LAPORAN AWAL

PRAKTIKUM BIOKIMIA FARMASI

Identifikasi Karbohidrat dan Metabolisme Karbohidrat

Koordinator Praktikum
Hadi Kurniawan, M.Sc., Apt.
NIP. 198904192019031010

DISUSUN OLEH :
KELOMPOK / KELAS : 1 / A2
ANGGOTA : Alvira Damayanti (I1021231017)
Dayang Naswa Zahiya (I1021231032)
Muhammad Dzaki Al Fakhri (I1021231035)
Gorhanna (I1021231038)
Muhammad Fajar Al Ghifari (I1021231044)
Nurhalizah (I1021231059)
Dheya Zahra Anggini (I1021231113)

LABORATORIUM KIMIA FARMASI

PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS TANJUNGPURA
PONTIANAK
2024
 DAFTAR ISI

DAFTAR ISI.....................................................................................................................
BAB I PENDAHULUAN................................................................................................
I.1 Latar Belakang.............................................................................................................
I.2 Tujuan Praktikum.........................................................................................................
BAB II TINJAUAN PUSTAKA.....................................................................................
II.1 Pengertian Karbohidrat...............................................................................................
II.2 Klasifikasi Karbohidrat...............................................................................................
II.3 Fungsi Karbohidrat.....................................................................................................
II.4 Uji Identifikasi Karbohidrat........................................................................................
II.5 Mekanisme Karbohidrat..............................................................................................
BAB III METODOLOGI..............................................................................................
III.1 Alat..........................................................................................................................
III.1.1 Isolasi Pati.............................................................................................................
III.1.2 Uji Identifikasi Karbohidrat..................................................................................
III.1.3 Hidrolisis Pati.......................................................................................................
III.2 Bahan.......................................................................................................................
III.2.1 Isolasi Pati.............................................................................................................
III.2.2 Uji Identifikasi Karbohidrat..................................................................................
III.2.3 Hidrolisis Pati.......................................................................................................
III.3 Prosedur Kerja.........................................................................................................
III.3.1 Isolasi Pati.............................................................................................................
III.3.2 Uji Identifikasi Karbohidrat..................................................................................
III.3.2.1 Uji Benedict.......................................................................................................
III.3.2.2 Uji Fehling.........................................................................................................
III.3.2.3 Uji Iodium..........................................................................................................
III.3.2.4 Uji Molisch........................................................................................................
III.3.2.5 Uji Seliwanoff....................................................................................................
III.3.2.6 Uji Barfoed........................................................................................................
III.3.2.7 Uji Bial..............................................................................................................
III.3.3 Hidrolisis Pati.......................................................................................................
III.4 Perhitungan.............................................................................................................
III.5 Tugas Pendahuluan..................................................................................................
DAFTAR PUSTAKA....................................................................................................
LAMPIRAN JURNAL..................................................................................................

i
 BAB I

PENDAHULUAN

I.1 Latar Belakang

Dengan empat kalori (kiojoule) energi nutrisi per gram, karbohidrat

merupakan sumber energi utama tubuh. Karbohidrat mengontrol metabolisme
lemak, penyimpanan protein, bertindak sebagai pemanis makanan dan
[1]
memperlancar ekskresi tinja . Karena karbohidrat mengandung glukosa,
konsumsinya juga berdampak signifikan pada fungsi otak. Sel-sel dalam tubuh
menggunakan glukosa sebagai bahan bakar utama untuk produksi energi serta
proses metabolisme dan biologis. Selain itu, glukosa penting untuk sel darah
merah, otak, dan sel lain di tubuh. Karbon, hidrogen dan oksigen merupakan
unsur penyusun karbohidrat [2].
Molekul organik, lipid, protein, lemak dan vitamin adalah bentuk
karbohidrat. Zat organik mengandung atom karbon ©, hidrogen (H) dan oksigen
(O) yang membentuk karbohidrat. Keempat jenis karbohidrat tersebut adalah
oligosakarida, polisakarida, disakarida, dan monosakarida. Monosakarida adalah
karbohidrat sederhana yang hanya mengandung sedikit atom karbon dalam
molekulnya. Dalam kondisi hidrolisis ringan, mereka tidak dapat dihidrolisis
menjadi karbohidrat lain. Dalam bentuk kristal, monosakarida tidak berwarna dan
larut dalam air tetapi tidak larut dalam pelarut nonpolar. Dua jenis monosakarida
adalah keton (ketosa) dan aldehida (aldosa), bergantung pada jumlah karbon dan
gugus fungsi karbonil. Ada dua golongan karbohidrat yang dapat dibedakan
berdasarkan gugus karbonil yang dikandungnya. Ketosa memiliki gugus karbonil
C=O di tengahnya yang terhubung dengan atom karbon lain, sedangkan aldosa
memiliki gugus karbonil O=CH, disebut juga gugus aldehida. Sepasang
monosakarida dihubungkan oleh ikatan glukosidik membentuk kelompok
disakarida. Sebagai ilustrasi, perhatikan laktosa, yang merupakan kombinasi
glukosa dan galaktosa, maltosa, yang merupakan kombinasi dua unit glukosa, dan
sukrosa, yang merupakan kombinasi glukosa dan fruktosa. Zat-zat ini pada

1
 2

dasarnya tidak larut dalam eter dan pelarut organik nonpolar, larut dalam air dan
sedikit larut dalam alkohol, seperti halnya monosakarida. Laktosa, sukrosa, dan
maltosa adalah beberapa jenis disakarida[3].

