Caspase

Domain caspase

Struktur caspase-1 (CASP1), awalnya disebut interleukin-

1 beta-converting enzyme (ICE), caspase manusia
pertama yang diidentifikasi.[1]
Pengidentifikasi
Simbol Peptidase_C14
Pfam PF00656
Klan Pfam CL0093
InterPro IPR002398
PROSITE PS50208
MEROPS C14
SCOP 1ice
LUAR BIASA 1ice

showStruktur protein yang tersedia:

Caspase (as protease artistik ysteine asp , as arte aspirasi protein yste asp atau aren yang diarahkan oleh
proteate artate yang bergantung pada protein) adalah keluarga enzim protease yang memainkan peran
penting dalam kematian sel terprogram (termasuk apoptosis , piroptosis , dan nekroptosis ) . Mereka
dinamai caspases karena aktivitas spesifik sistein protease - sistein di tempat aktifnya menyerang
secara nukleofilik dan membelah protein target hanya setelah residu asam aspartat . Pada 2009, ada 11
atau 12 caspases yang dikonfirmasi pada manusia [catatan 1] dan 10 pada tikus, melakukan berbagai fungsi
seluler.

Peran enzim ini dalam kematian sel terprogram pertama kali diidentifikasi pada tahun 1993, dengan
fungsi mereka dalam apoptosis yang ditandai dengan baik. Ini adalah bentuk kematian sel terprogram,
terjadi secara luas selama pengembangan, dan sepanjang hidup untuk
mempertahankan homeostasis sel. Aktivasi Caspases memastikan bahwa komponen seluler terdegradasi
secara terkendali, sehingga menyebabkan kematian sel dengan efek minimal pada jaringan di
sekitarnya. [3]

Caspases memiliki peran lain yang diidentifikasi dalam kematian sel terprogram
seperti pyroptosis dan necroptosis . Bentuk-bentuk kematian sel ini penting untuk melindungi suatu
organisme dari sinyal stres dan serangan patogen. Caspases juga memiliki peran dalam peradangan, di
mana ia langsung memproses sitokin pro-inflamasi seperti pro- IL1β . Ini adalah molekul pemberi sinyal
yang memungkinkan rekrutmen sel imun ke sel atau jaringan yang terinfeksi. Ada peran diidentifikasi
caspases lainnya seperti proliferasi sel, penekanan tumor , diferensiasi sel, pengembangan saraf dan
bimbingan akson dan penuaan. [4]

Kekurangan caspase telah diidentifikasi sebagai penyebab perkembangan tumor. Pertumbuhan tumor
dapat terjadi dengan kombinasi faktor, termasuk mutasi pada gen siklus sel yang menghilangkan
hambatan pada pertumbuhan sel, dikombinasikan dengan mutasi pada protein apoptopik seperti
Caspases yang akan merespon dengan menginduksi kematian sel dalam sel yang tumbuh secara tidak
normal. [5] Sebaliknya, aktivasi beberapa caspase yang berlebihan seperti caspase -3 dapat menyebabkan
kematian sel yang terprogram secara berlebihan. Ini terlihat pada beberapa penyakit neurodegeneratif
di mana sel-sel saraf hilang, seperti penyakit Alzheimer . [5] Caspase yang terlibat dalam pemrosesan
sinyal inflamasi juga terlibat dalam penyakit. Aktivasi caspases yang tidak memadai ini dapat
meningkatkan kerentanan organisme terhadap infeksi, karena respons imun yang tepat mungkin tidak
diaktifkan. [5]Caspases peran integral bermain dalam kematian dan penyakit sel telah menyebabkan
penelitian tentang penggunaan caspases sebagai target obat. Misalnya, inflamasi caspase-1 telah
terlibat dalam menyebabkan penyakit autoimun ; obat yang menghalangi aktivasi Caspase-1 telah
digunakan untuk meningkatkan kesehatan pasien. Selain itu, para ilmuwan telah menggunakan caspases
sebagai terapi kanker untuk membunuh sel-sel yang tidak diinginkan pada tumor. [6]

