BAKTERI BACILLUS

Gambar 1.Bacillus sp
Bacillus sp merupakan bakteri Gram positif, berbentuk batang, dapat tumbuh pada kondisi
aerob dan anaerob.Sporanya tahan terhadap panas (suhu tinggi), mampu mendegradasi
Xylandan karbohidrat (Cowandan Stells, 1973).Bacillus spp mempunyai sifat:
(1) mampu tumbuh pada suhu lebih dari 50 oC dan suhu kurang dari 5 oC,
(2) mampu bertahan terhadap pasteurisasi,
(3) mampu tumbuh pada konsentrasi garam tinggi (>10%), (4) mampu menghasilkan spora dan
(5) mempunyai daya proteolitik yang tinggi dibandingkan mikroba lainnya.
Bacillus adalah salah satu genus bakteri yang berbentuk batang dan merupakan anggota dari
divisi Firmicutes. Bacillus merupakan bakteri yang bersifat aerob obligat atau fakultatif, dan
positif terhadap uji enzim katalase.
Bacillus secara alami terdapat dimana-mana, dan termasuk spesies yang hidup bebas atau
bersifat patogen.Beberapa spesies Bacillus menghasilkan enzim ekstraseluler seperti protease,
lipase, amilase, dan selulase yang bisa membantu pencernaan dalam tubuh hewan (Wongsa dan
Werukhamkul, 2007). Jenis Bacillus (B. cereus, B. clausii dan B. pumilus) termasuk dalam lima
produk probiotik komersil terdiri dari spora bakteri yang telah dikarakterisasi dan berpotensi
untuk kolonisasi, immunostimulasi, dan aktivitas antimikrobanya (Duc et al., 2004).
Beberapa penelitian telah berhasil mengisolasi dan memurnikan bakteriosin Bacillus sp.
Gram positif diantaranya yaitu subtilin yang dihasilkan oleh Bacillus subtilis (Kleinetal.1993),
megacin yang dihasilkan oleh B. megaterium (Tagg et al., 1976), coagulin dihasilkan oleh B.

coagulans (Hyronimus, 1998), cerein dihasilkan oleh B. cereus (Oscariz dan Pisabarro, 2000),
dan tochicin yang dihasilkan oleh B. thuringiensis (Paik et al., 1997).
Bakteriosin merupakan zat antimikroba berupa polipeptida, protein, atau senyawa yang
mirip protein.Bakteriosin disintesis diri bosom oleh bakteri selama masa pertumbuhannya dan
umumnya hanya menghambat pertumbuhan galur-galur bakteri yang berkerabat dekat dengan
bakteri penghasil bakteriosin (Kone & Fung, 1992). Menurut Tagg et al., (1976), kriteria yang
merupakan ciri-ciri bakteriosin adalah sebagai berikut:
(1) memiliki spektra aktivitas yang lebih sempit,
(2) senyawa aktif merupakan polipeptida atau protein,
(3) bersifat bakterisida,
(4) mempunyai reseptor spesifik pada sel sasaran,
5) gen determinan terdapat pada plasmid.
Senyawa antibiotik yang dihasilkan Bacillus sp adalah basitrasin, pumulin, laterosporin,
gramisidin, dan tirocidin yang efektif melawan bakteri Gram positif serta kolistin dan polimiksin
bersifat efektif melawan bakteri Gram negatif.Sedangkan difficidin memilikis pektrum lebar,
mikobacilin dan zwittermicin bersifat antijamur (Todar, 2005).
Kelebihan dan Kekurangan Bakteri Bacillus sp
1. Kelebihan
Bacillus sp memiliki kemampuan dalam menghasilkan antibiotik yang berperan dalam nitrifikasi
dan denitrifikasi
pengikat nitrogen, pengoksidasi selenium (Se), pengoksidasi dan pereduksi mangan (Mn)
bersifat khemolitotrof, aerob dan fakultatif anaerob
dapat melarutkan karbonat
dapat melarutkan posfat, dan menurunkan pH substrat akibat asam organik yang dihasilkannya
dapat melakukan mineralisasi terhadap bahan organik kompleks baik berupa senyawa polisakarida,
protein maupun selulosa
2. Kekurangan
Bacillus sp ini dapat dimanfaatkan pada tahap persiapan lahan tambak dan pembentukan
air pada masa awal budidaya ikan/ udang.Pembentukan plankton, bakteri pembentuk flock,
menurunkan pH dan stabilisasi alkalinitas berupa pembentukan buffer (penyanggah) bikarbonatasam karbonat dapat terlaksana. Namun jika dilanjutkan terus dari masa pertengahan budidaya
hingga akhir (panen) maka eutrofikasi air dapat terjadi, konsentrasi posfat dan nitrit dapat

meningkat sebagai akibat pelarutan posfat dan degradasi protein dari sisa pakan dan kotoran
ikan/ udang serta produksi nitrit yang intens dari hasil pernafasan denitrifikasi Bacillus sp.
Rentang pH pagi sore juga dapat bergerak melebar, akibat daya larut terhadap karbonat yang
bisa menyebabkan ketidakseimbangan buffer bikarbonat-asam karbonat dan radikal karbonat
terbentuk (kalsinasi). Disamping itu, enzim protease dan chitinase yang dihasilkan selama
fermentasi Bacillus sp dapat secara ekstrim mengganggu siklus dan kesempurnaan moulting bagi
udang.
Secara individu, spesies-spesies Bacillus sp memiliki kemampuan khas masing-masing
sehingga dapat dimanfaatkan dalam kegiatan budidaya ikan/ udang, yaitu:
1) B. subtilis dan B. cereus memiliki kemampuan untuk melakukan lysis terhadap cyanobacteria
(BGA) pada konsentrasi 103 sel/ml di air kolam. Menghasilkan cyanobacteriocyde sehingga
cocok untuk digunakan sebagai kontrol biologi terhadap blooming blue green algae.
2) B. megaterium dan B. polymyxa mampu menghasilkan antibiotik berupa megacin dan polymycin
yang efektif untuk menekan pertumbuhbiakan vibrio, Escherchia colli dan Aeromonas. B.
Polymyxa memiliki berbagai macam potensi termasuk antibiotik peptida, protease, dan berbagai
macam enzim carbohydrateutilizing, seperti P-amilase,,-D-xilanase, pullulanase, glukosa
isomerase, dan polygalacturonate liase.
3) B. coagulans dan B. lichenoformis mampu mensintesis secara cepat dan massal lectin dan
polyhydroxyalkanoat (PHA) untuk polimerisasi activated sludge/bioflok, sehingga cocok untuk
penebalan bioflok di air kolam/tambak jika diperlukan.
4) B. subtilis dan B. coagulans mampu menghentikan diare/mencret pada ikan/udang jika digunakan
sebagai aditive pada pakan. B. subtilis memiliki kemampuan memproduksi antibiotik dalam
bentuk lipopeptida, salah satunya adalah iturin. Iturin membantu B. subtilis berkompetisi dengan
mikroorganisme lain dengan cara membunuh mikroorganisme lain atau menurunkan tingkat
pertumbuhannya. Iturin juga memiliki aktivitas fungisida terhadap pathogen.Serta menghasilkan
subtilin sebagai antibiotik yang digunakan untuk menekan populasi abkeri pathogen.B.
coagulans mampu menghasilkan enzim amilase dan lipase.
5) B. lichenoformis mampu menghasilkan enzim protease yang dapat meningkatkan daya cerna
protein dari pakan sehingga mampu meningkatkan protein efficiency ratio pakan (fermented
feed). Bakteri ini merupakan species bakteri yang mampu menghasilkan protease dalam jumlah
yang relatif tinggi.Jenis protease yang dihasilkan oleh bakteri ini adalah enzim ekstraselular yang
tergolong proteinase serin karena mengandung serin pada sisi aktifnya.

6) B. subtilis dan B. lichenoformis dapat menghasilkan biosurfaktan yang mampu memotong gugus
peptida dari toksin blue green algae.
7) B. subtilis, B. cereus dan B. megaterium mampu mengoksidasi senyawa hidrokarbon seperti minyak
bumi

dan fenol. B. megaterium merupakan produser utama untuk vitamin B12 dan

penicillin.Selain itu, juga dapat memproduksi enzim yang berfungsi untuk sintetik steroid dan
8)

stabilitas yang baik dari plasmid rekombinan (Vary, 2007).

B. subtilis dan B. lichenoformis penghasil biosurfactan dengan jenis lipoprotein (biosurfactin).

Gambar 2.1 Bacillus sp. Gram Positif Berspora

Kingdom :Procaryotae
Divisi

: Bacteria

Kelas

: Schizomycetes

Bangsa

: Eubacteriales

Suku

: Bacillaceae

Marga

: Bacillus

Jenis

: Bacillus sp.

