Gugus Kromofor (pada Analisa Spektrofotometer UV-Vis) 05:31 Susilo tri atmojo No

comments Bagian molekul yang mengabsorpsi dalam daerah UV dan daerah sinar tampak
dinyatakan sebagai kromofor (Roth dan Blaschke, 1985). Menurut Adam Wiryawan,
kromofor adalah suatu gugus fungsi, tidak terhubung dengan gugus lain, yang menampakkan
spektrum absorpsi karakteristik pada daerah sinar UV-sinar tampak (l>200 nm). Ada 3 jenis
kromofor sederhana, yaitu : Ikatan ganda antara 2 atom yang tidak memiliki pasangan
elektron bebas. Contoh : C = C Ikatan ganda antara 2 atom yang memiliki pasangan elektron
bebas Contoh : C = O Cincin Benzena Jika beberapa kromofor berhubungan maka absorpsi
menjadi lebih kuat dan berpindah ke panjang gelombang yang lebih panjang (Wiryawan dkk.,
2008). Contoh kromofor tunggal, antara lain : asetilen, aldehid, azo, karbonil, sulfoksida,
benzena, etilen, dan lain-lain (Harmita, tt). Dalam suatu molekul dapat dikandung beberapa
kromofor. Jika kromofor dipisahkan satu sama lain paling sedikit oleh 2 atom karbon jenuh,
maka tidak ada kemungkinan adanya konjugasi antara gugus kromofor (Roth dan Blaschke,
1985). Kromofor merupakan senyawa organik yang memiliki ikatan rangkap yang
terkonjugasi. Suatu ikatan rangkap yang terisolasi seperti dalam etilen mengabsorpsi pada
165 nm, yaitu di luar daerah ukur yang lazim dari spektroskopi elektron. Dua ikatan rangkap
terkonjugasi memberikan suatu kromofor seperti dalam butadien akan mengabsorpsi pada
217 nm. Panjang gelombang maksimum absorpsi dan koefisien ekstingsi molar akan
bertambah dengan bertambahnya jumlah ikatan rangkap terkonjugasi lainnya. Juga pada
vitamin A-alkohol (retinol) dan -karoten merupakan polien dengan 1 kromofor yang terdiri
dari 5 atau 11 ikatan rangkap terkonjugasi (Roth dan Blaschke, 1985). Gugus auksokrom
mengandung pasangan elektron bebas yang disebabkan oleh terjadinya mesomeri kromofor.
Yang termasuk dalam gugus auksokrom ini adalah substituen seperti OH, -NH2, -NHR dan
NR2. Gugus ini akan memperlebar sistem kromofor dan menggeser maksimum absorpsi
kearah panjang gelombang yang lebih panjang (Roth dan Blaschke, 1985). Gugus auksokrom
tidak menyerap pada panjang gelombang 200-800 nm, namun mempengaruhi spektrum
kromofor dimana auksokrom tersebut terikat (Wiryawan dkk., 2008). Pada daerah sinar uv-
sinar tampak hanya melibatkan transisi elektron dari p ke p* dan n ke p*, sehingga senyawa
yang dapat menunjukkan sifat absortivitasnya pada daerah ini hanya senyawa-senyawa yang
memiliki transisi elektron dari p ke p* dan n ke p* saja. Dimana senyawa-senyawa tersebut
merupakan senyawa-senyawa yang memiliki ikatan rangkap dengan panjang gelombang (l)
>200 nm atau dengan kata lain senyawa tersebut memiliki gugus kromofor. Suatu zat atau
senyawa yang bukan kromofor dapat direaksikan dengan zat lain yang menghasilkan suatu
kromofor sehingga dapat dianalisis dengan spektofotometri uv-visibel (Widjaja dan
Laksmiani, 2009). Hanya ada beberapa unsur yang memiliki absortivitas cukup besar untuk
dapat ditentukan secara langsung dengan spektrometri molekuler. Sedangkan unsur yang lain
dapat dikonversi ke derivative-nya yang memiliki absortivitas jauh lebih tinggi (Wiryawan
dkk., 2008). Perubahan keadaan oksidasi, atau pembentukan suatu komplek, dapat merubah
unsur analit non-absorbing menjadi derivatif absorbing. Sebagai contoh Mn2+ yang berwarna
merah muda (sangat) pucat dapat dioksidasi dengan menggunakan periodat atau persulfat
menjadi MnO4- yang dapat ditentukan dengan spektrofotometri sinar tampak. Ion Fe2+ akan
membentuk senyawa komplek oranye-merah dengan 1, 10-fenantrolin, sementara Fe3+ dan
Co2+ keduanya dapat membentuk senyawa komplek dengan SCN- (Wiryawan dkk., 2008).
