BILIRUBIN

Bilirubin adalah pigmen kuning yang berasal dari perombakan heme dari hemoglobin dalam
proses pemecahan eritrosit oleh sel retikuloendotel.
Disamping itu sekitar 20% bilirubin berasal dari perombakan zat-zat lain. Selretikuloendotel
membuat bilirubin tidak larut dalam air; bilirubin yang disekresikan dalam darah harus diikatkan
kepada albumin untuk diangkut dalam plasma menuju hati. Di dalam hati, hepatosit melepaskan
ikatan itu dan mengkonjugasinya dengan asam glukoronat sehingga bersifat larut air. Proses
konjugasi ini melibatkan enzim glukoroniltransferase.Bilirubin terkonjugasi (bilirubin glukoronida
atau hepatobilirubin) masuk kesaluran empedu dan diekskresikan ke usus. Selanjutnya flora usus
akan mengubahnya menjadi urobilinogen dan dibuang melalui feses serta sebagian kecil melalui
urin. Bilirubin terkonjugasi bereaksi cepat dengan asam sulfanilatyang terdiazotasi membentuk
azobilirubin (reaksi van den Bergh), karena itu sering dinamakan bilirubin direk atau bilirubin
langsung. Bilirubin tak terkonjugasi (hematobilirubin) yang merupakan bilirubin bebas yang
terikat albumin harus lebih dulu dicampur dengan alkohol, kafein atau pelarut lain sebelum dapat
bereaksi, karena itu dinamakan bilirubin indirek atau bilirubin tidak langsung
 Manfaat Pemeriksaan Bilirubin

Deteksi berbagai kondisi seperti :
1)penyakit hepatobilier, hepatitis, sirosis,dan penyakit hati
lainnya;
2) malnutrisidan anoreksia;
3) anemia pernisiosa,anemia hemolitik, neonatal
jaundice,hematoma, dan fetal aritoblastosis;
4)pulmonary embolism;
5) congestive heartfailure (CHF).
Metode Pemeriksaan Bilirubin Total dan Direk

Jendrassik & Grof

Metode Jendrassik &
Grof

Prinsip
Bilirubin bereaksi dengan DSA ( diazotized sulphanilic acid) dan membentuk senyawa azo
yang berwarna merah. Daya serap warna dari senyawa ini dapat langsung dilakukan terhadap
sampel bilirubin pada panjang gelombang 546 nm. Bilirubin glukuronida yang larut dalam air
dapat langsung bereaksi dengan DSA, namun bilirubin yang terdapat di albumin yaitu bilirubin
terkonjugasi hanya dapat bereaksi jika ada akselerator. Total bilirubin  bilirubin direk +
bilirubin indirek

Alat dan Bahan

• Tabung reaksi
• Mikropipet
• Blue tip dan yellow tip
• Tisu
• Reagen pereaksi
• Fotometer
Persyaratan Sample

Serum atau plasma heparin boleh digunakan.

Hindari sampel yang hemolisis dan sinar matahari langsung. Sinar matahari langsung dapat
menyebabkan penurunan kadar bilirubin serum sampai 50 % dalam satu jam. Karena itu,
serum hendaknya disimpan di tempat yang gelap, dan pengukuran hendaknya dikerjakan
dalam waktu 2 hingga 3 jam setelah pengumpulan darah
Prosedur

Bilirubin Total

1. Alat serta bahan yang akan digunakan disiapkan,

2.    Kemudian dipipet kedalam kuvet reagen bilirubin total sebanyak 1000 µl,
3.    Ditambahkan reagen T-Nitrit sebanyak 1 tetes, dihomogenkan dengan baik kemudian diinkubasi
selama 5 menit.
4.    Kemudian ditambahkan serum (darah yang telah disentrifuge) sebanyak 100 µl dan dimasukkan
kedalam kuvet yang berisi reagen
5.    Larutan dihomogenkan dengan menggunakan mikropipet dan di inkubasi selama 15 menit menit
pada suhu 370c.
6.    Kemudian blanko diperiksa terlebih dahulu dan diikuti pembacaan sampel  pada alat humalyzer.
 Bilirubin Direk

1.    Alat serta bahan yang akan digunakan disiapkan,

2.    Dipipet ke dalam kuvet reagen bilirubin direct sebanyak 1000 µl,
3.    Ditambahkan reagen D-Nitrit sebanyak 1 tetes, dihomogenkan dengan baik
4.    Ditambahkan serum dalam 2 menit sebanyak 100 µl dan dimasukkan kedalam kuvet yang
berisi reagen.
5.    Larutan dihomogenkan dengan menggunakan mikropipet kemudian di inkubasi selama 5
menit tepat pada suhu 370c
6.    Kemudian blanko diperiksa terlebih dahulu dan diikuti pembacaan sampel  pada alat
humalyzer
Bilirubin Indirek

Untuk prosedur kerja bilirubin indirek menggunakan perhitungan dimana

hasil didapatkan dari :

Bilirubin Indirek = Bilirubin Total – Bilirubin Direk

Gangguan Pemeriksaan

1. Makan malam yang mengandung tinggi lemak sebelum pemeriksaandapat

mempengaruhi kadar bilirubin.
 
2. Wortel dan ubi jalar dapat meningkatkan kadar bilirubin.
 
3. Hemolisis pada sampel darah dapat mempengaruhi hasil pemeriksaan.
 
4. Sampel darah yang terpapar sinar matahari atau terang lampu,
kandunganpigmen empedunya akan menurun.
 
5. Obat-obatan tertentu dapat meningkatkan atau menurunkan kadarbilirubin
 Nilai Rujukan
DEWASA :
total : 0.1 – 1.2 mg/dl
direk : 0.1 – 0.3 mg/dl,
indirek : 0.1 – 1.0 mg/dl

 ANAK:
total : 0.2 – 0.8 mg/dl,
direk : 0.1 – 0.3 mg/dl
indirek  : 0.1 – 1.0 mg/dl

BAYI BARU LAHIR:

total : 1 – 12 mg/dl,
direk : 0.1 – 0.3 mg/dl
indirek : 0.1 – 1.0 mg/dl