LAPORAN PRAKTIKUM

MIKROBIOLOGI INDUSTRI

MODUL 1
PENGENALAN ALAT-ALAT MIKROBIOLOGI

Dosen Pengampu:
Evelyn, S.T., M.Sc., M.Eng., Ph.D.
Syelvia Putri Utami, S.T., M. Eng.

Kelompok VII B:
Aditya Atma Della 2107025785
Angel 2107036652
Maria Imelsa Dewi 2107036643

PROGRAM STUDI D-III TEKNOLOGI PULP DAN KERTAS

JURUSAN TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS RIAU
2022
 LEMBAR PENGESAHAN PRAKTIKUM

MIKROBIOLOGI INDUSTRI

PENGENALAN ALAT-ALAT MIKROORGANISME

Kelompok VII B:
Aditya Atma Della 2107025785
Angel 2107036652
Maria Imelsa Dewi 2107036643

Catatan:

Pekanbaru, Desember 2022

Disetujui oleh:
Dosen Praktikum Dosen Praktikum

Evelyn,S.T., M.Sc.,M.Eng.,Ph.D Syelvia Putri Utami, S.T., M.Eng

NIP . 19750314 200112 2 001 NIP. 19840712 201212 2 001

ii
 DAFTAR ISI

LEMBAR PENGESAHAN .................................................................................. ii

DAFTAR ISI ......................................................................................................... iii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ iv
BAB I PENDAHULUAN ................................................................................ 1
1.1 Latar Belakang ...................................................................................... 1
1.2 Tujuan Percobaan .................................................................................. 2
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...................................................................... 3
2.1 Mikrobiologi ..........................................................................................3
2.2 Sterilisasi ..............................................................................................3
2.3 Autoclave ..............................................................................................4
2.4 Batang Penyebar atau Batang L .............................................................5
2.5 Biology Safety Cabinet (BSC) ................................................................6
2.6 Cawan Petri ............................................................................................7
2.7 Colony Counter ......................................................................................7
2.8 Hemasitometer .......................................................................................8
2.9 Hot Plate Magnetic Stirer ......................................................................9
2.10 Inkubator ............................................................................................10
2.11 Jarum Ose ............................................................................................10
2.12 Mikropipet ............................................................................................11
2.13 Mikroskop ............................................................................................12
2.14 Oven .....................................................................................................13
2.15 Penjepit Kayu .......................................................................................14
2.16 Spiritus ...............................................................................................15
2.17 Kaca objek ............................................................................................16
BAB III PENUTUP ...........................................................................................17
3.1 Kesimpulan ..........................................................................................17
3.2 Saran .....................................................................................................18
DAFTAR PUSTAKA
LAMPIRAN A LAPORAN SEMENTARA
LAMPIRAN B DOKUMENTASI

iii
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Autoclave ..........................................................................................5

Gambar 2.2 Batang Penyebar atau Batang L ...................................................... 6
Gambar 2.3 Biology Safety Colony (BSC) .......................................................... 6
Gambar 2.4 Cawan Petri ..................................................................................... 7
Gambar 2.5 Colony Counter ............................................................................... 8
Gambar 2.6 Hemasitometer ................................................................................. 9
Gambar 2.7 Hot Plate Magnetic Strirer .............................................................. 9
Gambar 2.8 Inkubator ........................................................................................ 10
Gambar 2.9 Jarum Ose ...................................................................................... 11
Gambar 2.10 Mikropipet ..................................................................................... 12
Gambar 2.11 Mikroskop ...................................................................................... 13
Gambar 2.12 Oven ............................................................................................... 14
Gambar 2.13 Penjepit Kayu................................................................................. 15
Gambar 2.14 Spiritus ........................................................................................... 16
Gambar 2.15 Kaca Objek .................................................................................... 16

iv
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Mikrobiologi adalah ilmu yang mempelajari semua makhluk mikroskopik
dalam bentuk sel tunggal, multisel maupun aselular seperti bakteri, microfungi,
kapang, microalgae, protozoa dan archaea. Virus merupakan makhluk mikro
aseluler sehingga sering dikaji dalam ilmu mikrobiologi meskipun tidak dapat
sepenuhnya dikatakan sebagai makhluk hidup. Mikrobiologi dimulai sejak
ditemukannya mikroskop dan berkembang menjadi ilmu yang lain dalam
aplikasinya di bidang farmasi, kedokteran, teknik kimia, arkeologi, pertanian,
gizi dan kesehatan serta pangan (sujayadan Amalia, 2016).
Pada saat melakukan praktikum mikrobiologi, perlu diketahui jenis alat yang
akan digunakan saat praktikum, selain itu juga perlu mengetahui prosedur kerjanya,
cara membersihkan dan fungsi dari masing-masing alat tersebut. Alat merupakan
salah satu pendukung yang sangat penting dari keberhasilan suatu pekerjaan di
laboratorium. Dengan begitu untuk memudahkan berlangsungnya praktikum
pengetahuan mengenai penggunaan alat sangat diperlukan untuk keselamatan saat
melakukan penelitian. Alat-alat laboratorium biasanya dapat rusak dan
mengakibatkan bahaya (Adriana, 2016).
Pada dasarnya setiap alat memiliki nama yang menunjukkan kegunaan
alat, prinsip kerja atau proses yang berlangsung ketika alat digunakan. Beberapa
kegunaan alat dapat dikenali berdasarkan namanya. Penamaan alat-alat yang
berfungsi mengukur biasanya diakhiri dengan kata meter seperti thermometer,
hygrometer dan spectrophotometer. Alat-alat pengukur yang disertai dengan
informasi tertulis biasanya diberi tambahan “graph” seperti thermograph dan
barograph. Sterilisasi peralatan yang terbuat dari gelas seperti erlenmeyer, test tube
dan petri dish disterilkan dengan autoclave. Sebelum digunakan, peralatan dicuci
dan disikat dengan detergen kemudian dibilas air tawar, tunggu kering, setelah itu
ditutup rapat dengan alumunium foil dan plastik, sedangkan tabung reaksi dan pipet
ditutup kapas kemudian dibungkus alumunium foil dan plastik (Adriana, 2016).