Klasifikasi fungsional caspases [ sunting ]

Kebanyakan kaspas berperan dalam kematian sel terprogram. Ini dirangkum dalam tabel di bawah
ini. Enzim-enzim tersebut diklasifikasikan ke dalam tiga jenis: Penggagas, Penuntut, dan Peradangan. [7]

Kematian Sel yang Diprogram Jenis Caspase Enzim Organisme

Caspase 2 manusia dan tikus
Caspase 8 manusia dan tikus
Pemrakarsa
Caspase 9 manusia dan tikus
Apoptosis Caspase 10 hanya manusiawi [8]
Caspase 3 manusia dan tikus
Algojo Caspase 6 manusia dan tikus
Caspase 7 manusia dan tikus
Caspase 1 manusia dan tikus
Caspase 4 manusia [catatan 2]
Caspase 5 manusia [catatan 2]
Piroptosis Radang
Caspase 11 mouse [note 2]
Caspase 12 mouse dan beberapa manusia [catatan 1]
Caspase 13 hanya ternak [10]
Peran lainnya Lain Caspase 14 manusia dan tikus
Perhatikan bahwa selain apoptosis, Caspase-8 juga diperlukan untuk menghambat bentuk lain dari
kematian sel terprogram yang disebut Necroptosis . Caspase-14 berperan dalam diferensiasi keratinosit
sel epitel dan dapat membentuk penghalang epidermis yang melindungi terhadap dehidrasi dan radiasi
UVB. [11]

Aktivasi caspases [ sunting ]

Caspases disintesis sebagai zymogen tidak aktif (pro-caspases) yang hanya diaktifkan mengikuti stimulus
yang sesuai. Tingkat kontrol pasca-translasi ini memungkinkan pengaturan enzim yang cepat dan ketat.

Aktivasi melibatkan dimerisasi dan seringkali oligomerisasi pro-caspases, diikuti oleh pembelahan
menjadi subunit kecil dan subunit besar. Subunit besar dan kecil bergabung satu sama lain untuk
membentuk caspase heterodimer aktif. Enzim aktif sering ada sebagai heterotetramer di lingkungan
biologis, di mana dimer pro-caspase dibelah bersama untuk membentuk heterotetramer. [12]

Dimerisasi [ sunting ]

Aktivasi caspases inisiator dan caspases inflamasi dimulai dengan dimerisasi, yang difasilitasi oleh
pengikatan pada protein adaptor melalui motif interaksi protein-protein yang secara kolektif disebut
sebagai lipatan kematian . Lipatan kematian terletak di domain struktural dari caspases dikenal sebagai
pro-domain, yang lebih besar di dalam caspases yang mengandung lipatan kematian daripada di mereka
yang tidak. Pro-domain dari caspases inisiator intrinsik dan caspases inflamasi berisi satu kematian lipat
yang dikenal sebagai domain perekrutan caspase (CARD), sedangkan pro-domain dari caspases inisiator
ekstrinsik berisi dua lipatan kematian yang dikenal sebagai domain efektor kematian (DED). [13][14]

Kompleks multiprotein sering terbentuk selama aktivasi caspase. [12] Beberapa kompleks multiprotein
aktif termasuk:

 Kompleks pensinyalan yang menginduksi kematian (DISC) selama apoptosis ekstrinsik

 Apoptosom selama apoptosis intrinsik

 Peradangan saat piroptosis

Belahan dada [ edit ]

Setelah dimerised dengan tepat, Caspases membelah pada daerah penghubung antar domain,
membentuk subunit besar dan kecil. Pembelahan ini memungkinkan loop situs aktif untuk mengambil
konformasi yang menguntungkan untuk aktivitas enzimatik. [15]

Pembelahan peti mati Inisiator dan Algojo terjadi dengan metode berbeda yang diuraikan dalam tabel di
bawah ini.
  Inisiator caspases membelah proteolitik secara otomatis sedangkan caspases algojo dibelah oleh
caspases inisiator. Hirarki ini memungkinkan reaksi berantai menguat atau kaskade untuk
menurunkan komponen seluler, selama kematian sel yang terkontrol.

