POTENSI EKSTRAK ETANOL DAUN SIRIH MERAH TERHADAP GAMBARAN

HISTOPATOLOGI GINJAL TIKUS YANG DIINDUKSI STREPTOZOTOCIN

Vidya Magvierah1, Joni Tandi1, Niluh Puspita1, Recky Patala1

1
Program Studi S1 Farmasi, STIFA Pelita Mas Palu

Email:vidyamaghviera@gmail.com

ABSTRACT

Secondary metabolites, the effect of administration, and the optimal dose of red betel leaf (Piper
Crocatum Ruiz & Pav) ethanol concentrate on the histopathological characteristics of male white rats
(Rattus norvegicus) are the main objectives of this study. In the experiment, 30 male white rats were
divided into six treatment groups: the healthy control group was given streptozotocin, the sick control
group was given 0.5% NaCMC, and the red betel leaf extract group was given 150, 250, and 350mg. ./kg
body weight. Using a 400x light microscope, HE staining revealed the degree of renal histopathological
damage. Secondary metabolites in the form of alkaloids, flavonoids, saponins, and tannins were found in
the red betel ethanol extract which affected the regeneration of kidney tissue cells in male white rats at an
effective dose of 350mg/kgBW and an average damage value of 0.2.

Keywords: Red Betel Leaf, Histopathology, Kidney, streptozotocin

ABSTRAK

Metabolit sekunder, pengaruh pemberian, dan dosis optimal konsentrat etanol daun sirih merah (Piper
Crocatum Ruiz & Pav) terhadap karakteristik histopatologi ginjal tikus putih (Rattus norvegicus) jantan
merupakan tujuan utama dari penelitian ini. percobaan, 30 ekor tikus putih jantan dibagi menjadi enam
kelompok perlakuan yaitu kelompok control sehat diberi streptozotocin, kelompok control sakit diberi Na
CMC 0,5%, dan kelompok konsentrat daun sirih merah diberi 150, 250, dan 350mg./kgBB. Menggunakan
mikroskop cahaya pembesar 400 kali lipat, pewarnaan HE di gunakan untuk menggambarkan tingkat
kerusakan histopatologi. Metabolit sekunder berupa alkaloids, flavonoids, saponins, dan tanins ditemukan
pada konsentrat etanol sirih merah yang berpengaruh terhadap regenerasi sel jaringan ginjal tikus putih
jantan pada dosis efektif 350mg/kgBB dan dosis efektif 350mg/kgBB. nilai kerusakan rata-rata 0,2.

