Prof Joko Isi

PENGARUH SERBUK CACING TANAH (Pheretima javanicaK.
)
KERING TERHADAP FAAL HATI, MORFOLOGI HATI,
SERTA GAMBARAN HISTOPATOLOGI HATI TIKUS PUTIH
(Rattus norvegicus)
LAPORAN PROYEK
Oleh
Ayu Rheina Firdauzi

140210103072
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI

JURUSAN PENDIDIKAN MIPA
FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN
UNIVERSITAS JEMBER
2017
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ......................................................................................... i

DAFTAR ISI ...................................................................................................... ii
DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... iv
DAFTAR TABEL ............................................................................................. v
BAB 1. PENDAHULUAN ................................................................................ 1
1.1 Latar Belakang........................................................................................ 1
1.2 Rumusan Masalah .................................................................................. 3
1.3 Batasan Masalah .................................................................................... 4
1.4 Tujuan Penelitian .................................................................................. 5
1.5 Manfaat Penelitian ................................................................................ 5
BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA ....................................................................... 6
2.1 Cacing Tanah(Pheretima javanica K.) ............................................... 6
2.1.1 Klasifikasi Cacing Tanah (Pheretima javanica K).................... 6
2.1.2 Morfologi Cacing Tanah (Pheretima javanica K) .................... 7
2.1.3 Fisiologi Cacing Tanah (Pheretima javanica K) ....................... 8
2.1.4 Kandungan dan Manfaat cacing tanah
(Pheretima javanica K.) ............................................................ 9
2.2 Tikus Putih (Rattus norvegiccus) ....................................................... 10
2.2.1 Klasifikasi Tikus Putih (Rattus norvegiccus) ............................ 11
2.2.2 MorfologiTikus Putih (Rattus norvegiccus) .............................. 11
2.3 Uji Toksisitas ....................................................................................... 12
2.4 Hati (Hepar) ......................................................................................... 13
2.4.1 Anatomi Hati............................... .............................................. 14
2.4.2 Fisiologi Hati............................. ................................................ 15
2.4.3 Histologi Hati.............................. .............................................. 15
2.4.4 Enzim Aminotransaminase pada hati.............................. .......... 16
2.5 Histopatologi Hati ................................................................................ 18
2.6 Kerangka Berpikir .............................................................................. 21
ii
2.7 Hipotesis ............................................................................................. 22
BAB 3. METODE PENELITIAN ................................................................... 23
3.1 Jenis Penelitian ..................................................................................... 23
3.2 Tempat dan Waktu Penelitian ............................................................ 23
3.3 Identifikasi Variabel ............................................................................. 23
3.2.1 Variabel Bebas .......................................................................... 23
3.2.2 Variabel Terikat ........................................................................ 23
3.2.3 Variabel Kontrol........................................................................ 24
3.4 Definisi Operasional ............................................................................ 24
3.5Jumlah Sampel ...................................................................................... 25
3.6 Alat dan Bahan Penelitian .................................................................. 26
3.6.1 Alat Penelitian .......................................................................... 26
3.6.2 Bahan Penelitian ....................................................................... 27
3.7 Prosedur Penelitian ............................................................................ 27

3.7.1 Persiapan Pheretima javanica Kering ..................................... 27
3.7.2 Pengujian Tikus Putih (Ratus norvegicus) ............................... 27
3.8 Analisis Data ........................................................................................ 31

3.8.1 Analisis Data Penelitian ............................................................... 32
3.9 Alur Penelitian ..................................................................................... 33
BAB 4. HASIL dan PEMBAHASAN .............................................................. 34
4.1 Hasil Penelitian .................................................................................... 34
4.1.1 Nilai dan Kisaran Lethal Dosis (LD50) ........................................ 35
4.1.2 Pengukuran kadar SGOT dan SGPT............................................ 36
4.1.3 Morfologi hati tikus putih (Rattus norvegicus B.) ...................... 39
4.1.4 Gambaran histopatologi sel hati tikus putih................................. 40
4.2 Pembahasan .......................................................................................... 46
4.2.1 Nilai Kisaran Potensi Ketoksikan (LD50) .................................... 46
4.2.2 Nilai kadar SGOT dan SGPT Tikus Putih ................................... 48
4.2.3 Morfologi Hati Tikus Putih.......................................................... 52
4.2.4 Gambaran Histopatologi Sel Hati Tikus Putih............................. 53
iii
BAB 5. Kesimpulan Dan Saran ....................................................................... 55
5.1 Kesimpulan ..................................................................................... 55
5.2 Saran ............................................................................................... 55
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 56
iv
DAFTAR GAMBAR
2.1 Morfologi cacing tanah (Pheretima javanica K.) .......................................... 8

2.2 Tikus Putih (Rattus norvegicus B.) ..................................................................12
2.3Hati Tikus putih (Rattus norvegiccusB.) ..........................................................14
2.4 Histologi normal hepar tikus putih (Rattus norvegiccus B.) ...........................16
2.5 Pembengkakan sel disertai vakuolisasi ............................................................19
4.1 Morfologi hati tikus Betina ........................................................................... 39
4.2 Morfologi hati tikus Jantan ........................................................................... 39
4.3 Gambaran histopatologi sel hati Kelompok Kontrol Jantan ........................ 42
4.4 Gambaran histopatologi sel hati Kelompok Kontrol Betina ........................ 42
4.5 Gambaran histopatologi sel hati Kelompok P1 Jantan ................................ 43
4.6 Gambaran histopatologi sel hati Kelompok P1 Betina ................................ 43
4.8 Gambaran histopatologi sel hati Kelompok P2 Betina ................................. 44
4.10 Gambaran histopatologi sel hati Kelompok P3 Betina .............................. 45
4.11 Gambaran histopatologi sel hati Kelompok P4 Jantan .............................. 46
4.12 Gambaran histopatologi sel hati Kelompok P4 Betina .............................. 46
v
DAFTAR TABEL
3.1Rancangan Penelitian Pada Tikus Jantan ..........................................................31

3.2Rancangan Penelitian Pada Tikus Betina ..........................................................32
3.3Komposisi Pakan Jenis PLIP ............................................................................34
3.4 Prosedur Tissue Processor dan Pengaturan Waktu....................................... 36
3.5 Tahap Pewarnaan Mayers Hematoxylin Eosin ............................................. 37
3.6 Skor Derajat Histopatologi Hati .................................................................... 32
4.1 Jumlah Kematian Tikus Putih ...................................................................... 35
4.2 Hasil pemeriksaan kadar SGOT dan SGPT tikus betina............................... 36
4.3 Hasil uji Paired Sampel T-testkadar SGOT Betina....................................... 36
4.4HasilUji PairedSample T-test Kadar SGPT Betina ....................................... 37
4.5 Hasil pemeriksaan kadar SGOT dan SGPT tikus jantan ............................... 37
4.6HasilUji PairedSample T-test Kadar SGOT Jantan ....................................... 38
4.7 HasilUji PairedSample T-test Kadar SGPT Jantan....................................... 38
4.8 Tabel Pengamatan Morfologi Hati ................................................................ 40
4.9 Hasil pemeriksaan perubahan histopatologi hati tikus putih ....................... 41
vi
BAB I. PENDAHULUAN
1.1 Latar belakang

Meningkatnya demam typhoid pada masyarakat disebabkan karena
standart hidup dan tingkat kebersihan yang rendah.Antibiotik yang pertama
digunakan untuk pengobatan oleh masyarakat untuk menyembuhkan demam
typhoid adalah golongan chloramfenikol, ciprofloxacin, Thiamphenikol
(Rampengan, 2007). Golongan obat tersebut sangat mudah di peroleh.Tetapi
apabila obat tersebut digunakan dalam jangka panjang dapat menimbulkan resiko
efek samping seperti kerusakan hati.Salah satu penyebab kerusakan hati adalah
obat-obatan.Obat yang dikatakan hepatotoksik adalah obat yang dapat
menginduksi kerusakan hati atau biasanya disebut drug induced liver injury
(Ahmed, 2013).
Upaya untuk mengurangi dampak yang ditimbulkan oleh obat kimia yaitu
dengan cara mulai dilakukan penelitian obat alami mengenai kandungan yang
terdapat di dalam cacing tanah yang dapat menurunkan demam typoid. Selain
minimnya pengetahuan masyarakat tentang hal tersebut, masyarakat juga belum
mendapat sosialisasi mengenai banyaknya zat yang terkandung di dalam cacing
tanah.Cacing tanah merupakan salah satu organisme yang mampu menghasilkan
senyawa antimikroba. Pemanfaatan cacing tanah untuk antipiuritik lebih aman
karena komponen kimia cacing tanah tidak menimbulkan efek toksik bagi
manusia sehingga aman dikonsumsi. Khasiat yang terdapat di dalam cacing tanah
membuktikan adanya zat antibakteri yang dapat menghambat pertumbuhan
bakteri pathogen dan menghambat pertumbuhan bakteri gram negatif (Sudiarto,
1999)
Cacing tanah merupakan hewan tingkat rendah yang tidak memiliki tulang
belakang (avertebrata) dan bertubuh lunak.Hewan ini hidup di dalam tanah yang
banyak mengandung senyawa organic dan bahan mineral yang cukup baik dari
1
2
alam maupun dari sampah limbah pembuangan penduduk sebagaimana habitat

alaminya.Cacing tanah telah dikenal dari beberapa familia, yaitu moniligastridae,
megascolecidae, eudrillidae, glossocolecidae dan lumbricidae.Beberapa
spesies yang sering ditemukan di Indonesia antara lainpontoscolex corethrurus,
Drawida sp., Peryonix excavates, Megascolex cempii, Pheretima posthoma,
Pheretima javanicaK,Metaphire javanica dan Metaphire copensis (Khairuman
dan Amri. 2009).
Berdasarkan uraian tersebut diatas, peneliti tertarik untuk meneliti
mengenai toksisitas pada cacing tanah khusunya cacing tanah jenis Pheretima
javanicaK. dimana uji toksisitas merupakan suatu pengujian untuk mengamati
suatu aktivitas farmakologi suatu senyawa dan mendeteksi efek toksik suatu zat
pada sistem biologi.Uji toksisitas ini memiliki tujuan untuk mengetahui tingkat
keamanan penggunanaan konsumsi suatu senyawa. Pengujian toksisitas suatu obat
dapat dilakukan dengan cara toksisitas akut dan subakut. Uji toksisitas sebagian
besar dirancang untuk menentukan LD50 (Lethal dose 50). LD50 merupakan obat
yang memiliki dosis tunggal suatu zat yang secara statistik diperkirakan dapat
membunuh 50% hewan percobaan dan akan menunjukkan organ sasaran yang
mungkin akan dirusak (Harmita, 2008). Dalam hal ini hewan uji yang akan diberi
perlakuan yaitu hewan tikus putih (Rattus norvegiccus).
Alasan menggunakan hewan uji tikus putih (Rattus norvegiccus) karena
hewan ini termasuk dalam kelompok mamalia, sehingga pengaruh yang
ditimbulkan terhadap tikus putih ini hampir sama dengan pengaruh yang akan
diperoleh manusia nantinya. Tikus putih dengan nama ilmiah Ratus novergicus
merupakan hewan yang termasuk hewan nokturnal dan sosial. Salah satu faktor
yang mendukung kelangsungan hidup tikus putih dengan baik ditinjau dari segi
lingkungan adalah temperatur dan kelembaban. Temperatur yang baik untuk tikus
putih yaitu 19° C – 23° C, sedangkan kelembaban 40-70 % (Wolfenshon dan
Lloyd, 2013).
Sebagai parameter organ utama yang akan dirusak yaitu pada hati. Hati
merupakan organ yang berperan sebagai detoksifikasi.Hati merupakan kelenjar
tebesar dalam tubuh yang memiliki banyak fungsi termasuk metabolisme obat
3
(Sherlock, 2004).Hati juga memiliki keterbatasan fungsi detoksifikasi sebagai

efek overdosis zat toksik. Jika zat hepatotoksik melewati batas fisiologisnya,
maka akan terjadi patofisiologis. Uji toksisitas sub akut adalah uji untuk
mengetahui toksisitas suatu senyawa yang dilakukan pada hewan coba dengan
sedikitnya tiga tingkat dosis, umunya uji toksisitas sub akut dilakukan dalam
jangka waktu 90 hari (Schnellman, 2001).
Pemeriksaan histopatologi hati berfungsi untuk mengetahui gejala paparan
senyawa uji. Parameter hati yang dilihat yaitu berupa degenerasi, nekrosis dan
pendarahan (Yusuf, 2011). Di dalam hati juga terdapat suatu ezim yang dapat
digunakan untuk mengetahui adanya kerusakan pada hati. Enzim tersebut yaitu
SGOT (glutamate oksaloasetat transminase) dan SGPT (glutamate pyruvate
transaminase. Hal ini dikarenakan SGOT dan SGPT merupakan enzim yang
dihasilkan oleh hati yang mana memiliki konsentrasi yang rendah dalam kondisi
normal. Konsentrasi SGPT yang cenderung naik merupakan tanda yang khas
adanya kerusakan membrane basalis jaringan hati, sehingga enzim SGPT yang
seharusnya berada pada jaringan hati merembes kedalam serum, yang dapat
mengakibatkan konsentrasi enzim dalam darah naik(Qodriyati, 2016). Penentuan
kadar ketoksikan ini dapat digunakan sebagai tolak ukur adanya acuto hepato
celluler (Syahrudin, 2013:1). Oleh karena itu dalam penelitian ini penting untuk
dilakukannya pemeriksaan kadar SGOT dan SGPT karena apabila serbuk cacing
tanah (Pheretima javanica K.) kering bersifat toksik, maka akan menyebabkan
peningkatan konsentrasi dari SGOT (glutamate oksaloasetat transminase) dan
SGPT (glutamate pyruvate transaminase).
Berdasarkan uraian tersebut, tujuan penelitian ini yaitu untuk mengetahui
informasi mengenai efek toksik secara subakut (dalam jangka waktu yang lebih
panjang) pada cacing tanah (Pheretima javanicaK.) keringyang dilihat melalui
gambaran histopatologi hati, pengukuran kadar SGOT dan SGPT serta morfologi
tikus putih (Rattus norvegiccusB.).
1.2 Rumusan Masalah

4
Berdasarkan latar belakang yang telah diuraikan sebelumnya, rumusan

masalah yang akan dibahas yaitu sebagai berikut:
a. Bagaimana pengaruh serbuk cacing tanah (Pheretima javanicaK.) kering
terhadap faalhati tikus putih (Rattus norvegiccus)?
b. Bagaimana pengaruh serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) kering
terhadap morfologihati tikus putih (Rattus norvegiccus)?
c. Bagaimana pengaruh serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) kering
terhadap histopatologi hati tikus putih (Rattus norvegiccus)?
1.3 Batasan Masalah

