Laboratorium Mikrobiologi FKUB 2009

TUJUAN PEMBELAJARAN
1. Menyebutkan prinsip toksisitas selektif
2. Mendefinisikan istilah: Obat semisintetik, Antibiotika, Spektrum aktivitas, Superinfection 3. Mengidentifikasi 5 cara kerja obat antimikroba 4. Menyebutkan penggunaan obat-obat sebagai antibakteri, antifungi, dan antivirus

 Obat antimikroba

suatu kelompok obat yang digunakan dalam khemoterapi pengobatan penyakit infeksi menggunakan bahan kimia

Tidak seperti halnya disinfektan sering bekerja di dalam tubuh hospes, sehingga efek pada sel dan jaringan hospes sangat penting obat antimikroba yang ideal adalah membunuh mikroba tanpa merusak hospes (SELECTIVE TOXICITY)

TOKSISITAS SELEKTIF adalah kemampuan obat untuk membedakan antara sel hospes dengan mikroba - dasar: perbedaan struktur dan fungsi sel antara hospes dan mikroba, misalnya: dinding sel, ribosom, atau komponen membran Antibakteri toksisitas selektifnya tinggi Antifung, antiparasit, antivirus toksisitas selektif rendah

Syarat obat antimikroba yang baik

- memiliki toksisitas selektif yang baik - tidak menyebabkan reaksi hipesensitif - mempunyai kelarutan dan kemampuan penetrasi yang baik ke dalam jaringan - dimetabolisme dan diekskresi secara lambat - lambat dalam pengembangan resistensi - tidak merusak flora normal hospes - tidak mahal

ASAL OBAT ANTIMIKROBA

1. OBAT SINTETIS: obat yang dibuat secara sintetis (melalui prosedur kimiawi) di laboratorium Contoh: Sulfonamid, Gol.Quinolon 2. ANTIBIOTIKA: obat yang dihasilkan secara almiah oleh mikroorganisme (bakteri atau fungi) Contoh: penicillin, Tetrasiklin, Erythromycin 3. OBAT SEMISINTETIS (mis.Amoxicillin, Ampisilin) : menggunakan formula alamiah dan dimodifikasi di laboratorium, bertujuan untuk: - memperbaiki efek farmakokinetik - meningkatkan aktivitas (memperluas spetrum) - memperbaiki stabilitas obat - menurunkan toksisitas obat

AKTIVITAS ANTIMIKROBA
--SIDAL --STATIK

membunuh mikroba menghambat pertumbuhan mikroba - perlu pertahanan tubuh hospes, mis. fagosits dan antibodi, utk mengeliminir mikroba

SPEKTRUM SEMPIT - efektif untuk sebagian mikroba saja, bakterui Gram positif atau Gram negatif mis. : ERYTHROMYCIN, PENICILLIN G SPEKTRUM LUAS - mempengaruhi berbagai jenis mikroba, Gram positif dan Gram negatif mis. : AMOXICILLIN, TETRACYCLINE, SULFONAMIDE

Antimikroba spektrum luas

Keuntungan : karena identifikasi mikroba tidak bisa segera diketahui, obat AM dapat diberikan dengan pertimbangan waktu

Kekurangan: beberapa flora normal hospes dirusak oleh obat

SUPERINFECTION infeksi karena overgrowth dari mikroorg yang tidak sensitif terhadap obat antibakteri ex. overgrowth C.albicans karena pemberian antibakterial per oral diarrhea

CARA KERJA OBAT ANTIMIKROBA

Menghambat sintesis dinding sel Merusak membran plasma Menghambat sinthesis protein Menghambat sintesis asam nukleat Menghambat sintesis metabolit essential

HAMBATAN PADA SINTESIS DINDING SEL

Dinding sel dari nakteri tersusun dari makromolekul yang disebut peptidoglikan Obat dapat mempengaruhi sintesis dinding sel melalui beberapa cara: - mengganggu sintesis pada tahap awal atau saat sintesis rantai linier peptidoglikan (dalam sitoplasma) ex. Vancomycin, Bacitracin - mencegah sintesis peptidoglikan pada tahap akhir (pada proses cross linking) ex. Penicillin, Cephalosporine (-lactam antibiotics) - menghambat sintesis peptidoglikan melalui efek kompetitif terhadap perolehan gula dan lipid sebagai komponen dari peptidoglikan, ex. Fosfomycin