1
 2

1.2 Tujuan Percobaan

Adapun tujuan dalam melakukan percobaan ini adalah:
1. Untuk mengetahui alat-alat di laboratorium yang digunakan dalam kegiatan
praktikum mikrobiologi.
2. Untuk mengetahui fungsi dari alat-alat di laboratorium yang digunakan dalam
kegiatan praktikum mikrobiologi.
3. Untuk mengetahui prinsip kerja alat-alat di laboratorium yang digunakan
dalam kegiatan praktikum mikrobiologi.
4. Untuk mengetahui manfaat alat-alat di laboratorium yang digunakan dalam
kegiatan praktikum mikrobiologi.
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Mikrobiologi
Mikrobiologi adalah ilmu yang mempelajari semua makhluk mikroskopik
dalam bentuk sel tunggal, multisel, maupun aselular seperti bakteri, microfungi,
kapang, mikroalga, protozoa dan archaea. Virus merupakan makhluk mikro
aseluler sehingga sering dikaji dalam ilmu mikrobiologi meskipun tidak dapat
sepenuhnya dikatakan sebagai makhluk hidup. Mikrobiologi dimulai sejak
ditemukannya mikroskop dan berkembang menjadi ilmu yang lain dalam
aplikasinya di bidang farmasi, kedokteran, teknik kimia, arkeologi, pertanian,
gizi dan kesehatan serta pangan (Rovianti et al., 2020).

2.2 Sterilisasi
Sterilisasi dalam mikrobiologi merupakan suatu proses untuk mematikan
semua organisme yang terdapat pada atau di dalam suatu benda. Sebagai contoh,
hal-hal yang dilakukan ketika pertama kalinya melakukan pemindahan biakan
bakteri secara aseptik sesungguhnya telah menggunakan salah satu cara sterilisasi
yaitu dengan cara pembakaran artinya pada bahan atau peralatan yang akan
digunakan harus bebas dari mikroorganisme yang tidak diinginkan yang dapat
merusak media atau koloni suatu mikroorganisme yang ditumbuhkan. Setelah
mengetahui dan memahami pentingnya bekerja secara aseptik, perlu diketahui pula
peralatan laboratorium dan bahan yang merupakan unsur penting yang harus ada
dalam praktikum mikrobiologi (Fibriana dan Amalia, 2016).
Menurut Sujaya (2016), sterilisasi merupakan suatu proses membebaskan
peralatan atau bahan dari mikroorganisme yang tidak dikehendaki. Untuk mencapai
tujuan ini, ada beberapa macam sterilisasi yang dapat dipilih dan disesuaikan
dengan sifat bahan yang akan disterilkan. Cara-cara yang umum dilakukan adalah:
a. Sterilisasi secara fisik yaitu sterilisasi dengan menggunakan pemanasan,
penggunaan sinar UV, sinar X dan sinar-sinar yang panjang gelombangnya
pendek.
b. Sterilisasi secara kimia yaitu sterilisasi dengan menggunakan bahan-bahan
kimia, seperti alkohol, desinfektan, larutan formalin dan sebagainya.

3
 4

c. Sterilisasi mekanik yaitu sterilisasi dengan menggunakan filter atau saringan

Menurut Sujaya (2016), sterilisasi dapat juga dilakukan dengan cara
pemanasan. Berikut adalah berbagai macam sterilisasi dengan cara pemanasan.
a. Pemanasan dengan udara kering atau udara basah adalah cara yang sangat
cocok untuk mensterilkan alat-alat atau bahan-bahan yang tahan panas.
Dalam cara ini, temperatur yang dipakai adalah 170℃ dan dilakukan selama
1 jam.
b. Tindalisasi adalah cara yang dipakai untuk mensterilkan bahan-bahan yang
tidak tahan suhu tinggi. Dalam cara ini bahan dan alat dipanaskan selama 30
menit pada suhu 100℃ dan diulang sebanyak 3 kali berturut-turut dengan
selang waktu 1 hari. Bahan dan alat disimpan pada suhu kamar pada saat tidak
dipanaskan.
c. Pasteurisasi adalah cara yang dipakai untuk mensterilkan bahan makanan
yang akan mengalami denaturasi pada suhu tinggi. Dengan cara ini alat dan
bahan dipanaskan pada suhu 60-80℃ selama satu jam sebanyak 3 kali
berturut-turut dengan selang waktu 1 hari.
d. Sterilisasi dengan nyala api langsung adalah cara yang sangat cocok untuk
mensterilkan jarum inokulasi.
e. Sterilisasi dengan uap panas yang bertekanan adalah cara yang umum dipakai
untuk mensterilkan alat dan bahan yang tahan panas tinggi dan tekanan. Alat
yang dipakai adalah autoclave yang dapat mencapai suhu 121℃ dan tekanan
15 lbs.