Untuk mempermudah pembahasan dan mengurangi kerancuan dalam
menafsirkan masalah dalam penelitian ini, maka perlu adanya batasan masalah,
yaitu sebagai berikut:
a. Jenis cacing tanah yang digunakan adalah spesies Pheretima javanicaK. yang
yang dapat ditemukan di kandang peternakan sapi dengan kedalaman 20 cm
dan diareal tanah yang gembur di daerah Pakusari Jember.
b. Kriteria cacing tanah yang digunakan adalah yang bertubuh sehat dan dewasa.
Dengan ciri-ciri geraknya lincah dan tubuhnya tidak pucat.
c. Cacing tanah yang digunakan sebagai obat adalah serbuk cacing tanah,
dengan proses penjemuran dan dioven dengan suhu 40˚ C selama 4 jam lalu
kemudian diblender, diayak dan disaring.
d. Pelarut yang digunakan untuk mengemulsikan serbuk cacing tanah
(Pheretima javanica K.) kering adalah larutan aquadest.
e. Pengamatan histopatologi organ hati tikus putih (Rattus norvegiccus) pada
penelitian ini meliputi kerusakan hati berupa degenerasi (degenerasi
perenkimatosa, degenerasi hidropobik) dan nekrosis (meliputi karioeksis,
kariolisis dan dan piknosis).
f. Pengamatan faal hati dengan pengukuran kadar SGOT dan SGPT
menggunakan serum dari darah hewan coba ditambah reagen SGOT dan
SGPT
5
g. Hewan coba tikus putih (Rattus norvegiccusB.) yang digunakan adalah tikus
putih jantan dan betina (Rattus norvegiccusB.) dengan strain wistar berumur
6-8 bulan dan berat badan 175-200 gram.
h. Variasi dosis cacing tanah(Pheretima javanica K.) kering yang digunakan
untuk uji toksisitas yaitu 0,4 g; 0,8 g; 1,6 g dan 3,2 g
1.4 Tujuan
a. Untuk mengetahui pengaruh serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.)
kering terhadap faal hatitikus putih (Rattus norvegiccus)
b. Untuk mengetahui pengaruh serbuk cacing tanah (Pheretima javanicaK.)
kering terhadap morfologi hati tikus putih (Rattus norvegiccus)
c. Untuk mengetahui pengaruh serbuk cacing tanah (Pheretima javanicaK.)
kering terhadap histopatologihati tikus putih (Rattus norvegiccus)
1.5 Manfaat Penelitian

a. Bagi penulis, dapat memberi pengetahuan serta wawasan mengenai ketoksikan
cacing tanah (Pheretima javanicaK.) kering terhadap gambaran histopatologi
dan faal hati yang digunakan sebagai obat tradisional yang berguna untuk
kesehatan.
b. Bagi masyarakat dapat menambah wawasan serta pengetahuan dengan
memperoleh informasi mengenai manfaat cacing tanah (Pheretima javanicaK.)
sebagai obat alternative, pengganti obat sintesis dengan menggunakan serbuk
maupun ekstrak cacing tanah (Pheretima javanicaK.) dengan dosis yang efektif
dan aman untuk dikonsumsi.
c. Bagi peneliti selanjutnya, dapat digunakan sebagai pertimbangan untuk
melakukan penelitian yang lebih lanjut.
BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA
2.1Cacing tanah (Pheretima javanica K.)

Cacing tanah merupakan hewan tingkat rendah, karena hewan ini tidak
memiliki tulang belakang atau biasa disebut invertebrata.Cacing tanah termasuk
ke dalam filum Annelida, yang mana Annelida berasal dari kata “Annulus” yang
artinya cincin.Tubuh hewan ini terdiri dari segmen-segmen atau cincin-cincin
(Waluyo, 1998).Jenis cacing tanah yang banyak ditemukan di Pulau Jawa antara
lain jenis Pontoscolex coretrurus, Lumbricus rubellus, Pheretima capensis dan
Pheretima javanica. Di antara keempat cacing tanah tersebut yang paling banyak
jumlah populasinya adalah spesies Pheretima javanica K.Cacing ini termasuk
jenis cacing tanah domestik.Dengan memiliki ukuran tubuh yang relatif lebih
besar dan panjang di antara cacing tanah yang lain (Waluyo, 1994).
Dalam uji pendahuluan terhadap potensi beberapa ekstrak cacing tanah
menunjukan bahwa cacing tanah Pheretima javanica K. mengandung senyawa
antibakteri.Secara umum tubuh cacing tanah mengandung protein, asam amino
dan bermacam-macam enzim (Waluyo, 2003).Berdasarkan penelitian ekstraksi
oleh Waluyo (2004) jenis Pheretima javanica K. menunjukkan aktivitas
antibakteri lebih tinggi dibandingkan ekstrak cacing tanah yang lain seperti
ekstrak Pontoscolex coretrurusdan Pheretima capensisyang terlihat pada diameter
zona hambatan bakteri Gram negatif Escherichia coli, Shigella dysenteriae,
Staphylococcus aureus dan Salmonella typhi.
2.1.1 Klasifikasi Cacing tanah (Pheretima javanicaK.)

Cacing tanah Pheretima javanicaK. termasuk dalam golongan kelompok
binatang avertebrata (Palungkun, 2010).
Adapun klasifikasi dari Pheretima javanicaK. menurut Kimberg (1867)
berdasarkan klasifikasi ITIS (Integrated Taxonomic Information System)adalah
sebagai berikut:
Kingdom : Animalia
6
7
Phylum : Annelida
Kelas : Chaetopoda
Ordo : Oligochaeta
Family : Megascolecidae
Genus : Pheretima
Spesies : Pheretima javanica K. (ITIS.gov)
2.1.2 Morfologi Cacing tanah (Pheretima javanica K.)

Pheretima javanica memiliki ciri eksternal sebagai berikut, panjang 110-140
mm, diameternya 3,0-5 mm, memiliki segmen yang berjumlah 102-125 segmen.
Warna bagian dorsal coklat kemerahan dan pada bagian posterior pucat
keputihan.Prostomium tipe epilobus (1/20).Lubang dorsal mulai pada segmen
XII/XIII, setae mulai segmen II dari tipe perikitin.Klitellium seperti cincin,
terletak pada segmen XIV-XVI.Lubang kelamin jantan terdapat pada segmen
XVIII.Lubang ini terlihat lebih menonjol keluar seperti bibir melingkar, antara
lubang terdapat setae.Lubang kelamin betina dibagian ventral pada segmen
XIV.Lubang spermateka terdapat dua pasang terletak pada segmen VII/VIII dan
VIII/I. Papila genital tidak ada (Waluyo, 1993).
8
Gambar 2.1 Morfologi cacing tanah (Pheretima javanica K.) (Sumber:

Dokumentasi pribadi).
Setiap segmen memiliki 4 pasang seta kecuali pada segmen pertama dan
terakhir, yang mana seta ini berfungsi sebagai pelekat pada permukaan tanah
ketika cacing berjalan atau menggali tanah, seta digerakkan oleh otot-otot
protaktor dan retraktor (Sunarto, 2008).
2.1.3 Fisiologi Cacing tanah (Pheretima javanica K.)

Proses peredaran darah pada cacing tanah Pheretima javanica K. terjadi ke
dan dari seluruh tubuh dalam suatu system pembuluh darah tertutup yang terjadi
pada kapiler darah. Zat-zat makanan dan oksigen dialirkan ke sel-sel atau jaringan
dan CO2 dikeluarkan.Pada Pheretima javanica K. memiliki 5 pasang
jantung.Darah cacing tanah terdiri dari cairan plasma yang mana mengandung
corpusles yang tak berwarna (amoebocyte) dan plasma darah berwarna merah
karena adanya hemoglobin (Waluyo, 2006).
Cacing telah memiliki pembuluh darah, sehingga sehigga system peredaran
darahnya tertutup.Warna merah pada darah disebabkan karena terdapat kandungan
hemoglobin di dalamnya.Pembuluh darah yang melingkari esofagus berfungsi
memompa darah ke seluruh tubuh.Cacing tanah memiliki alat peredaran darah
yang terdiri dari pembuluh darah punggung, pembuluh darah perut dan lima
pasang lengkung aorta, dimana lengkung aorta ini berfungsi sebagai jantung.
System saraf annelida adalah system saraf tangga tali. Ganglia otak terletak di
depan faring pada anterior (Dondin, 2005).
9
Cacing tanah memperoleh oksigen (O2) dan melepaskan karbondioksida

(CO2) melalui membrane luar atau kulit. Syarat yang harus terpenuhi agar proses
pertukaran uadara berjalan dengan baik adalah adanya kelembapan yang cukup
tinggi pada permukaan kulit. Pada keadaan yang mendesak cacing tanah dapat
bertahan hidup selama beberapa jam tanpa ada suplai udara segar (Waluyo, 2006).
2.1.4. Kandungan dan Manfaat cacing tanah (Pheretima javanica K.)

Sejak puluhan tahun yang lalu, cacing tanah dikenal sebagai organisme
pemecah materi organic dan dapat menyuburkan tanah.Cacing tanah telah
menyumbangkan senyawa nitrogen pada tanah.Senyawa ini berasal dari epitel
usus yang dikeluarkan bersama kotoran dan hasil ekskresi lainnya (Hayati,
1995:11).Cacing tanah ini juga telah digunakan oleh masyarakat Cina sebagai
obat berbagai macam penyakit.Yang mana bagian yang sering digunakan atau
dimanfaatkan dari cacing tanah adalah biomas atau cacing itu sendiri dan kascing.
Biomas cacing tanah merupakan sumber protein hewani, cacing tanah juga dapat
digunakan sebagai bahan baku obat (Rukmana, 1999). Cacing tanah juga
bermanfaat dalam bidang agrikultur, baik itu sebagai penghasil pupuk oraganik,
pendaur ulang limbah, bahan baku pakan ternak dan ikan serta sebagai pakan
burung (Palungkun, 2010)
Kandungan gizi yang terdapat di dalam cacing tanah cukup tinggi,
khususnya untuk kandungan protein yang terdapat didalamnya yang mencapai
61% (Palungkun, 2008).Kandungan protein yang terdapat di dalam cacing tanah
lebih tinggi dari sumber protein lainya, misalnya daging (51%) dan ikan
(60%).Oleh karena itu, di Jepang, Hongaria, Thailand, Filipina dan Amerika
Serikat cacing ini juga dimanfaatkan sebagai bahan makanan manusia selain
digunakan untuk ramuan obat dan bahan kosmetik (Rukmana, 1999).
Protein yang sangat tinggi pada tubuh cacing ini terdiri dari setidaknya
Sembilan asam amino esensial dan empat macam asam amino non-esensial. Asam
amino esensial tersebut antara lain arginin, histidin, leusin, isoleusin, valin,
metionin, fenilalanin, lisin dan treonin. Asam amino non-esensial yang
terkandung antara lain sistin, glisin, serin dan tirosin (Palungkun, 2008).
10
Cacing tanah (Pheretima javanica K.) memiliki senyawa bioaktif

antimikroba peptide yang disebut Lumbricin I. yangmengandung prolin 15 % dari
total berat kering dan tersusun dari 26 macam asam amino dengan berat molekul
7,231 kDa (Waluyo, 2010). Mode of action senyawa Lumbricin I dengan cara
merusak mekanisme permeabilitas membrane. Sehingga bakteri kehilangan
metabolit sel, seyawa ini dapat menghambat sintesis protein dan DNA dalam sel.
Lumbricin I juga dapat mempengaruhi stuktur atau soliditas lipid bilayer yang
menciptakan Multimeric Membrane Protein Pare,sehingga integritas membrane
terganggu (Yuan, 2014).
Di dalam saluran pencernaan cacing tanah mengandung enzim
lumbrokinase yang merupakan enzim yang sebagian besar terdiri dari residu asam
aspartat dan sedikit lisin.Yang mana lumbrokinase berpotensi untuk digunakan
sebagai fibrinolitik dan antitrombotik (Gayatri, 2013:167).
2.2 Tikus Putih (Rattus norvegiccusB.)

Tikus putih yang memiliki nama ilmiah Rattus novergicusB. merupakan
hewan coba yang sering dipakai untuk penelitian. Hewan ini termasuk hewan
nokturnal dan sosial.Salah satu faktor yang mendukung kelangsungan hidup tikus
putih dengan baik ditinjau dari segi lingkungan adalah temperatur dan
kelembaban. Temperatur yang baik untuk tikus putih yaitu 19° C – 23° C,
sedangkan kelembaban 40-70 % (Wolfenshon dan Lloyd, 2013).
Tikus (Rattus norvegiccusB.) termasuk binatang pengerat yang merugikan
dan termasuk hama terhadap tanaman petani. Selain menjadi hama yang
merugikan, hewan ini juga membahayakan kehidupan manusia. Sebagai pembawa
penyakit yang berbahaya, hewan ini dapat menularkanpenyakit seperti wabah pes
dan leptospirosis.Hewan ini, hidup bergerombol dalam sebuah lubang.Satu
gerombol dapat mencapai 200 ekor. Di alam tikus ini dijumpai di perkebunan
kelapa, selokan dan padang rumput. Tikus ini mempunyai indera pembau yang
sangat tajam (Malole, 1989).
11
2.2.1 Klasifikasi
Rattus norvegiccus B. termasuk dalam golongan kelompok binatang
vertebrata yaitu pada kelas mamalia. Adapun klasifikasinya adalah sebagai
berikut:
Kingdom : Animalia
Filum : Chordata
Kelas : Mammalia
Ordo : Rodentia
Subordo : Odontoceti
Familia : Muridae
Genus : Rattus
Spesies : Rattus norvegicusB. (ITIS.gov)
2.2.2 Morfologi (Rattus norvegicusB.)

Fase hidup tikus putih umunya tidak terlalu panjang, jarang ditemukan
yang lebih dari 3 tahun.Tikus putih tidak dapat memuntahkan makanan karena
susunan anatomi esophagus yang menyatu di perut, serta tikusputih tidak
memiliki kantung empedu. Tikuspercobaan strain wistar yang dikembangkan
secara luas sangat mudah menyesuaikan diri dengan lingkungannya. Makanan
tikus juga mempunyai variasi dalam susunannya, sebagai contoh komposisinya
meliputi: protein 20-25 %, karbohidrat 45-50%, serat 5%. Juga harus mengandung
vitamin A, vitamin D, alfa tokoferol, asam linoleat, thiamin, riboflavin,
panthothenat, biotin, serta mineral, phospor, magnesium, potasium, tembaga,
iodin, besi dan timah. Setiap hari seekor tikus dewasa membutuhkan makanan
antara 12-20 gr, serta minum air antara 20-45 ml, serta mineral, besi sebesar 35
mg/kg (Smith, 1998:41). Berikut merupakan ciri-ciri dari Rattus norvegicus
adalah sebagai berikut:
a. Bagian kepala dan ekor : hidung tumpul, badan besar dan bentuknya pendek
18-25 cm
b. Bagian ekor: Lebih pendek dari kepala dan badan, bagian atas lebih tua dan
bagian bawahnya lebih muda, dengan rambut pendek kaku 16-21 cm.
12
c. Bagian telinga: Relatif kecil, setengah tertutup oleh bulu yang jarang lebih
dari 20-23 cm
d. Bagian bulu: Pada bagian punggung berwarna abu-abu kecoklatan sedangkan
pada bagian perut berwarna keabu-abuan.
e. Bagian reproduksi: terjadi pada umur 75 hari, masa bunting 22-24 hari,
dimana waktu kebuntingannya sangat pendek dan berulang-ulang dengan
jumlah anak yang banyak setiap melahirkannya (Smith, 1998).
Gambar 2.2 Tikus putih (Rattus norvegiccus) wistar (Sumber: Zikrul, 2015)
2.3 Uji Toksisitas