Morfologi
Bacillus sp. merupakan bakteri berbentuk batang (basil), dan tergolong dalam bakteri gram
positif yang umumnya tumbuh pada medium yang mengandung oksigen (bersifat aerobik)
sehingga dikenal pula dengan istilah aerobic sporefomers.Kebanyakan anggota genus Bacillus
sp. dapat membentuk endospora yang dibentuk secara intraseluler sebagai respon terhadap
kondisi lingkungan yang kurangmenguntungkan, oleh karena itu anggota genus Bacillus sp.
memiliki toleransi yang tinggi terhadap kondisi lingkungan yang berubah-ubah. Beberapa
anggota Bacillus sp. memiliki S-layer yang merupakan lapisan crystalline dipermukaan subunit
protein atau glikoprotein. Bagian kapsul kebanyakan anggota Bacillus sp.mengandung D atau L-

glutamic acid, sedangkan beberapa lainnya memiliki kapsul yang mengandung karbohidrat.
Variasi struktur dinding sel seperti padakebanyakan bakteri gram negatif tidak ditemukan pada
genus Bacillus sp. Dinding sel vegetatif kebanyakan anggota Bacillus sp. terbuat dari
peptidoglikan yang mengandung Meso-Diaminopimelic Acid(DAP) dengan tipe Glyserol
Teichoic Acid sangat bervariasi diantara spesies. Kebanyakan anggota genus Bacillus sp.
merupakan bakteri yang bersifatmotil dan memiliki flagela tipe peritrik.Bacillus sp. digolongkan
ke dalam kelas bakteri heterotrofik, yaitu protista bersifat uniseluler, termasuk dalam golongan
mikroorganisme redusen atau yang lazim disebut sebagai dekomposer.Sebagian besar bakteri laut
termasuk dalam kelompok bakteri bersifat heterotrofik dan saprofitik (Rheinheimer, 1980).
Jenis Bacillus sp. menunjukkan bentuk koloni yang berbeda-beda pada medium agar.Warna
koloni pada umumnya putih sampai kekuningan atau putih suram, tepi koloni bermacam-macam
namun pada umumnya tidak rata, permukaannya kasar dan tidak berlendir, bahkan ada yang
cenderung kering berbubuk, koloni besar dan tidak mengkilat.Bentuk koloni dan ukurannya
sangat bervariasi tergantung dari jenisnya. Selain itu setiap jenis juga menunjukkan kemampuan
dan ketahanan yang berbeda-beda dalam menghadapi kondisi lingkungannya, misalnya
ketahanan terhadap panas, asam, kadar garam, dan sebagainya(Rheinheimer, 1980).
Bakteri Bacillus sp. biasanya banyak ditemukan di tanah.Cara untuk mendapatkan bakteri
Bacillus sp. yaitu dengan mengambil sampel tanah menggunakan sendok yang telah
disterilisasikan terlebih dahulu kemudian ambil tanah sekitar kedalaman 3 cm dari permukaan
tanah.Bacillus sp. merupakan bakteri gram positif dengan sel batang berukuran 0,3-221,27-7
m, sebagian bersifat motil (mampu bergerak), mobilitasnya ini disebabkan oleh flagel yang jika
dipanaskan akan membentuk endospora, yaitu bentuk dorman sel vegetatif sebagai bentuk
pertahanan diri yang muncul saat kondisi ekstrim yang tidak menguntungkan bagi bakteri.
Kandungan air endospora sangat rendah bila dibandingkan dengan sel vegetatifnya, maka
endospora berbentuk sangat padat dan sangat refraktil bila dilihat di bawah
mikroskop.Endospora dibentuk dalam sporangium di dalam sel dan dibentuk saat sel
masak.Endospora memiliki dinding tebal, reaktif, dan sangat resisten. Letak endospora dalam sel
ukuran selama pembentukannya tidak sama antara spesies satu dengan lainnya. Beberapa spesies
memiliki spora sentral, terminal, atau letal.Endospora dapat berbentuk oval, silindris, bulat, atau
lainnya.Bacillus sp. bersifat aerob sampai anaerob fakultatif, metabolisme dengan fermentasi dan
respirasi.Isolat-isolat murni tersebut dipelihara dalam medium agar miring.
Untuk memastikan bahwa koloni-koloni tersebut adalah Bacillus, maka dilakukan serangkaian
pengujian yang bersifat spesifik yaitu pengecatan gram, pengecetan negatif dan
motilitasnya.Bacillus dibedakan dari anggota familia Bacillaceae lainnya berdasarkan sifatsifatnya yaitu: keseluruhannya merupakan pembentuk spora, hidup pada kondisi aerob baik
sebagai jasad yang sepenuhnya aerob maupun aerob fakultatif, selnya berbentuk batang, dan
memproduksi katalase (Priyani, 2006).

Distribusi Geografik
Bacillus sp. merupakan bakteri gram-positif yang berbentuk batang,dan secara alami sering
ditemukan di tanah dan vegetasi. Bacillus sp.tumbuh di berbagai mesofilik suhu berkisar 25-35
derajat Celsius.Bacillus sp. juga telah berevolusi sehingga dapat hidup walaupun di bawah
kondisi keras dan lebih cepat mendapatkan perlindungan terhadap stres situasi seperti kondisi pH
rendah (asam), bersifat alkali, osmosa, atau kondisi oksidatif, dan panas atau etanol Bakteri ini
hanya memiliki satu molekul DNA yang berisi seperangkat set kromosom. Beberapa keunggulan
dari bakteri ini adalah mampu mensekresikan antibiotik dalam jumlah besar ke luar dari sel
(Scetzer, 2006).
Pengecatan
Pewarnaan Gram atau metode Gram adalah salah satu teknik pewarnaan yang paling penting dan
luas yang digunakan untuk mengidentifikasi kuman Bacillus sp. Pengecatan gram digunakan
untuk mengidentifikasi kuman Bacillus sp. Bakteri Gram positif akan mempertahankan zat
pewarna kristal violet dan karenanya akan tampak berwarna ungu tua di bawah mikroskop.
Adapun bakteri gram negatif akan kehilangan zat pewarna kristal violet setelah dicuci dengan
alkohol, dan sewaktu diberi zat pewarna tandingannya yaitu dengan zat pewarna air fuchsin atau
safranin akan tampak berwarna merah. Perbedaan warna ini disebabkan oleh perbedaan dalam
struktur kimiawi dinding selnya.Bakteri gram positif dinding selnya tersusun oleh peptidoglikan
dalam jumlah besar (Harley dan Presscot, 2002).
Pewarnaan Gram adalah teknik pewarnaan differensial yang paling banyak digunakan dalam
bakteriologi.Pewarnaan ini memisahkan bakteri menjadi dua kelompok, yaitu gram positif dan
gram negatif. Larutan yang digunakan dalam pewarnaan ini ada 4, yaitu Gram A, Gram B, Gram
C dan Gram D. Langkah pertama pewarnaan ini adalah menggunakan larutan Gram A, berupa
cat kristal violet (Huckers violet) yang member warna ungu pada sel bakteri. Setelah itu,
preparat ditetesi dengan larutan Gram B berupa iodine (Lugul Iodine) yang berfungsi sebagai
penguat warna cat sebelumnya. Iodin akan meningkatkan interaksi antara dinding sel bakteri dan
pewarna gram A. Selanjutnya preparat akan ditetesi dengan larutan Gram C berupa zat peluntur
seperti aseton atau alkohol. Karena perbedaan struktur dinding sel, yaitu ketebalan
peptidoglikannya, bakteri gram positif yang memiliki dinding peptidoglikan tebal tidak akan
luntur warnanya, sementara bakteri gram positif yang dinding peptidoglikannya tipis, akan luntur
warnanya. Selanjutnya, preparat akan diberi larutan Gram D berupa pewarna pembanding yang
kontras dengan pewarna utama. Safranin adalah pewarna pembanding yang paling umum
digunakan. Safranin akan mewarnai bakteri gram negatif yang tak berwarna, tapi tidak akan
mengubah warna bakteri gram positif. Hasil akhirnya adalah bakteri gram positif akan berwarna
ungu gelap, sementara bakteri gram negatif akan berwarna dadu atau merah (Harley dan
Presscot, 2002).

Agen Penyakit
Bacillus sp. merupakan agen penyakit dari beberapa penyakit seperti infeksi kulit, paru, usus,
dan selaput otak. Selain itu, beberapa tipe Bacillus sp. dipastikan sebagai penyebab suatu kasus
keracunan makanan, apabila hasil isolasi Bacillus sp. menunjukkan bahwa strain-strain dari
serotip yang samaditemukan pada makanan yang dicurigai dan dari kotoran atau muntahan
pasien, atau hasil isolasi bakteri dari makanan yang dicurigai, kotoran, atau muntahan
pasienmenunjukkan adanya sejumlah besar Bacillus cereus dari serotip yang dikenal
sebagaipenyebab keracunan makanan. Keracunan pangan yang diakibatkan oleh Bacillus sp.
ditunjukkan dari gejala diare, kejang (kram) perut, dan muntah (Akoso, 2009).

Bacillus

BAB II
PEMBAHASAN
I.

CIRI - CIRI UMUM

Secara umum kelompok Bacillus merupakan bakteri berbentuk batang (basil), dan
tergolong dalam bakteri gram positif yang umumnya tumbuh pada medium yang mengandung
oksigen (bersifat aerobik) sehingga dikenal pula dengan istilah aerobic sporeformers. Kebanyakan
anggota genusBacillusdapat membentuk endospora yang dibentuk secara intraseluler sebagai respon
terhadap kondisi lingkungan yang kurang menguntungkan, oleh karena itu anggota genus
Bacillus memiliki toleransi yang tinggi terhadap kondisi lingkungan yang berubah-ubah.
Bakteri Bacillussp. biasanya banyak ditemukan di tanah. Cara untuk mendapatkan bakteri
Bacillussp. yaitu dengan mengambil sampel tanah menggunakan sendok yang telah
disterilisasikan terlebih dahulu kemudian ambil tanah sekitar kedalaman 3 cm dari permukaan
tanah. Bacillussp. merupakan bakteri gram positif dengan sel batang berukuran 0,3-22x1,27-7
m, sebagian bersifat motil (gerak) mobilitasnya ini disebabkan oleh flagel, jika dipanaskan akan
membentuk endospora, yaitu bentuk dorman sel vegetatif sebagai bentuk pertahanan diri yang
muncul saat kondisi ekstrim yang tidak menguntungkan bagi bakteri.
Letak endospora dalam sel ukuran selama pembentukannya tidak sama antara spesies satu
dengan lainnya. Beberapa spesies memiliki spora sentral, terminal, atau letal. Endospora dapat
berbentuk oval, silindris, bulat, atau lainnya. Untuk memastikan bahwa koloni-koloni tersebut
adalah Bacillus, maka dilakukan serangkaian pengujian yang bersifat spesifik yaitu pengecetan
gram, pengecetan negatif dan motilitasnya. Bacillus dibedakan dari anggota familia Bacillaceae
lainnya berdasarkan sifat-sifatnya yaitu: keseluruhannya merupakan pembentuk spora, hidup

pada kondisi aerob baik sebagai jasad yang sepenuhnya aerob maupun aerob fakultatif, selnya
berbentuk batang, dan memproduksi katalase.

