PENDAHULUAN

Air merupakan salah satu sumber daya alam yang

memiliki fungsi sangat penting bagi kehidupan
manusia dan makhluk hidup lainnya

Perlu dilakukan pengelolaan dan

Pengendalian pencemaran air secara bijaksana

Perlu pengawasan dari instansi yang berwenang

Pemeriksaan laboratorium yang berkualitas

 MENENTUKKAN
KUALITAS AIR

UNDANG-UNDANG

TUJUAN
MENGETAHUI
DERAJAT KONTAMINASI SURAT KEPUTUSAN
PEMERIKSAAN
AIR PERATURAN PEMERINTA
PENGAWASAN

PEMBINAAN
 5 Jenis air
Air bersih :
SGL,SPT,Bor
4 1
Air limbah 2 Air minum
Pemotongan hewan
Hotel Rumah tangga
Rumah Sakit Kemasan
Bhn mak/min

5
Air laut
Perairan pelabuhan Air kolam
3 renang
Wisata Bahari
Biota Laut
Pemeriksaan bakteriologi air
Langkah langkah Pemeriksaan
Pengambilan sample

Pengiriman

Tes Perkiraan

Tes Penegasan

Tes lengkap

Hasil & laporan

MEDIA
 Media yang baik :

Nutrisi

Tidak
Mengandung Tekanan
Zat penghambat Osmose

Steril
MEDIA YANG DIPAKAI

Lactosa broth
BGLB
Endo/MC/EMB
1. Golongan coli / Coliform
( Genus Escherichia,Edwarsiella
Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter )

2. Streptococcus faecalis

3. Pseudomonas aeruginosa

4. Clostridium welchii
1. Dapat bertahan hidup di lingkungan
2. Tidak berkembang biak di lingkungan
3. Dapat dituangkan pada semua jenis air
4. Dapat mengindikasikan adanya kuman
patogen yg mengikutinya.
5. Akurat, tepat, sensitif, murah dan
memberikan hasil kuantitatif dalam
waktu relatif pendek.
 Gol. Coliform
• Habitatnya tersebar luas di
air, tanah, hasil pertanian, sisa
industri dll

• Kemampuannya berkembang
biak di lingkungan

• Adanya coliform menunjukkan

adanya bakteri patogen yang
mengikuti.
Batasan Coliform (WHO 1982)

• Bakteri berbentuk batang,

tidak berspora, Gram
Negatif, punya kemampuan
meragi laktosa
menghasilkan asam dan
gas dalam waktu 48 jam
Fecal Coliform (WHO, 1982)
• Bakteri golongan coliform
yang masih mempunyai
kemampuan fermentasi
laktosa pada suhu
42 – 46 OC.
 METODE PEMBIAKANTABUNG GANDA

Kelebihan Keterbatasan

Dapat untuk sample dengan Tidak dapat untuk vol sample

turbidity tinggi
Zat toksik dapat terencerkan
Satu satunya metode yang
dapat dipakai untuk air buangan merupakan hasil dari data
/yang mengandungnpartikel
tanah
yang besar
Membutuhkan waktu antara 4-9
hari pemeriksaan
Hasil yang didapatkan
statistik
Membutuhkan alat,tempat dan
pekerja yang lebih banyak
Tidak dapat dipakai di lapangan
 BAKU MUTU
Air bersih : Permenkes
No.416/Menkes/Per IX/90
4 1
Air limbah 2 Air minum
Perda Jateng No 10 th 2004
Permenkes
ABA :
No. 492/Menkes/SK/VII/2009
PP No 82 th 2001

5 3
Air laut
Kep Men Neg Lingk Hidup Air kolam renang
No. 51 th 2004 Permenkes
No.416/Menkes/Per IX/90
 JUMLAH MAKSIMAL YANG DIPERBOLEHKAN

NO BAKU MUTU Coliform/MPN Coli Hitung kuman

fecal/MPN
1 Air Bersih Air Perpipaan : 10 x x
No.416/Menkes/Per IX/90 Non Perpipaan : 50