Karbohidrat dengan berat molekul rendah disebut oligosakarida. NDO adalah

sejenis oligosakarida yang terletak di antara polisakarida dan monosakarida.
IUPAC mendefinisikan oligosakarida sebagai gula dengan antara 3 dan 10 rantai
gula. Dibandingkan dengan sukrosa, oligosakarida 0,3 hingga 0,6 kali lebih manis
dan larut dalam air. Contoh oligosakarida yang umum adalah fruktooligosakarida,
galaktooligosakarida, maltooligosakarida, laktulosa, rafinosa, dan
xylooligosakarida. Sebaliknya, polisakarida, seperti pati, glikogen dan dekstrin,
[4]
terdiri dari lebih dari sepuluh unit monosakarida . Secara umum, polisakarida
adalah molekul yang lebih kompleks dan lebih besar dibandingkan mono atau
oligosakarida. Banyak unit monosakarida digabungkan melalui ikatan glikosidik
untuk membentuk polisakarida. Polisakarida terdiri dari unit gula terkait yang
dapat bercabang, siklik, atau linier. Ikatan paling umum pada polisakarida alami
termasuk heksosa adalah 1 → 4 dan 1 → 6. Polisakarida biasanya berwarna putih,
non-kristal, dan bukan gula atau zat pereduksi. Larutan koloid terbentuk ketika air
larut dalam polisakarida dengan berat molekul tinggi. Polisakarida penting
termasuk selulosa, pati, glikogen dan dekstrin [1].

Dengan mengingat penjelasan ini, akan berguna untuk mengetahui

beberapa informasi dasar tentang karbohidrat. Oleh karena itu, tujuan mata kuliah
praktik ini adalah sebagai berikut:

1) Menggunakan uji Fehling dan Moore untuk memastikan perubahan

warna senyawa glukosa, sukrosa, dan pati yang mengandung monosakarida;

2) Memastikan perubahan warna senyawa glukosa, sukrosa dan pati yang

mengandung monosakarida setelah pengujian. Cari tahu zat mana yang
terhidrolisis aktif dengan adanya pati.

3) Mengetahui senyawa polisakarida positif antara glukosa, sukrosa dan

pati melalui perubahan warna pada percobaan hidrolisis;
 3

4) Memahami cara mengelompokkan senyawa dalam sampel yang

mengandung monosakarida, disakarida, dan polisakarida melalui perubahan warna
pada uji iodium. Uji Fehling menunjukkan keunikan karbohidrat ketika jumlah
karbohidrat yang ada lebih sedikit. Berdasarkan hasil pengujian tersebut dapat
disimpulkan bahwa pereaksi Fehling menghasilkan endapan berwarna bata bila
dipanaskan dengan karbohidrat. Reaksi pencoklatan digunakan dalam uji Moore
untuk menguji keberadaan gugus basa. Aldehida dengan gugus alkanol bercabang
dihasilkan ketika NaOH menempel pada rantai aldehida sebagai sumber ion OH.

Perubahan warna menjadi coklat menunjukkan hasil yang sukses. Untuk

mengubah karbohidrat kompleks menjadi karbohidrat sederhana dilakukan uji
hidrolisis. Endapan berwarna bata membentuk reaksi positif akhir. Bila larutan
iodium dan uji karbohidrat iodium digabungkan, akan muncul warna biru
kehitaman yang menunjukkan adanya pati dalam sampel. [1].

I.2 Tujuan Praktikum

Tujuan pada praktikum kali ini yaitu:

a. Mahasiswa mampu melakukan isolasi amilum (pati) dari kentang atau ubi kayu.

b. Mahasiswa mampu melakukan uji kualitatif identifikasi karbohidrat

berdasarkan reaksi-reaksi dan perubahan warnanya.

c. Mahasiswa mampu mengidentifikasi hasil hidrolisis amilum (pati)

 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

II.1 Pengertian Karbohidrat

Karbohidrat merupakan sekelompok zat alami dengan struktur molekul

berbeda yang dibutuhkan tubuh untuk menghasilkan energi. Karbohidrat tersusun
atas dari hidrogen, karbon, dan oksigen. Karbohidrat sederhana dan karbohidrat
kompleks merupakan susunan karbohidrat yang penting bagi kesehatan.
Karbohidrat sederhana tersusun atas monosakarida yang biasa diketahui sebagai
molekul karbohidrat, dan ada pula disakarida, yang tersusun dari dua monosa
yang dimana kedua monosa ini saling terkait. Karbohidrat kompleks memiliki
susunan yang terdiri dari polisakarida yang terdiri lebih dari dua ikatan
monosakarida.[5]

Gambar 1. Struktur karbohidrat [2]

II.2 Klasifikasi Karbohidrat

Gabungan antara monosakarida, disakarida, dan polisakarida disebut
sebagai karbohidrat. Karbohidrat sederhana karena molekulnya memiliki sedikit
atom karbon dan tidak bisa dihidrolisis menjadi karbohidrat lain disebut sebagai
monosakarida. Mereka tidak memiliki warna, mereka dapat larut dalam air hanya
saja tidak larut dalam pelarut nonpolar. [6]

