Bacalah materi dan amatilah video pembelajaran pertemuan 12, yang telah disajikan, Dari

tayangan tersebut analisislah apakah enzim restriksi?, samakah dengan enzim yang lain?
apakah vector? Apakah sel inang?

Orietasi  Enzim Restriksi

Enzim restriksi adalah enzim yang dapat mengenali dan memotong kedua utas DNA
masalah (Deoxy Ribonucleic Acid) pada urutan basa tertentu. Enzim ini mencari sekuens
spesifiknya dengan cara menempel pada DNA secara spesifik maupun nonspesifik,
kemudian berdifusi secara linier dengan kecepatan tertentu hingga ditemukan sekuens
spesifik yang dikenalinya. Setelah sekuens spesifik dikenali, perubahan konformasi
enzim dan DNA akan terjadi (Pingoud et al., 1993). Ikatan yang didapat saat enzim
restriksi memotong DNA yaitu Ikatan kovalen (dalam satu untai) dan Ikatan hidrogen
(antar untai) sebagai akibat dari untaian yang terlepas
• Vektor Kloning
Enzim restriksi merupakan suatu vektor. Vektor kloning merupakan suatu
komponen pembawa gen yang akan dimasukan ke dalam sel inang. Suatu
vektor kloning harus memiliki bagian titik mula replikasi atau ORI (Origins of
replication) yang menandai tempat dimulainya replikasi DNA, gen seleksi
(selectable marker) yang membantu mengidentifikasi sel yang akan diubah
dari sel aslinya, dan situs restriksi (restriction site) atau daerah kloning
merupakan urutan DNA khas yang akan dikenali oleh enzim restriksi.

• Sel Inang
Dalam biologi, adalah organisme yang menampung virus, parasit, partner
mutualisme, atau partner komensalisme, umumnya dengan menyediakan
makanan dan tempat berlindung. Contohnya suatu sel dapat menjadi inang
bagi virus, gulma dapat menjadi inang bagi bakteri pengikat nitrogen, dan
hewan dapat menjadi inang bagi cacing parasitik seperti nematoda.
PENCE Berdasarkan pengamatan saudara diskusikan dengan kompok saudara hal-hal berikut ini:

TUSAN
Setelah saudara cermati video pembelajaran di atas, bagaimanakah kerja enzim restriksi?, Apa jenis
enzim restriksi yang biasa digunakan dalam rekayasa genetika? Untuk apakah Vector tesebut? Apa ciri-
ciri vector yang dapat digunakan? Ada berapa banyak jenis vector tersebut?

IDE Mekanisme reaksi restriksi

Enzim restriksi memotong DNA dalam dua cara dan hasil yang berbeda, yaitu :
a) Hasil pemotongan berujung tumpul (blunt atau flush end), Enzim ini memotong secara simetris
antara kedua utas DNA sehingga menghasilkan ujung tumpul. Contoh enzim yang menghasilkan
pola seperti ini adalah SmaI
b) Hasil pemotongan berujung lancip atau lengket (sticky atau cohesive ends), Pola seperti ini lebih
mudah menempel (annealing) dengan pasangan DNA nya karena adanya ikatan basa antara
ujung-ujung yang menggantung.
• Ujung menggantung 5’, Enzim ini memotong secara asimetris pada situs pemotongan, menghasilkan
hasil pemotongan memanjang pada ujung 5’. Contoh enzim yang menghasilkan ujung menggantung
5’ adalah BamHI
• Ujung menggantung 3’, Enzim ini juga memotong secara asimetris pada situs pengenalan, namun
menghasilkan hasil pemotongan memanjang pada ujung 3’. Contoh enzim yang menghasilkan pola
seperti ini adalah KpnI
 jenis enzim restriksi yang biasa digunakan dalam rekayasa genetika
Secara umum, jenis enzim restriksi yang biasa digunakan dalam rekayasa genetika dapat dibedakan ke
dalam 3 tipe, berdasarkan pada komposisi sub unit, posisi pemotongan, spesifisitas sekuen DNA, dan
perlu tidaknya kofaktor.
1) Enzim tipe I merupakan enzim yang kompleks, multi sub unit, kombinasi antara restriksi dan
pemodifikasi yang memotong DNA pada area random yang jauh dari sisi pengenalan. Enzim ini
secara biokimia mungkin banyak berfungsi di dalam sel, tetapi kurang menguntungkan untuk
digunakan dalam percobaan di laboratorium.
2) Enzim tipe II memotong DNA pada posisi tertentu yang dekat atau berada di antara sekuen yang
dikenalnya. Enzim ini menghasilkan fragmenfragmen tertentu dengan pola pita-pita yang spesifik
pada gel agarosa. Enzim tipe inilah yang dipakai untuk berbagai percobaan dalam analisis DNA
dan kloning gen.