Uji toksisitas merupakan salah satu uji yang digunakan untuk mengetahui
tingkat keamanan suatu obat yang sedang dalam masa pengujian (Lu,
1995).Toksisitas diartikan sebagai suatu kemampuan yang melekat pada suatu zat
kimia untuk mengetahui pengaruh yang merugikan pada suatu organism
hidup.Seringkali reaksi sensitisasi bersifat fatal.Dalam istilah toksikologi,
toksisitas diartikan sebagai kemampuan bahan kimia dalam merusak suatu organ
(Ian, 2009).
Uji toksisitas dilakukan untuk memperoleh informasi atau data mengenai
toksisitas suatu bahan (kimia) pada hewan uji. Secara umum uji toksisitas dapat
dibedakan menjadi dua, yaitu uji toksisitas akut dan uji toksisitas sub akut. Uji
toksisitas akut (pengujian jangka pendek) yaitu uji yang dirancang untuk
menentukan efek toksik suatu senyawa dengan waktu yang singkat dan dalam
takaran tertentu.Dalam pengujian ini dosis yang digunakan adalah takaran dosis
13
yang memiliki dosis terendah yang mana tidak sampai mematikan seluruh hewan
uji. Untuk pengujian toksisitas akut biasanya pengamatan biasanya dilakukan
selama 24 jam kecuali untuk kasus tertentu dapat dilakukan selama 7-14 hari.
Sedangkan uji toksisitas sub akut atau biasa disebut sub kronik (pengujian jangka
panjang), dilakukan dengan memberikan bahan toksik secara berulang-ulang yang
biasanya dilakukan setiap hari atau lima kali dalam seminggu, selama jangka
waktu kurang lebih 10% dari masa hidup hewan uji. Selama kurang lebih 3 bulan
atau 90 hari (Clarke & Clarke, 1975).
Prinsip dari uji toksisitas subkronik oral adalah sediaan uji dalam beberapa
tingkat dosis yang diberikan setiap hari pada beberapa kelompok hewan uji
dengan satu dosis per kelompok selama 28 atau 90 hari.Selama waktu pemberian
sediaan uji, hewan harus diamati setiap hari untuk menentukan adanya toksisitas.
Tujuan uji toksisitas subkronis oral adalah untuk memperoleh informasi adanya
efek toksik zat yang tidak terdeteksi pada uji toksisitas akut, informasi
kemungkinan adanya efek toksik setelah pemaparan sediaan uji secara berulang
dalam jangka waktu tertentu (BPOM, 2014).
Menurut permenkes no.761/1992 dan 56/2000 menyebutkan bahawa uji
toksisitas subakut dibuat berdasarkan hasil uji dari toksisitas akut. Uji toksisitas
subakut dapat memberikan gambaran mengenai toksisitas fitofarmaka pada
penggunaan berulang untuk jangka waktu yang relatif lebih lama. Kecenderungan
kumulasi dan reversibilitas efek toksik calon fitofarmaka dapat dinyatakan dari
hasil uji toksisitas subakut (Priyanto, 2010).
2.4. Hati (Hepar)

Hati merupakan salah satu organ vital yang memiliki peranan penting
dalam metabolisme melalui sifat beberapa sistem enzim yang terlibat dalam
transformasi biokimia.Sel utama penyusun hati adalah hepatosit.
Hati merupakan kelenjar terbesar dalam tubuh, memiliki berat rata-rata
sekitar 1.500 g atau 2,5 % berat badan pada orang dewasa normal. Hati
merupakan organ plastis lunak yang tercetak oleh struktur sekitarnya.Secara
antomi, hati terletak di bagian tulang rusuk ketiga anterior di dalam rongga
14
abdominal.Permukaan hati pada bagian anteriornya dibatasi oleh lengkungan

diafragma sedangkan bagian posteriornya dibatasi oleh perut dan duodenum
(Green, 1966).
2.4.1 Anatomi hati

Secara anatomi hati terbagi menjadi 4 lobus yaitu lobus kanan, lobus kiri,
lobus quadratus dan lobus kaudatus.Masing-masing lobus dibentuk oleh lobulus-
lobulus yang merupakan unit fungsional dasar hati.Secara keseluruhan, hati
dibentuk oleh sekitar 100.000 lobulus yang terdiri dari hepatosit, saluran sinusoid
yang dikelilingi oleh endotel vaskuler dan sel kupfer yang merupakan bagian dari
sistem retikuloedotiel.Dalam hati terdapat tiga jenis jaringan yang penting yaitu
sel parenkim hati, susunan pembuluh darah dan susunan saluran empedu
(Darmawan, 2003).Pada orang dewasa waktu untuk membentuk lobus diperlukan
waktu 15-16 hari dan sangat dipengaruhi oleh hormone gonadothropin.Diantara
sel hati terdapat kapiler-kapiler yang disebut sebagai sinusoid.Sinusoid dibatasi
oleh sel fagositik atau sel kupffer yang fungsi utamanya adalah menelan bakteri
dan benda asing dalam darah.Selain cabang-cabang vena porta dan arteri hepatica,
juga terdapat saluran empedu.yang disebut sebagai kanalikuli yang bersatu
membentuk saluran empedu yang makin lama makin besar hingga menjadi duktus
koledokus (Price and Lorraine, 2006).
Gambar 2.3 Hati Tikus (Bredo & Vazquez, 2011)

15
2.4.2. Fisiologi hati

Hati merupakan organ dalam yang paling besar dan memiliki peranan
utama dalam metabolisme tubuh. Hati memproduksi empedu yang membantu
pencernaan lemak dan hati sendiri memproses asam amino, glukosa, asam lemak,
serta gliserol (Jeharatman dan Koh, 2005).
Hati merupakan organ tubuh yang memiliki berbagai macam fungsi.
Diantaranya adalah sebagai berikut:
a. Detoksifikasi, hati berguna untuk mendetoksifikasi toksin dan berbagai obat-
obatan. Proses ini dilakukan melalui oksidasi, metilasi dan konjugasi
(Juhryyah S. 2008).
b. Penyimpanan darah, hati adalah reservoir darah yang dihasilkan dari jantung
dan limpa serta volume darah yang diperlukan oleh tubuh
c. Sekresi, hati memproduksi empedu yang berfungsi dalam emulsifikasi dan
absopsi lemak
d. Penyimpanan, hati menyipan beberapa mineral, seperti besi dan tembaga,
serta vitamin yang larut dalam lemak yaitu vitamin A, D, E dan K. Hati juga
menyimpan toksin dan obat-obatan yang tidak dapat dipecahkan atau
diekskresikan oleh tubuh (Olefsky, 1975).
e. Metabolisme, hati memiliki peranan penting dalam metabolisme protein,
lemak dan karbohidrat
f. Produksi panas, banyaknya aktivitas kimiawi dalam hati menyebabkan
peranan sebagai sumber utama panas tubuh, khusunya saat tubuh dalam
kondisi istirahat atau tidur (Alfiansyah, 2008).
2.4.3 Histologi hati

Terdapat beberapa macam sel–sel yang terdapat di hati antara lain:
hepatosit, sel endotel, dan sel makrofag yang disebut sebagai sel kuppfer, dan sel
ito (sel penimbun lemak). Sel hepatosit berderet secara radier dalam lobulus hati
dan membentuk lapisan sebesar 1-2 sel serupa dengan susunan bata.Lempeng sel
ini mengarah dari tepian lobulus ke pusatnya dan beranastomosis secara bebas
16
membentuk struktur seperti labirin dan busa.Celah diantara 14 lempeng-lempeng

ini mengandung kapiler yang disebut sinusoid hati (Gibson, 2003).
Gambaran 2.4.Histologi normal hepar tikus.LiPa: liver parenchyma, PoTr:

portal triad, CeVe:central verin, BiDu: Biler duct, HeAr:hepatic
arteri,PoVe:portal vein, KuCe:kuffer cell, He: hepatocit,
Si:sinusoid, (Gibson, 2013)
Sinusoid hati adalah saluran yang berliku–liku dan melebar, diameternya

tidak teratur, dilapisi dengan sel endotel bertingkat yang tidak utuh. Sinusoid
dibatasi oleh 3 macam sel, yaitu sel endotel (mayoritas) dengan inti pipih gelap,
sel kupffer yang fagositik dengan inti ovoid, dan sel stelat atau sel Ito atau liposit
hepatik yang berfungsi untuk menyimpan vitamin A dan memproduksi matriks
ekstraseluler serta kolagen. Aliran darah di sinusoid berasal dari cabang terminal
vena portal dan arteri hepatik, membawa darah kaya nutrisi dari saluran
pencernaan dan juga kaya oksigen dari jantung (Farina, 2007).
2.4.4 Enzim Aminotransaminase pada hati

Enzim aminotransferase meruapak suatu enzim yang mengkatalis
pemindahan gugus amino dan alfa-keto.Enzim ini yang mengkatalisis reaksi
transaminase.Terdapat dua enzim yang sering dihubungkan dengan kerusakan sel
17
hati yaitu diantaranya Aspartat Aminotransferase (AST) yang biasa disebut SGOT
dan Alanine Aminotransferase (ALT) yang biasa disebut SGPT.Dengan
dilakukannya pengukuran enzim SGOT dan SGPT dapat mengidentifikasi
keamanan suatu zat yang masuk dan dimetabolisme oleh hati.Sekecil apapun
aktivitas aminotransferase di dalam darah tetap dapat terdeteksi. Apabila terjadi
gangguan dengan fungsi hati, enzim aminotransferase akan masuk ke peredaran
darah karena telah terjadi perubahan permeabilitas membrane sel sehingga kadar
enzim aminotransferase dalam darah akan meningkat (Tjokroprawiro, 2007:121).
SGOT dan SGPT akan mengalami peningkatan yang biasanya melebihi
batas normal karena adanya gangguan acute hepato cellular. Kadar SGPT
umumnya lebih tinggi dari kadar SGOT. Walaupun SGOT bukan merupakan
enzim yang spesifik yang berada pada hati, karena enzim ini dapat dijumpai pada
jantung dan juga otot, tetapi peningkatan aminotransferase lebih cepat dengan
diikuti oleh hiperbilirubinemia dibandingkan dengan albumin serum yang ada
pada hati.Hal ini disebabkan karena albumin serum umunya tidak menurun,
kecuali pada subakut yang lebih berat setelah minggu pertama penyakit.
a. SGOT/AST
Serum Glutamic Oxaloacetic Transaminase (SGOT) merupakan suatu
enzim yang mengkatalisir pemindahan reversible gugus alfa amino alanine
menjadi asam glutamate dan asam piruvat. Dimana enzim ini diperoleh
dengan kadar yang paling tinggi pada bagian sel hati dibandingkan dengan
sel-sel jantung dan otot. Sehingga lebih akurat untuk pemeriksaan dugaan
suatu acute hepato cellular.
Umumnya SGOT/AST diperiksa secara fotometri atau secara
spektofotometri,semi otomatis menggunakan fotometer atau
spektrofotometer, atau secara otomatis menggunakan chemistry analyzer.
Menurut Witri, 2014 Terdapat perbedaan nilai rujukan pada manusia dan
tikus untuk nilai SGOT yaitu sebagai berikut:
 Kisaran untuk Laki-laki: 8-48 U/L
 Kisaran untuk Perempuan: 10-36 U/L
 Kisaran untuk Tikus: 67,4-141 U/L
18
b. SGPT/ALT
Serum Glutamic Piruvic Transminase (SGPT) merupakan enzim yang
paling banyak ditemukan pada sel hati serta paling efektif untuk
mendiagnosis destruksi hepatoselular.
Kadar SGOT dan SGPT sangat mudah mengalami naik turun oleh
karena itu kadar SGOT dan SGPT yang berada di atas normal tidak selalu
menunjukkan adanya gangguan pada liver. Oleh karena itu perlunya
pengulangan lebih dari 2 kali dalam percobaan sangatlah penting untuk
dijadikan syarat dalam membuat kesimpulan.
Menurut Witri (2014), terdapat perbedaan nilai rujukan pada manusia
dan tikus untuk nilai SGP yaitu sebagai berikut:
 Kisaran untuk Laki-laki: 10-40 U/L
 Kisaran untuk Perempuan: 7-35 U/L
 Kisaran untuk Tikus: 40,5-90,7 U/L
Kadar SGOT dan SGPT sangat mudah mengalami naik turun oleh
karena itu kadar SGOT dan SGPT yang berada di atas normal tidak selalu
menunjukkan adanya gangguan pada liver. Perlunya pengulangan lebih dari 2
kali dalam percobaan sangatlah penting untuk dijadikan syarat dalam
membuat kesimpulan. SGPT umumnya diperiksa secara fotometri atau
spektrofotometri, secara semi otomatis atau otomatis (Wibowo, 2014).
2.5 Histopatologi Hati

Organ hati merupakan organ dalam tubuh terbesar dan merupakan pusat
metabolisme yang paling kompleks di dalam tubuh (Corwin, 2001).Kematian sel
dalam hati dapat bersifat reversibel atau ireversibel (Chandrasoma & Taylor,
2005).
1. Jejas reversible
a. Pembengkakan Sel
Pembengkakan adalah manifestasi pertama yang ada hampir pada semua
bentuk jejas sel, sebagai akibat pergeseran air ekstraseluler ke dalam sel, akibat
19
gangguan pengaturan ion dan volume karena kehilangan ATP (Chandrasoma &
Taylor, 2005).
Gambar 2.5.Pembengkakan sel disertai vakuolisasi; Ket: 1. Sel yang

MengalamiVakuolisasi; 2. Inti Sel Menggeser ke Tepi (Robbins
et al., 2007).
Saat air berlanjut tertimbun dalam sel, vakuol-vakuol kecil jernih tampak
berada dalam sitoplasma yang diduga merupakan retikulum endoplasma yang
melebar dan menonjol keluar atau segmen pecahannya.Gambaran jejas nonletal
ini kadang-kadang disebut degenerasi hidropik atau degenerasi vakuol (Robbins et
al., 2007).
b. Perlemakan Hati
Perlemakan hati merupakan akumulasi trigliserida dalam sel-sel parenkim
hati.Kerusakan hati ditandai dengan adanya jejas sel. Kematian sel-sel hati diawali
dengan adanya degenerasi sel pada hati.Degenerasi sel adalah perubahan struktur
sel normal sebelum terjadi kematian sel. Yang mana terdapat perubahan
morfologi sel akibat dari luka yang tidak mematikan (non letal injury) yang
bersifat reversible. Disebut reversible karena apabila rangsangan menimbulkan
cidera dapat dihentikan, maka nantinya sel akan kembali seperti semula. Tetapi
apabila prosesnya secara terus-menerus tanpa henti dan dengan dosis yang
berlebihan, maka hal tersebut dapat menyebabkan nekrosis dan kematian (Price &
Wilson, 1995).
Degenerasi terjadi akibat jejas sel dan kemudian baru timbul perubahan
metabolisme.Pada pemeriksaan, luas degenerasi lebih penting daripada jenis
degenerasi (Bhara, 2009). Berikut kerusakan-kerusakan pada hati meliputi:
20
1) Degenerasi hidropik, Fase ini ditandai dengan adanya vakuola-vakuola yang