II.

JENIS JENIS BACILLUS

Kebanyakan anggota genus Bacillus adalah organisme saprofit yang lazim terdapatdalam
tanah, air, udara, dan tumbuh-tumbuhan, seperti Bacilluscereus dan Bacillussubtilis. Beberapa di
antaranya patogen bagi insekta. Bacilluscereus dapat tumbuh pada makanan dan menghasilkan enterotoksin
yang menyebabkan keracunan makanan. Organisme ini kadang-kadang dapat menimbulkan penyakit
pada orang fungsi imun yang terganggu (misalnya meningitis, endokarditis, endoftalmitis,
konjungtivitis, atau gastroenteritis akut). Seperti Bacillusanthracis, penyebab antraks adalah
bakteri patogen utama genus ini.

A.

Bacillus anthracis

Gambar Bacillus anthracis

Koloni Basillus anthracis pada media agar darah

Kuman antraks banyak ditemukan pada penyakit zoonosis, infeksi pada ternak lembu,
kambing, domba dan babi. Kuman dikelurakan melalui feses, urin dan saliva binatang yang
terinfeksi dan bertahan hidup di ladang dalam bentuk spora untuk waktu yang lama sekali.
Morfologi
Batang dengan ukuran 1 x 3-4 m, dapat tersusun dengan seperti bambu, bentuk batangnya
persegi atau cekung ujungnya, sendiri-sendiri, berpasangan atau membentuk rantai pendek, tidak
bergerak, berspora oval yang letaknya sental, kadang-kadang berkapsul.

Struktur Antigen
Bahan simpai Bacillus anthracis, yang terdiri atas polipeptida berbobot molekul tinggi
yangmengandung asam D-glutamat, adalah suatu hapten. Badan bakteri mengandung proteindan
suatu polisakarida somatic, keduanya bersifat antigenik.
Patogenesis

Antraks terutama merupakan penyakit pada biri-biri, sapi, kuda, dan hewan lainnya; manusia
jarang terserang. Infeksi biasanya didapat dengan masuknya spora melalui lukapada kulit atau
selaput lendir, jarang dengan inhalasi spora ke dalam paru-paru. Eksudat antraks mengandung
polipeptida yang identik dengan polipeptida pada simpai Bacillus, dan dapat menimbulkan reaksi
histologik yang sama seperti reaksi akibat infeksi antraks. Protein lain yang diisolasi dari eksudat
merangsang kekebalan yang kuat terhadap antraks bila disuntikkan pada hewan.
Patologi
Pada hewan yang peka, organisme berkembang biak di tempat masuk. Simpai tetap utuh, dan
organisme dikelilingi oleh sejumlah besar cairan seperti protein yang mengandung sedikit
leukosit, organisme kemudian dengan cepat menyebar dan mencapai aliran darah. Pada hewan
yang resisten, organisme berkembang biak selama beberapa jam, setelah itu terkumpul sejumlah
besar leukosit. Sampai lambat laun mengalami disintegrasi dan menghilang. Organisme tetap
terlokalisasi.
Gambaran Klinik
Pada manusia, antraks menimbulkan infeksi kulit (pustula ganas). Mula-mula timbul popula
dalam 12-36 jam setelah masuknya organisme atau spora melalui goresan. Papula ini dengan
cepat berubah menjadi visikel, kemudian pustula, dan akhirnya menjadi ulkus nekrotik; lalu
infeksi dapat menyebar, menimbulkan septikemia.
Pada antraks pernapasan, gejala dini dapat berupa mediastinitis, sepsis, meningitis atau edema
paru-paru hemoragik. Pneumonia hemoragik dengan syok merupakan gejala yang terakhir.
Hewan sering terkena antraks dengan memakan sporanya dan organisme menyebar lewat saluran
usus, tetapi pada manusia hal ini jarang terjadi. Karena itu, sakit perut, muntah dan diare
berdarah jarang merupakan tanda-tanda klinik.
Tes Diagnostik Laboratorium
a)
Bahan: Cairan atau nanah dari lesi lokal, darah, dahak.
b)
Pewarnaan Sediaan: Dari lesi lokal atau darah hewan yang mati; rantai bakteri terbentuk batang
besar Gram-positif sering terlihat. Antraks dapat diidentifikasi pada sediaan kering dengan teknik
pewarnaan imunofluoresensi.
c)
Biakan: Bila dibiakkan pada lempeng agar darah, organisme ini membentuk koloni kelabu non
hemolitik dengan morfologi mikroskopis yang khas. Peragian karbohidrat tidak bermanfaat. Pada
perbenihan setengah padat, basil antraks selalu tidak bergerak, sedangkan organisme tidak
patogen yang sejenis (misalnya : Basillus cereus) menunjukkan pergerakkan dengan
menyebar. Biakan antraks virulen mematikan mencit atau marmot bila disutikkan secara intra
peritoneal.
d)
Tes serologi: Antibodi penyebab presipitasi atau hemaglutinasi dapat diperlihatkan dalam serum
orang atau hewan yang telah divaksinasi atau terinfeksi.
Resistensi dan Kekebalan
Beberapa hewan (marmut) sangat peka, sedangkan yang lain (tikus) sangat resisten terhadap
infeksi antraks. Kenyataan ini diperkirakan akibat sejumlah mekanisme pertahanan: aktivitas
leukosit, suhu badan, dan daya bakterisidal darah. Polipeptida tertentu yang mematikan hasil
antraks telah diisolasi dari jaringan hewan. Polilisin sintetik mempunyai daya kerja yang mirip.
Imunisasi antraks didasarkan pada percobaan klasik Louis Pasteur, yang pada tahun 1881

membuktikkan bahwa biakan yang telah tumbuh dalam kaldu pada 42-52Cselama beberapa bulan akan
kehilangan sebagian besar virulensinya dan dapat disuntikkan hidup-hidup pada biri-biri dan sapi
tanpa menyebabkan penyakit : selanjutnya hewan-hewan ini terbukti kebal. Terdapat
banyak variasi mengenai kemanjuran berbagai vaksin.
Pengobatan
Banyak antibiotika efektif terhadap antraks pada manusia, tetapi pengobatan harus dimulai sedini
mungkin. Penisilin cukup memuaskan, kecuali pada pengobatan antraks pernapasan, dimana
mortilitas tetap tinggi. Beberapa basil Gram-positif lainnya mungkin resisten terhadap penisilin
karena membentuk -laktamase. Tetrasiklin, eritromisin, atau clyndamicin mungkin efektif.
Epidemiologi, Pencegahan dan Pengendalian
Tanah tercemar oleh spora antraks dari bangkai hewan. Spora-spora ini dapat tetap hidup selama
puluhan tahun. Mungkin spora dapat tumbuh dalam tanah pada pH 6,5 pada suhu yang cocok. Hewan
merumput yang terinfeksi melalui luka pada selaput lendir menjadi penyambung rantai infeksi
terus-menerus. Kontak dengan hewan yang terinfeksi atau dengan kulit, rambut dan bulunya
merupakan sumber infeksi pada manusia.

B.

Tindakan pencegahan dan pengendalian meliputi:

Pembuangan bangkai hewan dengan membakar atau mengubur pada sumur yang dalam disertai
kapur,
Dekontaminasi produk-produk hewan (biasanya dengan autoklaf),
Baju dan sarung tangan pelindung waktu mengenai bahan-bahan yang mungkin tercemar,
Imunisasi aktif hewan peliharaan dengan vaksin hidup yang dilemahkan. Orang yang mempunyai resiko
besar karena pekerjaanya harus diimunisasi dengan vaksin bebas-sel yang dapat diperoleh dari
Centers for Disease Control, Atlanta, GA 30333.

