Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Perancah untuk
sel induk
Saat ini, kebanyakan orang setidaknya mengetahui sesuatu tentang sel induk. Sel induk
embrionik sering disebutkan dalam program berita dan majalah, mungkin karena cara
pembuatannya yang kontroversial tetapi juga karena potensinya yang besar dalam
bidang kedokteran. Di sini kita membedakan dan mendefinisikan jenis-jenis sel punca,
mendiskusikan teknik-teknik yang digunakan sejauh ini untuk membuat berbagai sel
dan jaringan dari sel punca, dan mendiskusikan bagaimana pendukung tiga dimensi dan
sel punca telah dan harus digunakan untuk mendorong pengembangan jaringan
pengganti yang fungsional. .

Nicholas D.Evans1*, Tuan Eileen1, dan Julia M. Polak2

1Departemen Material, Royal School of Mines, Imperial College London, South Kensington, London SW7 2AZ, Inggris
2Teknik Jaringan dan Kedokteran Regeneratif, Departemen Teknik Kimia, Ruang 144, Gedung Roderic Hill, Imperial College, Kampus South
Kensington, London SW7 2AZ, Inggris
* Surel:nd.evans@imperial.ac.uk

Sel induk dapat dianggap sebagai sel serbaguna dan tidak terspesialisasi yang sering menunjukkan bahwa mereka memelopori biologi sel induk jauh sebelum

mempunyai potensi untuk membelah untuk menghasilkan lebih banyak sel induk ledakan yang terjadi baru-baru ini dalam kepentingan ilmiah dan publik3. Sepanjang

atau untuk berdiferensiasi menjadi satu atau lebih jenis sel, biasanya sebagai tahun 1950-an dan 1960-an, para ilmuwan ini menunjukkan bahwa transplantasi 'sel

respons terhadap suatu jenis sinyal. Pada akhirnya, sel-sel ini digunakan dengan induk hematopoietik' (HSC), yang diisolasi dari sumsum tulang, dapat menghasilkan

harapan dapat mengatasi kekurangan jumlah jaringan yang tersedia untuk sistem kekebalan baru yang terdiri dari banyak tipe sel spesialis berbeda pada

transplantasi, baik jika digunakan sendiri, seperti halnya untuk menggantikan sel organisme yang sistem kekebalan tubuh inangnya pernah berada. hancur4. Hal ini

beta pankreas yang hilang pada diabetes melitus tipe 1.1, atau dalam kombinasi mencapai puncaknya pada tahun 1963 ketika Mathé mendemonstrasikan

dengan perancah, sebagaimana diperlukan dalam rekayasa jaringan tulang2. kelangsungan hidup jangka panjang dari pasien leukemia yang diobati dengan HSC.5.

Istilah 'sel induk' mengacu pada kumpulan jenis sel yang berbeda dan berbeda Transplantasi sumsum tulang kini menjadi prosedur medis rutin.

yang agak membingungkan, semuanya memiliki sifat yang sama, namun untuk Menyusul keberhasilan tersebut, Friedensteindkk.6memperhatikan jenis
kesederhanaan, sel induk biasanya dibagi menjadi sel induk dewasa dan sel induk sel lain pada eksplan sumsum tulang, awalnya disebut sel pembentuk koloni
embrionik. fibroblas karena menempel pada plastik kultur sel, yang kemudian terbukti

menjadi sel induk7,8. Mereka sekarang disebut sebagai sel stroma sumsum

Sel induk atau sel induk mesenkim (MSC) (Gambar 1). Sel-sel ini menyerupai sel-sel
Sel induk dewasa jaringan ikat (fibroblas) dan, berbeda dengan HSC, dapat ditumbuhkan
Sel induk dewasa telah digunakan selama bertahun-tahun, dengan keberhasilan dengan mudah dalam cawan kultur sel. Dengan mengubah komposisi media
tertentu dalam pengobatan kanker pada sistem darah. Ahli hematologi di mana mereka tumbuh, MSC dapat melakukan hal tersebut

26 DESEMBER 2006 | jilid 9 | NOMOR 12 ISSN:1369 7021 © Elsevier Ltd 2006Buka akses di bawahLisensi CC BY-NC-ND.
 Perancah untuk sel indukTINJAUAN

Sel induk embrio

Sebaliknya, sel induk embrionik (ESC) terkenal karena kemampuannya membelah tanpa

batas dan kapasitasnya untuk berdiferensiasi menjadi sebagian besar, jika tidak seluruh,

jaringan tubuh. Hal ini menjadikannya jenis sel yang berpotensi jauh lebih serbaguna

dibandingkan sel induk dewasa. Pada mamalia, mereka pertama kali diisolasi pada tahun

1981 dari blastokista tikus, sebuah bola sel yang terbentuk beberapa hari setelah

pembuahan. Karena kendala teknis dan etika, baru pada tahun 1998 Thomson dan

rekannya melakukan hal tersebut17

mampu melakukan hal yang sama pada manusia. ESC manusia sekarang dapat secara rutin

dikultur sebagai sel 'pluripoten' yang diawetkan, yang mempertahankan kemampuannya untuk

membelah tanpa batas waktu dalam keadaan tidak berdiferensiasi dan, ketika distimulasi

dengan sinyal yang tepat, untuk berdiferensiasi menjadi semua jaringan orang dewasa (Gambar

2). Hal ini meningkatkan kemungkinan menarik bahwa mereka mungkin dapat menyediakan

sumber sel yang tidak terbatas untuk penggantian jaringan.

