PENGENCERAN SPERMA

Hal-hal yang harus diperhatikan dalam mengolah semen :

Panas yang berlebihan (penyimpanan pada

temperatur kamar yang terlalu lama).
Air/bahan-bahan kimia yang bersifat toksik
bagi jasad renik
Berhubungan dengan udara luar terlalu lama
Sinar matahari langsung
Goncangan/pengocokan terlalu keras
 FUNGSI BAHAN
PENGENCER :

1. MEMPERBANYAK
VOLUME
2. PERLINDUNGAN
SPERMA
3. SUMBER NUTRISI
4. BACTERIOSTATIC ATAU
BACTERISIDE
 SYARAT-SYARAT BAHAN PENGENCER :
1. ISOTONIK (TEKANAN OSMOSA = SERUM/SPERMA)
2. HARUS MENGANDUNG MINERAL-MINERAL /GARAM MINERAL YG
DIBUTUHKAN UNTUK HIDUPNYA SPERMA (K, Na)
3. HARUS MENGANDUNG BAHAN YG DAPAT DIGUNAKAN SEBAGAI
SUMBER ENERGI BAGI KEHIDUPAN SPERMATOZOA
4. HARUS MENGANDUNG BAHAN-BAHAN YG DAPAT MELINDUNGI
SPERMATOZOA DARI PENGARUH SUHU PENYIMPANAN (KUNING
TELUR, GLISEROL).
5. HARUS BERSIFAT PENYANGGAH/BUFFER
6. HARUS STERIL
7. NON TOKSIK/TDK BERACUN (TERHADAP SPERMATOZOA,
UTERUS INDUK DAN PELAKSANA).
8. MEMPUNYAI DAYA MEMBUAHI YANG BAIK DAN TIDAK
TERLALU KENTAL
9. MURAH, MUDAH TERSEDIA
10. COCOK BAGI SPERMATOZOA
11. MEMUNGKINKAN UNTUK PENGUJIAN KUALITAS MIKRO
SPERMATOZOA SETELAH PENGENCERAN.
 PENGENCER, PENYANGGAH KUNING TELUR
1. FOSFAT KUNING TELUR, TERDIRI 2.
ATAS 1 BAGIAN KUNING TELUR
SEGAR DAN 1 BAGIAN
PENYANGGAH FOSFAT (2,0 g
Na2HPO4.12 H2O + 0,2 g
KH2PO4 + 100 ml aquadestilata).
SITRAT KUNING TELUR,
TERDIRI ATAS (1-7) BAGIAN
KUNING TELUR, DAN 1 BAGIAN
Na Sitrat (2,9 g Na3C6H5O7.
2H2O + 100 ml aquadestilata)

Khasiat kuning telur ada pada kandungan lipoprotein dan lecithin yang ada di
dalamnya, berfungsi melindungi integritas selubung lipoprotein sel
spermatozoa. Kuning telur juga mengandung Glukosa yang lebih disukai
oleh sel-sel sperma sapi untuk metabolismenya dari pada fruktosa yang
terdapat di dalam plasma seminal. Berbagai protein-asam amino seperti
tyroxin, tryptohan, phenylalanin. Menghasilkan Hidrogen peroksida pada
deaminasi oksidatif :
-Vitamin-vitamin yang larut dalam air/minyak
-Memiliki viskositas yang sungguh menguntunkan spermatozoa.
3. AIR SUSU PENGENCER
PENGENCERAN DENGAN AIR SUSU
AKAN BERHASIL BAIK DENGAN
PENGENCERAN 1 : 25
SUSU BUBUK 9% DALAM LARUTAN
AQUADESTILATA
AIR SUSU MENTAH MENGANDUNG BAHAN YANG BERSIFAT RACUN
TERHADAP SPERMATOZOA, BAHAN TOKSIK TERSEBUT ADALAH
LACTENIN, YAITU SUATU ZAT ANTI STREPTOCOCCUS PADA AIR
SUSU.
AIR SUSU MENGANDUNG PULA BERBAGAI ENZIM YANG HANCUR
PADA WAKTU PEMANASAN. PEMANASAN AIR SUSU DI ATAS 80
DERAJAD AKAN MELEPASKAN SH (IKATAN SULFHIDRYL) YANG
BERFUNGSI SEBAGAI ZAT REDUKTIF YANG MENGATUR
METABOLISME OKSIDATIF SPERMA.
CYSTEIN HYDROCHLORIDA KE DALAM AIR SUSU MENTAH AKAN
SECARA LANGSUNG MENGHAMBAT ATAU MENIADAKAN TOKSISITAS
LAKTENIN = GUGUS SH YANG DILEPAS DARI PROTEIN SUSU
DENGAN JALAN PEMANASAN 87 97 DERAJAD C SELAMA 1 MENIT
ATAU PADA 77 90 DERAJAD C SELAMA 10 MENIT.
PEMANASAN AIR SUSU DILAKUKAN SECARA TDK LANGSUNG PADA
SUHU 92 98 DERAJAD C SELAMA 10 MENIT.
 PENGENCER YANG MENGANDUNG
GLISEROL :
GLISEROL adalah suatu zat yang dapat
berdifusi ke dalam sel-sel sperma dan dapat
dimetaboliser dalam proses-proses yang
menghasilkan energi dan membutuhkan
fruktosa
Penambahan gliserol ke dalam pengencer
adalah esensial untuk pembekuan semen
Semen tidak beku jika di tambah gliserol
dengan daya tahan hidup bertambah
Semen+Susu+Gliserol 10% menghasilkan daya
tahan hidup dan fertilitas baik.
 PENGENCER-PENGENCER LAIN :