Kata Kunci: Daun Sirih Merah, Histopatologi, Ginjal, streptozotocin

PENDAHULUAN Diabetes Mellitus (DM) ialah
Perubahan jenis penyakit yang penyakit metabolic berkelanjutan yang di
mempengaruhi masyarakat dipengaruhi sebabkan oleh ketidakberdayaan tubuh
oleh pilihan gaya hidup. Terjadi peningkatan memproduksi insulin kimia sesuai
jumlah penyakit degeneratif akibat kebutuhan tubuh. Hal ini digambarkan
merebaknya gaya hidup modern dengan dengan peningkatan kadar gula didalam
banyaknya pilihan makanan dan kebiasaan darah atau hiperglikemia. Hiperglikemia
tak sehat pada semua lapisan masyarakat. menyebabkan penciptaan ekstremis bebas
mellitus, peningkatan kadar glukosa darah selangit atau biasa disebut Responsive
memicu auto-oksidasi glukosa, glikasi Oxigen Spesies (ROS). ROS akan memicu
protein, dan aktivitas pada jalur tekanan oksidativ karna tak ada yang lebih
metabolisme poliol. Proses-proses tersebut revolusioner dalam tubuh daripada agen
semakin mempercepat pembentukan pencegahan kanker, ekstremis bebas bisa
reactive oxygen species (ROS) yang berdifusi kedalam sel yang kemudian
merupakan salah satu penyakit yang merespons dengan lapisan lipid untuk
berkontribusi terhadap diabetes mellitus dan menghasilkan malondialdehid (MDA).
lainnya (Siti, 2017). (Tandi, 2018).
Malondialdehyde (MDA) ialah salah
International Diabetes Federation
satu hasil akhir dari lapisan lipid sel dengan
(IDF) 2021 menemukan bahwa Indonesia
kelimpahan revolusioner bebas dengan
mempunyai 10,3 juta penderita diabetes
tujuan bahwa MDA di gunakan sebagai
mellitus, menjadikannya negara terpadat
catatan untuk mengukur tindakan ekstrim
keenam di dunia. Diperkirakan jumlah ini
bebas didalam tubuh. Tujuan oksidasi ROS
akan terus meningkat, mencapai 16,7 juta
selain lipid ialah Deoxyribonucleic Corrosive
orang pada tahun 2045. Prevalensi diabetes
(DNA), dalam oksidasi nukleotida guanin
meningkat dari 6,9 persen pada studi Riset
DNA cenderung respon oksidasi ROS.
Kesehatan Dasar (Riskesdas) 2021 menjadi
Senyawa yang muncul karena oksidasi
8,5%. Pengobatan diabetes mellitus (DM)
guaninn ialah 8-hidroksideoksiguanosi(8-
perlu dilakukan berangsur-angsur membaik
OHdG). Oksidasi guanin didalam untai
karena merupakan penyakit yang rumit dan
DNA, menyebabkan hilangnya nukleotida
progresif. Bisa mengakibatkan komplikasi
guanin DNA. Respons nonstop membawa
diabetes mellitus jangka panjang jika tak
kerusakan DNA (Tandi J, 2018).
dikelola dengan baik (PERKENI 2021).
 Nefropati diabetik (ND) merupakan bahwa konsentrat etanol daun ciplukan
komplikasi yang sering terjadi pada (Physalis angulata L.) dosis 150mg/kgBB
pasien DM. Pada penyakit ini, ada mempunyai efek yang menguntungkan
kerusakan pada saluran ginjal atau yang pada regenerasi sel tubulus ginjal pada
disebut dengan glomerullus, karna tikus putih jantan, dengan skor kerusakan
kerusakan pada glomerulus, berapa rata-rata 0,33. Menurut Tandi et al. (2017),
banyak protein darah yang dikeluarkan konsentrat etanol daun pandan wangi
kedalam urin ialah aneh. Dalam keadaan (Pandanus amaryllifolius Roxb) efektif
biasa glomerullus tak bisa dilewati oleh dalam meregenerasi jaringan ginjal saat
protein atom yang sangat besar, namun diuji pada histologi ginjal dengan dosis
dalam keadaan obsesif protein ini bisa 600mg/kgBB dan skor kerusakan rata-rata
dilewati. Diabetes nefropatik merupakan 0,6.Menurut Tandi et al. (2017), konsentrat
gangguan mikrovaskuler paling terkenal etanol daun sukun (Artocarpus altilis)
yang terjadi pada pasien DM dan berpengaruh terhadap regenerasi sel ginjal
menyebabkan beberapa ketidakteraturan tikus putih jantan dosis 400mg/kgBB,
struktur histologi ginjal (Tandi J, 2017). dengan skor kerusakan rata-rata 0,2.
Ginjal ialah organ yang
METODE PENELITIAN
menyaring dan membuang kotoran dari
Alat dan Bahan
darah yang tak dibutuhkan tubuh. Limbah
Alat
yang disaring dibuang melalui urin. Gagal
Alat yang di gunakan dalam
ginjal ialah akibat dari ginjal yang tak
penelitian ini ialah saringan no. 40, bejana
berfungsi dengan baik. Ginjal sangat
maserasi, blender, cangkir porselen, cangkir
penting dalam membuang racun dan zat
majemuk (Pyrex), cangkir perkiraan (Pyrex),
beracun dari tubuh dan menjaga
gunting (Smics), uji strip Glucotest (Accu-
keseimbangan cairan dan zat tubuh. Urea,
Chek R), batas babi Guinea, teko volumetrik
kreatinin, dan amonia ialah produk sisa
(Pyrex ) ), Mortar dan stamper, Penangas
metabolisme yang diekskresikan oleh ginjal.
air, Pipet, Rak Silinder, Pembalik Vakum
Salah satu produk yang dikeluarkan oleh
Evaporator (Hedolph), Oral sonde , Jarum
ginjal yang sehat ialah kreatinin. Aditya dkk.
Infus, Tabung Reaksi (Pyrex) , Timbangan
(2018) menyebutkan bahwa fungsi ginjal
Logis (Ohaus), Timbangan Gram.
yang lemah bisa disebabkan oleh kadar
Bahan
kreatinin darah yang terlalu tinggi.
Aquadest, amonia, asam klorida
Menurut Wirawan (2018),
(Merck), anhidrida asetat (Merck), asam
penelitian histopatologi ginjal menunjukkan
sitrat, besi (iii) klorida (Merck), buffer
formalin 10%, daun sirih merah (Piper evaporator pada suhu antara 400 dan 600
crocatum Ruiz & Pav), etanol (96 persen) derajat Celcius sebelum diuapkan dalam
( Merck), eter, etil asetat (Merck), penangas air. kemudian ditentukan.
hematoxilin, kertas saring, kloroform, Pembuatan Larutan Streptozotocin (STZ)
garam, bubuk gelatin, lieber Streptozotocin ditimbang
Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirih 0,32g kemudian dipecah menggunakan
Merah Sitrat-cushioned salin, pH 4,5 sampai 100
Serbuk simplisia dari daun sirih merah mili, kemudian digerakkan pada hewan
ditempatkan dalam bejana maserasi, pengerat melalui intraperitoneal(ip). Porsi
kemudian dipecah dengan pelarut etanol streptozotosin yaitu 30mg/kgBB
96% sebanyak 2,5liter per bejana sampai
ANALISIS DATA
semua simplisia diturunkan (± 2,5cm dari
Setelah dilakukan penskoran citra
jangkauan maksimum simplisia). saturasi,
histopatologi ginjal tikus putih, data
proses maserasi di lakukan dengan
pemeriksaan mikroskopis dianalisis
pengadukan selama tiga hari dalam
menggunakan One Way Anova, dengan
ruangan yang terhindar dari sinar matahari
syarat data harus homogen dan
langsung. Konsentrat kental daun sirih
berdistribusi normal. Uji lanjut Mann
merah (Piper crocatum Ruiz & Pav)
Whitney dan uji Kruskall Wallis di gunakan
dihasilkan dengan cara menyaring
dalam uji non-parametrik jika tak ada
konsentrat melalui konsentrat kertas,
kondisi. Perangkat lunak SPSS di gunakan
kemudian dipekatkan dalam rotary
untuk menganalisis data.