Menyusul kemajuan ini, banyak kelompok bergegas membuat tipe sel yang

penting secara klinis dengan menggunakan ESC manusia sebagai titik awal.

Diketahui bahwa ESC manusia akan berdiferensiasi secara spontan menjadi

banyak tipe selsecara in vitrodalam struktur mengambang bebas yang mirip

dengan embrio awal yang disebut 'badan embrio' dan setelah implantasi ke

hewan percobaan17, tetapi diperlukan metode untuk mengubahnya secara

selektifmenjadi jenis sel yang diminati. Strategi yang paling sederhana dan paling
umum adalah dengan menumbuhkan ESC dalam media yang dirancang untuk

jenis sel yang dibutuhkan. Misalnya Bielbydkk.18menumbuhkan ESC manusia

dalam media yang mengandung β-gliserofosfat, vitamin C, dan deksametason,

Gambar 1 Diagram menunjukkan bagaimana sel induk dewasa dapat digunakan dalam rekayasa
yang digunakan secara rutin untuk pertumbuhan osteoblas dalam percobaan
jaringan. Sumsum dikeluarkan dari tulang dewasa dan ditempatkan dalam cawan kultur. Sel induk
mesenkim yang melekat kemudian dapat diperluas atau diarahkan untuk berdiferensiasi menjadi sel
kultur sel, dan menunjukkan pembentukan nodul tulang dan sel yang
tulang, tulang rawan, atau lemak. mengekspresikan gen spesifik tulang. Peneliti lain telah menggunakan metode

serupa, biasanya dengan memasukkan berbagai faktor pertumbuhan ke dalam

berdiferensiasi secara selektif menjadi sel tulang (osteosit), sel lemak (adiposit), medium, untuk membuat sel β pankreas19, neuron20, kardiomiosit21, sel paru-

dan sel tulang rawan (kondrosit).8. Properti ini menjadikannya pilihan yang paru22,23, dan bahkan telur24dan sperma25. Strategi sederhana lainnya

menarik untuk rekayasa jaringan tulang dan tulang rawan, terutama karena melibatkan pembiakan ESC manusia dengan adanya sel target atau jenis sel yang

mereka dapat digunakan untuk merawat orang yang diisolasi – sebagai diduga berperan dalam diferensiasi. Dengan cara ini, Ppndkk.26, Mummerydkk.27

transplantasi 'autologus'. Ada juga banyak contoh bukti dalam literatur bahwa dan Van Vrankendkk.28telah menunjukkan bahwa ESC manusia dapat dibedakan

sel-sel ini dapat berdiferensiasi menjadi garis keturunan lain, termasuk sel menjadi kondrosit, kardiomiosit, dan pneumosit. Manipulasi genetik juga

jantung9dan neuron10. Namun mereka mempunyai keterbatasan – mereka hanya merupakan teknik yang berguna untuk mengarahkan diferensiasi sel ES. Kim dan

dapat membagi beberapa kali (tergantung pada usia donor)11, yang membatasi rekannya29memperkenalkan gen untuknurr1menjadi ESC, dan menunjukkan

pasokannya, dan mereka mungkin mengakumulasi perubahan genetik seiring diferensiasi menjadi neuron penghasil dopamin dan perbaikan kondisi tikus yang

waktu12. menderita penyakit Parkinson setelah implantasinya. Taidkk.30telah menunjukkan

Sel induk juga diketahui didistribusikan ke seluruh tubuh di berbagai 'ceruk' bahwa peningkatan jumlah osteoblas dapat diproduksi oleh ESC yang

lainnya. Misalnya, sel induk saraf dapat diisolasi dari jaringan otak dan diekspresikan secara berlebihan osterix. Matriks ekstraseluler – campuran protein

ditumbuhkansecara in vitro, dan diinduksi untuk berdiferensiasi menjadi tiga jenis tempat sel tumbuh – juga dianggap sebagai faktor penting dalam diferensiasi

sel otak – neuron, astrosit, dan oligodendrosit13,14. Mereka juga tampaknya ESC. Misalnya Corauxdkk.31menunjukkan bahwa kultur ESC pada matriks yang

mampu berubah menjadi jenis sel lain – setelah disuntikkan ke dalam blastokista berasal dari fibroblas kulit dapat menghasilkan jaringan yang tampak sangat

tikus yang sedang berkembang, mereka kemudian dapat ditemukan pada mirip dengan kulit asli.

organisme dewasa di beberapa jaringan, termasuk jantung, ginjal, dan hati.15. Sel

induk serupa juga diperkirakan berada di jaringan lain sebagai mekanisme

perbaikan terhadap cedera, misalnya di kulit16. Namun sekali lagi, sel induk ini Literatur mengenai diferensiasi terarah ESC menjadi berbagai tipe sel kini

tidak dapat ditumbuhkan dengan mudahsecara in vitrodan dianggap memiliki sangat luas, dengan lebih dari 1600 makalah diterbitkan sejak tahun 1998,

kapasitas replikasi yang terbatas. sebagian besar menggunakan variasi atau kombinasi metode yang diberikan.