2 No.416/Menkes/Per IX/90
Air Kolam Renang 0 X 200 / ml
Air Pemandian Umum < 200

3 907/Menkes/SK/VII/2002 0 0 x

4 Perda Jateng No 10 th 2004

Air Limbah : RS < 5000 X X
Hotel < 400 X X
PP No 82 th 2001 ( ABA) 1000 100 X
5 Air Laut
Kep Men Neg Lingk Hidup 1000 200 X
No. 51 th 2004
 I. Pengambilan Sampel
• Air sumur yang keluar melalui kran

label

Buka keran
Biarkan air Tutup rapat
Tampung air dalam
mengalir secara wadah gelas steril wadah
deras selama 10 (volume air maks. ¾ gelas
menit bagian wadah atau ± Beri label
2.5 cm dari tutup
wadah)
 I. Pengambilan Sampel

• Air PDAM

Jika air diklorinasi, maka klorin

harus dinon-aktifkan (digunakan
natrium tiosulfat) agar tidak
bereaksi dengan mikroorganisme
dalam sampel

Prosedur pengambilan sampel sama seperti

pengambilan air sumur yang keluar melalui kran
 I. Pengambilan Sampel

• Air dari sumber mata air

label

Biarkan air mengalir

Ambil wadah gelas steril bermulut lebar
Letakkan wadah gelas di bawah aliran
air Tutup rapat wadah
gelas tersebut
Tampung air dalam wadah gelas Beri label
(volume air maks. ¾ bagian wadah atau
± 2.5 cm dari tutup wadah)
 TAHAP PEMERIKSAAN
Day 1 : Tes Perkiraan / Presumptive test : Lactosa Broth

Incubation 37 C – 2 x 24 jam
Positip ( Asam dan Gas ) Tes Penegasan : BGLB
Day 2 :
Incubation 37 C Incubation 44 C
2 x 24 jam 2 x 24 jam
Positip ( terbentuk gas ) Positip ( terbentuk gas )
Day 3 : Tabel MPN Tabel MPN

Day 4 : Laporan

Day 5 : Tes Lengkap : Pengecatan Gram, LB, Media Endo/MC/EMB

Day 6 : Pengamatan pada LB, Pengamatan koloni pada media Endo

Day 7 : Tes Biokimia Laporan

 Tes Perkiraan/
Presumptive Test
NO JENIS LB LB LB
SAMPLE Pekat Encer Encer
1 Air Bersih 3 tb 3 tb 3 tb
+ 10 ml sp + 1 ml sp + 0,1 ml sp

2 Air Minum 5 tb 1 tb 1 tb
+ 10 ml sp + 1 ml sp + 0,1 ml sp

3 AL/ABA 5 tb 5 tb 5 tb
LB encer + 1 ml sp + 1 ml sp + 0,1 ml sp
( 10 -1 ) ( 10 – 2 ) ( 10 – 3 )
DARI SETIAP TABUNG LB ( + )
DIINOKULASIKAN 1 – 2 OSE PADA MEDIA BGLB
DIINKUBASIKAN :
PADA SUHU 37 0 C 2x24 JAM ( MPN COLIFORM)
PADA SUHU 42 – 46 0 C 2x24 JAM (MPN FECAL
COLI / COLI TINJA )
TES LENGKAP/
COMPLETE TEST
inokulasi pada media selektif
inokulasi pada LB
pengecatan gram
Hasil analisa metoda MPN didapat dari
mencocokkan dengan tabel MPN, yaitu tabel
yang memberikan The Most Probable Number
atau Angka Perkiraan Terdekat, yang
tergantung dari kombinasi tabung positif (yang
mengandung coliform) dan negatif (tidak
mengandung) dari tahap yang kedua/TES
PENEGASAN
ATURAN PERHITUNGAN METODA MPN