Bacillus cereus

Koloni Bacillus cereus pada media NA

Mikroskopik Bacillus cereus

Dapat menyebabkan keracuann makanan dan juga menyebabkan pneumonia,

bronkopneumonia dan luka. Bacilluscereusmerupakan salah satu anggota genus Bacillus yang pertama
kali diisolasi pada tahun 1969 dari darah dan cairan pleura pasien pneumonia.
Morfologi
Bacillus cereus memiliki beberapa karakter morfologi diantaranya: Gram positif dengan lebar sel
0,9 1,2 m dan panjang 3 5 m. Motilitas positif, spora elipsoidal, sentral atau parasentral,
spora jarang keluar dari sporangia. Tidak membentuk kapsul, biasanya muncul dalam bentuk
rantai panjang tipe R. Bentuk koloni irregular, opague terkadang waxy. Padamedium cair
membentuk turbiditas moderate.
Enterotoksin
Bacilluscereus memiliki karakter yang mirip dengan Bacillusthuringiensis dan Bacillusanthracis,
namun tetap dapat dibedakan berdasarkan determinasi motilitas (kebanyakan Bacilluscereus
bersifat motil) dan adanya kristal toxin (hanya dihasilkan olehBasillus thuringiensis), aktivitas
hemolisis (B.cereus memiliki sifat ini, sedangkan B.anthracis bersifat non-hemolitik). Dalam
pertumbuhan Bacillus cereusmenghasilkan toksin selama pertumbuhanatau selama sporulasi.
Beberapa strain dari Bacilluscereus bersifat patogen dan berbahaya bagi manusia karena dapat
menyebabkanfoodborne illness, namun beberapa diantaranya yang bersifat saprofitik dapat
bermanfaat sebagai probiotik dan juga penghasil antibiotik yang potensial. Bacilluscereus
kebanyakan ditemukan terkandung dalam bahan pangan dan menyebabkan 2 tipe keracunan makanan
yaitu emetic dan diarhoeal.
Antibiotika
Bacilluscereus dapat memproduksi peptida antibiotik diantaranya:Cerexin,Zwitermicin.
Gejala Penyakit
Gejala-gejala keracunan makanan tipe diare karena Basillus cereus mirip dengan gejala keracunan
makanan yang disebabkan oleh Clostridium perfringens. Diare berair, kram perut, dan rasa sakit
mulai terjadi 6-15 jam setelah konsumsi makanan yang terkontaminasi. Rasa mual mungkin
disertai diare, tetapi jarang terjadi muntah (emesis). Pada sebagian besar kasus, gejala-gejala ini
tetap berlangsung selama 24 jam.
Tes Diagnostik Laboratorium
Bacilluscereus non pathogen menunjukkan pergerakan dengan penyebaran(swarming) pada
media kultur setengah padat. Sel vegetatif dari Bacillus cereus dapat tumbuh pada rentang
temperatur 5 50C dengan temperatur optimal antara 35 - 40C, resisten terhadap pH 4,5 9,3.
Dapat tumbuh pada aerobic agar dan nutrien broth dan penambahan NaCl 7%, nutritive agar serta
nutritive agar dengan 7 10 % darah domba. Waktu generasi relatif singkat, antara 20 30 menit.
Patogenesis
Bacillus cereus bertanggung jawab untuk sebagian kecil penyakit bawaan makanan(2-5%),
menyebabkan mual, muntah parah dan diare.
Pencegahan

Pencegahan secara total mungkin tidak dapat dilakukan. Namun demikian, makanan yang
dimasak, dipanaskan, dan disimpan dengan benar umumnya aman dari racun yang menyebabkan muntah.
Resiko paling besar yaitu kontaminasi silang.
Epidemiologi
Bakteri Bacilluscereus merupakan bakteri gram positif, bersifat aerobik, dan mampu membentuk
spora yang dapat ditemukan di tanah, pada sayuran maupun produk pangan. Spora dari jenis bakteri ini
tahan terhadap panas dan kondisi lingkungan yang tidak menguntungkan dan mampu membentuk
kecambah dalam larutan yang mengandung NaOH dan HCL.
C.

Bacillus subtilis

Mikroskopis Bacillus subtilis

Dapat menyebabkan meningitis, endokarditis, infeksi mata dan lain-lainnya. Bacilus Subtilis
ini awalnya bernama Vibro subtilis oleh Christian GottfriedEhrenbergpada tahun 1835.
Kemudian nama Bacillussubtilis dikenalkan oleh FerdinandCohn pada 1872.Bacillus subtilis telah
digunakan sepanjang 1950 sebagai alternatif dari obat karena efek immunostimulatory sel dari
masalah, yang pada pencernaan telah ditemukan secara signifikan untuk kekebalan aktivasi
antibodi spesifik IgM, IgG ,dan IgA.
Morfologi
Bakteri ini termasuk bakteri gram positif, katalase positif yang umum ditemukan di
tanah. Bacillus subtilismempunyai kemampuan untuk membentuk endospora yang protektif yang
memberi kemampuan bakteri tersebut mentolerir keadaan yang ekstrim. Tidak seperti species
lain seperti sejarah, Bacillussubtilis diklasifikasikan sebagai obligat anaerob walau penelitian
sekarang tidak benar. Bacillussubtilis tidak dianggap sebagai patogen walaupun kontaminasi
makanan tetap jarang menyebabkan keracunan makanan. Sporanya dapat tahan terhadap panas
tinggi yang sering digunakan pada makanan dan bertanggung jawab terhadap kerusakan pada
roti.
Bacillussubtilis selnya berbentuk basil, ada yang tebal dan yang tipis. Biasanyabentuk rantai atau
terpisah. Sebagian motil dan adapula yang non motil. Semuamembentuk endospora yang berbentuk
bulat dan oval.Bacillussubtilis merupakan jeniskelompok bakteri termofilik yang dapat tumbuh pada
kisaran suhu 45 C 55 C danmempunyai pertumbuhan suhu optimum pada suhu 60 C 80 C.
Toksik
Bacillussubtilis tidak dianggap oleh manusia sebagai bakteri yang patogen, karena dapat
mencemari makanantetapi jarang menyebabkan keracunan makanan.Bacillussubtilis produces

the proteolyticenzymesubtilisin. Bacillussubtilis menghasilkan enzim proteolytic yang

subtilisin. Bacillussubtilis spores dapat hidup yang ekstrim pemanasan yang sering digunakan untuk
memasak makanan, dan bertanggung jawab untuk menyebabkan kekentalan yanglengket,
membenang konsistensi yang disebabkan oleh bakteri produksi panjang
rantaipolysaccharidesdan manja dalam adonan roti.
Bacillussubtilis dapat membagi asymmetrically, memproduksi sebuah endosporeyang
tahan terhadap faktor lingkungan seperti panas, asam, dan garam, yang dapat beradadi dalam
lingkungan dalam jangka waktu yang lama. Endospore adalah yang dibentuk pada saat gizi stres,
memungkinkan organisme untuk terus berada di dalam lingkungansampai kondisi menjadi
baik.Sebelum proses untuk menghasilkan spora bakteri melaluiproses produksi flagella dan
mengambil DNA dari lingkungan.
Bacillussubtilis terbukti untuk manipulasi genetik,karena itu telah menjadi banyak diadopsi
sebagai model organisme untuk penelitian laboratorium,terutama darisporulation,yang merupakan
contoh sederhana daridiferensiasi selular.Hal ini juga sangatflagellated,yang memberikan Bacillus
subtilis kemampuan untuk bergerak sangat cepat.

BAB III
KESIMPULAN
Secara umum, kelompok Bacillus merupakan bakteri berbentuk basil (batang), dan
tergolong dalam bakteri gram positif yang umumnya tumbuh pada medium yang mengandung
oksigen (bersifat aerobic), sehingga dikenal pula dengan istilah aerobic
sporeformers.Kebanyakan anggota genus Bacillus dapat membentuk endospora yang dibentuk
secara intraseluler sebagai respon terhadap kondisi lingkungan yang kurang menguntungkan,
oleh karena itu anggota genus Bacillus memiliki toleransi yang tinggi terhadap kondisi
lingkungan yang berubah-ubah.
Berdasarkan definisi umum, bakteri patogen merupakan jenis bakteri merugikan yang
dapat menimbulkan berbagai macam penyakit, bagi manusia, hewan maupun tumbuhan.Salah
satu contoh spesies dari genus Bacillus, seperti Bacillus anthracis, Bacillus cereus, dan Bacillus
subtilis.

Bacillus sp.
Posted on Desember 13, 2012 by savitrirachmawati

Kingdom :Procaryotae
Divisi

: Bacteria

Kelas

: Schizomycetes

Bangsa

: Eubacteriales

Suku

: Bacillaceae

Marga

: Bacillus

Jenis

: Bacillus sp.

Morfologi
Bacillus sp. merupakan bakteri berbentuk batang (basil), dan tergolong dalam bakteri gram
positif yang umumnya tumbuh pada medium yang mengandung oksigen (bersifat aerobik)
sehingga dikenal pula dengan istilah aerobic sporefomers.Kebanyakan anggota genus Bacillus
sp. dapat membentuk endospora yang dibentuk secara intraseluler sebagai respon terhadap
kondisi lingkungan yang kurangmenguntungkan, oleh karena itu anggota genus Bacillus sp.
memiliki toleransi yang tinggi terhadap kondisi lingkungan yang berubah-ubah. Beberapa
anggota Bacillus sp. memiliki S-layer yang merupakan lapisan crystalline dipermukaan subunit
protein atau glikoprotein. Bagian kapsul kebanyakan anggota Bacillus sp.mengandung D atau Lglutamic acid, sedangkan beberapa lainnya memiliki kapsul yang mengandung karbohidrat.
Variasi struktur dinding sel seperti padakebanyakan bakteri gram negatif tidak ditemukan pada
genus Bacillus sp. Dinding sel vegetatif kebanyakan anggota Bacillus sp. terbuat dari
peptidoglikan yang mengandung Meso-Diaminopimelic Acid(DAP) dengan tipe Glyserol
Teichoic Acid sangat bervariasi diantara spesies. Kebanyakan anggota genus Bacillus sp.
merupakan bakteri yang bersifatmotil dan memiliki flagela tipe peritrik.Bacillus sp. digolongkan
ke dalam kelas bakteri heterotrofik, yaitu protista bersifat uniseluler, termasuk dalam golongan
mikroorganisme redusen atau yang lazim disebut sebagai dekomposer.Sebagian besar bakteri laut
termasuk dalam kelompok bakteri bersifat heterotrofik dan saprofitik (Rheinheimer, 1980).
Jenis Bacillus sp. menunjukkan bentuk koloni yang berbeda-beda pada medium agar.Warna
koloni pada umumnya putih sampai kekuningan atau putih suram, tepi koloni bermacam-macam
namun pada umumnya tidak rata, permukaannya kasar dan tidak berlendir, bahkan ada yang
cenderung kering berbubuk, koloni besar dan tidak mengkilat.Bentuk koloni dan ukurannya
sangat bervariasi tergantung dari jenisnya. Selain itu setiap jenis juga menunjukkan kemampuan
dan ketahanan yang berbeda-beda dalam menghadapi kondisi lingkungannya, misalnya
ketahanan terhadap panas, asam, kadar garam, dan sebagainya(Rheinheimer, 1980).

