Cara kerja imunohistokimia

1. Deparafinasi slide pada xilol 1, xilol 2, ethanol absolut 1,

ethanol absolut 2, ethanol 90%, ethanol 80%, ethanol 70%, ethanol 30%
dan aquades.
2. Cuci slide dengan pbs 3x
3. Unmusking dalam buffer sitrat ph 6(10 mM) dan 1 mM edta ph 8 selama
10-20 menit pada suhu 90derajat celcius lalu angkat slide lalu cuci
dengan akuades
2. Blocking peroksidase jaringan dengan h2o2 3% dalam methanol selama 10
menit
3. Cuci slide dengan pbs 3x
4. Blocking slide dalam susu skim 1% dalam pbs-tween selama 30 menit
5. Cuci slide dengan pbs 3x
6. Slide diberi antibodi primer rabbit polyclonal.........(1:100)
dalam susu skim 1% dalam pbs-tween suhu 4 derajat overnight
7. Cuci slide dengan pbs 3x
8. Tambahkan goat anti rabbit igg biotin labeled (1:300) dalam pbs selama 1
jam
9. Cuci slide dengan pbs 3x
10. Slide diberi sa-hrp(1:500) dalam pbs inkubasi selama 45 menit
11.cuci slide dengan pbs 3x
12. Slide ditetesi dengan DAB dan inkubasi selama 30 menit
13. Cuci slide dengan pbs 3x
14. Counterstain slide dengan hematoxilen selama 10 menit lalu slide
direndam dalam air kran selama 10 menit.
15 slide dicuci dengan akuades dan dikeringkan kurang lebih satu malam
16. Mounting slide dengan entelan lalu keringkan dalam suhu ruang