Hasil Dan Pembahasan

Tabel 1. Hasil uji penapisan fitokimia konsentrat etanol Daun Sirih Merah
Pengujian Pereaksi Pengamatan Hasil
Uji Alkaloids Dregendorf LP Terbentuknya endapan kuning orange merah bata (+)
Uji Flavonid HCL pekat dan logam Mg Terjadinya warna kuning jingga (+)
Uji Saponins Dikocok + HCL N Terjadi buih (+)
Uji Tanins Larutan NaCL 10% + Terbentuknya warna biru kehitaman (+)
FeCl3
 Gambar 1. Diagram tingkat kerusakan histopatologi ginjal

Keterangan: Sel Glomerullus : Semua normal

Sel Tubullus : Tak ada perubahan

Gambaran 2. Gambaran histopatologis ginjal tikus putih jantan dengan pewarnaan HE

Perbesaran 400x Skor 0 (Normal)

Keterangan: Sel Glomerullus : Mengalami degeneratif

Sel Tubullus : Mengalami degeneratif

Gambaran 3. Gambaran histopatologis ginjal tikus putih jantan dengan pewarnaan HE

Perbesaran 400x Skor 1(<25%)
Keterangan: Sel Glomerullus : Terjadi apoptosis
Sel Tubullus : Mengalami degeneratif

Gambaran 4. Gambaran histopatologis ginjal tikus putih dengan pewarnaan HE Perbesaran

400x Skor 2 (25%-50%)