Bakteri Bacillus sp. biasanya banyak ditemukan di tanah.Cara untuk mendapatkan bakteri
Bacillus sp. yaitu dengan mengambil sampel tanah menggunakan sendok yang telah
disterilisasikan terlebih dahulu kemudian ambil tanah sekitar kedalaman 3 cm dari permukaan
tanah.Bacillus sp. merupakan bakteri gram positif dengan sel batang berukuran 0,3-221,27-7
m, sebagian bersifat motil (mampu bergerak), mobilitasnya ini disebabkan oleh flagel yang jika
dipanaskan akan membentuk endospora, yaitu bentuk dorman sel vegetatif sebagai bentuk
pertahanan diri yang muncul saat kondisi ekstrim yang tidak menguntungkan bagi bakteri.
Kandungan air endospora sangat rendah bila dibandingkan dengan sel vegetatifnya, maka
endospora berbentuk sangat padat dan sangat refraktil bila dilihat di bawah
mikroskop.Endospora dibentuk dalam sporangium di dalam sel dan dibentuk saat sel
masak.Endospora memiliki dinding tebal, reaktif, dan sangat resisten. Letak endospora dalam sel
ukuran selama pembentukannya tidak sama antara spesies satu dengan lainnya. Beberapa spesies
memiliki spora sentral, terminal, atau letal.Endospora dapat berbentuk oval, silindris, bulat, atau
lainnya.Bacillus sp. bersifat aerob sampai anaerob fakultatif, metabolisme dengan fermentasi dan
respirasi.Isolat-isolat murni tersebut dipelihara dalam medium agar miring.
Untuk memastikan bahwa koloni-koloni tersebut adalah Bacillus, maka dilakukan serangkaian
pengujian yang bersifat spesifik yaitu pengecatan gram, pengecetan negatif dan
motilitasnya.Bacillus dibedakan dari anggota familia Bacillaceae lainnya berdasarkan sifatsifatnya yaitu: keseluruhannya merupakan pembentuk spora, hidup pada kondisi aerob baik
sebagai jasad yang sepenuhnya aerob maupun aerob fakultatif, selnya berbentuk batang, dan
memproduksi katalase (Priyani, 2006).
Distribusi Geografik
Bacillus sp. merupakan bakteri gram-positif yang berbentuk batang,dan secara alami sering
ditemukan di tanah dan vegetasi. Bacillus sp.tumbuh di berbagai mesofilik suhu berkisar 25-35
derajat Celsius.Bacillus sp. juga telah berevolusi sehingga dapat hidup walaupun di bawah
kondisi keras dan lebih cepat mendapatkan perlindungan terhadap stres situasi seperti kondisi pH
rendah (asam), bersifat alkali, osmosa, atau kondisi oksidatif, dan panas atau etanol Bakteri ini
hanya memiliki satu molekul DNA yang berisi seperangkat set kromosom. Beberapa keunggulan
dari bakteri ini adalah mampu mensekresikan antibiotik dalam jumlah besar ke luar dari sel
(Scetzer, 2006).
Pengecatan
Pewarnaan Gram atau metode Gram adalah salah satu teknik pewarnaan yang paling penting dan
luas yang digunakan untuk mengidentifikasi kuman Bacillus sp. Pengecatan gram digunakan
untuk mengidentifikasi kuman Bacillus sp. Bakteri Gram positif akan mempertahankan zat
pewarna kristal violet dan karenanya akan tampak berwarna ungu tua di bawah mikroskop.
Adapun bakteri gram negatif akan kehilangan zat pewarna kristal violet setelah dicuci dengan

alkohol, dan sewaktu diberi zat pewarna tandingannya yaitu dengan zat pewarna air fuchsin atau
safranin akan tampak berwarna merah. Perbedaan warna ini disebabkan oleh perbedaan dalam
struktur kimiawi dinding selnya.Bakteri gram positif dinding selnya tersusun oleh peptidoglikan
dalam jumlah besar (Harley dan Presscot, 2002).
Pewarnaan Gram adalah teknik pewarnaan differensial yang paling banyak digunakan dalam
bakteriologi.Pewarnaan ini memisahkan bakteri menjadi dua kelompok, yaitu gram positif dan
gram negatif. Larutan yang digunakan dalam pewarnaan ini ada 4, yaitu Gram A, Gram B, Gram
C dan Gram D. Langkah pertama pewarnaan ini adalah menggunakan larutan Gram A, berupa
cat kristal violet (Huckers violet) yang member warna ungu pada sel bakteri. Setelah itu,
preparat ditetesi dengan larutan Gram B berupa iodine (Lugul Iodine) yang berfungsi sebagai
penguat warna cat sebelumnya. Iodin akan meningkatkan interaksi antara dinding sel bakteri dan
pewarna gram A. Selanjutnya preparat akan ditetesi dengan larutan Gram C berupa zat peluntur
seperti aseton atau alkohol. Karena perbedaan struktur dinding sel, yaitu ketebalan
peptidoglikannya, bakteri gram positif yang memiliki dinding peptidoglikan tebal tidak akan
luntur warnanya, sementara bakteri gram positif yang dinding peptidoglikannya tipis, akan luntur
warnanya. Selanjutnya, preparat akan diberi larutan Gram D berupa pewarna pembanding yang
kontras dengan pewarna utama. Safranin adalah pewarna pembanding yang paling umum
digunakan. Safranin akan mewarnai bakteri gram negatif yang tak berwarna, tapi tidak akan
mengubah warna bakteri gram positif. Hasil akhirnya adalah bakteri gram positif akan berwarna
ungu gelap, sementara bakteri gram negatif akan berwarna dadu atau merah (Harley dan
Presscot, 2002).
Agen Penyakit
Bacillus sp. merupakan agen penyakit dari beberapa penyakit seperti infeksi kulit, paru, usus,
dan selaput otak. Selain itu, beberapa tipe Bacillus sp. dipastikan sebagai penyebab suatu kasus
keracunan makanan, apabila hasil isolasi Bacillus sp. menunjukkan bahwa strain-strain dari
serotip yang samaditemukan pada makanan yang dicurigai dan dari kotoran atau muntahan
pasien, atau hasil isolasi bakteri dari makanan yang dicurigai, kotoran, atau muntahan
pasienmenunjukkan adanya sejumlah besar Bacillus cereus dari serotip yang dikenal
sebagaipenyebab keracunan makanan. Keracunan pangan yang diakibatkan oleh Bacillus sp.
ditunjukkan dari gejala diare, kejang (kram) perut, dan muntah (Akoso, 2009).

Bakteri adalah kelompok organisme yang tidak memiliki membran inti sel. Organisme ini
termasuk ke dalam domain prokariot dan berukuran sangat kecil (mikroskopik), serta memiliki
peran besar dalam kehidupan di bumi. Bakteri merupakan organisme yang paling banyak

jumlahnya dan lebih tersebar luas dibandingkan mahluk hidup lain. Bakteri memiliki ratusan ribu
spesies yang hidup didarat hingga lautan dan pada tempat-tempat yang ekstrim
(Anonim,2011).
Teknik biakan murni digunakan untuk memisahkan berbagai macam bakteri. Peranan
bakteri baik yang menguntungkan ataupun yang merugikan dalam kehidupan melalui proses
isolasi dan identifikasi. Prinsip isolasi bakteri adalah memisahkan suatu mikroba dari mikroba
lainnya sehingga diperoleh kultur murni. Identifikasi dilakukan setelah kultur murni yang berasal
dari satu progeni didapatkan untuk diketahui potensinya, namun sebelum dilakukan identifikasi
bakteri harus sudah diklasifikasikan. Klasifikasi merupakan proses untuk mengenali dan
mengelompokkan organisme hidup. Tujuan dari klasifikasi adalah untuk mengatur kedudukan
dari berbagai organisme di alam.Langkah identifikasi adalah inokulasi, inkubasi, isolasi,
eksaminasi dan identifikasi.Identifikasi bakteri didasarkan pada berbagai macam sifat bakteri
seperti sifat biokimia, morfologi koloni dan morfologi selnya.
Bakteri Bacillus sp. biasanya banyak ditemukan di tanah.Cara untuk mendapatkan bakteri
Bacillus sp. yaitu dengan mengambil sampel tanah menggunakan sendok yang telah
disterilisasikan terlebih dahulu kemudian ambil tanah sekitar kedalaman 3 cm dari permukaan
tanah. Bacillus sp. merupakan bakteri gram positif dengan sel batang berukuran 0,3-22x1,27-7
m, sebagian bersifat motil (mampu bergerak) mobilitasnya ini disebabkan oleh flagel, jika
dipanaskan akan membentuk endospora, yaitu bentuk dorman sel vegetatif sebagai bentuk
pertahanan diri yang muncul saat kondisi ekstrim yang tidak menguntungkan bagi bakteri.
Kandungan air endospora sangat rendah bila dibandingkan dengan sel vegetatifnya, maka
endospora berbentuk sangat padat dan sangat refraktil bila dilihat di bawah
mikroskop.Endospora dibentuk dalam sporangium di dalam sel dan dibentuk saat sel
masak.Endospora memiliki dinding tebal, reaktif, dan sangat resisten. Letak endospora dalam sel
ukuran selama pembentukannya tidak sama antara spesies satu dengan lainnya. Beberapa spesies
memiliki spora sentral, terminal, atau letal.Endospora dapat berbentuk oval, silindris, bulat, atau
lainnya.