2.3 Autoclave
Autoclave merupakan alat yang digunakan untuk mensterilkan bahan dengan
cara mengatur suhu dan uap yang bertekanan tinggi. Tekanan yang digunakan
umumnya 2 atm atau 15 Psi dalam suhu 250oF. Maka tekanan yang digunakan
dalam permukaan benda adalah 15 pon tiap inchi. Siklus yang akan menjamin
sterilisasi dalam autoclave efektif adalah dilakukan 10 menit dalam suhu 126oC, 15
menit dalam 121oC dan 25 menit dalam suhu 115oC (Adriana, 2016). Autoclave
digunakan dengan cara diisi sampai batas yang ditentukan kemudian dimasukkan
alat atau bahan yang akan disterilkan ke dalam kerajang khusus. Setelah itu
autoclave ditutup dan pengamannya dikencangkan, dinyalakan autoclave dan
 5

diatur suhu serta waktu sterilisasi. Setelah proses sterilisasi, katup pengaman dibuka
untuk menurunkan tekanan, autoclave dibuka dan alat atau bahan yang telah steril
dikeluarkan (Yusmaniar et al., 2017).
Perawatan autoclave dapat dilakukan dengan pemeriksaan secara berkala.
Perawatan harian dilakukan dengan menjaga kebersihan alat di dalam maupun di
luar serta area di sekitar alat, kuras air dan juga tiriskan filter udara, periksa semua
pengukur dan katup untuk memastikan berfungsi dengan baik. Perawatan bulanan
dengan cara memeriksa segel kipas untuk mendeteksi kebocoran pada alat,
membersihkan alur segel pintu serta permukaan pintu, menghilangkan sisa minyak
dengan menyapu bagian dalam autoclave dan membersihkan strainer pada
autoclave steam. Annual maintenance dengan diperiksanya sabuk penggerak
belakang serta kalibrasi kontrol suhu dan grafik kemudian dibersihkan probe
penginderaan perekam temperasi dan ganti katup pengaman (Maulana dan
Simanjuntak, 2021). Adapun gambar autoclave dapat dilihat pada Gambar 2.1 di
bawah ini.

Gambar 2.1 Autoclave (Luklukyah et al., 2019)

2.4 Batang Penyebar atau Batang L

Batang penyebar atau batang L digunakan untuk menyebarkan biakan bakteri
atau cairan yang terdapat diatas wadah pembiakan. Batang penyebar ini beberapa
bentuk seperti bentuk L atau segitiga. Batang L dapat dibuat sendiri dengan
memanasi batang gelas lurus yang ditekuk menjadi bentuk L. Sudut lekukan yang
besar pada batang yang berbentuk segitiga dapat mempengaruhi fungsinya.
Semakin besar lekukan maka akan sulit meratakan cairan sampai ke sudut cawan
 6

petri (Yusmaniar et al., 2017). Adapun gambar batang L dapat dilihat pada Gambar
2.2 di bawah ini.

Gambar 2.2 Batang L (Luklukyah et al., 2019)

2.5 Biology Safety Cabinet (BSC)

Biology Safety Cabinet (BSC) dapat disebut sebagai Laminar Air Flow
(LAF). BSC merupakan tempat kerja yang terbebas dari mikroorganisme. Hal ini
berarti udara dalam tempat tersebut steril. Maka BSC ini cocok untuk menstransfer
atau memanipulasi biakan. BSC dapat menyaring partikel udara termasuk
mikroorganisme. Dalam penggunaan alat ini perlu diperhatikan beberapa hal
diantaranya yaitu tidak menumpuk alat atau media di tempat area kerja karena dapat
menghalangi aliran udara, tidak meletakkan spiritus terlalu dekat dengan filter dan
bersihkan BSC setelah selesai serta tidak meninggalkan sampah atau bahan
praktikum di dalam BSC. Perbedaan BSC dan LAF secara spesifik yaitu pada LAF
udara kotor masuk melalui bagian alat dan keluar melalui bagian depan sedangkan
BSC udara kotornya masuk melalui bagian depan dan keluar melalui bagian atas alat
(Artanti, 2018). Adapun gambar BSC dapat dilihat pada Gambar 2.3 di bawah ini.

