Spektrofotometri Ultraviolet dan

Tampak
 Radiasi Elektromagnetik
Radiasi elektromagnetik, sinar uv dan sinar
tampak merupakan salah satunya,dapat dianggap
sebagai energi yang merambat dalam bentuk
gelombang.
Dimensi panjang gelombang adalah panjang yang
dapat dinyatakan dalam (cm), atau yang lebih
umum adalah unit-unit berikut :
1 angstrom (A) = 10-8 cm=10-10cm
1 nano angstrom (A) = 10-7 cm= 10-9m= 1m =10A
1 mikrometer (m)= 10-6m=10-4cm= 1 ()
 Penyerapan radiasi Oleh molekul
Huruf latin lamda () merupakan simbol yang
umum digunakan untuk panjang gelombang.

Ada hubungan antara energi yang dimiliki radiasi

elektromagnetik, frekuensi, dan panjang
gelombang.
E= hv... E= energi radiasi cahaya
h= tetapan plank yang harganya 6,626x 10-34
c= kecepatan cahaya yang harganya 2,2998
x1010
V=c/ -- E= hc/ = panjang gelombang
Penyerapan Sinar Ultra Violet dan sinar
tampak Oleh Molekul
Fenomena molekul yang mempunyai energi
antara lain :
1. Energi translasi
2. Energi vibrasi
3.Energi rotasi
4. Energi Eletronik
Penyerapan sinar Ultra violet dan sinar
2 proses langkah penyerapan energi
Yang pertama adalah melibatkan eksitasi
sebagaimana ditunjukkan persamaan berikut
M + hv M*
Yang kedua proses relaksasi
M* - M + energi

Ada tiga macam proses penyerapan energi ultra

violet
 Ada tiga macam proses penyerapan energi
ultra violet
1. Penyerapan oleh transisi elektron ikatan
dan elektron anti ikatan
2. Penyerapan oleh transisi elektron d dan f
dari molekul komplek: dan f dari molekul
kompleks
3. penyerapan oleh perpindahan muatan
 Elekton sigma, elektron phi, dan elektron bukan ikatan atau non
bonding.
Transisi elektronik yang terjadi ada 4 macam
Transisi elektron * energi yang diserap terletak pada uv
vacum ( kurang dari 180 nm)
Jenis transisi kurang begitu bermanfaat untuk analisa spektroskopi UV-
vis.
`n * energi yang diperlukan untuk transisi ini lebih kecil
dibanding transisi * sehinggga sinar yang diserappun
mempunyai panjang gelombang lebih panjang yakni sekitar 150-250
nm
n * -- *
Jenis transisi ini merupakan transisi yang paling cocok untuk analisa
sebab sesuai dengan panjang gelombang antara 200-700 nm
 Aspek kualitatif dan Kuantitatif
Spektrofotometri-Uv Vis
1. aspek Kualitatif
Data yang diperoleh dari spektroskopi UV dan dan Vis adalah panjang gelombang
maksimal, intensitas , efek pH, dan pelarut
2. aspek Kuantitatif
Radiasi yang diserap oleh cuplikan ditentukan dengan membandingkan harga
intensitas sinar yang diteruskan dan intensitas sinar yang diserap jika tidak ada
penyerapan sinar spesies penyerapan lainnya.
Jika sinar monokromatik dilewatkan melalui lapisan larutan dengan suatu
ketebalan dB, maka penurunan intensitas sinar (dl) karena melewati lapisan
larutan (db) berbanding lurus dengan intensitas radiasi, konsentrasi spesies
menyerap (c) dan ketebalan lapisan larutan (db). Secara matematis
-dI= KIcdb
Kemudian di integrasikan
dI/I= k cdb..
-ln I/Io = kbc
I= Io e-kbc
Dan diperoleh I = Io 10 kbc
 dengan k/2,303 = a maka akan di dapat persamaan
log Io/I = abc
A= abc
A= absorban
a= absorptivitas
b= tebal kuvet
c= konsentrasi
Hubungan antara nilai E dengan absorbtivitas molar
= E x BM/10
Hukum lambert-beer tersebut tersebut ada beberapa batasan
1. sinar yang digunakan dianggap monokromatis
2. penyerapan terjadidalam suatu volume yang mempunyai penampang luas yang
sama
3. senyawa yang menyerap dalam larutan tersebut tidak tergantung terhadap yang
lain dalam larutan yang lain dalam larutan tersebut.
4. tidak terjadi peristiwa fluoresensi atau fosforesnsi.
Indeks bias tidak tergantung pada konsentrasi larutan
Hal-hal yang harus diperhatikan dalam
analisis Spektrofotometer UV-Vis
A. Pembentukkan molekul yang dapat menyerap sinar UV Vis
Hal yang perlu dilakukan untuk senyawa-senyawa yang tidak menyerap pada
daerah tersebut. Cara yang digunakan adalah dengan merubahnya menjadi
senyawa lain atau direaksikan dengan pereaksi tertentu.
Reaksinya selektif dan sensitif
Reaksinya cepat, kuantitatif, dan reprodusible
Hasil reaksi stabil dalam jangka waktu lama
B. Waktu operasional
Cara ini biasa digunakan untuk pengukuran hasil reaksi atau pembentukkan warna
Tujuan : untuk mengetahui waktu pengukuran yang stabil.
C. Panjang gelombang
Panjang gelombang yang digunakan untuk analisis
D. Pembuatan kurva baku
E. Pembacaan absobansi sampel atau cuplikan
Absorban yang terbaca pada spektro fotometer hendaknya antara 0,2 sampai 0,8
atau 15 % sampai 70 %
Spektrofotometri UV-Vis
Instrumentasi spektrofotometri UV-Vis
Instrumentasi spektrofotometri UV-Vis