4
 5

Gambar 2. Struktur monosakarida. [6]

Sukrosa, berasal dari gula bit atau gula tebu, juga terdapat pada tumbuhan wortel
dan nanas. Contoh disakarida yaitu terdiri dari senyawa laktosa, maltosa, dan
sukrosa. Disakarida juga terdiri atas dua unit monosakarida yang memiliki ikatan
glikosilik antara karbon anomerik atas satu unit monosakarida dan juga gugus
hidroksil dari suatu unit monosakarida lainnya. Laktosa adalah kombinasi dua
monosakarida, glaktosa dan glukosa, dan mudah larut dalam air. Maltosa
memiliki rasa yang lebih manis dibandingkan dengan laktosa, dan terbentuk dari
ikatan yang terbentuk antara atom karbon nomor satu dan juga atom nomor empat
yang terhubung oleh atom oksigen. [7]

Gambar 4. Struktur disakarida. [8]

Polisakarida merupakan senyawa berwarna putih, non-kristal, dan tidak manis
dengan rantai karbon panjang dan berat molekul tinggi. Polisakarida terdiri dari
selulosa, glikogen, dan pati (disebut juga pati) sebagai sumber karbohidrat
menyimpan energi untuk tumbuhan, yaitu pati yang diaplikasikan dalam
kehidupan sehari-hari; bagi hewan, glikogen adalah polisakarida penyimpan
energi, dan ditemukan dalam tubuh manusia di otot dan hati. Polisakarida yang
ditemukan pada tumbuhan disebut selulosa, yang digunakan untuk membentuk
dinding sel. [7]
 6

Gambar 5. Struktur Polisakarida (a) Amilum, (b) Selulosa. [8]

II.3 Fungsi Karbohidrat

Fungsi dari karbohidrat, diantaranya yaitu :
a. Sebagai Sumber Energi utama tubuh
Kandungan dari karbohidat mengandung empat kalori per gram,
dan fungsi utamanya adalah menyediakan energi bagi tubuh. Hewan
seperti mamalia dapat mengubah laktosa (gula susu), sukrosa, maltosa, dan
pati hingga menjadi glukosa, yang kemudian digunakan sebagai energi
pada makhluk hidup atau dapat juga disimpan sebagai glikogen.
Karbohidrat juga bisa diubah menjadi bentuk steroid dan sampai batas
tertentu hingga menjadi kumpulan protein. [8]

a. Memperlancar Pencernaan
Karbohidrat yang dapat dicerna berfungsi untuk memperlancar
peristaltik usus dan memudahkan pembuangan feses. Contoh karbohidrat
yang dapat dicerna adalah karbohidrat golongan monokasarida dan
disakarida. Selain itu, karbohidrat yang tidak dapat dicerna seperti
serat bisa memberikan rasa kenyang. [8]
 7

b. Sebagai Pemanis Alami

Fungsi lain dari karbohidrat yaitu sebagai pemberi rasa manis yang
alami pada makanan, terutama untuk karbohidrat dengan golongan
monosakarida dan disakarida. [8]

II.4 Uji Identifikasi Karbohidrat

Metode yang paling umum digunakan untuk menentukan jumlah karbohidrat
adalah: uji Molish, uji Benedict, uji beryodium (untuk mencari kadar pati), uji
Berfoed, uji Selliwanof (untuk menentukan adanya fruktosa), dan uji Fehling
(untuk menentukan adanya fruktosa). [9]
a. Uji molish
Uji Molisch digunakan untuk menunjukkan karbohidrat secara keseluruhan.
Ketika karbohidrat bereaksi dengan senyawa H2SO4 pekat, karbohidrat akan
mengalami dehidrasi membentuk suatu furfural (untuk pentosa) atau bisa juga
turunan (heksosa dan heptosa). [10]

b. Uji Iodin
Salah satu cara untuk membedakan polisakarida dari disakarida dan
monosakarida adalah dengan menggunakan tes yodium. Ketika warna
larutan pati berubah, konfigurasi ikatan setiap unit glukosa menyebabkan
unit glukosa membentuk rantai heliks, sehingga pati dapat membentuk
kompleks bersama molekul yodium untuk masuk ke dalam suatu spiral.
Prinsip reaksi larutan yodium dengan glikogen adalah menyerap yodium
yang ada pada struktur cincin glikogen, mereka saling berikatan
membentuk suatu kompleks berwarna merah kecoklatan.. Iodin dan
amilosa akan berwarna biru, amilopektin dan iodin akan menghasilkan
warna merah violet, glikogen maupun dekstrin dengan iodin akan
berwarna merah coklat. Kelebihan yang dimiliki dari metode iodin salah
satunya proses pengujiannya yang tergolong mudah dan biaya yang
dikeluarkan terhitung lebih sedikit dibanding metode lainya. Kelemahan
dari metode iodin yaitu hasil yang didapat kurang akurat. Hasil tidak
 8

akurat dari pengujian dengan menggunakan metode iodin disebabkan oleh

pengujiannya yang bersifat subjektif. [10]

