Tugas Kelompok Makalah

Bioteknologi Perairan
(Produksi DHA dari Crypthecodinium cohnii)

OLEH :

Karni (I1A116125)
Siti Rahma Rahim (I1A116058)
Haerudin (I1A116063)

JURUSAN MANAJEMEN SUMBER DAYA PERAIRAN

FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN
UNIVERSITAS HALU OLEO
KENDARI
2019
 KATA PENGANTAR

Assalamualaikum Wr. Wb.

Puji syukur kehadirat Allah SWT, yang telah memberikan rahmat-Nya

kepada penulis sehingga penulis dapat menyelesaikan makalah ini dengan baik,

dimana penulisan makalah ini diajukan untuk memenuhi salah satu tugas mata

kuliah Bioteknologi Perairan. Penulis menyadari, karena keterbatasan ilmu dan

pengetahuan yang dimiliki, makalah ini masih banyak kekurangan dalam

penyusunan makalah ini yang masih jauh dari sempurna. Untuk itu dengan senang

hati penulis akan menerima kritik dan saran dari semua pihak yang berhubungan

dengan penulisan makalah utama ini. Dalam penyusunan makalah ini penulis

banyak mendapat bantuan, bimbingan dan pengarahan dari berbagai pihak, oleh

karena itu dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan terimakasih

kepada dosen Mata Kuliah yang telah memberikan materi dalam mata kuliah

Bioteknologi Perairan sehingga mempermudah dalam penyusunan makalah serta

rekan-rekan sekelompok yang telah memberikan dorongan, motivasi dan inspirasi

sehingga makalah ini bisa terselesaikan. Akhir kata, mohon maaf apabila terdapat

kalimat-kalimat yang kurang berkenan untuk dibaca dalam makalah ini. Terima

kasih.

Kendari, Maret 2019

Penulis
 DAFTAR ISI

Halaman
HALAMAN JUDUL................................................................................ i
KATA PENGANTAR.............................................................................. ii
DAFTAR ISI............................................................................................. iii
BAB I PENDAHULUAN
A. Latar Belakang...................................................................................... 1
B. Rumusan Masalah................................................................................ 2
C. Tujuan dan manfaat.............................................................................. 2
BAB II ISI
A. Pengertian Crypthecodinium cohnii..................................................... 3
B. Produk yang dihasilkan dari Crypthecodinium cohnii.......................... 4
C. Proses/Tahap Menghasilkan Produk..................................................... 5
BAB III PENUTUP
A. Kesimpulan........................................................................................... 10
DAFTAR PUSTAKA
 BAB I
PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Indonesia merupakan suatu negara kepulauan yang dua pertiga wilayahnya

adalah lautan dan mempunyai garis pantai terpanjang di dunia yaitu ± 81 ribu km.

Di dalam lautan terdapat bermacam - macam makhluk hidup baik berupa

tumbuhan air maupun hewan air. Salah satu makhluk hidup yang tumbuh dan

berkembang di laut adalah alga, baik yang berukuran besar (makroalga) dan alga

yang berukuran kecil (mikroalga). Ditinjau secara biologi, alga merupakan

kelompok tumbuhan berklorofil yang terdiri dari satu atau banyak sel dan

berbentuk koloni. Di dalam alga terkandung bahan bahan organik seperti

polisakarida, agarosa, hormon, vitamin, mineral, dan juga senyawa bioaktif.

Sejauh ini, pemanfaatan alga sebagai komoditi perdagangan atau bahan baku

industri masih relatif kecil jika dibandingkan dengan keanekaragaman jenis alga

yang ada di Indonesia. Padahal komponen kimiawi yang terdapat dalam alga

sangat bermanfaat sebagai bahan baku industri makanan, kosmetik, farmasi, dan

lain-lain.

Rumput laut (makroalga) adalah ganggang (algae) yang berbentuk

poliseluler dan hidup di laut. Mikroalga dari banyak genus heterotrofik (obligat

atau fakultatif) menunjukkan fleksibilitas dan fleksibilitas metabolisme yang

cukup tetapi saat ini kurang dieksploit dalam pembuatan bioteknologi dari

senyawa yang diketahui berasal dari tanaman, biomolekul bernilai tinggi baru atau

biomassa yang diperkaya. Kemampuan mikroalga untuk mengadaptasi

metabolisme mereka ke berbagai kondisi kultur memberikan peluang untuk

memodifikasi, mengontrol, dan dengan demikian memaksimalkan pembentukan

senyawa yang ditargetkan dengan mikroalga non-rekombinan (Munifah. 2017).