1. IVT (Illini Variable 2. CUE (Cornell University Extender),

Temperatur), dengan terdiri atas 1 bagian kuning telur
menambah gas CO2 secara + 4 bagian penyanggah (1,45% Na
jenuh kedalam pengencer Sitrat+ 0,21 % Na
kemudian ditutup secara Bikarbonat+0,04% Kcl, 0,3%
hermatik di dalam ampul Glukosa+0,93% glyserin).
CO2 berguna untuk
menghentikan motilitas dan
metabolisme sperma. IVT
fertilitas dapat sampai 6 7
hari

3. AIR KELAPA KUNING TELUR, Air kelapa sebagai

sumber makanan bagi spermatozoa dapat dipahami akan
tetapi sebagai larutan penyanggah masih diragukan (perlu
diteliti).
 PENAMBAHAN ANTIBIOTIKA

1. JIKA DITAMBAHKAN AKAN MENINGKATKAN DAYA

HIDUP SPERMATOZOA DAN MENGELIMINIR
ORGANISME VIBRIO FOETUS DAN TIDAK
MEMPENGARUHI ANGKA KONSEPSI
2. DOSISI 1000 UNIT PENISILIN, 1000 MIKRO g / ml
pengencer
3. Pengencer air susu dan sitrat kuning telur umumnya
ditambah 1000 unit crystalline penicilline atau 1000
mikro g dehidrostreptomycine
4. UNTUK SEMEN CAIR DAPAT DITAMBAHKAN
SULFANILAMIDE DENGAN KONSENTRASI 0,03 G/ml
pengencer (utk pembekuan preparat SA tdk boleh
digunakan, karena berpengaruh terhadap metablisme
yaitu penghambatan fructolisis)
5. Antibiotik yang berlebihan akan bersifat toksis bagi
spermatozoa.
 KADAR PENGENCERAN DAN DOSIS IB

TUJUAN PENENTUAN KADAR PENGENCERAN :

AGAR SETIAP SATUAN VOLUME SEMEN YANG AKAN DI IB KAN
MENGANDUNG CUKUP SPERMATOZOA UNTUK MEMBERIKAN
FERTILITAS YANG TINGGI TANPA MEMBUANG-MBUANG
SPERMATOZOA YANG BERLEBIHAN

STANDAR MINIMAL BAGI KUALITAS SEMEN YANG DAPAT DIPAKAI

UNTUK IB MINIMAL MENGANDUNG 500 JUTA SEL/EJAKULASI, 50%
SPERMA HIDUP DAN MOTIL (SETIAP DOSIS IB HARUS MENGANDUNG
MINIMAL 5 JUTA SEL SPERMA YANG HIDUP DAN MOTIL).
Vol semen sapi 3 ml, dosis iB segar pakai 10 juta, konsentrasi 900.000/mm3,
motulitas 80%, tentukan berapa kadar pengencerannya, jika setiap kali IB 1 ml.

