Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

9 MIKRO
DALAM
Mengontrol Pertumbuhan
Mikroba di Lingkungan

Ikan Mentah, Penawaran Mentah?

Untuk merayakan pekerjaan barunya sebagai ahli kesehatan dan, yang membuatnya ngeri, melihat gatal-gatal menyebar di sekujur
gigi, Brianne mengundang teman sekamarnya, Sasha, untuk tubuhnya. Kulitnya mulai gatal. Sasha memanggil taksi dan membawa

KLINIK menghabiskan malam di kota. James, seorang teman semasa

kuliah, bergabung dengan para wanita di sebuah rumah baru

yang berbiaya rendah.
restoran sushi murah. Mereka duduk di sebuah bar di mana piring-piring kecil berisi
sushi berwarna-warni berputar di ban berjalan di depan mereka. Merasa ingin
bertualang, Brianne pertama kali mencoba sashimi—ikan mentah yang diiris tipis—
yang dicelupkannya ke dalam kecap. Kemudian kelompok memilih berbagai macam
sushi gulung, termasuk tuna mentah dan salmon mentah yang dibungkus dengan
nasi dan rumput laut. Sasha, bagaimanapun, tetap berpegang pada gulungan
kepiting yang sudah dimasak. Setelah beberapa jam mengenang masa sarjana
mereka, pesta kecil itu bubar.
Sekitar jam 4 pagi, Brianne tiba-tiba terbangun dengan sakit
perut yang hebat dan mual. Dia berlari ke kamar mandi untuk
muntah. Saat dia mencuci wajahnya, Brianne melihat ke cermin
Brianne ke ruang gawat darurat rumah sakit terdekat.
Lima hari kemudian, James juga dirawat di rumah sakit setelah dia
menderita sakit perut yang parah. James berteriak ketika dokter
menekan lembut perut kanan bawahnya. Ketika tes menunjukkan
bahwa jumlah sel darah putih James meningkat, dokter menjadwalkan
operasi usus buntu darurat. Selama operasi, ahli bedah memeriksa
usus buntu James dan terkejut saat mengetahui bahwa usus buntu
tersebut tampak normal. Namun, bagian pendek dari usus kecil James
menebal dan mengeluarkan cairan berdarah. Dokter bedah
memutuskan untuk berkonsultasi dengan ahli patologi.
Mungkinkah sushi yang buruk menjadi penyebab penyakit
Brianne dan James? Buka akhir bab ini (hlm. 283) untuk mencari
tahu.

Jelajahi Lebih Lanjut:Uji kesiapan Anda dan terapkan pengetahuan Anda dengan alat pembelajaran dinamis diwww.masteringmicrobiology.com. Jelajahi
Lebih Lanjut:Uji kesiapan Anda dan terapkan pengetahuan Anda dengan alat pembelajaran dinamis di MasteringMicrobiology.

Pengendalian mikroba di fasilitas pelayanan kesehatan, di
laboratorium, dan di rumah merupakan aspek mikrobiologi yang
penting dan praktis. Dalam bab ini kita mempelajari terminologi dan
prinsip pengendalian mikroba, faktor-faktor yang mempengaruhi
kemanjuran pengendalian mikroba, dan berbagai cara kimia dan fisik
untuk mengendalikan mikroorganisme dan virus. (Salah satu aspek
penting dari pengendalian mikroba—penggunaan obat antimikroba
untuk membantu pertahanan tubuh melawan patogen—akan dibahas
di Bab 10.)
Prinsip Dasar Pengendalian
Mikroba
Ilmuwan, profesional kesehatan, peneliti, dan pegawai pemerintah
harus menggunakan terminologi yang tepat ketika mengacu pada
pengendalian mikroba di lingkungan. Pada bagian berikut kita
mempertimbangkan terminologi pengendalian mikroba, konsep
tingkat kematian mikroba, dan tindakan agen antimikroba.
Terminologi Pengendalian Mikroba
|HASIL
SEDANG BELAJAR
9.1Bandingkan sterilisasi, desinfeksi, dan antisepsis serta
jelaskan kegunaan praktisnya.
9.2Bandingkan persyaratannyadegerming, sanitasi,Dan
pasteurisasi.
9.3Bandingkan efek dari-statismelawan-cidalagen kontrol pada
pertumbuhan mikroba.
Penting bagi ahli mikrobiologi, petugas kesehatan, dan pihak lain untuk menggunakan
terminologi yang benar dalam menjelaskan pengendalian mikroba. Meskipun istilah-istilah
tersebut sudah tidak asing lagi bagi masyarakat umum, namun sering kali istilah-istilah
tersebut disalahgunakan.
Dalam arti yang paling ketat,sterilisasimengacu pada penghapusan
atau penghancuransemuamikroba, termasuk virus dan endospora bakteri,
di dalam atau pada suatu benda. (Istilah ini tidak berlaku untukprion, yang
merupakan protein menular, karena teknik sterilisasi standar tidak
menghancurkannya.)
Secara praktis, sterilisasi hanya berarti pemberantasan
mikroorganisme dan virus berbahaya; beberapa mikroba yang tidak
berbahaya mungkin masih ada dan dapat hidup di lingkungan yang
dianggap steril. Contohnya,sterilisasi komersial makanan kaleng tidak
membunuh semua mikroba hipertermofilik; namun, karena mereka
tidak menyebabkan penyakit dan tidak dapat tumbuh serta merusak
makanan pada suhu kamar, maka mereka tidak menjadi perhatian
praktis. Demikian pula, beberapa hipertermofil dapat bertahan hidup
dalam sterilisasi dengan metode laboratorium (akan dibahas segera),
namun mereka tidak menjadi perhatian praktis bagi teknisi karena
mereka tidak dapat tumbuh atau bereproduksi dalam kondisi
laboratorium normal.
Syarataseptik1(A - sep´tik) menggambarkan suatu lingkungan
.
atau prosedur yang bebas kontaminasi olehpatogen.Untuk
1 Dari bahasa YunaniA,artinya “tidak”, dansepsis,artinya “pembusukan”.
BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan 263
Misalnya, jus sayuran dan buah tersedia dalam kemasan aseptik, dan
ahli bedah serta teknisi laboratorium menggunakan teknik aseptik
untuk menghindari kontaminasi pada bidang bedah atau peralatan
laboratorium.
Disinfeksi2mengacu pada penggunaan agen fisik atau kimia yang
dikenal sebagaidesinfektan, termasuk sinar ultraviolet, panas,
alkohol, dan pemutih, untuk menghambat atau menghancurkan
mikroorganisme, terutama patogen. Berbeda dengan sterilisasi,
desinfeksi tidak menjamin hilangnya semua patogen; memang,
disinfektan saja tidak dapat menghambat endospora atau beberapa
virus. Selanjutnya istilahdesinfeksihanya digunakan untuk merujuk
pada perlakuan terhadap benda mati. Ketika suatu bahan kimia
digunakan pada kulit atau jaringan lain, prosesnya disebutantisepsis3-
.
(an-te sep´sis), dan bahan kimianya disebut anantiseptik. Antiseptik
dan disinfektan sering kali memiliki komponen yang sama, namun
disinfektan lebih pekat atau dapat tertinggal di permukaan dalam
jangka waktu yang lebih lama. Tentu saja, beberapa disinfektan,
seperti uap atau pemutih pekat, tidak cocok digunakan sebagai
antiseptik.
Degermingadalah penghilangan mikroba dari suatu permukaan
dengan cara menggosok, seperti saat Anda mencuci tangan atau perawat
menyiapkan area kulit untuk disuntik. Meskipun bahan kimia seperti sabun
atau alkohol biasanya digunakan selama penghilangan kuman, tindakan
menggosok permukaan secara menyeluruh mungkin lebih penting
daripada bahan kimia dalam menghilangkan mikroba.
Sanitasi4adalah proses disinfeksi tempat dan peralatan yang
digunakan masyarakat untuk mengurangi jumlah mikroba
patogen agar memenuhi standar kesehatan masyarakat yang
diterima. Misalnya, uap, air panas bertekanan tinggi, dan scrub
digunakan untuk membersihkan peralatan dan piring restoran,
dan bahan kimia digunakan untuk membersihkan toilet umum.
Jadi, perbedaan antaradesinfektanpiring di rumah dansanitasi
hidangan di restoran adalah arena—pribadi versus publik—
tempat aktivitas berlangsung.
Pasteurisasi5adalah penggunaan panas untuk membunuh
patogen dan mengurangi jumlah mikroorganisme pembusuk dalam
makanan dan minuman. Susu, jus buah, anggur, dan bir biasanya
dipasteurisasi.
Sejauh ini, kita telah melihat bahwa ada dua jenis utama
pengendalian mikroba—sterilisasi, yaitu pemusnahan semua
mikroba, dan antisepsis atau desinfeksi, yang masing-masing
menunjukkan penghancuran sel vegetatif (nonspora) dan banyak
virus. Modifikasi desinfeksi meliputi degerming, sanitasi, dan
pasteurisasi. Beberapa ilmuwan dan dokter menerapkan istilah ini
hanya untuk mikroorganisme patogen.
Selain itu, ilmuwan dan profesional kesehatan menggunakan sufiks
tersebut-stasis/-statis6untuk menunjukkan bahwa zat kimia atau fisik
menghambat metabolisme dan pertumbuhan mikroba tetapi tidak serta merta
membunuh mikroba. Jadi, pendinginan bersifat bakteriostatik bagi sebagian
besar spesies bakteri; itu menghambat pertumbuhan mereka, tapi
Dari bahasa Latinini,berarti "pembalikan", dantidak berdaya,yang berarti “merusak”.
2
3 Dari bahasa Yunanianti,yang berarti “melawan,” dansepsis,yang berarti “pembusukan.”
4 Dari bahasa Latinsanitas,artinya “sehat.”
Dinamakan berdasarkan Louis Pasteur, penemu proses tersebut.
5
6 Yunani, yang berarti “berdiri”—yaitu, relatif tidak berubah.
264 BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan

mereka dapat melanjutkan metabolisme ketika suhu optimal pulih. 109

Sebaliknya, kata-kata yang berakhiran-side/-cidal7mengacu pada agen
108
yang menghancurkan atau menonaktifkan secara permanen suatu jenis
mikroba tertentu;pembunuh virusmenonaktifkan virus,bakterisida 107

Jumlah mikroba yang hidup

90% mati Persentase konstan
membunuh bakteri, danfungisidamembunuh hifa jamur, spora, dan ragi. 106 dari populasi yang masih ada
Pembasmi kuman penyakitadalah bahan kimia yang menghancurkan 1 menit terbunuh setiap menitnya
105
mikroorganisme patogen secara umum.
TABEL 9.1merangkum terminologi yang digunakan untuk menggambarkan 104
90% mati
pengendalian pertumbuhan mikroba.
103
1 menit
102

Tingkat Kematian Mikroba 101

SEDANG BELAJAR |HASIL 100

9.4Mendefinisikanangka kematian mikroba,dan jelaskan signifikansinya dalam
pengendalian mikroba.
Para ilmuwan mendefinisikankematian mikrobasebagai hilangnya
kemampuan reproduksi secara permanen pada kondisi lingkungan ideal. Salah
satu teknik untuk mengevaluasi kemanjuran suatu agen antimikroba adalah
dengan menghitungangka kematian mikroba, yang biasanya ditemukan
konstan dari waktu ke waktu untuk mikroorganisme tertentu dalam kondisi
tertentu(GAMBAR 9.1). Misalkan, misalnya, seorang ilmuwan mengolah kaldu
yang mengandung 1 miliar (109) mikroba dengan agen yang membunuh 90%
mikroba dalam 1 menit. Sel-sel yang paling rentan akan mati terlebih dahulu,
menyisakan 100 juta sel (108) sel yang lebih keras setelahnya
Dari bahasa Latincidium,yang berarti “pembunuhan.”
7 Bila hasil tersebut diplot pada semilogaritma
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Waktu (menit)
▲ GAMBAR 9.1Plot tingkat kematian mikroba.Agen mikrobisida tidak membunuh
semua sel secara bersamaan. Sebaliknya, mereka membunuh sel dalam persentase yang
konstan dari waktu ke waktu—dalam hal ini, 90% per menit. Pada grafik semilogaritma ini,
angka kematian yang konstan ditunjukkan dengan garis lurus.Berapa menit yang
diperlukan untuk sterilisasi pada kasus ini?
memerlukan waktu 9 menit untuk mencapai sterilisasi.
Gambar 9.1Untuk mikroba dalam kondisi ini, agen mikrobisida ini
menit pertama. Setelah satu menit pengobatan, 90% lainnya meninggal,
menyisakan 10 juta (107) sel yang memiliki resistensi lebih besar dan
memerlukan paparan lebih lama terhadap agen sebelum mati. Perhatikan
bahwa dalam kasus ini, setiap menit penuh mengurangi jumlah sel hidup
sebanyak 10 kali lipat. Kaldu akan menjadi steril bila semua selnya mati.

MEJA9.1 Terminologi Pengendalian Mikroba

Ketentuan Definisi Contoh Komentar

Antisepsis Pengurangan jumlah mikroorganisme
dan virus, khususnya patogen
potensial, pada jaringan hidup
Aseptik Mengacu pada lingkungan atau prosedur
yang bebas dari kontaminan patogen
- sariawan Akhiran yang menunjukkan pemusnahan suatu
Yodium; alkohol Antiseptik sering kali merupakan disinfektan
yang kekuatannya telah dikurangi agar aman
bagi jaringan hidup.
Persiapan bidang bedah; cuci tangan; Ilmuwan, teknisi laboratorium, dan petugas
sterilisasi api peralatan laboratorium kesehatan secara rutin mengikuti teknik
aseptik standar.
Bakterisida; fungisida; bahan pembasmi kuman; Bahan pembasmi kuman termasuk etilen

- cidal jenis mikroba pembunuh virus oksida, propilen oksida, dan aldehida.

Degerming Penghapusan mikroba dengan cara Cuci tangan; penyeka alkohol di Bahan kimia memainkan peran sekunder dalam
mekanis tempat suntikan penghilangan mikroba secara mekanis.

Disinfeksi Penghancuran sebagian besar mikroorganisme Fenolik; alkohol; aldehida; sabun Istilah ini digunakan terutama dalam kaitannya
dan virus pada jaringan tak hidup dengan patogen.

Pasteurisasi Penggunaan panas untuk menghancurkan patogen Susu pasteurisasi dan jus buah Perlakuan panas dilakukan secara singkat untuk
dan mengurangi jumlah mikroorganisme pembusuk meminimalkan perubahan rasa dan nutrisi; mikroba masih
pada makanan dan minuman tersisa dan akhirnya menyebabkan pembusukan.