Mikroalga memiliki tingkat pertumbuhan yang lebih tinggi dan kepadatan

biomassa yang lebih tinggi dibandingkan dengan tanaman berbasis lahan. Substrat

fermentasi yang digunakan dalam pembuatan mikro-alga sudah tersedia dan

berasal dari sumber yang terbarukan (sirup glukosa adalah pilihan populer sebagai

konstituen utama). Fermentasi mikro-alga juga memiliki manfaat lingkungan

lainnya, karena tidak bersaing untuk mendapatkan ruang tanah dan beberapa dapat

digunakan untuk memperbaiki karbon dioksida. Banyak alga fototrofik mampu

menyesuaikan metabolisme mereka dengan kondisi heterotrof dan itulah satu-

satunya cara mereka dapat berfungsi ketika sinar matahari tidak tersedia

(Raymond Et All., 2002).

B. Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang di atas, maka ada beberapa pertanyaan terkait

Crypthecodinium cohnii diantaranya sebagai berikut :

1. Apa pengertian Crypthecodinium cohnii ?

2. Produk apa yang dihasilkan dari Crypthecodinium cohnii ?
3. Bagaimana tahap/proses menghasilkan produk ?

C. Tujuan dan Manfaat

Berdasarkan rumusan masalah di atas maka terdapat tujuan dan manfaat

sebagai berikut :
1. Mengetahui pengertian Crypthecodinium cohnii
2. Mengetahui produk yang dihasilkan dari Crypthecodinium cohnii
3. Mengetahui tahap/Proses menghasilkan produk
 BAB II
ISI

A. Pengertian Crypthecodinium cohnii

Crypthecodinium cohnii adalah dinoflagellata yang memiliki theca yang

sangat halus (15-20 μm) yang sebagian besar terdiri dari selulosa dan Thecanya

dapat berubah bentuk. Theca terkandung dalam alveoli yang relatif sedikit dengan

pola yang dapat ditentukan (tabulasi lempeng logam) dan digunakan untuk

keperluan taksonomi. Selain itu juga ia memiliki Kista berbentuk soliter dan ovoid

serta dapat bertahan dalam tahap dorman /bertahan hidup atau mulai membelah

(kista vegetatif). Cryptheconidium cohnii tampaknya merupakan spesies

kompleks, terdiri dari banyak spesies yang terisolasi secara reproduktif .

Mikroalga ini dapat hidup di air payau, litoral dan tumbuh diantara makrofita,

terutama Fucus spp. Namun demikian, Fucus tidak selalu menghasilkan C. cohni.

Di alam, dinoflagellate ini juga ditemukan diantara rumput laut yang membusuk

lainnya. Crypthecodinium cohnii dan spesies lainnya juga telah diisolasi dari jenis

inang lain seperti Macrocystis , Sargassum, Cystoseira, Zostera , Thalassia,

Phragmites dan Acetabularia (Bumbak Et All., 2011).

Crypthecodinium cohnii dapat ditemukan dari berbagai habitat termasuk

pantai samudra terbuka, teluk dan muara payau yang tercemar, dan rawa-rawa

bakau yang mengepul. Crypthecodinium cohnii tersebar di perairan beriklim

sedang dan tropis. Mereka ditemukan dari Laut Utara ke Karibia, Laut

Mediterania, dan Baltik. Crypthecodinium cohnii memiliki morfologi sel dengan

cingulum yang khas, yang banyak tergeser dan tidak membentuk lingkaran

lengkap di sekitar tubuh. Crypthecodinium cohnii juga memiliki sel renang dan

kista dengan dimensi yang berbeda. Sel renang motil memiliki dua flagela yang
tidak sama. Salah satunya adalah flagellum pipih seperti pita, yang mengelilingi

sepenuhnya atau sebagian sel dalam tanaman lain (Mendes Et All., 2008)

Crypthecodinium cohnii memiliki reproduksi aseksual dan seksual, dengan

siklus pertama (siklus dengan fase berenang) dan waktu fase siklus sel kedua

(siklus dalam kista). Reproduksi seksual Crypthecodinium cohnii yaitu isogami

dan anisogami membentuk “fertilisasi jembatan”. Selama pembuahan, ada fusi

protoplasma gamet dan pembentukan planozygote. Zigot encysts, menghasilkan

cyclose nuklir di dalam kista. Dalam siklus sel normal dari mikroalga

dinoflagellate heterotrofik, sel motil akan melepaskan flagela mereka,

menguraikan dan mengeksekusi fase siklus sel yang tersisa (sintesis DNA dan

mitosis. Kista selanjutnya akan menghasilkan 2, 4 atau 8 sel anak tergantung pada

jalur siklus sel mana yang diambil oleh masing-masing sel. Keberadaan dan

pemanjangan Fase pada Crypthecodinium cohnii juga dapat mengakumulasi lipid

hingga lebih dari 20% dari berat kering dengan kandungan 22: 6ω-3 (lebih dari

30% dari kandungan total asam lemak (Mendes Et All., 2008)

