Machine Translated by Google
Psikofarmakologi (2010) 210:533–545 DOI
10.1007/s00213-010-1855-2
INVESTIGASI ASLI
Studi efek dosis Gelsemium sempervirens dalam pengenceran tinggi
terhadap respons terkait kecemasan pada tikus
Paolo Magnani & Anita Conforti & Elisabetta Zanolin &
Marta Marzotto & Paolo Bellavite
Diterima: 10 Februari 2010 / Diterima: 26 Maret 2010 / Diterbitkan online: 20 April 2010 # Penulis
2010. Artikel ini diterbitkan dengan akses terbuka di Springerlink.com
Abstrak
Pendahuluan Penelitian ini dirancang untuk menyelidiki aktivitas
yang diduga mirip ansiolitik dari Gelsemium sempervirens (G.
sempervirens) dosis sangat rendah, yang diproduksi menurut
farmakope homeopati.
Metode Lima pengenceran centesimal (C) yang berbeda dari G.
sempervirens (4C, 5C, 7C, 9C dan 30C), obat buspirone (5 mg/kg)
dan zat pelarut dikirimkan secara intraperitoneal ke kelompok
tikus ICR-CD1 selama a jangka waktu 9 hari.
Efek perilaku dinilai dalam tes lapangan terbuka (OF) dan terang-
gelap (LD) secara buta dan acak.
Hasil Kebanyakan pengenceran G. sempervirens tidak
mempengaruhi total jarak yang ditempuh dalam OF (hanya 5C
yang memiliki efek stimulasi yang hampir signifikan pada parameter
ini), menunjukkan bahwa obat tersebut tidak menyebabkan efek
sedasi atau perubahan aktivitas alat gerak yang tidak spesifik.
Dalam pengujian yang sama, buspirone menyebabkan sedikit
penurunan penggerak namun signifikan secara statistik. G.
sempervirens menunjukkan sedikit aktivitas stimulasi pada waktu
yang dihabiskan dan jarak perjalanan di zona tengah OF, namun
efek ini tidak signifikan secara statistik. Dalam uji LD, G.
sempervirens meningkatkan % waktu yang dihabiskan di
kompartemen ringan, sebuah indikator aktivitas mirip ansiolitik,
dengan efek yang signifikan secara statistik menggunakan
pengenceran 5C, 9C, dan 30C. Efek ini sebanding dengan
buspirone. Jumlah transisi antar kompartemen tes LD sangat signifikan memberikan respon yang cukup terhadap pengobatan lini pertama
P. Magnani : M. Marzotto : P. Bellavite (*)
Dipartimento di Patologia, Università di Verona,
Strada Le Grazie,
37134 Verona, Italia
email: paolo.bellavite@univr.it
A. Conforti : E. Zanolin
Departemen Kedokteran dan Kesehatan Masyarakat, Universitas
Verona, Verona, Italia
meningkat dengan pengenceran G. sempervirens 5C, 9C dan 30C.
Kesimpulan Pola keseluruhan hasil memberikan bukti bahwa G.
sempervirens bekerja pada reaktivitas emosional tikus, dan bahwa
efek anxiolytic-nya terlihat jelas, dengan hubungan non-linear,
bahkan pada pengenceran tinggi.
Kata Kunci Gelsemium sempervirens. Model kecemasan hewan.
Tes lapangan terbuka. Tes terang-gelap. Dosis sangat rendah.
Pengobatan komplementer. Gelsemin. Nanofarmakologi
Perkenalan
Kecemasan dan gangguan perilaku memiliki prevalensi yang relatif
tinggi di masyarakat modern dan menghabiskan banyak sumber
daya keuangan. Obat penenang atau ansiolitik yang paling terkenal
adalah golongan benzodiazepin, yang bekerja dengan memodulasi
reseptor GABAergik, namun banyak obat lain yang diketahui,
termasuk buspirone dan obat lain yang termasuk dalam golongan
senyawa azaspirodecanedione, yang bertindak sebagai agonis
reseptor serotoninergik. (5-HT1A). Namun, penggunaan klinis obat-
obatan tersebut bukannya tanpa kelemahan, terutama karena risiko
efek samping seperti gangguan psikomotorik atau potensiasi obat
depresan sentral lainnya (Lader 2008; Cloos dan Ferreira 2009).
Terlebih lagi, 25% pasien dengan gangguan kecemasan tidak
(Schosser dan Kasper 2009). Benzodiazepin tidak direkomendasikan
untuk pengobatan jangka panjang gangguan kecemasan umum,
karena terkait dengan perkembangan toleransi, perubahan kognitif
dan memori, ketergantungan fisik dan reaksi penarikan pada
penghentian (Allgulander et al. 2003). Pengobatan alami yang
memiliki kemanjuran yang sama dengan obat konvensional, namun
dengan efek samping yang lebih sedikit, akan menjadi tambahan
yang berharga dalam pilihan pengobatan untuk gangguan terkait
kecemasan.
Machine Translated by Google
534
Namun, penerimaan pengobatan alternatif sejauh ini terhambat oleh
kurangnya studi farmakologi yang menjelaskan indikasi, keterbatasan
dan mekanisme kerjanya (Mamtani dan Cimino 2002; Pilkington dkk.
2006a, b).
Dalam Materia Medica tradisional, Gelsemium sempervirens (G.
sempervirens) digambarkan sebagai obat untuk berbagai gejala
psikologis dan perilaku seperti kecemasan (Boericke 1927; Barbancey
1987; Guermonprez 2006); namun, bukti yang konsisten mengenai
kemanjurannya masih kurang.
Tanaman yang termasuk dalam famili Loganiaceae ini merupakan
tanaman merambat asli Amerika yang beriklim hangat dan tropis, dari
Guatemala hingga Amerika Serikat bagian tenggara. Seluruh bagian
tanaman ini mengandung alkaloid beracun terkait strychnine
gelsemine, gelseminine dan sempervirine (Schun dan Cordell 1987).
Gelsemine telah diidentifikasi sebagai penanda utama paparan
Gelsemium pada urin (Lai dan Chan 2009). Tanda-tanda neurologis
yang ditandai dengan kelemahan progresif dan kejang-kejang yang
berpuncak pada kematian telah diamati pada kambing setelah konsumsi
G. semper-virens dan diikuti toksikosis (Thompson dkk. 2002); nektar
juga beracun bagi lebah madu (Irwin dan Adler 2006). Dalam literatur
fitoterapi, G. sempervirens telah dilaporkan menunjukkan sifat obat
penenang, analgesik dan anti-kejang, meskipun dosis efektifnya tidak
jelas (Valnet 1992; Demarque et al.
1995; Peredery dan Persinger 2004). Namun, perlu dicatat bahwa efek
perlindungan terhadap kejang yang disebutkan terakhir ini diperoleh
dengan menggunakan ekstrak yang dicampur dengan Scutellaria
lateriflora dan Datura stramonium.
G. sempervirens dalam pengenceran tinggi, dibuat sesuai dengan
farmakope homeopati, telah diselidiki oleh beberapa penulis, namun
hasil yang dilaporkan tidak selalu konsisten, terutama karena
ketidakpastian terkait dengan metodologi dan kurangnya evaluasi
statistik (Binsard 1979; Binsard et al.1980 ; Skul dkk. 1986; Guillemain
dkk. 1989). Ada dua penelitian di mana pengenceran tinggi G.
sempervirens ditemukan memiliki tindakan pencegahan terhadap stres
eksperimental (sengatan listrik) pada tikus (Bousta et al. 2001) dan
terhadap kejang yang dipicu oleh litium dan pilocarpine pada tikus
(Peredery dan Persinger 2004). Dalam uji coba baru-baru ini di
laboratorium kami, G. sempervirens menunjukkan efek mirip ansiolitik
yang menjanjikan pada uji lapangan terbuka dan tampaknya bekerja
bahkan pada pengenceran tinggi (Bellavite dkk. 2009a), namun studi
respon dosis sistematis tidak dilakukan. Oleh karena itu, ada ruang
untuk penelitian lebih lanjut yang mengeksplorasi efek G. sempervirens
pada model respons emosional tikus, dan, khususnya, untuk menyelidiki
ketergantungan dosis (atau pengenceran) dari efek tersebut.
Investigasi eksperimental yang dilakukan pada larutan yang sangat
encer mengalami masalah dalam replikasi antar laboratorium yang
berbeda (Bellavite dkk. 2006a, b; Witt dkk. 2007). Oleh karena itu, ini
penting bagi siapa pun
Psikofarmakologi (2010) 210:533–545
hasil awal di bidang ini harus dikonfirmasi dan dikonsolidasikan melalui
penyelidikan lebih lanjut oleh laboratorium independen, menggunakan
protokol yang ketat dan evaluasi statistik. Oleh karena itu, kami
mengadopsi protokol yang ditentukan secara hati-hati dan
menerapkannya pada serangkaian percobaan yang dirancang untuk
menguji (a) hipotesis nol bahwa efek pengenceran obat serupa dengan
efek kendaraan kontrol dan (b) apakah ada ketergantungan dosis dari
obat yang diduga. dampaknya dapat dibuktikan.
Kami menggunakan dua model tervalidasi yang mengeksplorasi
perilaku tikus di lingkungan baru, yaitu uji lapangan terbuka (OF) dan
tes pilihan terang-gelap (LD), untuk memperoleh berbagai parameter
perilaku yang digunakan dalam neuro-psikofarmakologi untuk skrining
obat. . Tes OF (Walsh dan Cummins 1976; Simon et al. 1994; Prut dan
Belzung 2003; Lamprea et al. 2008) banyak digunakan sebagai tes
penggerak karena tikus bebas bergerak di seluruh lapangan, dan jarak
yang ditempuh selama waktu tertentu dapat diukur (Mi et al. 2005; de
Araujo et al. 2009; Vasconcelos et al. 2009). Namun, analisis etologi
rinci dari tes OF, termasuk waktu yang dihabiskan dan jarak yang
ditempuh di pusat/pinggiran lapangan, memungkinkan tidak hanya
untuk memeriksa aktivitas umum tetapi juga untuk mendeteksi efek
spesifik obat pada parameter perilaku seperti eksplorasi lapangan.
kecenderungan dan thigmotaxis (Choleris et al. 2001; Ramos et al.
2008; Fukushiro et al.
2009). Sistem model LD dua kompartemen (Crawley dan Goodwin
1980; Hascoet et al. 2001; Belzung dan Griebel 2001; Bourin et al.
2007) adalah salah satu paradigma perilaku yang paling umum
digunakan: anxiolytics klasik (benzodiazepin) serta yang lebih baru.
senyawa mirip anxiolytic (misalnya obat serotonergik atau obat yang
bekerja pada reseptor neuropeptida) (Bourin dan Hascoet 2003) dan
senyawa alami (Chen et al. 2004; de Araujo et al. 2009) dapat dideteksi
menggunakan paradigma ini, karena senyawa tersebut secara spesifik
meningkatkan waktu yang dihabiskan di kompartemen yang menyala
dan jumlah transisi eksplorasi.
Eksperimen kami dilakukan pada respons tanpa syarat,
menggunakan paradigma berbasis etologis yang melibatkan reaksi
spontan terhadap rangsangan yang tidak menyakitkan. Model etologis
dipilih karena alasan etis dan karena tujuan kami adalah meniru kondisi
alam di mana kita berada
perilaku dipengaruhi oleh keadaan emosional ketakutan, rasa ingin
tahu dan kecemasan. Pengamatan etologis menunjukkan bahwa,
meskipun hewan pengerat secara alami cenderung menjelajahi
lingkungan baru, lahan terbuka dan ruang yang diterangi cahaya tidak
disukai mereka dan karenanya bertentangan dengan perilaku normal.
tanggapan (Griebel dkk. 1993; Clement dkk. 2007). Dapat dibayangkan
bahwa kedua dorongan yang saling bertentangan ini membuat tes
menjadi sangat sensitif bahkan terhadap rangsangan yang sangat
lemah, seperti yang diharapkan dari zat aktif dalam dosis sangat
rendah. Namun, model etologis bergantung pada perbedaan antar
individu dan dasar perilaku yang bervariasi.