Sanitasi Penghapusan patogen dari objek untuk Mencuci peralatan makan dengan air Standar sanitasi berbeda-beda di
memenuhi standar kesehatan masyarakat mendidih di restoran setiap yurisdiksi pemerintah.
- stasis Akhiran yang menunjukkan penghambatan tetapi bakteriostatik; fungistatik; virustatic Agen germistatik mencakup beberapa bahan kimia,
- statis bukan penghancuran total suatu jenis mikroba pendinginan, dan pembekuan.

Sterilisasi Pemusnahan seluruh mikroorganisme dan virus yang ada Persiapan media kultur mikrobiologi Biasanya dicapai dengan uap di bawah tekanan,
pada atau pada suatu benda dan makanan kaleng pembakaran, atau gas etilen oksida.

grafik—di manakamu-sumbu adalah logaritma danX-sumbu adalah
aritmatika—plot angka kematian mikroba adalah garis lurus; artinya,
angka kematian mikroba adalah konstan.
Aksi Agen Antimikroba
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.5Jelaskan bagaimana agen antimikroba bekerja terhadap dinding
sel, membran sitoplasma, protein, dan asam nukleat.
Ada banyak jenis pengendalian mikroba secara kimia dan fisik, namun
cara kerjanya terbagi dalam dua kategori dasar: pengendalian yang
mengganggu integritas sel dengan mengubah dinding sel atau
membran sitoplasma dan pengendalian yang mengganggu
metabolisme dan reproduksi sel dengan mengganggu proses
metabolisme. struktur protein dan asam nukleat.
Perubahan Dinding dan Membran Sel
Dinding sel menjaga integritas sel dengan melawan efek
osmosis ketika sel berada dalam larutan hipotonik. Jika dinding
dirusak oleh faktor fisik atau kimia, hal ini tidak lagi dapat
mencegah pecahnya sel ketika air masuk ke dalam sel melalui
osmosis (lihat Gambar 3.20).
Di bawah dinding sel, membran sitoplasma pada dasarnya
bertindak sebagai kantong yang berisi sitoplasma dan mengontrol
jalannya bahan kimia masuk dan keluar sel. Kerusakan parah pada
protein membran atau fosfolipid oleh agen fisik atau kimia
menyebabkan isi sel bocor—yang, jika tidak segera diperbaiki,
akan menyebabkan kematian.
Pada virus beramplop, amplop merupakan membran yang
tersusun dari protein dan fosfolipid yang bertanggung jawab untuk
menempelnya virus pada sel targetnya. Kerusakan pada selubung
oleh agen fisik atau kimia akan mengganggu replikasi virus secara
fatal. Kurangnya selubung pada virus yang tidak berselubung
menyebabkan toleransi yang lebih besar terhadap kondisi lingkungan
yang keras, termasuk agen antimikroba.
Kerusakan Protein dan Asam Nukleat
Protein mengatur metabolisme sel, berfungsi sebagai enzim dalam
sebagian besar reaksi metabolisme, dan membentuk komponen
struktural pada membran dan sitoplasma. Seperti yang telah kita lihat,
fungsi protein bergantung pada bentuk tiga dimensi yang tepat, yang
dipertahankan oleh ikatan hidrogen dan disulfida antara asam amino.
Ketika ikatan ini diputus oleh panas yang ekstrim atau bahan kimia
tertentu, bentuk protein berubah (lihat Gambar 5.8). Seperti
terdenaturasiprotein berhenti berfungsi, menyebabkan kematian sel.
Bahan kimia, radiasi, dan panas juga dapat mengubah dan
bahkan menghancurkan asam nukleat. Mengingat gen sel atau
virus terdiri dari asam nukleat, gangguan pada molekul ini dapat
menghasilkan mutasi yang fatal. Selain itu, bagian ribosom yang
benar-benar mengkatalisis sintesis protein adalah a
BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan 265
ribozim—yaitu, molekul RNA enzimatik. Oleh karena itu, agen
fisik atau kimia yang mengganggu asam nukleat juga
menghentikan sintesis protein.
Para ilmuwan dan petugas kesehatan mempunyai banyak bahan
kimia dan fisik untuk mengendalikan pertumbuhan dan aktivitas
mikroba. Pada bagian selanjutnya kita mempertimbangkan faktor dan
kondisi yang harus dipertimbangkan dalam memilih metode
pengendalian tertentu serta beberapa cara untuk mengevaluasi
efektivitas suatu metode.
KATAKAN KENAPA
Mengapa susu pada akhirnya menjadi “buruk” meskipun telah dipasteurisasi?
Pemilihan Metode
Pengendalian Mikroba
Idealnya, agen yang digunakan untuk mengendalikan mikroba harus
murah, bertindak cepat, dan stabil selama penyimpanan. Lebih jauh lagi,
agen yang sempurna akan mengendalikan pertumbuhan dan reproduksi
setiap jenis mikroba namun tidak berbahaya bagi manusia, hewan, dan
benda. Sayangnya, tidak ada produk dan prosedur ideal seperti itu—setiap
agen mempunyai keterbatasan dan kekurangan. Pada bagian selanjutnya
kita membahas faktor-faktor yang mempengaruhi kemanjuran metode
antimikroba.
Faktor-Faktor yang Mempengaruhi
Kemanjuran Metode Antimikroba
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.6Sebutkan faktor-faktor yang perlu dipertimbangkan dalam memilih metode
pengendalian mikroba.
9.7Identifikasi tiga kelompok mikroba yang paling resisten dan jelaskan
mengapa mereka resisten terhadap banyak agen antimikroba.
9.8Diskusikan kondisi lingkungan yang dapat
mempengaruhi efektivitas agen antimikroba.
Dalam setiap situasi, ahli mikrobiologi, petugas laboratorium,
dan staf medis harus mempertimbangkan setidaknya tiga
faktor: sifat lokasi yang akan dirawat, tingkat kerentanan
mikroba yang terlibat, dan kondisi lingkungan yang terkait.
Situs yang Akan Diobati
Dalam banyak kasus, pilihan metode antimikroba bergantung
pada sifat area yang akan diobati. Misalnya, bahan kimia keras dan
panas ekstrem tidak boleh digunakan pada manusia, hewan, dan
benda rapuh, seperti katup jantung buatan dan peralatan plastik.
Terlebih lagi, ketika melakukan prosedur medis, tenaga medis
harus memilih metode dan tingkat pengendalian mikroba
berdasarkan lokasi prosedur karena lokasinya sangat besar.
266 BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan
mempengaruhi potensi infeksi berikutnya. Misalnya penggunaan alat
kesehatan yang menembus pertahanan luar tubuh, seperti jarum
suntik dan pisau bedah, memiliki potensi infeksi yang lebih besar
sehingga harus disterilkan; namun, desinfeksi mungkin cukup untuk
benda-benda yang hanya bersentuhan dengan permukaan selaput
lendir atau kulit. Dalam kasus terakhir, sterilisasi hanya diperlukan jika
pasien mengalami gangguan sistem imun.
Kerentanan Relatif Mikroorganisme
Meskipun tingkat kematian mikroba biasanya konstan untuk agen
tertentu yang bekerja melawan satu mikroba, tingkat kematian
terkadang sangat bervariasi—antara mikroorganisme dan virus.
Mikroba berada dalam satu rangkaian dari yang paling rentan hingga
yang paling resisten terhadap agen antimikroba. Misalnya,amplop
virus, seperti HIV, lebih rentan terhadap agen antimikroba dan panas
dibandingkanvirus yang tidak berselubung,seperti virus polio, karena
selubung virus lebih mudah dirusak dibandingkan lapisan protein
virus yang tidak berselubung. Kerentanan relatif mikroba terhadap
agen antimikroba diilustrasikan padaGAMBAR 9.2.
Seringkali, para ilmuwan dan tenaga medis memilih metode untuk
membunuh mikroorganisme paling kuat yang ada, dengan asumsi bahwa
pengobatan tersebut akan membunuh mikroba yang lebih rapuh juga. Mikroba
yang paling resisten adalah sebagai berikut:
■ Endospora bakteri.Endospora dariBasil(ba-sil´u
DanKlostridium(klos-trid´e Sayam) adalah bentuk yang paling tangguh
.
- kamu
kehidupan. Mereka dapat bertahan hidup pada suhu ekstrem,
keasaman, dan kekeringan serta tahan terhadap banyak
disinfektan kimia. Misalnya, endospora dapat bertahan lebih
dari 20 tahun dalam alkohol 70%, dan para ilmuwan telah
menemukan endospora yang hidup yang dibalsem dengan
mumi Mesir ribuan tahun yang lalu.
■ Spesies darimikobakterium. Dinding sel anggota genus ini,
sepertiMycobacterium tuberkulosis(MSaya - ko- bak-te ulang - kamu
. .
śis), mengandung sejumlah besar lipid lilin.
terlalu-ber-kyuSaya-lihatlah
.
Paling tahan
Prion
Endospora bakteri
mikobakteri
Kista protozoa
Protozoa tahap aktif (trofozoit)
Kebanyakan bakteri Gram-negatif
jamur
Virus yang tidak berselubung
Sebagian besar bakteri Gram positif
Virus yang diselimuti
Paling rentan
▲ GAMBAR 9.2Kerentanan relatif mikroba terhadap agen antimikroba.
Mengapa virus yang tidak berselubung umumnya lebih resisten dibandingkan
virus yang berselubung?
lapisan protein.
Gambar 9.2Selubung fosfolipid biasanya lebih rapuh dibandingkan
Lilin memungkinkan bakteri ini bertahan dalam pengeringan dan melindungi
mereka dari sebagian besar bahan kimia berbasis air; oleh karena itu, tenaga
medis harus menggunakan disinfektan atau panas yang kuat untuk merawat
apapun yang bersentuhan dengan pasien tuberkulosis, termasuk peralatan,
perlengkapan, dan kamar pasien.
■ Kista protozoa.Dinding kista protozoa mencegah masuknya
sebagian besar disinfektan, melindungi dari kekeringan, dan
melindungi dari radiasi dan panas.
Prion, yang merupakan protein menular yang menyebabkan penyakit
degeneratif pada otak, lebih tahan dibandingkan makhluk hidup mana pun.
Efektivitas germisida dapat diklasifikasikan menjadi tinggi, sedang, atau
rendah, tergantung pada kemampuannya dalam menonaktifkan atau
menghancurkan mikroorganisme pada peralatan medis yang tidak dapat
disterilkan dengan panas.Pembasmi kuman tingkat tinggimembunuh semua
patogen, termasuk endospora bakteri. Profesional perawatan kesehatan
menggunakannya untuk mensterilkan instrumen invasif seperti kateter, implan,
dan bagian mesin jantung-paru.Pembasmi kuman tingkat menengah
membunuh spora jamur, kista protozoa, virus, dan bakteri patogen tetapi tidak
membunuh endospora bakteri. Mereka digunakan untuk mendisinfeksi
instrumen yang bersentuhan dengan selaput lendir namun tidak invasif, seperti
peralatan pernapasan dan endoskopi. Pembasmi kuman tingkat rendah
menghilangkan bakteri vegetatif, jamur, protozoa, dan beberapa virus; mereka
digunakan untuk mendisinfeksi barang-barang yang hanya bersentuhan
SayaS) dengan kulit pasien, seperti furnitur dan elektroda.
Keadaan lingkungan
Suhu dan pH mempengaruhi tingkat kematian mikroba dan kemanjuran
metode antimikroba. Disinfektan hangat, misalnya, umumnya bekerja
lebih baik daripada disinfektan dingin karena bahan kimia bereaksi lebih
cepat pada suhu yang lebih tinggi(GAMBAR 9.3). Kondisi asam
meningkatkan efek antimikroba dari panas. Beberapa disinfektan kimia,
seperti pemutih klorin rumah tangga, lebih efektif pada pH rendah.
Bahan organik, seperti lemak, feses, muntahan, darah, dan
. .
SayaM
matriks biofilm antar sel, mengganggu penetrasi panas, bahan
kimia, dan beberapa bentuk radiasi, dan dalam beberapa bentuk.
105
104
Jumlah mikroba yang hidup
103
20°C
45°C
102
101
100
2 4 6 8 10
Waktu (menit)
▲ GAMBAR 9.3Pengaruh suhu terhadap kemanjuran bahan kimia
antimikroba.Grafik semilogaritmik ini menunjukkan bahwa angka kematian mikroba lebih
tinggi pada suhu yang lebih tinggi; untuk membunuh mikroba dalam jumlah yang sama,
disinfektan ini hanya memerlukan waktu 2 menit pada suhu 45°C dan 7 menit pada suhu
20°C.