Pembahasan control normal mempunyai nilai kerusakan

Daun tanaman sirih merah dijadikan rata-rata 0 untuk kerusakan ginjal mereka.
sebagai sampel penelitian dalam penelitian Sel-sel glomerulus dan tubulus tampaknya
ini. Metode maserasi di gunakan untuk tak rusak pada control normal. Hal ini
mengekstraksi daun sirih merah. Metode karena tak ada pengobatan diberikan pada
maserasi di gunakan karena sederhana dan control normal. Nilai kerusakan rata-rata
tak memerlukan pemanasan, sehingga pada control negatif ialah 2. Tubulus
bahan alami lebih kecil kemungkinannya mengalami degenerasi dan inflamasi sel,
untuk rusak atau rusak. sedangkan sel glomerulus mengalami
Ekstrak daun sirih merah kerusakan sedang dan apoptosis pada
mengandung metabolit sekunder seperti control negatif. Hal ini disebabkan oleh fakta
alkaloids, flavonoids, saponins, dan tanins, bahwa control negatif yang diterima induksi
yang ditentukan oleh hasil skrining fitokimia. streptozotocin dan tak menerima efek
Menurut penelitian dalam literatur (Sasmita terapeutik dari bahan alami atau obat-
et al., 2022), sirih merah mengandung obatan. BB mempunyai nilai kerusakan
alkaloids, flavonoids, saponins, dan tanins. rata-rata 1 pada 150mg/kg. Sel degeneratif
Tikus putih jantan (Rattus norvegicus) muncul di glomerulus dan tubulus pada 150
dijadikan sebagai hewan uji dalam mg/kg BB, menunjukkan kerusakan ringan.
penelitian ini. Ini ialah karena terapi diberikan dengan
Pemeriksaan data skor untuk tingkat dosis 150mg/kg BB untuk mencegah
kerusakan ginjal menunjukkan bahwa kerusakan sel tubulus.mempunyai nilai
kerusakan rata-rata 0 pada dosis mengalami kerusakan. fakta bahwa
250mg/kgBB dan 350mg/kgBB, masing- 150mg/kgBB mempunyai efek yang lemah,
masing.Sel glomerulus dan tubulus tak mencegah kerusakan. Tak berbeda nyata
terpengaruh dengan cara apa pun yang dengan control normal pada 250mg/kgBB
bisa dilihat.Hal ini disebabkan oleh dan 350mg/kgBB. Hal ini menunjukkan
peningkatan kemampuan dosis terapeutik bahwa dosis 250mg/kgBB yang mempunyai
yang lebih baik untuk mencegah kerusakan kerusakan rata-rata 0,6, dan dosis
sel tubulus dan glomerulus. 350mg/kgBB yang mempunyai kerusakan
Nilai skoring histopatologi ginjal rata-rata 0, 2 mempunyai tingkat kerusakan
p=0,001 (p0,005) yang menyatakan bahwa rendah yang mendekati normal. Hal ini
terdapat perbedaan control dari masing- disebabkan karena tanaman sirih merah
masing kelompok perlakuan yaitu normal, mempunyai efek farmakologis yang
control negatif, dan konsentrat daun sirih memungkinkan untuk kembali normal.
merah (dosis 150mg/kgBB), didasarkan Terdapat perbedaan yang signifikan antar
pada analisis statistik uji nonparametrik kelompok jika dibandingkan dosis
Kruskal-Wallis, dosis masing-masing 150mg/kgBB, 250mg/kgBB, dan
350mg/kgBB dan 250mg/kgBB). Uji 350mg/kgBB. mg/kg BB, menunjukkan
tambahan Mann-Whitney di gunakan untuk bahwa masing-masing kelompok
menentukan perbedaan antara masing- mempunyai efek yang berbeda dalam
masing kelompok perlakuan. mencegah kerusakan. Hal ini disebabkan
Dengan control negatif, uji Mann- fakta bahwa dosis 250mg/kgBB dan
Whitney menunjukkan perbedaan yang 350mg/kgBB mempunyai efek yang lebih
signifikan antara kelompok dosis 150, 250, besar daripada dosis 150mg/kgBB. Dari
dan 350mg/kgBB, menunjukkan bahwa jumlah tersebut, dosis 250mg/kgBB dan
ketiga dosis menyebabkan kerusakan yang 350mg/kgBB dianggap aman dan efektif
lebih kecil daripada control negatif. Hal ini untuk mencegah kerusakan sel tubulus
karena ketiga kelompok dosis mengalami ginjal dan glomerulus.
efek terapeutik dari senyawa tanaman yang Berdasarkan pemeriksaan
melindungi sel tubulus ginjal dari kerusakan. histopatologi ginjal tikus terbukti bahwa
Jika dibandingkan dengan dosis konsentrat etanol daun sirih merah bisa
150mg/kgBB yang mempunyai nilai mencegah kerusakan sel ginjal tikus. Pada
kerusakan 1, dosis 150mg/kgBB dengan dosis 150, 250, dan 350mg/kgBB,