3) Enzim tipe III juga merupakan kombinasi restriksi dan enzim pemodifikasi. Enzim ini memotong
DNA di luar sekuen yang dikenal dan memerlukan 2 sekuen yang sama pada orientasi yang
berlawanan pada untai DNA yang sama untuk dapat memotong. Enzim-enzim ini jarang
menghasilkan potongan yang sempurna.
 Untuk apakah vector tesebut?
Vektor kloning dalam teknik rekayasa genetika berfungsi sebagai situspengenalan endonuklease
restriksi, dimana informasi genetik dapat disisipkan. Selain itu, vektor kloning berfungsi sebagai titik
mula replikasi atau ORI (Origins of replication) yang menandai tempat dimulainya replikasi DNA, gen
seleksi (selectable marker) yang membantu mengidentifikasi sel yang akan diubah dari sel aslinya, dan
situs restriksi (restriction site) atau daerah kloning merupakan urutan DNA khas yang akan dikenali oleh
enzim restriksi.
• Apa ciri-ciri vector yang dapat digunakan?
Karakteristik penting yang harus dimiliki oleh suatu vektor kloning sehingga dapat digunakan adalah :
1. Stabil dalam sel inang
2. Mengandung gen resistensi antibiotik tertentu, sehingga memudahkan seleksi dari gen rekombinan
3. Memiliki titik ori (sebagai titik awal replikasi), sehingga bisa bereplikasi atau multiplikasi sendiri.
Dengan kata lain, plasmid tersebut dapat berbiak autonom serta dapat mengontrol replikasinya
sendiri
4. Memiliki daerah restriksi atau MCS, yang dapat dipotong dengan enzim restriksi endonuklease
tertentu
5. Berukuran kecil
6. Dipotong pada situs tunggal oleh endonuklease restriksi
7. Tidak ditransfer dengan konjugasi
8. Cirinya dengan mudah dideteksi
9. Dengan mudah di isolasi dari sel
 Ada berapa banyak jenis vector tersebut?
Terdapat beberapa jenis vektor kloning yang telah diketahui yaitu plasmid, bakteriofaga, kosmid, vektor,
YAC, virus hewan dan virus tumbuhan.
a. Plasmid, merupakan vektor kloning yang paling sering digunakan dalam proses kloning pada bakteri.
Plasmid adalah DNA ekstrakromosomal yang biasanya berbentuk sirkuler, dan plasmid ini ditemukan
dalam sel bakteri. Bakteri memiliki kemampuan pembelahan yang cepat, sehingga plasmid sering
digunakan sebagai vektor pembawa gen untuk memproduksi suatu produk tertentu dalam waktu yang
cepat.
b. Bakteriofaga, merupakan virus yang menginfeksi bakteri dengan memasukan DNA nya ke dalam
bakteri inang. DNA virus dapat dimanipulasi dengan cara disisipi gen asing kemudian dimasukan ke
dalam bakteri. Bakteriofafa yang dikembangkan untuk vektor kloning yaitu bakteriofag lambda dan
M13.
c. Kosmid, merupakan kombinasi dari beberapa bagian vektor plasmid dan situs COS bakteriogaf
lambda. Kosmid memungkinkan DNA target masuk ke dalam kepala lambda. Keuntungan dari
penggunaan kosmid adalah tingkat efisiensi transformasinya yang tinggi dan dapat membawa 45kb
DNA asing.
d. Vektor YAC, merupakan vektor yang dikembangkan untuk mengkloning segmen
DNA yang sangat besar.
f. Virus hewan, DNA virus hewan dapat dimanipulasi untuk memasukan DNA asing ke
dalam sel hewan yang dibudidayakan. Contohnya, Simian virus 40 (SV 40), Adenovirus
dan Papiloma virus.
g. Virus tumbuhan, virus ini dapat dimanipulasi untuk memasukan DNA asing ke dalam
sel tumbuhan. Contohnya, Tobacco Mosaic Virus (TMV) dan Cauliflower Mosaic Virus
(CaMV).
PENSTR
Dari pencetusan ide tersebut diskusikan dalam kelompok saudara sebagai berikut:
UKTURA Buatlah tabel yang berisi jenis-jenis enzim restriksi type 2 dan daerah pengenalannya.

