PROPOSAL SKRIPSI

PENGARUH PENGENCER SKIM MILK TERHADAP

MOTILITAS SPERMATOZOA SAPI BALI DI BALAI
INSEMINASI BUATAN BANYUMULEK PROVINSI
NUSA TENGGARA BARAT

OLEH :
AKMAL WIGUNA
20311043

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN

UNIVERSITAS PENDIDIKAN MANDALIKA
MATARAM
2023

i
 LEMBAR PENGESAHAN

PENGARUH PENGENCER SKIM MILK TERHADAP MOTILITAS

SPERMATOZOA SAPI BALI DI BALAI INSEMINASI BUATAN
BANYUMULEK PROVINSI NUSA TENGGARA BARAT

OLEH :

AKMAL WIGUNA
20311043

Pembimbing Utama Pembimbing Pendamping

drh. Maratun Janah, M. Si drh. Candra Dwi Atma,M,si

NIDN. 0817056501 NIDN. 0816019201

ii
 DAFTAR ISI

LEMBAR PERSETUJUAN.............................................................................. ii
DAFTAR ISI ....................................................................................................... iii
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... iv
DAFTAR SINGKATAN DAN ARTI LAMBANG ....................................... v

BAB I PENDAHULUAN................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang........................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ..................................................................................... 3
1.3 Tujuan Penelitian....................................................................................... 3
1.4 Manfaat Penelitian .................................................................................... 3
1.5 Kerangka Berfikir ...................................................................................... 4
1.6 Hipotesis .................................................................................................. 5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ....................................................................... 6

2.1 Sapi Bali ..................................................................................................... 6
2.2 Spermatozoa Sapi ...................................................................................... 8
2.3 Pengencer Susu Skim ................................................................................ 10
2.4 Motilitas Spermatozoa Sapi ...................................................................... 11
2.5 Fisiologi Semen Sapi ................................................................................ 12
2.6 Profil Balai Inseminasi Buatan Banyumulek .......................................... 13

BAB III METODE PENELITIAN .................................................................. 15

3.1 Jenis dan Rancangan Penelitian ............................................................... 15
3.1.1 Jenis penelitian ................................... ................................................ 15
3.1.2 Rancangan Penelitian ................. ........................................................ 15
3.2 Populasi dan Sampel ................................................................................. 16
3.3 Variabel Penelitian .................................................................................... 16
3.3.1 Variabel Bebas ....................... ............................................................ 16
3.3.2 Variabel Terikat .............................. ................................................... 17
3.3.3 Variabel Kontrol ................... .............................................................. 17
3.4 Tempat dan Waktu Penelitian .................................................................. 17
3.5 Alat dan Bahan Penelitian ........................................................................ 17
3.5.1 Alat-Alat Penelitian ........................................................................... 17
3.5.2 Bahan-Bahan Penelitian ................................ .................................... 17
3.6 Prosedur Penelitian.................................................................................... 18
3.6.1 Persiapan Sampel .............................. ................................................. 18
3.6.2 Pembuatan Bahan Pengencer ......................... ................................... 18
3.6.3 Persiapan Vagina Buatan ................................................................... 18

iii
 3.6.4 Penampungan Semen ......................... ................................................ 19
3.6.5 Pengamatan Makroskopis .......................................... ....................... 20
3.6.6 Pengencer Semen .......................................... .................................... 21
3.6.7 Motilitas Massa Spermatozoa ............................... ............................ 21
3.6.8 Motilitas Individu ............................................. ................................. 22

3.7 Analisis Data.............................................................................................. 22

3.8 Kerangka Operasional ............................................................................... 23

DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 24

DAFTAR GAMBAR

Halaman
Gambar 2.1. Bull Sapi Bali ................................................................................. 7
Gambar 2.2 Morfologi Spermatozoa Sapi Bali ................................................. 8
Gambar 2.6 Balai Inseminasi Buatan NTB ........................................................ 14
Gambar 3.1 Kerangka Operasional ..................................................................... 23

iv
 DAFTAR ISTILAH DAN LAMBANG

°C : Derajat Celcius

< : Kurang dari

± : Kurang lebih

% : Persen

ATP : Adenosina Trifosfat

BIB : Balai Inseminasi Buatan

Dkk : Dan kawan-kawan

IB : Inseminasi Buatan

Kemenristek : Kementerian Pendidikan, Kebudayaan, Riset, dan Teknologi

Kg : Kilogram

Km : Kilometer

LIPI : Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia

MS : Motilitas Spermatozoa

PAD : Pendapatan Asli Daerah

pH : Power Of Hydrogen

SP : Spermatozoa Progresif

SNI : Standar Nasional Indonesia

SDM : Sumber Daya Manusia

v
 BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Sapi Bali merupakan salah satu ras sapi lokal yang memiliki potensi ekonomi

yang tinggi di Provinsi Nusa Tenggara Barat. Balai Inseminasi Buatan

Banyumulek bertanggung jawab dalam memproduksi dan mendistribusikan

semen sapi untuk kebutuhan peternak di daerah tersebut. Kualitas dan produksi

semen sapi Bali sangat penting untuk memastikan kelangsungan dan peningkatan

populasi sapi Bali, serta memenuhi kebutuhan reproduksi peternak. (Rita

Widaningsih, A,Md et al. 2021).