DESEMBER 2006 | jilid 9 | NOMOR 12 27

TINJAUANPerancah untuk sel induk

(A) (B)

Gambar 2 (a) Fotomikrograf ESC manusia yang tidak berdiferensiasi (H1) yang ditumbuhkan pada lapisan pengumpan fibroblast tikus. (b) Diagram yang menjelaskan derivasi dan
diferensiasi ESC. ESC dapat diperoleh dari massa sel bagian dalam blastokista praimplantasi dan diperluas dalam kultur pada lapisan pengumpan fibroblas. Koloni ESC dapat
diarahkan untuk berdiferensiasi menjadi tipe sel dari tiga lapisan kuman.

di atas. Meskipun demikian, induksi diferensiasi ke jenis sel tertentu masih

kompleksitas lingkungan alami sel dan jarang mendukung perakitan sel menjadi
merupakan masalah untung-untungan, dan ESC tampaknya memiliki
jaringan yang berfungsi. Namun, menyediakan perancah yang tepat yang akan
kecenderungan jahat untuk berdiferensiasi menjadi sejumlah jenis sel lain selain
mengarah pada pengembangan jaringan fungsional bukanlah perkara sederhana,
jenis sel yang diinginkan. Jadi sebagian besar pengulas menyarankan bahwa
dan para insinyur jaringan telah melakukan pendekatan terhadap masalah ini dengan
mungkin perlu untuk memilih jenis sel yang diinginkan untuk sebagian besar
berbagai cara, dengan menggunakan berbagai bahan.
aplikasi, baik dengan menyortir sel menggunakan antibodi fluoresen atau
penanda genetik, atau dengan merekayasa penanda mematikan ke dalam sel
yang dapat diaktifkan jika sel tidak berubah. ke dalam sel yang tepat32-34. Perancah konvensional
Mungkin karena alasan ini, penelitian ESC sampai saat ini masih berada dalam Implan biomedis telah digunakan sejak zaman kuno – misalnya, sebuah kelompok di

domain ahli biologi sel, yang melakukan uji diferensiasi pada sel yang tumbuh Brazil baru-baru ini melaporkan bahwa suku Inca kuno berhasil menggunakan pelat Au

pada permukaan dua dimensi dalam cawan dan labu kultur sel. Diferensiasi sel untuk memperbaiki cacat tengkorak.35. Hingga beberapa dekade terakhir tahun 20anth

dan perkembangan jaringan, bagaimanapun, merupakan proses tiga dimensi Pada abad ini, kriteria yang digunakan dalam memilih bahan untuk implan tidak

dan oleh karena itu perlu diselidiki diferensiasi dan pembentukan jaringan banyak berubah secara mendasar dan biasanya bahan implan dipilih yang berfungsi

secara in vitrosepenuhnya, mungkin perlu beralih ke bidang rekayasa jaringan, karena sifat inertnya. Namun, sejak penemuan pada tahun 1960an bahwa beberapa

di mana sistem kultur sel tiga dimensi telah digunakan selama bertahun-tahun. keramik kaca secara aktif berikatan dengan tulang hidup, fokusnya telah beralih dari

bahan inert ke bahan yang bersifat bioaktif – bahan yang dengan sengaja

menimbulkan respons tertentu dari tubuh. Saat ini, sebagian besar perancah

Rekayasa Jaringan Organ menyediakan lingkungan tiga dimensi di mana jaringan dapat tumbuh dan

Insinyur jaringan sering memfokuskan upaya mereka pada penyediaan lingkungan berkembang, sehingga mampu mereproduksi fungsi jaringan yang akan

tiga dimensi, atau perancah, untuk perlekatan dan pertumbuhan sel, dan berharap digantikannya. Beberapa perancah mungkin dirancang untuk ditanamkan tanpa

bahwa, dengan menirusecara alamilingkungan, sel dapat dibujuk untuk menciptakan komponen seluler apa pun36– sebaliknya mereka dirancang untuk mendorong

jenis jaringan yang diinginkan. Tujuan akhir dari rekayasa jaringan adalah untuk pertumbuhan jaringan ke dalam dande novosintesis jaringansecara alami–sementara

membuat perancah berisi sel tiga dimensi yang dapat ditanamkan ke dalam tubuh sebagian besar dimaksudkan untuk merekayasa semacam komponen selulersecara in

untuk menyembuhkan penyakit atau memperbaiki cacat (Gambar 3). Standarsecara vitro sebelum implantasi (contohnya dapat ditemukan di tempat lain37). Strategi

alamisistem kultur – dimana sel ditumbuhkan dalam lapisan tunggal pada permukaan terakhir mengharuskan sel memiliki akses terhadap nutrisi dan ruang untuk tumbuh.

plastik datar dan bermuatan – tidak dapat bereplikasi

28 DESEMBER 2006 | jilid 9 | NOMOR 12

 Perancah untuk sel indukTINJAUAN

Gambar 3 Diagram yang menguraikan potensi rekayasa jaringan. Sel induk dapat berasal dari embrio atau jaringan dewasa dan dikembangkan dalam kultur. Mereka kemudian dapat disemai
langsung pada perancah atau dibedakan dalam kultur dan disortir untuk mendapatkan populasi murni dari jenis sel target sebelum disemai pada perancah. Perancah yang diunggulkan sel
kemudian dapat ditanam dalam kultur untuk mengembangkan jaringan yang diinginkan sebelum ditanamkan ke dalam tubuh.