Gambar 2.3 Biology Safety Cabinet (Telambanua, 2017)

2.6 Cawan Petri

Cawan petri berfungsi untuk membiakkan (kultivasi) mikroorganisme.
 7

Medium dapat dituang ke cawan bagian bawah dan cawan bagian atas sebagai
penutup. Cawan petri tersedia dalam berbagai macam ukuran. Diameter cawan
yang biasa adalah berdiameter 15 cm dan dapat menampung media sebanyak 15-
20 ml. Sedangkan cawan berdiameter 9 cm kira-kira cukup diisi media sebanyak
10 ml (Roviati et al., 2020).
Terdapat dua jenis cawan petri yaitu cawan yang tidak berventilasi dan
berventilasi. Cawan yang berventilasi merupakan cawan yang paling umum
digunakan yang digunakan untuk pembiakan anaerob. Cawan petri disposable
terbuat dari plastik dan memiliki kelebihan yaitu cawan petri disposable tidak
beresiko pecah dan aman (Artanti, 2018).
Cawan petri dapat disterilkan dengan dua cara yaitu autoclave dan oven. Cara
sterilisasi dengan autoclave adalah bungkus cawan petri dengan kertas atau
aluminium foil dan dilakukan pengecekan volume air pada autoclave. Pada saat
volume air pada autoclave telah mencapai batas, maka tutup autoclave dan
kencangkan pengaman. Atur timer 15 menit pada suhu 121oC. Saat alarm berbunyi
buka sedikit autoclave untuk menurunkan tekanan. Pada saat tekanannya telah
menurun buka pengaman dan keluarkan isinya dengan hati-hati (Auliyah, 2020).
Adapun gambar cawan petri dapat dilihat pada Gambar 2.4 di bawah ini.

Gambar 2.4 Cawan Petri (Telambanua, 2017)

2.7 Colony Counter

Colony counter adalah alat yang digunakan untuk menghitung jumlah koloni
bakteri. Alat ini dilengkapi dengan kaca pembesar dan cahaya pada latar belakang
yang berfungsi untuk memperjelas perlihatan koloni yang telah diinkubasi, selain
itu, terdapat juga pulpen yang dilengkapi sensor yang berfungsi untuk membantu
perhitungan koloni dengan cara koloni yang akan dihitung secara otomatis ditekan
 8

(Yusmaniar et al., 2017).

Penggunaan alat dilakukan dengan cara dihubungkan dengan sumber tenaga
listrik dan aktifkan alatn dengan menekan tombol on. Setelah itu diatur
keseimbangan kaca pembesar dan diletakkan cawan petri yang berisi koloni dengan
posisi terbalik tepat di bawah kaca pembesar.Tandai koloni dengan mengarahkan
pulpen. Digunakan kaca pembesar untuk memperjelas koloni yangdihitung. Direset
terlebih dahulu jumlah koloni yang dihitung lalu dimatikan alat dengan menekan
off (Salsabilla, 2019). Adapun gambar colony counter dapat dilihat pada Gambar
2.5 di bawah ini.

Gambar 2.5 Colony Counter (Telambanua, 2017)

2.8 Hemasitometer
Hemasitometer berbentuk ruang kaca atau gelas dengan sisi yang ditinggikan
dan memiliki penutup kecil tembus cahaya tepat 0,1 mm lantai ruang.
Hemasitometer memiliki berbagai jenis desain salah satu nya adalah improved
newbauer yang terdiri dari bagian tengah yang dikelilingi oleh alur yang berukuran
1 mm dan alur melintang membagi menjadi 2 buah counting chamber.
Hemasitometer berfungsi untuk melakukan perhitungan sel. Kelebihan perhitungan
sel dalam menggunakan hemasitometer adalah dapat menghitung jumlah sel yang
hidup dan sel yang mati. Perhitungan sel dengan hemasitometer bergantung pada
volume coverslip. Selain itu morfologi sel dapat diamati dan dievaluasi serta dapat
mendeteksi kontaminasi (Angelika et al., 2017). Adapun gambar hemasitometer
dapat dilihat pada Gambar 2.6 di bawah ini.
 9

Gambar 2.6 Hemasitometer (Telambanua, 2017)

2.9 Hot Plate Magnetic Stirer

Hot plate magnetic stirer merupakan alat untuk memanaskan cairan atau
untuk menghomogenkan suatu cairan dengan batang magnet pengaduk. Plate yang
terdapat dalam alat ini dapat dipanaskan, sehingga mampu mempercepat proses
homogenisasi. Proses pengadukan menggunakan alat yang disebut stir bar. Cara
kerja dari hot plate magnetic stirer yaitu dengan dihubungkan terlebih dahulu
instrumen dengan sumber listrik. Kemudian tekan tombol power (ON/OFF), lalu
suhu diatur sesuai yang diinginkan. Setelah itu wadah (beaker glass) yang berisi air
diletakkan di atas lempengan pemanas. Kemudian stirer dimasukkan ke dalam
wadah larutan yang akan diaduk. Lalu tombol magnetic stirer diatur sampai
kecepatan putaran yang diinginkan. Setelah selesai, putar tombol sampai posisi off
dan putuskan sambungan listrik (Pradana, 2016). Adapun gambar hot plate
magnetic stirer dapat dilihat pada Gambar 2.7 di bawah ini.

Gambar 2.7 Hot Plate Magnetic Stirer (Telambanua, 2017)

 10

2.10 Inkubator
Inkubator merupakan alat yang digunakan untuk menginkubasi mikroba pada
suhu tertentu. Inkubator digunakan untuk menumbuhkan bakteri, jamur dan
menyimpan biakan murni pada suhu rendah. Inkubator memiliki sekat kaca antara
bagian dalam inkubator dan pintu yang fungsinya untuk melihat biakan mikroba
tanpa membuka sekat dalam, sehingga kondisi dalam inkubator tetap terjaga
(Yusmaniar et al., 2017). Adapun gambar inkubator dapat dilihat pada Gambar 2.8
di bawah ini.