tingkat garis (Bourin dkk. 2007) sehingga harus dilakukan kehati-hatian
Machine Translated by Google
Psikofarmakologi (2010) 210:533–545
diambil dengan parameter variabel seperti lingkungan, penanganan
dan pengujian.
Dalam penelitian ini, kami berupaya menyelidiki rentang
pengenceran G. sempervirens seluas mungkin yang sesuai dengan
kendala teknis dan variabilitas antar subjek yang diharapkan. Oleh
karena itu, kami menguji efek pengenceran rendah (4C dan 5C),
sedang (7C dan 9C) dan tinggi (30C) dari ekstrak tanaman.
Pengenceran seperti pengenceran centesimal ke-4 dan ke-5 (4C–5C)
dari ekstrak kasar diharapkan mengandung konsentrasi bahan aktif
yang diklaim sangat rendah, namun masih berada dalam kisaran
molekuler sejak faktor pengenceran dari ekstrak etanol pertama
(induk tingtur ) adalah 108 –1010 kali. Sebaliknya, pengenceran 12C
(1024 kali) atau lebih tinggi secara teoritis tidak mengandung
molekul tingtur induk sejak faktor pengenceran
melebihi batas Avogadro – Loschmidt (Sainte-Laudy dan Belon 2009).
Karena kami menggunakan obat dengan dosis yang sangat
rendah, hewan-hewan tersebut diobati dengan menggunakan rejimen
kronis satu suntikan ip setiap hari selama 8-9 hari. Sebagai kontrol
positif, kami menggunakan agonis buspirone 5-HT(1A), yang cocok
untuk pengobatan kronis, dengan dosis 5 mg/kg, yang berada dalam
kisaran dosis yang biasanya digunakan untuk mendeteksi aktivitas
mirip ansiolitik pada hewan pengerat ( Cole dan Rodgers 1994; Merali
dkk. 2003; Grundmann dkk. 2007; Yamauchi dkk. 2008).
Agonis 5-HT1A parsial seperti buspirone menghasilkan efek ansiolitik
pada hewan pengerat sebagaimana dinilai dengan uji LD, sedangkan
hasil yang kontras telah dilaporkan dengan agonis reseptor 5-HT1A
penuh seperti 8-hidroksi-2-(di-n-propylamino)-tetralin (8 -OH-DPAT)
(Young dan Johnson 1991a; Shimada dkk. 1995; Bilkei-Gorzo dkk.
1998). Kelompok hewan yang diberi obat dibandingkan dengan
kelompok kontrol yang diberi larutan dari kendaraan yang sama yang
digunakan untuk menyiapkan pengenceran obat.
Bahan dan metode
Subyek dan penanganannya
Tikus jantan berumur 4-5 minggu dari strain ICR-CD1 adalah
dibeli dari Laboratorium Charles River (Lecco, Italia) dan dibiarkan
menyesuaikan diri selama 2 minggu sebelum pengujian di fasilitas
hewan terkendali (suhu 22±2°C, kelembapan 55%±5%). Pada awal
perlakuan, berat badan hewan adalah 30±3 g. Untuk setiap percobaan,
64 tikus didistribusikan secara acak, dua per kandang, dalam kandang
plastik (ukuran: 25×14×12 cm) dan ditempatkan dengan makanan
dan air tersedia ad libitum, kecuali selama periode pengujian singkat.
Lampu dinyalakan antara jam 7 pagi sampai jam 7 malam. Kandang
ditempatkan pada rak kandang yang terdiri dari empat baris delapan
kandang yang masing-masing disusun sedemikian rupa sehingga
kandang yang ditempatkan pada kelompok eksperimen berbeda
ditempatkan secara seragam.
535
didistribusikan sepanjang baris dan kolom. Urutan kelompok—dan
urutan injeksi dan pengujian—diganti secara merata untuk menjamin
interval yang sama antara operasi untuk kelompok yang berbeda
selama percobaan. Setiap hewan hanya digunakan sekali dalam tes
yang sama untuk menghindari efek perancu dalam pembelajaran dan
pembiasaan. Semua percobaan dilakukan sesuai dengan kebijakan
NIH Italia tentang penggunaan hewan dalam penelitian, dan prosedur
pengujian disetujui secara independen oleh Komite Etika Hewan dari
Pusat Penelitian Hewan Antar Departemen (CIRSAL) Universitas
Verona dan oleh Universitas Verona. Kementerian Kesehatan Italia.
Narkoba
Obat untuk penelitian ini diproduksi oleh Boiron Laboratoires, Lyon
(F), dimulai dari ekstrak hidro-alkohol utuh G. sempervirens, yang
diencerkan 100 kali dalam 30% etanol/air suling untuk mendapatkan
suhu 1C.
pengenceran. Pengenceran serial 100× hingga 29C kemudian dibuat
dalam pelarut yang sama menggunakan botol kaca. Setelah setiap
pengenceran, botol diaduk kuat-kuat menggunakan pengocok
mekanis. Pengenceran 3C, 4C, 6C, 8C dan 29C disimpan dalam
tempat gelap pada suhu kamar. Kandungan gelsemine—alkaloid
utama G. sempervirens (Gbr. 1)—dalam ekstrak hidroalkohol pertama
adalah 0,021% (b/v), sesuai dengan konsentrasi 6,5×10ÿ4 mol/l.
Larutan kontrol (kendaraan) adalah larutan etanol/air suling 30% yang
sama yang digunakan untuk menyiapkan pengenceran obat.
Sebelum digunakan dalam setiap percobaan, 0,4 ml sampel larutan
ditambahkan ke 39,6 ml larutan steril sulingan dan
air apirogenik dalam tabung plastik Falcon 50 ml steril, ditutup dengan
tutup plastik dan dikocok secara manual dengan 20 gerakan vertikal
yang kuat untuk mendapatkan pengenceran akhir 4C, 5C, 7C, 9C
dan 30C dan kendaraan kendali yang digunakan untuk perawatan,
dengan konsentrasi etanol akhir diturunkan menjadi 0,3% (v/v).
Buspirone (Sigma, dosis akhir 5 mg/kg) diencerkan dalam larutan
kendaraan akhir (etanol 0,3% dalam air suling). Di dalam
Gambar 1 Gambar tanaman G. sempervirens dan struktur alkaloid
gelsemine utamanya
Machine Translated by Google
536
untuk membutakan operator sehubungan dengan solusi pengujian,
semua sampel kemudian diberi kode oleh orang independen dan
kode tersebut disimpan tersegel di dalam amplop sampai semua
pengujian dan perhitungan selesai. Larutan didistribusikan dalam
tabung plastik Falcon steril 15 ml (4 ml/tabung), dibungkus dengan
aluminium foil dan disimpan pada suhu +4°C hingga hari
penggunaan. Sebelum digunakan, masing-masing tabung dikocok
kembali secara manual sebanyak 20 pukulan. Semua prosedur
dilakukan dalam kondisi steril dan menggunakan peralatan plastik
sekali pakai yang steril. Solusi akhir yang digunakan untuk
perawatan diuji dengan kromatografi gas dan spektroskopi massa
untuk kemungkinan kontaminasi dengan buspirone; hasil tes
tersebut negatif.
Perawatan
Ukuran sampel minimum yang diperlukan sebesar n=42 subjek per
kelompok dihitung berdasarkan pengalaman sebelumnya (Bellavite
dkk. 2009b) dan dengan asumsi tingkat kekuatan statistik yang
telah ditetapkan sebelumnya sebesar 0,9 dan tingkat alfa sebesar 0,05.
Karena beberapa dosis harus diuji secara paralel, penelitian
dilakukan dengan enam ulangan, masing-masing dengan ukuran
sampel minimal delapan. Jadi, dalam setiap percobaan, tikus diacak
menjadi delapan kelompok yang terdiri dari delapan hewan: lima
kelompok diberi pengenceran G. sempervirens yang berbeda, satu
kelompok dengan buspirone dan dua kelompok dengan kendaraan
(kontrol). Dua kelompok hewan yang diberi perlakuan dengan
kendaraan kontrol dimasukkan untuk mendapatkan nilai referensi
yang sangat konsisten untuk menghitung efek obat dan untuk
memungkinkan perbandingan dua kelompok yang identik untuk
menentukan stabilitas antar kelompok dalam pengaturan percobaan.
Semua percobaan dilakukan antara pukul 09:00 dan 14:00 (LD)
dan antara pukul 09:00 dan 15:00 (OF). Larutan diberikan pada
pagi hari selama sembilan hari berturut-turut (termasuk pada dua
hari terakhir saat hewan diuji) dengan injeksi intraperitoneal (ip)
(0,3 ml/mencit). Perawatan diberikan baris demi baris, dan tes
perilaku dimulai 30 menit setelah suntikan obat. Hewan-hewan
tersebut diuji secara individual dalam empat perangkat terpisah,
memungkinkan satu set lengkap hingga 64 tikus (8 hewan×8
kelompok) untuk diuji selama sesi percobaan 4-5 jam.
Tes perilaku
Percobaan dilakukan dengan urutan sebagai berikut: uji eksplorasi
lapangan terbuka (OF) pada hari pertama (hari ke 8 pemberian
obat) dan uji pilihan terang-gelap (LD) pada hari berikutnya (hari ke
9 pemberian obat). Sesaat sebelum pengujian, hewan dibiarkan
menyesuaikan diri dengan ruangan di dalam kandangnya selama 3
menit setelah dipindahkan dari tempat tinggal adatnya. Operator
tetap berada di luar ruang pengujian selama perekaman sesi
eksperimen.
Psikofarmakologi (2010) 210:533–545
Selain suntikan pengobatan dan pengujian, hewan-hewan tersebut
tidak mengalami rasa sakit atau bentuk tekanan emosional atau
fisik lainnya.
Tes lapangan terbuka
Uji OF (Prut dan Belzung 2003; Simon et al. 1994; Walsh dan
Cummins 1976) dilakukan dengan menempatkan hewan selama 10
menit di lingkungan yang terdiri dari platform kayu bercat hitam
berukuran 50×50 cm dengan tinggi sekeliling 25 cm. dinding
diterangi dengan cahaya putih (100 lux).
Untuk mengevaluasi kecenderungan eksplorasi pusat, arena dibagi
menjadi dua bagian, dengan zona pusat berbentuk persegi yang
luasnya setara dengan 25% dari total luas. Peralatan dibersihkan
secara menyeluruh dengan air dan kertas lembut sekali pakai di
antara percobaan, dan dengan air dan deterjen di antara percobaan.
Tes terang-gelap
Tes LD (Bourin dan Hascoet 2003; Chen dkk. 2004; Hascoet dkk.
2001) peralatan yang digunakan terdiri dari kompartemen kecil
yang gelap dan aman (15×30 cm) dan kompartemen besar dengan
penerangan yang tidak menyenangkan (30×30 cm) . Kedua
kompartemen tersebut dipisahkan oleh sebuah partisi yang memiliki
bukaan (4×4 cm) sehingga hewan dapat berpindah dari satu
kompartemen ke kompartemen lainnya. Kompartemen permusuhan
diterangi dengan 200 lx. Hewan-hewan ditempatkan di tengah
kompartemen yang menyala menghadap bukaan dan dibiarkan
menjelajahi ruang selama periode pengujian 5 menit. Jumlah transisi
antara kompartemen terang dan gelap dalam tes LD juga dievaluasi
di layar oleh operator yang tidak mengetahui penetapan kelompok
tikus. Peralatan dibersihkan secara menyeluruh di antara percobaan.
Pelacakan video
Semua sesi direkam dengan kamera pelacak video (GZ-MG135,
JVC, Jepang) dan disimpan dalam DVD. Sebuah program perangkat
lunak (“Smart” sistem VTS dari PanLab, Barcelona, E) digunakan
untuk secara otomatis melacak posisi dan pergerakan hewan dan
menghitung waktu yang dihabiskan di berbagai zona dan jarak yang
ditempuh. Semua rekaman perilaku dilakukan dengan pengamat
tidak mengetahui penugasan kelompok perlakuan pada tikus.
Statistik
Semua analisis dilakukan dengan menggunakan perangkat lunak
SPSS, versi 17 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA: http://www.spss.com ).
Semua data direpresentasikan sebagai mean ± nilai SEM. Uji
Shapiro-Wilk menunjukkan bahwa data yang diperoleh bersifat
parametrik. Kelompok-kelompok tersebut dibandingkan secara dua arah
Machine Translated by Google