(A) (B) (C) (D)

Gambar 4 Ilustrasi skema yang menunjukkan empat metode untuk mencapai transportasi nutrisi dalam konstruksi jaringan yang direkayasa. (a) Konstruk ditempatkan dalam kultur statis yang
bergantung pada difusi sederhana untuk pengiriman nutrisi. (b) Konstruksi ditempatkan di lingkungan dimana media dicampur, seperti labu pemintal, atau dalam bioreaktor berputar yang
mencapai keadaan gravitasi nol ketika fluida dipindahkan mengelilinginya. (c) Construct ditempatkan dalam suatu sistem yang memaksa cairan dan nutrisi terus menerus disalurkan langsung
melaluinya. (d) Saluran-saluran kecil direkayasa ke dalam konstruksi yang memungkinkan nutrisi disalurkan dengan cara yang serupa ke pembuluh darah di dalam tubuh.

Oleh karena itu, sebagian besar perancah, apa pun bahan pembuatannya, karena kemiripan dan kemampuannya berikatan dengan tulang punggung mineral

dibuat dengan semacam jaringan berpori dan dikultur dengan sel alami tulang. Kacamata bioaktif dapat disinter dalam bentuk bubuk untuk membuat

sedemikian rupa sehingga mendorong transportasi nutrisi (Gambar 4). jaringan berpori38atau bila dalam bentuk larutan, cukup 'dibusa' menggunakan

Misalnya, bahan anorganik seperti gelas bioaktif dan kalsium fosfat telah sabun lalu digel untuk membuat sol-gel39. Demikian pula, porositas dapat direkayasa

digunakan secara luas untuk rekayasa jaringan tulang menjadi polimer, seperti poliester (yang mana

DESEMBER 2006 | jilid 9 | NOMOR 12 29

TINJAUANPerancah untuk sel induk
Gambar 5 Mikrograf epifluoresensi dari komposit serat kolagen pendek/hidrogel kolagen
yang diunggulkan dengan fibroblas kulit tikus sebelum pengerasan gel. Sel hidup tampak
hijau dan memiliki proyeksi panjang ke dalam matriks gel, sedangkan sel mati berukuran
kecil dan bulat serta berwarna merah. Serat kolagen berfluoresensi oranye secara otomatis.
memiliki keuntungan karena dapat terbiodegradasi), baik dengan membuat larutan
polimer berbusa40atau dengan membentuk polimer terlarut di sekitar gumpalan
bahan lain seperti garam, membiarkan polimer mengeras dan kemudian garam
tersebut larut dengan air.41. Jaringan berpori juga dapat direkayasa menjadi molekul
alami – misalnya, gel kolagen dapat dikeringkan dengan cara dibekukan sebelum sel
disemai.42.
Alternatifnya, hidrogel dapat digunakan sebagai perancah untuk
pertumbuhan sel dan pengiriman sel. Karena proses pembentuk gel seringkali
tidak beracun, sel dapat dimasukkan ke dalam larutan sebelum gelasi. Dalam
kasus alginat, polimer alami yang terdiri dari rantai asam guluronat dan
manuronat, kalsium biasanya ditambahkan ke larutan sel/gel, yang mengikat
rantai ini dan mengeraskan gel.43. Demikian pula gel kolagen dapat mengeras
dengan mengubah pH larutan44,45(Gambar 5) dan poli(etena) glikol dapat
dipadatkan menggunakan cahaya46. Hidrogel memiliki sifat mekanik yang
berbeda dengan perancah lainnya, sehingga pemilihan material harus
didasarkan pada sifat-sifatnya, dengan memperhatikan tujuan penerapannya.
Namun semua perancah ini memiliki kekurangannya masing-masing. Perancah
anorganik seperti keramik dan kaca cenderung terlalu rapuh dan lemah untuk
digunakan dalam aplikasi penahan beban, dan bahkan kaca bioaktif, yang ditemukan
lebih dari 30 tahun yang lalu, terbatas pada aplikasi non-pemikul beban seperti
penggantian perancah kecil. tulang di telinga tengah47. Sebaliknya, polimer buatan
dapat dianggap oleh tubuh sebagai benda asing karena tidak memiliki molekul
permukaan yang lengket untuk adhesi sel. Produk degradasinya, dalam kasus poliester,
bersifat asam, dan meskipun tidak beracun secara langsung, dapat menciptakan
lingkungan mikro asam yang mungkin tidak fisiologis. Hal ini sangat penting dan sering
diabaikan dalam rekayasa jaringan tulang – mekanisme alami yang menyebabkan
degradasi tulangsecara alamioleh osteoklas melibatkan pembentukan lingkungan
mikro yang asam! Kolagen mungkin merupakan pilihan yang lebih baik dalam hal ini,
karena mekanisme alami pembentukan tulang melibatkan mineralisasi perancah
kolagen yang diciptakan oleh osteoblas.
– tidak mengherankan bahwa perancah kolagen mudah termineralisasi
dalam eksperimen rekayasa jaringan48. Masalah lain dengan perancah
berpori adalah karena sel-sel diunggulkan ke dalam matriks berpori internal
30 DESEMBER 2006 | jilid 9 | NOMOR 12
perancah Menjadi dapat diperdebatkan apakah sel benar-benar mengalami lingkungan tiga
dimensi – mereka hanya 'melihat' permukaan dua dimensi yang sedikit melengkung. Hal ini
dapat diatasi sampai batas tertentu dengan memperkecil ukuran pori-pori dan menambahkan
tekstur permukaan, atau menyematkan sel-sel dalam matriks ekstraseluler yang lembut,
namun kemudian muncul masalah tentang bagaimana menjaga sel-sel yang tertanam dalam
tetap mendapatkan nutrisi. Yang paling penting dalam kasus sel induk, terdapat tantangan
dalam memberikan sinyal yang tepat untuk mendorong diferensiasi dan membentuk pola sel
saat mereka berdiferensiasi menjadi jaringan yang terorganisir.
Perancah berpola mikro dan nano
Untuk mengatasi masalah ini, berbagai kelompok telah mulai menyelidiki
pola scaffold – baik diskala mikroresolusi, mungkin termasuk saluran
sehingga sel dapat disuplai dengan nutrisi dan area di mana tipe sel yang
berbeda dapat disimpan, dan padaskala nanoresolusi, di mana sel diberi
ligan yang tepat untuk meningkatkan dan mengarahkan fungsinya serta
menginduksi diferensiasi.
Untuk mengatasi tantangan pertama, sejumlah teknologi baru sedang diselidiki.
Hidrogel poli(etena) glikol yang dapat difotopolimerisasi telah digunakan sebagai
bahan untuk merangkum sel dalam tiga dimensi – gel ini dapat dicampur dengan
sel sebagai cairan dan cahaya dapat digunakan untuk memadatkannya46. Baru-baru
ini, beberapa kelompok telah menggunakan sifat ini untuk menambahkan elemen
pola ke dalam hidrogel49-51. Dalam kasus ini, lapisan gel yang mengandung sel
secara selektif terkena cahaya dalam pola yang ditentukan oleh masker
pemblokiran cahaya. Setelah gelasi lapisan ini, lapisan sel lain, kemungkinan
mengandung jenis sel lain, dapat dituangkan ke atas cetakan padat ini dan dibuat
gel menggunakan pola lain. Untuk mengilustrasikan teknik ini, Liu dan Bhatia50
sel yang dienkapsulasi dalam bentuk yang dapat dikenali dan melapisi jenis sel
yang berbeda dalam pola geometris (Gambar 6). Teknik menarik lainnya
melibatkan penggunaan fotolitografi, suatu teknik yang banyak digunakan untuk
membuat komponen elektronik. Ini hanya melibatkan pengungkapan
(A) (B)
Gambar 6 Ilustrasi hidrogel yang mengandung sel berpola. (a) Sel HepG2, garis sel
kanker hati, dikemas dalam berbagai bentuk tiga dimensi dalam hidrogel PEG yang
difotopolimerisasi. (b) Sel diberi label dengan pewarna merah atau hijau, dipartisi
dalam area berbeda dalam lapisan hidrogel tiga dimensi. (Dicetak ulang dengan izin
dari50. © 2002 Peloncat.)
 Perancah untuk sel indukTINJAUAN