Inseminasi Buatan merupakan teknik memasukkan semen ke dalam saluran

reproduksi betina menggunakan alat yang disebut Insemination Gun yang

bertujuan untuk meningkatkan mutu genetik ternak, populasi, produksi,

pendapatan dan mengurangi penyakit kelamin menular (Hardijanto dkk., 2010).

Kualitas spermatozoa sangat mempengaruhi tingkat keberhasilan Inseminasi

Buatan (IB). Kualitas spermatozoa setelah penampungan akan mengalami

penurunan apabila tidak ditangani dengan baik. Salah satu metode yang

digunakan untuk mempertahankan kualitas spermatozoa yang baru ditampung

adalah dengan menambahkan bahan pengencer agar dapat mempertahankan

kualitas spermatozoa tersebut. (Fransiskus X Manehat, dkk 2021)

Pengencer adalah bahan cair yang digunakan untuk meningkatkan volume

semen dan mengandung nutrisi yang dibutuhkan oleh spermatozoa untuk bisa

bertahan hidup (Garner dan Hafez, 2000). Spermatozoa tidak dapat hidup untuk

1
waktu yang lama kecuali jika ditambahkan berbagai unsur ke dalam semen

(Feradis, 2010). Pengenceran semen dilakukan untuk mengurangi kepadatan dan

menjaga kelangsungan hidup spermatozoa. Pengenceran merupakan tahapan

kritis karena semen segar adalah barang rapuh dan tidak dapat tahan lama (Yusuf

dkk., 2006), maka dari itu diperlukan bahan pengencer yang mampu

mempertahankan motilitas dan daya tahan hidup spermatozoa yang lebih lama,

mudah diperoleh, cepat, dan murah. Syarat setiap bahan pengencer adalah harus

dapat menyediakan nutrisi bagi kebutuhan spermatozoa selama penyimpanan,

harus memungkinkan sperma dapat bergerak secara progresif, tidak bersifat

racun, 2 dapat menjadi penyanggah bagi sperma, dapat melindungi spermatozoa

dari kejutan dingin (cold shock) baik untuk semen beku maupun semen segar

(Solihati dan Kune, 2009).

Pengencer yang digunakan menjadi media yang dapat memberikan nutrisi

secara optimum sebagai sumber energi, sebagai preservasi maupun

kriopreservasi serta dapat menjaga pH dan tekanan osmotik bagi spermatozoa

dan harus mempunyai sifat-sifat seperti plasma semen. Salah satu pengencer

yang dapat digunakan yaitu skim milk . Skim milk adalah bagian yang tertinggal

setelah susu diambil krimnya. Skim milk yang digunakan pengencer dengan

harga yang murah, kadar lemak yang rendah dan memudahkan pemeriksaan

menggunakan mikroskop (Suharyati dan Hartono 2011)

Susu skim dapat menjadi zat nutrisi tambahan untuk spermatozoa jika

ditambahkan ke dalam pengencer semen. Hal ini karena susu skim mengandung

protein dan sumber energi yang dapat digunakan untuk mempertahankan daya

2
 hidup spermatozoa selama penyimpanan. Penggunaan air susu sebagai pengencer

semen telah banyak dilaporkan penggunaannya pada spermatozoa mamalia.

Pemberian pengencer susu skim hingga 15% mampu menekan laju penurunan

spermatozoa sapi bali selama dua hari (Widjaya, 2011). Sementara itu, menurut

Fu et al. (2017) suplementasi susu skim layak digunakan sebagai pengganti

bovine serum albumin (BSA) dalam pengencer semen babi.

1.2 Rumusan Masalah

Apakah pengencer skim milk memiliki pengaruh yang signifikan terhadap

motilitas spermatozoa sapi Bali di Balai Inseminasi Buatan Banyumulek

Provinsi Nusa Tenggara Barat?

1.3 Tujuan Penelitian

Tujuan utama dari penelitian ini adalah untuk menginvestigasi pengaruh

pengencer skim milk terhadap motilitas spermatozoa sapi Bali di Balai Inseminasi

Buatan Banyumulek Provinsi Nusa Tenggara Barat. Penelitian ini akan mencoba

mengidentifikasi apakah pengencer skim milk dapat meningkatkan motilitas

sperma sapi Bali

1.4 Manfaat Penelitian

Manfaat bagi peneliti yaitu memberikan wawasan dan pengetahuan tentang

bagaimanakah pengaruh pengencer skim milk terhadap motilitas spermatozoa

sapi bali.

3
1.5 Kerangka Berfikir

Spermatozoa berasal dari Bahasa Yunani Kuno yang berarti benih dan

makhluk hidup yang merupakan sel dari sistem reproduksi jantan. Peran aktif

spermatozoa sebagai gamet jantan sehingga penting pada keberhasilan munculnya

individu baru oleh karena itu di dalam reproduksi sering diperlukan adanya

standar kualitas spermatozoa. Spermatozoa di produksi oleh testis, proses

pembentukan dan pemasakan spermatozoa disebut spermatogenesis.

Spermatogenesis terjadi di tubulus seminiferus. Spermatogenesis mencakup

pematangan sel epitel germinal melalui proses pembelahan dan diferensiasi sel,

yang bertujuan untuk membentuk sperma fungsional. Pematangan sel terjadi di

tubulus seminiferus yang kemudian disimpan di epididimis. Dinding tubulus

seminiferus tersusun dari jaringan ikat dan jaringan epitelium germinal (jaringan

epitelium benih) yang berfungsi pada saat spermatogenesis (Munarto dkk., 2016).

