REVIEW JOURNAL

“Classical Cytogenetics
Karyotyping
Techniques”
DISUSUN OLEH KELOMPOK 3
ANGELINA NATASYA PENGGABEAN (4193341053)
ENI RAHAYU (4191141029)
ATTANASIA ULIN TARIGAN (4193141042)
BERNITA SIMBOLON (4193141045)
INTAN JUWITA BUGIS (4191141030)
ROSELINA TRIANA SITORUS (4193141050)
 CONTENTS

IDENTITAS RINGKASAN HASIL KESIMPULAN

JURNAL JURNAL REVIEW
PART 01
IDENTITAS
JURNAL
 IDENTITAS JURNAL

NAMA VOLUME
JUDUL PENGARANG
JURNAL TAHUN
JURNAL

Classical Steven E. Human 767, 2011

Cytogenetics Bates Pluripotent
: Karyotyping Stem Cells:
Techniques Methods and
Protocols
PART 02
RINGKASAN
JURNAL
 PENDAHULUAN
Sitogenetika klasik, kariotipe adalah salah satu tes yang paling umum dan mudah diakses yang digunakan
untuk menentukan komplemen kromosom dari kultur sel induk pluripoten manusia (PSC). Salah satu hal
pertama yang dilakukan untuk mengkarakterisasi galur PSC baru adalah dengan kariotipe galur tersebut.
Hal ini untuk menentukan apakah garis diploid normal dengan komplemen kromosom yang lengkap,
termasuk kromosom seks, atau memiliki penataan ulang, seperti inversi, delesi, atau aneuploid, yang
mengandung jumlah kromosom abnormal. Karena salah satu keuntungan utama bekerja dengan jalur PSC
adalah fakta bahwa mereka mampu berproliferasi jangka panjang sambil mempertahankan komplemen
kromosom diploid normal, kariotipe sering dilakukan. Garis sel induk embrionik manusia (hESC) telah
dipertahankan untuk waktu yang lama dalam kultur tanpa mengembangkan kelainan kromosom yang dapat
dideteksi. Metode dasar sitogenetik meliputi panen kromosom, preparasi slide, pewarnaan dan pita
kromosom, analisis jumlah kromosom dalam populasi, dan analisis pola pita. Persiapan kromosom terdiri
dari penangkapan sel, panen dan produksi suspensi sel tunggal, pengobatan hipotonik (pembengkakan sel
terkontrol) dan fiksasi. Setelah fiksasi dan dehidrasi, sel-sel metafase yang membengkak dijatuhkan ke
slide kaca, dikeringkan dengan udara, dan dituakan sebelum pewarnaan atau pita. Banding adalah metode
pewarnaan yang digunakan untuk memvisualisasikan kromosom dan menghasilkan serangkaian daerah
pewarnaan terang dan gelap yang memanjang. Proses penangkapan, perawatan hipotonik, fiksasi dan
preparasi slide sangat mempengaruhi kualitas pita yang dihasilkan. Metode G-banding (pengobatan tripsin
diikuti dengan pewarnaan Giemsa) adalah metode yang paling umum digunakan untuk memvisualisasikan
pola pita kromosom, dan dapat menghasilkan hingga 1.000 pita per genom manusia haploid.
 BAHAN
1) Air, gunakan yang segar dari ultra filtrasi atau
tersedia secara komersial “untuk kultur sel”
2) Colcemid (10 M g/mL)
3) Larutan hipotonik (0,075 M KCl): Larutkan 0,56 g
KCl dalam 100 mL air. Hangatkan hingga 37°C
sebelum digunakan.
4) Fiksatif Carnoy adalah metanol/asam asetat, 3:1.
Buat dalam jumlah kecil, karena fiksatif sangat
higroskopis. Dinginkan sebelum digunakan untuk
meminimalkan evolusi panas saat kontak dengan
suspensi hipotonik berair.
5) Larutan Buffer Gurr, larutkan satu tablet ke dalam
1.000 mL air .
6) NaCl 0,9%, larutkan 0,9 g dalam 100 mL air
7) 0,05% tripsin dan 1 mM ethylenediamine tetra
acetic acid (EDTA) dalam PBS.
8) Dulbecco's Modified Eagle Medium
(DMEM)
9) Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline
(DPBS) (tanpa Mg++ dan Ca++)
10) Pewarnaan Giemsa (larutan 5%): 2,5
mL Pewarnaan Giemsa hingga 47,5 mL
Solusi buffer Gurr
11) Kain atau tisu bebas serat untuk
membersihkan slide
12) Media Slide Mikroskop dengan dan
tanpa DAPI
13) Slide Mikroskop dan kaca penutup
14) Stoples coplin
 METODE
Satu-satunya cara untuk mendapatkan jumlah metafase berkualitas tinggi yang
cukup adalah dengan memiliki banyak sel yang aktif membelah. Persiapan
kromosom paling baik dilakukan sehari sebelum sel biasanya dilewati. Selama
metafase mitosis, kromosom mencapai tingkat kondensasi maksimum dan dapat
diidentifikasi di bawah mikroskop. Kromosom kurang padat pada metafase awal
dan menjadi lebih padat sebagai kemajuan sel menuju akhir metafase. Karena
tujuan pengambilan sel adalah untuk mendapatkan sel metafase berkualitas
sebanyak mungkin untuk membuat analisis kultur yang akurat, colcemid
ditambahkan ke kultur karena menghambat sel dalam metafase.
Tahap pertama yang dilakukan adalah tahapan metafase (persiapan kromosom).
Tahap kedua mempersiapkan slide metafase.
Tahap ketiga pewarnaan kromosom ( pewarnaan giemsa, pewarnaan DAPI dan
pewarnaan in situ giemsa.
Tahap keempat kromosom banding (tripsin G-Banding)
Dan tahap terakhir menafsirkan hasil
 Title text addition