Inisiato
r
Caspase
Gambar PDB caspase 8 (3KJQ) dalam
Caspase Inititator Pro-caspases memiliki prodomain
'perakitan biologis'. Dua warna biru
-8 yang memungkinkan perekrutan pro-caspases
digunakan untuk mewakili dua sunit kecil,
lainnya, yang kemudian dimerise. Kedua
sementara dua warna ungu mewakili dua
moleuceules pro-caspase menjalani
subunit besar
pembelahan dengan autokatalisis.Hal ini
mengarah pada penghapusan prodomain dan
pembelahan wilayah linker antara subunit
besar dan kecil. Heterotetramer terbentuk

Algojo

Caspase
Caspase Caspase algojo secara konstitusional ada
-3 sebagai homodimer. Potongan merah
Gambar PDB Caspase 3 (4QTX) dalam
mewakili daerah di mana peti mati inisiator
'perakitan biologis'. Dua warna biru
membelah peti mati algojo.Subunit kecil dan
digunakan untuk mewakili dua sunit kecil,
besar yang dihasilkan dari masing-masing
sementara dua warna ungu mewakili dua
Caspase-3 akan bergabung, menghasilkan
subunit besar
heterotetramer.
[16]
Beberapa peran caspases [ sunting ]

Apoptosis [ sunting ]

Caspase inisiator diaktifkan oleh jalur apoptopik intrinsik dan ekstrinsik. Hal ini menyebabkan aktivasi
caspases lain termasuk caspases algojo yang melakukan apoptosis dengan membelah komponen seluler.

Apoptosis adalah bentuk kematian sel terprogram di mana sel mengalami perubahan morfologis, untuk
meminimalkan efeknya pada sel-sel di sekitarnya untuk menghindari menginduksi respon imun. Sel
menyusut dan mengembun - sitoskeleton akan runtuh, amplop nuklir membongkar dan fragmen DNA
naik. Hal ini menghasilkan sel membentuk tubuh tertutup yang disebut 'blebs', untuk menghindari
pelepasan komponen seluler ke dalam media ekstraseluler . Selain itu, konten membran fosfolipid sel
diubah, yang membuat sel sekarat lebih rentan terhadap serangan dan penghapusan fagositik. [17]

Caspases apoptopik disubkategorikan menjadi:

1. Caspase Inisiator ( Caspase 2 , Caspase 8 , Caspase-9 , Caspase 10 )

2. Caspases Eksekusi ( Caspase 3 , Caspase 6 dan Caspase 7 )

Setelah caspases inisiator diaktifkan, mereka menghasilkan reaksi berantai, mengaktifkan beberapa
caspases algojo lainnya.Caspases algojo menurunkan lebih dari 600 komponen seluler [18] untuk
menginduksi perubahan morfologis untuk apoptosis.

Contoh kaskade kaskase selama apoptosis:

1. Jalur apoptopik intrinsik: Selama masa stres seluler, sitokrom c mitokondria dilepaskan ke dalam
sitosol. Molekul ini mengikat protein adaptor ( APAF -1), yang merekrut inisiator Caspase-9
(melalui interaksi CARD-CARD). Ini mengarah pada pembentukan Caspase yang mengaktifkan
kompleks multiprotein yang disebut Apoptosome . Setelah diaktifkan, caspase inisiator seperti
Caspase 9 akan membelah dan mengaktifkan caspases algojo lainnya. Hal ini menyebabkan
degradasi komponen seluler untuk apoptosis.
 2. Jalur apoptopik ekstrinsik: Kaskade kaspase juga diaktifkan oleh ligan ekstraseluler, melalui
permukaan sel Reseptor Kematian. Ini dilakukan dengan pembentukan Multiprotein Death
Inducing Signaling Complex (DISC) yang merekrut dan mengaktifkan pro-caspase. Sebagai
contoh, Fas Ligand mengikat reseptor FasR pada permukaan ekstraseluler reseptor; ini
mengaktifkan domain kematian di ekor sitoplasma reseptor. Protein adaptor FADD akan
merekrut (oleh domain Kematian-interaksi domain Kematian) pro-Caspase 8 melalui domain
DED. FasR, FADD dan pro-Caspase 8 ini membentuk Death Signing Complex (DISC)
tempat Caspase-8 diaktifkan. Hal ini dapat mengarah pada aktivasi hilir jalur intrinsik dengan
menginduksi tekanan mitokondria, atau aktivasi langsung Caspases Eksekusi (Caspase 3, Caspase
6 dan Caspase 7) untuk mendegradasi komponen seluler seperti ditunjukkan pada diagram yang
berdekatan. [19]