3 X 900.000.000 X 0,8/ 10.000.000 X 1 ml = 3X90X0,8 = 216 ml

 CONTOH SEMEN DENGAN KUALITAS SD/++/70p vol 5 ml

ARTINYA :
SD = Semi Densum (konsentrasi +/- 600 juta/ml)
++ = Gerak massa sperma baik
70 = Persentase jumlah sel spermatozoa yang hidup dalam
contoh semen 1 ml
p = gerak individu sperma umumnya progresif

Perhitungan : 1 ml mengandung spermatozoa

motil :
70/100 X 600.juta = 420 juta
spermatozoa motil; maka kadar pengencerannya =
420 juta/5 juta = 84 kali
 jika terdapat kode produksi semen D/+++/90p vol
3 ml, hitung berapa kali pengenceran jika dosis IB
5 juta

D= 1.000.000.000.000 X
90%=900.000.000:5.000.000 = 180
kaliX 3 ml = 540 kali (dosis)

31/07/17

1. MEMBUAT SEDIAAN BUFFER SITRAT
2,9 g dihidro Na citrat dimasukan
kedalam tabung erlenmeyer yang berisi
100 ml aquadest
Panaskan sampai mendidih di atas api
bunsen kemudian dinginkan
Buffer sitrat dapat dipakai untuk
pengencer
Buffer sitrat dapat tahan lama dan
disimpan dalam almari es dengan
temperatur 5 derajad C
Mempersiapkan pengencer :
2. MEMBUAT SEDIAAN KUNING TELUR
Telur ayam dicuci bersih, setelah
kering pecahkan kulit telur kira-kira di
tengah. Kulit telur dikuakan dan putih
telur dibuang. Kemudian kuning telur
diguling-gulingkan dari belahan yang
satu ke yang lain
Tarus kuning telur pada kertas saring
yang steril, lipat seperti corong dan
bagian yang runcing dipotong,
kemudian kuning telur dipecah dengan
gunting/pisau kemudian tuang dalam
tabung silinder berskala 50 ml.

3. MEMBUAT SEDIAAN PENGENCER KUNING TELUR CITRAT

Pengencer dibuat : KT : Citrat = 1 : (1 7)
Tambahkan 100 unit penicilin dan 1000 Mikro g dehidrostreptomycin yang
sebelumnya dilarutkan dalam aquades steril atau buffer
Sediaan pengencer tersedia dalam keadaan segar setiap hari sebelum dipakai
(taruh dalam 5 derajad C)
PENGENCER KUNING TELUR-POSPAT (PHILIPS DAN LARDY) :
PENGENCERNYA TERDIRI ATAS :
Na2HPO.12H2O 2,0 gr
KH2PO4 0,20 gr
AQUADEST sampai dengan 100 ml
kemudian di tambahkan KUNING TELUR SAMA BANYAK (1:1)

pH = 6,7 6,8
PHOSPAT

PENGENCER INI SUDAH CUKUP BAIK UNTUK

PENGENCER SEMEN SAPI
PERBANDINGAN PHOSPAT : KUNING TELUR = 1:1, 1:4 DAN
1:5
 LARUTAN YANG BAIK (ISOTONIK) SEBAGAI BUFFER ADALAH
SEKITAR 3%
PENAMBAHAN KUNING TELUR UNTUK PENGENCER SEMEN
DOMBA DAN SAPI SEKITAR 20 -50%
KAMBING PENAMBAHAN KUNING TELUR DALAM
PENGENCER SEMEN HANYA SAMPAI 10% SAJA.
BUFFER YG BANYAK DIPAKAI ADALAH CITRAT DAN PHOSPAT
LARUTAN CITRAT 3% ADALAH Na-Citrat YG MENGANDUNG 2
AIR KRISTAL

KUNING TELUR :

MENGANDUNG LECITHIN DAN CEPHALIN

PADA SEMEN KAMBING LECITHIN AKAN
DIHIDROLISIS OLEH ENZIM PHOSPATASE
TERBENTUK ZAT TOXIS LYSOLECITHIN, TERHADAP
SEMEN SAPI DAN DMBA TIDAK BERPENGARUH.
AIR SUSU SEBAGAI
PENGENCER
SUSU HARUS DIPANASKAN PADA SUHU 92 -95 C SELAMA 10
MENIT DI DALAM PENANGAS, DENGAN MAKSUD UNTUK MENG-
INAKTIFKAN LACTENIN (TOXIK BAGI SPERM) KARENA ADANYA
PEMBEBASAN GUGUS SULFHIDRIL (-SH) YAITU SULFHIDRIL YG
BERASAL DARI LACTO GLOBULIN SUSU).
APABILA TANPA PEMANASAN MAKA PERLU DITAMBAHKAN
CYSTEIN (AA YG MENGANDUNG SH) ATAU DITAMBAHKAN ASAM
THYOGLICOLAT UNTUK MEMBEBASKAN GUGUSAN SH GUNA
MENGINAKTIFKAN LACTENIN SUSU.
1. SUSU BISA DIPAKAI PENUH SEBAGAI PENGENCER
NAMUN KENDALANYA ADALAH PADA BUTIRAN-
BUTIRAN LEMAK YG MENGGANGGU DALAM
PEMERIKSAAN MOTILITAS (SOLUSI; SUSU
DIHOMOGENKAN DULU)
2. MENGGUNAKAN SUSU TANPA LEMAK (SKIM), DALAM
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS NAMPAK BERSIH