PENYAKIT YANG MUNCUL
AcanthamoebaKeratitis
Tim menyukai danau itu; Faktanya,
pacarnya mengatakan bahwa dia lebih
seperti ikan daripada manusia. Mereka
menghabiskan seluruh waktu luangnya
dengan berenang, bermain ski air,
menyelam, dan berjemur, hingga Tim
bertemu dengan amuba bersel tunggal,
Acanthamoeba.
Tim memperhatikan sesuatu
salah ketika mata kanannya mulai sakit, memerah, dan menjadi sangat
sensitif terhadap cahaya sehingga dia tidak tahan berada di luar. Dua hari
kemudian, rasa sakitnya sangat menyiksa, belum pernah Tim alami
sebelumnya. Rasanya seperti ada yang menumbuk pecahan kaca ke bagian
depan matanya dan di saat yang sama dengan cepat memasukkan ribuan
jarum kecil ke bagian belakang matanya. Dengan mata bengkak tertutup
dan air mata mengalir di wajahnya, Tim mencari bantuan medis.
Dokter mendiagnosisAcanthamoebakeratitis, yaitu peradangan
pada penutup mata (kornea) yang disebabkan oleh amuba.
dalam kasus ini bahan-bahan ini menonaktifkan disinfektan kimia. Oleh karena
itu, penting untuk membersihkan benda sebelum sterilisasi atau disinfeksi agar
zat antimikroba dapat bersentuhan secara menyeluruh dengan seluruh
permukaan benda.
Tingkat Keamanan Hayati
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.9Jelaskan empat tingkat keamanan hayati, dan berikan contoh
mikroba yang ditangani pada setiap tingkat.
Pusat Pengendalian dan Pencegahan Penyakit (CDC) telah menetapkan
pedoman untuk empat tingkat keamanan di laboratorium mikrobiologi
yang menangani patogen. Setiap tingkat meningkatkan keselamatan
personel dan lingkungan dengan menetapkan teknik laboratorium yang
semakin ketat, penggunaan peralatan keselamatan, dan desain fasilitas.
Keamanan Hayati Tingkat 1 (BSL-1)cocok untuk menangani mikroba,
sepertiEscherichia coli(esh-eSaya-riḱ- ASayako
e
. .
ĺı ), tidak diketahui menyebabkan penyakit
.
pada manusia yang sehat. Tindakan pencegahan dalam BSL-1 sangat minim dan
mencakup mencuci tangan dengan sabun antibakteri dan mencuci permukaan
dengan disinfektan.
BSL-2fasilitasnya mirip dengan BSL-1 tetapi dirancang untuk
menangani agen yang cukup berbahaya, seperti virus hepatitis dan
influenza serta bakteri yang resisten terhadap metisilin.Stafilokokus
aureus(staf'i-lo - kok'uSayasakit - kamu
Sayas) (MRSA). Akses ke laboratorium BSL-2
. .
terbatas ketika pekerjaan sedang dilakukan, tindakan pencegahan ekstrim
dilakukan terhadap benda tajam yang terkontaminasi, dan prosedur yang
dapat menghasilkan aerosol dilakukan di dalam lemari keselamatan (lihat
Gambar 9.11).
BSL-3lebih ketat, mengharuskan semua manipulasi dilakukan di
dalam lemari pengaman yang berisi udara partikulat berefisiensi tinggi
BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan 267
STUDI KASUS
Mikroba eukariotik ini umumnya hidup di
air, antara lain sungai, sumber air panas,
dan danau. Ketika terjebak di bawah lensa
kontak, amuba dapat menembus mata dan
menyebabkan penyakit
keratitis. Kadang-kadang,Acanthamoebajuga dapat masuk ke
dalam tubuh melalui selaput lendir hidung atau melalui luka di kulit.
Penyakit ini telah menjadi ancaman yang muncul dalam masyarakat modern karena mereka dapat
hidup di bak mandi air panas, kolam renang, pancuran, dan keran wastafel.
Dokter meresepkan larutan antiseptik yang harus diteteskan Tim ke
matanya setiap 30 menit, siang dan malam, selama tiga minggu.
Perawatannya menyakitkan dan memakan waktu, tapi setidaknya Tim
dapat mempertahankan penglihatannya tanpa memerlukan transplantasi
kornea. Dia juga belajar melepas lensa kontaknya di danau!
1. Mengapa terdapat lebih banyak kasus keratitis amuba
dibandingkan 100 tahun yang lalu?
(HEPA) filter. BSL-3 juga menetapkan fitur desain khusus untuk
laboratorium. Hal ini termasuk masuk melalui dua set pintu dan
ventilasi sedemikian rupa sehingga udara masuk ke dalam ruangan
hanya melalui pintu yang terbuka. Udara yang keluar dari ruangan
disaring dengan HEPA sebelum dibuang. BSL-3 dirancang untuk
eksperimen pada mikroba seperti bakteri tuberkulosis dan antraks
serta virus demam kuning dan demam berbintik Rocky Mountain.
Laboratorium yang paling aman adalahBSL-4fasilitas yang dirancang
untuk menangani mikroba berbahaya atau eksotik yang menyebabkan penyakit
parah atau fatal pada manusia, seperti virus Ebola, cacar, dan demam Lassa.
Laboratorium BSL-4 merupakan bangunan terpisah atau terisolasi sepenuhnya
dari semua area lain di bangunannya. Masuk dan keluar dikontrol secara ketat
melalui kunci udara yang disegel secara elektronik dengan banyak pancuran,
ruang vakum, ruang sinar ultraviolet, dan tindakan pencegahan keselamatan
lainnya yang dirancang untuk menghancurkan semua jejak biohazard. Semua
udara dan air yang masuk dan keluar fasilitas disaring untuk mencegah
pelepasan yang tidak disengaja. Personil mengenakan “pakaian luar angkasa”
yang dilengkapi dengan selang udara(GAMBAR 9.4). Pakaian dan laboratorium
itu sendiri diberi tekanan sedemikian rupa sehingga mikroba dapat hilang dari
pekerja.
KATAKAN KENAPA
Mengapa pakaian BSL-4 diberi tekanan? Mengapa tidak mengenakan pakaian biasa
yang kuat saja?
Sekarang kita telah mempelajari terminologi dan prinsip umum
pengendalian mikroba dan tingkat keamanan hayati, kita mengalihkan
perhatian kita pada agen fisik dan kimia yang tersedia bagi para
ilmuwan, tenaga medis, dan masyarakat umum untuk mengendalikan
pertumbuhan mikroba.
268 BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan
▲ GAMBAR 9.4Seorang pekerja BSL-4 membawa kultur virus Ebola.
Metode Fisik
Pengendalian Mikroba
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.10Jelaskan lima jenis metode fisik pengendalian
mikroba.
Metode fisik pengendalian mikroba meliputi paparan mikroba
terhadap panas dan dingin yang ekstrim, pengeringan, filtrasi,
tekanan osmotik, dan radiasi.
Metode Terkait Panas
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.11Diskusikan keuntungan dan kerugian menggunakan panas
lembab dalam autoklaf dan panas kering dalam oven untuk
sterilisasi.
9.12Jelaskan kegunaan dariBacillus stearothermophilusendospora
dalam teknik sterilisasi.
9.13Jelaskan pentingnya pasteurisasi, dan jelaskan tiga
metode pasteurisasi yang berbeda.
Panas adalah salah satu cara pengendalian mikroba yang lebih tua
dan umum. Suhu tinggi mengubah sifat protein, mengganggu
integritas membran sitoplasma dan dinding sel, serta mengganggu
fungsi dan struktur asam nukleat. Panas dapat digunakan untuk
sterilisasi, dalam hal ini semua sel dan virus dinonaktifkan, atau untuk
penyiapan makanan kaleng secara komersial. Dalam apa yang disebut
sterilisasi komersial, prokariota hipertermofilik tetap dapat hidup
namun tidak berbahaya karena mereka tidak dapat tumbuh pada
suhu normal (ruangan) di mana makanan kaleng disimpan.
105
104
Jumlah mikroba yang hidup
103
90%
102
D
101 90%
D
100
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24
Waktu (menit)
▲ GAMBAR 9.5Waktu reduksi desimal (D) sebagai ukuran angka kematian
mikroba.D didefinisikan sebagai waktu yang diperlukan untuk membunuh 90%
populasi mikroba. Perhatikan bahwa D adalah konstanta yang tidak bergantung pada
kepadatan awal populasi.Berapa waktu reduksi desimal dari perlakuan panas
terhadap organisme ini? Berapa waktu kematian termalnya?
Gambar 9.5D=5 menit; waktu kematian termal=22,5 menit.
Meskipun mikroorganisme memiliki kerentanan yang berbeda-beda
terhadap panas, hal ini dapat menjadi agen penting dalam pengendalian
mikroba. Hasilnya, para ilmuwan telah mengembangkan konsep dan
terminologi untuk menyampaikan perbedaan kerentanan ini.Titik kematian
termaladalah suhu terendah yang membunuh semua sel dalam kaldu dalam 10
menit, danwaktu kematian termaladalah waktu yang diperlukan untuk
mensterilkan seluruh volume cairan tertentu pada suhu tertentu.
Seperti yang telah kita bahas, kematian sel terjadi secara
logaritmik. Saat mengukur efektivitas sterilisasi panas, peneliti
menghitungwaktu reduksi desimal (D), yaitu waktu yang diperlukan
untuk memusnahkan 90% mikroba dalam suatu sampel
(GAMBAR 9.5). Konsep ini sangat berguna bagi pengolah makanan karena
mereka harus memanaskan makanan untuk menghilangkan endospora
anaerobikKlostridium botulinum(bo-tu ´num), yang bisa
.
Saya -akuSaya
berkecambah dan menghasilkan toksin botulisme yang mengancam jiwa di dalam
kaleng tertutup. Standar dalam pengolahan makanan adalah menggunakan panas
sedemikian rupa sehingga populasinya berjumlah 10 orang12C.botulinumendospora
berkurang menjadi 100(yaitu, 1) endospora (pengurangan 12 kali lipat), yang hanya
menyisakan kemungkinan sangat kecil bahwa kaleng makanan tertentu mengandung
satu endospora. Peneliti telah menghitung bahwa nilai D untukC.botulinum
endospora pada suhu 121°C adalah 0,204 menit, sehingga memerlukan waktu 2,5
menit (0,204×12) untuk mengurangi 1012endospora menjadi 1 endospora.
Panas lembab
Panas lembab (yang biasanya digunakan untuk mendisinfeksi, membersihkan,
mensterilkan, dan mempasteurisasi) membunuh sel dengan mengubah sifat protein
dan menghancurkan membran sitoplasma. Panas lembab lebih efektif dalam
mengendalikan mikroba dibandingkan panas kering karena air merupakan
penghantar panas yang lebih baik dibandingkan udara. Contoh dari dapur Anda
dengan jelas menunjukkan hal ini: Anda dapat dengan aman memasukkan tangan
Anda ke dalam oven pada suhu 350°F selama beberapa saat, tetapi memasukkan
tangan ke dalam air mendidih pada suhu yang lebih rendah yaitu 212°F akan
membuat Anda terbakar parah.
 BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan 269

Metode pertama yang kami pertimbangkan untuk mengendalikan mikroba menggunakan

panas lembab adalah dengan merebus.

MendidihPerebusan membunuh sel vegetatif bakteri dan jamur, trofozoit

protozoa, dan sebagian besar virus dalam waktu 10 menit di permukaan
laut. Berlawanan dengan kepercayaan umum, air yang direbus dengan
cepat tidak lebih panas daripada air yang direbus perlahan; air mendidih
pada tekanan atmosfer normal tidak boleh melebihi titik didihnya (100°C di
permukaan laut) karena uap yang keluar membawa panas berlebih. Tidak
mungkin merebus sesuatu lebih cepat hanya dengan menggunakan lebih
banyak panas; panas tambahan terbawa oleh uap yang keluar. Mendidih
waktuadalah faktor kritisnya. Lebih lanjut, penting untuk disadari bahwa di
tempat yang lebih tinggi, air mendidih pada suhu yang lebih rendah
karena tekanan atmosfer lebih rendah; oleh karena itu, waktu perebusan
yang lebih lama diperlukan di Denver dibandingkan di Los Angeles untuk
mendapatkan efek antimikroba yang sama. (A)
Endospora bakteri, kista protozoa, dan beberapa virus (seperti virus
hepatitis) dapat bertahan hidup pada suhu mendidih di permukaan laut selama petunjuk Tekanan
beberapa menit atau bahkan berjam-jam. Faktanya, karena endospora bakteri Katup untuk uap
knalpot ke mengukur

suasana ke kamar
dapat tahan terhadap perebusan selama lebih dari 20 jam, perebusan tidak Keamanan

katup Knalpot
dianjurkan jika diperlukan sterilisasi yang sebenarnya. Merebus efektif untuk katup
membersihkan peralatan makan restoran atau mendisinfeksi botol bayi.

Uap
AutoklafSecara praktis, sterilisasi yang sebenarnya menggunakan panas
memerlukan suhu yang lebih tinggi dibandingkan dengan air mendidih. Udara

Uap
Untuk mencapai suhu yang diperlukan, tekanan diberikan pada air
jaket
mendidih untuk mencegah keluarnya panas dalam uap. Alasan penerapan Pintu
Bahan untuk
tekanan berhasil mencapai sterilisasi adalah karena suhu saat air mendidih
disterilkan
(dan terbentuknya uap) meningkat seiring dengan meningkatnya tekanan.(
GAMBAR 9.6). Para ilmuwan dan tenaga medis secara rutin menggunakan Perangkap

peralatan yang disebut anautoklafuntuk mensterilkan bahan kimia dan Termometer Pasokan uap
benda yang tahan terhadap panas lembab. Teknik alternatif (akan dibahas
(B)
sebentar lagi) harus digunakan untuk barang-barang yang rusak karena
panas atau air, seperti beberapa plastik dan vitamin. ▲ GAMBAR 9.7Sebuah autoklaf. (A)Foto autoklaf laboratorium.
(B)Skema autoklaf, yang menunjukkan cara kerjanya.

30
Sebuahautoklafterdiri dari ruang tekanan, pipa untuk memasukkan
dan mengevakuasi uap, katup untuk mengeluarkan udara dan mengontrol
25
tekanan, serta pengukur tekanan dan suhu untuk memantau prosedur(
Tekanan di atas normal (psi)