berisi zat yang menyerupai cairan dalam sel. Adanya vakuola membuat
sitoplasma tidak terisi sempurna. Sel umumnya lebih besar, sinusoid hepar
tampak lebih sempit bila dibandingkan dangan keadaan normal.Degenerasi
ini bersifat reversible. Kerusakan sel hati ini bersifat sementara yang
disebabkan karena kurangnya nutrisi, ketuaan sel, maupun sebagai suatu cara
adaptasi sel hati terhadap terjadinya penigkatan metabolisme di dalam hati.
Keadaan ini dapat sembuh dan sel dapat kembali normal kembali.(Himawan,
1994).
2) Degenerasi lemak, Degenerasi lemak ditandai dengan adanya vakuola lemak
intrasitopplasmik yang disebabkan oleh gangguan metabolik dan defesiensi
faktor-faktor lipolitik yang penting. Fase terakhir dari degenerasi lemak
adalah sel hepar tampak berisi globuli lemak yang besar sehingga nukleus
terdasak ke tepi sel (Johty, 2011).
3) Degenerasi amiloid yaitu Penimbunan amiloid, suatu kompleks protein-
karbohidrat, tampak dalam celah dissie. Biasanya ditemukan pada penyakit
menahun seperti tuberkolosis (Himawan, 1994).
2. Jejas Ireversibel
a. Nekrosis
Nekrosis sel dapat terjadi langsung atau dapat mengikuti degenerasi sel
(jejas reversibel).Gambaran mikroskopik dari nekrosis dapat berupa
gambaran piknosis, karioreksis dan kariolisis.Berdasarkan lokasinya nekrosis
terbagi menjadi tiga yaitu nekrosis fokal, nekrosis zona, nekrosis
submasif.Nekrosis sel hati fokal adalah nekrosis yang terjadi secara acak pada
satu sel atau sekelompok kecil sel pada seluruh daerah lobulus-lobulus
hati.Dapat diketahui daerah lisis sel hati yang dikelilingi oleh kumpulan sel
kupffer dan sel radang.Nekrosis zona sel hati adalah nekrosis sel hati yang
terjadi pada regio-regio yang identik disemua lobulus hati, sedangkan
nekrosis submasif merupakan nekrosis sel haati yang meluas melewati batas
lobulus, sering menjembatani daerah portal dengan vena sentralis (bridging
necrosis) (Chandrasoma & Taylor, 2005).
21
b. Fibrosis
Fibrosis merupakan akumulasi matriks ekstraseluler yang merupakan
respon dari cedera akut atau kronik pada hati.Pada tahap awal, fibrosis
mungkin terbentuk di dalam atau di sekitar saluran porta atau vena sentralis
atau mungkin mengendap langsung didalam sinusoid (Robbins et al., 2007).
c. Sirosis
Sirosis merupakan berlanjutnya fibrosis dan cedera parenkim yang
dapat menyebabkan hepar terbagi-bagi menjadi nodus hepatosit yang
mengalami regenerasi dan dikelilingi oleh jaringan parut (Robbins dkk.,
2007).
2.6. Kerangka berfikir
Antibiotik adalah zat yang dapat membunuh atau menghambat pertumbuhan

bakteri.Antibiotik yang biasa digunakan untuk pengobatan oleh masyarakat dalam
upaya penurunan demam adalah golongan Chloramfenikol dan Ciprofloxacin
(Rampengan, 2013).
Tetapi apabila obat tersebut digunakan dalam jangka panjang dapat menimbulkan
resiko efek samping seperti resistensi bakteri terhadap antibiotik dan kerusakan hati.
Upaya untuk mengurangi dampak yang ditimbulkan oleh obat kimia yaitu dengan cara
mulai dilakukan penelitian obat tradisional mengenai kandungan yang terdapat di
dalam cacing tanah yaitu adanya zat antibakteri yang dapat menghambat pertumbuhan
bakteri pathogen dan menghambat pertumbuhan bakteri gram negatif(Sudiarto, 1999).
Cacing tanah yang paling banyak ditemukan di pulau jawa yaitu spesies Pheretima
javanica(Waluyo, 1994).
Cacing tanah (Pheretima javanica K.) berpotensi untuk mengobati demam yang
disebabkan oleh bakteri salah satunya bakteri Salmonella typhi karena adanya
kandungan senyawa bioaktif antimikroba peptide yang disebut Lumbricin (Waluyo,
2010).
22
Lumbricin dapat merusak membrane plasma bakteri dengan cara interaksi

elektrostatik dengan dinding sel bakteri sehingga terbentuk Multimeric Membrane
protein Poreyang mengakibatkan terganggunya permeabilitas membrane hingga
menyebabkan kematian sel (Willet et al., 2009).
Sebelum serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) dijadikan obat, perlu dilakukan
uji praklinik yaitu uji toksisitas subakut untuk mengetahui pengaruh serbuk tersebut
terhadap organ spesifik seperti hati.
Sebelum diujikan terhadap manusia, dilakukan pengujian terhadap hewan uji yaitu
tikus putih (Rattus norvegiccus) karena hewan ini termasuk dalam kelompok
mamalia, sehingga pengaruh yang ditimbulkan terhadap tikus putih ini hampir sama
dengan pengaruh yang akan diperoleh manusia nantinya.
Hati merupakan salah satu organ vital yang merupakan kelenjar terbesar yang paling
sensitive dalam mendeteksi adanya senyawa toksik yang masuk ke dalam tubuh.
Penentuan efek toksik ini dapat dilakukan dengan melihat gambaran histopatologi
hati dan kadar SGOT serta SGPT pada hati serta di dukung dengan pengamatan
morfologi pada tikus putih (Amir, 2014).
Parameter perubahan histopatologi hati yang diamati adalah terjadinya peradangan

(Guyton dan Hall, 2008). Hati yang sehat ditandai dengan fungsi yang secara baik,
ukuran serta kadar SGOT dan SGPT normal (Argalawa, 2005).
2.7 Hipotesis
Hipotesis dari penelitian ini adalah sebagai berikut:
a. Tidak ada pengaruh serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) kering
terhadap faal hatitikus putih (Rattus norvegicusB.).
b. Tidak ada pengaruh serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) kering
terhadap morfologi hati tikus putih (Rattus norvegicusB.).
c. Tidak ada pengaruh serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) kering
terhadap histopatologi hatitikus putih (Rattus norvegicusB.).
BAB 3. METODE PENELITIAN
3.1 Jenis Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratoris dikarenakan
pada penelitian ini digunakan perlakuan untuk memanipulasi objek penelitian
yang disertai dengan adanya kontrol. Ekperimen ini dilakukan dengan
menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL).
3.2 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Farmakologi Fakultas
Kedokteran Gigi Universitas Jember dan Laboratorium Mikrobiologi Program
Studi Pendidikan Biologi Universitas Jember.Penelitian ini dilakukan dengan
waktu yang dibutuhkan selama ± 90 hari.Penelitian ini dimulai pada bulan Juni
2017.
3.3 Identifikasi Variabel Penelitian

3.3.1 Variabel Bebas
Variabel bebas merupakan variabel yang dapat mempengaruhi atau
menjadi sebab perubahan timbulnya variabel terikat. Dalam penelitian ini
Variabel bebasnyaadalah varian dosis serbuk cacing tanah (Pheretima
javanicaK.) kering yang diinduksikan pada tikus putih (Rattus norvegicusB.).
3.3.2 Variabel Terikat
Variabel terikat adalah variabel yang dapat dipengaruhi atau menjadi
akibat karena adanya variabel bebas.Variabel terikat pada penelitian ini adalah
efek toksisitas subakut pada tikus putih (Rattus norvegicusB.) setelah diinduksi
oleh cacing tanah (Pheretima javanicaK.) kering dan diamati melalui gambaran
histopatologi hati dan fungsi faalhati serta ciri fisik dari tikus putih (Rattus
norvegicusB.).
23
24
3.3.3 Variabel Kontrol

Variabel kontrol adalah variabel yang dikendalikan sehingga hubungan
variabel bebas dan variabel terikat tidak dipengaruhi oleh faktor luar yang tidak
diteliti.Variabel kendali meliputi :
a. Umur hewan coba yang digunakan (6-8 bulan);
b. berat badan hewan coba yang digunakan (175-200 gram);
c. jenis kelamin hewan coba adalah jantan dan betina;
d. jenis hewan coba adalah tikus putih (Rattus norvegicusB.)jenis Wistar
strain;
e. Waktu perlakuan sekitar 3 bulan dilakukkan di Laboratorium Farmakologi
Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember;
3.4 Definisi Operasional

Definisi operasional digunakan untuk menjelaskan gambaran mengenai judul
yang ada di dalam penelitian. Berikut rincian dari definisi operasional penelitian:
a) Toksisitas subakut didefinisikan sebagai uji yang dilakukan terhadap hewan
uji dengan perlakuan memberikan serbuk cacing tanah (Pheretima
javanicaK.) kering sebanyak satu kali atau beberapa kali terhadap tikus
putih (Rattus norvegicusB.) yang diberikan dalam waktu 90 hari.
b) Lethal Dose (50%) merupakan tolok ukur kuantitatif toksisitas subakut,
dimana pada dosis tertentu mengakibatkan 50% kematian pada hewan uji
sehingga dapat ditentukan tingkat toksisitas dengan bahaya yang disebabkan
oleh zat kimia tertentu.
c) Serbuk cacing tanah (Pheretima javanicaK.) kering diperoleh dari cacing
tanah yang telah dikeringkan degan menggunakan suhu 40˚C selama 4 jam
kemudian dijadikan serbuk dengan menambahkan pelarut aquadest.
d) Tikus putih (Rattus norvegiccus B.) yang digunakan yaitu jenis strain wistar
dengan ciri-cirinya yang sehat, dewasa, tidak pucat dan pergerakannya
lincah, tidak terinfeksi bakteri sebelumnya.
e) Pengujian toksisitas subakut pada tikus putih (Rattus norvegicusB.) dengan
kriteria hewan uji yang berumur 6-8 bulan, berat 175-200 gram.
25
f) Histopatologi hati dilakukan untuk mengetahui pola jaringan dan gambaran

kerusakan serta perubahan yang ditimbulkan akibat pemberian serbuk
cacing tanah (Pheretima javanica K.) kering selama 90 hari pada organ hati.
Dalam penelitian ini yang diamati yaitu adanya kerusakan atau perubahan
berupa degenerasi dan nekrosis
g) Pemeriksaan SGOT dan SGPT yang merupakan enzim yang terdapat di
dalam hati yang digunakan untuk mengetahui adanya suatu acute hepato
celluler.
3.5 Jumlah Sampel

Jumlah total sampel hewan coba yang digunakan dalam penelitian ini
adalah tikus putih (Rattus norvegicus) sebanyak 50 ekor, 25 ekor jantan dan 25
ekor betina. Penentuan jumlah sampel minimal dengan menggunakan rumus besar
sampel eksperimental dari Federer (1995), dimana (t-1)(r-1) ≥ 15 perlakuan,
dimana t adalah jumlah perlakuan dan r adalah jumlah hewan coba tiap kelompok
perlakuan.
(t-1)(r-1) ≥ 15
(5-1)(r-1) ≥ 15
4(r-1) ≥ 15
r-1 ≥ 15
r-1 ≥ 3,75
r ≥ 3,75 + 1
r ≥ 4,75
Pada penelitian ini jumlah tikus yang digunakan sebanyak 10 ekor (5 ekor
tikus putih jantan dan 5 ekor tikus putih betina) untuk masing-masing perlakuan
(4 kelompok perlakuan dan 1 kelompok kontrol). Jadi total hewan uji pada
penelitian ini adalah 50 ekor tikus putih (25 ekor jantan dan 25 ekor betina).
Adapun rancangan penelitiannya adalah sebagai berikut:
26
Tabel 3.1 Rancangan Penelitian Uji Toksisitas Subakut Serbuk Cacing Tanah
(Pheretima javanicaK.) Kering Pada Tikus Putih (Rattus norvegicusB.)
Jantan.
Perlakuan Pengualangan
1 2 3 4 5
K(-) K(-). U1 K(-). U2 K(-). U3 K(-). U4 K(-). U5
P1 P1. U1 P1. U2 P1. U4 P1. U4 P1. U5
P2 P2. U1 P1. U2 P1. U4 P1. U4 P1. U5
P3 P3. U1 P1. U2 P1. U3 P1. U4 P1. U5
P4 P4. U1 P1. U2 P1. U3 P1. U4 P1. U5
Keterangan:
K(-) : Kontrol negatif
P1 : Perlakuan 1 (Induksi cacing tanah kering dengan dosis 1x g/KgBB)
U : Ulangan
Tabel 3.2 Rancangan Penelitian Uji Toksisitas Subakut Serbuk Cacing Tanah
(Pheretima javanicaK.) Kering Pada Tikus Putih (Rattus norvegicusB.)
Betina.
Perlakuan Pengualangan
1 2 3 4 5
K(-) K(-). U1 K(-). U2 K(-). U3 K(-). U4 K(-). U5
P1 P1. U1 P1. U2 P1. U4 P1. U4 P1. U5
P2 P2. U1 P1. U2 P1. U4 P1. U4 P1. U5
P3 P3. U1 P1. U2 P1. U3 P1. U4 P1. U5
P4 P4. U1 P1. U2 P1. U3 P1. U4 P1. U5
Keterangan:
K(-) : Kontrol negatif
U : Ulangan
3.6 Alat dan Bahan Penelitian

3.6.1 Alat Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian antara lain: sonde oral, timbangan
hewan, mikropipet 100 µL, tip kuning dan tip biru, kandang tikus, lemari es,
27
spuid, tempat pakan tikus, tempat minum tikus, blender, saringan simplisia cacing
tanah, dan kamera digital
3.6.2 Bahan Penelitian

Bahan yang digunakan adalah simplisia cacing tanah (Pheretima
javanicaK.) kering, Aquades, alkohol 75%,formalin, tikus putih (Rattus
norvegicus) jantan dan betina galur Wistar, pakan.
3.7 Prosedur Penelitian

3.7.1 Persiapan Pheretima javanica K. kering
Cacing tanah (Pheretima javanicaK.) dikering anginkan selama 6 hari
kemudian dioven pada suhu 400C selama 4 jam, diblender, dan ditimbang dengan
dosis yang telah dikonversikan dari dosis manusia ke tikus putihyaitu dengan
perbandingan 0,4, 0,8, 1,6, dan 3,2gram/0,2 KgBB.
3.7.2 Pengujian Tikus Putih (Rattus norvegicus)
a. Tahap Persiapan
Hewan coba yaitu tikus putih yang telah memenuhi kriteria sampel di atas, di
tempatkan dalam kandang dengan suhu ± 250C dan kelembapan 80%.
Kandang terbuat dari plastik dengan kawat dan beralaskan sekam kering.
Sekam kering tersebut diganti 3 hari sekali agar tidak kotor dan mengurangi
standart error. Hewan coba diaklimasikan selama 7 hari dengan tujuan untuk
menyeragamkan dan mengamati keadaan tikus putih awal sebelum dilakukan
perlakuan.
b. Pemeliharaan dan Perawatan
Pemeliharaan dan perawatan tikus putih dilakukan di Laboratorium
Farmakologi Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember. Hewan coba
diberi makan dan minum yang selalu tersedia. Dan sekam kering 2 hari
sekali diganti hal ini bertujuan untuk menjaga kesehatan tikus putih.Pakan
berupa makanan standart.
28
Tabel 3.3 Komposisi Pakan Jenis PLIP

Komposisi Presentasi
Protein 21%
Serat 4%
Lemak 4%
Air 14%
Abu 6,5%
Kalsium 0,9%-1,1%
Phospor 0,7%-0,9%
Sumber: Arixs, 2006.

c. Pengambilan darah awal
Pengambilan darah awal dilakukan dikarenakan untuk mengetahui kondisi
awal hewan coba ssebelum dikenai perlakuan apapun. Pengambilan darah ini
dilakukan melalui plexus retroorbitalis pada mata. Darah yang diambil ± 2 ml
dengan menggunakan hematokrit.
d. Uji laboraturium (Uji SGOT dan SGPT)
Pemeriksaan SGOT dan SGPT awal dilakukan sebelum perlakuan dimulai,
hal ini bertujuan untuk mengetahui kadar SGOT dan SGPT awal pada tikus
putih yang nantinya diakhir perlakuan akan dibandingkan kadarnya apakah
terjadi acute hepato cellular.
e. Pemuasaan
Setelah proses aklimatisasi dan pengukuran kadar SGOT/SGPT awal selesai
dilakukan, kemudian dilakukan pemuasaan (tidak diberikan makanan namun
tetap diberi minuman) selama semalam sebelum dilakukan pemejaan serbuk
cacing tanah terhadap hewan uji dan hewan uji diberi makan lagi seteah 3-4
jam pemejaan. Hal ini dilakukan untuk mengurangi pengaruh makanan
terhadap pemejaan bahan uji (OECD, 2001).
f. Dosis yang digunakan dalam Penelitian
Dosis yang digunakan dalam penelitian ini diperoleh berdasarkan dosis
optimal dari Uji Aktifitas Serbuk Cacing Tanah (Pheretima javanicaK.)
kering pada penelitian sebelumnya yaitu 0,4, 0,8, 1,6, 3,2 gram/ 0,2 KgBB .
29
g. Pemberian serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) kering.