Title text addition

The user can demonstrate on a projector
or computer, or print the presentation and
make it film
Title text addition
The user can demonstrate on a projector
or computer, or print the presentation and
make it film

Title text addition

The user can demonstrate on a projector
or computer, or print the presentation and
make it film
 PART 03
Education process
 Title text addition

Title text addition Title text addition

The user can demonstrate on a projector The user can demonstrate on a projector
or computer, or print the presentation and or computer, or print the presentation and
make it film make it film

Title text addition Title text addition

The user can demonstrate on a projector The user can demonstrate on a projector
or computer, or print the presentation and or computer, or print the presentation and
make it film make it film
 Title text addition

Title text addition Title text addition

1 The user can demonstrate on a projector
or computer, or print the presentation and
2 The user can demonstrate on a projector
or computer, or print the presentation and
make it film make it film

Title text addition Title text addition

3 The user can demonstrate on a projector

or computer, or print the presentation and
4 The user can demonstrate on a projector
or computer, or print the presentation and
make it film make it film
Title text addition

Title text addition

The user can The user can

demonstrate on a demonstrate on a
projector or computer, projector or computer,
or print the or print the
presentation and presentation and
make it film make it film

Title text addition

 Title text addition

01
Title text addition Title text addition
The user can demonstrate on a projector The user can demonstrate on a projector
or computer, or print the presentation and or computer, or print the presentation and
make it film make it film
02
03

Title text addition

The user can demonstrate on a projector
or computer, or print the presentation and
make it film
 PART 04
Education reflection
 Title text addition

Title text
addition

Title text
addition

The user can demonstrate on a projector or computer, or

Title text
print the presentation and make it film
addition
 Title text addition

Title text addition Title text addition Title text addition

The user can demonstrate on a projector The user can demonstrate on a projector The user can demonstrate on a projector
or computer, or print the presentation and or computer, or print the presentation and or computer, or print the presentation and
make it film make it film make it film
 Title text addition

Title text addition Title text addition Title text addition Title text addition
The user can demonstrate on a projector The user can demonstrate on a projector The user can demonstrate on a projector The user can demonstrate on a projector
or computer, or print the presentation andor computer, or print the presentation and or computer, or print the presentation and or computer, or print the presentation and
make it film make it film make it film make it film
 Title text addition

Title text addition Title text addition Title text addition Title text addition
The user can demonstrate on a projector The user can demonstrate on a projectorThe user can demonstrate on a projector The user can demonstrate on a projector
or computer, or print the presentation andor computer, or print the presentation andor computer, or print the presentation andor computer, or print the presentation and
make it film make it film make it film make it film
Thank you for
listening to
time ： ××× The teacher ： ×××