membuat perancah yang mengandung fibroblas berdasarkan kolagen. Kemampuan untuk

mengembangkan perancah tiga dimensi yang dapat diperfusi memiliki potensi besar baik

dalam rekayasa jaringan maupun teknologi bioreaktor karena dapat memberikan cara untuk

menjaga sel-sel yang tertanam dalam tetap mendapatkan nutrisi di dalam perancah.

Cara lain yang memungkinkan untuk membuat pola perancah yang lebih rumit

mungkin melibatkan pembuatan prototipe cepat (RP). Sederhananya, RP mencakup

serangkaian teknik berbeda, yang semuanya memiliki kemampuan untuk

menghasilkan objek fisik berdasarkan desain komputer.55. Sebagian besar perangkat

Gambar 7 Sel yang tumbuh dalam jaringan mikrofabrikasi di PDMS. Saluran dibuat dengan
memaparkan photoresist secara selektif ke cahaya untuk menciptakan pola relief yang rumit
dan menonjol. Pola relief ini kemudian digunakan untuk membuat indentasi PDMS, yang
kemudian ditempelkan pada kaca objek. Sel dan medium dapat diperfusi melalui saluran dan
sel menempel pada dinding. Sel-sel di sini adalah HMEC-1, garis sel endotel yang diabadikan.
(Dicetak ulang dengan izin dari53. © 2004 Pegas.)
ini dianalogikan dengan printer dan dapat mencetak perancah menggunakan berbagai
bahan. Namun, yang paling menarik adalah perangkat yang tampaknya mampu
mencetak kombinasi sel dan matriks56,57, yang memungkinkan kontrol yang tepat atas
struktur mikro jaringan di masa depan.
Perkembangan teknologi seperti ini memungkinkan kita untuk mengontrol
lingkungan sekitar sel dalam lingkungan tiga dimensi dengan lebih tepat, dan

permukaan 'photoresist' yang dipasang pada wafer Si terhadap sinar ultraviolet. Area dapat menyediakan lingkungan yang lebih otentik untuk mengarahkan

yang terbuka dapat dikeraskan – sekali lagi dengan pola yang ditentukan oleh masker – diferensiasi sel untuk membentuk jaringan yang koheren. Namun pendekatan ini

dan permukaan yang berpola dapat digunakan untuk membentuk substrat lunak. tidak secara langsung mempertimbangkan interaksi kimia yang terjadi antara sel

Teknik ini telah digunakan secara luas untuk aplikasi mikrofluida, di mana poli(dimetil dan substratnya (Gambar 8). Untuk mengatasi masalah 'skala nano' ini, para

siloksan) (PDMS) diindentasi dan dilekatkan pada kaca objek untuk membuat insinyur jaringan mulai membuat perancah bioaktif, dimana permukaan

serangkaian saluran (teknik ini telah ditinjau di tempat lain52). Namun baru-baru ini, perancah direkayasa untuk merangsang fungsi sel.