Pemberian serbuk cacing tanah diberikan secara oral kepada tikus putih
(Rattus norvegicus B.) yang dilakukan sekali setiap hari selama 3 bulan.
Selama 3 bulan (90 hari) tikus diberi serbuk cacing tanah (Pheretima javanica
K.) kering dengan dosis 0,4, 0,8, 1,6, 3,2 gram/ 0,2 KgBB dosis optimal uji
aktivitas.
h. Pemeriksaan kadar SGOT dan SGPT tahap kedua
Pada akhir perlakuan dilakukan kembali pemeriksaan kadar SGOT dan
SGPT, hal ini dilakukan untuk membandingkan kadar pemeriksaan akhir
dengan kadar awal sebelum diberi perlakuan apapun.
i. Pembuatan preparat histopatologi hati
Pada hari ke 91 tikus kemudian dibedah dan diambil organ hatinya untuk
diperiksa dan dilakukanpembuatan preparat histopatologi hatinya.Menurut
Taryu (2005), pembuatan preparat organ hatisama halnya dengan pembuatan
preparat organ lain. Adapun langkah kerja pembuatan preparat organyaitu:
a. Pengambilan organ hati tikus putih (capturing), hati yang telah diambil
kemudian dicuci dengan menggunakan larutan NaCl 0,9%.
b. Pemotongan spesimen
1) Spesimen yang dipilih untuk diperiksa histopatologinya, dipotong
setebal 0,5-1 cm.
2) Potongan spesimen dimasukkan dalam keranjang pemrosesan lalu diberi
label nomor spesimen menggunakan bolpoint.
c. Perendaman (embedding) dan Pencetakan (block)
Embeddingmerupakan proses penanaman sampel dalam parafin. Proses
ini harus dilakukan dekat sumber panas agar parafin tidak membeku.
Selanjutnya, sampel diletakkan ke dalam cetakan yang berisi parafin cair
ukurannya setengah dari dinding cetakan.Kemudian setelah sampel
diletakkan barulah ditutup lagi dengan menggunakan parafin lagi
diatasnya.Selanjutnya parafin disimpan dalam lemari es agar segera
membeku.
30
Embedding cassete yang telah diisi spesimen jaringan dimasukkan ke

dalam tissue processor dengan pengaturan waktu yang telah di uraikan
pada Tabel 3.4.
Tabel 3.4 Prosedur Tissue Processor dan Pengaturan Waktu
No. Proses Reagensia Waktu
1 Fiksasi Buffer formalin 10% 2 jam
2 Fiksasi Buffer formalin 10% 2 jam
3 Dehidrasi Alkohol 70% 1 jam
8 Clearing Toulen 1 jam
9 Clearing Toulen 1,5 jam
10 Clearing Toulen 1,5 jam
11 Impreagnasi Parafin 2 jam
12 Impreagnasi Parafin 3 jam
Total waktu 20 jam
Sumber: Susanti, 2015.
d. Pemotongan
Setelah parafin membeku, selanjutnya dilakukan pemotongan
setebal 4 µm dengan menggunakan mikrotom, sehingga diperoleh
permukaan yang rata.Selanjutnya memilih jaringan yang paling bagus
kualitasnya dari pita-pita tersebut dengan menggunakan
mikroskop.Kemudian potongan yang terpilih direntangkan diatas kaca
objek yang sudah diberi lem haup pada kisaran suhu 40°C (Susanti, 2015).
e. Pewarnaan
Pewarnaan sampel dengan menggunakan Hematoksilin Eosin (HE).
Adapun proses pewarnaannya yaitu:
1) Sebelum pewarnaan dilakukan semua bahan harus diperiksa
2) Tahap pewarnaan
31
Tabel 3.5 Tahap Pewarnaan Mayers Hematoxylin Eosin

No. Reagensia Waktu
1 Xylol I 2 menit
2 Xylol II 2 menit
3 Alkohol 100% I 1 menit
4 Alkohol 100% II 1 menit
5 Alkohol 95% I 1 menit
6 Alkohol 95% II 1 menit
7 Mayer’s Hematoxylin 15 menit
8 Rendam dalam Tap Water 20 menit
9 Masukkan ke dalam eosin 15 detik-2 menit
10 Alkohol 95% III 2 menit
11 Alkohol 95% IV 2 menit
12 Alkohol 100% III 2 menit
13 Alkohol 100% IV 2 menit
14 Alkohol 100% V 2 menit
15 Xylol III 2 menit
16 Xylol IV 2 menit
Sumber: Susanti, 2015.
3) Setelah pewarnaan selesai, selanjutnya dilakukan coverslipping yaitu
menyiapkan coverslips secukupnya sesuai dengan jumlah preparat yang
baru diwarnai dan meneteskan 1-2 entellan pada setiap coverslip. Pada
proses penutupan preparat dengan slide harus berhati-hati agar tidak
terbentuk gelembung udara. Setelah menutup preparat lalu slide
dibersihkan dengan xylol, kemudiandiberi label sesuai jenis perlakuan.
Selanjutnya melakukan pengamatanmenggunakan mikroskop.
j. Pengamatan histopatologi
Pengamatan histopatologi hati dilkakukan setelah satu hari pembuatan
preparat. Pengamatan menggunakan mikroskop dengan perbesaran objektif
4X, 10X, 20X, dan 40X. Pengamatan preparat histologi hati dengan
mikroskop cahaya menggunakan perbesaran 400 kali (Susanti, 2015).
3.8Analisis Data
3.8.1 Analisis Data Penelitian
Teknik analisis data untuk mengetahui nilai LD50 dan kisaran nilainya
dengan menggunaka metode metode Thomson dan Weil, metode ini mulai
32
digunakan pada tahun 1952 dan memiliki beberapa kelebihan, diantaranya

memiliki tingkat kepercayaan yang tinggi, selain itu metode ini sering digunakan
karena tidak memerlukan hewan percobaan yang cukup banyak. Metode ini sangat
sederhana dan menggunakan daftar perhitungan LD50 sehingga lebih akurat
(Supriyono, 2007: 13)
Dalam pengukuran kadar SGOT dan SGPT analisis yang digunakan adalah
analisisUji Paired-Sample T-test pada taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui
apakah terdapat pengaruh pemberian serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.)
terhadap perubahan kadar SGOT/SGPT awal dan akhir, yang apabila nilai
signifikansi yang di dapat cederung lebih rendah dari nilai signifikan, maka
terdapat pengaruh pemberian serbuk cacing tanah terhadap fungsi hati dan faal
hati.
Data yang diperoleh dari pengaruh pemberian serbuk cacing tanah
(Pheretima javanica K.) kering terhadap gambaran histopatologi hati dengan
melihat tingkat kerusakan hati dan pengamatan terhadap preparat histopatologi
hati tikus putih (Rattus norvegicus B.) yang dianalisis secara deskriptif. Untuk
membedakan tingkat keparahan dan memudahkan dalam analisis maka penilaian
diklasifikasikan dalam empat tingkatan dengan skor sebagaiberikut:
Tabel 3.6 Skor derajat histopatologi hati
Tingkat Perubahan Skor

Normal 1
Degenerasi Parenkimatosa 2
Degenerasi hidrofobik 3
Nekrosis 4
Sumber: Insani,2015
Keterangan:
1. Tidak terjadi degenerasi (sel hati normal, sel hepatosit tersusunreguler)
2. Degenerasi parenkimatosa (adanya penimbunan lemak dalam parenkim
hepar, dapat berupa bercak, zonal dan merata.
3. Degenerasi hidrofobik (ditandai dengan penumpukan air di dalam sel.
Pada prinsipnya sama dengan bengkak keruh, tetapi tingkat kerusakan
jaringan yang ditimbulkan lebih berat dengan jangka waktu yang lebih
33
lama) (Sudatri,2016)
4. Nekrosis (perubahan pada sel-sel hepatosit tersusun irreguler, tampak
tanda nekrosis). Meliputi piknosis, karioksis dankariolisis.
3.9 Alur Penelitian

Cacing tanah Tikus putih (Rattus norvegicus)
(Pheretima javanicaK.)
Aklimasi pada hari ke 1-7 dengan

Dicuci bersih dengan air mengalir pemberian makan dan minum
Dikeringanginkan selama 6 hari Pengambilan darah pada mata untuk

dan di oven selama 4 jam pada penentuan kadar SGOT/SGPT awal
suhu 400C
Uji perlakuan selama 90 hari

Di blender hingga halus dan di
saring
Ditimbang dengan perbandingan

dosis 0,4 g; 0,8 g; 0,16 g; dan 3,2
g/KgBB
Serbuk cacing tanah(Pheretima

javanica) kering dengan berbagai K (-) P1 P2 P3 P4
dosis di induksikan pada tikus
putih (Rattus norvegiccus) dan
dilarutkan dengan aquadest
Pengambilan darah pada mata untuk
menentukan kadar SGOT/SGPT akhir
Pengamatan Pengamatan morfologi hati dan Pembuatan

Analisis Data
Mikroskop preparat histopatologi Hati
Pembahasan Kesimpulan
Gambar 3.4 Diagram Alur Penelitian

BAB 4. HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Penelitian

Penelitian toksisitas subakutini bertujuan untuk mengetahui pengaruh serbuk
cacing tanah (Pheretima javanica K.) kering terhadap kadar SGOT dan SGPT,
morfologi hati serta terhadap gambaran histopatologi hati tikus putih (Rattus
norvegiccus B.). penelitian ini telah dilakukan pada bulan Juni sampai Oktober 2017
yang bertempat di Laboraturium Farmakologi Fakultas Kedokteran Gigi Universitas
Jember, Laboraturium Piramida, Laboraturium Biomolekuler Fakultas Kedokteran,
Laboraturium Biologi FKIP Universitas Jember. Penelitian ini dilakukan selama 90
hari dengan parameter morfologi hati, peningkatan kadar SGOT dan SGPT sebelum
dan sesudah perlakuan serta dengan melihat gambaran preparat histopatologi untuk
mengetahui efek pemberian serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) terhadap
fungsi hati.
Setelah dilakukan proses aklimatisasi selama 7 hari, hewan uji diambil
darahnya untuk mengetahui kadar SGOT dan SGPT awal. Lalu pada hari berikutnya
hewan uji mulai diberi perlakuan dengan disonde menggunakan serbuk cacing tanah
(Pheretima javanica K.) kering selama 90 hari. Pada hari terakhir perlakuan hewan
uji diambil kembali sampel darahnya untuk mengetahui kadar SGOT dan SGPT
akhir yang mana untuk dibandingkan hasilnya dengan sebelum perlakuan. Setelah
diperoleh hasil data, selanjutnya adalah menganalisis masing-masing data. Untuk
mencari nilai LD50dapat diperoleh dengan menggunakan metode Thomson and Weil,
untuk data SGOT dan SGPT dianalisis dengan menggunakan paired sample T-test
untuk mengetahui pengaruh pemberian sebuk cacing tanah (Pheretima javanica K.)
sebelum dan sesudah perlakuan, sedangkan untuk gambaran histopatologi hati dapat
dianalisis secara deskriptif.
Penelitian ini menggunakan 50 ekor tikus putih (Rattus norvegicus B.) yang
terbagi menjadi 5 kelompok. Adapun hasil penelitian disajikan selengkapnya sebagai
berikut:
34
35
4.1.1 Nilai dan Kisaran Lethal Dosis (LD50)

Berdasarkan pengamatan yang telah dilakukan selama 90 hari setelah
dilakukan pengujian serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) kering dengan
menggunakan beberapa varian dosis diantaranya 0,4, 0,8, 16, 3,2 gram Kg/BB. Hasil
pengamatan kematian tikus putih pada berbagai tingkat dosis disajikan dalam tabel
berikut:
Tabel 4.1 Jumlah Kematian Tikus Putih setelah pemberian serbuk cacing tanah
(Pheretima javanica K.)
Perlakuan Jumlah Jumlah Kematian

Ulangan
1 2 3 4 5
K- jantan 0 0 0 0 0 0
K- betina 0 0 0 0 0 0
P1 jantan 0 0 0 0 0 0
P1 betina 0 0 0 0 0 0
P2 jantan 0 0 0 0 0 0
P2 betina 0 0 0 0 0 0
P3 jantan 0 0 0 0 0 0
P3 betina 0 0 0 0 0 0
P4 jantan 0 0 0 0 0 0
P4 betina 0 0 0 0 0 0
Pada tabel 4.1 diatas diperoleh hasil kematian hewan uji yang telah diberi perlakuan
berupa pemberian serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) selama 90 hari.
Dalam hal ini tiap hewan uji yang mati, didata jumlah kematian tiap kelompok uji,
waktu kematian serta analisis penyebab kematian di pembahasan. Data ini sangat
diperlukan untuk dalam perhitungan nilai LD50 maupun kisaran LD50 dengan selang
waktu 90 hari. Dapat terlihat pada tabel diatas, tidak terdapat tikus yang mati pada
semua kelompok perlakuan sehingga nilai LD50 dalam selang waktu 90 hari yang
didapatkan merupakan nilai LD50 semu. Tanpa dilakukan perhitungan menggunakan
metode Thomson dan Weil, nilai LD50 sudah dapat ditentukan yakni lebih dari 5000
mg/KgBB yang menurut Globally Harmonized Classification System (GHS) masuk
ke dalam kategori praktis tidak toksik sehingga aman untuk dikonsumsi. Hasil
pengujian LD50 serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) kering dipengaruhi
oleh beberapa faktor. Faktor-faktor tersebut diantaranya strain, spesies, keragaman
36
individu, jenis kelamin, umur, berat badan, cara pemberian, kesehatan hewan, dan
lingkungan (Balls et al, 1991).
4.1.2 Pengukuran kadar SGOT dan SGPT

Untuk mengetahui adanya pengaruh atau tidak dari pemberian serbuk cacing
tanah (Pheretima javanica K.), data pengamatan ini di uji dengan paired-sample T
test dengan taraf kepercayaan 95%. Hasilnya jika sig. (2-tailed) > 0,05 maka serbuk
cacing tanah (Pheretima javanica K.) kering tidak berpengaruh terhadap kadar
SGOT dan SGPT tikus putih (Rattus norvegicus B.). Berikut perbandingan rata-rata
hasil pemeriksaan SGOT dan SGPT sebelum dan sesudah perlakuan kelima
kelompok serta hasil analisis dengan menggunakan paired sampel T test dapat dilihat
pada tabel berikut.
Tabel 4.2 Hasil pemeriksaan kadar SGOT dan SGPT tikus betina sebelum dan
sesudah pemberian serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) selama 90 hari
No Kode tikus tiap Nilai SGOT (U/L) Nilai SGPT (U/L)

perlakuan
Sebelum Sesudah Sebelum Sesudah
1 K- 99,2 98,4 70,8 67,8
2 P1 67,6 69 59,2 58,8
3 P2 77,8 76,8 63,4 59,6
4 P3 88 89,8 59,4 55,2
5 P4 96 99 63,4 64,4
Tabel 4.3 Hasil uji Paired Sampel T-testkadar SGOT Betina
H0 = tidak ada pengaruh serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.)