B. Produk yang dihasilkan Crypthecodinium cohnii

Crypthecodinium cohnii adalah dinoflagellata laut heterotrofik yang dapat

digunakan untuk produksi DHA. Proses ini dibagi dalam dua fase: dalam fase

pertumbuhan dan fase produksi yang lebih pendek, di mana jumlah DHA per sel

dapat digandakan. Dalam proyek tersebut sistem penyaringan pada pelat sumur

dalam dengan aplikasi vektor oksigen dikembangkan. Dengan sistem penyaringan

ini, kandungan DHA 25% per berat kering sel tercapai pada akhir fase

pertumbuhan. Spesies mikroorganisme laut seperti Crypthecodinium cohnii,

Schizochytrium dan Aurantiochytrium telah menjadi spesies mikroba utama untuk

produksi PUFA komersial karena pertumbuhannya yang cepat dan hasil DHA

yang tinggi (Pei Et All., 2017)

DHA (C22: 6 n-3) adalah asam lemak omega-3 rantai panjang yang

ditemukan di seluruh tubuh manusia (Lopes Et All., 2008). Asam

Docosahexaenoic (DHA) juga merupakan asam lemak tak jenuh ganda (PUFA)

dengan efek menguntungkan pada kesehatan manusia. Lebih khusus, itu adalah

lipid struktural utama di otak dan retina mata dan merupakan komponen kunci

dari jantung. Tingkat DHA dan EPA yang bersirkulasi adalah bagian penting dari

mekanisme pertahanan tubuh dan memiliki peran kunci dalam mengurangi

peradangan dan meniadakan spesies oksigen reaktif (ROS) pada tingkat sel. EPA

(C20: 5 n-3) juga merupakan asam lemak omega-3 rantai panjang. Manfaat

kesehatan utama dari EPA adalah perannya sebagai eicosanoid; memainkan peran

penting dalam mengatur peradangan dan kekebalan pada manusia. Hal ini

diterima secara luas bahwa eikosanoid EPA yang diturunkan adalah effefektif

dalam membantu mengelola penyakit jantung dan proses kronis dan inflamasi

lainnya (Robert. 2013).

C. Proses/Tahap Menghasilkan Produksi

1. Pemrosesan hulu

- Sumber karbon

sumber karbon adalah yang paling mahal dalam media fermentasi. Micro-

algae dikembangkan dan harus dipisahkan dari organisme tertentu untuk

memastikan hasil lipid paling ekonomis. Secara umum, konsentrasi glukosa dalam

media fermentasi berada pada kisaran 5–40 g/L. Sumber glukosa yang biasa

dalam produksi komersial adalah sirup glukosa yang berasal dari konversi
enzimatik pati dari sereal atau kentang. Gliserol adalah alternatif potensial yang

menarik untuk glukosa. Namun, bentuk gliserol ini umumnya akan mengandung

jejak sabun metanol dan ketidaknyamanan lainnya yang akan menghambat

pertumbuhan mikro-alga. Baik glukosa dan gliserol dikonversi oleh mikro-alga

pertama menjadi asam piruvat, kemudian menjadi asetil KoA (melalui siklus asam

sitrat) yang berfungsi sebagai molekul sumber dasar untuk produksi lipid. Aliran

limbah lainnya dari industri pengolahan makanan yang kaya akan monosakarida

juga berpotensi sebagai sumber karbon yang dapat bertahan secara ekonomi.

- Nitrogen

Selain sumber karbon, bahan nitrogen untuk fermentasi adalah yang

termahal kedua. Sumber nitrogen anorganik (misalnya amonia) dapat digunakan.

Mineral dan nutrisi lain (yaitu vitamin) yang sangat penting bagi pertumbuhan

mikro-alga, oleh karena itu ini perlu ditambahkan. Sumber nitrogen penting dalam

fase pertama fermentasi alga - pengembangan biomassa, di mana ia digunakan

dalam sintesis asam amino. Hanya sekali pasokan nitrogen habis dalam masalah

fermentasi, mikro-ganggang mulai memproduksi asam lemak dari sumber karbon.