N IDE Buatlah tabel yang berisi jenis-jenis vektor dan ukurannya

Enzim ini memotong DNA dekat atau pada situs pengenalan. Enzim ini menghasilkan
fragmen-fragmen sesuai dengan yang diinginkan sehingga biasa digunakan untuk
analisis DNA dan kloning gen. Enzim tipe II yang umum digunakan adalah HhaI,
HindIII, EcoRI, dan NotI; dan enzim-enzim tersebut tersedia secara komersial. Enzim
ini tergolong kecil dengan subunit yang memiliki 200-350 asam amino dan
memerlukan Mg2+ sebagi kofaktor. Selanjutnya enzim jenis tipe II yang umum,
biasanya digolongkan sebagai tipe IIs, adalah FokI dan AlwI. Enzim ini memotong di
luar situs pengenalan, berukuran sedang, 400-650 asam amino, dan memiliki 2 domain
khusus. Domain pertama untuk berikatan dengan DNA, sedangkan domain yang
satunya untuk memotong DNA.
APLIKA Jika urutan DNA berikut ini di reaksikan dengan enzim resktriksi Bam H1 apa yang

SI terjadi? analisislah Fragmen DNA yang dihasilkan?

5’ TCG-AAA-CAG-AGA-CCG-TTG-TAG-TTA-CTG-ACC-TAA-TAG-CAA-GTG-
TCT-TAA-CTA-AAG-GGA-GAG-CTA-GTA-TAC-TCA-ACG-TCT-AGA-CTA- TTG-
GAG-CTG-AAC-TCC-CGG-CTC-GGT 3’
Anti sense
3’ AGC – TTT – GTC – TCT – GGC – AAC – ATC – AAT – GAC – TGG – ATT –
ATC – GTT – CAC – AGA – ATT – GAT – TTC – CCT – CTC – GAT – CAT – ATG –
AGT – TGC – AGA – TCT – GAT – AAC – CTC – GAC – TGG – AGG – GCC – GAG
– CCA 5’
Direaksikan dengan enzim Restriksi BamHI
Ketika urutan DNA diatas direaksikan dengan enzim restriksi BamHI maka tidak
terjadi pemotongan fragmen DNA karena pada urutan DNA tersebut tidak ada
sekuens pengenalan BamHI yaitu GGATCC, maka dari itu urutan DNA diatas
tidak terjadi reaksi ketika direaksikan oleh enzim restriksi BamHI
Manfaat Pribadi

Secara pribadi, manfaat pendirian usaha ini

meningkatkan taraf hidup kami dibidang sosial
maupun ekonomi, keuntungan yang dihasilkan
dari usaha ini telah kami rasakan dan ada
kebahagiaan tersendiri bagi kami.
Manfaat Umum