Psikofarmakologi (2010) 210:533 –545 537

analisis varians, menggunakan kelompok perlakuan dan

percobaan sebagai faktornya. Tes post hoc t dilakukan

229,0
84
dengan asumsi varians yang sama dengan perbedaan signifikan terkecil

2. 8 9 3. 5

2. 7 7 0. 5

2. 9 7 0. 5
9,642.6
7, 2 6 5. 3
-lortnoB
K

9,786.4
(LSD) koreksi untuk menyesuaikan beberapa perbandingan.
Efek bersih obat dihitung dalam bentuk standar sebagai persentase
relatif terhadap nilai rata-rata semua obat
kontrol di setiap percobaan (dianggap sebagai efek nol)

229,0
84
sesuai dengan rumus:

1.5
6
9,403.3
-lortnoA
K

5,177.4

7,808.4
15
47
0,7
4 6
½ð Nilai uji tiap tikus = nilai uji rata-rata 16 tikus kontrol 1 TH

100:

200,0
kadit
Hal ini memungkinkan efek yang diamati dalam semua percobaan

04
5,532.5
2. 3 0 3. 3
noripsuB

9,022.4

4, 2 5 8. 4

9,327.4
untuk dikumpulkan, dibandingkan dan dievaluasi secara statistik.

Hasil

262,0
84
5,120.5

3.5
6

8,063.5
7,662.3
le0G
3
Tes lapangan terbuka

24
2,8
1 3 69
Nilai rata-rata dari setiap percobaan OF dan nilai rata-ratanya
nilai±SEM dari semua percobaan, dengan evaluasi statistik, dilaporkan
pada Tabel 1, 2 dan 3. Tabel 1 menunjukkan

359,0
84
total jarak yang ditempuh di seluruh arena lapangan terbuka.

1.394.5
2.974.3
leG
9

9.5
4

3.448.4
12
0,0
6
9 5 68
1 6
Parameter ini tidak mencerminkan perubahan emosi
perilaku, tetapi penting untuk mengevaluasi total lokomotor
aktivitas hewan selama percobaan 10 menit. G.
pengenceran sempervirens tidak mengubah nilai-nilai ini

116,0
84
dibandingkan dengan hewan kontrol yang tidak diberi perlakuan, kecuali
6.6
5
leG
7

6,398.2

8,506.4

0.618.4
72
2,5
0
1 43
8

Pengenceran 5C yang menghasilkan peningkatan parameter ini

yang hanya sedikit meleset dari signifikansi statistik (p =
0,052). Buspirone menyebabkan penurunan total jarak tempuh yang
kecil, namun signifikan secara statistik (p=0,002).
250,0
84

lapangan, menunjukkan kemungkinan efek sedatif obat ini di

6.611.5
6.6
5
5,031.6
2.191.3
leG
5

87
9,7
6 64
5

dosis yang digunakan.

6
2

Dua variabel perilaku utama dievaluasi dalam OF

tes adalah persentase waktu yang dihabiskan di zona tengah
lapangan (Tabel 2) dan jarak yang ditempuh di tengah
844,0
84

zona (Tabel 3). Seperti yang ditunjukkan pada Tabel 1, terdapat signifikan
7.5

1.615.5

.5
4(
1.091.3

4,269.4

312
069

2
4

variabilitas antar eksperimen (p<0,001) namun tidak ada interaksi antara

141

371
9
5
0
7,5
4

6
5,4
2
0
1
5
8
3

5
4
1
2
3
7 ,8
0)0
8
4
17
2

eksperimen dan kelompok, yang menunjukkan adanya variabilitas

efek obat yang diamati tidak dipengaruhi oleh perbedaan antar
percobaan. Di sebagian besar percobaan, beberapa
Pengenceran G. sempervirens tampaknya menambah waktu
–
69

dihabiskan di zona tengah. Nilai-nilai kelompok yang diperlakukan

5.6
5

.5(
8,334.3

7,927.4

0.449.4

01
6831
2 3

23
lo-ratanlteatoaG
R
4kr

1,2
7

,5,4
3
2

5)9

dengan G. sempervirens 7C lebih tinggi dari rata-rata

kontrol di semua percobaan, sedangkan pada kelompok 9C
lebih tinggi pada semua kasus kecuali satu (percobaan no. 6).
Namun, ANOVA global untuk kelompok tersebut menghasilkan suatu nilai
hanya p = 0,063, tidak termasuk analisis post hoc untuk mengevaluasi
signifikansi statistik dari pengenceran individu. Itu
m
A
e
oLpks(t
h
d

percobaan tidak mengungkapkan sesuatu yang jelas dan dapat direproduksi

alnre
ie
ncsS
1

ah
5
6

tsu
o
3
raT
1j

A
tnDoIC
T

judidit
4

aR(r

acascaoP
h
efA
F
uk
d
p

riilsa
wleuhkJ

D
g
tatS

)na
sm
lelkabato
a

<
n
l=
tN

un
0r=

h
o
a
glid
-aaE

kia
aalm

co1
2
7

nhp
o

,O u
,.3
8
5

kpo-sa
.KoA

)M

b,Vmk2
hnm

3
4
,p2
0 o
0
9
.1
3
.h

ko/p

hubungan ketergantungan dosis. Buspirone obat standar

nemirepsken*ka;oaA
:0
5
1
Machine Translated by Google

538 Psikofarmakologi (2010) 210:533–545

Tabel 2 Waktu permanen di area tengah lapangan terbuka (% dari total waktu)