terhadap kadar SGOT tikus putih betina (Rattus norvegicus B.)
H1 = ada pengaruh serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) terhadap
kadar SGOT tikus putih betina (Rattus norvegicus B.)
37
Dari hasil analisis tersebut dapat diketahui bahwa nilai sig. (2-tailed)>0,05,
maka dapat dinyatakan bahwa tidak terdapat perbedaan yang signifikan pada
kadar SGOT tikus putih betina (Rattus norvegicus B.) dengan taraf kepercayaan
95%. Oleh karena itu H0 diterima yang artinya tidak ada pengaruh serbuk cacing
tanah (Pheretima javanica K.) kering terhadap kadar SGOT tikus putih betina
(Rattus norvegicus B.)
Tabel 4.4HasilUji PairedSample T-test Kadar SGPT Betina
H0 = tidak ada pengaruh serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) kering
terhadap kadar SGPT tikus putih betina (Rattus norvegicus B.)
H1 = ada ada pengaruh serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) terhadap
kadar SGPT tikus putih betina (Rattus norvegicus B.)
kadar SGPT tikus putih betina (Rattus norvegicus B.) dengan taraf kepercayaan
tanah (Pheretima javanica K.) kering terhadap kadar SGPT tikus putih betina
(Rattus norvegicus B.).
Tabel 4.5 Hasil pemeriksaan kadar SGOT dan SGPT tikus jantan sebelum dan
sesudah pemberian serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) selama 90 hari
No Kode tikus tiap Nilai SGOT (U/L) Nilai SGPT (U/L)
perlakuan
Sebelum Sesudah Sebelum Sesudah
1 K- 86,8 87 55 55,8
2 P1 83,6 84,8 58,8 58,6
3 P2 96,6 96 63,6 62,4
4 P3 90,2 90,8 63,8 64,8
5 P4 76,8 78,2 68 66,4
38
Tabel 4.6HasilUji PairedSample T-test Kadar SGOT Jantan

terhadap kadar SGOT tikus putih jantan (Rattus norvegicus B.)
kadar SGOT tikus putih jantan (Rattus norvegicus B.)
kadar SGOT tikus putih jantan (Rattus norvegicus B.) dengan taraf kepercayaan
tanah (Pheretima javanica K.) kering terhadap kadar SGOT tikus putih jantan
Tabel 4.7HasilUji PairedSample T-test Kadar SGPT Jantan

terhadap kadar SGPT tikus putih jantan (Rattus norvegicus B.)
kadar SGPT tikus putih jantan (Rattus norvegicus B.).
kadar SGPT tikus putih jantan (Rattus norvegicus B.) dengan taraf kepercayaan
tanah (Pheretima javanica K.) kering terhadap kadar SGPT tikus putih jantan
39
4.1.3 Morfologi hati tikus putih (Rattus norvegicus B.)

Dari hasil pengamatan morfologi hati antara kelompok kontrol dengan
kelompok perlakuan memiliki gambaran morfologi yang sama baik jika dilihat
dari warnanya, bentuknya, dan struktur permukaannya. Tidak terdapat perbedaan
antara hati pada kelompok kontrol dan pada kelompok perlakuan betina.
(a) (b)
(c)
(d) (e)
Gambar 4.1.Morfologi hati tikus betina. a=kontrol, b=0,4 gr/Kg BB, c=0,8 gr/Kg
BB, d=1,6 gr/Kg BB, e= 3,2 gr/ Kg BB.
(a) (b) (c)

40
(d) (e)
Gambar 4.2.Morfologi hati tikus jantan. a=kontrol, b=0,4 gr/Kg BB, c=0,8 gr/Kg
BB, d=1,6 gr/Kg BB, e= 3,2 gr/ Kg BB.
Tabel 4.8 Tabel Pengamatan Morfologi Hati

Ulangan
Perlakuan
1 2 3 4 5
K Jantan v
K Betina v
P1 Jantan v
P1 Betina v
P2 Jantan v
P2 Betina v
P3 Jantan v
P3 Betina v
P4 Jantan v
P4 Betina v
4.1.4 Gambaran histopatologi sel hati tikus putih (Rattus norvegicus B.)
Pemeriksaan histopatologi sel hati meliputi pemeriksaan ada atau tidaknya
kerusakan sel hati dengan adanya tanda-tanda degenerasi sel yang meliputi
degenerasi hidrofobik, degenerasi parenkimatosa, dan degenerasi lemak serta adanya
kerusakan sel yang berupa nekrosis yang kemudian dapat ditarik kesimpulan
terhadap kesan derajat kerusakan sel hati yang dapat dianalisis secara deskriptif.
Hasil pemeriksaan histopatologi hati tikus putih setelah diberi serbuk cacing
tanah (Pheretima javanica K.) kering secara oral dapat dilihat pada tabel berikut:
41
Tabel 4.9 Hasil pemeriksaan perubahan histopatologi hati tikus putih setelah perlakuan
Perlakuan Ulangan Skoring
1 2 3 4 5
K- jantan - 1 - - - 1
K- betina - - 1 - - 1
P1 jantan 1 - - - - 1
P1 betina - - - 1 - 1
P2 jantan - - - - 1 1
P2 betina 1 - - - - 1
P3 jantan - - - 1 - 1
P3 betina - 1 - - - 1
P4 jantan - - 1 - - 1
P4 betina - - - - 1 1
Berdasarkan tabel di atas dapat diketahui hasil penelitian mengenai toksisitas

subakut serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) kering terhadap gambaran
histopatologi hati terlihat pada kelompok kontrol negatif K- jantan pada ulangan satu
sampai lima diambil preparat pada ulangan kedua dengan hasil skoring 1 yang
menunjukkan bahwa sel dalam keadaan normal. Pada kelompok perlakuan P1 jantan
diambil preparat pada ulangan pertama dengan hasil skoring 1 yang menunjukkan
bahwa sel dalam keadaan normal. Begitupun dengan pada kelompok kontrol negatif
K- betina pada ulangan satu sampai lima diambil preparat pada ulangan ketiga
dengan hasil skoring 1 yang menunjukkan bahwa sel dalam keadaan normal. Pada
kelompok perlakuan P1 betina diambil preparat pada ulangan keempat dengan hasil
skoring 1 menunjukkan bahwa sel dalam keadaan yang normal.
Hasil pengamatan mikroskopis yang mewakili masing-masing kelompok
perlakuan dapat dilihat pada gambar 4.3 sampai 4.12.
42
Gambar 4.3 Gambaran histopatologi sel hati Kelompok Kontrol (-) jantan
perbesaran 400x (A: Vena sentralis, B: Sinusoid, C: Hepatosit)
Gambar 4.4 Gambaran histopatologi sel hati Kelompok Kontrol (-) betina
perbesaran 400x (A: Vena sentralis, B: Sinusoid, C: Hepatosit)
43
Gambar 4.5 Gambaran histopatologi sel hati Kelompok Dosis 0,4 gram/ Kg BB
jantan perbesaran 400x (A: Vena sentralis, B: Sinusoid, C: Hepatosit)
betina perbesaran 400x (A: Vena sentralis, B: Sinusoid, C: Hepatosit)
44
Gambar 4.8 Gambaran histopatologi sel hati KelompokDosis 0,8 gram/ Kg BB

45
46
4.2 Pembahasan
4.2.1 Nilai Kisaran Potensi Ketoksikan (LD50) Serbuk Cacing Tanah (Pheretima
javanica K.)
Salah satu tahapan uji toksisitas sub akut adalah pengujian LD50. Tahap
pengujian ini berfungsi untuk mengetahui tingkat ketoksikan suatu bahan alami.
Dalam hal ini penentuan nilai LD50 merupakan tahap awal untuk mengetahui
47
tingkat toksisitas suatu bahan, dalam hal ini bahan yang dimaksud adalah serbuk
cacing tanah (Pheretima javanica K.). Terdapat banyak kandungan di dalam
cacing tanah, salah satunya yaitu terdapat protein, yang diantaranya terdiri dari 26
macam asam amino serta memiliki senyawa bioaktif antimikroba peptide yaitu
lumbricin I yang mengandung prolin 15% dari total berat kering. Dalam hal ini
diketahui bahwa protein bukanlah merupakan senyawa yang bersifat toksik bagi
tubuh, melainkan suatu senyawa yang diperlukan oleh tubuh. Tetapi dalam hal ini,
apabila jumlah protein yang terdapat dalam tubuh terlalu berlebihan
dikhawatirkan dapat memberikan suatu efek tertentu bagi tubuh. Oleh karena itu
perlu dilakukan uji toksisitas sub akut yang merupakan uji lanjutan dari uji
toksisitas akut untuk mengetahui kelayakan penggunaan serbuk cacing tanah
(Pheretima javanica K. ) kering sebagai suatu obat yang dapat dikatakan efektif
apabila digunakan dalam jangka waktu yang lama.
Berdasarkan hasil penelitian nilai LD50 dalam selang waktu sekitar 90 hari
menunjukkan bahwa tidak ada hewan uji yang mati, hal ini menunjukkan bahwa
dosis yang diberikan merupakan dosis yang aman serta tidak menimbulkan efek
toksik walaupun hewan uji deberi dosis tertinggi yaitu dosis keempat sebesar 3,2
gram Kg/BB. Dalam penelitian ini tidak ada kematian pada hewan uji.
Dapat disimpulkan berdasarkan uraian di atas bahwa hasil dari pengujian
LD50 dengan selang waktu 90 hari serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.)
pada tikus secara oral lebih besar dari 5000 mg/KgBB yang berdasarkan kategori
Globally Harmonized Classification System (GHS) termasuk ke dalam kategori
praktis tidak toksik. Dalam hal ini bukan hanya pengujian LD50 yang digunakan
untuk menilai toksisitas suatu bahan obat atau zat. Pengujian ini juga di dukung
oleh pengujian morfologi hati tikus, faal hati tikus putih, yang berupa pengukuran
kadar SGOT dan SGPT yang bertujuan untuk mengetahui efek dari pemberian
serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) terhadap fungsi hati. Serta di dukung
pula dengan gambaran histopatologi yang terlihat adanya degenerasi dan nekrosis
pada sel hati.
48
4.2.2 Nilai kadar SGOT dan SGPT Tikus Putih (Rattus norvegicus B.)
Dalam penelitian ini, organ yang paling peka terhadap adanya kerusakan
yang ditimbulkan oleh zat toksik adalah organ hati. Hati merupakan salah satu
organ vital yang memiliki peranan penting dalam metabolisme melalui sifat
beberapa sistem enzim yang terlibat dalam transformasi biokimia. Apabila terjadi
kerusakan pada organ hati dapat dilihat melalui peningkatan kadar SGOT dan
SGPT yang mengalami peningkatan secara signifikan yaitu 3-5 kali dari nilai
normal, sehingga dapat diketahui adanya gangguan pada hati. Apabila dalam
kondisi normal kadar SGOT dan SGPT berada dalam jumlah yang stabil. Untuk
mengetahui bagaimana pengaruh sebuk cacing tanah (Pheretima javanica K.)
terhadap tubuh, apakah terdapat efek yang ditimbulkan pada salah satu organ
spesifik seperti hati, maka perlu dilakukan pengujian kadar SGOT dan SGPT.
Dalam penelitian ini digunakan 30 ekor tikus, yang terbagi menjadi 5
kelompok, satu kelompok kontrol dan 4 kelompok perlakuan. Yang terdiri dari 15
jantan dan 15 betina. Masing-masing kelompok perlakuan terdiri dari beberapa
varian dosis yaitu mulai dari 0,4, 0,8, 1,6 dan 3,2 gram Kg/BB. Seluruh hewan uji
memperoleh perlakuan selama 90 hari. Pada awal mula setelah tikus sampai di
Lab. Farmakologi tikus di letakkan dalam kandang, lalu kemudian tikus
diaklimatisasi selama sekitar 7 hari agar tikus dapat beradaptasi dengan
lingkungan yang baru. Pada hari kedelapan sebelum dilakukan perlakuan tikus
diambil darahnya pada bagian vena mata untuk melihat nilai SGOT dan SGPT
awal sebelum dilakukannya perlakuan. Terlihat pada hasil pengukuran SGOT dan
SGPT bahwa hasil yang diperoleh normal. Nilai rata-rata SGOT dan SGPT
menunjukkan bahwa tidak terdapat peningkatan yang signifikan sebelum dan
sesudah perlakuan. Apabila dibandingkan dengan kelompok kontrol hasil yang
diperoleh kelompok perlakuan tidak jauh berbeda dengan kelompok kontrol dan
masih berada dalam kisaran yang normal. Untuk mengetahui peningkatan yang
terjadi cukup signifikan atau tidak, maka perlu dilakukan uji Paired Sampel T-test
untuk mengetahui apakah terdapat pengaruh pemberian serbuk cacing tanah
(Pheretima javanica K.) kering terhadap kadar SGOT dan SGPT awal maupun
akhir.
49
Dari uji Paired Sampel T-test, diperoleh nilai signifikansi pada tikus betina
antara nilai SGOT awal dan akhir sebesar 0,439>0,05. Karena nilai signifikansi
sebesar 0,439 lebih besar dari 0,05 maka dapat disimpulkan bahwa pemberian
serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) tidak berpengaruh secara signifikan
terhadap kadar SGOT sehingga tidak dapat menyebabkan peningkatan nilai
SGOT dan tidak berpengaruh terhadap fungsi hati dengan kata lain tidak
menyebabkan efek toksik terhadap fungsi hati. Sedangkan uji Paired Sampel T-
Test pada nilai SGPT betina awal dan akhir diperoleh nilai sebesar 0,102>0,05.
Karena nilai signifikansi sebesar 0,102 lebih besar dari 0,05 maka dapat
disimpulkan bahwa pemberian serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) tidak
berpengaruh secara signifikan terhadap kadar SGPT sehingga tidak dapat
menyebabkan peningkatan nilai SGPT dan tidak berpengaruh terhadap fungsi hati
dengan kata lain tidak menyebabkan efek toksik terhadap fungsi hati.
Sedangkan hasil dari uji Paired Sampel T-test pada tikus jantan, diperoleh
nilai signifikansi antara nilai SGOT awal dan akhir sebesar 0,427>0,05. Karena
nilai signifikansi sebesar 0,427 lebih besar dari 0,05 maka dapat disimpulkan
bahwa pemberian serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) tidak berpengaruh
secara signifikan terhadap kadar SGOT sehingga tidak dapat menyebabkan
peningkatan nilai SGOT dan tidak berpengaruh terhadap fungsi hati dengan kata
lain tidak menyebabkan efek toksik terhadap fungsi hati. Sedangkan uji Paired
Sampel T-testpada nilai SGPT jantan awal dan akhir diperoleh nilai sebesar
0,797>0,05. Karena nilai signifikansi sebesar 0,797 lebih besar dari 0,05 maka
dapat disimpulkan bahwa pemberian serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.)
tidak berpengaruh secara signifikan terhadap kadar SGPT sehingga tidak dapat
menyebabkan peningkatan nilai SGPT dan tidak berpengaruh terhadap fungsi hati
dengan kata lain tidak menyebabkan efek toksik terhadap fungsi hati.
Dalam penelitian ini, kelompok kontrol merupakan kelompok yang tidak
diinduksi oleh serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) kering dan hanya
diinduksi oleh aquaedes saja. Hasil penelitian pada kelompok kontrol betina
diperoleh nilai kadar SGOT sebelum sebesar 99,2 dan sesudah sebesar 98,4 U/L,
nilai kadar SGPT sebelum sebesar 70,8 dan sesudah sebesar 67,8 U/L. Sedangkan
50
pada kelompok kontrol jantan diperoleh nilai kadar SGOT sebelum sebesar 86,8
dan sesudah sebesar 87 U/L, nilai kadar SGPT sebelum sebesar 55 dan sesudah
sebesar 55,8 U/L. Hal ini menunjukkan bahwa pada kelompok kontrol nilai SGOT
dan SGPT terlihat normal. Pada kadar SGOT kelompok betina terlihat penurunan
antara sebelum dan sesusah perlakuan, begitu pula dengan pada SGPT juga
terlihat penurunan antara sebelum dan sesudah perlakuan. Sedangkan pada
kelompok kontrol jantan antara sebelum dan sesudah terdapat kenaikan pada
kadar SGOT yaitu sebesar 0,2, begitu pula pada kadar SGPT terdapat kenaikan
sekitar 0,8. Kenaikan pada kadar SGOT dan SGPT ini masih wajar terjadi, karena
kenaikan tidak sampai 3 kali lipat nilai aslinya.
Pada kelompok perlakuan dalam penelitian ini digunakan 4 kelompok
dosis, yaitu pada perlakuan pertama digunakan dosis 0,4 gram Kg/BB. Pada
kelompok betina diperoleh nilai SGOT sebelum sebesar 67,6 dan sesudah sebesar
69 U/L, nilai kadar SGPT sebelum sebesar 59,2 dan sesudah sebesar 58,8 U/L.
Sedangkan pada kelompok jantan diperoleh nilai SGOT sebelum sebesar 83,6 dan
sesudah sebesar 84,8 U/L, nilai kadar SGPT sebelum sebesar 58,8 dan sesudah
sebesar 58,6 U/L. Diperoleh hasil pada kelompok betina untuk kadar SGOT
mengalami kenaikan sekitar 1,4, begitupun dengan kadar SGPT mengalami
kenaikan sekitar 0,6. Sedangkan pada kelompok jantan untuk kadar SGOT
mengalami kenaikan sekitar 1,2, dan untuk kadar SGPT mengalami penurunan
sekitar 0,2. Hal ini terlihat bahwa pada perlakuan pertama menunjukkan kadar
nilai SGOT dan SGPT berada dalam keadaan yang normal, karena nilai pada
sebelum dan sesudah perlakuan tidak menunjukkan perubahan yang signifikan.
Pada kelompok perlakuan yang kedua digunakan dosis 0,8 gram Kg/BB.
Pada kelompok betina diperoleh nilai SGOT sebelum sebesar 77,8 dan sesudah
sebesar 76,8 U/L, nilai kadar SGPT sebelum sebesar 63,4 dan sesudah sebesar
59,6 U/L. Sedangkan pada kelompok jantan diperoleh nilai SGOT sebelum
sebesar 96,6 dan sesudah sebesar 96 U/L, nilai kadar SGPT sebelum sebesar 63,6
dan sesudah sebesar 62,4 U/L. Diperoleh hasil pada kelompok betina untuk kadar
SGOT mengalami penurunan sekitar 1, begitupun dengan kadar SGPT mengalami
penurunan sekitar 3,8. Sedangkan pada kelompok jantan untuk kadar SGOT
51
mengalami penurunan sekitar 0,6, dan untuk kadar SGPT mengalami penurunan
sekitar 1,2. Hal ini terlihat bahwa pada perlakuan kedua menunjukkan kadar nilai
SGOT dan SGPT berada dalam keadaan yang normal, karena nilai pada sebelum
dan sesudah perlakuan tidak menunjukkan perubahan yang signifikan.
Pada kelompok perlakuan yang ketiga digunakan dosis 1,6 gram Kg/BB.
Pada kelompok betina diperoleh nilai SGOT sebelum sebesar 88 dan sesudah
sebesar 89,8 U/L, nilai kadar SGPT sebelum sebesar 59,4 dan sesudah sebesar
55,2 U/L. Sedangkan pada kelompok jantan diperoleh nilai SGOT sebelum
sebesar 90,2 dan sesudah sebesar 90,8 U/L, nilai kadar SGPT sebelum sebesar
63,8 dan sesudah sebesar 64,8 U/L. Diperoleh hasil pada kelompok betina untuk
kadar SGOT mengalami kenaikan sekitar 1,8, dan kadar SGPT mengalami
penurunan sekitar 4,2. Sedangkan pada kelompok jantan untuk kadar SGOT
mengalami kenaikan sekitar 0,6, dan untuk kadar SGPT mengalami kenaikan
sekitar 1. Hal ini terlihat bahwa pada perlakuan ketiga menunjukkan kadar nilai
SGOT dan SGPT berada dalam keadaan yang normal, karena nilai pada sebelum
dan sesudah perlakuan tidak menunjukkan perubahan yang signifikan.
Pada kelompok perlakuan yang keempat digunakan dosis 3,2 gram
Kg/BB. Pada kelompok betina diperoleh nilai SGOT sebelum sebesar 96,4 dan
sesudah sebesar 99 U/L, nilai kadar SGPT sebelum sebesar 63,4 dan sesudah
sebesar 64,4 U/L. Sedangkan pada kelompok jantan diperoleh nilai SGOT
sebelum sebesar 76,8 dan sesudah sebesar 78,2 U/L, nilai kadar SGPT sebelum
sebesar 68 dan sesudah sebesar 66,4 U/L. Diperoleh hasil pada kelompok betina
untuk kadar SGOT mengalami peningkatan sekitar 2,6, begitupun dengan kadar
SGPT mengalami peningkatan sekitar 1. Sedangkan pada kelompok jantan untuk
kadar SGOT mengalami peningkatan sekitar 1,4, dan untuk kadar SGPT
mengalami penurunan sekitar 1,6. Hal ini terlihat bahwa pada perlakuan keempat
menunjukkan kadar nilai SGOT dan SGPT berada dalam keadaan yang normal,
karena nilai pada sebelum dan sesudah perlakuan tidak menunjukkan perubahan
yang signifikan.
Peningkatan kadar SGOT dan SGPT yang terjadi dapat dikarenakan
banyak faktor penyebab,antara lain karena pengaruh hormonal dan metabolisme
52
yang berbeda pada tiap hewan uji juga mempengaruhi perbedaan kadar SGOT dan
SGPT, faktor lainnya, bisa dari faktor luar tubuh seperti faktor pengambilan
sampel darah, cara pengambilan darah pada area jalur intra-vena dapat
menurunkan kadar. karena pada saat hewan uji diambil darahnya melalui vena
reorbitalis pada mata dengan menggunakan hematocrit, kemungkinan kadar
SGOT dan SGPT dapat menurun. Namun pengambilan darah ini juga dapat
meningkatkan kadar SGOT dan SGPT dikarenakan trauma pada hewan uji yang
ditimbulkan akibat pengambilan darah tidak sekali tusuk (Donatus, 2005).
4.2.3 Morfologi Hati Tikus Putih (Rattus norvegiccus B.)