Menyediakan kebutuhan akan bahan bangunan (batako) tersedia lebih dekat dengan kualitas
terbaik dan harga yang sesuai. Percetakan manual yang kami gunakan memberikan manfaat
tersendiri terkait dengan dampak lingkungan. Usaha ini tidak memberikan dampak lingkungan
yang negatif. Suara yang dihasilkan dari kegiatan produksi hanya terdengar oleh kami saja, jadi
tidak ada yang terganggu.
ALTERNATIVE
RESOURCES
Manfaat UMKM

Usaha ini termasuk salah satu usaha yang mudah dikembangkan serta
tidak membutuhkan modal yang besar. Sehingga orang-orang yang ingin
menjadi pelaku bisnis dapat mempertimbangkan jenis usaha ini sebagai
salah satu usaha dengan peluang keuntungan yang besar.
 Identitas Usaha
Nama Usaha : Usaha Percetakan
Batako 9 Bersaudara
Badan Hukum :-
Alamat Usaha : Jl. Lintas Sumbawa
Desa Bara Dusun Fo'o Mpongi RT/RW
014/007 Kec.Woja Kab. Dompu NTB
Produk Yang Dijual : Bahan Bangunan
Nama Produk : Batako
Manajemen Usaha
Pasar dan Pemasaran
Pasar
Merupakan kunci penting untuk diperhatikan. Sudah menjadi
kelaziman bahwa usaha dibidang percetakan batako bekerja
berdasarkan kebutuhan konsumen serta berdasarkan pada
pesanan. Kegiatan produksi dimulai seperti biasa disesuaikan
dengan kebutuhan serta jika mendapat pesanan, maka kegiatan
produksi dilakukan setelah pesanan sudah diterima. Target pasar
adalah seluruh kalangan masyarakat yang ingin membangun
rumah atau bangunan yang memerlukan batako.
Pemasaran
Strategi pemasaran yang kami lakukan adalah memilih tempat usaha harus mudah dilihat, mudah
dicapai, mudah dicari. Dalam usaha ini kami memberikan pelayanan yang memuaskan melalui
layanan langsung, pemesanan, dan tepat waktu pengerjaan. Penetapan harga yang dilakukan adalah
dengan menetapkan harga berdasarkan tingkat keberlangsungan usaha, dimana kami mencari
keuntungan yang relatif sehingga dapat menjalankan usaha secara kontinyu untuk meningkatkan
pangsa pasar. Promosi yang kami lakukan merupakan promosi yang paling sederhana, serta tidak
memerlukan banyak biaya untuk melakukan promosi ini. Cukup dengan bercerita dengan teman-
teman atau keluarga untuk mempromosikan usaha kami. Untuk wilayah pemasaran sendiri hanya
mencakup wilayah kabupaten Dompu.
Manajemen
Dalam usaha ini kami mempekerjakan 2 orang saja karena usaha ini belum terlalu besar, sistem produksi yang
masih berdasarkan pesanan, serta mengefektifkan pengeluaran.
• Penanggungjawab Usaha
Penanggung jawab adalah orang yang bertanggung jawab atas usaha. Penanggung jawab berasal dari kata dasar
tanggung. Penanggungjawab usaha ini memegang keputusan tertinggi, memimpin jalannya usaha, serta serta
yang menentukan harga produk yang dijual.
Penanggungjawab usaha: Mufida Faridah
• Buruh
Buruh, pekerja, worker, laborer, tenaga kerja atau karyawan pada dasarnya adalah manusia yang menggunakan
tenaga dan kemampuannya untuk mendapatkan balasan berupa pendapatan baik berupa uang maupun bentuk