c. Uji Benedict
Uji Benedict merupakan uji khusus untuk semua disakarida dan
monosakarida kecuali trehalosa dan juga sukrosa yang terjadi reaksi
oksidasi-reduksi. Reagen digunakan dalam reaksi Benedict antara lain
yaitu:
 Na-sitrat berguna sebagai faktor penghambat terjadinya pengendapan pada
Cu (OH)2 atau CuCO3
 CuSO4 berguna sebagai penyedia ion CU2+
 Na2CO3 berguna sebagai alkali yang dapat mengubah gugus karbonil
bebas dari guila menjadi bentuk etanol yang lebih reaktif. Etanol reaktif
memproduksi dengan CU2+ dari senyawa kompleks menghasilkan CU +.
Cu+ bersama OH membentuk CuOH (yang berwarna kuning), yang
dengan pemanasan berubah menjadi endapan Cu 2O yang memiliki
warna merah. Warna yang terbentuk dari endapan bervariasi mulai dari
hijau, kuning, orange, merah sampai endapan merah bata, tergantung dari
jumlah CuO yang tersusun, sehingga dapat disimpulkan reaksi ini dapat
digunakan untuk meliht adanya gula baik secara kualitatif hingga
kuantitatif. [8]

d. Uji borfoed
Uji berfoed menggunakan pereaksi asam yang dapat menyebabkan
pengendapan kuproksida dalam reaksi dengan berbagai disakarida dan
monosakarida. Disakarida mengendap lebih lambat dibandingkan
monosakarida pada konsentrasi dan kondisi yang sama, sehingga uji
Berfoed dapat digunakan untuk membedakan antara disakarida dan juga
monosakarida. [8]

e. Uji selliwanof
 9

Reaksi yang mengidentifikasi keberadaan gugus karbon keton dalam sakarida

disebut uji seliwanoff. Reaksi positif jika HCl mengubah hekosa menjadi logam
hidroksi fulfural, kemudian akan bereaksi dengan resorsinol membentuk suatu
kompleks merah. [8]

II.5 Mekanisme karbohidrat

Peran glukosa sebagai bahan bakar utama untuk aktivitas sel-sel tubuh
menentukan mekanisme karbohidrat. Glukosa diangkut melalui tulang belakang
ke seluruh tubuh melalui pembuluh darah. Namun, molekul glukosa yang tidak
diperlukan untuk menghasilkan energi disimpan di hati, sel darah merah, dan otot
sebagai glikogen. Kebutuhan energi jaringan seperti otak, sel darah merah, dan sel
otot rangka selama berolahraga sangat bergantung pada jumlah air glukosa yang
tersedia. Sebaliknya jika jumlah glukosa yang tersedia sangat tinggi maka akan
berdampak buruk pada kestabilan aktivitas tubuh. [11]

Gambar 3. Jalur utama metabolism karbohidrat pada organisme. [11]

Jalur mekanisme (gambar 3) menunjukkan bahwa tahap awal dimulai dari

molekul glukosa yang dikonversi melalui proses glikoogenesis. Glikogenolisis
menguraikan glikogen menjadi glukosa ketika dibutuhkan sebagai sumber energi
atau sebagai molekul prekursor dalam biosintesis. Selain itu, glukosa dapat diubah
menjadi ribosa-5-fosfat (komponen nukleotida) dan NADPH (zat pereduksi kuat)
 10

melalui jalur pentosa fosfat. Kondisi anaerobik dan aerobik dapat menyebabkan
asam piruvat berubah menjadi asam laktat atau sebaliknya. Dalam kondisi
aerobik, asam piruvat terdegradasi lebih lanjut dan asetil-KoA terbentuk.. Asetil-
KoA yang biasa juga disebut Koenzim-A Asetil, KoA-asetil (Acetyl-CoA)
merupakan molekul penting yang dapat menyediakan berbagai jumlah atom
karbon pada gugus asetil yang akan digunakan dalam siklus asam sitrat untuk
dioksidasi berguna untuk memperoleh energi dalam bentuk ATP . Selain proses
oksidasi yang terjadi pada siklus asam sitrat, juga terjadi proses transpor elektron.
Elektron tersebut dipindahkan melalui berbagai rantai elektron sehingga terjadi
reaksi yang disebut reaksi eksergonik. Ini membantu meningkatkan produksi ATP.
[11]
 BAB III
METODOLOGI

III.1 Alat
III.1.1 Isolasi Pati
a. Pisau
b. Timbangan/neraca analitik
c. Parutan
d. Blender
e. Gelas ukur
f. Erlenmeyer
g. Kaca Arloji
h. Kain penyaring
III.1.2 Uji Identifikasi Karbohidrat
a. Pipet tetes
b. Pipet ukur
c. Tabung reaksi
d. Gelas ukur
III.1.3 Hidrolisis Pati
a. Tabung reaksi
b. Penjepit tabung
c. Rak tabung reaksi
d. Porselin tetes
e. Gelas ukur
f. Pipet ukur
g. Kertas lakmus
h. Penangas air
i. Timbangan