Proses fermentasi minyak ganggang sebagian besar dalam dua tahap. Pada fase

pertama, mikro-ganggang (mikroalga) memanfaatkan kelebihan nutrisi untuk

mengembangkan biomassa. Pada fase kedua, kekurangan nitrogen berarti energi

yang sebelumnya dicadangkan untuk DNA/RNA dan mensintesis protein lainnya

dapat dialihkan ke produksi (M. E. De Swaf Et all., 2002).

- Oksigen terlarut
 Media fermentasi yang digunakan juga harus mengandung oksigen terlarut

tinggi (DO) untuk meningkatkan pembentukan ikatan rangkap dalam asam lemak

omega-3 akhir. Pentingnya DO untuk fermentasi bervariasi antara mikro-alga.

Namun, sementara kontrol DO sangat penting dalam fase awal akumulasi

biomassa, itu tidak selalu diperlukan pada fase kedua akumulasi lipid.

- pH

Kontrol pH tidak terlalu penting daripada mengendalikan kadar karbon

dan nitrogen dalam biomassa. Namun demikian, mempertahankan pH sedekat

mungkin dengan operasi yang diperlukan oleh mikro-ganggang tertentu yang

bersangkutan, jika tidak, organisme harus membuang energi untuk

mengembalikan pH optimal.

- Suhu

Suhu penting dalam hal akumulasi biomassa dan asam lemak. Biasanya,

suhu fermentasi yang lebih tinggi mendukung peningkatan pertumbuhan sel

sementara suhu yang lebih rendah cendukung memproduksi asam lemak.

- Salinitas

Tingkat garam dalam biomassa untuk fermentasi optimal bervariasi antara

mikro-alga. Garam biasanya merupakan faktor penting untuk pertumbuhan.

Biasanya untuk mikro-alga laut, kadar salinitas disesuaikan dengan salinitas air

laut. Kadar garam yang terlalu tinggi dalam fermentor menyebabkan masalah

korosi yang serius.

- Cahaya
 Kebutuhan cahaya untuk mikro-alga berbeda – beda. Pada organisme

autotrof, produksi EPA dan DHA terjadi terutama pada membran foto-sintetik,

oleh karena itu cahaya diperlukan untuk produksinya.

2 Pemrosesan Hilir

Dimulai dengan kultur mikro-alga murni dan axenic, kondisi pertumbuhan

dioptimalkan untuk memungkinkan produksi lipid maksimum. Dalam beberapa

kasus, biomassa dikeringkan (dengan semprotan atau pengeringan drum). Tahap

selanjutnya bisa melibatkan gangguan sel-sel alga untuk melepaskan minyak dari

sel-sel.

- Ekstraksi minyak

Tahap ekstraksi produksi minyak mikro-alga cukup sulit karena

memerlukan perlindungan ke LC-PUFA dari anti-oksidan alami yang hadir dalam

mikro-alga tidak efefektif setelah sel pecah. Oleh karena itu sangat penting untuk

meminimalkan paparan udara pada tahap ini. Berbagai metode ekstraksi dapat

digunakan, meskipun semua melibatkan pecahnya dinding sel dengan beberapa

bentuk penggilingan (sering dibantu dengan enzim, sonifikasi dll) diikuti oleh

ekstraksi dengan pelarut. Secara klasik, heksana, seperti yang digunakan dalam

sebagian besar produksi minyak nabati, digunakan sebagai pelarut, tetapi baru-

baru ini proses ekstraksi tanpa pelarut telah dikembangkan. Alternatif selanjutnya

adalah penggunaan ekstraksi fluida super kritis (biasanya dengan karbon

dioksida). Dalam hal ini, pemeriksaan cermat dilakukan untuk memastikan tidak

ada sisa pelarut dalam minyak. Biomassa yang dihabiskan dan tidak diminyaki

biasanya dapat digunakan untuk pakan ternak. Minyak mentah kemudian

dikenakan teknik penyulingan minyak makanan standar. Limbah atau minyak

teroksidasi dapat dialihkan ke produksi biofuel.

Ekstraksi minyak alga untuk produksi DHA dan EPA cukup sulit karena

segera setelah dinding sel alga pecah, LC-PUFA ini terkena oksidasi potensial.