Contoh. TIDAK. Rata-rata kontrol Gel 4 Gel 5 Gel 7 Gel 9 Gel 30 Kontrol Buspirone-A Kontrol-B

1 6.7 6.2 8.4 9.0 8.5 7.1 7.8 6.9 6.5

2 13.0 11.1 13.4 19.4 15.9 15.8 12.6 14.2 11.9
3 15.0 17.8 15.6 16.2 17.8 17.5 16.5 15.7 14.4
4 15.2 18.5 19.0 16.8 17.9 15.8 tidak 16.7 13.7
5 17.5 13.8 16.3 18.3 19.1 18.2 14.7 18.1 16.8
6 14.3 11.2 14.8 16.4 12.5 17.8 19.4 14.9 13.6

Jumlah hewan/kelompok 96 48 48 48 48 48 40 48 48

Rata-rata (SEM) 13,6 (0,6) 13,1 (0,9) 14,6 (0,8) 16,0 (1,1) 15,3 (1,0) 15,4 (1,2) 14,2 (1,0) 14,5 (0,8) 12,8 (0,8)
ANOVA: untuk kelompok df=8, F=1.87, p=0.063; untuk percobaan df=5, F=30.1, p<0.001; untuk kelompok*eksperimen df=39, F=0,75, p=0,858

tidak diuji

memiliki sedikit atau tidak berpengaruh pada waktu yang dihabiskan di zona pusat.
Hasil serupa diamati untuk jarak yang ditempuh
bagian tengah OF (Tabel 3): G. sempervirens 5C, 7C, 9C
dan 30C menunjukkan sedikit kecenderungan untuk meningkatkan jarak
bepergian di zona tengah, sedangkan buspirone cenderung
Pentingnya efek seperti anxiolytic dari G.
sempervirens dalam tes ini diperkuat dengan observasi
bahwa dua kelompok terpisah diperlakukan dengan kendaraan kendali
menghasilkan skor yang sama, dan keduanya berbeda dari keduanya
dari kelompok yang diberi perlakuan verum.

kurangi parameter yang sama; namun besarnya

efek ini tidak mencapai ambang batas statistik
makna.
Tes terang-gelap
Nilai rata-rata setiap percobaan LD dan rata-ratanya
nilai±SEM dari semua percobaan, dengan evaluasi statistik, dilaporkan
pada Tabel 4 dan 5. Juga dalam pengujian ini, ada
ada perbedaan yang signifikan antara percobaan (p=
0,002) namun tidak ada interaksi antar kelompok dan eksperimen.
Pada uji LD, sebagian besar pengenceran G. sempervirens dan
obat referensi anxiolytic konvensional terbukti
efektif secara signifikan (ANOVA global untuk kelompok p=
0,002 dan p=0,001 untuk data Tabel 4 dan 5,
masing-masing). Persentase waktu yang dihabiskan dalam keadaan terang
kompartemen (Tabel 4) meningkat secara signifikan sebesar
Pengenceran G. sempervirens 5C dan 9C, sedangkan 30C dipamerkan
signifikansi yang berada di ambang batas. Pengenceran 9C memiliki hasil yang lebih besar
efeknya daripada rata-rata kontrol di semua percobaan dan
menunjukkan signifikansi statistik tertinggi (p<0,001).
Namun, tidak ada hubungan ketergantungan dosis yang jelas
dalam rangkaian percobaan ini. Buspirone obat standar
meningkatkan waktu yang dihabiskan di kompartemen yang diterangi, seperti
diharapkan, sehingga mengkonfirmasi sensitivitas tes.
Hasil jumlah transisi antara
kompartemen (Tabel 5) menunjukkan efek stimulasi yang serupa
pengenceran G. sempervirens. Namun, buspirone, dibandingkan
dengan kontrol, memiliki efek yang lebih kecil terhadap jumlah pasien
transisi daripada waktu yang dihabiskan di tempat terang
kompartemen. Karena jumlah transisi bergantung pada aktivitas
lokomotor, hal ini mungkin terkait dengan jumlah yang kecil
efek sedatif, seperti yang juga diamati pada tes OF.
Ringkasan efek persentase
Hasil dari semua percobaan dikumpulkan setelahnya
menstandardisasi nilai untuk setiap mouse sehubungan dengan
nilai rata-rata untuk tikus kontrol pada percobaan itu. Itu
perbedaan antara masing-masing tikus yang diberi perlakuan kendaraan kendali,
relatif terhadap nilai rata-rata semua kontrol yang sama
percobaan, juga dihitung. Hal ini memungkinkan untuk
mengevaluasi variasi antara dua kelompok kontrol dan
stabilitas sistem. Ringkasan hasil utama
penyelidikan ini disediakan pada Gambar. 2. Rata-rata
nilai persentase efek untuk semua tikus dalam kelompok perlakuan
jelas menunjukkan peningkatan kecil akibat G. sempervirens
pengenceran dalam paradigma OF (panel A dan B). Di OF,
hewan yang diobati dengan G. sempervirens (5C, 7C, 9C dan 30C)
menunjukkan aktivitas 10-20% lebih tinggi dibandingkan kontrol. Namun,
karena variabilitas respons antar individu, efek ini
tidak mencapai signifikansi statistik dalam ANOVA global
analisis. Buspirone memiliki efek yang kecil dan tidak signifikan
jumlah waktu yang dihabiskan di tengah (panel A) dan
menunjukkan kecenderungan untuk menghambat jarak yang ditempuh dalam
tengah (panel B).
Pengobatan G. sempervirens menyebabkan dampak yang sangat signifikan
peningkatan parameter paradigma LD (panel C
dan D). Di sini, solusi G. sempervirens paling aktif
(5C, 9C dan 30C) meningkatkan parameter, dianggap
menjadi tanda berkurangnya kecemasan, sebesar 20–40%. Dengan hormat
waktu yang dihabiskan di kompartemen cahaya, efek ini adalah
sebanding dengan buspirone, sedangkan dalam hal
jumlah transisi, efek G. sempervirens 9C dan
30 C jauh lebih tinggi dan lebih signifikan dibandingkan suhu 30 C
buspirone. Hal ini mungkin disebabkan oleh efek obat penenang
 n
hauah
g
pk)a
ln
tkm
eg
uig
a
n
/bm
nn
erpra
e 0tae
ca
miT
3yJ(tl
d
1

.h
.KoA
tnDoIC
T lo-ratantatoaRkr leG
4 leG
5 leG
7 leG
9 le0G
3 noripsuB -lortnoA
K -lortnoB
K

1 4.434 5.343 5.873 8.763 1.515 0.093 0.193 2.624 5.244

1.758 1.297 0.067 9.209 4.118

2 3.712.1 9,970.1 1.261.1 3.010.1

3 5,661.1 5,073.1 6,612.1 8,283.1 0.621.1 4.143,1 6,031.1 6,171.1 4. 1 6 1. 1

kadit
4 7,0
6 6243
1.1 8,2
4 3091
3.1 7,0
1 3913.1 2,4
5 5274
1.1 3,9
2 5573
2.1 6,8
7 5143.1 8,2
3 663
2.1 6, 6 2 0. 1
Machine Translated by Google

7.168
5 9, 6 0 4. 1

6 3.668 5.559 5,599 4.569 9.288 6.0901 5.3011 9.848 7.388

kop/hnm
)an
M
aloam
w
Eleee
uSM
K
hJ(
69 84 84 84 84 84 04 84 84
Psikofarmakologi (2010) 210:533 –545

)09..36979( 9,)576,4
06.1( 4,)3
3 51
3,8
4 5,55
3
074
6
.9
1( 8,)298,8
07.1( )32..90468( )55,,61969( )46,,56569(

nemirepsken*ka;o
:3
7
1
aA
,p7
8
3
0
5
bV
,m
6
0
.3
1
9
o
k8
,O
,3
8
5
.u
co1
6
0r=
tN
l=
<
efA
n F
uk
d
p

kiajudidit

nen-g
ulpn
a e
t)a
m ka
la
bia
e
rl%
ra
teiW
ro
ejiT
4(t
p
a
u
g
d

.h
.KoA
tnDoIC
T lo-ratantatoaRkr leG
4 leG
5 leG
7 leG
9 le0G
3 noripsuB -lortnoA
K -lortnoB
K

1 8.61 7.91 8.52 8.62 5.52 6.02 5.91 0.41

2 9.71 4.81 4.12 1.42 3.12 4.32 6.71 2.81

3 0.12 8.42 7.62 4.62 8.62 8.81 3.12 8.22 2.91

4 7.51 7.02 4.71 7.12 8.32 9.22 kadit 4.31 9.71

5 0.32 7.91 6.12 3.12 1.62 8.81 6.03 8.91 3.62

6 8.31 2.12 0.91 0.91 7.91 4.91 7.51

69 84 84 84 84 84 04 84 84

)M
-aaE
tatS
aR(r )00..811( )74..012( )74..112( )54..012( )42..412( )23..112( )13..312( )52..711( )57..811(

–
nemirepsken*ka;o
:2
aA
,/p
h9
4
0
1
bnV
,aa
m
0
9
7
8
o
ka,ca
O
l,.3
8
5
u
cm
w
o
3
0
scr=
tN
la
=
o
e
n
ufA
P
F
hkJ
u
d
p 111,0 230,0 641,0 100,0< 460,0 500,0 557,0 557,0