Salah satu tahapan Inseminasi Buatan yang penting dilakukan adalah

penyimpanan semen. Penyimpanan semen penting dilakukan agar kualitas semen

dapat terjaga hingga proses IB pada ternak betina, oleh karena itu dibutuhkan

pengencer semen (Susilawati, 2011). Salah satu pengencer yang dapat digunakan

yaitu tris kuning telur. Pengencer tris kuning telur mengandung beberapa

komponen yaitu tris aminomethan, asam sitrat, laktosa, penisilin, streptomisin,

kuning telur, dan air suling (Mardiyah, 2001)

Salah satu pengencer yang dapat digunakan yaitu skim milk . Skim milk

adalah bagian yang tertinggal setelah susu diambil krimnya. Skim milk yang

4
digunakan pengencer dengan harga yang murah, kadar lemak yang rendah dan

memudahkan pemeriksaan menggunakan mikroskop (Suharyati dan Hartono

2011). Penggunaan skim milk sebagai pengencer semen telah banyak dilaporkan

penggunaannya pada spermatozoa mamalia. Pemberian pengencer susu skim

hingga 15% mampu menekan laju penurunan spermatozoa sapi bali selama dua

hari (Widjaya, 2011). Sementara itu, menurut Fu et al. (2017) suplementasi susu

skim layak digunakan sebagai pengganti bovine serum albumin (BSA) dalam

pengencer semen babi.

1.6 Hipotesis

H0 : Penggunaan pengencer skim milk sebagai bahan pengencer semen

dapat mempengaruhi motilitas yang rendah pada spermatozoa sapi

bali.

H1 : Penggunaan pengencer skim milk sebagai bahan pengencer semen

tidak dapat mempengaruhi dan berefek apa-apa terhadap motilitas

yang rendah pada spermatozoa sapi bali.

5
 BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Sapi Bali

Sapi Bali (Bos sondaicus) adalah salah satu bangsa sapi asli dan murni

Indonesia, yang merupakan keturunan asli banteng (Bibos banteng) dan telah

mengalami proses domestikasi yang terjadi sebelum 3.500 SM, sapi Bali asli

mempunyai bentuk dan karakteristik sama dengan banteng. Sapi Bali dikenal juga

dengan nama Bibos javanicus, meskipun sapi Bali bukan satu subgenus dengan

bangsa sapi Bostaurusatau Bos indicus. Berdasarkan hubungan silsilah famili

Bovidae, kedudukan sapi Bali diklasifikasikan ke dalam subgenus Bibovine tetapi

masih termasuk genus bos (Bamualim dan Wirdahayati, 2003). Warna bulu

mereka sangat khas, berwarna coklat kemerahan, kecuali area putih yang terlihat

jelas di bagian belakang yang memanjang di samping perut, dan juga kaus kaki

putih yang membentang dari atas lutut pada sapi jantan, tetapi tidak pada sapi

betina, rambut merah yang menutupi rambut mulai menggelap pada usia 12-18

bulan dan pada saat dewasa hampir menjadi hitam (Talib et al. 2002). Sapi bali

merupakan sapi potong asli Indonesia yang merupakan hasil domestikasi dari

banteng (Bos-bibos banteng) dan memiliki potensi besar untuk mensuplai

kebutuhan protein hewani (Hardjosubroto, 1994).

Pejantan inseminasi buatan adalah ternak unggul yang memenuhi syarat teknis,

reproduktif maupun kesehatan, telah lulus dari uji performans dan uji zuriat, untuk

ditampung semennya dan diperoses menjadi semen beku; (Pedoman Ineminasi

Buatan pada Ternak).

6
 Gambar 2.1 Bull Sapi Bali (BIB Provinsi NTB, 2023)

Menurut Williamson and Payne,1993 sapi Bali mempunyai klasifikasi

taksonomi sebagai berikut :

Phylum : Chordata

Subphylum : Vertebrata

Class : Mamalia

Sub class : Theria

Infra class : Eutheria

Ordo : Artiodactyla

Sub ordo : Ruminantia

Infra ordo : Pecora

7
Famili : Bovidae

Genus : Bos (cattle)

Group : Taurinae

Spesies : Bos sondaicus (banteng/sapi Bali)

2.2 Spermatozoa Sapi

Sel sperma adalah sel yang unik dengan dua bagian utama yaitu kepala

dan ekor yang berperan penting dalam proses pembuahan. Ekor sperma berfungsi

untuk pergerakan sperma sedangkan kepala berfungsi pada reaksi akrosom dan

fusi membran (Garner dan Hafez, 2000). Ukuran dan bentuk spermatozoa pada

berbagai jenis hewan berbeda, namun tetap memiliki struktur morfologi yang

sama. Sel sperma dihasilkan di dalam tubulus seminiferus testis, oleh sel yang

berasal dari germinal epithelium yang disebut spermatogonium dan bersifat

spermatogenik (Poernomo dkk., 2005)

Gambar 2.2 Morfologi spermatozoa sapi Bali (Feradis, 2010)

8
 Secara umum, spematozoa terdiri dari 3 bagian yaitu kepala, leher dan ekor.

Bagian kepala terdiri dari inti dan akrosom. Akrosom dilindungi oleh sebuah

lapisan tipis dan transparan yang disebut galea capitis. Lapisan ini berperan

penting dalam proses fertilisasi. Leher spermatozoa mempunyai panjang sekitar

0,5 mikron. Ekor spermatozoa berbentuk seperti cambuk, berfungsi untuk

mendorong spermatozoa agar bisa bergerak maju (Feradis, 2010).