Gambar 2.8 Inkubator (Telambanua, 2017)

2.11 Jarum Ose

Jarum ose adalah batang kaca yang ujungnya terdapat kawat panjang. Ada
yang berbentuk lurus dan ada pula yang berbentuk bulat. Berfungsi untuk
memindahkan atau mengambil koloni suatu mikroba. Jarum ose yang berbentuk bulat
digunakan untuk mengambil atau memidahkan sampel dari suatu medium ke medium
lainnya. Sedangkan jarum ose lurus digunakan untuk mengambil atau memindahkan
sampel dari suatu medium ke medium lainnya dengan cara ditusukkan. Prinsip kerjanya
yaitu ose disentuhkan pada bagian mikroba kemudian digosokan pada kaca preparat
untuk diamati. Bentuk ujung jarum dapat berbentuk lingkaran (loop) dan disebut ose
atau inoculating loop/transfer loop dan yang berbentuk lurus disebut inoculating
needle/transfer needle. (Fatoni, 2015). Adapun gambar jarum ose dapat dilihat pada
Gambar 2.9 di bawah ini.
 11

Gambar 2.9 Jarum Ose (Telambanua, 2017)

2.12 Mikropipet
Mikropipet adalah alat untuk memindahkan cairan yang bervolume cukup
kecil biasanya kurang dari 1000 µl. Banyak pilihan kapasitas dalam mikropipet
misalnya mikropipet yang dapat diatur volume pengambilannya (adjustable volume
pipette) antara 1 µl sampai 20 µl. Mikropipet yang tidak bisa diatur volumenya
hanya tersedia satu pilihan volume (fixed volume pipette) misalnya mikropipet 5 µl.
Dalam penggunaannya mikropipet memerlukan tip. Cara penggunaan dari
mikropipet yaitu yang pertama tekan tombol dengan thumb knob untuk
mengonfirmasikan pipet tersebut. Diarahkan skala sesuai dengan kebutuhan volume
yang diperlukan. Dimasukkan ujung tip pada mikropipet atau ujung mikropipet
nozzle menyesuaikan volume tip (biru 1000 µl, 500 µl, 100 µl dan menguning 1 µl).
Tekan tombol thumb knob untuk meletakkan ujung tip secara vertikal dalam larutan
2-3 mm. Bersihkan ujung tip dari sisa larutan dengan menggunakan tisu dan
pindahkan larutan tersebut pada wadah yang telah disiapkan (Kresianim et al.,
2020).
Terdapat dua jenis mikropipet yaitu fix volume (volume tetap) yang dirancang
oleh pabrikan untuk mengeluarkan volume cairan satu kapasitas nominal misalnya
100 µl. Jenis mikropipet yang kedua yaitu variabel volume yang dirancang oleh
pabrikan untuk mengeluarkan volume yang dapat dipilih oleh pengguna dalam satu
kapasitas nominal misalnya 10-100 µl. Mikropipet juga dibedakan atas dua tipe
yaitu type A (air displacement pipettes) yang terdapat kantung udara (dead air
volume) di antara kepala piston dan cairan di dalam silinder ketika terisi cairan. Tipe
yang kedua yaitu type D (positive/direct displacement) dengan kepala piston
langsung mengenai cairan (Kresianim et al., 2020). Adapun gambar mikropipet
dapat dilihat pada Gambar 2.10 di bawah ini.
 12

Gambar 2.10 Mikropipet (Luklukyah et al., 2019)

2.13 Mikroskop
Mikroskop yaitu alat bantu yang digunakan untuk melihat benda-benda atau
jasad renik yang tidak dapat terlihat secara kasat mata. Mikroskop terdiri dari
beberapa bagian yang masing-masing bagiannya memiliki fungsi. Mikroskop pada
prinsipnya terdiri dari dua lensa cembung yaitu sebagai lensa objektif (dekat dengan
mata) dan lensa okuler (dekat dengan benda). Baik objektif maupun okuler dirancang
untuk perbesaran yang berbeda. Lensa objektif biasanya dipasang pada roda berputar
yang disebut gagang putar. Setiap lensa objektif dapat diputar ke tempat yang sesuai
dengan perbesaran yang diinginkan. Sistem lensa objektif memberikan perbesaran
mula-mula dan menghasilkan bayangan nyata yang kemudian diproyeksikan ke
atas lensa okuler. Bayangan nyata tadi diperbesar oleh okuler untuk menghasilkan
bayangan maya yang dapat dilihat (Prasetyaningrum, 2017).
Ada dua jenis mikroskop berdasarkan pada kenampakan objek yang diamati
yaitu mikroskop dua dimensi (mikroskop cahaya) dan mikroskop tiga dimensi
(mikroskop stereo). Berdasarkan sumber cahayanya, mikroskop dibedakan menjadi
mikroskop cahaya dan mikroskop elektron. Pada umumnya mata tidak mampu
membedakan benda dengan diameter lebih kecil dari 0,1 mm maka jika ingin
melihat morfologi sel mikroorganisme diperlukan bantuan mikroskop. Mikroskop
cahaya umumnya memiliki perbesaran dari 40x sampai 1000x sehingga sesuai
untuk melihat morfologi sel mikroorganisme. Mikroskop stereo berfungsi untuk
melihat objek yang membutuhkan perbesaran tidak terlalu besar. Di laboratorium
mikrobiologi, mikroskop stereo biasanya digunakan untuk menghitung atau
mengamati secara detail bentuk koloni bakteri atau jamur yang tumbuh pada cawan
petri. Perbesaran maksimal yang mampu dilihat adalah 40x (Prasetyaningrum,
2017). Adapun gambar mikroskop dapat dilihat pada Gambar 2.11 di bawah ini.
 13