Terlihat pada pengamatan morfologi hati tikus putih (Rattus norvegicus
B.), bahwa seluruh gambaran morfologi hati terlihat normal, mulai dari kelompok
kontrol hingga kelompok perlakuan. Dapat terlihat pada kelompok kontrol betina
bahwa morfologi hati yang terlihat tampak berwarna merah kecoklatan dengan
strukur permukaannya yang kenyal. Hal ini sesuai dengan teori yang menyatakan
bahwa bentuk hati mirip dengan piramid, berwarna merah kecoklatan dengan
struktur permukaan yang kenyal. Terlihat ukuran hati memiliki proporsi yang
sesuai. Begitupun dengan kontrol jantan terlihat morfologi hati yang tampak
berwarna merah kecoklatan dengan strukutur permukaan yang kenyal. Pada
kelompok perlakuan dengan dosis terendah 0,4 betina maupun jantan terlihat pula
hasil yang sama dengan pada kelompok kontrol. Terlihat morfologi hati berwarna
merah kecoklatan dengan struktur permukaan yang kenyal. Begitupun dengan
kelompok perlakuan dosis 0,8 betina maupun jantan terlihat hasil yang sama yaitu
hati berwarna merah kecoklatan dengan struktur permukaan yang kenyal. Pada
kelompok perlakuan dosis 1,6 betina maupun jantan terlihat hati berwarna merah
kecoklatan dengan struktur permukaan yang kenyal. Pada kelompok perlakuan
dengan dosis 3,2 betina maupun jantan terlihat hati berwarna merah kecoklatan
dengan sturuktur permukaan kenyal. Terlihat bahwa hasil yang diperoleh pada
semua kelompok memiliki hasil yang sama normalnya dibandingkan dengan
literatur. Hal ini menunjukkan bahwa serbuk cacing tanah (Pheretima javanica
K.) tidak berpengaruh terhadap morfologi hati tikus putih (Rattus norvegicus B.).
53
4.2.4 Gambaran Histopatologi Sel Hati Tikus Putih (Rattus norvegicus B.)
Dapat dipaparkan hasil pengamatan histopatologi hati tikus putih (Rattus
norvegiccus B.), diperoleh hasil bahwa tidak terdapat perbedaan antara kelompok
kontrol dengan kelompok perlakuan (P1, P2, P3, P4) yang dapat dilihat pada hasil
pengamatan gambar 4.2-4.11. Secara umum tidak terdapat pengaruh yang
diberikan oleh serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) kering terhadap
gambaran histopatologi hati tikus putih (Rattus norvegicus B.). Hal ini terlihat
pada semua preparat mulai dari kelompok kontrol hingga kelompok perlakuan
mulai dari dosis yang paling rendah 0,4 gram Kg/BB hingga dosis yang paling
tinggi yaitu 3,2 gram Kg/BB diperoleh hasil bahwa seluruh sel hati tikus putih
dalam kondisi yang normal dan tidak terdapat kerusakan berupa degenerasi
maupun nekrosis. Hal ini menunjukkan bahwa serbuk cacing tanah (Pheretima
javanica K.) kering aman untuk di konsumsi (tidak menimbulkan efek toksik)
dalam jangka waktu yang lama.
Proses pemeriksaan preparat histopatologi dilakukan secara mikroskopik
dengan menggunakan perbesaran 100x hingga 400x. Berdasarkan hasil penelitian
yang telah diperoleh dapat diketahui bahwa tidak terdapat perubahan pada sel hati
pada kelompok kontrol maupun pada kelompok perlakuan. Dapat terlihat pada
preparat histopatologi bahwa sel terlihat normal tanpa adanya kerusakan. Pada sel
hati tampak terlihat adanya vena porta, sinusoid dan hepatosit di dalam sel hati.
Dalam pembuatan preparat histopatologi hati dari kelompok kontrol hingga
kelompok perlakuan menunjukkan preparat yang baik. Hal ini terlihat bahwa
dalam proses fiksasi tidak terjadi kesalahan. Fiksasi merupakan langkah awal
yang menjadi penentu keberhasilan dalam pengolahan suatu jaringan. Apabila
dalam tahap awal ini terjadi kerusakan untuk masuk pada proses selanjutnya akan
sulit untuk diperbaiki kembali. Sehingga hasil yang diperoleh tentu tidak sesuai
dengan yang diharapkan (Astiwulan, 2011).
Menurut Yunalda (2016), terdapat suatu cara fiksasi yang benar
diantaranya adalah segera memasukkan jaringan yang telah diangkat dari tubuh
untuk dimasukkan ke dalam cairan fiksasi. Volume dari cairan fiksasi sebaiknya
54
15-20 kali volume jaringan. Untuk jaringan yang kecil dapat langsung
dimasukkan ke dalam pot yang telah berisi cairan fiksasi kemudian ditutup rapat,
sedangkan untuk jaringan yang besar dibuat sejajar terlebih dahulu sebelum
dimasukkan ke dalam wadah yang telah berisi cairan fiksasi. Hal ini bertujuan
agar fiksasi jaringan dapat terpejar secara merata sehingga proses autolisis dan
pembusukan jaringan dapat dihindari. Apabila organ direndam terlalu lama dalam
larutan formalin dapat menyebabkan kerapuhan pada jaringan sehingga saat akan
dipotong menggunakan mikrotom akan mengalami kesusahan (Pratiwi, 2015).
Dapat terlihat pada preparat kelompok kontrol betina dan jantan, terlihat
sel sehat dan tampak adanya vena sentralis, sinusoid dan hepatosit. Pada
gambaran histopatologi kelompok kontrol betina memperoleh skor 1 yang artinya
tidak terjadi degenerasi maupun nekrosis (sel hati normal, sel hepatosit tersusun
reguler). Begitupun dengan pada kelompok perlakuan, dengan dosis 0,4, 0,8, 1,6
dan 3,2 diperoleh hasil yang sama dengan pada kelompok kontrol. Terlihat pada
preparat kelompok perlakuan dengan skor 1 yang artinya tidak terjadi degenerasi
maupun nekrosis (sel hati normal, sel hepatosit tersusun reguler).
BAB 5. PENUTUP
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil uraian pembahasan, dapat diperoleh kesimpulan sebagai
berikut:
a. Hasil dari pengujian LD50 serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.)
pada tikus dengan selang waktu 90 hari lebih besar dari 5000 mg/KgBB
yang berdasarkan kategori GHS termasuk kategori praktis tidak toksik.
b. Tidak terdapat pengaruh serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.)
kering terhadap kadar SGOT dan SGPT tikus putih (Rattus norvegicus B.)
c. Tidak terdapat pengaruh serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.)
kering terhadap morfologi hati tikus putih (Rattus norvegiccus B.)
d. Tidak terdapat pengaruh serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.)
kering terhadap gambaran histopatologi hati tikus putih (Rattus
norvegiccus B.)
5.1 Saran
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai serbuk cacing tanah
(Pheretima javanica K.) yaitu berupa uji klinik fase 1 untuk mengetahui
keamanan serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.).
55
DAFTAR PUSTAKA
Adnan. 1992. Pengaruh mangostin terhadap fungsi reproduksi mencit (Mus

musculus) Swiss Webster betina. Tesis Pascasarjana Biologi ITB. p.
5-13 & 54-62.
Agustinus, M. D. 2009. Jurnal Tingkah Laku Cacing Tanah.

http://edukasi.kompasiana.com. (Diakses pada 10 Agustus 2016).
Ahmed, Mohammad Fazil & Rao, A. Srinivasa. 2013.“Comparative

Hepatoprotective Activities of Selected Indian Medicinal Plants.
Global Journal Of Medical Research Pharma, Drug Disovery,
Toxicology and Medicine. ISSN: 2249-4618. Vol. 13 (2)
Alfiansyah M. (2008). Pengaruh Pemberian Boraks (Na2B4O7.10H2O)

Terhadap Perubahan Struktur Histologis Sel. Hati Mencit (Mus
musculus).Skripsi tidak diterbitkan: 4-21.
Amir, Nursinah. 2014. Keamanan Pangan Produk Jambal Roti Ikan Manyung
(Arius thalassinus Ruppel) yang terpapar Sipermetrin. Proposal
Penelitian Disertasi. Malang: Program Study Ilmu Perikanan dan
Kelautan Minat Teknologi Hasil Perikanan Universitas Brawijaya.
Astuti.Y.S. 2008.Pengaruh frekuensi pencekokan ekstrak daun mangga

(Mangifera indica L.) pada tahap praimplantasi terhadap fertilitas
tikus putih betina (Rattus norvegicus) galur Sprague Dawley.Skripsi
Sarjana Pendidikan Biologi.UHAMKA.
Affandi, 1996. Pengaruh penggunaan media sampah rumah tangga dengan

berbagai tingkat umur pengomposan dan waktu pemeliharaan
terhadap biota cacing tanah jenis Lumbricus rubelus, Tesis yang tidak
dipublikasikan, Jurusan Biologi FMIPA, UNPAD, Bandung, pp14-17.
Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia (BPOM RI). 2014.
Pedoman Uji Toksisitas Nonklinik Secara In Vivo. Jakarta: BPOM RI.
Bhara, Makna L.A. 2009. Pengaruh Pemberian Kopi Dosis bertingkat per oral 30
hari Terhadap gamabaran Hisropatologi hepar Tikus Wistar. Artikel
Karya Tulis Ilmiah. Semarang: Fakultas Kedokteran Universitas
Diponegoro.
Bredo, RM. 2011. Anatomy of the Liver In Wistar Rat (Rattus norvegicus). Jurnal
International J. Morphol. Hal 77.
56
57
Chandrasoma, P. dan Taylor , C. R. 2005. Ringkasan Patologi Anatomi. Jakarta:

EGC
Clarke, E.G.C. and M.L. Clarke. 1975. Veterinary Toxicology Cassell and
Collver. Mc Millan Publishers Ltd, London.
Darmawan S. 2003. Hati dan Saluran Empedu.Jakarta: Fakultas Kedokteran

Universitas Indonesia.
Dondin, S. et al. 2005.Efek Antipeuritik Cacing Tanah. Bandung: FMIPA ITB
Farina M. 2007.Gambaran Histopatologi Hepar Tikus Wistar Setelah Pemberian

Asetaminofren Berbagai Dosis. Skripsi Fakultas Kedokteran
Universitas Diponegoro: Semarang Hal 21.
Ganong W.F 2003.Buku Ajar Fisiologi Kedokteran, Edisi 2. Jakarta: EGC
Gayatri, Anggi, Purwanty, Astuty. 2013. Penggunaan Lumbrokinase sebagai

Fibrinolitik dan anti Trombotik Oral.Jurnal Continuing Medical
Education. Vol 40(3)
Gibson, J. 2003. Fisiologi dan Anatomi Modern. Jakarta: EGC.
Green, L. Earl. 1996. Biology of the Laboratory Mouse Second Revised Edition.
New York: Dover Publication Inc.
Guyton, A. C & Hall, J.E. 2008.Buku Ajar fisiologi Kedokteran. Jakarta: Penerbit
Buku Kedokteran EGC.
Harmita, Maksum kadji. 2008. Buku Ajar Analisis Hayati. Edisi ke 3. Jakarta:
Penerbit Buku Kedokteran. ECG.
Hayati, A. 1995.Diversitas dan Kelimpahan Cacing tanah dalam hubungannya

dengan tanah dan Vegetasi di daerah Surabaya. Surabaya: Unair.
Hidayat, A., W. Chistijanti, A. Marianti. 2013. Pengaruh Vitamin E Terhadap

Kadar SGPT dan SGOT Tikus putih galur Wistar yang di papar
timbale. Unnes J Life Vol 2 (1).
Himawan, S. 1994. Patologi. Edisi 1, Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.