Reaksi umum : analit non-absorbing + reagen absorbing derivative Larutan analit (baik
standar atau yang belum diketahui) direaksikan dengan reagen yang sesuai. Larutan analit
(baik standar atau yang belum diketahui) direaksikan dengan reagen yang sesuai. Reagen
yang digunakan harus menuhi beberapa persyaratan yaitu : 1. Reaksinya selektif dan sensitif
2. Reaksinya cepat, kuantitatif dan reprodusibel (ajeg) 3. Hasil reaksi stabil dalam jangka
waktu yang lama (Gandjar dan Rohman, 2009). Absorbansi dari absorbing derivative inilah
yang diukur absorbansinya, bukan larutan analit asal (Wiryawan dkk., 2008). Metode ini
memerlukan tiga persyaratan agar diperoleh hasil yang akurat dan teliti : a. Reaksi harus
kuantitatif (yakni memiliki konstanta keseimbangan yang besar) sehingga seluruh analit dapat
diubah menjadi absorbing derivative, b. Reagen yang digunakan harus tidak menyerap pada
panjang gelombang dimana derivative yang dihasilkan menyerap, c. Absorbing derivative
yang dihasilkan harus memenuhi Hukum Beer (Wiryawan dkk., 2008 Amazing Offers:
http://bit.ly/cheap-gadgets

Amazing Offers: http://bit.ly/cheap-gadgets

Apa itu Spektrofotometer? Spektrofotometer sesuai dengan namanya adalah alat yang terdiri
dari spektrometer dan fotometer. Spektrometer menghasilkan sinar dari spektrum dengan
panjang gelombang tertentu dan fotometer adalah alat pengukur intensitas cahaya yang
ditransmisikan atau yang diabsorpsi. Jadi spektrofotometer digunakan untuk mengukur energi
secara relatif jika energi tersebut ditransmisikan, direfleksikan atau diemisikan sebagai fungsi
dari panjang gelombang (Khopkar,1990). Sinar ultraviolet mempunyai panjang gelombang
antara 200-400 nm, sementara sinar tampak mempunyai panjang gelombang 400-800 nm
(Ditjen POM, 1995). Berikut ini adalah uraian bagian-bagian spektrofotometer. 1. Sumber-
sumber lampu; lampu deutrium digunakan untuk daerah UV pada panjang gelombang dari
190-350 nm, sementara lampu halogen kuarsa atau lampu tungsten digunakan untuk daerah
visibel (pada panjang gelombang antara 350-900 nm). 2. Monokromator: digunakan untuk
memperoleh sumber sinar yang monokromatis. Alatnya dapat berupa prisma ataupun grating.
Untuk mengarahkan sinar monokromatis yang diinginkan dari hasil penguraian. 3. Sel
absorpsi: Pada pengukuran didaerah tampak, kuvet kaca atau kuvet kaca corex dapat
digunakan, tetapi untuk pengukuran pada daerah UV kita harus menggunakan sel kuarsa
karena gelas tidak tembus cahaya pada daerah ini. Umumnya tebal kuvet adalah 10 mm,
tetapi yang lebih kecil ataupun yang lebih besar dapat digunakan. Sel yang biasa digunakan
berbentuk persegi, tetapi bentuk silinder dapat juga digunakan. Kita harus menggunakan
kuvet yang bertutup untuk pelarut organik. Sel yang baik adalah kuarsa atau gelas hasil
leburan serta seragam keseluruhannya 4. Detektor: Peranan detektor penerima adalah
memberikan respon terhadap cahaya pada berbagai panjang gelombang (Khopkar, 1990;
Rohman, 2007). Penyerapan radiasi oleh Molekul Semua molekul mempunyai energi yang
dapat digambarkan menjadi beberapa fenomena. (1) molekul secara keseluruhan dapat
bergerak yang kejadian ini disebut dengan translasi; energi yang berhubungan dengan
translasi disebut dengan energi translasional, E trans; (2) bagian molekul (atom atau
sekelompok atom) dapat bergerak karena berkenaan satu sama lain. Gerakan ini disebut
dengan vibrasi dan energinya dinamakan dengan energi vibrasional, Evibr; (3) molekul dapat
berotasi pada sumbunya dan rotasi ini dikarakterisasi dengan energi rotasional, Erot; (4)
disamping bentuk gerakan gerakan tersebut, suatu molekul memiliki konfigurasi elektronik,
dan energinya (energi elektronik, Eelek) tergantung pada keadaan elektronik molekul. Sinar
ultraviolet dan sinar tampak memberikan energi yang cukup untuk terjadinya transisi
elektronik. Dengan demikian, spektra ultraviolet dan spektra tampak dikatakan sebagai
spektra elektronik. Jika suatu molekul sederhana dikenakan radiasi elektromagnetik maka
molekul tersebut akan menyerap radiasi elektromagnetik yang energinya sesuai. Interaksi
antara molekul dengan radiasi elektromagnetik ini akan meningkatkan energi potensial
elektron pada tingkat keadaan tereksitasi. Apabila pada molekul yang sederhana tadi hanya
terjadi transisi elektronik pada satu macam gugus yang terdapat pada molekul, maka hanya
akan terjadi satu absorpsi yang merupakan garis spektrum. Pada kenyataannya, spektrum UV
Vis yang merupakan korelasi antara absorbansi (sebagai ordinat) dan panjang gelombang
(sebagai absis) bukan merupakan garis spektrum akan tetapi merupakan suatu pita spektrum.