Gambar 2.11 Mikroskop ( Telambanua, 2017)

2.14 Oven
Oven adalah bagian dari alat yang digunakan untuk sterilisasi dengan metode
panas kering. Suhu sterilisasi dengan oven kira-kira 160℃ selama 60 menit.
Sterilasasi dengan oven digunakan untuk alat, bahan atau media yang tahan
terhadap pemanasan tinggi. Oven adalah alat yang digunakan untuk sterilisasi alat
dan bahan dengan menggunakan udara kering. Oven digunakan untuk mensterilkan
alat-alat gelas seperti erlenmeyer, cawan petri, tabung reaksi dan gelas lainnya.
Lamanya sterilisasi tergantung pada jumlah alat disterilkan dan ketahanan alat
terhadap panas. Bahan-bahan seperti kapas, kain dan kertas juga dapat disterilkan
dalam oven tetapi dalam temperatur tertentu. Pada umumnya temperatur yang
digunakan pada sterilisasi cara kering adalah sekitar 140-170°C selama paling
sedikit 2 jam (Yusmaniar et al., 2017).
Prinsip kerja dari oven yaitu hubungkan dengan sumber listrik. Masukkan alat
yang akan dikeringkan dan atur dengan rapi lalu tutup pintu dengan rapat. Hidupkan
alat dengan menekan tombol on kemudian lampu pilot akan menyala (merah dan
kuning). Atur temperatur suhu dan waktu yang diinginkan. Bila suhu 170°C waktu
diatur selama 1 jam. Bila suhu 160°C waktu diatur selama 2 jam. Bila suhu 150°C
waktu diatur selama 2,5 jam. Bila suhu 140°C waktu diatur selama 3 jam. Bila
waktu yang diatur telah selesai, pengatur waktu secara otomatis kembali ke nol.
Biarkan dingin lalu keluarkan bahan dan alat yang disterilkan atau dikeringkan
(Yusmaniar et al., 2017).
Oven yang baik adalah oven yang selalu dirawat. Sebelum oven digunakan
bersihkan semua aksesoris dan rak tatakan yang ada di dalamnya. Selalu pastikan
steker oven sudah dicabut dan oven sudah dingin sebelum dibersihkan. Buka pintu
 14

oven dan bagian dalam dibersihkan dengan lap lembut dalam air panas atau
detergen. Zat abarsif jangan digunakan untuk membersihkan oven. Jangan
mengelap elemen pemanas. Bagian luar dapat dibersihkan dengan lap basah. Untuk
menghindari hal-hal yang tidak diinginkan tidak diperbolehkan menggunakan alat
gelas untuk dimasukkan ke dalam oven. Diharapkan ada jarak minimal 1 antara
bagian atas dan bagian elemen pemanas. Jangan sekali-sekali menggunakan oven
dalam keadaan pintu terbuka. Hindari seringnya membuka pintu oven saat sedang
digunakan karena hal ini menimbulkan panas dalam oven berkurang. Selalu
gunakan gegep untuk mengambil peralatan dari dalam oven. Hentikan pemakaian
oven bila terlihat asap pada kabel listrik dan segera cabut steker dari stop kontak
(Yusmaniar et al., 2017). Adapun gambar oven dapat dilihat pada Gambar 2.12 di
bawah ini.

Gambar 2.12 Oven (Telambanua, 2017)

2.15 Penjepit Kayu atau Penjepit Tabung Reaksi

Penjepit tabung reaksi terbuat dari kayu yang dilengkapi oleh pegas dan
memiliki lubang sebagai tempat tabung reaksi. Panjang penjepit tabung reaksi
sekitar 180 mm. Alat ini digunakan untuk memegang tabung reaksi pada saat
mereaksikan zat atau memanaskan tabung reaksi diatas pembakar spiritus.
Diameter tabung reaksi yang dapat dipegang menggunakan penjepit berkisar antara
10-25 mm. Cara penggunaan penjepit kayu dengan bagian penjepit tengah ditekan
sehingga kepala penjepit terbuka dan siap untuk menjepit tabung reaksi. Ketika
memasang tabung reaksi harus dilakukan dengan hati-hati dan pastikan tabung telah
terjepit dengan erat. Saat memanaskan tabung reaksi, dipegang ujung penjepit yang
tidak ada tabungnya. Tabung reaksi diletakkan diatas spiritus dengan posisi miring
dengan mulut tabung reaksi diarahkan menjauhi tubuh (Fatoni, 2015).
Hal yang perlu diperhatikan sebelum digunakan adalah diperiksa dan
 15