Spematozoa mempunyai kemampuan pada proses fertilisasi, sehingga

mempunyai fungsi kapasitasi, migrasi, pengikatan, penetrasi dan fusi dengan

oosit. Proses fertilisasi tercapai bila spermatozoa dapat menembus tiga lapisan sel

telur. Tiga lapisan itu yakni kumulus oophorus, korona radiata, dan zona pelusida

(Hardijanto dkk., 2010).

Sapi jantan normal menghasilkan 12 – 17 juta spermatozoa per gram testis per

harinya. Hal itu disebabkan karena waktu spermatogenesis yang relatif singkat

dan banyaknya spermatozoa yang dihasilkan oleh sel spermatogonia. Jumlah

spermatozoa mempunyai korelasi yang erat dengan berat dan ukuran testis

(Feradis, 2010).

Sapi jantan dalam satu kali ejakulasi mengandung semen dengan volume 6 – 10

ml dengan konsentrasi 1000 – 2000 juta spermatozoa. Setiap ml semen

mengandung 1,8 x 109 spermatozoa dengan morfologi normal antara 70 – 95 %

(Garner and Hafez, 2000).

9
2.3 Pengencer Susu Skim

Menurut definisinya, susu skim merupakan susu yang tidak mengandung

lemak. Susu skim mengandung semua kandungan yang dimiliki susu pada

umumnya kecuali lemak dan vitamin yang larut dalam lemak. Kandungan lemak

pada susu skim kurang lebih hanya sebanyak 1%. Pengencer susu mengandung

lesitin untuk melindungi spermatozoa terhadap cekaman dingin selama proses

pembekuan. Susu skim lebih disukai karena mempunyai sedikit butir-butir lemak

yang bisa menghambat pergerakan spermatozoa (Feradis, 2010)

Susu skim dibuat dengan cara memasak susu murni. Setelah mendidih, bagian

atas yang berbentuk krim diambil dengan teknik penyendokan (skimming). Susu

yang tersisa disebut dengan susu skim sedangkan proses pembuatnnya disebut

skimming (Saleh, 2004). Pemanasan susu di atas 80°C akan melepaskan gugus

sulfhydril (-SH) sebagai zat reduktif yang dapat menetralisasi pengaruh toksik

laktenin. Di samping itu, pemanasan susu ditujukan untuk mematikan

mikroorganime. Pada pemakaian susu skim perbandingan pemakaian susu skim

berkisar antara 8 -10% dari jumlah pelarut (Susilowati dkk., 2010)

Pengencer yang digunakan menjadi media yang dapat memberikan nutrisi

secara optimum sebagai sumber energi, sebagai preservasi maupun kriopreservasi

serta dapat menjaga pH dan tekanan osmotik bagi spermatozoa (Suharyati dan

Hartono 2011) dan harus mempunyai sifat-sifat seperti plasma semen. Salah satu

pengencer yang dapat digunakan yaitu skim milk.

10
2.4 Motilitas Spermatozoa Sapi

Motilitas merupakan salah satu indikator penting dalam menentukan

kualitas semen dan keberhasilan fertilitas (Zulyazaini dkk., 2016). Membran

plasma yang utuh memiliki kolerasi dengan motilitas spermatozoa, semakin

banyak membran plasma spermatozoa yang utuh maka semakin banyak

spermatozoa yang motil (Azzahra dkk., 2016).

Motilitas (pergerakan) spermatozoa terjadi karena adanya selubung

mitokondria pada bagian tengah ekor spermatozoa yang berperan sebagai tempat

sintesis energi untuk pergerakan (Feradis, 2010). Gerakan spermatozoa yang di

nilai adalah spermatozoa yang maju kedepan 8 (progresif) karena gerakan

spermatozoa yang memenuhi syarat adalah aktif maju kedepan sedangkan

kecepatan spermatozoa dinilai dari spermatozoa yang memiliki kecepatan cepat

karena kecepatan ini berhubungan dengan waktu bertemunya sel telur dari induk

(Susilowati, dkk., 2010). Persentase motilitas spermatozoa dapat dihitung

menggunakan rumus berikut:

% 𝑀𝑆 = 𝑆𝑃 200 100 (2.1) MS adalah motilitas spermatozoa dan

SP adalah jumlah spermatozoa progresif.

11
2.5 Fisiologi Semen Sapi

Semen adalah cairan suspensi seluler hasil sekresi kelenjar assesoris pada

saluran reproduksi sapi pejantan yang mengandung spermatozoa (Novita dkk.,

2019). Parameter yang digunakan untuk menentukan kualitas semen adalah

parameter makroskopik dan mikroskopik. Parameter makroskopik merupakan

parameter yang terdiri dari pengamatan volume, warna konsistensi, dan pH,

sedangkan parameter makroskopik merupakan parameter yang diamati dengan

bantuan mikroskop seperti konsentrasi, motilitas, abnormalitas, viabilitas

(Moradpour, 2019).