Gambar. Bacillus sp

Bacillus sp. bersifat aerob sampai anaerob fakultatif, metabolisme dengan fermentasi dan
respirasi.Isolat-isolat murni tersebut dipelihara dalam medium agar miring.Untuk memastikan
bahwa koloni-koloni tersebut adalah Bacillus, maka dilakukan serangkaian pengujian yang
bersifat spesifik yaitu pengecetan gram, pengecetan negatif dan motilitasnya. Bacillus dibedakan
dari anggota familia Bacillaceae lainnya berdasarkan sifat-sifatnya yaitu: keseluruhannya
merupakan pembentuk spora, hidup pada kondisi aerob baik sebagai jasad yang sepenuhnya
aerob maupun aerob fakultatif, selnya berbentuk batang, dan memproduksi katalase.
B. Tujuan
Tujuan dari praktikum ini adalah mengisolasi bakteri Bacillus sp. dan mengidentifikasi
bakteri Bacillus sp. hasil isolasi dengan pendekatan mikrobiologis.
II. MATERI DAN METODE
A. Materi
Alat yang digunakan adalah jarum ose, object glass, mikroskop, mikrometer, kertas
merang, tissue, tabung reaksi, pipet tetes, beaker glass, cawan petri, oven, pembakar spirtus,
inkubator, wrapper.
Bahan yang digunakan adalah akuades, alcohol 70%, medium Nutrient Agar (NA), Nitrat
Broth (NB), Malachite Green, Starch Agar (SA), SIMA semisolid, Skim Milk Agar (SMA),
Simon Citrat, MR-VP Broth, KOH-alffanaftol, reagen A dan B, NaCl (0%, 6,5%, 10%), Kristal
Violet. Lugols iodine, safranin, etanol 96%, reagen H2O2, reagen lactose, rafinosa, reagen
oksidase.
B. Metode
a. Pengambilan Sampel
Pengambilan dilakukan secara aseptis
Alumunium foil yang sebelumnya disterilkan terlebih dahulu dengan alkohol 70%
Sampel diambil dengan cepat dan dengan hati-hati dimasukkan ke dalam alumunium foil steril
kemudian ditutup rapat
b. Tahapan Isolasi Bacillus

 Preparasi suspense dilakukan, sebelumnya sampel tanah dimasukkan kedalam tabung

pengenceran pertama kemudian direbus 10 menit dengan suhu 80oC diatas dandang.
Diinokulasikan sebanyak 1 ose pada medium NA, selanjutnya diinkubasi pada suhu 30oC selama
2x24 jam.
c. Tahap Pemurnian Dengan Metode Streak Kuadran
Dipilih satu koloni yang Nampak terdiri dari satu tipe sel
Jarum ose dibakar, setelah dingin disentuhkan ke permukaan koloni bakteri yang akan distreak
pada plating NA
Streak ini dianggap sebagai streak primer pada permukaan NA
Jarum ose dibakar, angkat lalu didinginkan dan distreakan melewati streak primer kesatu atau
kedua dan kemudian dilanjutkan kestreak sekunder tanpa kembali streak primer
Jarum ose dibakar, angkat lalu dinginkan dan disteakan melewati streak sekunder dan kemudian
dilanjutkan kestreak tersier tanpa kembali kestreak primer dan sekunder
Diinkubasi pada suhu 30OC selama 2x24 jam
d. Pengamatan Morfologi Koloni
Dibuat biakan pada media Nutrient Agar (NA) cawan
Inkubasi 2x24 jam pada suhu 30oC
Perbedaan bentuk koloni, bentuk tepi, elevasi dan lainnya diamati
e. Pengukuran Panjang dan Lebar Sel
Disiapkan mikroskop yang telah dipasang micrometer okuler yang terkalibrasi
Dibuat preparasi ulas bakteri uji dengan metode pewarnaan sederhana dengan menggunakan
pewarnaan metilen blue
Diukur panjang dan lebar sel kemudian dihitung panjang dan lebar sel sebenarnya (m).
f. Uji Pewarnaan Gram
Dibuat ulasan bakteri pada object glass, difiksasi
Ditetesi dengan gram A (kristal violet), dibiarkan selama 60 detik
Dicuci dengan air mengalir, keringanginkan
Ditetesi dengan gram B (lugols iodin), dibiarkan selama 60 detik
Dicuci dengan gram C (ethanol 96%) setetes demi setetes sampai etanol yang jauh berwarna
bening dan jangan sampai terlalu banyak.
Ditetesi dengan D (safranin), dibiarkan selama 45 detik, dicuci dan dikeringanginkan

 Diamati dibawah mikroskop

g. Uji Pewarnaan Endospora
Dibuat ulasan bakteri pada object glass lalu ditutupi dengan kertas merang
Ditetesi dengan Malachite Green diatas kertas merang dan diletakkan di atas air mendidih.
Dibiarkan selama 5 menit, jika pinggir mulai mengering tambahkan lagi Malachite Green
Setelah dingin , object glass dibilas dengan aquades mengalir
Ditetesi dengan safranin sebagai counter stain
Didiamkan selama 45 detik
Dicuci dan dikeringanginkan
Diamati di bawah mikroskop
h. Uji Motilitas
Diinokulasikan bakteri uji pada medium SIMA semisolid sebanyak 1 ose
Diinkubasi selama 2x24 jam pada temperatur 30oC
Diamati perubahan yang terjadi, jika terbentuk zona jernih di sekitas koloni menandakan hasil uji
positif, dan jika warna media tetap menandakan hasil uji negatif.
i. Uji Hidrolisis Starch
Diinokulasikan bakteri uji pada medium padat Starch Agar sebanyak 1 ose
Diinkubasi selama 2x24 jam pada temperature 30oC
Kemudian permukaan media digenangi dengan larutan Lugols iodine
Diamati perubahan yang terjadi, jika terbentuk zona jernih di sekitas koloni menandakan hasil uji
positif, dan jika tidak terbentuk zona jernih (warna biru reagen) menandakan hasil uji negatif.
k. Uji Hidrolisis Kasein
Diinokulasikan bakteri uji pada medium padat Skim Milk Agar (SMA) sebanyak 1 ose.
Diinkubasi selama 2x24 jam pada temperature 30oC
Diamati perubahan yang terjadi, jika terbentuk zona jernih di sekitas koloni menandakan hasil uji
positif, dan jika warna media tetap menandakan hasil uji negatif.
l. Uji VP (Voges Proskaner)
Diinokulasikan bakteri uji pada medium cair MR-VP sebanyak satu ose
Diinokulasikan bakteri uji pada medium cair MR-VP sebanyak 1 ose
Diinkubasi selama 2x24 jam pada temperatur 30oC
Bakteri ditetesi dengan alfanaftol 3 tetes dan KOH 40 % 2 tetes

 Diamati perubahan yang terjadi, jika terbentuk zona jernih di sekitar koloni menandakan hasil uji
positif, dan jika warna media tetap menandakan hasil uji negatif.
m. Uji Katalase
Dibuat preparat ulas bakteri pada object glass
Ditetesi dengan larutan H2O2
Diamati perubahan yang terjadi
Jika terbentuk gelembung gas menunjukan bahwa hasil uji positif dan sebaliknya
n. Uji Oksidase
Dibuat preparat ulas bakteri pada object glass, tutup dengan potongan tissue
Ditetesi dengan reagen oksidase
Diamati perubahan yang terjadi
Hasil positif jika berwarna biru marun, hasil negatif tidak terbentuk warna biru marun.
o. Uji Penggunaan Sitrat
Diinokulasikan bakteri uji pada medium agar miring Simon Citrate sebanyak 1 ose
Diinkubasi selama 2x24 jam pada temperature 30oC
Diamati perubahan yang terjadi, jika hasil positif media berwarna biru sedangkan hasil negatif
tetap berwarna hujau.
p. Uji Lactosa dan Raffinosa
Bakteri uji ditumbuhkan pada medium Lactosa dan Raffinosa
Diinkubasi selama 2x24 jam pada temperature 30oC
Diamati perubahannya, hasil positif jika media berubah warna dari ungu menjadi kuning dan
hasil negatif jika media tetap berwarna ungu.
q. Uji Toleransi NaCl
Dibuat tiga buah tabung Nutrient broth yang mengandung NaCl 0%, 6,5%, dan 10%
Isolat diinokulasikan dengan streak kontinyu
Diinokulasikan selama 2x24 jam pada temperature 30oC
Diamati hasilnya dengan melihat tingkat kekeruhan dengan media
r. Penentuan Spesies Melalui Pendekatan Homologi
Data-data yang diperoleh dibandingkan dengan data karakter bakteri dari sumber
Ditentukan persen homologinya dengan rumus:

% Homologi=

III.

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil
Tabel 1. Pengamatan Morfologi sel
No
1.
2.
3.
4.
5,

Pengamatan
Bentuk koloni
Ukuran
Elevasi
Margin
Permukaan

Hasil
Circular
Moderate
Convex
Entire
Halus mengkilap

Tabel 3. Perbandingan Isolat dan Spesies-spesies Bacillus

No

Jenis Uji

Isolat

1.