GAMBAR 9.7). Saat uap memasuki ruang autoklaf, uap akan memaksa
20
udara keluar, menaikkan suhu isi, dan meningkatkan tekanan hingga suhu
dan tekanan yang ditentukan tercapai.
15
Para ilmuwan telah menentukan bahwa suhu 121°C, yang
memerlukan penambahan 15 pon per inci persegi (psi)8
10
tekanan di atas tekanan udara normal (lihat Gambar 9.6), menghancurkan
semua mikroba dalam volume kecil dalam waktu sekitar 10 menit. Biasanya,
5
autoklaf menahan tekanan dan suhu selama 15 menit untuk memberikan batas
keamanan. Mensterilkan cairan atau padatan dalam jumlah besar
0
100 110 120 130 140 memperlambat proses karena memerlukan lebih banyak waktu agar panas
Suhu (°C) dapat menembus. Oleh karena itu, diperlukan waktu lebih lama untuk
mensterilkan 1 liter cairan dalam labu dibandingkan volume cairan yang sama
▲ GAMBAR 9.6Hubungan antara suhu dan tekanan.Perhatikan bahwa suhu
yang lebih tinggi—dan, sebagai konsekuensinya, tindakan antimikroba yang lebih yang didistribusikan ke dalam tabung yang lebih kecil. Mengotoklaf zat padat,
besar—berhubungan dengan tekanan yang lebih tinggi.Pasteurisasi susu dengan seperti daging, juga memerlukan waktu ekstra karena panas membutuhkan
suhu sangat tinggi memerlukan suhu 134°C; berapa tekanan yang harus waktu lebih lama untuk menembus ke bagian tengahnya.
diberikan pada susu untuk mencapai suhu tersebut?
Standar Internasional (SI) yang setara dengan 1 psi adalah 6,9×103pascal.
Gambar 9.629 psi. 8
270 BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan
Sterilisasi dalam autoklaf mengharuskan uap dapat bersentuhan
dengan semua cairan dan permukaan yang mungkin terkontaminasi
mikroba; oleh karena itu, benda padat harus dibungkus dengan kain
atau kertas berpori, tidak ditutup dengan plastik atau alumunium foil,
yang keduanya kedap uap. Wadah berisi cairan harus ditutup rapat
agar uap dapat bersirkulasi dengan bebas, dan semua udara harus
dipaksa keluar oleh uap. Karena uap lebih ringan dari udara, maka
uap tidak dapat memaksa udara keluar dari dasar bejana kosong; Oleh
karena itu, wadah kosong harus dimiringkan agar udara dapat keluar.
Para ilmuwan menggunakan beberapa cara untuk memastikan bahwa
autoklaf telah mensterilkan isinya. Yang umum adalah bahan kimia yang
berubah warna ketika kombinasi suhu dan waktu yang tepat telah
tercapai. Seringkali indikator warna seperti itu dicetak dalam pola pada
pita atau kertas sehingga membentuk katasterilatau muncul pola atau
desain. Teknik lain menggunakan manik-manik plastik yang meleleh ketika
kondisi yang tepat terpenuhi.
Indikator biologis sterilitas menggunakan endospora
bakteriBacillus stearothermophilus(ba-sil´u
Sayas ste-ro - ada-ma´fil-uSayaS)
.
diresapi ke dalam pita. Setelah diautoklaf, selotip diinokulasi secara
aseptik ke dalam kaldu steril. Jika tidak muncul pertumbuhan bakteri,
bahan aslinya dianggap steril. Dalam variasi teknik ini, endospora
ditempatkan pada strip dalam satu kompartemen botol yang juga
berisi media pertumbuhan yang mengandung indikator warna pH.
Setelah autoklaf, penghalang antara kedua kompartemen dipecah,
sehingga endospora bersentuhan dengan medium(GAMBAR 9.8).
Dalam hal ini, tidak adanya perubahan warna setelah inkubasi
menunjukkan sterilitas.▶VIDEO TUTOR:Prinsip dari
Autoklaf
PasteurisasiLouis Pasteur mengembangkan metode memanaskan bir
dan anggur secukupnya untuk menghancurkan mikroorganisme
penyebab pembusukan tanpa merusak rasanya. Saat ini, pasteurisasi
juga digunakan untuk membunuh patogen pada susu, es krim, yogurt,
dan jus buah.Brucella melitensis(broo-sel´laSayame-li-ten´sis),
Mycobacterium bovis(bo ´vis), danEscherichia coli, penyebab
.
agen demam tinggi, tuberkulosis sapi, dan satu jenis diare,
dikendalikan dengan cara ini.
Batas yang memungkinkan
uap untuk menembus
Plastik fleksibel
botol kecil
Kaca yang bisa dihancurkan Inkubasi
ampul
Media nutrisi
mengandung pH
indikator warna
Strip endospora Setelah autoklaf, vial fleksibel
diperas untuk memecahkan
ampul dan melepaskannya
medium ke strip spora.
Pasteurisasi bukanlah sterilisasi.TermodurikDan termofilik—tahan
terhadap panas dan menyukai panas—prokariota bertahan dalam
proses pasteurisasi, namun tidak menyebabkan pembusukan dalam
waktu yang relatif singkat ketika makanan yang didinginkan dan
dipasteurisasi disimpan dengan benar sebelum dikonsumsi. Selain itu,
prokariota tersebut umumnya tidak patogen.
Kombinasi waktu dan suhu yang diperlukan untuk pasteurisasi yang
efektif bervariasi menurut produk. Karena susu adalah produk pasteurisasi
yang paling dikenal, kami mempertimbangkan pasteurisasi susu secara
mendetail. Secara historis, susu dipasteurisasi olehmetode batchselama 30
menit pada suhu 63°C, namun sebagian besar pengolah susu saat ini
menggunakan metode suhu tinggi dan waktu singkat yang dikenal sebagai
pasteurisasi kilat,di mana susu mengalir melalui tabung panas yang
menaikkan suhunya hingga 72°C hanya dalam 15 detik. Perawatan ini
secara efektif menghancurkan semua patogen.Pasteurisasi suhu sangat
tinggimemanaskan susu hingga suhu minimal 135°C hanya selama 1 detik,
namun beberapa konsumen menyatakan bahwa hal ini berdampak buruk
pada rasanya.
Sterilisasi Suhu Sangat TinggiIndustri susu dan pengolah makanan
lainnya juga dapat menggunakansterilisasi suhu sangat tinggi,yang
melibatkan pemanasan cepat susu atau cairan lain untuk menghilangkan
semua mikroba hidup. Prosesnya melibatkan melewatkan cairan melalui
uap super panas pada suhu sekitar 140°C selama 1 hingga 3 detik dan
kemudian mendinginkannya dengan cepat. Cairan yang diolah dapat
disimpan tanpa batas waktu pada suhu kamar tanpa pembusukan
mikroba, meskipun degradasi kimia setelah penyimpanan berbulan-bulan
menyebabkan perubahan rasa. Kemasan kecil krimer susu yang disajikan
di restoran sering kali disterilkan dengan metode suhu sangat tinggi.TABEL
9.2merangkum penggunaan panas lembab oleh industri susu untuk
mengendalikan mikroba dalam susu.
Panas Kering
Untuk bahan seperti bubuk dan minyak yang tidak dapat disterilkan
dengan cara direbus atau dengan uap atau untuk bahan yang dapat rusak
jika terkena uap berulang kali (seperti beberapa benda logam), sterilisasi
dapat dilakukan dengan menggunakan panas kering, seperti yang terjadi
pada sebuah oven.
◀ GAMBAR 9.8Indikator sterilitas.Ampul uji endospora
komersial, yang termasuk di antara benda yang akan
media kuning disterilkan. Setelah autoklaf selesai, media yang berisi indikator
berarti spora adalah warna pH dilepaskan ke strip endospora ketika ampul dipecah.
giat; diautoklaf Jika endospora masih hidup, sisa metabolismenya menurunkan
objek tidak pH sehingga mengubah warna medium.
steril.
media merah
berarti spora itu
terbunuh; diautoklaf
objek adalah
steril.

MEJA9.2 Perlakuan Panas Lembab pada Susu
Proses Perlakuan
Pasteurisasi historis (batch). 63°C selama 30 menit
Pasteurisasi kilat 72°C selama 15 detik
Pasteurisasi suhu sangat tinggi 135°C selama 1 detik
Sterilisasi suhu sangat tinggi 140°C selama 1–3 detik
Udara panas adalah bahan sterilisasi yang efektif karena mengubah
sifat protein dan mendorong oksidasi bahan kimia metabolik dan
struktural; Namun, untuk mensterilkan, panas kering memerlukan suhu
yang lebih tinggi untuk waktu yang lebih lama dibandingkan panas lembab
karena panas kering menembus lebih lambat. Misalnya, autoklaf
membutuhkan waktu kurang dari 15 menit untuk mensterilkan suatu
benda pada suhu 121°C, sedangkan oven pada suhu yang sama
memerlukan setidaknya 16 jam untuk mencapai sterilitas. Para ilmuwan
biasanya menggunakan suhu yang lebih tinggi—171°C selama 1 jam atau
160°C selama 2 jam untuk mensterilkan benda dalam oven, namun benda
yang terbuat dari karet, kertas, dan berbagai jenis plastik akan teroksidasi
dengan cepat (terbakar) dalam kondisi ini.
Insinerasi menyeluruh merupakan cara sterilisasi yang paling
utama. Sebagai bagian dari teknik aseptik standar di laboratorium
mikrobiologi, loop inokulasi disterilkan dengan memanaskannya
dalam nyala api pembakar Bunsen atau dengan kumparan pemanas
listrik sampai menyala merah (sekitar 1500°C). Petugas kesehatan
membakar pembalut, tas, dan cangkir kertas yang terkontaminasi,
dan ahli epidemiologi lapangan membakar bangkai hewan yang
menderita penyakit seperti antraks atau bovine spongiform
encephalopathy (penyakit sapi gila).
Pendinginan dan Pembekuan
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.14Jelaskan penggunaan dan pentingnya pendinginan dan pembekuan
dalam membatasi pertumbuhan mikroba.
Dalam banyak situasi, khususnya dalam penyiapan dan penyimpanan
makanan, metode pengendalian mikroba yang paling mudah dilakukan
adalah pendinginan (suhu antara 0°C dan 7°C) atau pembekuan (suhu di
bawah 0°C). Proses-proses ini menurunkan metabolisme, pertumbuhan,
dan reproduksi mikroba karena reaksi kimia terjadi lebih lambat pada suhu
rendah dan karena air cair tidak tersedia pada suhu di bawah nol. Namun
perlu diperhatikan bahwa mikroba psikrofilik (menyukai suhu dingin) dapat
berkembang biak dalam makanan yang didinginkan dan merusak rasa
serta kelayakannya untuk dikonsumsi.
Pendinginan menghentikan pertumbuhan sebagian besar patogen, yang
sebagian besar merupakan bakteri mesofil. Pengecualian penting adalah
bakteriListeria(daftar-te ulang - ASaya),yang dapat berkembang biak hingga berbahaya
. .
kadar dalam makanan yang didinginkan, danYersinia(kamu-dosa - ASaya),yang dapat
.
berkembang biak dalam produk darah yang didinginkan dan
diteruskan ke penerima darah. (Bab 20 dan 21 membahas patogen ini
secara lebih rinci.)
BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan 271
Pembekuan lambat, di mana kristal es memiliki waktu untuk
terbentuk dan menembus membran sel, lebih efektif daripada pembekuan
cepat dalam menghambat metabolisme mikroba, meskipun kerentanan
mikroorganisme terhadap pembekuan juga berbeda-beda. Meskipun kista
cacing pita mati setelah beberapa hari berada di dalam daging beku,
banyak sel bakteri vegetatif, endospora bakteri, dan virus dapat bertahan
hidup pada suhu di bawah titik beku selama bertahun-tahun. Faktanya,
para ilmuwan menyimpan banyak bakteri dan virus dalam freezer bersuhu
rendah pada suhu −30°C hingga −80°C dan mampu menyusun kembali
mikroba menjadi populasi yang layak dengan menghangatkannya dalam
media yang mengandung nutrisi yang tepat. Oleh karena itu, kita harus
berhati-hati dalam mencairkan dan memasak makanan beku karena masih
banyak mengandung mikroba patogen.
Pengeringan dan Liofilisasi
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.15Bandingkan dan kontraskan pengeringan dan liofilisasi.
Pengeringan, atau pengeringan, telah digunakan selama ribuan tahun untuk mengawetkan
makanan seperti buah-buahan, kacang polong, buncis, biji-bijian, kacang-kacangan, dan ragi.
(GAMBAR 9.9). Pengeringan menghambat pertumbuhan mikroba
karena metabolisme membutuhkan air cair. Pengeringan
menghambat penyebaran sebagian besar patogen, termasuk bakteri
penyebab sifilis, gonore, dan bentuk bakteri pneumonia dan diare
yang lebih umum. Namun, sebagian besar jamur dapat tumbuh pada
kismis dan aprikot kering, yang kandungan airnya hanya 16%.
Para ilmuwan menggunakanliofilisasi(akuSaya - of´-i-li-za ´shu
. .
Sayan), sebuah teknologi-
nique menggabungkan pembekuan dan pengeringan, untuk mengawetkan
mikroba dan sel lainnya selama bertahun-tahun. Dalam proses ini, para
ilmuwan langsung membekukan kultur dalam nitrogen cair atau karbon
dioksida beku (es kering); kemudian mereka memasukkannya ke dalam ruang
hampa yang menghilangkan air beku melalui proses yang disebutsublimasi,
dimana air diubah langsung dari padat menjadi gas. Liofilisasi mencegah
pembentukan kristal es berukuran besar dan merusak. Meskipun tidak semua
sel bertahan hidup, cukup banyak sel yang mampu bertahan sehingga kultur
dapat dibentuk kembali beberapa tahun kemudian.
▲ GAMBAR 9.9Penggunaan pengeringan sebagai cara mengawetkan aprikot di
Pakistan.Dalam praktik yang sudah lama dikenal ini, pengeringan menghambat pertumbuhan
mikroba dengan menghilangkan air yang dibutuhkan mikroba untuk metabolisme.
272 BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan
Penyaringan
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.16Jelaskan penggunaan filter untuk desinfeksi dan sterilisasi.
Penyaringanadalah aliran suatu cairan (cairan atau gas) melalui saringan
yang dirancang untuk menjebak partikel—dalam hal ini, sel atau virus—
dan memisahkannya dari cairan. Peneliti sering menggunakan ruang
hampa untuk membantu pergerakan cairan melalui filter(GAMBAR 9.10a).
Filtrasi menjebak mikroba yang lebih besar dari ukuran pori-pori, sehingga
memungkinkan mikroba yang lebih kecil untuk melewatinya. Pada akhir
tahun 1800-an, filter mampu menjebak sel, namun pori-porinya terlalu
besar untuk menjebak patogen penyakit seperti rabies dan campak.
Patogen ini diberi nama demikianvirus yang dapat disaring,yang saat ini
telah disingkat menjadivirus.9Kini, sudah tersedia filter dengan pori-pori
yang cukup kecil untuk menjebak virus, sehingga filtrasi dapat digunakan
untuk mensterilkan bahan yang sensitif terhadap panas seperti larutan
mata, antibiotik, vaksin, vitamin cair, enzim, dan media kultur.
Selama bertahun-tahun, filter telah dibuat dari porselen, kaca, kapas,
asbes, dan tanah diatom, suatu zat yang terdiri dari dinding sel alga bersel
tunggal yang tak terhitung banyaknya yang disebut diatom. Para ilmuwan
saat ini biasanya menggunakan yang tipis (tebalnya hanya 0,1 mm),
berbentuk lingkaranfilter membrandibuat dari nitroselulosa atau plastik
dan mengandung ukuran pori spesifik dengan diameter mulai dari 25 μm
hingga kurang dari 0,01 μm(GAMBAR 9.10b). Pori-pori filter terakhir cukup
kecil untuk menjebak virus kecil dan bahkan beberapa molekul protein
besar. Ahli mikrobiologi
9Latin, yang berarti “racun.”
Media yang tidak steril
Penyaring membran
Untuk menyedot debu
Media steril
(A) (B)
juga menggunakan filtrasi untuk memperkirakan jumlah mikroba dalam
suatu cairan dengan menghitung jumlah yang disimpan pada filter setelah
melewati volume tertentu melalui filter (lihat Gambar 6.24).TABEL 9.3
mencantumkan beberapa ukuran pori filter membran dan mikroba
yang tidak boleh masuk.
Petugas kesehatan dan laboratorium secara rutin menggunakan
filtrasi untuk mencegah kontaminasi mikroba di udara. Petugas medis
memakai masker bedah untuk mencegah mikroba yang dihembuskan
mencemari lingkungan, dan sumbat kapas ditempatkan di wadah kultur
untuk mencegah kontaminasi mikroba di udara. Selain itu,filter udara
partikulat efisiensi tinggi (HEPA).merupakan bagian penting dari lemari
keamanan biologis(GAMBAR 9.11), dan filter HEPA dipasang di saluran
udara di beberapa ruang operasi, ruangan yang ditempati oleh pasien
dengan penyakit yang ditularkan melalui udara seperti tuberkulosis, dan
ruangan untuk pasien dengan gangguan sistem imun, seperti korban luka
bakar dan pasien AIDS.
MEJA9.3 Filter Membran
Ukuran Pori (μm) Mikroba Terkecil Yang Terjebak
5 Alga multiseluler, hewan, dan jamur
3 Ragi dan alga uniseluler yang lebih besar
1.2 Protozoa dan alga uniseluler kecil
0,45 Bakteri terbesar
0,22 Virus terbesar dan bakteri terbanyak
0,025 Virus yang lebih besar dan bakteri lentur
(mikoplasma, rickettsia, klamidia, dan beberapa
spirochetes)
0,01 Virus terkecil
◀ GAMBAR 9.10Peralatan filtrasi yang digunakan
untuk pengendalian mikroba. (A)Perakitan untuk sterilisasi
dengan penyaringan vakum.(B)Filter membran yang terdiri dari
berbagai zat dan pori-pori dengan berbagai ukuran dapat
digunakan untuk menjebak beragam mikroba, di sini bakteri
dikenal sebagai resisten vankomisin. Enterokokus(VRE).
SEM
1 mikron
 BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan 273

Di luar
Tekanan Osmotik

Knalpot HEPA
Kaca pengaman
layar tampilan
SEDANG BELAJAR |HASIL
Saring 9.17Diskusikan penggunaan larutan hipertonik dalam pengendalian mikroba.