Volume semen merupakan banyaknya semen yang dihasilkan pada satu kali

ejakulasi (Moradpour, 2019). Warna semen dapat dijadikan sebagai indikator

untuk menduga kosentrasi spermatozoa yang berada di dalam semen secara cepat.

Warna pada semen diamati secara visual setelah penampungan, semen yang baik

adalah semen yang bewarna putih susu (Aisah dkk., 2017) dan krem (Sunarti dkk.,

2016). Derajat keasaman (pH) merupakan salah satu parameter kualitas yang

diukur dengan cara mengambil sedikit semen menggunakan ose/jarum dan

diletakkan pada kertas indikator pH, selanjutnya dilihat pH semen menggunakan

perubahan warna pada kertas tersebut. pH normal semen adalah 6.4-7.8 (Garner

dan Hafez, 2000).

Kualitas semen sapi pejantan mempunyai peranan yang sangat penting dalam

pelaksanaan perkawinan, baik secara alami maupun Inseminasi Buatan (IB).

Inseminasi buatan merupakan teknik perkawinan dengan memasukkan semen

12
segar atau semen beku ke dalam saluran kelamin sapi betina menggunakan alat

yang dibuat oleh manusia. Hal ini bertujuan untuk memperbaiki mutu genetik

ternak, menghindari penyebaran penyakit kelamin dan meningkatkan jumlah

keturunan dari pejantan unggul (Hafez, 2000).

Produksi dan kualitas semen yang dihasilkan dari pejantan unggul mempunyai

peranan yang penting dalam Inseminasi Buatan, karena faktor yang

mempengaruhi keberhasilan IB sangat dipengaruhi oleh kualitas semen yang

digunakan dari pejantan yang memiliki produksi dan kualitas semen yang baik.

Pejantan unggul yang baik mempunyai produksi dan kualitas semen yang bagus

dengan bobot badan yang tinggi. Salah satu faktor yang mempengaruhi produksi

dan kualitas semen adalah bobot badan (Khairi, 2016).

2.6 Profil Balai Inseminasi Buatan Provinsi Nusa Tenggara Barat

BIB (Balai Inseminasi Buatan) Banyumulek dikelola oleh Dinas

Peternakan dan Kesehatan Hewan Pemerintah Provinsi Nusa Tenggara Barat yang

berdiri pada tahun 1967. Pada awalnya 13ernama Balai Pembibitan Ternak (BPT)

berlokasi di Bertais, kemudian pada tahun 2002 diubah menjadi Balai

Laboratorium Produksi Kesehatan Hewan (BLPKH) yang selanjutnya berlokasi di

Banyumulek. Barulah pada tahun 2009 BLPKH dirubah menjadi Balai Inseminasi

Buatan (BIB). Balai Inseminasi Buatan Provinsi Nusa Tenggara Barat terletak 10

km dari kota Mataram dan berada pada jalan pariwisata Desa Lelede Kecamatan

kediri Kabupate Lombok Barat Provinsi Nusa Tenggara Barat . Dasar hukum:

Peraturan Daerah Prov. NTB nomor 13 Tahun 2001 : Balai laboratorium Produksi

13
dan Kesehatan (BLPKH) dan peraturan Gubernur NTB Nomor 23 Tahun 2008 :

Balai Inseminasi Buatan.

Gambar 2.6 Balai Inseminasi Buatan, (2023)

Fasilitas-fasilitas yang ada di Balai Inseminasi Buatan Provinsi Nusa Tenggara

barat yaitu : Gedung kantor, Laboratorium, Peralatan laboratorium, Perumahan,

Kandang jepit, instalasi kompor dan biogas, lahuan HPT, peralatan pertanian,

kedaraan roda empat, kendaraan roda dua, daan fasilitas pengambilan semen dan

perawatan sapi pejantan unggul.

Jumlah Bull sapi yang ada di Balai Inseminasi Buatan Provinsi Nusa Tenggara

Barat adalah 17 ekor yang terdiri dari : Empat Bull sapi Bali (4 SNI, dan 2

persiapan SNI), enam Bull sapi Brangus (1 SNI, 3 persiapan SNI), empat Bull

sapi simenbtal (persiapan SNI), 1 Bull Limosin (persiapan SNI).

14
 BAB III METODE PENELITIAN

3.1 Jenis dan Rancangan Penelitian

3.1.1 Jenis Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian yang bersifat eksperimental dengan

judul ”Pengaruh Pengencer Skim Milk Terhadap Motilitas Spermatozoa

Sapi Bali di BIB Banyumulek Provinsi Nusa Tenggara Barat”.