Jakarta. Hal.226-149.
Ian. 2009. Toksikologi.

http://igdrsudbuol.blogspot.com/2009/3/toksikologi.html.diakses
tanggal 24 April 2017.
58
Jeharatnam, David koh.2005. Bahan Ajar Praktik Kedokteran Kerja ed 1. Jakarta:

EGC.
Jothy L. Subramanion., Lau Ling Yee. 2011. Acute Oral Toxicity of Methanolic
Seed Extract Of Casia Fistula in Mice. Journal of Molecules. 16,
5268-5282. Issn 1420-3049.
Juhryyah S. 2008. Gambaran Histopatologi Organ Hati dan Ginjal Tikus pada
Intoksikasi Akut Insektisida (Metofluthrin, D-phenothrin, D- Alletrin)
dengan Dosis Bertingkat.Skripsi Fakultas Kedokteran Hewan IPB;
Bogor .Hal 43.
Junqueira, L.C., Carneiro, J. 2003. Basic Histology: Text&Atlas, 11 th Edition,

New York: McGraw-Hill Inc.
Khairulman dan Amri, K. 2009.Mengeruk untung dari beternak cacing.Cetakan

pertama. Jakarta: PT. AgroMedia Pustaka. Hal 1, 9, 16, 26.
Kimberg. 1867. Klasifikasi Pheretima Javanica www.ITIS.gov. (Diakses 22 April

2017)
Lorgue G, Lechnet J, Riviere A. 1996. Clinical Veterinary Toxicology. Oxford:
Blackwell Science.
Lu F.C., 1995. Toksikologi Dasar, Ed. 2. Jakarta: UI-Press.
Lu F.C., 2009. Basic Tocxicology: Fundamental, Target Organs and Risk

Assesment 5th edition, Informa Healtcare USA, New York: Informasi
Healthcare USA, Inc.
Malole, M. B. M. dan C. S. Pramono.1989. Penggunaan Hewan-hewan

Percobaan Laboratorium.Departemen Pendidikan dan Kebudayaan.
Direktorat Jendral Pendidikan Tinggi Pusat Antar Universitas
Bioteknologi. Institut Pertanian Bogor, Bogor
Olefsky JM. 1975. Effect of dexamethasone on insulin binding, glucose transport,

and glucose oxidation of isolated rat adipocytes. J Clin Invest.
Palungkun, R. 2008. Sukses Beternak Cacing Tanah Lumbricus rubellus. Jakarta:

Penebar Swadaya.
Palungkun, R. 2010. Usaha ternak Cacing Tanah Lumbricus rubellus. Jakarta:

Penebar Swadaya.
59
Price, S. A. dan Wilson, L. M. 2005.Patofisiologi Konsep Klinis Proses-proses

penyakit. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Price, Sylvia Anderson & Wilson, Lorraine McCarty. 2006. Patofisiologi: Konsep
Klinis Proses-proses Penyakit. Ed 4 Buku 1&2. Terjemahan dari
Pathophysiologhy. Clinical Consepts Of Disease Processes. Alih
Bahasa. Peter Anugerah. Jakarta: Penerbit Buku EGC.
Priyanto. 2010. Toksikologi Mekanisme, Terapi Antidotum, dan Penilaian Resiko.

Depok: Penerbit Leskonfi.
Qodriyati, Yaumil, Sulistyani, Yuwono. 2016. Kadar Serum Glutamic

Oxaloacetic Transminase (SGOT) pada Tikus Wistar (Rattus
norvegiccus) jantan yang di peroleh dari Rasa Sakit Electrical Foot
Shock selama 28 hari. Jurnal Pustaka Kesehatan. Vol 4 (no.1).
Rampengan T.H, Laurentz. I. R. 2007. Demam typhoid. Dalam: Rempengan TH,

penyunting. Penyakit infeksi tropik pada anak.Edisi ke-2. Jakarta:
EGC. h.64
Rukmana, R. 1999. Budidaya Cacing Tanah, Yogyakarta: Penerbit Kanisius.
Robbins, A.A dan Kumar, V.M.D. 2007.Buku ajar Patologi 1 Edisi 4. Jakarta:
EGC.
Rofina, Afira, et al. 2014. PROFIL DARAH TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus)
YANG DIINFEKSIKAN Trypanosoma evansi DAN DIBERIKAN
EKSTRAK KULIT BATANG JALOH (Salix tetrasperma
Roxb).Jurnal Kedokteran Hewan. 8(2).
Roslim, D. I., D. S. Nastiti, dan Herman.2013. Karakter Morfologi dan

Pertumbuha tiga jenis cacing tanah lokal Pekanbaru pada dua macam
Media Pertumbuhan.Biosaintifika: Journal of Biology and Biology
Education. 5(1).1-9.
Schmitz, G., H. Lepper, dan M. Heidrich. 2009. Farmakologi dan Toksikologi

Edisi 3. Jakarta: Penerbit Buku kedokteran EGC.
Schnellman, RG. 2001. Toxic responses of the kidney In klassen CD casarett and
doull’s toxicology the basic science of poisons 6th ed. Kansas: Mc graw Hill.
Sherlock S. Penyakit hati dan saliran empedu, cetakan kedua. Jakarta: PT. Arkans,
2004.
60
Smith, J dan Mangkoewidjojo, S. 1998. Pemeliharaan pembiakan dan

Penggunaan Hewan percobaan di Daerah Tropis. Jakarta: Universitas
Indonesia Press.
Sunarto. 2008. Cacing tanah sebagai obat Alternatif penurunan demam Typoid
pada tikus putih (Rattus novegiccus). Skripsi. Jember: Universitas
Jember.
Soenanto.2008. Budidaya Cacing Tanah Lumbricus rubellus. Solo: Aneka.
Sudiarto, 1999.Peranan cacing tanah dalam pengelolaan sampah dan sebagai

sumber pendapatan masyarakat.Materi DIKLAT Budidaya Cacing Tanah.
Susanti, Elvi. 2015. Gambaran Histopatologi Hati Tikus Putih (Rattus

norvegiccus) yang diberi insektisida Golongan Piretroid
(Sipermetrin).Skripsi. Makassar: Universitas Hasanuddin.
Syahruddin. 2013. Penentuan Aktivitas Enzim SGOT dan SGPT pada Hewan Uji
Kelinci yang telah diberi Ekstrak Tiram Crassostrea iredelei Asal Pantai
Takalar Sulawesi Selatan. Seminar Nasional Kefarmasian II oleh STIF A
Makassar.
Tjokroprawira, A. 2007. Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Surabaya: Airlangga

University Press.
Tsung Fu-Yuan, Chan Yu-Kwuo, 2014. Earthworm (Pheretima aspergillum)

Extract Stimulates Osteoblast Activity and Inhibits Osteoclast
Differentiation.Journal Complementary & Alternative Medicine.14: 440.
Waluyo, 1993.Distribusi dan Kepadatan Cacing Tanah Lumbricus luberus.

Jember: Universitas Jember.
Waluyo J, 1994. Distribusidan kepadatan cacing tanah di daerah Jember,

Penelitian yang tidak dipublikasikan, Jember.
Waluyo J, 1998. Laporan Penelitian, Pengaruh Cacing tanah Ponthoscolex

corenthurus, Pheretima javanica dan Pheretima capensis terhadap
pengomposan serasah daun sebagai Alternatif Penanggulangan
sampah. Jember: Departement Pendidikan dan Kebudayaan RI
Universitas Jember, Lembaga Penelitian tahun 1998-1999.
Waluyo J, 2003. Uji potensi berbagai macam pelarut ekstrak dan berbagai spesies
cacing tanah terhadap pertumbuhan berbagai macam bakteri.Jurnal
Saintifika. 4(3): 218-226.
61
Waluyo J, 2004. Uji potensi di berbagai macam pelarut ekstrak dan berbagai
spesies cacing tanah terhadap pertumbuhan berbagai macam
bakteri.Jurnal Saintifika. 5(1): 155-163. Jember: Universitas Jember.
Waluyo. 2006. Karakterisasi Protein Antibakteri dari cacing tanah Pheretima
javanica. Jurnal Saintifika. 7(2): 165-178. Jember: Universitas
Jember.
Waluyo, J, et al,. 2007. Purifikasi dan Karakterisasi Protein Antibakteri dari

Pheretima javanica. Jurnal ILMU DASAR. Vol.8 No.1 (37-44).
Waluyo, Joko., Supriyanto., Slmaet. 2010. Deteksi, Isolasi dan Karakteristik

Senyawa anti Bakteri Pheretima javanica (Horts) sebagai Obat Tipus
(secara in vivo). Penelitian Hibah Bersaing DP2M Dikti.
Wibowo, Witri., Lilik., Retno. 2014. Pengaruh Pemberian Perasan Buah

Mengkudu (Morinda citrifolia) terhadap kadar SGOT dan SGPT Tikus
Putih (Rattus norvegicus) Diet Lemak. Jurnal Kesehatan. Vol 6 (No.
1)
Wolfensohn, S. E. dan Lloyd, M. H., 2003, Handbook of Laboratory Animal

Management and Welfare, 3rd edition, Blackwell Science, Oxford, h. 85-
86.
WHO. 2013. Tradisional Medicine Strategy 2014-2023. Geneva: World Health

Organization
Yusuf, Hanifah. 2011. Uji toksisitas akut Ekstrak Daun Etanol Daun Klausena (
Clausena anisata Hook.f.) Jurnal Kedokteran sylah kual. 11(1):4
Zikrul. 2015. Mamalia. Lebih dekat dengan makhluk menyusui. Bandung: Bestart.

Prof Joko Isi

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Prof Joko Isi

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

PENGARUH SERBUK CACING TANAH (Pheretima javanicaK.

Ayu Rheina Firdauzi

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI

HALAMAN JUDUL ......................................................................................... i

3.7 Prosedur Penelitian ............................................................................ 27

3.8 Analisis Data ........................................................................................ 31

2.1 Morfologi cacing tanah (Pheretima javanica K.) .......................................... 8

3.1Rancangan Penelitian Pada Tikus Jantan ..........................................................31

1.1 Latar belakang

alam maupun dari sampah limbah pembuangan penduduk sebagaimana habitat

(Sherlock, 2004).Hati juga memiliki keterbatasan fungsi detoksifikasi sebagai

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang yang telah diuraikan sebelumnya, rumusan

1.3 Batasan Masalah

1.5 Manfaat Penelitian

2.1Cacing tanah (Pheretima javanica K.)

2.1.1 Klasifikasi Cacing tanah (Pheretima javanicaK.)

2.1.2 Morfologi Cacing tanah (Pheretima javanica K.)

Gambar 2.1 Morfologi cacing tanah (Pheretima javanica K.) (Sumber:

2.1.3 Fisiologi Cacing tanah (Pheretima javanica K.)

Cacing tanah memperoleh oksigen (O2) dan melepaskan karbondioksida

2.1.4. Kandungan dan Manfaat cacing tanah (Pheretima javanica K.)

Cacing tanah (Pheretima javanica K.) memiliki senyawa bioaktif

2.2 Tikus Putih (Rattus norvegiccusB.)

2.2.2 Morfologi (Rattus norvegicusB.)

2.3 Uji Toksisitas

2.4. Hati (Hepar)

abdominal.Permukaan hati pada bagian anteriornya dibatasi oleh lengkungan

2.4.1 Anatomi hati

Gambar 2.3 Hati Tikus (Bredo & Vazquez, 2011)

2.4.2. Fisiologi hati

2.4.3 Histologi hati

membentuk struktur seperti labirin dan busa.Celah diantara 14 lempeng-lempeng

Gambaran 2.4.Histologi normal hepar tikus.LiPa: liver parenchyma, PoTr:

Sinusoid hati adalah saluran yang berliku–liku dan melebar, diameternya

2.4.4 Enzim Aminotransaminase pada hati

2.5 Histopatologi Hati

Gambar 2.5.Pembengkakan sel disertai vakuolisasi; Ket: 1. Sel yang

1) Degenerasi hidropik, Fase ini ditandai dengan adanya vakuola-vakuola yang

2.6. Kerangka berfikir

Antibiotik adalah zat yang dapat membunuh atau menghambat pertumbuhan

Lumbricin dapat merusak membrane plasma bakteri dengan cara interaksi

Parameter perubahan histopatologi hati yang diamati adalah terjadinya peradangan

3.1 Jenis Penelitian

3.2 Tempat dan Waktu Penelitian

3.3 Identifikasi Variabel Penelitian

3.3.3 Variabel Kontrol

3.4 Definisi Operasional

f) Histopatologi hati dilakukan untuk mengetahui pola jaringan dan gambaran

3.5 Jumlah Sampel

3.6 Alat dan Bahan Penelitian

3.6.2 Bahan Penelitian

3.7 Prosedur Penelitian

Tabel 3.3 Komposisi Pakan Jenis PLIP

Sumber: Arixs, 2006.

g. Pemberian serbuk cacing tanah (Pheretima javanica K.) kering.

Embedding cassete yang telah diisi spesimen jaringan dimasukkan ke

Tabel 3.5 Tahap Pewarnaan Mayers Hematoxylin Eosin

digunakan pada tahun 1952 dan memiliki beberapa kelebihan, diantaranya

Tingkat Perubahan Skor

3.9 Alur Penelitian

Aklimasi pada hari ke 1-7 dengan

Dikeringanginkan selama 6 hari Pengambilan darah pada mata untuk

Uji perlakuan selama 90 hari