dibersihkan bagian pegasnya. Jika pegas telah kendor diganti dengan penjepit lain.
Penjepit tabung dipilih yang kondisi pegangan kayu masih baik. Saat digunakan
harus memperhatikan tabung reaksi agar tabung tidak mudah pecah. Penjepit
tabung reaksi tidak boleh terlalu dekat dengan pembakar spiritus karena kayu
mudah terbakar. Jika sudah digunakan penjepit tabung reaksi dicuci menggunakan
air kemudian dikeringkan. Penjepit tabung disimpan di tempat yang kering dan
tidak lembap untuk menghindari tumbuhnya jamur pada kayu (Fatoni, 2015).
Adapun gambar penjepit kayu dapat dilihat pada Gambar 2.13 di bawah ini.

Gambar 2.13 Penjepit Kayu (Telambanua, 2017)

2.16 Spiritus
Spiritus adalah alat yang berfungsi untuk sterilisasi dengan pemanasan.
Pembakar spiritus dibuat dari bahan kaca. Di dalam pembakar spiritus dilengkapi
dengan bahan bakar spiritus, sumbu dan tutup. Pembakar spiritus digunakan
untuk memanaskan larutan. Cara menggunakan pembakar spiritus dalam
pemanasan larutan yaitu menyalakan pembakar spiritus dengan korek api kemudian
meletakkan pembakar spiritus di bawah kaki tiga dan kasa kawat. Api pembakar
spiritus harus terletak tepat di bawah asbes yang terdapat pada tengah kasa kawat.
Setelah selesai digunakan api dimatikan dengan cara menutup pembakar spriritus
dengan penutupnya. Terdapat berbagai hal yang perlu diperhatikan sebelum, saat
dan setelah menggunakan spiritus. Sebelum digunakan, ketersediaan spiritus dalam
pembakar spiritus harus dicek terlebih dahulu. Dinding luar pembakar spiritus
dibersihkan menggunakan tisu. Api tidak boleh dimatikan dengan cara ditiup.
Sumbu pembakar spiritus harus menutup mulut pembakar spiritus secara sempurna
agar api tidak merembet ke dalam pembakar spiritus dan pembakar spiritus
diletakkan di bawah asbes pada kasa kawat. Kemudian setelah digunakan,
pembakar spiritus disimpan di tempat yang bersih dan kering (Fatoni, 2015).
Adapun gambar spiritus dapat dilihat pada Gambar 2.14 di bawah ini.
 16

Gambar 2.14 Spiritus (Telambanua, 2017)

2.17 Kaca Objek

Kaca objek merupakan wadah yang digunakan untuk memeriksa
mikroorganisme atau sampel mikrobiologi (berukuran kecil) baik pemeriksaan
menggunakan mikroskop maupun pemeriksaan gram atau tes biokimia. Cover glass
atau kaca penutup merupakan kaca tipis transparan yang digunakan untuk
melindungi lensa objektif mikroskop dari kontak langsung dengan spesimen. Kaca
penutup dapat menempel pada kaca preparat sehingga menutup spesimen, menjaga
spesimen dari debu, penghambat dehidrasi dan oksidasi spesimen. Spesimen padat
ditekan menjadi datar sedangkan sampel cair dibentuk menjadi lapisan datar. Hal
tersebut dapat membantu fokus pada mikroskop resolusi tinggi (Wulandari et al.,
2020). Adapun gambar kaca objek dapat dilihat pada Gambar 2.15 di bawah ini.

Gambar 2.15 Kaca Objek (Luklukyah et al., 2017)

 BAB III
KESIMPULAN DAN SARAN

3.1 Kesimpulan
Adapun kesimpulan yang diperoleh dari percobaan ini sebagai berikut:
1. Dalam melakukan praktikum mikrobiologi digunakan beberapa diantaranya
autoclave, batang penyebar, Biology Safety Cabinet (BSC), cawan petri,
colonycounter, hemasitometer, hot plate, inkubator, jarum ose, mikropipet,
mikroskop, oven, penjepit kayu, spiritus dan kaca objek.
2. Fungsi dari BSC, autoclave, oven dan spiritus adalah untuk mensterilkan
alat ataupun bahan. Cawan petri berfungsi sebagai wadah
perkembangbiakan mikroba. Hemasitometer berfungsi untuk menghitung
sel. Colony counter untuk menghitung jumlah koloni. Inkubator untuk
menginkubasi mikroba. Jarum ose untuk memindahkan mikroba.
Mikropipet untuk memindahkan cairan. Mikroskop dan kaca objek untuk
mengamati sel yang berukuran kecil. Penjepit kayu untuk memegang tabung
reaksi. Batang penyebar untuk meratakan cairan.
3. Prinsip kerja autoclave dengan memanfaatkan tekanan udara dalam
mensterilkan alat. Oven dan spiritus memanfaatkan sumber energi panas
untuk sterilsasi. BSC menggunakan sinar UV dalam mensterilkan alat.
Jarum ose harus dipijarkan terlebih dahulu sebelum digunakan. Pada tip
mikropipet harus di sterilkan terlebih dahulu. Mikroskop dengan
memanfaatkan sumber cahaya untuk melihat sel.
4. Manfaat dari BSC, autoclave, oven dan spiritus adalah alat dan bahan yang
digunakan terbebas dari bakteri. Hemasitometer dan colony counter
manfaatnya untuk mengetahui jumlah sel atau koloni yang terdapat pada
mikroba. Mikroskop dan kaca objek bermanfaat untuk mengetahui bentuk
dari mikroba. Inkubator bermanfaat untuk memberikan suhu dan
kelembaban yang optimal dalam perkembangbiakan mikroba.