Peniup
Metode kuno lainnya dalam pengendalian mikroba adalah
penggunaan garam atau gula konsentrasi tinggi dalam makanan
Pasokan HEPA
Saring untuk menghambat pertumbuhan mikroba dengan cara:tekanan
osmotik. Osmosis adalah pergerakan bersih air melintasi membran
Lampu semipermeabel (seperti membran sitoplasma) dari area dengan
konsentrasi air lebih tinggi ke area dengan konsentrasi air lebih
rendah. Sel dalam larutan garam atau gula hipertonik kehilangan air,
dan sel menyusut (lihat Gambar 3.19b). Penghapusan air menghambat
metabolisme sel karena enzim berfungsi penuh hanya di lingkungan
Kecepatan tinggi
penghalang udara
berair. Jadi, osmosis melindungi madu, dendeng, selai, jeli, ikan asin,
dan beberapa jenis acar dari sebagian besar serangan mikroba.
Jamur memiliki kemampuan lebih besar dibandingkan bakteri dalam
menoleransi lingkungan hipertonik dengan sedikit kelembapan, yang menjelaskan
mengapa jeli di lemari es Anda dapat menumbuhkan koloni jamur.penisilium(penis-sil
´e Sayam) jamur tetapi kecil kemungkinannya untuk menumbuhkan bakteri
.

- kamu

Salmonella(sal´moSaya-tidakSaya).

Radiasi
▲ GAMBAR 9.11Peran filter udara partikulat efisiensi tinggi (HEPA) SEDANG BELAJAR |HASIL
dalam lemari keamanan biologis.Filter HEPA melindungi pekerja dari
paparan mikroba (dengan menjaga penghalang udara yang disaring di 9.18Bedakan antara radiasi pengion dan radiasi nonionisasi dalam
seluruh bukaan kabinet). Rumah sakit juga menggunakan filter HEPA di kaitannya dengan pengendalian mikroba.
saluran udara ruang operasi dan kamar pasien yang sangat menular atau
sistem imunnya lemah.

TINGGILAMPU
Mikroba di Sushi?
Sushi—itu membuat Anda menggeliat atau
mengeluarkan air liur! Meskipun secara teknis istilah ini
mengacu pada nasi, secara umum istilah ini dipahami
sebagai irisan ikan mentah seukuran gigitan yang
disajikan dengan nasi. Sudah lama menjadi makanan
pokok masakan Jepang, sushi telah menjadi populer di
seluruh Amerika Serikat. Tapi bukankah makan ikan
mentah berbahaya? Metode pengendalian mikroba apa
yang diterapkan dalam persiapan sushi?
Memang benar ikan mentah bisa mengandung
mikroorganisme berbahaya. Cacing gelang parasit yang
disebut anisakid umumnya ditemukan di sushi dan
dapat menyebabkan gejala gastrointestinal pada
manusia. Oleh karena itu, sebelum ikan dapat disajikan
mentah, Badan Pengawas Obat dan Makanan AS (FDA)
mengharuskan ikan dibekukan pada suhu −20°C
selama tujuh hari atau pada suhu −20°C.
- 37°C selama 15 jam. Sayangnya, pembekuan tidak
membunuh semua bakteri atau virus patogen.
Konsumen harus menyadari bahwa mereka selalu
menanggung risiko keracunan makanan yang
disebabkan oleh bakteri sepertiStafilokokus aureus
,E.coli, dan spesiesSalmonella Dangetaransetiap
kali mereka makan makanan mentah apa pun,
termasuk sushi, tiram mentah, ceviche, atau
carpaccio.
Meskipun pengunjung cenderung terpaku
pada keamanan ikan mentah, nasi yang
didiamkan pada suhu ruangan juga rentan
terhadap pertumbuhan patogen. Untuk
mengatasi potensi masalah ini, nasi sushi diolah
dengan cuka, yang membuat nasi menjadi asam.
Pada nilai pH di bawah 4,6, beras menjadi terlalu
asam untuk mendukung pertumbuhan sebagian
besar patogen. Bar sushi juga dapat mengurangi
risiko patogen dengan menjaga suhu restoran
tetap dingin. Selain itu, diyakini bahwa wasabi,
warna hijau seperti lobak pedas
pasta yang biasa dimakan dengan sushi,
mengandung sifat antimikroba, meskipun efek
antimikrobanya belum dipahami dengan baik.
Dengan adanya tindakan pencegahan
antimikroba ini, sebagian besar pengunjung
mengonsumsi sushi dengan aman setelah makan
(walaupun wanita hamil dan orang dengan sistem
kekebalan tubuh lemah harus menghindari semua
makanan laut mentah). Jika disiapkan dengan
benar, sushi akan terasa indah, rendah kalori,
sumber asam lemak omega-3 yang menyehatkan
jantung—dan sangat lezat.
274 BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan

Metode fisik lain untuk mengendalikan mikroba adalah penggunaan

radiasi. Ada dua jenis radiasi: radiasi partikulat dan radiasi
elektromagnetik. Radiasi partikulat terdiri dari partikel subatom
berkecepatan tinggi, seperti proton, yang telah dibebaskan dari
atomnya. Radiasi elektromagnetik dapat didefinisikan sebagai energi
tanpa massa yang merambat dalam gelombang dengan kecepatan
cahaya (3×105km/detik). Energi elektromagnetik dilepaskan dari atom
yang telah mengalami perubahan internal. Itupanjang gelombang
radiasi elektromagnetik, yang didefinisikan sebagai jarak antara dua
puncak gelombang, berkisar dari sinar gamma yang sangat pendek;
terhadap sinar X, sinar ultraviolet, dan cahaya tampak; untuk sinar
infra merah panjang; dan terakhir, gelombang radio yang sangat
panjang (lihat Gambar 4.1). Meskipun berbentuk partikel, elektron
juga memiliki sifat gelombang, dengan panjang gelombang yang
bahkan lebih pendek dari sinar gamma.
Semakin pendek panjang gelombang gelombang elektromagnetik, semakin banyak
energi yang dibawanya; oleh karena itu, radiasi dengan panjang gelombang yang lebih
pendek lebih cocok untuk pengendalian mikroba daripada radiasi dengan panjang
gelombang yang lebih panjang, yang membawa lebih sedikit energi dan daya tembusnya
lebih sedikit. Para ilmuwan menggambarkan semua jenis radiasi sebagai salah satunya
Ionisasiataunonionisasiberdasarkan pengaruhnya terhadap bahan kimia di dalam sel.

Radiasi Pengion
Berkas elektron, sinar gamma, dan beberapa sinar X, semuanya memiliki
panjang gelombang lebih pendek dari 1 nmradiasi pengion karena ketika
mereka menumbuk molekul, mereka mempunyai energi yang cukup untuk
mengeluarkan elektron dari atom, sehingga menghasilkan ion. Ion-ion tersebut
mengganggu ikatan hidrogen, mengoksidasi ikatan kovalen ganda, dan
menghasilkan radikal hidroksil yang sangat reaktif (lihat Bab 6). Ion-ion ini pada
gilirannya mengubah sifat molekul lain, khususnya DNA, sehingga
menyebabkan mutasi fatal dan kematian sel.
Berkas elektron dihasilkan olehmesin sinar katoda. Berkas elektron
sangat energik sehingga sangat efektif dalam membunuh mikroba hanya
dalam beberapa detik, namun tidak dapat mensterilkan benda tebal atau
benda yang dilapisi bahan organik dalam jumlah besar. Mereka digunakan
untuk mensterilkan rempah-rempah, daging, peralatan plastik
mikrobiologis, dan perlengkapan gigi dan medis, seperti sarung tangan,
jarum suntik, dan bahan penjahit.
Sinar gamma, yang dipancarkan oleh beberapa unsur radioaktif, seperti
kobalt radioaktif, menembus lebih jauh daripada berkas elektron tetapi
memerlukan waktu berjam-jam untuk membunuh mikroba. Badan Pengawas
Obat dan Makanan AS (FDA) telah menyetujui penggunaan iradiasi gamma
untuk pengendalian mikroba pada daging, rempah-rempah, serta buah-buahan
dan sayuran segar.(GAMBAR 9.12). Iradiasi dengan sinar gamma tidak hanya
membunuh mikroba tetapi juga larva dan telur serangga; itu juga membunuh
sel-sel buah-buahan dan sayuran, mencegah pembusukan mikroba dan
pematangan yang berlebihan.
Konsumen enggan menerima makanan yang diiradiasi. Sejumlah alasan
telah dikemukakan, termasuk ketakutan bahwa radiasi membuat makanan
menjadi radioaktif dan klaim bahwa radiasi mengubah rasa dan nilai gizi
makanan atau menghasilkan bahan kimia yang berpotensi bersifat karsinogenik
(penyebab kanker). Pendukung iradiasi menjawab bahwa radiasi gamma
melewati makanan dan tidak dapat membuatnya menjadi radioaktif seperti
halnya rontgen gigi yang menghasilkan gigi radioaktif, dan mereka mengutip
banyak penelitian yang menyimpulkan bahwa makanan yang diiradiasi itu enak,
bergizi, dan aman.
Non-iradiasi diiradiasi
▲ GAMBAR 9.12Demonstrasi peningkatan umur simpan makanan yang
dicapai dengan radiasi pengion.Simbol radura melingkar digunakan di Amerika
Serikat untuk memberi label pada makanan yang diiradiasi.
Sinar X merambat paling jauh dalam materi, namun energinya lebih
kecil dibandingkan sinar gamma dan memerlukan waktu yang sangat lama
agar dapat digunakan dalam pengendalian mikroba.
Radiasi Nonionisasi
Radiasi elektromagnetik dengan panjang gelombang lebih besar dari 1 nm
tidak memiliki energi yang cukup untuk memaksa elektron keluar dari orbitnya,
sehinggaradiasi nonionisasi. Namun, radiasi tersebut mengandung energi
yang cukup untuk mengeksitasi elektron dan menyebabkan elektron membuat
ikatan kovalen baru, yang dapat mempengaruhi struktur tiga dimensi protein
dan asam nukleat.
Sinar ultraviolet (UV), cahaya tampak, radiasi infra merah, dan gelombang radio
merupakan radiasi nonionisasi. Dari jumlah tersebut, hanya sinar UV yang memiliki
energi yang cukup untuk menjadi agen antimikroba yang praktis. Cahaya tampak dan
gelombang mikro (gelombang radio dengan panjang gelombang yang sangat
pendek) memiliki sedikit manfaat dalam pengendalian mikroba, meskipun
gelombang mikro memanaskan makanan, menghambat pertumbuhan dan
reproduksi mikroba jika makanan menjadi cukup panas. Gelombang mikro yang lebih
energik yang dihasilkan oleh beberapa oven microwave komersial dapat membunuh
spora jamur, sehingga mencegah terbentuknya makanan yang telah diolah.
Sinar UV dengan panjang gelombang 260 nm secara spesifik
diserap oleh basa nukleotida pirimidin yang berdekatan dalam DNA,
menyebabkan basa tersebut membentuk ikatan kovalen satu sama
lain daripada membentuk ikatan hidrogen dengan basa pada untai
DNA komplementer (lihat Gambar 7.25). Sepertipirimidindimer
mendistorsi bentuk DNA, sehingga mustahil bagi sel untuk menyalin
atau mereplikasi materi genetiknya secara akurat. Jika dimer tetap
tidak dikoreksi, sel yang terkena bisa mati.
 BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan 275

MEJA9.4 Metode Fisik Pengendalian Mikroba

metode Kondisi Tindakan Penggunaan Representatif

Panas lembab

Mendidih 10 menit pada suhu 100°C Mendenaturasi protein dan Disinfeksi botol bayi dan sanitasi peralatan
menghancurkan membran masak dan makan restoran
Autoklaf 15 menit pada suhu 121°C Mendenaturasi protein dan Autoklaf: sterilisasi perlengkapan medis dan laboratorium
(memasak dengan tekanan) menghancurkan membran yang tahan terhadap panas dan kelembapan; pressure cooker:
sterilisasi makanan kaleng

Pasteurisasi 15 detik pada 72°C Mendenaturasi protein dan Penghancuran semua patogen dan sebagian besar mikroba
menghancurkan membran pembusuk pada produk susu, jus buah, bir, dan anggur

Suhu sangat tinggi 1–3 detik pada 140°C Mendenaturasi protein dan Sterilisasi produk susu
sterilisasi menghancurkan membran

Panas kering

Udara panas 2 jam pada 160°C atau 1 jam Mendenaturasi protein, Sterilisasi bahan yang sensitif terhadap air, seperti
pada 171°C menghancurkan membran, bubuk, minyak, dan logam
mengoksidasi senyawa metabolik