A
kpo-sa
nh
glid
p a
o
h
u
sm
n)na
D
g
riilsa
tsu
o
ah
ncsS
ie
alnre
oL
e
m
Apks(t
h
d

kiajudidit
539
Machine Translated by Google

540 Psikofarmakologi (2010) 210:533–545

Tabel 5 Transisi antar kompartemen pengujian terang-gelap (n/5 menit)

Contoh. TIDAK. Rata-rata kontrol Gel 4 Gel 5 Gel 7 Gel 9 Gel 30 Kontrol Buspirone-A Kontrol-B

1 5.6 5.6 5.1 5.1 6.8 9.2 5.9 6.5 4.7

2 6.5 6.6 9.6 6.3 10.4 8.2 8.0 6.6 6.4

3 7.2 9.5 8.6 9.6 9.5 6.5 6.9 6.7 7.6

4 6.4 7.3 7.4 7.7 9.5 11.5 tidak 6.7 6.1

5 8.2 7.7 9.0 9.1 9.7 9.9 7.3 6.5 9.9

6 4.5 8.5 7.4 6.4 7.3 7.1 6.6 4.9 4.1

Jumlah hewan/kelompok 96 48 48 48 48 48 40 48 48

Mean (SEM) 6,4 (0,4) 8,7 (0,6) 7,5 (0,6) 7.9 (0.6) 7.4 (0.5) 8.9 (0.6) 6.9 (0.4) 6,3 (0,5) 6,5 (0,6)

ANOVA: untuk kelompok df=8, F=3,29, p=0,001; untuk percobaan df=5, F=5.08, p<0.001; untuk kelompok*eksperimen df=39, F=0,78, p=0,820
Pasca hoca – 0,096 0,034 0,152 <0,001 0,001 0,472 0,920 0,920

A
Analisis post hoc (LSD) terhadap selisih mean masing-masing kelompok dengan mean seluruh kontrol
tidak diuji

buspirone yang mengurangi kecepatan gerakan tikus, dan B menunjukkan, dalam berbagai model eksperimen, a
efek yang tidak diamati dengan menggunakan diazepam (1 mg/kg in variabilitas (positif dan negatif) relatif terhadap mean itu
pengobatan akut) dalam percobaan terpisah yang dilakukan di bawah tidak melebihi 5%, cenderung mendukung kesimpulan bahwa
kondisi yang sama (data tidak ditampilkan). Kelompok kontrol A efek obat itu nyata dan tidak disebabkan oleh kebetulan.

Gambar 2 Pengaruh pengenceran G. sempervirens dan buspirone pada OF (a
dan b) dan parameter perilaku LD (c dan d), dinyatakan sebagai
persentase ± SEM relatif terhadap nilai rata-rata untuk hewan kontrol yang dirawat
dengan kendaraan. N=48 dan 40 hewan untuk masing-masing kelompok yang diobati
dengan G. sempervirens dan buspirone. ANOVA Global
df=8, F=3,11, p=0,002; panel D untuk percobaan df=5, F=2.97, p=
0,012, untuk kelompok df=8, F=3,35, p=0,001. Semua interaksi antar
kelompok dan eksperimen tidak signifikan. Nilai p (*p<0,05;
**p<0,001) berasal dari analisis LSD-post hoc dengan ANOVA dua arah,
membandingkan kelompok yang diobati dengan obat atau kelompok yang diobati dengan kendaraan (kontrol

