KRISTALISASI PROTEIN

Kristalisasi makromolekul dalam bentuk yang cocok

untuk difraksi sinar-X melibatkan berbagai optimasi
parameter larutan.

Proses kristalisasi dimulai dari pembentukan inti

dalam larutan superjenuh kemudian dilanjutkan dengan
pertumbuhan kristal.

Kondisi larutan untuk mencapai

pembentukan inti dan pertumbuhan kristal berbeda
diantara teknik-teknik kristalisasi. Karena keperluan
superjenuh spesifik untuk nukleasi dan pertumbuhan
berbeda-beda diantara protein-protein

strategi kristalisasi harus melibatkan variasi berbagai

teknik.
 TUJUAN

 sebagai metode purifikasi

 sebagai konfirmasi homogenitas
 sebagai metode penyimpanan yang
stabil
 untuk menentukan struktur tersier
melalui teknik difraksi
 TEKNIK KRISTALISASI

 HANGING DROP
SITTING DROP
 FAKTOR PENTING DALAM
KRISTALISASI PROTEIN

 KEMURNIAN PROTEIN (setidaknya 97% murni)

 pH
 KONSENTRASI PROTEIN
 SUHU
 PRESIPITAN
 Kandungan reservoir

 Buffer
 Presipitan :
1. PEG
2. Ammonium sulfat
3. Beberapa trace element (ion atau
logam )
KRISTAL TUNGGAL LYSOZYME
Beberapa kristal hasil penelitian Lab.
Biokimia FMIPA Unair
CRYSTALIZATION OF ABFA

Monoclinic
10% PEG 3000, 0.1M phosphate citrate pH 5.0,
0.2M NaCl
STRUCTURE OF ABFA from Geobacillus
thermoleovorans IT-08 (2005)
 CRYSTALIZATION OF XYL

Bipyramide Rectangular

0.1M HEPES pH 7.0, 5% (w/v) 0.1M HEPES pH 7.0, 13% (w/v)

PEG 6000 PEG 6000