Pembakaran 1 detik pada suhu lebih dari 1000°C Mengoksidasi segalanya Sterilisasi jalur inokulasi, limbah medis terkontaminasi
sama sekali yang mudah terbakar, dan bangkai yang sakit
Pendinginan 0–7°C Menghambat metabolisme Pengawetan makanan

Pembekuan Di bawah 0°C Menghambat metabolisme Pengawetan makanan, obat-obatan, dan budaya dalam jangka panjang

Pengeringan(pengeringan) Bervariasi tergantung jumlah Menghambat metabolisme Pengawetan makanan

air yang harus dibuang

Liofilisasi – 196°C selama beberapa menit Menghambat metabolisme Penyimpanan kultur bakteri dalam jangka panjang
(pengeringan beku) sambil dikeringkan

Penyaringan
Tekanan Osmotik
Radiasi pengion(berkas
elektron, sinar gamma, sinar X)
Filter menahan mikroba
Paparan hipertonik
solusi
Pemaparan dalam hitungan detik
hingga jam (tergantung pada
panjang gelombang radiasi)
Secara fisik memisahkan mikroba
dari udara dan cairan
Menghambat metabolisme
Menghancurkan DNA
Sterilisasi larutan mata dan enzimatik yang peka
terhadap udara dan panas, vaksin, dan antibiotik
Pengawetan makanan
Sterilisasi peralatan medis dan laboratorium serta
pengawetan makanan

Radiasi nonionisasi Iradiasi dengan Pembentukan dimer timin Disinfeksi dan sterilisasi permukaan serta
(sinar ultraviolet) Panjang gelombang 260 nm menghambat transkripsi dan cairan dan gas transparan
radiasi replikasi DNA

Efektivitas penyinaran UV dipengaruhi oleh fakta bahwa sinar UV tidak

dapat menembus dengan baik. Oleh karena itu, sinar UV cocok terutama
untuk mendisinfeksi udara, cairan transparan, dan permukaan benda,
seperti gunting pangkas rambut dan meja operasi. Beberapa kota
menggunakan iradiasi UV dalam pengolahan limbah. Dengan mengalirkan
air limbah melewati tepian lampu UV, mereka mengurangi jumlah bakteri
tanpa menggunakan klorin, yang dapat merusak lingkungan.
TABEL 9.4merangkum metode fisik pengendalian mikroba
yang dibahas di halaman sebelumnya.
KATAKAN KENAPA
MengapaBasilendospora digunakan sebagai indikator sterilitas?
(Lihat Gambar 9.8.)
Metode Kimia
Pengendalian Mikroba
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.19Bandingkan dan kontraskan sembilan jenis utama bahan kimia
antimikroba, dan diskusikan aspek positif dan negatifnya
masing-masing.
Meskipun bahan fisik terkadang digunakan untuk disinfeksi,
antisepsis, dan pengawetan, bahan kimia lebih sering digunakan
untuk tujuan ini. Seperti yang telah kita lihat, bahan kimia
mempunyai efek merugikan pada dinding sel mikroba, membran
sitoplasma, protein, atau DNA. Seperti halnya agen fisik, efek agen
kimia bervariasi menurut suhu, lama pemaparan, dan jumlah
kontaminasi bahan organik di lingkungan.
276 BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan
Efeknya juga bervariasi menurut pH, konsentrasi, dan kesegaran bahan
kimia. Agen kimia cenderung menghancurkan atau menghambat
pertumbuhan virus yang diselimuti dan sel vegetatif bakteri, jamur, dan
protozoa lebih dari spora jamur, kista protozoa, atau endospora bakteri.
Yang terakhir ini sangat resisten terhadap bahan kimia, seperti yang
ditunjukkan oleh berbagai upaya yang gagal untuk mendekontaminasi
endospora antraks di gedung kantor Senat AS yang dikirim ke sana oleh
seorang bioteroris pada tahun 2001.
Pada bagian berikut ini kita membahas sembilan kategori utama
bahan kimia antimikroba yang digunakan sebagai antiseptik dan
desinfektan: fenol, alkohol, halogen, zat pengoksidasi, surfaktan, logam
berat, aldehida, zat gas,Danenzim.Beberapa bahan kimia menggabungkan
satu atau lebih bahan-bahan tersebut. Selain itu, peneliti dan pengolah
makanan terkadang menggunakan antimikroba—zat yang biasanya
digunakan untuk mengobati penyakit—sebagai disinfektan.
Fenol dan Fenolik
SEDANG BELAJAR |HASIL
09.20Bedakan antara fenol dan jenis fenolat, dan diskusikan
aksinya sebagai agen antimikroba.
Pada tahun 1867, Dr. Joseph Lister (1827–1912) mulai menggunakan fenol
(GAMBAR 9.13a)untuk mengurangi infeksi selama operasi. Sebagaimana
dinyatakan sebelumnya, kemanjuran fenol tetap menjadi salah satu standar
yang dapat dibandingkan dengan kerja agen antimikroba lainnya.
Fenolikadalah senyawa yang berasal dari molekul fenol yang telah
dimodifikasi secara kimia dengan penambahan halogen atau gugus fungsi
organik(GAMBAR 9.13b). Misalnya, fenolat terklorinasi mengandung satu
atau lebih atom klor dan memiliki efek antimikroba yang lebih baik serta
bau yang tidak terlalu mengganggu dibandingkan fenol. Minyak alami,
seperti minyak pinus dan cengkeh, juga bersifat fenolik dan dapat
digunakan sebagai antiseptik.
Bisphenolikterdiri dari dua fenolik yang terikat secara kovalen.
Contohnya adalahtriclosan,yang dimasukkan ke dalam berbagai
produk konsumen, termasuk kantong sampah, popok, dan talenan
(GAMBAR 9.13c).
Fenol dan fenolik mengubah sifat protein dan mengganggu membran
sel pada berbagai macam patogen. Bahan ini efektif meskipun terdapat
bahan organik yang mengkontaminasi, seperti muntahan, nanah, air liur,
dan feses, serta tetap aktif pada permukaan.
OH OH Kl
OH
CH3
Kl HAI
ortokresol Triclosan
(a) Fenol (b) Fenolik (c) Bisfenolat
▲ GAMBAR 9.13Fenol dan fenolik. (A)Fenol, molekul alami yang juga
disebut asam karbol.(B)Fenolik, yang merupakan senyawa yang disintesis dari
fenol, memiliki khasiat antimikroba yang lebih besar dengan efek samping yang
lebih sedikit.(C)Bisphenol berpasangan, fenolat terikat secara kovalen.
untuk waktu yang lama. Karena alasan ini, fenolik umumnya digunakan di
lingkungan layanan kesehatan, laboratorium, dan rumah tangga.
Aspek negatif dari fenolik termasuk baunya yang tidak sedap
dan kemungkinan efek sampingnya; misalnya, fenolik mengiritasi
kulit beberapa orang.
Alkohol
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.21Diskusikan tindakan alkohol sebagai agen antimikroba, dan
jelaskan mengapa larutan alkohol 70% hingga 90% lebih
efektif dibandingkan alkohol murni.
Alkoholbersifat bakterisida, fungisida, dan virucidal terhadap virus
yang berselubung; namun, obat ini tidak efektif melawan spora
jamur atau endospora bakteri. Alkohol dianggap sebagai
disinfektan tingkat menengah. Alkohol yang umum digunakan
termasuk alkohol gosok (isopropanol) dan alkohol minum (etanol):
OH
CH3 CH CH3 CH3 CH2OH
Isopropanol Etanol
Isopropanol sedikit lebih unggul dari etanol sebagai desinfektan dan
antiseptik.Tincture(tingk´chu rs), yang merupakan solusi dari other
.
bahan kimia antimikroba dalam alkohol, seringkali lebih efektif dibandingkan bahan
kimia yang sama yang dilarutkan dalam air.
Alkohol mengubah sifat protein dan mengganggu membran sitoplasma.
Anehnya, alkohol murni bukanlah agen antimikroba yang efektif karena
denaturasi protein memerlukan air; oleh karena itu, larutan alkohol 70% hingga
90% biasanya digunakan untuk mengendalikan mikroba. Alkohol menguap
dengan cepat, hal ini menguntungkan karena tidak meninggalkan residu
namun merugikan karena tidak dapat bersentuhan dengan mikroba dalam
jangka waktu yang cukup lama sehingga efektif. Antiseptik berbahan dasar
alkohol lebih efektif dibandingkan sabun dalam menghilangkan bakteri dari
tangan namun tidak efektif melawan beberapa virus, seperti norovirus
penyebab diare. Menyeka kulit dengan alkohol sebelum penyuntikan
menghilangkan lebih banyak mikroba melalui tindakan fisik (penghilangan
kuman) dibandingkan dengan tindakan kimia.
Halogen
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.22Diskusikan jenis dan penggunaan agen antimikroba yang
Kl mengandung halogen.
Halogenadalah empat unsur kimia nonlogam yang sangat
reaktif: yodium, klor, brom, dan fluor. Halogen adalah bahan
kimia antimikroba tingkat menengah yang efektif melawan sel
bakteri dan jamur vegetatif, spora jamur, beberapa endospora
bakteri dan kista protozoa, dan banyak virus. Halogen
digunakan sendiri dan dikombinasikan dengan unsur lain
dalam senyawa organik dan anorganik. Halogen memberikan
efek antimikroba dengan membuka dan mendenaturasi
protein esensial, termasuk enzim.
 BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan 277

BERMANFAATMIKROBA
Sulit Menelan?
Pengendalian bakteri di lingkungan menjadi lebih sulit karena bakteri
tersebut mengembangkan resistensi terhadap disinfektan dan antiseptik
yang umum. Oleh karena itu, para ilmuwan beralih ke parasit alami bakteri
—bakteriofag, yang juga disebut fag—untuk mengendalikan kontaminasi
bakteri.Bakteriofag,yang secara harfiah berarti “pemakan bakteri”, adalah
istilah untuk virus yang secara khusus menyerang strain bakteri tertentu.
Fag itu seperti “bom pintar”; tidak seperti disinfektan dan sebagian besar
obat antimikroba, fag menyerang strain bakteri tertentu dan membiarkan
keju dan daging makan siang.Listeria
membunuh sekitar 20% orang yang sakit karena
menelannya. Anti yang disetujui-Listeriafag
tersedia dalam bentuk larutan yang dapat
disemprotkan oleh pengolah makanan, pemilik
toko makanan, dan konsumen pada makanan SEM 90nm Bakteriofag
untuk mengurangi jumlahnya
dariListeriasel. Beberapa orang berpendapat bahwa gagasan yang sulit untuk diterima, yaitu

bakteri di sekitarnya tidak terluka. Fag menyuntikkan materi genetiknya ke dengan sengaja mengkontaminasi makanan dan peralatan dengan virus terdengar seperti

dalam sel bakteri, menyebabkan sel bakteri menghasilkan ratusan fag baru kebersihan yang buruk.

yang keluar dari bakteri dan membunuhnya. Para peneliti sedang
mengembangkan solusi fag untuk mengendalikan bakteri di lingkungan
medis, makanan, dan pasien.
Pada tahun 2006, Badan Pengawas Obat dan Makanan AS (FDA) menyetujui
penggunaan fag nonmedis yang secara spesifik membunuh bakteri.Listeria
monocytogenes,yang seringkali merupakan kontaminan bakteri
Para pendukung penggunaan fag menunjukkan bahwa seseorang
mengonsumsi jutaan fag setiap hari dalam air dan makanan tanpa efek
buruk. Memang, fag di restoran lebih umum dibandingkan mustard dan
mayones. Para profesional medis di bekas Uni Soviet, khususnya di negara
Georgia, telah menggunakan fag untuk mengobati penyakit selama lebih
dari enam dekade tanpa efek samping yang merugikan.

