DASAR-DASAR PEMERIKSAAN

MIKROBIOLOGI
METODE IDENTIFIKASI DAN
DIAGNOSIS MIKROBIOLOGI
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS :
Pemeriksaan Lab.dilakukan u/ menget.penye-
bab penyakit, menilai perkembangan penyakit
stlh pengobatan,atau u/meyakinkan kebenaran
penyebab penyakit yg diduga berdasarkan gejala
klinisnya yg khas.
Untuk mengetahui penyebab penyakit infeksi,
dilakukan penanaman (kultur).
Hasil pemeriksaan kultur akan digunakan sbg
pedoman dalam pengobatan,perawatan, dan
tindakan lain pd penderita.
Krn pemeriksaan Lab. Penting, maka pengambilan
dan penanganan specimen harus benar.
Pemeriksaan Lab dpt dilakukan berbagai cara
sbb :
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS :
Bbrp jenis penyakit dpt didiagnosa ckp dgn
menemukan bibit penyakit pd specimen segar,
misalnya : penyakit yg disebabkan o/ Protozoa
,cacing dan jamur.
Sementara penyakit yg disebabkan o/ bakteri,
umumnya tdk ckp hanya dgn pem.mikroskopis
,krn morphologi bakteri tdk memiliki ciri khas
u/ membedakan antar bakteri.
Bahan dan Alat yg dibutuhkan u/ pemeriksaan
MIKROSKOPIS :
Specimen, koloni bakteri, suspensi bakteri.
Larutan Garam Fisiologi steril
Objeck Glass dan Deck Glass
Mikroskop
Minyak imersi
Xylol
Zat Warna/cat pewarnaan
Botol semprot aquades
Lampu spiritus
Ose/jarum ent
Pinset anatomi
Bak Pengecatan
Tissu, kapas putih dan Centrifuge.
Pemeriksaan Jenis Bakteri :
Pemeriksaan jenis bakteri disini,hanya
mengamati secara mikroskopis dgn menggnkn
mikroskop.
Untuk pengamatan yg lbh baik,mk hrs dilkkan
pengecatan/pewarnaan pd bakteri.
Pemeriksaan mikroskopis hanya akan menget.
Morphologi,sifat pewarnaan dan gerak bakteri
Sebelum pengecatan dan pengamatan bakteri
maka harus membuat sediaan lbh dulu.
CARA MEMBUAT SEDIAAN :
Ambil objeck glass,bersihkan dgn tisu kering.
Bila menggunakan spesimen yg purulen, atau
koloni bakteri , maka harus ditambah garam
fisiologi steril, bila spesimen cair (suspensi)
bakteri, tidak butuh garam fisiologi, dan bila
specimen cair (urin), centrifuge,endapan yang
diambil.
Letakkan objeck glass diatas meja porselen,
ambil specimen seujung ose,bila perlu tambah
garam fisiologi 1 ose, ratakan diatas kaca
objek setipis mungkin.
* Keringkan diudara(angin-anginkan).
* Lakukan Fiksasi ,lalukan diatas api 3kali.
Fungsi fiksasi adalah : merekatkan specimen
pd objek glass dan membunuh kuman.
Fiksasi ada juga dgn cara merendam dalam
methanol.
Sediaan siap untuk diwarnai/ di Cat.
Macam-macam pewarnaan bakteri :
Pewarnaan negatip : u/melihat simpai/kapsul
bakteri dan u/ melihat bakteri bentuk spiral.
Pewarnaan Tunggal: menggnkn 1 mcm zat
warna.(methylen blue ).
Pewarnaan Ganda/majemuk :
* Pewarnaan Gram * Pewarnaan Tahan Asam
atau BTA.
Pewarnaan Khusus :
* Pewarnaan Gray : u/ melihat Flagel
* Pewarnaan Klein : u/ melihat endospora.
* Pewarnaan Neisser :u/ mlihat bakteri diphteri
* Pewarnaan Castaneda : u/ Rickettsia.
Pewarnaan Giemsa : U/ melihat parasit, dan
sel darah.
Cara Pewarnaan Gram :
Siapkan sediaan yg sdh difiksasi, Gram Colour (A,
B,C,& D ), 3 Zat warna & 1 Decolorisasi.
Sediaan yg telah difiksasi diletakkan diatas bak
pewarnaan.
Ambil Gram A (Gentian Violet),tetes kan diatas
sediaan, hingga tergenang,biarkan 2 menit.
* Cuci dgn air mengalir tiriskan.
* Teteskan Gram B ( Lugol ) biarkan 30 detik
Cuci dgn air mengalir, tiriskan.
Bubuhkan Gram C (Alkohol Aceton 5% )/Deco
lorisasi, sampai warna hitam tengguli luntur.
Cuci dgn air mengalir dan tiriskan.
Bubuhkan Gram D (Safranain/Fuchsin),biarkan
selama 1 menit.
Cuci dgn air mengalir,tiriskan,keringkan dan
siap diamati dibawah mikroskop dgn lensa
objektip 100X,ditambah setetes imersi Oil.
* Gram Positip akan tmpk bakteri bwarna Ungu.
* Gram Negatip tampak bakteri bwarna Merah
*Cara Pewarnaan Tahan Asam :
*Pewarnaan Tahan Asam dikenal dgn BTA =
Basil Tahan Asam./Zeihl Neelson Colour.( 2 zat
warna dan 1 Decolorisasi ).
* Sediaan yg sdh difiksasi diletakkan diatas bak
pewarnaan.
* Teteskan Zn 1 (Carbol Fuchsin) diatas sediaan
hingga tergenang,panaskan diatas nyala api
 sampai menguap tidak mendidih selama 5 menit.
* Cuci dgn air mengalir dan tiriskan.
Teteskan Zn 2 (Alkohol Asam 3 %), sampai
warna merah hilang.(Decolorisasi).
Cuci dgn air mengalir, tiriskan.
Bubuhkan Zn 3(Methylen Blue/Malachyt
Green) ,biarkan 1 menit.
Cuci dgn air mengalir, tiriskan dan keringkan.
Siap diamati dibwh mikroskop dgn perbesaran
lensa objektip 100 X, tambah imersi oil.
* Bacil Tahan Asam Positip bila ditemukan bakte
ri bentuk bacil berwarna Merah.
Dalam pemeriksaan mikroskopis, tdk
dilakukan identifikasi, sehingga tdk akan diket.
Bakteri apa, tetapi akan dilaporkan
morphologi bakteri yg dpt diamati dibawah
mikroskop, misalnya :
Ditemukan bakteri bentuk Coccus dgn formasi
dua-dua bersifat Gram negatip intracelluler
jumlah banyak/ LPB, dan jml lekosit banyak
/LPB.
S e l e s a i