3.1.2 Rancangan Penelitian

Rancangan penelitian yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap

(RAL) yaitu rancangan dengan beberapa perlakuan yang disusun secara

random untuk semua unit percobaan. Rancangan Acak Lengkap (RAL) yaitu

yang dengan melakukan pengujian campuran pengencer skim milk dan

semen segar dengan masing-masing perlakuan yaitu 0,3 mL pengencer dan

0,075 mL semen segar yang disimpan dalam refrigerator dengan variasi

waktu 24, 48, 72, dan 96 jam, serta jumlah ulangan pada masing-masing

perlakuan dihitung dengan rumus sebagai berikut:

(𝓉 − 1)(𝓃 − 1) ≥ 15

Keterangan :

𝓉 = Perlakuan

𝓃 = Ulangan

15
 (𝓉 − 1)(𝓃 − 1) ≥ 15

(4 − 1)(𝓃 − 1) ≥ 15

(3𝓃 − 1) ≥ 15

3𝓃 − 3 ≥ 15

3𝓃 ≥ 15 + 3

18
𝓃≥
3

𝓃 ≥6

Sehingga, pada penelitian ini dilakukan empat perlakuan dengan enam kali

ulangan.

3.2 Populasi dan Sampel Penelitian

Populasi penelitian ini adalah sapi Bali dengan sampel penelitian 4 ekor sapi

Bali dengan jenis kelamin jantan dengan umur 4 tahun dan berat badan rata-rata ±

400 kg.

3.3 Variabel Penelitian

1. Variabel Bebas

a. Pengencer skim milk dan semen dengan variasi waktu simpan 24, 48, 72,

dan 96 jam.

b. Masing-masing variasi waktu simpan diberikan perlakuan yaitu 0,3 mL

pengencer dan 0,075 mL semen segar.

16
 2. Variabel Terikata

Variabel terikat dalam penelitian ini yaitu motilitas spermatozoa

3. Variabel Kontrol

Variabel kontrol dalam penelitian ini yaitu semen segar sapi bali.

3.4 Tempat Dan Waktu Penelitian

Penelitian ini dilakukan di kandang bull sapi bali dan Laboratorium Balai

Inseminasi Buatan Provinsi Nusa Tenggara Barat selama ...... hari yang

berlangsung pada ..... tanggal ... bulan .... sampai .... tanggal ... bulan ... 2023.

3.5 Alat dan Bahan Penelitian

3.5.1 Alat-Alat Penelitian

Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini adalah kertas saring, timbangan

analitik, batang pengaduk, spatula, tabung reaksi, rak tabung reaksi, object glass

dan deck glass, erlenmeyer, pipet tetes, pipet steril, refrigerator, cool box, bunsen,

handtally counter, mikroskop, thermometer, dan alumunium foil.

3.5.2 Bahan-bahan Penelitian

Bahan-bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah sapi bali, skim milk,

riger laktat, penisilin, streptomisin, akuabides, ky jelly, dan air hangat.

17
3.6 Prosedur Penelitian

3.6.1 Persiapan Sampel

Persiapan awal yang dilakukan adalah menyiapkan sapi bali yang akan di

ditampung semennya. Sapi di beri pakan terlebih dahulu sebelum di tampung

semennya, dengan pemberian pakan kosentrat sebanyak 1% dari berat badan dan

pakan hijauna sebanyak 10% dari berat badan.

3.6.2 Pembuatan Bahan Pengencer

Pembuatan bahan pengencer mengikuti metode yang di lakukan oleh

(kaheaeruddin dkk, 2020) dengan sedikit modifikasi susu skim 10g, fruktosa 1g,

penicilin 1g, streptomisin 1g, dan riger laktat (1,99g) ke dalam tabung erlenmeyer,

kemudian dilarutkan dengan 80 mL akuabides. Larutan antibiotik kemudian

dibuat dengan dicampurkan penisilin (1 g) dan streptomisin (1 g), yang kemudian

dilarutkan dalam 10 mL akuabides. Larutan buffer dan antibiotik diaduk hingga

homogen, kemudian ditambahakan susu skim (10 ml) pada masing-masing larutan

campuran buffer antibiotik dan diaduk kembali hingga homogen.

3.6.3 Persiapan Vagina Buatan

Proses persiapan vagina buatan dimulai dari pemasangan selongsong karet tipis

ke dalam tabung luar kemudian ujung selongsong karet tipis ditarik ke kiri dan ke

kanan lalu dipasang pada bibir tabung luar. Kedua 17 ujung selongsong karet tipis

kemudian dieratkan pada tabung luar menggunakan karet gelang, setelah itu

18
pasang corong dari karet tipis disalah satu ujung dari tabung dan dieratkan dengan

karet gelang, Tabung penampung dipasang di ujung corong karet tersebut dan

dieratkan menggunakan karet gelang. Air hangat dengan suhu ± 45 ℃ kemudian

dimasukkan melalui lubang yang ada hingga penuh, setelah itu diisi udara dengan

cara ditiup melalui lubang udara yang ada hingga vagina buatan keras dan rapat

lalu oleskan ky jelly sebagai pelicin ± ¾ bagian tabung dan vagina buatan siap

digunakan.

3.6.4 Penampungan Semen

Sapi bali jantan yang akan ditampung semennya perlu dimandikan terlebih

dahulu agar ternak jantan menjadi lebih segar. Penampungan semen dilakukan

dengan cara sapi betina pemancing dimasukkan ke dalam kandang jepit. Kurang

lebih satu jam sebelum ditampung semennya sapi bali jantan didekatkan ke betina

pemancing untuk mempertinggi libido ternak jantan, sehingga kualitas dan

kuantitas semen yang dihasilkan bisa maksimal. Jika sapi bali pertama kali naik,

jangan langsung ditampung semennnya, tetapi penis dibelokkan sehingga penis

tidak masuk ke vagina betina pemancing dan akhirnya sapi bali akan turun dengan

sendirinya. Penaikan untuk ketiga atau keempat kalinya, penampungan semen

dilakukan dengan cara mengarahkan vagina buatan ke penis sapi simental hingga

penis sapi bali masuk ke dalam vagina buatan dan mengeluarkan semen ke dalam

vagina buatan tersebut.