Penicillins
1. Penicillin alamiah dari Penicillium notatum
dirusak oleh Penicillinase (-lactamase) spektrum sempit ex. Penicillin-G (dirusak asam lambung)

Penicillin-V (tahan terhadap asam) 2. Semisynthetic Penicillin acid stable , ex. Ampicillin, Amoxicillin tahan terhadap penicillinase: ex. Methicillin, Cloxacillin, Oxacillin spektrum luas ex. Ampicillin, Amoxicillin

Cephalosporin
dari Cephalosporium acremonium Cephalosporine C tahan penicillinase (tetapi sensitif terhadap -lactamase yang lain, mis.cephalosporinase) cephalosporine semisintetik: - generasi I : Cephalexin, Cephradine, Cefazolin - generasi II : Cefamandole, Cefoxitin - generasi III: Cefoperazone, Cefotaxime, Ceftriaxon - generasi IV: Cefepime
Setiap generasi yang baru cenderung lebih efektif terhadap Gramnegatif

Merusak membran plasma

Antimikroba tertentu dapat merusak membran plasma, melalui cara : - mengubah permeabilitas membran (berikatan dengan fosfolipid) ex. Polymyxin B
- berikatan dengan sterol pada membran plasma ex. Amphotericin B, Azole derivatives (obat antifungi) (toksisitas selektif?)

Menghambat sintesis protein

Sintesis protein adalah umum terjadi pada semua sel , baik procariota ataupun eukariota
Untungnya, sel eukariota mempunyai 80S ribosom, sedangkan procariota cells mempunyai 70S ribosom Ingat: mitokhondria juga mengandung 70S ribosom ! mis. Chloramphenicol, Tetracycline, Erythromycin

(toksisitas selektif?)

Menghambat sintesis asam nukleat

Mengganggu proses replikasi DNA

mis. Gol. Quinolone Mengganggu proses transkripsi mis. Rifampicin

(selective toxicity?)

Menghambat sinthesis metabolites esential

Aktivitas suatu enzim dari mikroba dapat dihambat secara kompetitif oleh suatu bahan (antimetabolit) yang mirip dengan substrat normal enzim tersebut ex. Sulfanilamide dengan PABA
NH2

NH2

Sulfanilamide
COOH

PABA

SO2NH

- PABA asalah substrat untuk reaksi enzimatik untuk sintesis asam folat

(koenzim pada sintesis purine dan pirimidin)

PTERIDINE + PABA
Sulfonamide DIHYDROPTEROIC ACID DIHYDROFOLIC ACID Trimethoprim

TETRAHYDROFOLIC ACID

FOLIC ACID

Kombinasi antara Sulfonamide dengan Trimethoprim

menghasilkan hambatan sekuensial Manusia tidak memproduksi asam folat dari PABA (toksisitas selektif ?)

PENGGUNAAN OBAT ANTIMIKROBA 1. ANTIBAKTERI

Penicillins, Gol.Tetracycline, Chloramphenicol dsb. Asam Nalidiksat, Nitrofurantoin antiseptika tr.urinarius

2. ANTIMYCOBACTERIUM
Antituberkulosis Membutuhkan kombinasi obat, karena mudah resisten Rifampisin, Streptomisin Antileprae DDS (4,4 diamino diphenyl sulfone), Rifampisin

3. ANTIFUNGI

Amphotericin B (untuk mikosis sistemik) Clotrimazole, Miconazole untuk superficial mycosis - Ketoconazole, Fluconazole, Itraconazole untuk systemic & subcutaneous mycosis, kandidiasis pada kuku (onychomycosis) - kurang toksik dibandung Amphotericin Griseofulvin, Nystatin - untuk superficial mycosis (kandidiasis)

4. ANTIVIRAL

Nucleotida Analogs
- menghambat sintesis DNA/RNA virus GUANINE ANALOGs : - ACYCLOVIR - RIBAVIRIN - GANCICLOVIR pengobatan Herpesvirus utk infeksi Rotavirus utk Cytomegalovirus, Herpesvirus

THYMIDINE ANALOGs : - TRIFLURIDINE utk Herpes yg resisten terhadap ACYCLOVIR - AZIDOTHYMIDINE (AZT) utk HIV

Resistensi mikroba merupakan usaha mikroba untuk tetap survive

 MEKANISME RESISTENSI 1. menghasilkan enzim yang merusak obat mis. Staphylococcus -lactamase Bakteri Gram neg.
Chloramphenicol- acetyl transferase, fosforilase dll.