para insinyur jaringan mulai menyadari bahwa ini bisa menjadi cara terbaik untuk

memperkenalkan sesuatu yang mirip dengan sistem pembuluh darah ke dalam Salah satu metode tersebut melibatkan penggunaan peptida amfifilik yang

biomaterial. Misalnya Shindkk.53mensimulasikan jaringan pembuluh darah dalam dapat dirakit sendiri. Molekul-molekul ini direkayasa dengan kepala hidrofilik

perangkat mikrofluida PDMS dan menunjukkan pertumbuhan sel endotel – sel dan ekor hidrofobik yang, dalam kondisi yang tepat, dapat berkumpul menjadi

pembuluh darah jaringan 'nanofiber' dengan kepala mencuat ke dalam larutan.

- pada Jaringan

Gambar 8 Diagram yang menunjukkan hubungan antara sel dan perancah. Lingkungan mikro yang tercipta di sekitar sel yang melekat pada perancah rekayasa jaringan
sangatlah rumit. Transportasi nutrisi membawa faktor pertumbuhan, ligan, dan sinyal lain yang dapat berikatan dengan reseptor sel. Perancah yang terdegradasi juga dapat
melepaskan pembawa pesan kimia yang berikatan dengan reseptor membran dan mempengaruhi komunikasi intraseluler dan proses seluler seperti transkripsi gen. Sel juga
menempel pada perancah melalui reseptor integrin. Reseptor Integrin berhubungan erat dengan sitoskeleton sel dan menyampaikan informasi lebih lanjut ke sel sehingga
mempengaruhi fungsi sel.

DESEMBER 2006 | jilid 9 | NOMOR 12 31

TINJAUANPerancah untuk sel induk
(A)
(B)
(C)
Gambar 9 Ilustrasi bagaimana peptida amfifilik berkumpul untuk menghasilkan serat
nano. (a) Struktur kimia setiap peptida, termasuk ekor hidrofobik panjang (1) dan
motif RGD tiga asam amino di kepala (5). (b) dan (c) menunjukkan bagaimana peptida
ini berkumpul membentuk serat. (Dicetak ulang dengan izin dari58. © 2001 AAAS.)
seperti ini mempunyai keunggulan porositas dan sel-sel hidup dapat
dikombinasikan dengan bahan-bahan tersebut sebelum perancah dibuat. Lebih
penting lagi, peptida yang umum terdapat pada matriks ekstraseluler jaringan
yang diteliti dapat direkayasa menjadi kepala hidrofilik molekul tersebut, yang
dapat meningkatkan perlekatan sel dan meningkatkan diferensiasi dan fungsi.
Karena jalinannya sangat halus, luas permukaan bagian dalam perancah sangat
besar dan sel-sel terpapar ligan dengan kepadatan tinggi dari segala arah, yang
dapat mendorong pertumbuhan tiga dimensi. Metode fabrikasi lain yang saat
ini sedang diselidiki untuk membuat jaringan perancah yang sangat halus
adalah electrospinning, di mana benang-benang kecil dari bahan dapat dibuat
untuk menghasilkan jaring berpori. Hal ini dicapai dengan mengekstrusi bahan
dari nosel halus menggunakan gaya elektrostatis untuk membentuk serat
dengan diameter antara 3 nm dan 5 µm. Sekali lagi, ligan matriks ekstraseluler
dapat dilekatkan pada serat tersebut, atau serat tersebut dapat dibuat dari
bahan biologis seperti kolagen.59.
Oleh karena itu, perancah berpola mikro dan nano tersebut memperkenalkan
tingkat kontrol yang lebih besar terhadap struktur halus perancah dibandingkan
perancah konvensional dan memungkinkan kontrol atas pola sel dan
32 DESEMBER 2006 | jilid 9 | NOMOR 12
Pembedaan sel. Tingkat kendali ini mungkin sangat berharga jika perancah
digunakan dalam kombinasi dengan sel induk.
Perancah dan sel induk
Sel induk, tentu saja, bergantung pada lingkungan ekstraseluler tidak hanya untuk
bertahan hidup tetapi juga untuk berkembang menjadi jaringan fungsional. Oleh
karena itu, semakin banyak insinyur jaringan yang mulai menggunakan komposisi
perancah untuk membujuk sel induk agar berdiferensiasi. Arinzehdkk.60telah
menunjukkan bahwa penyesuaian rasio hidroksiapatit terhadap tri-kalsium fosfat
dapat mempengaruhi sejauh mana terjadinya diferensiasi osteogenik MSC, sementara
pihak lain telah mulai merekayasa faktor bioaktif ke dalam perancah berpori. Misalnya
Kimdkk.61telah menciptakan perancah poliester yang secara perlahan memancarkan
vitamin C dan β-gliserofosfat dan menunjukkan peningkatan osteogenesis dari MSC,
sementara Yangdkk.62telah menunjukkan peningkatan diferensiasi osteogenik dalam
perancah asam polilaktat (PLA) yang dibubuhi faktor pertumbuhan spesifik tulang.
Alternatifnya, kekuatan mekanis dapat digunakan untuk merangsang diferensiasi –
Altmandkk.63baru-baru ini menunjukkan bahwa menerapkan kekuatan mekanis pada
perancah gel kolagen dapat mendorong MSC berdiferensiasi menjadi jaringan
ligamen.
Perancah berpola mikro dan nano kurang diteliti dalam kaitannya dengan
sel induk, meskipun dua penelitian terbaru menyoroti daya tariknya. Silva dan
rekannya64termasuk lima asam amino, domain pengikat sel spesifik laminin
(yang berikatan dengan integrin spesifik pada permukaan sel) di kepala
hidrofilik amfifilnya, dan menunjukkan bahwa sel induk saraf dapat diinduksi
untuk berdiferensiasi menjadi neuron ketika dikultur dalam jaringan.
Sebaliknya, sel-sel yang ditumbuhkan dalam perancah kontrol tanpa domain
khusus laminin atau pada plastik kultur jaringan dua dimensi yang dilapisi
dengan larutan laminin jauh lebih sedikit berdiferensiasi. Hal ini dihipotesiskan
sebagian besar disebabkan oleh kepadatan ligan pengikat sel yang terpapar
pada sel, yang menunjukkan dengan jelas pentingnya matriks ekstraseluler
dalam mempengaruhi fungsi sel. Dalam penelitian serupa, Hosseinkhanidkk.65
menggantikan domain spesifik laminin dalam molekul amfifilik dengan
rangkaian asam amino, arginin-glisin-aspartat (RGD), domain pengikat sel
yang umum di banyak protein matriks ekstraseluler, terutama kolagen.
Mereka kemudian menunjukkan bahwa diferensiasi MSC dengan
osteoblas ditingkatkan secara signifikan dibandingkan dengan nanofiber
amfililik tanpa urutan ini pada kontrol dua dimensi.
Sejauh ini, sangat sedikit penelitian yang dipublikasikan tentang pengaruh
lingkungan tiga dimensi dan perancah pada diferensiasi ESC. Dalam dua contoh
langka, Levenberg dan rekannya66,67telah menunjukkan bahwa ESC manusia yang
tertanam dalam gel matriks ekstraseluler yang disebut Matrigel dapat dibedakan
dalam tiga dimensi pada perancah poliester konvensional. Dalam kasus ini, beberapa
struktur yang menyerupai jaringan primitif dihasilkan, bergantung pada kandungan
media pertumbuhan. Para penulis juga menunjukkan bahwa jaringan yang tumbuh
dalam tiga dimensi mengekspresikan tingkat protein terkait diferensiasi yang lebih
tinggi dibandingkan jaringan pada permukaan dua dimensi yang dilapisi. Menariknya,
ada kelompok lain yang melakukannya
 Perancah untuk sel indukTINJAUAN