III.2 Bahan

11
 12

III.1.1 Isolasi Pati

a. 300 g kentang atau ubi kayu yang telah di parut
b. Etanol 95%
c. Aquades
III.1.2 Uji Identifikasi Karbohidrat
a. Sampel uji makanan
b. Saliva
c. Urin
d. Larutan pati 1%
e. Amilum 1 %
f. Glikogen 1 %
g. Dekstrin 1 %
h. Sukrosa 1%
i. Laktosa 1 %
j. Maltosa 1 %
k. Galaktosa 1 %
l. Fruktosa 1 %
m. Glukosa 1 %
n. Arabinosa 1 %
o. HCL pekat
p. Larutan KI
q. Asam sulfat pekat
r. Pereaksi benedict
s. Pereaksi fehling
t. Larutan iodium 0,01 M
u. NaOH 40 %
III.1.3 Hidrolisis Pati
a. Larutan Amilum 1 %
b. Larutan pati hasil isolasi 1 %
c. Larutan iodium
d. Pereaksi benedict
e. Larutan HCL 2 N
f. NaOH 2 %

III.3 Prosedur Kerja

 13

III.3.1 Isolasi Pati

Dikupas kentang/ubi kayu, cuci dan potong-potong, kemudian diparut hingga
diperoleh sebanyak 300 g kentang/ubi kayu hasil parutan.
⬇
Diblender dengan 100 ml akuades selama 2 menit.
⬇
Disaring campuran dengan saringan (kain penyaring), cairan yang keruh ditampung
dalam gelas beaker. Residu (ampas) dibuang.
⬇
Ditambahkan akuades 100 ml, kocok campuran dan biarkan mengendap.
⬇
Didekantasi cairan
⬇
Disuspensikan kembali pati dengan 30 ml etanol 95%, lalu didekantasi ulang.
⬇
Disaring pati melalui kertas saring.
⬇
Dikeringkan pati pada suhu kamar dengan cara penyebaran.
⬇
Ditimbanglah pati yang diperoleh untuk percobaan berikutnya (Uji Identifikasi
Karbohidrat dan Hidrolisis Pati).

III.3.2 Uji Identifikasi Karbohidrat

 14

III.3.2 1 Uji Benedict

Disiapkan sejumlah tabung reaksi yang bersih dan kering.
⬇
Dipipetlah 1 ml. larutan sampel.
⬇
Dimasukkan ke dalam tabung reaksi.
⬇
Diteteskan secukupnya pereaksi benedict.

Dicampur homogenkan dengan baik.

⬇
Dipanaskan di atas api kecil selama 2 menit atau dimasukkan dalam penangas air
selama 5 menit sampai mendidih, dinginkan perlahan-lahan.
⬇
Diamati perubahan warna yang terjadi atau endapan yang terbentuk.
⬇
Dibandingkan, catat dan dokumentasikan hasil pengamatan. (Uji positif ditandai
dengan terbentuknya larutan hijau-kuning hingga coklat atau jingga-merah atau
merah bata serta adanya endapan).
⬇
Diinterpretasikan dan simpulkan hasil uji tersebut.

III.3.2.2 Uji Fehling

 15

Dicampurkan dalam tabung reaksi 1 mL larutan Fehling A ke dalam 1 mLlarutan

Fehling B.
⬇
Dipanaskan
⬇
Ditambahkan 1 ml. larutan uji ke dalam tabung reaksi tersebut.
⬇
Dipanaskan campuran tersebut pada pembakar spiritus atau water bath.
⬇
Amati, catat perubahan warna/hasil observasi yang terjadi dan dokumentasikan.
(Uji positif ditandai dengan warna merah bata atau hijau- kuning hingga jingga-
merah hingga coklat).
⬇
Diinterpretasikan dan simpulkan hasil uji tersebut.

III.3.2 3 Uji Iodium

Langkah 1 :
Disiapkan sejumlah tabung reaksi yang bersih dan kering.
⬇
Dipipet 1 mL larutan uji.
⬇
Dimasukkan ke dalam tabung reaksi.
⬇
Ditambahkan 2 tetes larutan iodium 0.05 N. Diamati warna, dicatat dan
didokumentasikan.

⬇
 16

Dipanaskan larutan. Diamati warna, dicatat dan didokumentasikan.

⬇
Didinginkan larutan. Diamati warna, dicatat dan didokumentasikan.
⬇
Diamati perubahan warna spesifik yang terjadi.
⬇
Dibandingkan, catat dan dokumentasikan hasil pengamatan. (Uji positif ditandai
dengan adanya kompleks ungu tua atau biru tua, merah ungu, atau coklat
kemerahan)
⬇
Diinterpretasikan dan simpulkan hasil uji tersebut.

Langkah 2 :
Disiapkan sejumlah tabung reaksi yang bersih dan kering.
⬇
Disiapkan sejumlah tabung reaksi yang bersih dan kering.
⬇
Dimasukkan ke dalam tabung reaksi.
⬇
Ditambahkan 1 mL larutan NaOH 40%.
⬇
Dicampurkan dan tambahkan beberapa tetes larutan iodin 0,1 N.
⬇
Diamati warna, dicatat dan didokumentasikan.
⬇
Ditambahkan 1 mL HCI
⬇
Diamati warna, catat dan dokumentasikan.
 17

⬇
Diinterpretasikan dan simpulkan hasil uji tersebut.

