METODE IMUNOKROMATOGRAFI
( RAPID TEST / STRIP TEST )
Imunokromatografi ASSAY (ICA) atau disebut juga aliran samping
(lateral flow test) / uji strip (strip test) tergolong dalam kelompok imuno
ASSAY berlabel sampel, seperti imunofluerens (IF) dan imuno enzim
(EIA).
Tujuan : Penggunaan
HbsAg tes strip (Serum/plasma) ad/. pem langsung kromatografi immunoassay
untuk pem kualitatif HbsAg dalam serum atau plasma
.
Metode : imunokromatografi assay
Reagen
Tes strip mengandung partikel HBs.Ag dan anti-HBs.Ag yang dilapiskan pada
membran.
Prinsip :
Imunokromatografi dengan prinsip serum yg diteteskan pada bantalan sampel
akan bereaksi dengan partikel yg telah dilapisi dengan anti HBs (antibodi).
Campuran ini selanjutnya akan bergerak sepanjang strip membran untuk
berikatan dengan antibody spesifik. Pada daerah tes, sehingga akan
menghasilkan garis warna.
Sentrifus , Tabung reaksi dan Rak , klinipet, Tips Kuning
Sampel serum.
Strip HBs.Ag / Merk ACON
ANALITIK
Cara kerja
Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
Siapkan serum dalam tabung reaksi
Keluarkan strip HBs.Ag dari lemari es dan biarkan pada sahu kamar
Perhatikan kantong segel strip dan digunakana sekali saja.
Celupkan strip kedalam serum / plasma secara vertikal biarkan selama 10 – 15
detik, jangan dicelupkan melewati batas maksimum.
Strip diletakan pada tempat datar / rata . Mulailah pengamatan waktunya tunggu
sampai muncul garis merah. Baca hasil setelah 15 menit .
PASCA ANALITIK
Interpretasi Hasil
Positif (+) : Muncul 2 (Dua)garis merah pada garis 1(Cell) dan garis T.
Negatif (-) : Muncul 1 (Satu) garis merah pada garis 1 (Cell)
Nilai Kritis : Muncul 2 (Dua) merah samar-samar (Positif lemah).
Kit dapat disimpan pada temperature kamar
atau pendingin.
Tes strip tetap stabil sampai tanggal
kadaluarsa yang tertera pada kemasan
Tes strip harus tetap dalam kantong tertutup
sampai digunakan.
Jangan dibekukan. Jangan digunakan
melebihi tanggal kadaluarsa.
Bahan yg disediakan :
Tes strip
Timer
Pastikan test strip, spesimen serum atau plasma, kontrol agar sama
dengan suhu kamar (15-300C) sebelum pemeriksaan.
1. Bawa kemasan pada suhu kamar sebelum di buka. Keluarkan
tes strip dari kemasan dan segera gunakan. Hasil terbaik akan
diperoleh bila pem dilakukan dalam satu jam.
2. Dengan panah menunjuk ke arah spesimen plasma atau serum. Celupkan
tes strip secara vertikal pada serum atau plasma setidaknya selama 10-15
detik. Jangan melewati garis batas maksimum (MAX) pada tes strip saat
mencelupkan tes strip. Lihat ilustrasi dibawah.
3. Tempatkan tes strip pada permukaan datar yang tidak dapat menyerap,
mulai hitung waktu dan tunggu sampai garis merah muncul. Hasilnya
harus dibaca pada 15 menit.
Catatan : konsentrasi HbsAg yang rendah akan muncul dalam garis lemah
pada area tes (T) setelah melampaui jangka waktu, oleh karena itu
jangan membaca hasil setelah lebih dari 30 menit.
Positif : *Muncul dua garis merah yang berbeda. Satu baris harus dalam
daerah kontrol ( C ) dan garis lain harus dalam daerah tes (T ) .
Permukaan test strip hepatitis B (Serum/Plasma) dapat dilihat menggunakan sampel selain
serum atau plasma.
Pisahkan serum atau plasma darah, dari darah se segera mungkin untuk menghindari
hemolisis. Hanya spesimen yang jernih dan tidak hemolisis yang dapat digunakan.
Pengujian harus dilakukan segera setelah specimen telah dikumpulkan. Jangan tinggalkan
spesimen di suhu ruangan untuk memperpanjang periode.
Specimen harus disimpan pada suhu 2 o-8o C agar dapat bertahan 3 hari. Untuk masa
penyimpanan yang lama, spesimen harus disimpan dibawah -20 oC
.
Bawa specimen ke suhu ruangan lebih dahulu sebelum pengujian.
Spesimen tidak boleh dibekukan dan dicairkan ulang.
Jika spesimen akan dikirim, spesimen harus dikemas sesuai dengan “PETUNJUK “.
STRIP TEST :
* Strip reagen berupa strip plastik tipis yg ditempeli kertas seluloid yg
mengandung bahan kimia tertentu sesuai jenis parameter yg akan diperiksa.
* Uji kimia yang tersedia pada reagen strip umumnya adalah : glukosa, protein,
bilirubin, urobilinogen, pH, berat jenis, darah, keton, nitrit, dan leukosit
esterase.
Prosedur Tes :
* Celupkan strip reagen sepenuhnya ke dalam urin selama dua detik.
* Hilangkan kelebihan urine dengan menyentuhkan strip di tepi wadah
spesimen atau dengan meletakkan strip di atas secarik kertas tisu.
* Perubahan warna di interpretasikan dengan membandingkannya
skala warna rujukan, yg biasanya ditempel pada botol/wadah reagen.
TERIMA KASIH