baru-baru ini melaporkan bahwa diferensiasi khondrogenik ESC manusia dalam Kesimpulan
hidrogel PEG bergantung pada apakah hidrogel tersebut mengandung situs Dengan sel induk, kita diberikan bahan serbaguna yang memungkinkan kita

RGD perekat atau tidak, yang menggambarkan pentingnya matriks sel dan membangun kembali banyak struktur yang ditemukan di dalam tubuh. Namun

lingkungan mikro dalam diferensiasi ESC.68. tantangan bagaimana membangun jaringan tiga dimensi darinya masih tetap ada.

Penggunaan perancah yang lebih baru dan berpola akan memberikan para ahli Baru-baru ini, para ahli biologi dan ilmuwan material telah menyadari bahwa

biologi ESC alat baru yang penting untuk menstimulasi dan memodelkan diferensiasi. perancah dapat dan harus dirancang untuk mengarahkan dan meningkatkan fungsi

secara in vitro. Misalnya, perancah berpola nano, seperti yang menggunakan peptida dan diferensiasi sel. Namun, kita baru mengetahui permukaannya saja tentang

amfifilik, dapat digunakan untuk mempartisi sel dalam populasi campuran sel yang bagaimana perancah ini dapat digunakan bersama dengan sel induk, dan hal ini

diturunkan dari ESC, berdasarkan pada kekhususan ligan yang mengikat sel yang memberi kita dorongan besar bahwa perancah ini dapat memberi kita kekuatan

berbeda. Dengan cara ini, perancah dapat berperan dalam mengarahkan organisasi untuk membangun replika jaringan manusia yang fungsional dan rumit secara tiga

jaringan, tidak hanya dengan tujuan memproduksi jaringan untuk transplantasi tetapi dimensi di dalam tubuh manusia. tidak lama lagi.

juga untuk mempelajari diferensiasi.secara in vitro. Demikian pula, ESC dapat dikotak-

kotakkan dalam perancah untuk mempelajari interaksi sel-sel dan pengaruhnya Ucapan Terima Kasih
terhadap diferensiasi sel dan pembentukan jaringan. Perancah seperti itu pasti akan NDE mengakui dukungan dari Medical Research Council, Inggris untuk pendanaan.
menemukan penerapan menarik dalam studi diferensiasi ESC di masa depan.