III.3.2.4 Uji Molisch

Dibuat pereaksi Molisch dengan melarutkan 12,5 gram alfa-naftol ke dalam.
alkohol 95% sampai volumenya tepat 250 mL. Dibuat pereaksi baru (fresh) setiap
kali digunakan.
⬇
Dimasukan 15 tetes s.d. 2 mL. larutan uji ke dalam tabung reaksi.
⬇
Ditambahkan 1-3 tetes pereksi molisch dan kocok dengan baik. Diringkan tabung
reaksi, lalu dialirkan dengan pelan dan hati-hati 1-2 ml asam sulfat pekat melalui
dinding tabung agar tidak bercampur.
⬇
Diperhatikan, dicatat dan didokumentasikan perubahan yang terjadi. Uji ini positif
adanya karbohidrat jika terbentuk cincin berwarna ungu pada batas ( antara kedua
lapisan).
⬇
Diinterpretasikan dan simpulkan hasil uji tersebut.

III.3.2.5 Uji Seliwanoff

 18

Dibuatlah pereaksi Seliwanoff dengan mencampurkan 3,5 mL. resorcinol 0,5%

dengan 12 ml. HCl pekat, lalu diencerkan dengan akuades sampai 35 ml..
⬇
Dimasukkan 5 tetes s.d. 2 ml. larutan uji dan 15 tetes s.d. 2 ml. pereaksi seliwanoff
ke dalam tabung reaksi.
⬇
Didihkan dalam api kecil selama 30 detik atau dalam penangas air mendidih
selama 30 detik.

Diperhatikan, dicatat dan didokumentasikan warna yang terbentuk. (Hasil positif

fruktosa dengan ditandainya terbentuk warna merah oranye dan glukosa jika tidak
terbentuk warna merah)
⬇
Dilanjutkan pemanasan hingga lebih dari 30 detik. Diamati warna, dicatat dan
didokumentasikan. Dibandingkan perubahan warnanya 30 detik pemanasan dan
pemanasan yang lebih lama.
⬇
Diinterpretasikan dan simpulkan hasil uji tersebut

III.3.2.6 Uji Barfoed

Dibuat pereaksi Barfoed dengan melarutkan 13,3 gram kristal tembaga asetat
dalam 200 mL. air, saring bila perlu. Kemudian ditambahkan 1,9 ml. asam asetat
glasial. Pereaksi dibuat baru setiap kali digunakan.
⬇
Dimasukan ke dalam tabung reaksi 10 tetes s.d. 2 mL. larutan uji dan 10 tetes s.d. 5
ml. pereaksi barfoed.
⬇
Dicampur dengan baik dan panaskan di atas penangas air mendidih selama 2 menit.
⬇
Diperhatikan, catat dan dokumentasikan warna yang terbentuk. (Reaksi positif
ditandai dengan terbentuknya endapan Cu₂O berwarna merah bata).
 19

⬇
Diinterpretasikan dan simpulkan hasil uji tersebut.

III.3.2.7 Uji Bial

Dibuat pereaksi Bial dibuat dengan melarutkan 5,0 gram orsinol dalam alkohol
95% sampai volume 100 ml.
⬇
Dimasukan ke dalam tabung reaksi 5 tetes larutan uji dan 10 tetes pereaksi bial
⬇
Ditambahkan HCI pekat campurlah dengan baik.
⬇
Dipanaskan dalam api kecil sampai timbul gelembung-gelembung gas ke
permukaan larutan.
⬇
Diperhatikan, dicatat dan didokumentasikan warna atau endapan yang terbentuk.
(Terbentuknya warna biru menunjukkan adanya pentosa).
⬇
Diinterpretasikan dan simpulkan hasil uji tersebut.

III.3.3 Hidrolisis Pati

 20

Masukkan 5 ml amilum 1% (amilum yang disiapkan laboran dilab atau amilum

hasil isolasi) ke dalam tabung reaksi dan di tabung lain masukkan amilum standar
dari lab ke dalam tabung reaksi sebagai kontrol pembanding. Kemudian masing-
masing tabung:
⬇
Ditambahkan 2,5 ml HCl 2N.
⬇
Dicampurkan dengan baik kemudian dipanaskan di atas penangas air mendidih.
Setelah tiga menit, ujilah dengan iodium dengan mengambil 2 tetes larutan,
ditambah 2 tetes jodium dalam porselin tetes.
⬇
Dicatat perubahan warna yang terjadi.
⬇
Dilakukan uji iodium setiap 3 menit sampai hasilnya berwarna kuning pucat.
⬇
Dilakukan hidrolisis selama 5 menit lagi, selanjutnya didinginkan,
⬇
Diambil 2 ml larutan hidrolisis tersebut, lalu dinetralkan dengan NaOH 2%.
⬇
Diuji dengan kertas lakmus.
⬇
Dilakukan uji dengan pereaksi Benedict.
⬇
Disimpulkan apa yang dihasilkan dari hidrolisis pati tersebut.