17
 18

3.2 Saran
Praktikkan diharapkan memahami prinsip kerja dari masing-masing alat
pada percobaan ini supaya tidak terjadi kesalahan dan kecelakaan kerja. Masing-
masing anggota kelompok diharapkan andil dalam pemakaian alat-alat
mikrobiologi supaya lebih mahir kedepannya dalam pemakaiannya. Diharapkan
menggunakan alat pelindung diri yang lengkap saat melakukan percobaan.
Dalam mensterilkan alat menggunakan BSC diharapkan untuk tidak
mendekati alat tersebut dikarenakan sinar UV yang tidak baik bagi tubuh. Jangan
menggunakan tangan saat mengambil tip dari mikropipet. Mengambil cairan
menggunakan mikropipet dalam keadaan sedikit miring. Saat mencuci kaca objek
perlu dilakukan dengan hati-hati karena kaca penutup dari kaca objek sangat tipis
sehingga rentan untuk pecah.
 DAFTAR PUSTAKA

Adriana, R. (2016). Pengenalan Alat-Alat Laboratorium Mikrobiologi Untuk

Mengatasi Keselamatan Kerja dan Keberhasilan Praktikum. Jurnal
Mengatasi Mikrobiologi, 1(1) : 1-22.
Angelika, Joseph, Islami, Agasi dan Zakiah. (2017). Kuantifikasi Sel dengan
Hemasitometer. Bandung: Institut Teknologi Bandung.
Artanti, D. (2018). Modul Praktikum Instrumentasi Mikro. Surabaya:
Universitas Muhammadiyah.
Auliyah, D. D. (2020). Sterilisasi Alat dan Bahan. Semarang: Universitas Islam
Negeri Walisongo.
Fatoni, I. (2015). Panduan Teknis Penggunaan Alat dan Bahan Praktikum. Jakarta:
Sunda Kelapa Pustaka.
Fibriana, F. dan Amalia, A. V. (2016). Potensi Kitchen Microbiology Untuk
Meningkatkan Keterampilan Teknik Hands-On dalam Pembelajaran
Mikrobiologi. Jurnal Unnes Science Education, 5(2) : 1210-1216.
Kresiani, R. H., Hafid, Mahendra F. (2020). Panduan Kalibrasi Mikropipet.
Tangerang: Laboratorium Standar Nasional Satuan Ukuran BSN.
Lukluyah, Z. (2019). Panduan Praktikum Mikrobiologi Dasar. Magelang: Fakultas
Pertanian Universitas Tidar.
Maulana, D. A. dan Simanjuntak, R. (2021). Sistem Perawatan Mesin Autoclave.
Jurnal Teknik Mesin, 4(1) : 2656-9434.
Pradana, A. N. (2016). Stirer Magnetic Hot Plate Dilengkapi Sensor Infrared.
Surabaya: Politeknik Kesehatan Kementrian Surabaya.
Prasetyaningrum, N. (2017). Penggunaan Mikroskop Olympus. Malang:
Universitas Brawijaya.
Rovianti, Nurjanah, Sahrir dan Umami. (2020). Panduan Praktikum Mikrobiologi
Berbasis Argumentasi. Cirebon: Insititut Agama Islam Negeri Syekh Nurjati.
Salsabilla, K. N. (2019). Panduan Alat Colony Counter. Surabaya: Universitas
Negeri Surabaya.
Sujaya, N. (2016). Penuntun Praktikum Mikrobiologi. Bali: Universitas Udayana.

Telaumbanua, A. (2017) Pengenalan Alat-Alat Laboratorium. Kendari: Fakultas

Pertanian Universitas Halu.
Wulandari, A. (2020). Praktikum Mikrobiologi Farmasi. Jakarta Selatan: Institut
Sains dan Teknologi Nasional.
Yusmaniar, Wadyah dan Nida, K. (2017). Mikrobiologi dan Parasitologi.
Jakarta Selatan: Kemeterian Kesehatan Republik Indonesia.
 LAMPIRAN A
LAPORAN SEMENTARA
 LAMPIRAN B
DOKUMENTASI

Gambar B.1 Biologycal Safety Gambar B.2 Inkubator

Cabinet (BSC)

Gambar B.1 Spiritus Gambar B.1 Cawan Petri

Gambar B.1 Colony Counter Gambar B.6 Batang L

Gambar B.7 Hemasitometer Gambar B.8 Jarum Ose

Gambar B.9 Mikroskop Gambar B.10 Penjepit Kayu

Gambar B.11 Mikroskop Gambar B.12 Tip

Gambar B.13 Oven Gambar B.14 Hot Plate

Gambar B.15 Autoclave