Gram

2.

Endospora

3.

Katalase

4.

Starch

5.

Casein

6.

Rafinossa

7.

NaCl 10%

8.

Sitrat

9.

Motilitas

10. VP

11. Oksidase

Tabel 4. Pengukuran Homologi

No
1.

Jenis Uji
Gram

IA

IB

IC

ID

IE

2.

Endospora

3.

Starch

4.

Casein

5.

Rafinossa

6.

NaCl 10%

7.

Sitrat

8.

Motilitas

9.

VP

10. Oksidase
Jumlah karakter
yang sama
Keterangan :
d
A
B
C
D
E

=
=
=
=
=
=

16-84% strain positif

Bacillus anthracis
Bacillus cereus
Bacillus thuringiensis
Bacillus megaterium
Bacillus subtilis

Berdasarkan hasil perhitungan persen homologi, jumlah terbesar adalah 80% yaitu antara isolat
dengan spesies A (Bacillus anthracis).

B. Pembahasan

Pengambilan sampel (tanah kandang) dilakukan dengan cara sterilisasi sendok yang
ingin dipakai terlebih dahulu dengan menggunakan autoklaf kemudian ambil sampel tanah
kedalaman 3cm dari permukaan, masukkan kedalam alumunium foil yang sebelumnya
disterilisasikan terlebih dahulu dengan menggunakan alkohol 70% kemudian ditutup rapat.
Pengambilan sampel dilakukan dengan mensterilisasikan alat terlebih dahulu agar dapat
dilindungi dari kontaminasi.Dilakukan dengan prosedur kerja aseptik dengan senyawa
desinfektan yang sesuai.Menyesuaikan wadah sampel yang diambil dan metode yang sesuai
dengan jenis sampel. Kemudian sampel yang mengandung bakteri tersebut dijaga agar tetap
menggambarkan kondisi yang ada sebelum memasuki tahap analisa (Anonim, 2011).
v Isolasi Bacillus sp. dilakukan dengan cara sampel tanah yang telah didapat dimasukkan
kedalam tabung yang berisi akuades steril kemudian direbus 10 menit dengan suhu 80oC diatas

dandang, tanah rebusan diinokulasikan kedalam cawan yang telah berisi medium NA kemudian
disreak sinambung, inkubasi selama 2x24 jam dengan suhu ruang. Proses perebusan dilakukan
agar bakteri yang diinginkan (Bacillus sp.) membentuk endospora. Terbentuknya endospora
bertujuan untuk melindungi bakteri dari lingkungan yang kurang menguntungkan (Sudjadi,
2006).
Misalnya, lingkungan yang terlalu kering, banyak mengandung bahan kimia, dan panas
yang terlalu tinggi.Endospora memiliki dinding yang tebal, oleh karena itu bakteri yang
menghasilkan endospora dapat bertahan hidup pada lingkungan yang ekstrim.Jika keadaan
lingkungan membaik, maka pembungkus spora segera pecah dan bakteri kembali memulai
aktivitas hidupnya sebagaimana biasanya.Contoh bakteri yang menghasilkan endospora adalah
Bacillus
dan
Clostridium
(Sudjadi,
2006).
v Pemurnian sampel dari hasil yang telah diisolasi dilakukan dengan cara pemilihan satu koloni
(koloni tunggal) yang nampak terdiri dari satu tipe sel, amati bakteri Bacillus sp. inokulasikan ke
media NA disteak kuadran kemudian diinkubasi selama 2x24 jam dengan suhu ruang 30oC.
Hasil pemurnian ambil koloni tunggal kemudian diamati bentuk, ukuran, elevasi, permukaan,
dan margin didapatkan hasil koloni berbentuk bulat atau circular, berukuran sedang atau
moderate, elevasi convex, permukaan halus mengkilap, dan margin entre. Bacillus berbentuk
bulat (coccus), memiliki permukaan yang halus dan mengkilap (Anonim, 2011).Koloni tunggal
yang terbentuk diperiksa menggunakan pewarnaan Gram untuk melihat karakteristik dinding sel
dan bentuk dari sel tersebut.Pengamatan dengan mikroskop dilakukan dengan menggunakan
mikroskop jenis mikroskop cahaya. Untuk pengamatan dinding sel bakteri, digunakan perbesaran
sebesar 1000x dan menggunakan minyak imersi (.)Selain diamati ciri-ciri morfologi koloninya
hasil pemurnian juga digunakan untuk pembuatan stok di media NA miring kemudian diinkubasi
selama 2x24 jam pada suhu ruang. Pembuatan stok dilakukan dua kali, digunakan untuk
melakukan
berbagai
macam
uji.
v Pengukuran panjang dan lebar sel dilakukan dengan menyiapkan mikroskop yang telah
dipasang micrometer okuler yang terkalibrasi, dibuat preparat ulas bakteri uji dengan metode
pewarnaan sederhana dengan menggunakan pewarnaan metilen blue kemudian diukur panjang
dan lebar sel kemudian dihitung panjang dan lebar sel sebenarnya (m). Pewarnaan sederhana
merupakan teknik pewarnaan yang paling banyak digunakan.Disebut sederhana karena hanya
menggunakan satu jenis zat warna untuk mewarnai organisme tersebut (Anonim, 2011).Zat-zat
warna yang digunakan untuk pewarnaan sederhana umumnya bersifat alkolin.Dengan pewarnaan
sederhana dapat mengetahui bentuk dan rangkaian sel-sel bakteri.Pewarna basa yang biasa
digunakan untuk pewarnaan sederhana ialah memilen biru, krisdal violet dan karbol fuehsin
(Sudjadi,
2006).
Hasil perhitungan kalibrasi dimana skala object dibagi dengan skala okuler dikali 10 m
didapatkan hasil 2,5 m, sehingga didapatkan panjang sel sebenarnya, skala panjang dikali hasil
kalibrasi yaitu 2,5 m kemudian lebar sel sebenarnya, skala lebar dikali hasil kalibrasi yaitu
didapatkan 2,5 m. Bacillus thuringiensis atau biasa disebut Bt berbentuk batang dengan ukuran
panjang 3-5 m dan lebar 1,0-1,2 m. Bacillus antracis yaitu bakteri berbentuk batang berukuran
panjang
1-8
m,
lebar
1-1,5
m
(Sudjadi,
2006).
v
Uji pewarnaan gram dilakukan dengan mengulas bakteri pada object glass kemudian
difiksasi selama 3-5 kali tujuan dari fiksasi adalah untuk mematikan sel bakteri tanpa merubah
bentuk dan strukturnya, membuka pori-pori dari sel bakteri sehingga mudah terwarnai, dan
merekatkan bakteri ke object glass (Udin, 2001). Kemudian ditetesi dengan gram A yaitu Kristal

violet didiamkan selama 60 detik, pemberian Kristal violet bertujuan untuk memberikan warna
dasar atau pewarna primer yaitu pewarnaan dinding sel bakteri (Anonim, 2011).
Kemudian dicuci keringanginkan, ditetesi lugols iodine dibiarkan selama 60 detik
bertujuan sebagai pewarna kedua atau pewarna pengganti.Setelah terwarnai dicuci
keringanginkan kemudian dicuci dengan gram C (ethanol 96%) setetes demi setetes sampai
ethanol yang jatuh berwarana bening, namun jangan sampai terlalu banyak.Berfungsi untuk
melarutkan pewarna (decolorizing agent) kemudian ditetesi dengan gram D (safranin) dibiarkan
45 detik lalu cuci keringanginkan, pemberian safranin digunakan sebagai pewarna pembanding
(James, 2008). Setelah itu amati dibawah mikroskop. Hasil yang didapat terlihat warna ungu
muda. Bakteri gram positif mempertahankan zat warna gentian violet dan bakteri gram negatif
mempertahankan warna merah (Udin, 2001)
Uji pewarnaan endospora dilakukan dengan mengulas bakteri pada object glass kemudian
ditutup dengan kertas merang lalu ditetesi dengan malachite green diatas kertas merang
kemudian diuapkan diatas dandang, pemberian malachite green bertujuan untuk melumuri fiksasi
panas.Jangan sampai mengering jika kering ditetesi lagi malachite green.Pemanasan bertujuan
untuk membantu warna menembus dinding endospora. Kemudian bilas dengan aquades lalu
ditetesi dengan safranin sebagai counterstain yang digunakan untuk melumuri bagian warna dari
sel yang lain daripada endospora (James, 2008). Didiamkan selama 45 detik, dicuci
keringanginkan kemudian diamati dibawah mikroskop didapatkan hasilkan endospora berwarna
hijau sedangkan sel vegetative berwarna merah.

Uji mortilitas bakteri yang diinokulasikan pada medium SIMA semisolid sebanyak 1 ose

kemudian diinkubasi selama 2x24 jam pada suhu ruang 30 oC, menunjukan tidak adanya
pertumbuhan koloni pada medium tegak SIMA yang telah ditusuk dengan jarum ose, hasilnya
hanya tumbuh diatas permukaan medium. Banyaknya koloni bakteri yang tumbuh pada suatu
substrat sangat dipengaruhi oleh tersedianya kondisi fisik, nutrisi, dan sifat hudupnya (Priyani,
2006). Pertumbuhan dipermukaan medium ini dikarenakan Bacillus merupakan bakteri yang
bersifat aerob.Namun tidak membuktikan mortilitas, hal ini disebabkan pada saat
menginokulasikan bakteri dengan menggunakan jarum ose, bakteri tersebut tidak masuk ke
dalam media hanya tertanam dipermukaan. Namun ada beberapa spesies Bacillus yang tidak
bersiat motil salah satunya adalah Bacillus anthracis merupakan bakteri berbentuk batang,
berukuran 1,6 m, tidak mempunyai alat gerak atau motil (Akoso, 2009).