III.4 Perhitungan
a. Rumus mencari kadar karbohidrat (12)
G
Persen Glukosa (%) =
W
x 100

Keterangan :
 21

G = Konsentrasi glukosa (g)

W= Berat sampel (g)

III.5 Tugas Pendahuluan

1. Apa yang anda ketahui tentang karbohidrat dan apa peranan
karbohidrat bagi tubuh? Sebutkan sumber-sumber karbohidrat!
Jawaban : Karbohidrat merupakan senyawa karbon, hydrogen, dan oksigen yang
terdapat dalam alam yang tersusun dari gula dan memiliki energi, penyimpan
energi, penyusun tubuh (selulosa dan kitin). Karbohidrat mempunyai rumus
empiris CH2O. Karbohidrat sebenarnya adalah polisakarida aldehid dan keton
atau turunan lainnya. Peran karbohidrat bagi tubuh untuk sumber energi bagi
tubuh manusia, yang menyediakan 4 kalori (kiojoule) energi pangan per gram.
Karbohidrat juga mempunyai peranan penting dalam menentukan karakteristik
bahan makanan, misalnya rasa, warna, tekstur, dan lain-lain. Sedangkan dalam
tubuh, karohidrat berguna untuk mencegah tumbuhnya ketosis, pemecahan tubuh
protein yang berlebihan, kehilangan mineral, dan berguna untuk membantu
metabolism lemak dan protein. Sumber dari karbohidrat yaitu : padi-padian, umbi-
umbian, kacang-kacangan dan gula.

[Fitri AS, Fitriana YAN. Analisis Senyawa Kimia pada Karbohidrat. Jurnal
Sainteks. 2020 ; Vol 17 (1) : 45-52]

2. Jelaskan klasifikasi karbohidrat dan contohnya serta sifat-sifat

karbohidrat!
Jawaban :
- Monosakarida, berasal dari bahasa yunani (mono:satu, sacchar:gula) yang
umumnya memiliki rumus molekul yaitu beberapa kelipatan unit CH2O2.
Contohnya, glukosa, galaktosa, deoksiribosa dan fruktosa Sifat monosakarida
tidak berwarna, bentuk kristalnya larut dalam air tetapi tidak larut dalam pelarut
nonpolar.
 22

- Disakarida adalah dua monosakarida yang bergabung menggunakan ikatan

glikosidik. Senyawa ini larut dalam air, sedikit larut dalam alkohol, dan praktis
tidak larut dalam eter dan pelarut organik non-polar. Contoh dari disakarida
adalah maltosa, sukrosa, dan laktosa
- Polisakarida adalah makromolekul, polimer dengan ratusan bahkan ribuan
monosakarida yang bergabung menggunakan ikatan glikosidik. Polisakarida
berupa senyawa berwarna putih dan tidak berbentuk kristal, tidak memiliki rasa
manis dan tidak memiliki sifat mereduksi. Contoh polisakarida yakni, amilum,
glikogen, dekstrin, dan selulosa.

[Fitri AS, Fitriana YAN. Analisis Senyawa Kimia pada Karbohidrat. Jurnal
Sainteks. 2020 ; Vol 17 (1) : 45-52]
[Urry LA, Cain ML, Wasserman SA, Minorsky PV, Orr RB. Campbell Biology
Twelfth Edition. New York: Pearson Education, Inc; 2020.

3. Apa yang dimaksud dengan ikatan glikosidik/ikatan glikosida?

Jawaban : Hubungan glikosida dari karbon 1 dari satu satuan ke suatu OH satuan
lain. Suatu cara ikatan yang lazim ialah suatu hubungan glikosida α atau β dari
satuan pertama ke gugus 4-hidroksil dari satuan kedua. Hubungan ini disebut
suatu ikatan 1,4’-α atau 1,4’-β, tergantung pada stereokimia pada stereokimia
pada karbon glikosida.

[Fitri AS, Fitriana YAN. Analisis Senyawa Kimia pada Karbohidrat. Jurnal
Sainteks. 2020 ; Vol 17 (1) : 45-52]

4. Apa yang dimaksud dengan gula pereduksi?

Jawaban : Gula pereduksi adalah golongan karbohidrat yang dapat mereduksi
senyawa-senyawa penerima elektron dimana ujung dari gula pereduksi
mengandung gugus aldehid atau keton bebas. semua monosakarida dan disakarida
merupakan gula pereduksi kecuali sukrosa dan pati.
 23

[Almatsier S. Prinsip Dasar Ilmu Gizi. Jakarta: PT. Gramedia Pustaka Utama;
2004]

5. Jelaskan mengapa sukrosa tidak dapat diidentifikasi dengan uji Benedict?

Jawaban : Uji benedict adalah uji kimia untuk mengetahui kandungan gula
(karbohidrat) pereduksi. Pada uji Benedict, pereaksi ini akan bereaksi dengan
gugus aldehid, kecuali aldehid dalam gugus aromatik, dan alpha hidroksi keton.
Sukrosa (gula pasir) tidak terdeteksi oleh pereaksi Benedict. Sukrosa mengandung
dua monosakarida (fruktosa dan glukosa) yang terikat melalui ikatan glikosidic
sedemikian rupa sehingga tidak mengandung gugus aldehid bebas dan alpha
hidroksi keton. Sukrosa juga tidak bersifat pereduksi.
Dengan demikian sukrosa tidak dapat diidentifikasi
menggunakan uji benedict.