Piroptosis [ sunting ]

Piroptosis adalah suatu bentuk kematian sel terprogram yang secara inheren menginduksi respons
imun. Secara morfologis berbeda dari jenis kematian sel lainnya - sel membengkak, pecah dan
melepaskan konten seluler pro-inflamasi. Ini dilakukan sebagai respons terhadap berbagai rangsangan
termasuk infeksi mikroba serta serangan jantung (infark miokard). [20] Caspase-1, Caspase-4 dan
Caspase-5 pada manusia, dan Caspase-1 dan Caspase-11 pada tikus memainkan peran penting dalam
menginduksi kematian sel dengan piroptosis. Ini membatasi waktu hidup dan proliferasi patogen
intraseluler dan ekstraseluler.

Pyroptosis oleh caspase-1 [ sunting ]

Aktivasi Caspase-1 dimediasi oleh repertoar protein, memungkinkan deteksi berbagai ligan
patogen. Beberapa mediator aktivasi Caspase-1 adalah: Leucine Rich Repeats (NLRs) seperti NOD , AIM2
-Like Receptor (ALR), Pyrin dan IFI16 . [21]

Protein ini memungkinkan aktivasi caspase-1 dengan membentuk kompleks pengaktivasi multiprotein
yang disebut Inflammasomes. Misalnya, NOD Like Leucine Rich Repeat NLRP3 akan merasakan
penghabisan ion kalium dari sel. Ketidakseimbangan ion seluler ini menyebabkan oligomerisasi molekul
NLRP3 untuk membentuk kompleks multiprotein yang disebut NLRP3 Inflammasome. Pro-caspase-1
dibawa berdekatan dengan molekul pro-caspase lainnya untuk dimerise dan menjalani pembelahan
auto-proteolitik. [21]

Beberapa sinyal patogen yang mengarah ke Pyroptosis oleh Caspase-1 tercantum di bawah ini:

 DNA dalam host cytosol berikatan dengan AIM2-Like Receptor yang menginduksi Pyroptosis

 Aparat sistem sekresi tipe III dari bakteri mengikat NOD Like Leucine Rich Repeats reseptor yang
disebut NAIP (1 pada manusia dan 4 pada tikus)

Piroptosis oleh Caspase-4 dan Caspase-5 pada manusia dan Caspase-11 pada tikus
Caspases ini memiliki kemampuan untuk menginduksi piroptosis langsung ketika
molekul lipopolysaccharide (LPS) (ditemukan di dinding sel bakteri gram negatif) ditemukan dalam
sitoplasma sel inang. Sebagai contoh, Caspase 4 bertindak sebagai reseptor dan diaktifkan secara
proteolitik, tanpa memerlukan kompleks inflammasome atau aktivasi Caspase-1.[21]

Substrat hilir penting untuk caspases pyroptopic adalah Gasdermin D (GSDMD) [22]

Peran dalam peradangan [ sunting ]

Peradangan adalah upaya perlindungan oleh suatu organisme untuk memulihkan keadaan homeostatis,
setelah gangguan dari stimulus berbahaya, seperti kerusakan jaringan atau infeksi bakteri. [18]

Caspase-1, Caspase-4, Caspase-5 dan Caspase-11 dianggap 'Inflammatory Caspases'. [7]