• Bila Vol. benda uji yg diambil 10 ml,

1 ml dan 0,1 ml, MPN coliform dihitung
menggunakan tabel MPN

• Bila Vol benda uji yang diambil tidak sama dengan

ketentuan dalam tabel dihitung dengan rumus
….Rumus 1

• Jika hasil tabung positif tidak terdapat pada

kombinasi tabung positif pada tabel, dihitung
dengan rumus….Rumus 2
 SEMBUH
SUSPEK

T/ LENGKAP
RUMUS I RUMUS II HASIL
GAGAL
DEFAULT
MENINGGAL

JPT/100 ml = A x 100
JPT/100 ML : √BxC
Indeks JPT*) x 10/Y
A = Jml tabung positif
*) Diperoleh dari tabel MPN B = Vol (ml) benda uji dalam
Y : Vol benda uji terbesar tabung yang negatif
C = Vol (ml) benda uji dalam
semua tabung
Contoh soal :
Sampel air sungai
Pa = 3 tbg mengandung 10 -1 sampel
Pb = 3 tbg mengandung 10 -2 sampel
Pc = 3 tbg mengandung 10 -3 sampel

Setelah inkubasi, tes penduga dan tes penegasan terlihat gas pada 3
tbg Pa, 2 tbg Pb, 0 tbg Pc. Berapa Nilai MPN ?
Jawab
Nilai MPN = 93 X 10
10 -1
= 93 X 100
= 9300
Contoh =
Sampel air bersih
Pa = 3 tbg mengandung 10 ml sampel
Pb = 3 tbg mengandung 1 ml sampel
Pc = 3 tbg mengandung 0,1 ml sampel

Setelah inkubasi, tes penduga dan tes penegasan

terlihat gas pada 3 tabung Pa, 2 tbg Pb, 3 tbg Pc.
Berapa Nilai MPN ?

Jawab : 8 x 100
√ 1 x 33,3
138
 Bacteriological analysis of water:
Most Probable Number (MPN) technique

coliform: acid and gas from lactose <24 hours/370C

indicator organism: E. coli

 
Water double strength single strength single strength
sample
10 ml sample 1.0 ml sample 0.1 ml sample
 
*Normally 5 Durham tubes are inoculated but this exercise is modified to three tubes in the interest
of economy.
 Table 1.Table of Most Probable Numbers (MPN) Per 100 ML
of Sample using Three Tubes of Each Dilution

Number of positive Number of positive

tubes in dilutions tubes in dilutions
MPN per MPN per
10 ml 1 ml 0.1 ml 100 ml 10 ml 1 ml 0.1 ml 100 ml
0 0 0 2 0 0 9.1
0 1 0 3 2 0 1 14
0 0 2 6 2 0 2 20
0 0 3 9 2 0 3 26
0 1 0 3 2 1 0 15
0 1 1 6.1 2 1 1 20
0 1 2 9.2 2 1 2 27
0 1 3 12 2 1 3 34
0 2 0 6.2 2 2 0 21
0 2 1 9.3 2 2 1 28
0 2 2 12 2 2 2 35
0 2 3 16 2 2 3 42
0 3 0 9.4 2 3 0 29
0 3 1 13 2 3 1 36
0 3 2 16 2 3 2 44
0 3 3 19 2 3 3 53
1 0 0 3.6 3 0 0 23
1 0 1 7.2 3 0 1 39
1 0 2 11 3 0 2 64
1 0 3 15 3 0 3 95
1 1 0 7.3 3 1 0 43
1 1 1 11 3 1 1 75
1 1 2 15 3 1 2 120
1 1 3 19 3 1 3 160
1 2 0 11 3 2 0 93
1 2 1 15 3 2 1 150
1 2 2 20 3 2 2 210
1 2 3 24 3 2 3 290
1 3 0 16 3 3 0 240
1 3 1 20 3 3 1 460
1 3 2 24 3 3 2 1100
1 3 3 29
Multiple-Tube Method

Figure 6.18a
Multiple-Tube Method

Figure 6.18b
Bacteriological analysis of water: Membrane filter technique