TUGAS MAKALAH

PORCINE DETECTION KIT

Tugas Terstruktur Mata Kuliah Biosensor
Dosen Pengampu: Endrika Widyastuti, S.Pt, M.Sc, MP

Disusun oleh:
Rabitha Almas Fasya

125100500111010

Ahfad Ulhidayati

125100501111008

Nur Aulia

125100501111027

Ulul Musyhidah

125100507111015
Kelas J

PROGRAM STUDI ILMU DAN TEKNOLOGI PANGAN

JURUSAN TEKNOLOGI HASIL PERTANIAN
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
UNIVERSITAS BRAWIJAYA
MALANG
2014

DAFTAR ISI
DAFTAR ISI ..........................................................................................................................i
I. PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang .............................................................................................................1
II. METODE
2.1 Porcine Detection Kit ...............................................................................................2
2.2 Imunokromatografi / Rapid Test ...............................................................................2
2.3 Metode Penggunaan Porcine Detection Kit pada Produk Pangan .................3
III. HASIL DAN PEMBAHASAN
3.1. Mekanisme Kerja Porcine Detection Kit .............................................................5
3.2. Sensitivitas dan Spesifikasi ....................................................................................6
3.3. Kelebihan dan Kekurangan ...........................................................................................6
IV. PENUTUPAN
4.1. Kesimpulan ...................................................................................................................8
DAFTAR PUSTAKA.............................................................................................................ii

BAB I
PENDAHULUAN
1.1

Latar Belakang
Pangan halal saat ini menjadi salah satu pusat perhatian dari para pelaku industri

pangan dan pemerintah di Indonesia. Hal ini terutama disebabkan tingginya jumlah
penduduk muslim di Indonesia. Menurut Badan Pusat Statistik (BPS), penduduk muslim
di Indonesia pada tahun 2010 mencapai 207.176.162 jiwa dari total 237.641.236 jiwa
penduduk Indonesia. Tingginya jumlah penduduk muslim di Indonesia berimplikasi pada
tingginya permintaan akan produk pangan yang terjamin mutu halalnya. Hal ini dapat
dilihat dari tingginya jumlah sertifikat halal yang telah dikeluarkan LPPOM MUI yaitu
sebanyak 5.896 sertifikat halal dengan jumlah produk mencapai 97.794 item dari 3.561
perusahaan sejak tahun 2006 hingga Desember 2012 (LPPOM MUI, 2013).
Tingginya konsumsi produk pangan halal tidak selamanya diikuti oleh kesadaran
setiap pihak yang memiliki andil dalam penyediaan pangan halal tersebut. Berbagai
bentuk pemalsuan pangan atau food adulteration yang menyangkut status kehalalan

produk pangan masih kerap terjadi. Hal ini kemudian memunculkan kebutuhan akan
adanya metodeanalisis yang dapat mendeteksi cemaran babi dalam suatu produk.
Berbagai metode analisis telah dikembangkan untuk mempermudah deteksi cemaran
daging babi dalam produk pangan dengan memanfaatkan kemajuan perkembangan
biologi molekuler, contohnya adalah kromatografi gas untuk analisis asam lemak,
imunodifusi ganda atau ouchterlony dan SDS-PAGE untuk analisis protein. Namun,
ketiga metode ini hanya dapat dilakukan pada bahan pangan yang belum mengalami
pemasakan atau mengalami perlakuan diatas suhu 50oC (Roswiem 2000). Metode yang
saat ini menjadi salah satu metode dengan ketelitian tinggi adalah metode Polymerase
Chain Reaction (PCR) yang memanfaatkan DNA dan dapat digunakan untuk produk
daging yang telah dimasak atau diproses (Carnegie et al.1997 dalam Maryatni 2000).
Namun metode-metode tersebut masih memiliki beberapa kelemahan, terutama terkait
biaya untuk reagen dan instrumen yang mahal serta tidak dapat dilakukan secara praktis
di lapangan.
Porcine detection kit dikembangkan berdasarkan prinsip-prinsip imunokromatografi
dengan mengadsorpsi beberapa jenis antibodi pada permukaan strip uji yang akan terikat
khusus dengan antigen spesifik babi (PerkinElmer 2011). Metode ini dapat menjadi salah
satu solusi untuk mengatasi masalah ketidakpraktisan yang ada pada metode-metode
konvensional sebab metode ini hanya memerlukan alat dan reagen dalam jumlah yang
kecil.
BAB II
METODE
2.1