[Fitri AS, Fitriana YAN. Analisis Senyawa Kimia pada Karbohidrat. Jurnal
Sainteks. 2020 ; Vol 17 (1) : 45-52]

6. Jelaskan bagaimana cara membuat reagen Benedict?

Jawaban : Menurut situs (https://medlab.id/reagen-benedict/),sebanyak 1000 mL
benedict dapat dibuat dengan menggunakan komposisi yaitu : Trinatrium sitrat
(Na3C6H5O.2H2O) sebanyak 173 gram, Tembaga (II) sulfat (CuSO4.5H2O)
sebanyak 17,3 gram, Natrium karbonat (Na2CO3) anhidrat 100 gram dan
kemudian Aquadest (ad hingga 1000 mL).Adapun tata cara pembuatannya yaitu;
- Dilarutkan trinatrium sitrat dan natrium karbonat ke dalam labu takar 1000
ml yang sudah berisi aquades sebanyak 800 ml.
- Ditambahkan larutan tembaga (II) sulfat secara perlahan-lahan dalam
larutan tadi sambil dicampur supaya homogen.
- Ditambahkan aquades sampai batas volume 1000 ml. Tuang larutan ke
dalam botol bersumbat kaca. Label botol dengan nama “Reagen Benedict” dan
tulis tanggal pembuatannya.
 24

7. Apakah karbohidrat dapat digantikan sebagai sumber energi oleh lemak

dan protein?
Jawaban : Lemak dan protein dapat menggantikan karbohidrat sebagai senyawa
penghasil energi. Pada umumnya, metabolisme terjadi pada mitokondria melalui
siklus Krebs. Katabolisme protein, karbohidrat dan lemak dapat menjadi derivat
asam amino, glukosa, gliserol dan asam lemak yang dapat dikonversi menjadi
energi maupun cadangan energi untuk proses pertumbuhan dan perkembangan sel.

[Henggu, K. U., & Nurdiansyah, Y. (2021). Review dari Metabolisme

Karbohidrat, Lipid, Protein, dan Asam Nukleat. QUIMICA: Jurnal Kimia Sains
dan Terapan, 3(2), 9-17. https://doi.org/10.33059/jq.v3i2.5688]

8. Apakah reaksi yang lazim terjadi sebagai reaksi pertama pada lintasan
glikolisis dari glukosa?
Jawaban : Rreaksi yang lazim atau biasanya terjadi sebagai reaksi pertama pada
lintasan glikolisis dari glukosa yaitu reaksi endergonik (reaksi yang memerlukan
energi) dan reaksi eksergonik (reaksi yang melepaskan
energi).[https://kumparan.com/berita-terkini/tahapan-metabolisme-endergonik-dal
am-proses-glikolisis-energi-1z3RUXh3Eqd]
 DAFTAR PUSTAKA

1. Fitri AS, Fitriana YAN. Analisis Senyawa Kimia pada Karbohidrat.

SAINTEKS. 2020; 17(1): 1-66
2. Panjaitan RS, Sutriningsih, Purwati, Sagala Z. Edukasi Kandungan
Karbohidrat dan Metode Uji Identifikasinya Pada Buah-buahan di SDN 09
Sunter Agung, Jakarta Utara. Jurnal BERDIKARI. 2021; 4(1): 1-9
3. Tanjung MM, Yulianti E, Wahyuningsih L. Pengaruh Negatif Akibat
Mengkonsumsi Karbohidrat Secara Berlebihan Menurut Alqur’an dan Hadist.
Journal of Islamic Guidance and Conseling. 2023; 2(01): 207-214
4. Setyaningsih D, Musdaniaty D, Muna N. Produksi Bubuk Sinbiotik dari
Hidrolisat Euchuema cottonii Menggunakan Spray Drying. Jurnal Teknologi
Industri Pertanian. 2019; 29(3): 233-239
5. Tanjung MM, Yulianti E, Wahyuningsih L. Pengaruh Negatif Akibat
Mengkonsumsi Karbohidrat Secara Berlebihan Menurut Al-Qur’an dan
Hadist. Journal Of Islamic Guadance dan Conseling. 2023 ; 12 (1) : 207-214
6. Fitri AS, Fitriana YA. Analisis Senyawa Kimia Pada Karbohidrat. Jurnal
Sainteks. 2020 ; 17 (1) : 45-52
7. Bukhari, Muhammad, Nasrudin. Proses Pengajaran Biokimia di SMA
Berbasis Bahan Ajar Yang Terdapat Dalam Kehidupan Sehari-Hari. Jurnal
Dedikasi Pendidikan. 2019 ; 3 (2) : 87-90
8. Hanum, G R. Biokimia Dasar. Sidoarjo : UMSIDA Press ; 2017 : 42-56
9. Panjaitan RS, Sutriningsih, Purwati, et all. Edukasi Kandungan Karbohidrat
dan Metode Uji Identifikasinya Pada Buah-buahan di SDN 09 Sunter Agung,
Jakarta Utara. Jurnal Besikari. 2021 ; Vol 4 (1) : 1-9
10. Nurprialdi B, Gani VOT, Pratama P, et all. Qualitive and Quantitative
Identification Of Carbohydrates In Commercial Youghurt Products.
Indonesian Journal Of Pharmaceutical Research. 2022 ; 2 (2) : 11-21
11. Henggu KU, Nurdiansyah Y. Review dan Metabolisme Karbohidrat, Lipid,
Protein dan Asam Nukleat. Jurnal Kimia Sains dan Terapan. 2021 ; 3 (2) ; 9-
17
12. Umi Q, Anang W, Supriadi. Analisis kadar Karbohidrat, Lemak dan Protein
Dari Tepung Biji Mangga Jenis Gadung.Jurnal Akademia Kimia. 2017 ; 4(4):
168-174

25
LAMPIRAN JURNAL

26
27
28
29
30
31