Terbentuknya pita spektrum UV-Vis tersebut disebabkan oleh terjadinya eksitasi elektronik
lebih dari satu macam pada gugus molekul yang sangat kompleks. Terjadinya dua atau lebih
pita spektrum UV-Vis diberikan oleh molekul dengan struktur yang lebih kompleks karena
terjadi beberapa transisi sehingga mempunyai lebih dari satu panjang gelombang maksimal
(Rohman, 2007). Kromofor adalah bagian molekul yang mengabsorpsi dalam daerah ultra
violet dan daerah sinar tampak. Dalam satu molekul dapat dikandung beberapa kromofor.
Sebagai contoh C=O, dan NO2 . Dilihat dari struktur kaptopril yang mempunyai kromofor
(C=O), maka senyawa ini dapat menyerap radiasi pada daerah ultraviolet. Pada gugus
karbonil, disamping mempunyai sepasang elektron sigma dan sepasang elektron pi, juga
terdapat dua pasang elektron bebas, sehingga dapat terjadi beberapa transisi (Silverstein,
1986). Menurut hukum Lambert, serapan (A) berbanding lurus dengan ketebalan lapisan (b)
yang disinari : A = k.b Dengan bertambahnya ketebalan lapisan, serapan akan bertambah.
Menurut Hukum Beer, yang hanya berlaku untuk cahaya monokromatis dan larutan yang
sangat encer, serapan (A) dan konsentrasi (c) adalah : A = k.c Jika konsentrasi bertambah,
jumlah molekul yang dilalui berkas sinar akan bertambah, sehingga serapan juga bertambah.
Kedua persamaan ini digabungkan dalam hukum Lambert-Beer, maka diperoleh bahwa
serapan berbanding lurus dengan konsentrasi dan ketebalan lapisan: A = k.c.b Umumnya
digunakan dua satuan c (konsentrasi zat yang menyerap) yang berlainan, yaitu gram per liter
atau mol per liter. Nilai tetapan (k) dalam hukum Lambert-Beer tergantung pada sistem
konsentrasi mana yang digunakan. Bila c dalam gram perliter, tetapan disebut dengan
absorptivitas (a) dan bila dalam mol per liter tetapan tersebut adalah absortivitas molar ().
Jadi dalam sistem dikombinasikan, hukum Lambert-Beer dapat mempunyai dua bentuk: A =
a.b.c g/liter atau A = . b. C mol/liter Penandaan lain untuk a adalah ekstingsi spesifik,
koefisien ekstingsi, dan indeks absorbansi, sedangkan adalah koefisien ekstingsi molar
(Day and Underwood, 1999; Rohman, 2007)). Beberapa pengertian istilah dalam
spektrofotometri a. Kromofor, adalah suatu gugus atom yang menyebabkan terjadinya
absorpsi cahaya. b. Auksokrom, adalah suatu gugus atom yang apabila terikat kepada suatu
kromofor akan menambah panjang gelombang dan intensitas resapan maksimum (absorbans)
ke arah panjang gelombang yang lebih panjang. c. Efek batokrom, adalah pergeseran panjang
gelombang resapan maksimum kearah panjang gelombang lebih panjang. Disebut juga Red
Shift Effect. d. Efek hipsokrom, adalah pergeseran panjang gelombang yang lebih pendek.
Disebut juga Blue Shift Effect. e. Efek hipokrom, adalah pergeseran intensitas resapan kearah
intensitas yang lebih kecil. f. Efek hiperkrom, adalah pergeseran intensitas resapan ke arah
intensitas yang lebih besar ( Silverstein, 1986). Halhal yang harus diperhatikan dalam
analisis spektofotometri ultraviolet a. Pemilihan panjang gelombang maksimum Panjang
gelombang yang digunakan untuk analisis kuantitatif adalah panjang gelombang dimana
terjadi serapan maksimum. Untuk memperoleh panjang gelombang serapan maksimum,
dilakukan dengan membuat kurva hubungan antara absorbansi dengan panjang gelombang
dari suatu larutan baku pada konsentrasi tertentu. b. Pembuatan Kurva Kalibrasi Dibuat seri
larutan baku dari zat yang akan dianalisis dengan berbagai konsentrasi. Masing masing
absorbansi larutan dengan berbagai konsentrasi diukur, kemudian dibuat kurva yang
merupakan hubungan antara absorbansi dengan konsentrasi. Bila hukum Lambert-Beer
terpenuhi maka kurva kalibrasi berupa garis lurus. c. Pembacaan absorbansi sampel atau
cuplikan Absorbansi yang terbaca pada spektrofotometer hendaknya antara 0,2 sampai 0,8
atau 15 % sampai 70% jika dibaca sebagai transmitans. Anjuran ini berdasarkan anggapan
bahwa pada kisaran nilai absorbansi tersebut kesalahan fotometrik yang terjadi adalah paling
minimal (Rohman, 2007).

Amazing Offers: http://bit.ly/cheap-gadgets