REFERENSI
1. Hussain, MA, dan Theise, ND,Lanset(2004)364, 203 35. Marino, R., Jr.,dkk.,Bedah saraf(2000)47, 940
2. Heng, SM,dkk.,J. Penambang Tulang. Res.(2004)19, 1379 36. Stevens, MM,dkk.,Proses. Natal. Akademik. Sains. Amerika Serikat(2005)102, 11450

3. Jansen, J.,dkk.,J. Sel Mol. medis.(2005)9, 37 37. Weinand, C.,dkk.,Tulang(2006)38, 555

4. Ford, CE,dkk.,Alam(1956)177, 452 38.Jones, JR,dkk.,Biomaterial(2006)27, 964

5. Mathé, G.,dkk.,Sdr. medis. J.(1963)5373, 1633 39. Sepulveda, P.,dkk.,J. Biomed. Materi. Res.(2002)59, 340

6. Friedenstein, AJ,dkk.,Kinet Jaringan Sel.(1970)3, 393 40. Ginty, PJ, dkk.,Proses. Natal. Akademik. Sains. Amerika Serikat(2006)103, 7426

7. Haynesworth, SE,dkk.,Tulang(1992)13, 81 41. Murphy, WL,dkk.,Jaringan Eng.(2002)8, 43

8. Pittenger, MF,dkk.,Sains(1999)284, 143 42. O'Brien, FJ,dkk.,Biomaterial(2004)25, 1077

9. Liechty, KW,dkk.,Nat. medis.(2000)6, 1282 43. Simpson, NE,dkk.,Biomaterial(2004)25, 2603
10.Hofstetter, CP,dkk.,Proses. Natal. Akademik. Sains. Amerika Serikat(2002)99, 2199 44. Tuan-tuan, E.,dkk.,Jaringan Eng.(2006)12, 1639

11. Baxter, MA,dkk.,Sel Induk(2004)22, 675 45. Tuan-tuan, E.,dkk.,Jaringan Eng.(2004)10, 421

12. Tolar, J.,dkk.,Sel Induk(2006), sedang dicetak 46.Mann, BK,dkk.,Biomaterial(2001)22, 3045

13.Reynolds, BA,dkk.,Sains(1992)255, 1707 47. Karat, KR,dkk.,Saya. J.Otol.(1996)17, 371
14. Levison, SW,dkk.,saraf(1993)10, 201 48. Phillips, JE,dkk.,Biomaterial(2006)27, 5535
15. Clarke, DL,dkk.,Sains(2000)288, 1660 49. Albrecht, DR,dkk.,Chip Lab.(2005)5, 111
16.Toma, JG,dkk.,Nat. Biol Sel.(2001)3, 778 50. Liu, VA, dan Bhatia, SN,Bioma. Perangkat mikro(2002)4, 257

17. Thomson, JA,dkk.,Sains(1998)282, 1145 51. Luo, Y., dan Shoichet, MS,Nat. Materi.(2004)3, 249

18. Bielby, RC,dkk.,Jaringan Eng.(2004),10, 1518 52. Falconnet, D.,dkk.,Biomaterial(2006)27, 3044

19. Lumelsky, N.,dkk.,Sains(2001)292, 1389 53. Shin, M.,dkk.,Bioma. Perangkat mikro(2004)6, 269

20. Zhang, SC,dkk.,Nat. Bioteknologi.(2001)19, 1129 54. Tan, W., dan Desai, TA,Jaringan Eng.(2003)9, 255

21. Yuasa, S.,dkk.,Nat. Bioteknologi.(2005)23, 607 55. Mironov, V.,dkk.,Tren Bioteknologi.(2003)21, 157

22. Rippon, HJ,dkk.,Sel Induk(2006)24, 1389 56.Xu, T.,dkk.,Biomaterial(2005)26, 93

23. Samadikuchaksaraei, A.,dkk.,Jaringan Eng.(2006)12, 867 57. Boland, T.,dkk.,Anat. Rek. Sebuah Penemuan. mol. Evolusi Sel. biologi.(2003)272, 497

24. Hubner, K.,dkk.,Sains(2003)300, 1251 58. Hartgerink, JD,dkk.,Sains(2001)294, 1684

25. Geijsen, N.,dkk.,Alam(2004)427, 148 59. Pham, QP,dkk.,Jaringan Eng.(2006)12, 1197

26. PPN, A.,dkk.,Jaringan Eng.(2006)12, 1687 60. Arinzeh, TL,dkk.,Biomaterial(2005)26, 3631

27. Mummery, C.,dkk.,Sirkulasi(2003)107, 2733 61.Kim, H.,dkk.,Biokimia. Biofisika. Res. Komunitas.(2005)332, 1053

28. Van Vranken, MENJADI,dkk.,Jaringan Eng.(2005)11, 1177 62. Yang, XB,dkk.,Jaringan Eng.(2004)10, 1037

29.Kim, JH,dkk.,Alam(2002)418, 50 63. Altman, GH,dkk.,FASEB J.(2002)16, 270

30. Tai, G.,dkk.,Jaringan Eng.(2004)10, 1456 64.Silva, GA,dkk.,Sains(2004)303, 1352
31. Coraux, C.,dkk.,Saat ini. biologi.(2003)13, 849 65. Hosseinkhani, H.,dkk.,Biomaterial(2006)27, 4079
32. Keller, G.,Pengembang Gen.(2005)19, 1129 66. Levenberg, S., dkk.,Proses. Natal. Akademik. Sains. Amerika Serikat(2003)100, 12741

33. Passier, R.,dkk.,Kardiovasc. Res.(2003)58, 324 67. Levenberg, S.,dkk.,Jaringan Eng.(2005)11, 506

34. Pera, MF,dkk.,Perkembangan(2004)131, 5515 68. Elisseeff, J.,dkk.,Sel IndukDev.(2006)15, 295

DESEMBER 2006 | jilid 9 | NOMOR 12 33