control normal mempunyai perbedaan yang konsentrat etanol daun sirih merah
signifikan yaitu control normal tak mencegah sel ginjal pada tikus putih jantan,
dengan efek yang lebih besar pada sukun dengan dosis 400mg/kgBB
350mg/kgBB. Hal ini dikarenakan mencegah kerusakan sel tubulus ginjal
kandungan aktifnya yang lebih dengan nilai rata-rata sebesar 0,2 (Tandi et
terkonsentrasi pada konsentrat etanol daun al., 2017). Dengan dosis 350mg/kgBB dan
sirih merah, sehingga memungkinkan sel- nilai lean rata-rata 0,2, mengungguli
sel ginjal, khususnya yang berada di tubulus konsentrat etanol daun sirih merah pada
proksimal, untuk lebih mencegah penelitian sebelumnya. Nilai kerusakannya
kembalinya sel-sel ginjal yang rusak. sama dengan daun sukun konsentrat, 0,13
Konsentrat etanol daun sirih merah, yang dengan konsentrat daun ciplukan dan 0,6
membantu memperbaiki sel ginjal pada dengan daun pandan wangi.Hal ini karena
tikus putih jantan dan mengandung tanaman yang berbeda mempunyai
antioksidan, flavonoids, dan senyawa metabolit sekunder yang berbeda, sehingga
fenolik. Antioksidan ialah zat yang bisa di setiap tanaman membutuhkan dosis yang
gunakan tubuh untuk mencegah dan berbeda.untuk mencapai sel yang dituju dan
memperbaiki kerusakan jaringan atau mencegah kerusakan sel tubulus
organ, seperti yang dikemukakan oleh ginjal.Pada penelitian sebelumnya, red
Nabila.2019.Antioksidan mampu mengikat konsentrat daun sirih ialah ditemukan
oksigen dengan cara mencegahnya menyebabkan kerusakan yang lebih sedikit.
mendukung reaksi oksidasi karena Dibandingkan dengan tanaman lain, sirih
merupakan pemulung oksigen bagi radikal merah mempunyai metabolit sekunder
bebas. Antioksidan bisa menetralkan radikal flavonoids, alkaloids, saponins, dan tanins
bebas, memulihkan sel-sel ginjal yang rusak yang lebih banyak.
dan memungkinkannya berfungsi dengan Menurut hasil uji penapisan fitokimia,
baik sebagai penyaring darah. kandungan alkaloids, flavonoids, saponins,
Wirawan (2018) mengklaim bahwa dan tanins mempunyai efek mencegah
dalam studi histopatologi ginjal, konsentrat kerusakan akibat pemberian konsentrat
etanol daun ciplukan dengan dosis etanol daun sirih merah pada cedera
100mg/kgBB mencegah kerusakan sel tubulus ginjal tikus. Flavonoids yang
tubulus ginjal sebelumnya dengan nilai berfungsi sebagai antioksidan untuk
kerusakan rata-rata 0,33. Pada dosis mencegah pembentukan radikal bebas
600mg/kgBB, konsentrat etanol daun (ROS) terkait diabetes dan regenerasi sel
ciplukan pandan mencegah kerusakan sel pankreas yang rusak, merupakan
tubulus ginjal dengan nilai rata-rata 0,6 komponen konsentrat etanol daun sirih
(Tandi et al.,2017). Konsentrat etanol daun merah yang bisa menurunkan kadar
glukosa darah. Penyamakan mampu 2.Pada tikus putih jantan (Rattus
membentuk oksigen teroksidasi, dan norvegicus), konsentrat etanol daun sirih
saponins bisa menurunkan kadar glukosa merah (Piper Crocatum Ruiz & Pav) pada
darah dengan menghambat glukosa di berbagai dosis (150mg/kgBB, 250mg/kgBB,
saluran cerna dan memicu ekskresi insulin dan 350mg/kgBB) berpotensi untuk
di sel pankreas. Alkaloids mempunyai sifat mencegah kerusakan tubulus ginjal yang
antioksidan dengan cara menghambat disebabkan oleh streptozotocin.
reaksi sehingga pembentukan rantai bebas 3. Pada tikus putih jantan (Rattus
dihambat dengan mendonorkan proton norvegicus), dosis efektif konsentrat etanol
kepada radikal bebas (Serang). dan Bani daun sirih merah (Piper Crocatum Ruiz &
(2017). Pav) pada 350mg/kgBB bisa mencegah
kerusakan tubulus ginjal akibat
KESIMPULAN streptozotocin.
Salah satu kesimpulan yang bisa SARAN
ditarik dari hasil penelitian ini ialah: Menurut temuan penelitian (Piper
1. Metabolit sekunder alkaloids, flavonoids, Crocatum Ruiz & Pav), dimungkinkan untuk
saponins, dan tanins bisa ditemukan pada menyarankan bahwa pengujian kuantitatif
konsentrat etanol daun sirih merah (Piper dilakukan untuk memastikan kadar
Crocatum Ruiz & Pav). metabolit sekunder sirih merah.