PADA PENGGUNAAN SUSU PENUH SEBAGAI

PENGENCER BISA TDK DITAMBAHKAN KUNING
TELUR NAMUN PADA SUSU SKIM BISA
DITAMBAHKAN KUNING TELUR 2 10%
PENGENCER KUNING TELUR YANG SUDAH DIBUAHI
(BERTUNAS) ATAU NEOSEMINAN (Prof. Nishikawa,
Jepang). UMUR BERTUNAS DARI 10 12 HARI
PENTASAN.
 BAHAN-BAHAN PENGENCER YG DAPAT DIGUNAKAN
DALAM PENYIMPANAN SEMEN (PANJANG) :

1. GLYCEROL (DIBEKUKAN)
2. DMSO (DIMETHYLSULFOXIDE)
3. EDTA (ETHYLEN DIAMINE TETRACETIC ACID)

PENYIMPANAN SEBAGAI LIQUID SEMEN BIASANYA PADA SUHU KAMAR

15/18C SUHU DI LUAR 24/25C.
PENYIMPANAN DALAM BENTUK CHILLED SEMEN, YAITU PENYIMPANAN
PADA SUHU 4 - 5C DENGAN PROSES PENGENCERAN YG SAM DENGAN
POIN DI ATAS. PENGENCERNYA BISA MENGUNAKAN YCG
(GLUKOSACITRAT KUNING TELUR) MAUPUN YPG (GLUKOSA PHOSPAT
KUNING TELUR).
PENGENCER-PENGENCER KHUSUS SEMEN YG DISIMPAN PADA SUHU
KAMAR (15/18C) ADALAH DALAM PENGENCER IVT (ILLINI VARIABLE
TEMPERATUR) DAN DAPAT JUGA CUE (CORNELL UNIVERSITY EXTENDER)
PENGENCER IVT TERDIRI ATAS : PENGENCER CUE TERDIRI ATAS :
Na H CO2 0,21 g 0,21 g
Na Citrat 2,00 g 1,45 g
Glukosa 0,34 g 0,3 g
SA 0,3/3 mg 0,3 / 3 mg
Kuning Telur 10 % 20%
Penicillin 1000 IU/ml 1000 IU/ml
Gas CO2 CO2
KCl 0,04 g 0,04 g
Aquadest 100 ml 100 ml
Glycerin 0,94

BISA DIGUNAKAN UNTUK SAPI TERBAIK PADA SUHU 5C DAN UMUMNYA

PADA PENYIMPANAN SUHU 15C KHUSUSNYA PADA SEMEN BABI
PENGENCER CUE BISA DIPAKAI UNTUK TEMPERATUR SIMPAN 5C
UMUMNYA 25C. UNTUK PENYESUAIAN ph dapat ditambahkan ASAM
CITRAT 0,087 g
PENGENCER CAPROGEN :

UNTUK PENGENCER SEMEN SAPI PADA SUHU SIMPAN 4 5 C DAN

18C/24C.
DENGAN PENGENCER INI CR SAPI SAMPAI HARI KE 3 ADALAH 62
68%
TERDIRI ATAS :

Na Citrat 2,0 g %
Glukosa 0,3 g %
Glyceril 1,0 g %
Glycerol 1,25 g %
Asam Caproat (Caproic acid) 0,0325 g %
Kuning Telur 2 20 % volume
Gas N2
Antibiotika
 TUGAS :
1. BUAT RESUME DALAM BENTUK WORD TIMES
NEW ROMANS SPASI 1.5 MINIMAL 2 HAL
FOLIO, KIRIM KE EMAIL P. SETYO

31/07/17