PEMERINTAH DAERAH PROVINSI JAWA BARAT

DINAS PENDIDIKAN
SEKOLAH MENENGAH KEJURUAN NEGERI 13
KOMPETENSI KEAHLIAN KIMIA ANALISIS

MENGHITUNG JUMLAH SEL

A. Tujuan Percobaan
1. Siswa dapat membuat preparat dengan alat counting chamber.
2. Siswa dapat menentukan ruang hitung pada counting chamber di bawah mikroskop dengan
perbesaran 100x dan 400x.
3. Siswa dapat menghitung jumlah sel pada suspesi ragi 0,1% setiap ml nya di bawah mikroskop
dengan perbesaran 400x.

B. Prinsip Dasar
Menghitung jumlah sel ragi pada sampel suspensi ragi 0,1% menggunakan counting chamber
dengan mikroskop perbesaran 400x sehingga dapat diketahui jumlah sel pada setiap ml nya.

C. Dasar Teori
Alat counting chamber merupakan suatu kaca objek tebal, yang diasah. Pada bagian atas
dibuat garis-garis melintang dan membujur yang membentuk 16 kotak kecil. Dimensi dari setiap
kotak kecil adalah: panjang sisi-sisinya 0,05 mm dan tinggi 0,1 mm. Jika di atas bagian 16 kotak
kecil tersebut ditutup dengan kaca penutup maka akan terbentuk suatu rungan dengan volume =
0,05 x 005 x 0,1 = 25 x 10-3 mm. Bila ke ruangan tersebut dimasukkan setetes suspensi ragi, maka
dengan mikroskop dapat dihitung jumlah sel dalam 1 ml dari suspensi tersebut.
Pada counting chamber terdapat dua ruangan hitung yang dipisahkan satu sama lain dengan
saluran, begitu pula pada kedua sisi ruang hitung. Fungsi dari saluran ini adalah untuk menampung
kelebihan cairan. Untuk perhitungan lebih akurat, pada waktu meletakkan kaca penutup di atas
ruang hitung, bagian bawah dari pinggir kaca tidak boleh basah, karena akan menyebabkan tinggi
ruang hitung melebihi 0,1 mm.

D. Alat
1. Mikroskop
2. Counting Chamber
3. Kaca Penutup
4. Pipet Tetes
5. Botol Semprot
6. Rak Tabung Reaksi

10
Mikrobiologi – Counting Chamber
 PEMERINTAH DAERAH PROVINSI JAWA BARAT
DINAS PENDIDIKAN
SEKOLAH MENENGAH KEJURUAN NEGERI 13
KOMPETENSI KEAHLIAN KIMIA ANALISIS

E. Bahan
1. Suspensi Ragi 0,1%
2. Kertas Isap
3. Tisu Lensa
4. Kapas Biasa
5. Alkohol 95%
6. Aqua DM

F. Langkah Kerja
1. Buatlah suspensi ragi dengan konsentrasi 0,1 % ( jika perlu diencerkan hingga jumlah sel
didalam tiap-tiap persegi kecil ± 10 buah).
2. Tutuplah ruang hitung pada counting chamber dengan kaca penutup yang kering.
3. Teteskan suspensi ragi pada tepi kaca penutup bagian atas/bawah maka tetesan akan mengalir
kebawah kaca penutup dan mengisi ruang hitung, keringkan kelebihan cairan diatas kaca
penutup dengan kertas hisap.
4. Amati dan hitunglah jumlah sel dalam 5 kotak besar dengan menghitung sel-sel yang berada di
dalam persegi kecil.
5. Untuk hasil yang baik pekerjaan diatas (1-4) paling sedikit harus diulangi dua kali lagi
kemudian dihitung jumlah rata-rata dari tiga penetapan yang sesuai.
6. Hitunglah jumlah sel dalam setiap ml-nya dengan faktor sebagai berikut :

𝑠𝑒𝑙 1
𝐽𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ =( ) 𝑥 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑠𝑒𝑙 𝑑𝑎𝑙𝑎𝑚 5 𝑘𝑜𝑡𝑎𝑘 𝑏𝑒𝑠𝑎𝑟
𝑚𝑙 80 𝑥 25 𝑥 10−5 𝑥 10−3

G. Keselamatan Kerja dan PLH

1. Letakan tas dan benda-benda lain yang tidak diperlukan pada tempat yang disediakan. Jangan
meletakkan barang-barang pribadi di atas meja praktikum.
2. Sebelum dan sesudah praktikum meja dilap dengan desinfektan.
3. Jangan memasukan / menggigit barang-barang seperti kertas, pulpen dan sebagainya kedalam
mulut selama berada di ruang praktikum.
4. Cuci tangan dengan air dan sabun antiseptik sebelum dan sesudah praktikum.
5. Tidak membuang sampah apapun ke dalam washbak.
6. Bersihkan mikroskop sebelum dan setelah digunakan.
7. Bekerjalah dengan teliti.

H. Tugas Praktikum
Setiap kelompok menyiapkan:
 1 set mikroskop
 1 buah pipet tetes
 1 buah counting chamber
 1 buah kaca penutup
 1 buah gelas kimia 50 ml
 1 buah batang pengaduk

11
Mikrobiologi – Counting Chamber
 PEMERINTAH DAERAH PROVINSI JAWA BARAT
DINAS PENDIDIKAN
SEKOLAH MENENGAH KEJURUAN NEGERI 13
KOMPETENSI KEAHLIAN KIMIA ANALISIS

I. Pertanyaan
1. Kenapa sampel suspensi ragi tidak boleh diteteskan langsung di atas ruang hitung?
2. Jelaskan dari mana diperoleh faktor perhitungan berikut !
𝑠𝑒𝑙 1
𝐽𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ =( ) 𝑥 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑠𝑒𝑙 𝑑𝑎𝑙𝑎𝑚 5 𝑘𝑜𝑡𝑎𝑘 𝑏𝑒𝑠𝑎𝑟
𝑚𝑙 80 𝑥 25 𝑥 10−5 𝑥 10−3
3. Sebutkan metode lain yang dapat digunakan untuk menghitung jumlah sel/ml!
4. Gambar alat dan ruang hitung dari counting chamber!

J. Hal yang Perlu Diperhatikan

1. Tidak membuang sampah apapun ke dalam wasbak/saluran pembuangan air.
2. Tidak meninggalkan api dalam keadaan menyala.
3. Bekerja secara aseptis
4. Siapkan alat dan bahan yang diperlukan terlebih dahulu sebelum bekerja

K. Laporan
1. Laporan awal dikumpulkan sebelum praktikum yang meliputi judul praktikum, tanggal
percobaan, tujuan, prinsip dasar, dan bagan kerja.
2. Laporan dibuat dalam buku laporan Mikrobiologi dan dikumpulkan dalam waktu 1 minggu
setelah praktikum.

L. Daftar Pustaka

Ratna, S.H.1983. Mikrobiologi dalam Praktek. Bogor : Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam IPB.

Salle,A.J. Fundamental Principles of Bacteriology. Mc Graw-HillBook.Co.

Unus .S, Drs. 1985. Pengantar Mikrobiologi Umum. Bandung : Penerbit Angkasa.

Waksman, S.A. 1957. Soil Microbiology. New York : John Wiley & Sons, Inc.

12
Mikrobiologi – Counting Chamber