Porcine Detection Kit

Porcine detection kit adalah alat yang digunakan untuk menguji kandungan babi

pada suatu makanan atau permukaan alat pemotong, alat ini sangat mudah digunakan dan
hasilnya dapat diperoleh dalam waktu singkat, oleh karena itu proses pengambilan
sampel dan pengujian dapat dilakukan di waktu yang sama hingga mendapatkan hasil
hanya dalam beberapa menit.
Porcine detection kit termasuk dalam metode kualitatif berbasis deteksi sensori
dikarenakan interpretasi hasil dtunjukkan oleh munculnya strip uji positif yang dilakukan

secara langsung oleh analis menggunakan indra penglihatan. Porcine detection kit
dikembangkan berdasarkan prinsip-prinsip imunokromatografi dengan mengadsorpsi
beberapa jenis antibodi pada permukaan strip uji yang akan terikat khusus dengan antigen
spesifik babi (PerkinElmer 2011).

2.2

Imunokromatografi / Rapid Test

Metode yang dapat disebut juga uji strip, berbeda dari metode yang lain, metode ini tidak

memerlukan peralatan untuk membaca hasilnya, tetapi cukup dilihat dengan kasat mata, sehingga jauh
lebih praktis. Metode ini mempunyal dua jenis prinsip yang berbeda. Prinsip dasar rapid test

adalah pengikatan antigen oleh antibodi monoklonal yang spesifik. Salah satu jenis rapid
tes yang banyak digunakan adalah alat diagnostik berupa stik uji untuk mendeteksi
keberadaan antigen atau pun antibodi dalam sampel berupa darah, plasma atau serum.
Secara umum metode imunokromatografi untuk mendeteksi sebuah spesimen
dengan menggunakan dua antibodi. Antibodi pertama berada dalam larutan uji atau
sebagian terdapat pada membran berpori dari alat uji. Antibodi ini dilabeli dengan lateks
partikel atau partikel koloid emas (antibody berlabel). Keberadaan antigen akan dikenali
oleh antibody berlabel dengan membentuk ikatan antigen-antibodi. Komplek ikatan ini
kemudian akan mengalir karena adanya kapilaritas menuju penyerap, yang terbuat dari

kertas penyaring. Selama aliran, kompleks ini akan dideteksi dan diikat oleh antibody
kedua yang terdapat pada membran berpori, sehingga terdapat komplek pada daerah
deteksi pada membran yang menunjukkan hasil uji.

INCLUDEPICTURE
"http://cripx.files.wordpress.com/2012/05/vol8_iss5_fig3.jpg?w=640"
2.3

Metode Penggunaan Porcine Detection Kit pada Produk Pangan

Sampel diaduk dalam bowl chopper hingga homogen. Sebanyak 1 gram sampel
diambil menggunakan tusuk gigi lalu dimasukkan dalam botol vial berisi 3 ml cairan
ekstraksi. Botol vial berisi sampel ini kemudian dikocok selama 1 menit hingga sampel
nampak larut dalam cairan ekstraksi. Strip uji dimasukkan sesuai kategori sampel yang
akan diuji. Strip uji raw porcine meat detection kit untuk sampel daging mentah dan strip
uji processed porcine meat detection kit untuk sampel daging yang sudah diolah. Salah
satu ujung strip uji dicelupkan ke dalam botol vial berisi sampel dan cairan ekstraksi.
Larutan sampel dibiarkan mengalir ke atas melalui strip uji hingga mencapai ujung
bawah patch bertanda panah. Strip uji diangkat lalu diletakkan pada permukaan datar dan
tidak menyerap cairan. Strip uji diamati hingga 15 menit. Hasil uji positif ditandai
munculnya garis merah pada positive test line dan control test line pada strip uji. Hasil uji
negatif ditandai dengan munculnya garis merah hanya pada control test line pada strip
(Setiawan, 2013).