19
3.6.5 Pengamatan Makroskopis

1. Volume semen

Volume semen yang tertampung dapat dievaluasi secara langsung pada tabung

penampung yang berskala. Volume semen dianggap normal jika volume semen

hasil penampungan berkisar antara 1-15 mL.

2. Warna Semen

Warna semen dievaluasi dengan melihat secara langsung sesaat setelah

penampungan semen dilakukan. Warna semen dianggap normal jika warnanya

putih susu.

3. pH Semen

pH semen dievaluasi menggunakan kertas indikator. pH dianggap normal jika

pH semen yang dihasilkan memiliki kisaran antara 6,2- 7,2 yaitu menunjukkan

warna hijau dan jika pH asam maka kerta indikator akan berwarna kuning atau

merah sedangkan jika pHnya basa maka kertas pH akan berwarna biru atau ungu.

4. Bau Semen

Bau semen dievaluasi dengan cara mencium bau semen pada tabung

penampung setelah penampungan. Bau semen dianggap normal apabila semen

yang ditampung memiliki bau khas ternak itu sendiri.

20
5. Kosentrasi

Konsistensi atau tingkat kekentalan dievaluasi dengan cara menggoyangkan

tabung yang berisi semen secara perlahan-lahan 19 sehingga terlihat gerakan

permukaan semen di dalam tabung. Semakin tinggi tingkat kekentalannya maka

kualitas semen tersebut juga semakin baik

3.6.6 Pengencer Semen

Metode yang digunakan berdasarkan pada penelitian yang dilakukan oleh

(Manehat dkk., 2021). Pengenceran semen dilakukan menggunakan 4 tabung

reaksi, yang mana setiap tabung reaksi berisi campuran pengencer skim milk dan

semen segar dengan masing-masing perlakuan yaitu 0,3 mL pengencer dan 0,075

mL semen segar yang disimpan dalam refrigerator dengan variasi waktu 24, 48,

72, dan 96 jam. Langkah selanjutnya adalah mengevaluasi secara mikroskopis

untuk mengetahui motilitas spermatozoa

3.6.7 Motilitas Massa Spermatozoa

Pemeriksaan motilitas massa spermatozoa diamati dengan menempatkan satu

tetes semen diatas object glass tanpa ditutup cover glass dan diamati dengan

mikoroskop perbesaran 100x. Motilitas massa dinilai dengan :

a. (+++) jika spermatozoa tersebut kelihatan seperti kumpulan awan gelap yang

bergerak aktif dan sangat cepat.

b. (++) jika spermatozoa tersebut kelihatan seperti awan gelap tetapi

pergerakannya tidak terlalu cepat.

21
c. (+) jika yang terlihat hanya pergerakan individu saja dan tidak ada kumpulan

spermatozoa.

d. (0) jika spermatozoa tidak bergerak.

3.6.8 Motilitas Individu

Pemeriksaan motilitas individu spermatozoa diamati dengan menempatkan

semen diatas object glass dan ditutup cover glass serta diamati dengan perbesaran

400x. Penilaian motilitas individu ini dilihat dari spermatozoa yang bergerak

progresif kedepan (pergerakan mundur dan melingkar tidak diikut sertakan).

Penilaian motilitas individu ini dalam bentuk presentase spermatozoa yang

bergerak dan dinyatakan dalam persen (%) mulai dari 0% sampai 100%

3.7 Analisis Data

Data dari penelitian ini dianalisis menggunakan analisis sidik ragam (ANOVA)

dengan menggunakan Softwer Statistical Packge For The Social Sciences (SPSS.

20), jika terdapat pengaruh yang nyata antar perlakuan maka akan dilanjutkan

dengan uji Duncan.

22
3.8 Kerangka Oprasional

Persiapan Pejantan Sapi Bali

Persiapan alat Penampungan

Pembuatan Pengencer Semen

Penampungan

Libido dan Ejakulasi

Collecting Semen

Evaluasi Semen

Makroskopis :
1. Volume Mikroskopis:
2. Warna
1. Motilitas Massa
3. Bau
2. Motilitas Individu
4. PH