Yodiumadalah antiseptik yang terkenal. Di masa lalu, para backpacker dan

orang yang berkemah mendisinfeksi air dengan tablet yodium, namun pengalaman
menunjukkan bahwa kista protozoa dapat bertahan dari pengobatan yodium kecuali
konsentrasi yodiumnya sangat tinggi sehingga airnya tidak dapat diminum. Para
pekemah yang berpengetahuan luas sekarang menyaring air sungai dan danau atau
membawa air kemasan.
Secara medis, yodium digunakan sebagai tingtur atau sebagai obat
iodofor,yang merupakan senyawa organik yang mengandung yodium yang
melepaskan yodium secara perlahan. Iodofor memiliki keunggulan karena
tahan lama dan tidak menyebabkan iritasi pada kulit. Betadine adalah contoh
iodophor yang digunakan di institusi medis untuk mempersiapkan kulit untuk
operasi(GAMBAR 9.14)dan suntikan serta untuk mengobati luka bakar.
Kotamadya biasanya menggunakanklorindalam bentuk unsurnya (Cl2)
untuk mengolah air minum, kolam renang, dan air limbah dari instalasi
pengolahan limbah. Senyawa yang mengandung klorin juga merupakan
▲ GAMBAR 9.14 Degerming sebagai persiapan untuk operasi
disinfektan yang efektif. Contohnya termasuknatrium hipoklorit(NaOCl),
di tangan.Betadine, sebuah iodophor, adalah antiseptik yang digunakan di sini.
yang merupakan pemutih klorin rumah tangga, dan kalsium hipoklorit[
Ca(OCl)2]. Industri susu dan restoran menggunakan senyawa ini untuk
mendisinfeksi peralatan, dan bidang medis menggunakannya untuk
mendisinfeksi sistem hemodialisis. Pemutih rumah tangga yang bentuk klorin, namun melepaskan klorin secara perlahan sehingga lebih
diencerkan dengan menambahkan dua tetes ke dalam satu liter air dapat tahan lama.
digunakan dalam keadaan darurat untuk membuat air lebih aman untuk Brom adalah disinfektan yang efektif dalam bak air panas
diminum, namun tidak membunuh semua kista protozoa, endospora karena ia menguap lebih lambat dibandingkan klorin pada suhu
bakteri, atau virus.Klorin dioksida(ClO2) adalah gas yang dapat digunakan tinggi. Brom juga digunakan sebagai alternatif pengganti klorin
untuk mendisinfeksi ruangan yang luas; misalnya, digunakan di gedung dalam desinfeksi kolam renang, menara pendingin, dan wadah air
perkantoran federal yang terkontaminasi spora antraks setelah serangan lainnya.
bioterorisme tahun 2001. Kloramin—kombinasi kimia klorin dan amonia— Fluor dalam bentuk fluoride bersifat antibakteri pada air
digunakan dalam pembalut luka, sebagai antiseptik kulit, dan dalam minum dan pasta gigi serta dapat membantu mengurangi
beberapa persediaan air kota. Kloramin adalah agen antimikroba yang kejadian karies gigi (gigi berlubang). Fluor bekerja antara lain
kurang efektif dibandingkan yang lain dengan mengganggu metabolisme biofilm plak gigi.
278 BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan
Agen Pengoksidasi
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.23Jelaskan penggunaan dan tindakan agen pengoksidasi dalam
pengendalian mikroba.
Peroksida, ozon,Danasam perasetatmembunuh mikroba dengan mengoksidasi
enzimnya, sehingga mencegah metabolisme.Agen pengoksidasiadalah
disinfektan dan antiseptik tingkat tinggi yang bekerja dengan melepaskan
radikal oksigen, yang sangat efektif melawan mikroorganisme anaerobik.
Petugas kesehatan menggunakan zat pengoksidasi untuk membunuh bakteri
anaerob pada luka tusuk yang dalam.
Hidrogen peroksida(H2HAI2) adalah bahan kimia rumah tangga biasa
yang dapat mendisinfeksi dan bahkan mensterilkan permukaan benda
mati seperti lensa kontak, namun sering kali disalahgunakan untuk
mengobati luka terbuka. Hidrogen peroksida bukanlah antiseptik yang
baik untuk luka terbuka karenakatalase—enzim yang dilepaskan dari sel
manusia yang rusak—dengan cepat menetralkan hidrogen peroksida
dengan memecahnya menjadi air dan gas oksigen, yang terlihat seperti
gelembung yang keluar. Meskipun bakteri aerob dan anaerob fakultatif
pada permukaan benda mati juga mengandung katalase, volume
peroksida yang digunakan sebagai disinfektan melebihi jumlah enzim,
sehingga hidrogen peroksida menjadi disinfektan yang berguna. Pengolah
makanan menggunakan hidrogen peroksida panas untuk mensterilkan
kemasan seperti kotak jus.
Ozon(HAI3) adalah bentuk oksigen reaktif yang dihasilkan
ketika molekul oksigen (O2) terkena pelepasan muatan listrik.
Ozon memberi udara “bau segar” setelah badai petir. Beberapa
kota di Kanada dan Eropa mengolah air minum mereka dengan
ozon, bukan klorin. Ozon merupakan agen antimikroba yang lebih
efektif dibandingkan klorin, namun harganya lebih mahal, dan
sulit untuk mempertahankan konsentrasi efektif ozon dalam air.
Asam perasetatadalah sporisida yang sangat efektif yang dapat digunakan
untuk mensterilkan permukaan. Pengolah makanan dan tenaga medis
menggunakan asam perasetat untuk mensterilkan peralatan karena tidak
terpengaruh oleh kontaminan organik, dan tidak meninggalkan residu beracun.
H N+ H
H
(a) Ion amonium
CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH 3 CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH3
N+ CH2 CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2
Cetylpyridinium
(b) Ion amonium kuarter (quat)
▲ GAMBAR 9.15Senyawa amonium kuarter (quats).Quat adalah surfaktan yang mengandung
atom hidrogen dari ion amonium(A)digantikan oleh gugus fungsi lainnya(B).
Surfaktan
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.24Mendefinisikansurfaktan,dan jelaskan tindakan antimikrobanya.
Surfaktanadalah bahan kimia “aktif permukaan”. Salah satu cara kerja
surfaktan adalah dengan mengurangi tegangan permukaan pelarut
seperti air dengan mengurangi gaya tarik-menarik antar molekul. Salah
satu akibat dari penurunan tegangan permukaan ini adalah pelarut
menjadi lebih efektif dalam melarutkan molekul zat terlarut.
Dua surfaktan umum yang terlibat dalam pengendalian mikroba adalah
sabun dan deterjen. Salah satu ujung molekul sabun bersifat hidrofobik karena
tersusun dari asam lemak, dan ujung lainnya bersifat hidrofilik dan bermuatan
negatif. Ketika sabun digunakan untuk mencuci kulit, misalnya, ujung
hidrofobik dari molekul sabun efektif memecah timbunan minyak menjadi
tetesan kecil, dan ujung hidrofilik menarik molekul air; hasilnya adalah tetesan
kecil bahan berminyak—dan bakteri apa pun yang terkandung di dalamnya—
lebih mudah larut dan tersapu oleh air. Oleh karena itu, sabun sendiri
merupakan bahan pembasmi kuman yang baik meskipun merupakan bahan
antimikroba yang buruk; Meskipun sabun rumah tangga bersifat antiseptik, hal
ini sebagian besar disebabkan karena sabun tersebut mengandung bahan
kimia antimikroba.
Sintetisdeterjenadalah surfaktan organik bermuatan positif
yang lebih larut dalam air dibandingkan sabun. Deterjen yang
paling populer untuk pengendalian mikroba adalahsenyawa
amonium kuaterner, atauquat, yang terdiri dari kation amonium
(NH+4) di mana atom hidrogen digantikan oleh fungsi lain-
gugus nasional atau rantai hidrokarbon(GAMBAR 9.15). Quat tidak hanya
bersifat antimikroba tetapi juga tidak berwarna, tidak berasa, dan tidak
berbahaya bagi manusia (kecuali pada konsentrasi tinggi), menjadikannya
ideal untuk banyak aplikasi industri dan medis. Jika obat kumur Anda
berbusa, kemungkinan obat tersebut mengandung senyawa amonium
kuaterner. Contoh quats adalah benzalkonium klorida (Zephiran) dan
cetylpyridinium klorida (digunakan dalam obat kumur Cepacol).
Quat berfungsi dengan mengganggu membran sel sehingga sel
yang terkena kehilangan ion internal yang penting, seperti ion kalium
(K+). Quat bersifat bakterisida (terutama terhadap Gram-positif
CH3
CH2 N+ CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2
CH3 Ekor hidrofobik
Benzalkonium

bakteri), fungisida, dan virucidal terhadap virus berselubung,
namun tidak efektif terhadap virus tak berselubung, mikobakteri,
atau endospora. Kerja senyawa amonium kuaterner terhambat
oleh kontaminan organik, dan senyawa tersebut dinonaktifkan
oleh sabun. Beberapa patogen, sepertiPseudomonas aeruginosa(
jadilah - bulan 'nas a - roo-ji-tidak ituSaya),benar-benar berkembang dalam quats;
. . . .
oleh karena itu, quat diklasifikasikan sebagai disinfektan tingkat rendah.
Logam Berat
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.25Mendefinisikanlogam berat,berikan beberapa contoh, dan jelaskan
penggunaannya dalam pengendalian mikroba.
Ion logam berat, seperti ion arsenik, seng, merkuri, perak, dan
tembaga, bersifat antimikroba karena bergabung dengan atom
belerang dalam molekul sistein, suatu asam amino. Ikatan seperti itu
mengubah sifat protein, menghambat atau menghilangkan fungsinya.
Ion logam berat merupakan agen bakteriostatik dan fungistatik
tingkat rendah, dan dengan beberapa pengecualian penggunaannya
telah digantikan oleh agen antimikroba yang lebih efektif.GAMBAR 9.16
menggambarkan efektivitas logam berat dalam menghambat
reproduksi bakteri pada cawan petri.
Pada suatu waktu, banyak negara mengharuskan mata bayi yang baru lahir
dirawat dengan krim yang mengandung 1%perak nitrat(AgNO3) untuk mencegah
kebutaan yang disebabkan olehNeisseria gonorrhoeae(NSaya - se´re - ASayapergi-atau-
. .
Saya
), yang dapat masuk ke mata bayi saat melewati an
. .
ulang
jalan lahir yang terinfeksi. Saat ini, perak nitrat telah banyak
digantikan oleh salep antimikroba lain yang tidak terlalu mengiritasi
dan juga efektif melawan patogen lain. Perak masih memainkan peran
antimikroba dalam beberapa pembalut bedah, krim luka bakar, dan
kateter.
Selama lebih dari 70 tahun, perusahaan obat telah menggunakanthimerosal,
senyawa yang mengandung merkuri, untuk mengawetkan vaksin. Pada tahun 1999,
Layanan Kesehatan Masyarakat AS merekomendasikan penggunaan alternatif
▲ GAMBAR 9.16Pengaruh ion logam berat terhadap pertumbuhan bakteri.
Zona penghambatan dapat terbentuk karena ion logam berat, seperti amalgam gigi
yang digunakan dalam tambalan dan ditampilkan di tengah pelat, menghambat
reproduksi bakteri melalui pengaruhnya terhadap fungsi protein.
BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan 279
karena merkuri merupakan racun metabolik, meskipun jumlah merkuri
dalam vaksin yang sangat kecil dianggap aman. Saat ini hanya sedikit
vaksin dewasa yang mengandung thimerosal. Ini termasuk pertusis sel
utuh dan beberapa vaksin untuk melawan tetanus, flu, dan meningitis
meningokokus.
Tembaga, yang mengganggu klorofil, digunakan untuk
mengendalikan pertumbuhan alga di waduk, tangki ikan, kolam renang,
dan tangki penyimpanan air. Dengan tidak adanya kontaminan organik,
tembaga merupakan algisida yang efektif dengan konsentrasi serendah 1
ppm (bagian per juta). Selain tembaga, seng dan merkuri digunakan untuk
mengendalikan jamur pada cat.
Aldehida
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.26Bandingkan dan kontraskan formaldehida dan glutaraldehid
sebagai agen antimikroba.
Aldehidaadalah senyawa yang mengandung gugus terminal —CHO (lihat Tabel
2.3 di halaman 40).Glutaraldehida,yang merupakan cairan, dan formaldehida,
yang berupa gas, merupakan bahan kimia yang sangat reaktif dengan rumus
struktur sebagai berikut:
HAI HAI HAI
CH CH2 CH2 CH2 CH HCH
Glutaraldehida Formaldehida
Aldehida berfungsi dalam pengendalian mikroba dengan menghubungkan
gugus fungsi organik amino, hidroksil, sulfhidril, dan karboksil secara silang,
sehingga mendenaturasi protein dan menonaktifkan asam nukleat.
Petugas rumah sakit dan ilmuwan menggunakan larutan
glutaraldehid 2% untuk membunuh bakteri, virus, dan jamur; perawatan
10 menit secara efektif mendisinfeksi sebagian besar objek, termasuk
peralatan medis dan gigi. Ketika waktu pemaparan ditingkatkan menjadi
10 jam, glutaraldehid menjadi steril. Meskipun glutaraldehid tidak terlalu
mengiritasi dan lebih efektif dibandingkan formaldehida, namun harganya
juga lebih mahal.
Petugas pemakaman dan petugas kesehatan menggunakan formaldehida
yang dilarutkan dalam air untuk membuat larutan 37% yang disebutformalin.
Mereka menggunakan formalin untuk pembalseman dan untuk mendisinfeksi
ruangan, instrumen, dan mesin rumah sakit. Formaldehida harus ditangani
dengan hati-hati karena mengiritasi selaput lendir dan bersifat karsinogenik
(menyebabkan kanker).
Agen Gas
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.27Jelaskan kelebihan dan kekurangan agen gas untuk
pengendalian mikroba.
Banyak barang, seperti komponen mesin jantung-paru, jahitan, peralatan laboratorium plastik,
kasur, bantal, katup jantung buatan, kateter, peralatan elektronik, dan makanan kering atau bubuk,
tidak dapat disterilkan dengan mudah menggunakan bahan kimia panas atau yang larut dalam air,
juga tidak dapat disterilkan dengan mudah menggunakan bahan kimia panas atau yang larut dalam
air. penyinaran selalu praktis untuk ukuran besar atau besar
280 BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan
item. Namun, bahan tersebut dapat disterilkan dalam ruang tertutup
yang mengandung gas mikrobisida dan sporisidal yang sangat reaktif
sepertietilen oksida, propilena oksida,Danbeta-propiolakton:
CH2 CH2
HAI HAI
CH2 CH2 CH3 CH CH2 HAI C autoklaf normal; mendidih; paparan formaldehida, glutaraldehid, atau
HAI
Etilen oksida Propilen oksida Beta-propiolakton
Gas-gas ini dengan cepat menembus kertas dan bungkus plastik dan
berdifusi ke setiap celah. Seiring waktu (biasanya 4–18 jam), mereka
mengubah sifat protein dan DNA dengan menghubungkan gugus fungsi
organik secara silang, sehingga membunuh semua yang bersentuhan
tanpa merusak benda mati.
Etilen oksida sering digunakan sebagai bahan sterilisasi gas di rumah sakit
dan klinik gigi, dan NASA menggunakan gas tersebut untuk mensterilkan
pesawat ruang angkasa yang dirancang untuk mendarat di dunia lain agar
mereka tidak secara tidak sengaja mengekspor mikroba terestrial. Rumah sakit
besar sering kali menggunakan ruang etilen oksida, yang tampilannya mirip
dengan autoklaf, untuk mensterilkan instrumen dan peralatan yang sensitif
terhadap panas.
Terlepas dari kelebihannya, bahan gas masih jauh dari sempurna: bahan ini bisa
sangat berbahaya bagi orang yang menggunakannya. Ketika diberikan, bahan-bahan
tersebut harus dikombinasikan dengan 10% hingga 20% gas nitrogen atau karbon
dioksida karena bahan-bahan tersebut seringkali sangat mudah meledak. Selain itu,
bahan-bahan tersebut sangat beracun, sehingga pekerja harus menyiram benda-
benda yang telah disterilkan dengan udara secara ekstensif untuk menghilangkan
sisa-sisa gas (sehingga menambah waktu yang diperlukan untuk menggunakannya).
Terakhir, zat gas, terutama beta-propiolakton, berpotensi bersifat karsinogenik.
Enzim
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.28Jelaskan penggunaan enzim untuk menghilangkan sebagian besar
bakteri dari makanan dan untuk menghilangkan prion dari
peralatan medis.
Banyak organisme menghasilkan bahan kimia yang menghambat atau
menghancurkan berbagai jamur, bakteri, atau virus. Diantaranya adalah
enzim antimikroba, yaitu enzim yang bertindak melawan
mikroorganisme. Misalnya air mata manusia mengandung enzimlisozim,
yang merupakan protein yang mencerna dinding sel peptidoglikan bakteri,
menyebabkan bakteri pecah karena tekanan osmotik sehingga melindungi
mata dari sebagian besar infeksi bakteri.
Para ilmuwan, pengolah makanan, dan tenaga medis sedang meneliti cara
menggunakan enzim antimikroba alami dan yang dimodifikasi secara kimia
untuk mengendalikan mikroba di lingkungan, menghambat pembusukan
mikroba pada makanan dan minuman, dan mengurangi jumlah dan jenis
mikroba pada peralatan medis. Misalnya, pengolah makanan menggunakan
lisozim untuk mengurangi jumlah bakteri dalam keju, dan beberapa pembuat
anggur menggunakan lisozim sebagai pengganti sulfur dioksida (SO2) yang
beracun.2) untuk menghilangkan bakteri yang dapat merusak anggur.
Salah satu perkembangan yang menarik adalah penggunaan enzim untuk
menghilangkan prion yang menyebabkan varian penyakit Creutzfeldt-Jakob
(vCJD), disebut juga penyakit sapi gila. Otak, sumsum tulang belakang,
plasenta, mata, hati, ginjal, kelenjar pituitari, limpa, paru-paru, dan
kelenjar getah bening, serta cairan serebrospinal, dapat menampung
prion. Instrumen medis yang terkontaminasi oleh protein yang sangat
menular dan mematikan ini mungkin tetap menular bahkan setelah
etilen oksida; atau panas kering 24 jam pada suhu 160°C. Sampai saat ini,
metode yang keras, seperti autoklaf dalam natrium hidroksida selama 30
menit atau pembakaran total, diperlukan untuk menghilangkan prion.
Pada tahun 2006, Uni Eropa menyetujui penggunaan enzim tersebut
Prionzimuntuk menghilangkan prion pada instrumen medis dengan aman
dan menyeluruh. Prionzim adalah bahan kimia non-kaustik bersertifikat
pertama yang menargetkan prion.
Antimikroba
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.29Jelaskan jenis antimikroba dan penggunaannya dalam
pengendalian lingkungan mikroorganisme.
Antimikrobatermasuk antibiotik, semisintetik, dan sintetik. Secara
khusus,antibiotikadalah bahan kimia antimikroba yang diproduksi
secara alami oleh mikroorganisme. Ketika para ilmuwan memodifikasi
suatu antibiotik secara kimia, agen tersebut disebut asemi sintetis.
Para ilmuwan juga telah berkembang sepenuhnyasintetisobat
antimikroba. Perbedaan utama antara antimikroba ini dan bahan
kimia yang telah kita bahas dalam bab ini adalah bahwa antimikroba
biasanya digunakan untuk pengobatan penyakit dan bukan untuk
pengendalian mikroba di lingkungan. Meskipun demikian, beberapa
antimikroba digunakan untuk pengendalian di luar tubuh. Misalnya
saja antimikrobanisinDannatamycindigunakan untuk mengurangi
pertumbuhan bakteri dan jamur, masing-masing, dalam keju. (Bab 10
membahas secara lebih rinci sifat dan penggunaan antimikroba untuk
mengobati penyakit menular.)
TABEL 9.5merangkum metode kimia pengendalian mikroba
yang dibahas dalam bab ini.
Metode untuk Mengevaluasi
Disinfektan dan Antiseptik
SEDANG BELAJAR |HASIL
9.30Bandingkan dan kontraskan empat metode yang digunakan untuk
mengukur efektivitas disinfektan dan antiseptik.
Dengan sedikit pengecualian, konsentrasi yang lebih tinggi dan larutan disinfektan
yang lebih segar lebih efektif dibandingkan larutan yang lebih encer dan lebih tua.
Kita juga telah melihat bahwa waktu pemaparan yang lebih lama akan menyebabkan
lebih banyak kematian mikroorganisme. Namun, siapa pun yang menggunakan
disinfektan harus mempertimbangkan apakah konsentrasi yang lebih tinggi dan
paparan yang lebih lama dapat merusak suatu benda atau melukai pasien.
Para ilmuwan telah mengembangkan beberapa metode untuk
mengukur kemanjuran agen antimikroba. Ini termasuk koefisien fenol,
uji penggunaan-pengenceran, uji kapasitas Kelsey-Sykes, dan uji
penggunaan.
 BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan 281