2. Mengubah permeabilitas membran terhadap obat mis. resistensi terhadap Tetracycline, Aminoglycosides 3. Mengubah struktur target dari obat mis. resisten thd. Erythromycin mengubah reseptor pada ribosom 50S subunit resisten thd. Penicillins perubahan PBPs

4. Membuat jalan metabolisme baru mis. resisten terhadap Sulfonamide E.coli mampu mengambil asam folat dari luar selnya 5. Menghasilkan metabolit yang kompetitif melawan obat mis. S. aureus mensintesis PABA, sehingga resisten terhadap Sulfonamide

ASAL RESISTENSI
RESISTENSI
NON GENETIK GENETIK RESISTENSI SILANG

ALAMIAH KROMOSOMAL
EFEK dari INDUKSI

DIPEROLEH EKSTRAKROMOSOMAL
- TRANSFORMASI - TRANSDUKSI - KONJUGASI - TRANSPOSISI

MUTASI

Non-genetik :

misalnya, Mycobacterium dapat tetap hidup dalam sel (Mo) tanpa dapat diganggu antimiktoba, karena kuman tersebut tidak mengadakan metabolisme (dormant states)

Reaksi silang : terjadi dalam satu kelompok obat antimikroba yang mempunyai rumus kimia hampir sama mis. Tetracycline with Doxycycline

Genetik : terjadi secara alamiah atau diperoleh Alamiah berarti mikroba mempunyai faktor resisten sejak awal keberadaannya Diperoleh berati mikroba mempunyai faktor resistensi melalui: - induksi obat, mis. induksi Penicillin membuat mikroba menghilangkan dinding selnya - dari mikroba lain (melalui proses transformasi, konjugasi, transduksi or transposisi)

MENGATASI MASALAH RESISTENSI

Masalah resistensi tidak dapat dihilangkan, tetapi dapat ditekan atau dihambat. 1. Mempertahankan kadar efektif di dalam jaringan, yang menghambat baik populasi awal maupun terjadinya pertama (penggunaan, dosis dan waktu yang adekuat) 2. Pemberian obat secara kombinasi sehingga tidak memberikan resistensi silang , masing-masing obat akan menghambat timbulnya mutant terhadap obat yang lain mis. RIFAMPICIN + INH (pengobatan tuberkulosis) 3. Menghindari kontak mikroba dengan obat yang sangat berharga (membatasi penggunaan) khususnya di rumah sakit

HAL-HAL PRAKTIS YANG MENGINDUKSI TERJADINYA RESISTENSI TERHADAP OBAT

1. 2. 3. 4. 5. 6. OVERUSE DAN MISUSE DARI ANTIMIKROBA OLEH PARA DOKTER PENGGUNAAN BEBAS ANTIMIKROBA OLEH MASYARAKAT UNTUK PENGOBATAN COMMON COLD PENGGUNAAN ANTIMIKROBA PADA PENDERITA IMUNOSUPRESI UNTUK MENCEGAH INFEKSI KEGAGALAN PENDERITA MENYELESAIKAN REGIMEN PENGOBATAN ANTIMIKROBA PENGGUNAAN YANG LAMA DENGAN DOSIS RENDAH PADA PENGOBATAN ACNE PENGGUNAAN ANTIMIKROBA DI DALAM BIDANG PETERNAKAN.

Obat antimikroba diberikan pada ternak untuk merangsang pertumbuhan dan matasi infeksi

toksin dari intestinal Clostridium perfringens dapat menghambat pertumbuhan ternak

Keberadaan yang terus menerus dari antimikroba pada ternak menyebabkan selective pressure dari flora normal maupun patogen mengembangkan resistensi