Uji hidrolisis starch dengan menggunakan medium padat Starch Agar sebanyak 1 ose yang

diinkubasi selama 2x24 jam dalam suhu ruang kemudian permukaan media digenangi dengan
larutan Lugols iodine menghasilkan positif karena terbentuknya zona jernih pada media hal ini

disebabkan karena enzim amilase yang bersifat eksoenzim akan memecah amilum menjadi
monomer-monomernya. Starch atau pati dipecah menjadi unit-unit yang lebih kecil yaitu dengan
memotong ikatan-ikatan glikosidiknya.Salah satu yang dapat memotong ikatan glokosidik adalah
enzim amilase (Anonim, 2011).

Uji hidrolisis kasein menggunakan medium padat Skim Milk Agar (SMA) diinokulasikan

bakteri sebanyak 1 ose kedalam medium tersebut kemudian diinkubasi selama 2x24 jam suhu
ruang. Hasil menunjukan positif yaitu terdapatnya zona jernih pada media SMA. Kaseinase akan
memecah kasein menjadi parakaseinase yang dapat bereaksi dengan susu tersebut sehingga
menghasilkan kalsium parakaseinat.

Uji VP (Voges Proskaner) menggunakan medium cair MR-VP yang telah diinokulasikan

dengan 1 ose bakteri kemudian diinkubasi selama 2x24 jam pada temperature 30 oC, bakteri
ditetesi dengan alfanaftol sebanyak 3 tetes dan KOH 40% 2 tetes menunjukan hasi positif karena
warna media menjadi orange muda mendekati merah. Penambahan alfanaftol akan bereaksi
dengan aseton sedangkan pemberian KOH 40% untuk mengoksidasi proses tersebut sehingga
terjadi warna orange sampai merah.
Prinsip dari uji ini adalah menentukan kemampuan beberapa mikroorganisme untuk
menghasilkan produk akhir yang netral (asetil-mythyil karbinol) dari fermentasi glukosa. Uji ini
digunakan untuk mengidentifikasi mikroorganisme yang melaksanakan fermentasi 2,3butanadiol. Bila bakteri memfermentasikan karbohidrat menjadi 2,3-butanadiol sebagai produk
utama, akan terjadi penumpukan bahan tersebut dalam media pertumbuhan (Sudjadi, 2006).
Penambahan 40% KOH dan 5% larutan alfanaphtol dalam etanol dapat menentukan
adanya asetolin (asetilmethylkarbinol), suatu senyawa pemuka dalam sintetis 2,3-butanadiol.
Penambahan KOH adanya asetolin ditunjukan oleh perubahan warna kaldu menjadi merah
muda.Perubahan warna ini diperjelas dengan penambahan larutan alfanaphtol. Perubahan warna
kaldu biakan lebih jelas pada bagian yang berhubungan dengan udara, karena sebagian 2,3butanadiol dioksidasi kembali menjadi asetolin sehingga memperjelas hasil reaksi (Sudjadi,
2006).

Uji katalase dilakukan dengan membuat preparat ulas bakteri pada object glass, ditetesi

dengan larutan H2O2 kemudian diamati perubahan yang terjadi hasil menunjukan positif karena
terbentuknya

gelembung

gas.Selama

respirasi

aerobik

(proses

fosforilasi

oksidatif),

mikroorganisme menghasilkan hydrogen peroksida, bahkan ada yang menghasilkan superoksida

yang sangat beracun. Senyawa ini dalam jumlah yang besar akan menyebabkan kematian pada
mikroorganisme. Senyawa ini dihasilkan oleh mikroorganisme aerobik, fakultatif aerob maupun
mikroaerofilik yang menggunakan jalur repirasi aerobik.
Superoksida dismutase adalah enzim yang bertanggung jawab untuk menguraikan
khususnya superoksida pada organisme aerob yang bersifat katalase negatif.Produksi katalase
bisa diidentifikasikan dengan menambahkan reagen H 2O2 pada suspense bakteri.Jika dihasilkan
gelembung gas, berarti bakteri tersebut mampu memproduksi enzim katalase.Jika tidak
dihasilkan gelembung gas berarti uji katalase dinyatakan negatif (Anonim, 2011).

Uji oksidase dilakukan dengan membuat preparat ulas bakteri pada object glass, ditutup

dengan potongan tissue, ditetesi dengan reagen oksidase kemudian diamati perubahan yang
terjadi. Hasil yang didapat positif karena hasil ulasan yang telah ditetesi reagen oksidase
berwarna biru marun. Enzim oksidase memegang peranan penting dalam transport electron
selama respirasi aerobik. Sitokrom oksidase mengkatalisis oksidasi dan reduksi sitokrom oleh
molekul oksigen.Enzim oksidase dihasilkan oleh bakteri aerob, fakultatif anaerob, dan
mikroaerofilik. Sifat kemoorganotrop dan fakultatif anaerob pada Bacillus sp. Menyebabkan
bakteri ini mampu memanfaatkan sumber karbon tersedia (Priyani, 2006).
Mikroorganisme ini menggunakan oksigen, sebagai akseptor elektron terakhir selama
penguraian karbohidrat untuk menghasilkan energi.Kemampuan bakteri memproduksi sitokrom
oksidase dapat diketahui dari reaksi yang ditimbulkan setelah pemberian reagen oksidase pada
koloni bakteri. Enzim ini merupakan bagian dari kompleks enzim yang berperan dalam proses
foforilasi

oksidatiif.

Reagen

yang

digunakan

adalah tetramethyl-D-

phenylenediaminedihyrocloride. Reagen akan mendonorkan electron terhadap enzim ini

sehingga akan terosidasi membentuk senyawa yang berwarna biru kehitaman. Positif tertunda
(warna biru muncul antara 10-60 detik setelah ditetesi) menandakan bahwa bakteri uji memiliki
sedikit enzim.Tidak adanya perubahan warna mengindikasikan bahwa uji yang dilakukan negatif
(James, 2008).

Uji penggunaan sitrat dilakukan dengan menginokulasikan bakteri uji pada medium agar

miring Simon Citrate sebanyak 1 ose, inkubasi selama 2x24 jam pada temperature 30oC
kemudian diamati perubahan yang terjadi, hasil yang didapat adalah negatif karena media tetap

berwarna biru. Sumber karbon asam sitrat akan dipecah menjadi oksalo asetat kemudian menjadi
asam asetat. Karena adanya proses peningkatan ph sehingga berwarna biru (Anonim, 2011).

Uji lactose dan raffinosa dilakukan dengan cara bakteri uji ditumbuhkan pada medium

lactosa dan raffinosa, diinkubasi selama 2x24 jam pada temperature 30oC kemudian diamati
perubahan warna pada media, hasil menunjukan bahwa warna media tidak berubah tetap
berwarna ungu.

Uji toleransi NaCl dibuat tiga buah tabung Nutrient broth yang mengandung NaCl 0%,

6,5%, dan 10%, isolate diinokulasikan kedalam ketiga tabung masing-masing 1 ose, diinkubasi
selama 2x24 jam pada temperature 30 oC kemudian diamati hasilnya dengan melihat tingkat
kekeruhan media. Hasil yang didapat tingkat kekeruhan yang paling tinggi adalah pada
konsentrasi NaCl 0%.

Penentuan spesies melalui pendekatan homologi dilakukan dengan mengumpulkan data-

data yang diperoleh kemudian dibandingkan dengan data karakter bakteri dari sumber.
Berdasarkan hasil perhitungan persen homologi, jumlah terbesar adalah 80% yaitu antara isolat
dengan spesies A (Bacillus anthracis). Karena pengambilan sampel tanah disekitar kandang
maka tanah tersebut mengandung banyak Bacillus anthracis. Bakteri ini banyak menyerang
hewan herbivora.Misalnya domba, lembu, unta, rusa, sejenis campuran kuda-keledai, kuda, dan
kambing.Bacillus anthracis termasuk klasifikasi gram positif, nonmotile, yang menjadi cikal
bakal bakteri spora. Kuman ini berkembang dan bertahan tahunan dalam berbagai keadaan di
tanah, air, atau benda apa pun. Vegetasi sel berukuran panjang 8 mikron dengan lebar 1-1,5
mikron ini mampu hidup selama bertahun-tahun di tanah (Akoso, 2009).
IV. KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan
Berdasarkan hasil dan pembahasan di atas maka dapat disimpulkan bahwa:
1. Bacillus sp. memiliki ciri-ciri morfologi sebagai berikut: koloni berbentuk bulat atau circular,
berukuran sedang atau moderate, elevasi convex, permukaan halus mengkilap, dan margin entre.
2. Lebar sel Bacillus sebenarnya 2,5

sedangkan Panjang sel sebenarnya 2,5

3. Hasil uji positif yaitu uji pewarnaan gram, pewarnaan endospora, uji hidrolisis starch, uji
hidrolisis kasein, uji VP, uji katalase, dan uji oksidase.
4. Hasil uji negatif yaitu uji lactose dan raffinosa, uji motilitas, uji penggunaan sitrat, dan uji
toleransi NaCl.
5. Berdasarkan hasil perhitungan persen homologi, jumlah terbesar adalah 80% yaitu
isolat Bacillus anthracis karena sampel yang digunakan adalah tanah kandang