PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI PERTANIAN

ISOLASI BAKTERI
Tujuan: Untuk Biakan Murni: biakan yang sel-
mengisolasi dan selnya berasal dari pembelahan
mengidentifikasi bakteri satu sel tunggal.
tanaman

Gejala dan tanda yang disebabkan bakteri Xanthomonas oryzae pv

oryzae penyebab penyakit hawar daun bakteri pada tanaman padi
BAHAN DAN ALAT
Bahan:
Tanaman bergejala (oleh bakteri), tissue, akuades, media NA, alcohol,
NaOCl 2%.
Alat:
Testube, petridish, Bunsen, micropipet, mortar, pipet tetes, rak testube

Isolasi bakteri menggunakan metode serial delution

PELAKSANAAN
1. Siapkan LAF, Potong bagian tanaman yang bergejala (1:1 yang sakit
dan sehat)
2. Sterilisasi permukaan

Akuades Alkohol 20 Akuades

1 menit detik 1 menit Kertas saring/tissue

Semua pengerjaan dilakukan di dalam Laminar Air Flow

3. Sampel dimaserasi (dihancurkan) dengan menggunakan mortal dan ditambahkan
10 ml aquades

Kertas saring/tissue
micropipet

Tambahkan aquades 10 ml
4. Sampel mengandung bakteri dimasukkan ke dalam testube pertama

Ambil 1 ml ekstrak

Tambahkan aquades 10 ml
Dipindahkan
1 ml ekstrak
ke testube
Testube 10-1 di
berisi akuades vortex
9ml steril (10-1)
 5. Diambil 1 ml dari tabung 10-1 dengan micropipet (ganti tip) dan
dipindahkan ke tabung berisi 9 ml aquades (10-2) dan vortex kembali

Dipindahkan ke
10-1 testube berisi Testube 10-2
akuades 9ml steril di vortex
(10-2)

6. Diambil 1 ml dari tabung sebelumnya dengan

micropipet (ganti tip) dan dipindahkan ke tabung
berisi 9 ml aquades dan vortex kembali
 Ambil 1 ml dan dipindahkan
ke testube terakhir yang berisi
media NA cair
Setelah 2 x 24 jam amati dan identifikasi
morfologi koloni bakteri yang tumbuh
(bentuk, ukuran, warna, elevasi, dan
pinggiran)
BIAKAN MURNI
PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI PERTANIAN

BAKTERI
TUJUAN: mempelajari cara-cara mendapatkan biakan-biakan murni dari suatu
biakan campuran.

Bahan: NA, petridish berisi koloni bakteri/suspense bakteri, alkohol

Alat: jarum ose, bunsen

Biakan murni bakteri menggunakan metode penggoresan

kuadran
Siapkan petridish steril, kemudian cairkan media NA, tuangkan 10 ml
media NA ke petridish steril
Semua pengerjaan dilakukan di dalam Laminar Air Flow
Setelah inkubasi 2 x 24 jam, pada petridish akan
tumbuh seperti gambar berikut