BAB III
HASIL DAN PEMBAHASAN
3.1

Mekanisme Kerja Porcine Detection Kit

Komponen strip tes terdiri atas partikel atau koloid emas (alat pendeteksi) yang

diikatkan dengan antibodi terhadap komponen daging babi yaitu antibodi poliklonal
IgG babi. Kemudian dilanjutkan dengan menyiapkan bahan kimia berupa larutan atau
buffer, membran nitroselulosa (tempat proses reaksi), bantalan tempat menaruh konjugat
(sampel), dan kertas hisap.
Prinsip pengembangan metode tersebut dilakukan dengan mengkonjugasikan nanocolloidal gold sebagai penanda dengan antibodi poliklonal IgG babi. Lalu, konjugat
diletakkan pada bantalan konjugat (sampel), salah satu bagian dari sistem strip tes
imunokromatografi. Strip tes ini kemudian digunakan untuk uji ada-tidaknya cemaran
komponen daging babi. Kontrol antibodi babi mengandung antibodi poliklonal IgG babi
yang telah dimurnikan dan digunakan sebagai kontrol positif.
Hasil positif ditunjukkan dengan adanya interaksi antara antigen spesifik babi dengan
porcine serum albumin. Protein ini merupakan unsur utama serum hewan dan secara luas
hadir di semua jaringan tubuh, termasuk lemak subkutan (lemak babi). Pada metode
immunokromatografi, target antigen terikat oleh antibodi yang sangat spesifik yang
melekat pada garis uji dan mikropartikel berwarna. Dua-situs pengikat ditunjukkan
dengan pembentukan kompleks imun yang terlihat sebagai garis berwarna.
Antibodi berlabel partikel nano-colloidal gold akan menangkap antigen pada larutan
sampel. Kemudian kompleks gold-antibodi-antigen akan ditangkap oleh antibodi kedua
pada test zone. Garis berwarna merah akan terbentuk dan terlihat pada test zone yang
mengindikasikan bahwa sampel mengandung komponen babi (hasil positif). Nanocolloidal gold yang tidak terikat dengan antibodi berlabel akan ditangkap oleh antibodi

ketiga pada control zone untuk membentuk garis merah yang menunjukkan bahwa test
telah berjalan dengan sesuai.

3.2

Sensitivitas dan Spesifikasi

Sensitivitas porcine detection kit dapat mendeteksi 0,05% (b/b) campuran daging

babi pada daging ayam, dan 0,02% (b/b) campuran daging babi dalam daging sapi dapat
terdeteksi. Sensitivitas mutlak tes pada produk yang berbeda obat-obatan, kosmetik dan
lain-lain adalah sekitar 0,5 miligram serum albumin babi per kilogram dari bahan padat
(0,5 ppm), namun nilai ini sangat tergantung pada pemanasan bahan .
Liu et al. (2006) menyatakan bahwa pengujian kandungan komponen babi dengan
menggunakan metode ELISA mampu mendeteksi 0,05% (b/b) campuran daging babi
pada daging ayam, dan 0,1% (b/b) campuran daging babi dalam daging sapi. Bila
dibandingkan dengan metode pengujian ELISA yang dikembangkan oleh Liu et al.
(2006) menunjukkan bahwa porcine detection kit dengan metode imunokromatografi
yang dikembangkan saat ini memiliki sensitifitas yang sebanding dan bahkan relatif lebih
baik.
Spesifikasi porcine detection kit ialah tes ini tidak mampu menunjukkan reaksi
terdeteksi untuk albumin serum spesies lain, yaitu sapi, domba, kuda, rusa, ayam, kalkun,
angsa, bebek, kelinci, kangguru. Tes ini juga negatif dengan darah manusia.