lainya kepada Pemberi Kerja atau pengusaha atau majikan.
Lokasi dan Tempat Produksi
• Lokasi
Usaha ini berada di Jl. Lintas Sumbawa Desa Bara Dusun Fo'o
Mpongi RT/RW 014/007, Gang Benteng.
• Tempat Produksi
Usaha ini diproduksi di rumah sendiri, yaitu sebelah selatan rumah
dengan memanfaatkan luas halaman samping rumah.
Teknis dan Operasional
Aspek teknis dan operasi merupakan suatu yang
berkenaan dengan proses pembangunan suatu
perusahaan secara teknis dan pengoperasiannya
setelah perusahaan tersebut dibangun.
 • Lokasi Usaha
Usaha ini berada di Jl. Lintas Sumbawa Desa Bara Dusun Fo'o Mpongi
RT/RW 014/007, Gang Benteng.
• Ketersediaan SDM
Pengelolaan dalam usaha ini membutuhkan keahlian dalam menghitung dan
melayani pembeli dengan ramah agar banyak pelanggan yang tertarik.
• Sistem Manajemen Usaha
Usaha ini dikelola oleh satu orang, dan dibantu oleh dua orang pekerja.
Penanggungjawab usaha ini memegang keputusan tertinggi, memimpin
jalannya usaha, serta yang menentukan harga produk yang dijual.
Aspek Keuangan
Setelah melakukan langkah-langkah dalam
konsep dasar berusaha, maka usaha
dapat dimulai dengan kalkulasi anggaran
yang kami butuhkan antara lain :
Bahan Baku: 4.720.000 (Pasir 3 damtruk
dan 38 sak semen)
Dengan rincian sebagai berikut:
Pasir 1 damtruk : 750.000
Semen 1 sak : 65.000
Analisis Dampak Lingkungan
Dalam menjalankan usaha pastinya tidak hanya menggunakan
tenaga mesin saja, melainkan juga membutuhkan sumber
daya manusia untuk hal-hal yang tidak dapat dilakukan
mesin. Hal ini dapat menciptakan lapangan pekerjaan dan
dapat meningkatkan taraf hidup masyarakat sekitar.
Sedangkan ditinjau dari aspek lingkungan, usaha ini tidak
memberikan dampak negatif bagi lingkungan. Pembuatan
batako manual dengan memanfaatkan alat cetak yang
terbuat dari besi dengan tidak menggunakan mesin dapat
meminimalisir suara yang dihasilkan. Hampir tidak ada
suara yang dihasilkan yang dapat mengganggu.
 Peralatan : 3.000.000
Dengan rincian sebagai berikut:
Cetakan Batako : 1.500.000
Kereta Argo : 500.000
Sekop pasir : 250.000
Sendok Semen : 200.000
Alat Pemukul : 100.000
Modal :10.500.000
Jaring penutup : 300.000
Didapat dari pembayaran dimuka
Sarung tangan : 50.000
yang dilakukan oleh pembeli dan
Kuas : 5000
Oli Bekas : 45.000
dana pribadi.
Tidak memerlukan biaya sewa
karena merupakan bangunan kami
sendiri.
Aspek Keuangan
Permodalan
Untuk modal awal memulai usaha ini besarnya modal
yang digunakan sebesar Rp. 13.500.000 yang
diperoleh dari dana pribadi dan pembayaran
dimuka.
Biaya Tenaga Kerja
Biaya Tenaga Kerja (2 orang @ 70.000 × 1 sak semen)
= Rp. 140.000
Perhitungan biaya tenaga kerja berdasarkan berapa
banyak sak semen yang mampu dihabiskan dalam
waktu tertentu. Perhitungannya berdasarkan unit
sak semen.
Investasi
Kami memiliki bangunan dan peralatan sebagai investasi awal.
Biaya Operasional (Biaya Tetap & Biaya Variabel)
Biaya Tetap
Biaya Gaji dan Upah