MEJA9.5 Metode Kimia Pengendalian Mikroba

metode Tindakan Tingkat Aktivitas Beberapa Kegunaan

Fenol(asam karbol) Mendenaturasi protein dan Menengah hingga rendah Antiseptik bedah asli; sekarang digantikan oleh fenolat yang
mengganggu membran sel tidak terlalu berbau dan berbahaya

Fenolik(fenol yang diubah secara
kimia; bisfenol terdiri dari
sepasang fenolat yang terikat)
Alkohol
Denaturasi protein dan mengganggu Menengah hingga rendah Disinfektan dan antiseptik
membran sel
Denaturasi protein dan mengganggu Intermediat Disinfektan, antiseptik, dan sebagai pelarut dalam
membran sel tincture

Halogen(yodium, klor,
brom, dan fluor)
Agen pengoksidasi(peroksida,
ozon, dan asam perasetat)
Surfaktan(sabun dan
deterjen)
Agaknya protein mengalami denaturasi
Denaturasi protein melalui oksidasi
Menurunkan tegangan permukaan air
dan mengganggu membran sel
Intermediat Disinfektan, antiseptik, dan penjernihan air
Tinggi Disinfektan, antiseptik untuk luka dalam,
penjernihan air, dan sterilisasi peralatan
pengolahan makanan dan kesehatan
Rendah Sabun: pembasmi kuman; deterjen: antiseptik

Logam berat(arsenik, seng,
merkuri, perak, tembaga, dll.)
Aldehida(glutaraldehid dan
formaldehida)
Agen gas(etilen oksida,
propilen oksida, dan beta-
propiolakton)
Enzim
Antimikroba(antibiotik,
semisintetik, dan sintetik)
Denaturasi protein Rendah Fungistat dalam cat; krim perak nitrat: pembalut
bedah, krim luka bakar, dan kateter; tembaga: algisida
di reservoir air, kolam renang, dan akuarium
Denaturasi protein Tinggi Cairan desinfektan dan pembalseman
Denaturasi protein Tinggi Sterilisasi benda-benda yang sensitif terhadap panas dan air
Denaturasi protein Tinggi terhadap target Penghapusan prion pada instrumen medis
substrat
Bertindak melawan dinding sel, Menengah hingga rendah Disinfektan dan pengobatan penyakit menular
membran sel, sintesis protein, serta
transkripsi dan replikasi DNA

Koefisien Fenol kultur bakteri dan keringkan sebentar pada suhu 37°C. Bakteri yang
digunakan dalam uji standar adalahPseudomonas aeruginosa,Salmonella
Joseph Lister memperkenalkan penggunaan fenol (juga dikenal
sebagai asam karbol) secara luas sebagai antiseptik selama operasi. enterikaserotipe Choleraesuis (kol-er-a-su´is), danS.aureus. Peneliti
kemudian merendam setiap silinder yang terkontaminasi ke dalam
Sejak itu, para peneliti telah mengevaluasi kemanjuran berbagai
pengenceran disinfektan berbeda yang sedang dievaluasi. Setelah 10
disinfektan dan antiseptik dengan menghitung rasio yang
menit, tiap silinder dikeluarkan, dibilas dengan air untuk menghilangkan
membandingkan kemampuan suatu bahan untuk mengendalikan
kelebihan bahan kimia, dan dimasukkan ke dalam tabung baru berisi
mikroba dengan fenol dalam kondisi standar. Rasio ini disebut sebagai
media steril selama 48 jam inkubasi. Agen yang paling efektif adalah agen
koefisien fenol. Koefisien fenol yang lebih besar dari 1,0
yang sepenuhnya mencegah pertumbuhan mikroba pada pengenceran
menunjukkan bahwa suatu zat lebih efektif daripada fenol, dan
tertinggi.
semakin besar rasionya, semakin besar pula efektivitasnya. Misalnya,
Tes penggunaan-pengenceran adalah tes standar saat ini di Amerika
kloramin,campuran klorin dan amonia, memiliki koefisien fenol 133,0
Serikat, meskipun tes ini dikembangkan beberapa dekade yang lalu
bila digunakan melawan bakteriStafilokokus aureus dan koefisien
sebelum munculnya banyak patogen saat ini, termasuk virus hepatitis C,
fenol 100,0 bila digunakan melawanSalmonella enterika(masuk-ter´i-ka
HIV, dan bakteri serta protozoa yang kebal antibiotik. Terlebih lagi,
Saya).Hal ini menunjukkan bahwa kloramin setidaknya 133 kali lebih
disinfektan yang digunakan pada saat itu kurang kuat dibandingkan yang
efektif dibandingkan fenolstafilokokustapi hanya 100 kali lebih efektif
banyak digunakan saat ini. Beberapa lembaga pemerintah telah
melawanSalmonella.Pengukuran koefisien fenol suatu zat telah
menyatakan kekhawatirannya bahwa tes tersebut tidak akurat, dapat
digantikan dengan metode yang lebih baru karena para ilmuwan telah
diandalkan, dan tidak relevan; oleh karena itu, Asosiasi Komunitas Analitik
mengembangkan disinfektan dan antiseptik yang jauh lebih efektif
sedang mengembangkan prosedur standar baru untuk digunakan di
daripada fenol.
Amerika Serikat.

Uji Penggunaan-Pengenceran Uji Kapasitas Kelsey-Sykes

Metode lain untuk mengukur kemanjuran disinfektan dan antiseptik terhadap ItuUji kapasitas Kelsey-Sykesadalah penilaian alternatif standar yang
mikroba tertentu adalahuji penggunaan-pengenceran. Dalam tes ini, seorang disetujui oleh Uni Eropa untuk menentukan kapasitas bahan kimia
peneliti mencelupkan beberapa silinder logam ke dalam kaldu tertentu dalam menghambat pertumbuhan bakteri. Di dalam
282 BAB9Mengontrol Pertumbuhan Mikroba di Lingkungan

Pada pengujian ini, peneliti menambahkan suspensi bakteri seperti
P.aeruginosaatauS.aureusdengan konsentrasi yang sesuai dari bahan kimia
yang diuji. Kemudian pada waktu yang telah ditentukan, mereka memindahkan
sampel campuran tersebut ke dalam media pertumbuhan yang berisi
deaktivator disinfektan. Setelah inkubasi selama 48 jam, kekeruhan dalam
medium menunjukkan bahwa bakteri selamat dari pengobatan. Kurangnya
kekeruhan, yang menunjukkan kurangnya reproduksi bakteri, menunjukkan
waktu minimum yang diperlukan agar disinfektan bisa efektif.
Tes Sedang Digunakan
Meskipun uji koefisien fenol, pengenceran penggunaan, dan kapasitas
Kelsey-Sykes dapat bermanfaat untuk penyaringan awal disinfektan,
namun hal ini juga dapat menyesatkan. Jenis evaluasi ini adalah
ukuran efektivitas dalam kondisi terkendali terhadap satu atau, paling
banyak, beberapa spesies mikroba, namun disinfektan umumnya
digunakan di berbagai lingkungan terhadap beragam populasi
organisme yang sering berasosiasi satu sama lain dalam biofilm
kompleks yang saling berinteraksi. perlindungan.
Metode yang lebih realistis (meskipun lebih memakan waktu) untuk
menentukan kemanjuran suatu bahan kimia disebuttes yang sedang
digunakan. Pada prosedur ini, usap diambil dari benda sebenarnya, seperti
peralatan ruang operasi, baik sebelum maupun sesudah pemberian disinfektan
atau antiseptik. Usapan tersebut kemudian diinokulasi ke dalam media
pertumbuhan yang sesuai, yang setelah inkubasi, diperiksa pertumbuhan
mikrobanya. Uji yang sedang digunakan memungkinkan penentuan yang lebih
akurat mengenai kekuatan yang tepat dan prosedur penerapan bahan
desinfeksi tertentu untuk setiap situasi tertentu.
Perkembangan Mikroba Resisten
Banyak ilmuwan khawatir bahwa orang Amerika terlalu sibuk dengan
antisepsis dan disinfeksi, sebagaimana dibuktikan dengan
menjamurnya produk yang mengandung bahan kimia antiseptik dan
desinfektan. Misalnya, saat ini seseorang dapat membeli sabun
tangan, sampo, pasta gigi, losion tangan, alas kaki untuk sepatu,
deodoran, dan spons mandi yang mengandung antiseptik, serta
kotoran kucing, talenan, bantalan gosok, kantong sampah, mainan
anak-anak, dan lain-lain. deterjen laundry yang mengandung
desinfektan. Hanya ada sedikit bukti bahwa penggunaan produk-
produk tersebut secara luas akan berdampak buruk bagi kesehatan
manusia atau hewan, namun hal ini mendorong berkembangnya
strain mikroba yang resisten terhadap bahan kimia antimikroba:
Ketika sel-sel yang rentan mati, sel-sel yang resisten tetap
berkembang biak. Para ilmuwan telah mengisolasi strain bakteri
patogen, termasukM. tuberkulosis, P. aeruginosa, E. coli, DanS.aureus,
yang kurang rentan terhadap disinfektan dan antiseptik umum.
Sorotan: Sabun Antibakteri: Terlalu Banyak
Manfaatnya?membahas kontroversi mengenai penggunaan
sabun antibakteri.
KATAKAN KENAPA
Banyak disinfektan kimia dan antiseptik bekerja dengan mendenaturasi protein.
Mengapa denaturasi membunuh sel?

TINGGILAMPU
Sabun Antibakteri: Terlalu Banyak Manfaatnya?
Meskipun sabun yang mengandung obat untuk menentukan apakah produk tersebut sebenarnya lebih

antimikroba lebih efektif dibandingkan sabun biasa banyak merugikan daripada menguntungkan.

dalam mengurangi keberadaan mikroba, terdapat
kekhawatiran bahwa penggunaan antimikroba yang
berlebihan berkontribusi pada evolusi
mikroorganisme yang resisten: Sabun antibakteri
membunuh bakteri yang lebih lemah, sehingga
bakteri yang lebih kuat dan lebih resisten dapat
berkembang biak. Pusat Pengendalian dan
Pencegahan Penyakit (CDC) AS telah mengambil
sikap hati-hati, mengakui manfaat sabun antimikroba
dalam keadaan tertentu dan setuju bahwa kita
memerlukan penelitian lebih lanjut.
Siapa sangka kebersihan bisa menjadi begitu
rumit? Sementara itu, sabun apa yang sebaiknya
digunakan? Para ahli tampaknya tidak dapat menyetujui
satu pedoman pun, namun CDC merekomendasikan
penggunaan sabun biasa yang lembut dan mencuci
dengan air hangat yang mengalir setidaknya selama 10
hingga 15 detik dalam banyak kasus. Sabun antimikroba
sebaiknya digunakan untuk penggunaan terbatas:
menangani makanan, merawat bayi baru lahir, dan
merawat pasien berisiko tinggi.