nilai untuk evaluasi ini adalah: panel A untuk eksperimen df=5, F= kelompok A dan B) dengan rata-rata kontrol yang sesuai,
0,97, p=0,438; untuk kelompok df=8, F=1,89, p=0,060; panel B untuk kelompok yang dirawat kendaraan. Analisis LSD-post hoc tidak dilakukan
percobaan df=5, F=2,72, p=0,020; untuk grup df=8, F=1.39, p= data panel A dan B karena ANOVA global berada di bawah
0,196; panel C untuk percobaan df=5, F=2.51, p=0.029; untuk kelompok ambang batas signifikansi
Machine Translated by Google
Psikofarmakologi (2010) 210:533–545
Diskusi
Benzodiazepin telah memonopoli pasar kecemasan selama sekitar
40 tahun, namun potensi toleransi dan ketergantungannya telah
merangsang minat terhadap obat ansiolitik alternatif. Perhatian
terfokus pada obat-obatan seperti inhibitor monoamine oksidase,
antidepresan trisiklik, inhibitor reuptake sero-tonin selektif dan agonis
parsial 5-HT1A, buspirone (Bandelow et al. 2002; Allgulander et al.
2003).
Tantangan di masa depan bukan hanya menemukan pengobatan
yang efektif dengan profil efek samping yang dapat diterima, namun
juga menentukan senyawa optimal untuk masing-masing gangguan
kecemasan yang berbeda. Baru-baru ini, terdapat peningkatan
perhatian terhadap cara-cara untuk memenuhi permintaan pengobatan
secara hemat biaya sehingga dapat mengendalikan pengeluaran
layanan kesehatan (Morgan dan Jorm 2009). Kecemasan dan depresi
merupakan salah satu gejala yang paling sering dilaporkan oleh
pasien yang mencari pengobatan medis komplementer dan alternatif,
homeopati dan pengobatan alami (Mathie dan Robinson 2006;
Thompson et al. 2008; Greeson et al. 2008; Guethlin et al. 2009).
G. sempervirens adalah salah satu pengobatan klasik yang
digunakan dalam pengobatan komplementer untuk mengobati pasien
yang menunjukkan gejala mirip kecemasan neurologis. Dalam Materia
Medica tradisional (Boericke 1927), G. sempervirens digambarkan
sebagai obat untuk berbagai gejala neurologis dan perilaku seperti
sujud umum, pusing, mengantuk, tumpul, gemetar, rasa lelah, apatis
mental, kelemahan otot, sujud. , kurangnya koordinasi otot, depresi
umum yang disebabkan oleh panasnya matahari, kegembiraan
emosional, efek buruk yang dipicu oleh rasa takut atau berita gembira
dan sebagainya. Singkatnya, tindakan pengobatan berpusat pada
sistem saraf, dan efek pada gejala perilaku seperti kecemasan telah
disarankan (Barbancey 1987; Guermonprez 2006) namun tidak
terbukti. Seperti halnya banyak pengobatan alternatif lainnya, bukti
kemanjuran klinis dan pra-klinis (laboratorium dan model hewan)
masih langka atau sama sekali tidak ada (Carpenter dan Neal 2005;
Pilkington dkk. 2006a).
Eksperimen kami memberikan bukti kuat bahwa berbagai
pengenceran G. sempervirens memiliki efek seperti ansiolitik pada
tikus dalam uji LD, tanpa efek apa pun pada komponen alat gerak
yang diuji dengan uji OF. Efek dari beberapa dosis G. sempervirens
yang diuji, yaitu 9C dan 30C, pada waktu yang dihabiskan di area
terang pada tes LD sebanding atau bahkan lebih baik dibandingkan
dengan buspirone ansiolitik standar.
Dalam paradigma OF, G. sempervirens menghasilkan sedikit
peningkatan jumlah waktu yang dihabiskan di tengah lapangan,
namun tidak signifikan, sedangkan buspirone tidak memberikan efek
signifikan. Penjelasan yang mungkin atas kelangkaan hasil tes OF
ini mungkin karena dalam kondisi eksperimental penyelidikan ini, tes
ini tidak cukup.
541
sensitif untuk mendeteksi kecemasan dan efek ansiolitik terkait obat.
Penelitian lain telah melaporkan bahwa pengobatan anxiolytic tidak
dengan sendirinya meningkatkan eksplorasi di zona tengah OF,
namun justru melawan penghambatan perilaku eksplorasi yang
disebabkan oleh stres (Bourin et al.
2007). Karena lingkungan percobaan kami tidak melibatkan paparan
stres sebelumnya, ada kemungkinan bahwa dalam kondisi seperti
itu, respons tikus terhadap obat tersebut hanya sedikit. Penafsiran ini
tampaknya konsisten dengan penafsiran Bousta dkk. (2001) yang
melaporkan beberapa efek mirip ansiolitik dari G. sempervirens pada
tikus yang mengalami stres akibat sengatan listrik berulang kali,
namun tidak berpengaruh pada tikus normal.
Masalah lebih lanjut dalam menafsirkan data OF dari penyelidikan
ini muncul dari pengurangan signifikan pada komponen alat gerak
tidak spesifik yang dihasilkan oleh buspirone, sedangkan pengenceran
G. sempervirens tidak menyebabkan efek seperti itu. Buspirone
diberikan selama jangka waktu 8-9 hari secara paralel dengan G.
sempervirens dengan alasan bahwa buspirone merupakan obat
rujukan standar yang cocok untuk pengobatan kronis karena tidak
mengembangkan toleransi khas benzodia-zepin (Miller dan Koff
1994; Khan dan Haleem 2007). Ada kemungkinan bahwa, pada dosis
yang digunakan dan dalam kondisi eksperimental tertentu, buspirone
mungkin telah menginduksi sindrom serotoninergik yang mengganggu
aktivitas alat gerak dan efek seperti ansiolitik. Efek ringan seperti
anxiolytic disertai dengan pengurangan ukuran aktivitas umum,
dihasilkan oleh buspirone dengan dosis 2,5-5,0 mg/kg, telah
dilaporkan oleh orang lain (Cole dan Rodgers 1994). Masih harus
dipastikan apakah buspirone dosis rendah dapat menghindari efek
samping yang tidak diinginkan ini sambil mempertahankan aktivitas
seperti ansiolitiknya. Bagaimanapun, dosis yang digunakan dalam
penyelidikan ini berada dalam kisaran rata-rata yang biasa digunakan
untuk mendeteksi efek mirip anxiolytic pada hewan pengerat (Costall
et al. 1989; Young dan Johnson 1991b; Merali et al. 2003; Harada et
al. 2006 ; Muda dkk.
2006; Grundmann dkk. 2007; Pogorelov dkk. 2007; Yamauchi dkk.
2008). Oleh karena itu, mengingat kecenderungan buspirone untuk
menghasilkan penekanan perilaku secara umum, mungkin disarankan
dalam penelitian selanjutnya untuk menggunakan obat yang berbeda
(misalnya benzodiazepin yang larut dalam air) sebagai kontrol positif
dalam lingkungan eksperimental yang serupa.
Perbandingan data untuk dua model pengujian menunjukkan
bahwa efek seperti anxiolytic dari G. sempervirens dan buspirone
lebih tinggi dan lebih signifikan pada LD dibandingkan pada tes OF.
Perbedaan ini mungkin disebabkan oleh beberapa alasan.
Kemungkinan pertama adalah bahwa kedua tes tersebut
mengeksplorasi aspek perilaku berbeda yang dipengaruhi oleh
pengobatan dengan cara yang berbeda, sebagaimana juga dibuktikan
oleh perbedaan sensitivitas mereka terhadap obat konvensional
buspirone. Kotak terang/gelap banyak digunakan pada hewan
pengerat sebagai model untuk menyaring obat-obatan anxiolytic atau
anxiogenik, berdasarkan pada keengganan bawaan hewan pengerat
terhadap area yang terang benderang dan perilaku eksplorasi spontan hewan penge
Machine Translated by Google
542
pemicu stres ringan—seperti lingkungan baru dan cahaya (Crawley dan
Goodwin 1980). Belzung dan Griebel berpendapat bahwa tes terang-
gelap dan labirin plus yang ditinggikan adalah perangkat yang paling tepat
untuk menilai “kecemasan terhadap keadaan”, sedangkan paradigma
eksplorasi bebas dapat digunakan untuk “kecemasan sifat”
(Griebel dkk. 1993; Belzung dan Griebel 2001). Namun, uji lapangan
terbuka juga digunakan sebagai model kecemasan (Bourin et al. 2007),
dan hanya ada sedikit model hewan yang benar-benar menunjukkan
kecemasan, dimana model yang digunakan mengandalkan paradigma
belakang secara in vitro (Venard et al.
genetik atau paparan kronis terhadap hal-hal yang memicu rasa takut. rangsangan.
Penjelasan alternatifnya adalah bahwa menguji hewan selama dua
hari berturut-turut mungkin telah mengubah tingkat kecemasan awal, dan,
karenanya, respons mereka terhadap pengobatan.
Telah dicatat bahwa sejauh mana senyawa anxiolytic dapat memfasilitasi
aktivitas eksplorasi tergantung pada tingkat dasar kecemasan pada
kelompok kontrol (Hascoet et al.
2001). Karena lingkungan percobaan kami tidak melibatkan paparan stres
sebelumnya dan tikus-tikus tersebut naif terhadap pengujian ketika uji OF
dilakukan pada hari pertama percobaan, ada kemungkinan bahwa dalam
kondisi tersebut respons tikus terhadap G. sempervirens rendah karena
tingkat kecemasan dasar mereka, yang dinilai dengan tes OF, lebih
rendah. Tingkat kecemasan hewan mungkin meningkat pada hari kedua
uji coba, dan hal ini dapat menyebabkan respons yang lebih tinggi
terhadap pengobatan dalam tes LD. Perbedaan antara jenis dan tingkat
keparahan stres eksternal, dan antara pengaturan eksperimen, mungkin
menjelaskan tingginya variabilitas hasil yang dilaporkan dalam kondisi
eksperimen berbeda dan oleh laboratorium berbeda (Bourin dkk. 2007).
Masalah dosis jelas merupakan hal yang penting dalam farmakologi.
Dari kumpulan data seluruh percobaan, muncul bukti yang jelas dan
konsisten yang menunjukkan bahwa pengenceran yang lebih rendah (4C)
kurang efektif (atau sama sekali tidak aktif pada parameter OF)
dibandingkan pengenceran yang lebih tinggi (9C dan 30C).
Namun, polanya jauh lebih kompleks karena, dalam pengujian LD dimana
data paling signifikan diamati, pengenceran 7C dan 30C menunjukkan
efek yang lebih rendah dibandingkan masing-masing 5C dan 9C. Sejumlah
pengamatan—berasal dari beberapa bidang penelitian (Belougne-Malfatti
et al. 1998; Brown dan Ennis 2001; Marotta et al. 2003; Belon et al. 2004;
Eizayaga et al. 2005; Bellavite et al. 2006b; Witt et al. 2006b; al. 2007;
Ruiz-Vega dan Estevez-Delgado 2008; Chirumbolo et al. 2009)—
menyarankan bahwa dalam farmakologi pengenceran tinggi, tidak ada
hubungan linier atau proporsional antara konsentrasi molekul zat aktif
dan efek terapeutik.