5. Konsentrasi

Hasil

Analisis Data

3.1 Gambar Kerangka Oprasional

23
 DAFTAR PUSTAKA

Aisah, S., Isnaini, N., dan Wahyuningsih, S. (2017). Kualitas Semen Segar dan
Recovery Rate Sapi Bali pada Musim yang berbeda. Jurnal Ilmu-Ilmu
Peternakan, 27(1), 63-79.
Azzahra, F. Y., Setiatin, E. T., dan Samsudewa, D. (2016). Evaluasi Motilitas dan
Persentase Hidup Semen Segar Sapi PO Kebumen Pejantan Muda. Jurnal Sains
Peternakan Indonesia, 11(2), 99-107.
Feradis. (2010). Bioteknologi reproduksi pada ternak. Bandung: Alfabeta
Fu J, Li Y, Wang L, Zhen L, Yang Q, Li P, Li X. 2017. Bovine serum albumin and skim-
milk improve boar sperm motility by enhancing energy metabolism and protein
modifications during liquid storage at 17 o C. Theriogenology 102:87- 97.
Garner, D. L., dan Hafez, E. S. (2000). Spermatozoa and Seminal Plasma, Reproduction
in Farm Animal. Philadelphia: Lea and Febiger.
Garner, D.L. and E.S.E. Hafez. 2000. Spermatozoa and Seminal Plasma. In:
Reproduction in Farm Animal. 7th ed. Lea and Febringer. Philadelphia. 97 –
109.
Hafez, E. S. (2000). Semen Evaluation in Reproduction in Farm Animal 7th Edition.
Philadelphia: Lea and Febiger.
Hardjosubroto, W. 1994. Aplikasi Pemuliabiakan Ternak di Lapangan. PT. Gramedia
Widiasarana Indonesia. Jakarta.
Hardijanto, Susilowati, S., Hernawati, T., Sardjito, T., Suprayogi, T.W. 2010. Buku Ajar
Inseminasi Buatan. Surabaya. Airlangga University Press, Hal: 20-24.
Hardijanto., S. Susilowati., T. Hernawati., T. Sardjito dan T.W. Suprayogi. 2010. Buku
Ajar Inseminasi Buatan. Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga.
Surabaya. 39-53.
Khairi, F. (2016). Evaluasi Produksi dan Kualitas Semen Sapi Simmental Terhadap
Tingkat Bobot Badan Berbeda. Jurnal Peternakan, 13(2), 54-58.
Manehat, F. X., Dethan, A. A., dan Tahuk, P. K. (2021). Moti litas, Viabilitas,
Abnormalitas Spermatozoa dan ph Semen Sapi Bali dalam Pengencer Sari
Mardiyah, E. (2001). Teknik Pengenceran pada Pembuatan Chilling Semen Sapi.
Makalah Badan Penelitian dan Pengembangan Departemen Pertanian, 1(1), 1-
6.

24
Moradpour, F. (2019). A Review on Animals Semen Characteristic: Fertility,
Reproduction, and Development. Asian Journal of Advances in Agricultural
Research, 10(2), 1-9.
Munarto, R., Permata, E., dan Orlando, G. (2016). Identifikasi Sperma Sapi Normal dan
Abnormal Menggunakan Jaringan Saraf Tiruan Algoritma Backpropagation.
Jurnal Ilmiah Setrum, 5(1), 1-10.
Novita, R., Karyono, T., dan Rasminah. (2019). Kualitas Semen Sapi Brahman pada
Persentase Tris Kuning Telur yang Berbeda. Jurnal Sains Peternakan Indonesia,
14(4), 351-358.

Poernomo, B., M. Mafruchati., Widjiati., E.M. Luqman., E.D. Masithah dan A.T. Mukti.
2005. Penuntun Embriologi. Pustaka Melati. Surabaya. 35-38.
Solihati, N., dan Kune, P. (2009). Pengaruh Jenis Pengencer Terhadap Motilitas dan Daya
Tahan Hidup Spermatozoa Semen Sapi Simental. Jurnal Fakultas Peternakan
Universitas Padjajaran, 1(1), 1-6.
Suharyati, S. dan M. Hartono. 2011. Preservasi dan Kriopreservasi Semen Sapi Limousin
dalam Berbagai Bahan Pengencer. Jurnal
Sunarti, S., Saili, T., dan Nafiu, L. O. (2016). Karakteristik Spermatozoa Sapi Bali setelah
Sexing Menggunakan Metode Kolom Albumin dengan Lama Waktu Sexing
yang Berbeda. Jurnal Ilmu dan Teknologi Peternakan, 3(1), 65-76
Susilawati, T. (2011). Spermatology. Malang: Universitas Brawijaya Press
Susilowati, S., Hardijanto, T. W., Suprayogi, T., Sarjito, dan Hermawati, T. (2010).
Petunjuk Pratikum Inseminasi Buatan. Surabaya: Airlangga University Press
Talib, C., Siregar, A., Budiarti, S., & Dwiyanto, K. (2002). Implementation Of A Breeding
Program For Bali Cattle. Technical Issues At National And Regional Levels. In
'Strategies To Improve Bali Cattle In Eastern Indonesia', ed. by K. Entwistle
and D.R. Lindsay. Aciar Proceedings No. 110: 82-85.
Toelihere, M. R. (1993). Inseminasi buatan pada ternak. Bandung: Angkasa
Widjaya N. 2011. Pengaruh pemberian susu skim dengan pengencer tris kuning telur
terhadap daya tahan hidup spermatozoa sapi pada suhu penyimpanan 5 o C.
Sains Peternakan 9(2):72-76.
Williamson, G., Payne, W., Jagra, I. B., & Darmaja, S. J. (1993). Pengantar Peternakan Di
Daerah Tropis. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.

25
Zulyazaini, Dasrul, Wahyuni, S., Akmal, M., dan Abdullah, M. A. (2016). Karakteristik
Semen dan Komposisi Kimia Plasma Seminaslis Sapi Aceh yang Dipelihara di
BIBD Saree Aceh Besar. Jurnal Agripet, 16(2), 121- 130

26