 Caspase-1 adalah kunci dalam mengaktifkan sitokin proinflamasi ; ini bertindak sebagai sinyal
untuk sel-sel kekebalan dan membuat lingkungan yang menguntungkan untuk perekrutan sel
kekebalan ke lokasi kerusakan. Karena itu Caspase-1 memainkan peran mendasar dalam sistem
kekebalan tubuh bawaan . Enzim ini bertanggung jawab untuk memproses sitokin seperti pro-
ILβ dan pro-IL18, serta mengeluarkannya. [21]

 Caspase-4 dan -5 pada manusia, dan Caspase-11 pada tikus memiliki peran unik sebagai
reseptor, di mana ia berikatan dengan LPS, sebuah molekul yang berlimpah dalam bakteri gram
negatif. Hal ini dapat menyebabkan pemrosesan dan sekresi sitokin IL-1β dan IL-18 dengan
mengaktifkan Caspase-1; efek hilir ini sama seperti yang dijelaskan di atas. Ini juga mengarah
pada sekresi sitokin inflamasi lain yang tidak diproses. Ini disebut pro-IL1α. [21] Ada juga bukti
caspase inflamasi, caspase-11 membantu sekresi sitokin;ini dilakukan dengan menonaktifkan
saluran membran yang menghalangi sekresi IL-1β [21]

 Caspases juga dapat menginduksi respon inflamasi pada level transkripsi. Ada bukti di mana ia
mempromosikan transkripsi faktor nuklir-κB ( NF-κB ) , faktor transkripsi yang membantu dalam
menyalin sitokin inflamasi seperti IFNs , TNF , IL-6 dan IL-8 . Misalnya, Caspase-1 mengaktifkan
Caspase-7, yang pada gilirannya memotong ribosa poli (ADP)- ini mengaktifkan transkripsi gen
yang dikendalikan NF-κB. [18]

Penemuan caspases [ sunting ]

H. Robert Horvitz awalnya menetapkan pentingnya caspases dalam apoptosis dan menemukan bahwa
gen ced-3 diperlukan untuk kematian sel yang terjadi selama pengembangannematoda C.
elegans . Horvitz dan koleganya, Junying Yuan menemukan pada tahun 1993 bahwa protein yang
dikodekan oleh gen ced-3 adalah sistein protease dengan sifat yang mirip
dengan mammalian interleukin-1-beta converting enzyme (ICE) (sekarang dikenal sebagai caspase
1). Pada saat itu, ICE adalah satu-satunya kasus yang diketahui. [23]Caspase mamalia lainnya kemudian
diidentifikasi, selain caspases pada organisme seperti lalat buah Drosophila melanogaster .
Para peneliti memutuskan nomenklatur caspase pada tahun 1996. Dalam banyak kasus, caspase
tertentu telah diidentifikasi secara bersamaan oleh lebih dari satu laboratorium;masing-masing
kemudian akan memberi protein nama yang berbeda. Misalnya, caspase 3 dikenal sebagai CPP32,
apopain dan Yama. Karenanya, peti mati diberi nomor sesuai urutan pengidentifikasiannya. [24] ICE, oleh
karena itu, diganti namanya menjadi caspase 1. ICE adalah caspase mamalia pertama yang ditandai
karena kesamaannya dengan gen kematian nematoda ced-3, tetapi tampaknya peran utama enzim ini
adalah untuk memediasi peradangan alih-alih. dari kematian sel.

Evolusi [ sunting ]

Pada hewan apoptosis diinduksi oleh caspase dan pada jamur dan tanaman, apoptosis diinduksi oleh
arginin dan caspase spesifik lisin seperti protease yang disebut metacaspases.Pencarian homologi
mengungkapkan homologi yang dekat antara caspases dan protein mirip caspase
dari Reticulomyxa (organisme uniseluler). Studi filogenetik menunjukkan bahwa divergensi urutan
caspase dan metacaspase terjadi sebelum divergensi eukariota. [25]