Sejauh ini belum ada penjelasan teoretis yang memuaskan atau dapat
menyatukan klaim-klaim ini, meskipun beberapa hipotesis menyatakan
adanya peran struktur nano-heterogen dan dinamika air pelarut (atau air-
etanol) pada skala mesoskopik (Arani dkk. 1995; Del Giudice dan
Preparata 1998; Smith 2004) dan/atau epitaksi (Demangeat et al. 2004;
Elia et al. 2004, 2007; Mastrangelo 2007; Rao et al. 2007; Chaplin 2007;
Demangeat 2009).
Psikofarmakologi (2010) 210:533–545
Kemungkinan target neurologis G. sempervirens dalam pengenceran
tinggi baru-baru ini diidentifikasi oleh penelitian yang menunjukkan bahwa
gelsemine, komponen utama G. sempervirens, merangsang biosintesis
allopregnanolone (3ÿ,5ÿ-THP) di sistem saraf pusat tikus melalui aktivasi
reseptor untuk glisin (Gly-R) (Venard et al.
2008). Baru-baru ini, kelompok yang sama telah menunjukkan bahwa
pengenceran 5C dan 9C dari G. sempervirens dan gelsemine murni
merangsang sintesis 3ÿ,5ÿ-THP di hipokampus dan sumsum tulang
2009). Pengamatan yang sangat menarik adalah bahwa efek G.
sempervirens in vitro dihambat oleh strychnine, suatu penghambat selektif
reseptor glisinergik yang terkenal. Karena allopreganolon disintesis
secara endogen di sistem saraf pusat secara signifikan memodulasi
kecemasan atau mekanisme nosiseptif melalui mode parakrin dan
autokrin (Le Melledo dan Baker 2004; Birzniece et al.
2006; Papadopoulos dkk. 2006; Patte-Mensah dkk. 2006), zat yang
mampu merangsang pembentukan 3ÿ,5ÿ-THP di jaringan saraf tampaknya
berpotensi menarik untuk pengembangan terapi ansiolitik atau analgesik
yang efektif.
Ringkasnya, hasil penelitian ini menunjukkan bahwa beberapa
pengenceran dalam kisaran dosis G. semper-virens yang diselidiki
memberikan efek seperti anxiolytic pada tikus dalam uji terang/gelap dan,
pada tingkat yang lebih rendah, dalam uji lapangan terbuka. Obat tersebut
ditemukan untuk meningkatkan kecenderungan eksplorasi di lingkungan
baru, tanpa efek apa pun pada koordinasi motorik atau sedasi hewan. Ini
adalah salah satunya
pengobatan tradisional pertama, yang secara empiris telah digunakan
pada pasien manusia untuk gejala yang berhubungan dengan kecemasan,
telah terbukti efektif pada hewan percobaan dan terdapat beberapa
hipotesis mengenai target molekulernya dalam sistem saraf pusat.
Ucapan Terima Kasih Pekerjaan ini didukung oleh hibah dari
Laboratoires Boiron srl (Milan, Italia) kepada Universitas Verona dan
dari Kementerian Universitas dan Riset Sains dan Teknologi. Kami
berterima kasih kepada Dr. Paola D'Incau yang telah melakukan
pengkodean sampel uji dan Dr. Jennifer Pascali yang telah melakukan
kromatografi gas dan spektroskopi massa pada sampel obat.
Konflik kepentingan Para penulis menyatakan bahwa mereka tidak mempunyai kepentingan
yang bersaing.
Akses Terbuka Artikel ini didistribusikan di bawah ketentuan Lisensi
Nonkomersial Atribusi Creative Commons yang mengizinkan
penggunaan, distribusi, dan reproduksi nonkomersial dalam media apa
pun, asalkan penulis dan sumber asli dicantumkan.
Referensi
Allgulander C, Bandelow B, Hollander E, Montgomery SA, Nutt DJ,
Okasha A, Pollack MH, Stein DJ, Swinson RP (2003) Rekomendasi
WCA untuk pengobatan jangka panjang gangguan kecemasan
umum. Spektrum SSP 8:53–61
Machine Translated by Google
Psikofarmakologi (2010) 210:533–545
Arani R, Bono I, Del Giudice E, Preparata G (1995) koherensi QED dan
termodinamika air. Int J Mod Phys B9:1813–1841 Bandelow B, Zohar
J, Hollander E, Kasper S, Moller HJ (2002) Pedoman Federasi Masyarakat
Psikiatri Biologis Dunia (WFSBP) untuk pengobatan farmakologis
kecemasan, obsesif-kompulsif, dan stres pasca trauma gangguan.
Psikiatri J Biol Dunia 3:171–199
Barbancey J (1987) Pratique Homéopathique dan psiko-patologi,
Buku II. Edisi Similia, Paris
Bellavite P, Conforti A, Ortolani R (2006a) Imunologi dan homeopati. 3.
Studi eksperimental pada model hewan. Komplemen Berbasis Bukti
Med 3:171–186 Bellavite P, Conforti A,
Pontarollo F, Ortolani R (2006b) Imunologi dan homeopati. 2. Sel sistem
imun dan peradangan. Komplemen Berbasis Evid Alternat Med
3:13–24 Bellavite P, Magnani P, Marzotto M, Conforti A
(2009a) Pengujian pengobatan homeopati pada model perilaku dan
psikopatologis hewan pengerat. Homeopati 98:208–227 Bellavite P,
Magnani P, Zanolin E, Conforti A (2009b)
Dosis homeopati Gelsemium sempervirens meningkatkan perilaku tikus
sebagai respons terhadap lingkungan baru. Jelas. Berdasarkan.
Alternatif Pelengkap. medis. doi:10.1093/ecam/nep139 Belon P,
Cumps J, Ennis M, Mannaioni PF, Roberfroid
M, Sainte-Laudy J, Wiegant FA (2004) Pengenceran histamin memodulasi
aktivasi basofil. Inflamm Res 53:181–188 Belougne-Malfatti E,
Aguejouf O, Doutremepuich F, Belon P,
Doutremepuich C (1998) Kombinasi dua dosis asam asetil salisilat: studi
eksperimental trombosis arteri. Thromb Res 90:215–221 Belzung C,
Griebel G (2001) Mengukur perilaku normal dan patologis seperti
kecemasan pada
tikus: ulasan. Behav Brain Res 125:141–149 Bilkei-Gorzo A, Gyertyan I,
Levay G (1998) kecemasan yang diinduksi mCPP dalam kotak
terang-gelap pada tikus—metode baru untuk menyaring aktivitas ansiolitik.
Psikofarmakologi (Berl) 136:291–298 Binsard AM (1979) Etude psiko-
farmakologi d'Ignatia dan pemulihan hubungan dengan polikrest
lain. Ann Homéop Fr 21:369–378 Binsard AM, Guillemain J, Platel A,
Savini EC, Tetau M (1980) Etude psiko-farmakologi de pengenceran
homeopathiques de Gelse-mium et d'Ignatia. Ann Homéop Fr 22:35–50
Birzniece V, Backstrom T, Johansson IM, Lindblad C, Lundgren P,
Lofgren M, Olsson T, Ragagnin G, Taube M,
Turkmen S, Wahlstrom G, Wang MD, Wihlback AC, Zhu D ( 2006)
Efek steroid neuroaktif pada fungsi kognitif dengan fokus pada sistem
serotonin dan GABA. Brain Res Rev 51:212–239 Boericke W (1927)
Materia medica dengan repertori, edisi ke-9. Boericke & Tafel Inc, Santa
Rosa Bourin M, Hascoet
M (2003) Tes kotak terang/gelap mouse. Euro J
Farmakol 463:55–65
Bourin M, Petit-Demouliere B, Dhonnchadha BN, Hascoet M (2007)
Model hewan kecemasan pada tikus. Fundam Clin Pharmacol
21:567–574
Bousta D, Soulimani R, Jarmouni I, Belon P, Falla J, Foment N, Younos C
(2001) Efek neurotropik, imunologis, dan lambung dari Atropa
belladonna L. dosis rendah, Gelsemium sempervirens L. dan Poumon
histamin pada tikus yang stres. J Ethnopharmacol 74:205–215 Brown
V, Ennis M (2001) Analisis aliran-sitometri aktivasi basofil: penghambatan
histamin pada konsentrasi konvensional dan homeopati. Inflamm
Res 50(2):S47–S48 Carpenter JS, Neal JG (2005)
Modalitas pengobatan komplementer dan alternatif lainnya: akupunktur,
magnet, pijat refleksi, dan homeopati. Am J Med 118(Suppl 12B):109–
117 Chaplin MF (2007) Memori air: gambaran umum.
Homeopati 96:143–150 Chen SW, Min L, Li WJ, Kong WX, Li JF, Zhang
YJ (2004)
Efek minyak esensial angelica dalam tiga tes kecemasan murine.
Perilaku Farmakol Biokimia 79:377–382
543
Chirumbolo S, Brizzi M, Ortolani R, Vella A, Bellavite P (2009)
Penghambatan regulasi membran CD203c pada basofil manusia
dengan pengenceran histamin yang tinggi: studi replikasi terkontrol.
Peradangan Res 58:755–764
Choleris E, Thomas AW, Kavaliers M, Prato FS (2001) Analisis etologi
terperinci dari uji lapangan terbuka tikus: efek diazepam,
klordiazepoksida, dan medan magnet berdenyut frekuensi sangat
rendah. Neurosci Biobehav Rev 25:235–260 Clement Y, Joubert
C, Kopp C, Lepicard EM, Venault P, Misslin R, Cadot M, Chapouthier G
(2007) Kecemasan pada tikus: studi analisis komponen utama.
Neural Plast 2007:35457 Cloos JM, Ferreira V (2009)
Penggunaan benzodiazepin saat ini pada gangguan kecemasan. Curr
Opin Psychiatry 22:90–95 Cole JC, Rodgers RJ
(1994) Evaluasi etologis dari efek pengobatan buspirone akut dan kronis
pada tes labirin plus peningkatan murine: perbandingan dengan
haloperidol. Psikofarmakologi (Berl) 114:288–296 Costall B, Jones
BJ, Kelly ME, Naylor
RJ, Tomkins DM (1989)
Eksplorasi tikus dalam kotak tes hitam putih: validasi sebagai model
kecemasan. Pharmacol Biochem Behav 32:777–785 Crawley
J, Goodwin FK (1980) Laporan awal model perilaku hewan sederhana
untuk efek ansiolitik benzodiazepin.
Pharmacol Biochem Behav 13:167–170
de Araujo FY, Silva MI, Moura BA, de Oliveira GV, Leal LK, Vasconcelos
SM, Viana GS, de Moraes MO, de Sousa FC, Macedo DS (2009)
Efek sistem saraf pusat dari minyak atsiri daun Alpinia zerumbet
pada tikus. J Pharm Pharmacol 61:1521–1527 Del Giudice E,
Preparata G (1998)
Elektrodinamika koherensi dalam air.
Dalam: Schulte J, Endler C (eds) Penelitian mendasar dalam
pengenceran ultratinggi dan homeopati. Kluwer, Dordrecht,
hal 89–100 Demangeat JL (2009) Relaksasi proton air NMR dalam
pengenceran histamin dalam air ultratinggi yang tidak dipanaskan
dan dipanaskan: bukti adanya organisasi supramolekul air yang
bergantung pada
udara. J Mol Liquids 144:32–39 Demangeat JL, Gries P, Poitevin B,
Droesbeke JJ, Zahaf T, Maton F, Piérart C, Muller RN (2004)
Relaksasi longitudinal proton air NMR medan rendah dalam larutan
silika- laktosa disiapkan dalam bahan kaca untuk keperluan farmasi.
Appl Magn Reson 26:465–481
Demarque D, Jouanny J, Poitevin B, Saint-Jean Y (1995) Pharmaco-logie
et matière médicale homéopathique, edisi ke-2. Boiron, CE
DH, Lyon, Perancis
Eizayaga FX, Aguejouf O, Belon P, Doutremepuich C (2005) Agregasi
trombosit pada hipertensi portal dan modifikasinya dengan aspirin
dosis sangat rendah. Patofisiol Haemost Tromb 34:29–34 Elia V,
Baiano S, Duro I, Napoli E, Niccoli M, Nonatelli L (2004)
Sifat fisiko-kimia permanen dari larutan obat homeopati dalam air