3.3 Kelebihan dan Kekurangan

Adapun kelebihan dari porcine detction kit dibandingkan dengan metode lain yaitu :
1.

Memerlukan alat dan reagen dalam jumlah yang kecil,

2.

Pengujian berlangsung cepat yakni sekitar 5-10 menit,

3.

Dapat digunakan dalam pengujian berbagai sampel, baik produk mentah, produk
olahan, maupun alat pengolahan,

4.

Lebih praktis dan mudah dibawa untuk pengujian di lapangan, dan lain sebagainya
Adapun kekurangan dari porcine detction kit, yaitu:
Porcine detection kit tidak dapat mendeteksi kandungan darah dan lemak babi pada

produk yang diproses dengan pemanasan tinggi (lebih tinggi dari 120oC selama lebih dari
30 menit), misalnya setelah penggorengan atau microwave selama memasak. Tes ini juga
tidak mendeteksi kolagen babi (gelatin).

BAB IV
PENUTUPAN
4.1

Kesimpulan
Pork detection kit adalah alat yang digunakan untuk menguji kandungan babi pada

suatu makanan atau permukaan alat pemotong, alat ini sangat mudah digunakan dan
hasilnya dapat diperoleh dalam waktu singkat, oleh karena itu proses pengambilan
sampel dan pengujian dapat dilakukan di waktu yang sama hingga mendapatkan hasil
hanya dalam beberapa menit.
Pork detection kit dikembangkan berdasarkan prinsip-prinsip imunokromatografi
dengan mengadsorpsi beberapa jenis antibodi pada permukaan strip uji yang akan terikat
khusus dengan antigen spesifik babi. Metode ini dapat menjadi salah satu solusi untuk
mengatasi masalah ketidakpraktisan yang ada pada metode-metode konvensional. Hal
tersebut dikarenakan metode ini hanya memerlukan alat dan reagen dalam jumlah yang
kecil.

DAFTAR PUSTAKA
Carnegie, P. R., K. Mills, dan P. A. OBrien. 1997. Novel DNA Technologies for
Identification of Individual Animals and Species Used in Processed Meat
Products. Di dalam : Upaya Mendeteksi Adanya Daging Babi dalam Makanan
Melalui Uji DNA. 2000. [skripsi]. Institut Pertanian Bogor. Bogor
Depamade, S. N. 2011. Development of a Rapid Immunodiagnostic Test for Pork Components
in Raw Beef and Chicken Meats: a Preliminary Study. Media Peternakan. EISSN 2087-4634

Lembaga Pengkajian Pangan, Obat-obatan, dan Kosmetika Majelis Ulama Indonesia.

2013. Indonesian Halal Directory 2012-2013. Bogor (ID): LPPOM MUI.
Liu, L., F. C. Chen, J. L. Dorsey, & Y-H. P. Hsieh. 2006. Sensitive Monoclonal Antibody-based
Sandwich ELISA for The Detection of Porcine Skeletal Muscle in Meat and Feed Products.
J. Food Sci. 71: M1M6. DOI: 10.1111/j.1365-2621.2006.tb12393.x.

PerkinElmer. 2011. Porcine Detection Kit Product Note. PerkinElmer, Inc. Madison. US
Roswiem PA. 2000. Sejauh Mana Analisis di Laboratorium Dapat Mendeteksi
Makanan Haram. Diskusi Terbatas Satu Hari Analisis Komponen Tidak Halal
dalam Makanan. P3KT. LIPI. Serpong
Setiawan, L.E. 2013. Validasi Porcine Detection Kit pada Analisis Cemaran Babi
Dalam Produk Daging Sapi. Institut Pertanian Bogor. Bogor