisme seluler dan molekuler fibrosis. J. Pathol. 2008; 214:199–210. [PubMed:
18161745]
Yata Y, Scanga A, Gillan A, Yang L, Reif S, Breindl M, Brenner DA, Rippe RA. DNase I-
situs hipersensitif meningkatkan ekspresi gen kolagen alfa1 (I) dalam sel stellate hati.
Hepatologi. 2003; 37:267–276. [PubMed: 12540776]
Yurchenco PD, Patton BL. Mekanisme Pengembangan dan Patogen Membran Basement
Perakitan. Kur. Farmasi. Des. 2009; 15:1277–1294. [PubMed: 19355968]
Zhu J, Li Y, Shen W, Qiao C, Ambrosio F, Lavasani M, Nozaki M, Branca M, Huard J. Hubungan
antara Transforming Growth Factor-␤1, Myostatin, dan Decorin. J.Biol. kimia 2007;
282:25852–25863. [PubMed: 17597062]
Zumstein MA, Jost B, Hempel J, Hodler J, Gerber C. Hasil Jangka Panjang Klinis dan Struktural
Perbaikan Terbuka Robekan Masif Rotator Cuff. J.Bone Jt. Operasi. 2008; 90:2423–2431.
Naskah Pengarang
Naskah Pengarang
Naskah Pengarang

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.

 Chapman dkk. halaman 15
Naskah Pengarang
Naskah Pengarang
Naskah Pengarang

Gambar 1. Struktur matriks ekstraseluler otot rangka

Otot rangka adalah jaringan komposit dan hierarkis dengan tiga lapisan ECM, epi-, peri- dan
endomysium. Fibroblast otot rangka berada di ruang ekstraseluler antara serat otot dan fasikula,
di mana mereka mengeluarkan protein ECM untuk dimasukkan ke dalam ECM otot rangka.
Gambar dimodifikasi dari (Mathewson dan Lieber, 2015).
Naskah Pengarang

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.

 Chapman dkk. halaman 16
Naskah Pengarang
Naskah Pengarang
Naskah Pengarang

Gambar 2. Mikroskop elektron untuk pemeriksaan ultrastruktur ECM otot rangka

( A ) Memindai mikrograf elektron dari ruang ekstraseluler otot rangka. Kapiler
digambarkan dalam warna magenta, kolagen berwarna kuning dan fibroblas berwarna
Naskah Pengarang

cyan. Bilah skala = 5 µm (B) Rekonstruksi 3 dimensi kabel kolagen (kuning) dan fibroblas
(sian) dari mikrograf pencitraan wajah blok serial. Kapiler telah ditinggalkan dari
rekonstruksi untuk kejelasan. Hubungan erat antara kolagen dan fibroblas terbukti dalam
gambar ini karena proses fibroblas melilit kabel kolagen. Bilah skala = 5µm (Dari Gillies et
al., 2014).

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.

 Chapman dkk. halaman 17
Naskah Pengarang
Naskah Pengarang

Gambar 3. Jaringan fibrotik yang parah dengan banyak fibroblas tertanam dalam deposit kolagen yang
besar
( A ) Mikrograf elektron dari tibialis anterior tikus knockout ganda nesprin-desmin dengan
fibrosis parah. Mikrograf ini menunjukkan fibroblas tertanam dalam deposit besar kolagen
antara serat otot. (B) Rekonstruksi 3 dimensi ruang ekstraseluler terlihat di sebelah kanan
Naskah Pengarang

menggunakan pencitraan wajah blok serial (kolagen-merah, fibroblas-magenta). Dengan

teknik mikroskop ini kami dapat mengamati distribusi fibroblas 3D dalam ECM otot rangka
untuk pertama kalinya. Teknik ini akan memungkinkan peneliti untuk memahami bagaimana
morfologi jaringan diubah pada penyakit. (Dari Meza dan Lieber, data tidak dipublikasikan.)
Naskah Pengarang

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.

 Chapman dkk. halaman 18
Naskah Pengarang
Naskah Pengarang

Gambar 4. Sel penghasil kolagen lebih banyak pada fibrosis otot rangka
Mikrograf fluoresensi bagian tibialis anterior dari tikus tipe liar (A) dan double knockout
(DKO) (B). Perhatikan peningkatan sinyal GFP pada tikus DKO, yang mencerminkan
peningkatan produksi kolagen tipe I oleh otot tikus DKO. Populasi sel ini heterogen,
dengan sebagian berupa fibroblas. Bilah skala = 50μm. (Dari (Chapman et al., 2016)).
Naskah Pengarang
Naskah Pengarang

Diferensiasi. Naskah penulis; tersedia di PMC 2017 01 September.