yang sangat encer. Homeopati 93:144–150 Elia V, Napoli E, Germano
R (2007)
'Memori Air': teka-teki yang hampir terpecahkan. Struktur disipatif dalam
larutan air yang sangat encer. Homeopati 96:163–169 Fukushiro DF,
Benetti LF, Josino FS, Oliveira GP, Fernandes MD,
Saito LP, Uehara RA, Wuo-Silva R, Oliveira CS, Frussa-Filho R (2009)
Kebaruan lingkungan dan pencahayaan memodifikasi yang diinduksi
etanol efek perilaku lapangan terbuka pada tikus. Farmakol.Bio-
kimia.Perilaku. doi:10.1016/j.pbb.2009.12.001 Greeson JM,
Rosenzweig S, Halbert SC, Cantor IS, Keener
MT, Brainard GC (2008) Penelitian pengobatan integratif di pusat medis
akademis: karakteristik pasien dan hasil kualitas hidup terkait
kesehatan. J Altern Komplemen Med 14:763–767
Griebel G, Belzung C, Misslin R, Vogel E (1993) Paradigma eksplorasi
bebas: metode efektif untuk mengukur perilaku neofobia pada tikus
dan menguji potensi obat pengurang neofobia. Perilaku Farmakol
4:637–644
Machine Translated by Google
544
Grundmann O, Nakajima JI, Seo S, Butterweck V (2007) Efek anti-kecemasan
Apocynum venetum L. dalam uji ketinggian plus labirin. J Ethnopharmacol
110:406–411 Guermonprez M
(2006) Homéopathie, Prinsip–Clinique–Teknik.
CEDH, Paris
Guethlin C, Walach H, Naumann J, Bartsch HH, Rostock M (2009)
Karakteristik pasien kanker yang menggunakan homeopati dibandingkan
dengan perawatan konvensional: studi cross-sectional. Ann Oncol.
doi:10.1093/annonc/mdp421
Guillemain J, Rousseau A, Dorfman P, Tetau M (1989) Recherche dan
psikofarmakologi. Cah Biother 103:53–66 Harada K,
Aota M, Inoue T, Matsuda R, Mihara T, Yamaji T, Ishibashi K, Matsuoka N
(2006) Aktivitas ansiolitik dari antagonis reseptor serotonin 5-HT(2C)
yang kuat dan baru FR260010: perbandingan dengan diazepam dan
buspirone. Eur J Pharmacol 553:171–184 Hascoet M, Bourin M,
Dhonnchadha BA (2001) Paradigma terang–gelap tikus: tinjauan. Prog
Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry 25:141–166 Irwin RE, Adler LS
(2006) Korelasi antara
sifat-sifat yang terkait dengan resistensi herbivora dan penyerbukan: implikasi
terhadap penyerbukan dan perampokan nektar pada tanaman distylous.
Am J Bot 93:64–72 Khan A, Haleem DJ (2007) Toleransi dalam
profil anxiolytic setelah pemberian diazepam berulang kali tetapi tidak buspirone
dikaitkan dengan penurunan respons reseptor 5-HT-1A postsin-aptik.
Acta Biol Hung 58:345–357 Lader M (2008) Efektivitas benzodiazepin:
apakah berhasil atau tidak? Ahli Rev Neurother 8:1189–1191
Lai CK, Chan YW (2009) Konfirmasi keracunan gelsemium dengan analisis
target alkaloid gelsemium beracun dalam urin.
J Racun Anal 33:56–61
Lamprea MR, Cardenas FP, Setem J, Morato S (2008) Respons thigmotactic
di lapangan terbuka. Braz J Med Biol Res 41:135–140 Le Melledo
JM, Baker G (2004) Peran progesteron dan steroid neuroaktif lainnya dalam
gangguan kecemasan. Pakar Rev Neurother 4:851–860
Mamtani R, Cimino A (2002) Panduan pengobatan komplementer dan alternatif
dan relevansinya dalam pengobatan masalah kesehatan mental. Psikiater
Q 73:367–381 Marotta D, Marini A, Banaudha
K, Maharaj SV, Jonas WB (2003)
Efek nonlinier glutamat dan KCl terhadap toksisitas glutamat pada neuron
otak kecil tikus yang dikultur. Int J Neurosci 113:491–502
Mastrangelo D (2007) Hormesis, epitaksi, struktur air cair, dan ilmu homeopati.
Med Sci Monit 13:SR1–SR8 Mathie RT, Robinson TW (2006) Hasil
dari peresepan homeopati dalam praktik medis: studi percontohan prospektif
dan bertarget penelitian. Homeopati 95:199–205
Merali Z, Levac C, Anisman H (2003) Validasi paradigma sederhana dan
relevan secara etologis untuk menilai kecemasan pada tikus.
Biol Psikiatri 54:552–565
Mi XJ, Chen SW, Wang WJ, Wang R, Zhang YJ, Li WJ, Li YL (2005)
Efek paeonol seperti anxiolytic pada tikus. Perilaku Farmakol Biokimia
81:683–687
Miller LG, Koff JM (1994) Interaksi situs benzodiazepin pusat dan perifer dalam
toleransi dan penghentian benzodiazepin. Prog Neuropsychopharmacol
Biol Psychiatry 18:847–857 Morgan AJ, Jorm AF (2009) Hasil upaya
swadaya dalam gangguan kecemasan. Hasil Ahli Rev Pharmacoecon Res
9:445–459 Papadopoulos V, Lecanu L, Brown RC, Han Z, Yao ZX (2006)
Reseptor benzodiazepin tipe perifer dalam biosintesis neurosteroid,
neuropatologi dan gangguan neurologis. Ilmu Saraf 138:749–756
Patte-Mensah C, Kibaly C, Boudard D, Schaeffer V, Begle A, Saredi S, Meyer
L, Mensah-Nyagan AG (2006) Nyeri neurogenik dan sintesis steroid di
sumsum tulang belakang. J Mol Neurosci 28:17–31 Peredery O,
Persinger MA (2004) Pengobatan herbal setelah induksi pasca kejang pada
tikus dengan lithium pilocarpine: Scutellaria
Psikofarmakologi (2010) 210:533–545
lateriflora (Skullcap), Gelsemium sempervirens (Gelsemium) dan Datura
stramonium (Jimson Weed) dapat mencegah perkembangan kejang
spontan. Phytother Res 18:700–705 Pilkington K, Kirkwood G,
Rampes H, Fisher P, Richardson J (2006a)
Homeopati untuk gangguan kecemasan dan kecemasan: tinjauan
sistematis penelitian. Homeopati 95:151–162 Pilkington
K, Rampes H, Richardson J (2006b) Pengobatan komplementer untuk depresi.
Pakar Rev Neurother 6:1741–1751 Pogorelov VM, Lanthorn TH,
Savelieva KV (2007) Penggunaan platform di lapangan terbuka otomatis untuk
meningkatkan penilaian perilaku seperti kecemasan pada tikus. Metode
J Neurosci 162:222–228
Prut L, Belzung C (2003) Bidang terbuka sebagai paradigma untuk mengukur
efek obat pada perilaku seperti kecemasan: tinjauan. Farmakol Eur J
463:3–33
Ramos A, Pereira E, Martins GC, Wehrmeister TD, Izidio GS (2008)
Mengintegrasikan lapangan terbuka, layang plus labirin, dan kotak terang/
gelap untuk menilai berbagai jenis perilaku emosional dalam satu
percobaan. Perilaku Otak Res 193:277–288
Rao ML, Roy R, Bell IR, Hoover R (2007) Peran penting struktur (termasuk
epitaksi) dalam masuk akalnya homeopati.
Homeopati 96:175–182 Ruiz-
Vega G, Estevez-Delgado G (2008) Pemodelan non-linearitas ultra-pengenceran:
kasus gangguan histamin. Dalam: Bonamin LV (ed) Sinyal dan gambar.
Kontribusi dan kontradiksi tentang penelitian pengenceran tinggi.
Dordrecht: Sains Springer, hal 67–82
Sainte-Laud J, Belon P (2009) Penghambatan aktivasi basofil oleh histamin:
model yang sensitif dan dapat direproduksi untuk mempelajari aktivitas
biologis pengenceran tinggi. Homeopati 98:186–197 Schosser A,
Kasper S (2009) Peran farmakogenetika dalam pengobatan depresi dan
gangguan kecemasan. Int Clin Psycho-pharmacol 24:277–288 Schun Y,
Cordell GA (1987) Steroid
sitotoksik Gelsemium sempervirens. J Nat Prod 50:195–198 Shimada T,
Matsumoto K, Osanai M, Matsuda H,
Terasawa K, Watanabe H (1995) Tes transisi terang/gelap yang dimodifikasi
pada tikus: evaluasi obat anxiolytic dan anxio-genic klasik dan diduga.
Gen Pharmacol 26:205–210 Simon P, Dupuis R, Costentin J (1994)
Thigmotaxis sebagai indeks kecemasan pada
tikus. Pengaruh transmisi dopaminergik. Otak Perilaku Res 61:59–64
Smith CW (2004) Efek kuanta dan koherensi dalam sistem air dan kehidupan.
J Altern Complement Med 10:69–78 Sukul NC, Bala
SK, Bhattacharyya B (1986) Efek katalepto-genik yang berkepanjangan dari
obat homoeopati yang dikuatkan. Psikofarma-kologi (Berl) 89:338–339
Thompson LJ, Frazier K,
Stiver S, Styer E (2002) Intoksikasi multipel pada hewan terkait dengan
konsumsi Carolina jessamine (Gelsemium sempervirens). Dokter Hewan
Hum Toxicol 44:272–273
Thompson EA, Mathie RT, Baitson ES, Barron SJ, Berkovitz SR, Brands M,
Fisher P, Kirby TM, Leckridge RW, Mercer SW, Nielsen HJ, Ratsey DH,
Reilly D, Roniger H, Whitmarsh TE (2008) Menuju penetapan standar
untuk hasil yang dilaporkan pasien di rumah sakit homeopati NHS.
Homeopati 97:114–121 Valnet J (1992) Phytotherapie. Maloine,
Paris Vasconcelos SM, Lima SR, Soares PM,
Assreuy AM, de Sousa FC, Lobato RF, Vasconcelos GS, Santi-Gadelha T,
Bezerra EH, Cavada BS, Patrocinio MC (2009) Aksi sentral lektin biji
Araucaria angustifolia pada tikus . Perilaku Epilepsi 15:291–293 Venard
C, Boujedaini N, Belon P, Mensah-Nyagan AG, Patte-Mensah C
(2008) Regulasi biosintesis alopregnanolon neurosteroid di sumsum tulang
belakang tikus oleh glisin dan analog alkaloid strychnine dan gelsemine.
Ilmu Saraf 153:154–161 Venard C, Boujedaini N, Mensah-Nyagan AG,
Patte-Mensah C (2009)
Analisis perbandingan aktivitas gelsemine dan Gelsemium sempervirens
terhadap pembentukan neurosteroid allopregnanolone di tulang belakang
Machine Translated by Google
Psikofarmakologi (2010) 210:533–545
tali pusat dan sistem limbik. Med Alternatif Pelengkap Berbasis
Bukti. doi:10.1093/ecam/
nep083 Walsh RN, Cummins RA (1976) Uji lapangan terbuka: tinjauan kritis.
Psychol Bull 83(3):482–504
Witt CM, Bluth M, Albrecht H, Weisshuhn TE, Baumgartner S, Willich SN
(2007) Bukti in vitro untuk efek potensi homeopati yang tinggi—
tinjauan sistematis literatur.
Lengkapi Ada Med 15:128–138
Yamauchi M, Dostal J, Kimura H, Strohl KP (2008) Efek buspirone pada
perilaku ventilasi pascahipoksia pada strain tikus C57BL/6J dan A/
J. J Appl Fisiol 105:518–526
545
Young R, Johnson DN (1991a) Perbandingan rute pemberian dan efek
waktu zacopride dan buspirone pada tikus menggunakan tes terang/
gelap otomatis. Perilaku Biokimia Farmakol
40:733–737
Young R, Johnson DN (1991b) Peralatan terang/gelap otomatis yang
berguna untuk membandingkan agen ansiolitik. Perilaku Farmakol
Biokimia 40:739–743
Young R, Batkai S, Dukat M, Glennon RA (2006) TDIQ (5, 6, 7, 8-
tetrahydro-1, 3-dioxolo[4, 5-g]isoquinoline) menunjukkan aktivitas
seperti ansiolitik dalam penguburan marmer pengujian pada tikus.
Perilaku Farmakol Biokimia 84:62–73