Biaya Tenaga Kerja (2 orang @ 70.000 × 1 sak semen) = Rp. 140.000
Biaya konsumsi
Biaya Konsumsi (2 orang @ Rp. 30.000/hari)
Asumsi pekerjaan dilakukan selama 19 hari dalam satu bulan produksi.
Jadi biaya konsumsi selama sebulan Rp. 570.000
Biaya Variabel
Biaya Listrik
Biaya Listrik & Air ( Rp. 50.000/bulan)
Biaya Bahan Baku
Biaya Bahan Baku
Pasir : Rp. 2.250.000
Semen : Rp. 2.470.000 (38 sak semen @ Rp. 65.000/sak)
= Rp. 2.250.000 + Rp. 2.470.000
= Rp. 4.720.000
 Perhitungan Penerimaan
Proyeksi Keuangan 1 bulan:
Modal Rp. 10.500.000 (modal sendiri dan hasil dari
pembayaran dimuka)
Peralatan Rp. 3.000.000 ( pembelian peralatan)
Penjualan Perbulan (Rp)
Proyeksi penjualan dalam 1 bulan:
Minimal mendapat 5 kali pesanan
2 × pembelian 1000 unit @ 2.500
= 2 × 1000 × Rp. 2.500 = Rp. 5.000.000
3 × pembelian 600 unit @ 2.500
= 3 × 600 × Rp. 2.500 = 4.500.000
Perkiraan pendapatan minimal 1 bulan = 9.500.000
 Jurnal transaksi dalam 1 bulan
Biaya tenaga kerja: ( 2 orang @ Rp. 70.000 × 1 sak
semen)= Rp. 140.000
Sistem pembayaran upah dilakukan apabila karyawan
telah menyelesaikan pekerjaan 1 sak semen= Rp.
70.000, dihitung dari berapa sak semen yang
mampu dihabiskan.
Jadi upah selama sebulan Rp. 2.660.000
Biaya Konsumsi (2 orang @ Rp. 30.000/hari)
Asumsi pekerjaan dilakukan selama 19 hari dalam satu
bulan produksi.
Jadi biaya konsumsi selama sebulan Rp. 570.000
Biaya Listrik & Air ( Rp. 50.000/bulan)
Biaya Bahan Baku
Pasir : Rp. 2.250.000
Semen : Rp. 2.470.000 (38 sak semen @ Rp. 65.000/sak)
= Rp. 2.250.000 + Rp. 2.470.000
= Rp. 4.720.000 + perkiraan pengeluaran selama 1 bulan
= Rp. 4.720.000 + 3.280.000
= Rp. 8.000.000
Laba Rugi
Laporan Laba Rugi dalam 1 bulan
Pendapatan Rp. 9.500.000
Biaya-biaya :
Biaya tenaga kerja Rp. 2.660.000
Biaya konsumsi Rp. 570.000
Biaya listrik Rp. 50.000
Biaya bahan baku Rp. 4.720.000
Total biaya ( Rp. 8.000.000 )
Laba Rp. 1.500.000
Break Event Point (BEP)
Modal
Modal usaha : Rp. 10.500.000
Peralatan : Rp. 3.000.000
Perkiraan Penghasilan
Perkiraan dihitung melalui rata rata penghasilan bersih perbulan :
Rp. 9.500.000
Pengeluaran Rp. 3.280.000
BEP = Harga Peralatan/Laba Bersih
BEP = Rp. 3.000.000/Rp. 1.500.000 = 2
Jadi BEP dapat dilakukan pada 1 hingga 2 bulan bisnis berjalan
dengan operasi produksi sebanyak 1600 unit batako/bulan.
 Kesimpulan
Usaha rumahan atau industri kecil dalam pembuatan batako
cukup menguntungkan dilihat dari aspke pertumbuhan
penduduk maka kebutuhan akan pembangunan ikut serta
meningkat. Dengan material yang ringan dan cukup
murah membuat banyak konsumen memilih batako.

CREDITS:
This presentation template was created by Slidesgo,
including icons by Flaticon, and infographics & images
by Freepik.
Please keep this slide for attribution.
 CREDITS:
This presentation template was created by Slidesgo,
including icons by Flaticon, and infographics & images
by Freepik.
Please keep this slide for attribution.