Setelah asam lemak tak jenuh yang tinggi ini bereaksi dengan radikal teroksidasi,

reaksi berantai yang tak terhentikan dimulai yang mengarah pada produksi

minyak tengik, beraroma yang tidak cocok untuk konsumsi manusia. Oleh karena

itu, sejauh mungkin, semua sumber bahan yang dapat memulai proses oksidasi

(misalnya tembaga, logam besi) harus dijauhkan dari area penambangan dan

penyimpanan minyak. Minyak alga mentah disimpan dingin, biasanya di bawah

selimut nitrogen, dan siap untuk pemurnian. Pemutihan dan penghilangan bau

minyak ganggang. Minyak nabati kasar, termasuk minyak ganggang yang

membutuhkan penyulingan untuk meningkatkan warna, kejernihan, bau dan

menghilangkan setiap bahan partikel dan kontaminan kimia. Ada berbagai bahan

lain dalam minyak mentah yang dapat dihilangkan dengan proses perbaikan,

termasuk: asam lemak bebas, fosfatides (yaitu lesitin), pigmen (yaitu karotenoid,

klorofil), trace metal, sterol (yaitu kolesterol), lilin, mono asil dan glikosida diasil

(MAG dan DAG), produk oksidasi dan melacak kontaminan. Asam lemak bebas

(FFA) biasanya dipindahkan dengan pemurnian kimia di mana FFA dinetralkan

dengan soda kaustik kemudian dengan mudah dihilangkan dengan sabun.

Perbaikan fisik kurang cocok untuk minyak alga karena melibatkan suhu tinggi.

Langkah netralisasi biasanya dilanjutkan dengan proses degumming di mana air

ditambahkan untuk menghilangkan fosfat, sterol dll. Penghapusan sabun

dilakukan dengan mencuci minyak dengan air diikuti oleh pemisahan fisik fase
berair dan pengeringan di bawah vakum (yang juga membantu memindahkan

oksigen terlarut).

Tahap selanjutnya adalah pemutihan, di mana tanah atau penyerap atau

karbon aktif ditambahkan untuk menghilangkan pigmen warna, produk oksidasi

dan jejak logam. Sisa bahab pemutihan kemudian dihilangkan dengan

penyaringan. Proses pemulihan tambahan dapat digunakan untuk memulihkan

residu dalam bantuan filter yang dihabiskan sebelum dikirim ke tempat

pembuangan sampah. Minyak yang diputihkan kemudian dihilangkan kandungan

lilinnya untuk meningkatkan kejernihannya. Proses ini melibatkan pendinginan

minyak untuk memungkinkan kristal lilin yang berkembang dan tumbuh. Kristal

lilin kemudian dihilangkan dengan filtrasi atau sentrifugasi. Minyak kemudian

diberi pewangi yang dapat membersihkan uap. Steam tekanan tinggi ditambahkan

ke minyak di bawah vakum tinggi untuk menghilangkan komponen minyak yang

tersisa yang berkontribusi terhadap rasa, bau dan warna termasuk yang diproduksi

dalam proses pemurnian hingga tahap ini. Minyak kemudian didinginkan

 BAB III
PENUTUP

A. Kesimpulan

Adapun kesimoulan dari makalah ini yaitu;

1. Crypthecodinium cohnii adalah dinoflagellata yang memiliki theca yang

sangat halus (15-20 μm) yang sebagian besar terdiri dari selulosa dan

Thecanya dapat berubah bentuk. Crypthecodinium cohnii dapat ditemukan

dari berbagai habitat termasuk pantai samudra terbuka, teluk dan muara

payau yang tercemar, dan rawa-rawa bakau yang mengepul.

Crypthecodinium cohnii memiliki reproduksi aseksual dan seksual, dengan

siklus pertama (siklus dengan fase berenang) dan waktu fase siklus sel

kedua (siklus dalam kista).

2. Produk yang dihasilkan oleh Crypthecodinium cohnii yaitu DHA. DHA

(C22: 6 n-3) adalah asam lemak omega-3 rantai panjang yang ditemukan

di seluruh tubuh manusia.

3. Proses untuk menghasilkan minyak DHA melalui beberapa proses,

meliputi pemrosesan hilir, dengan mengontrol karbon, oksigen terlarut

(DO), salinitas, suhu, nitrogen, cahaya dan pH. Sedangkan pemrosesan

hilir meliputi ekstraksi minyak alga dan pemutihan atau pemurnian.

 DAFTAR PUSTAKA

Bumbak. F, Stella Cook, Vilém Zachleder, Silas Hauser & Karin Kovar. 2011.
Best Practices in Heterotrophic High-Cell-Density Microalgal Processes:
Achievements, Potential and Possible Limitations. Appl Microbiol
Biotechnol 91:31–46.
Lopes. T da Silva & Alberto Reis. 2008. The Use of Multi-Parameter Flow
Cytometry to Study the Impact of n-dodecane Additions to Marine
Dinoflagellate Microalga Crypthecodinium cohnii Batch Fermentations
and DHA Production. J Ind Microbiol Biotechnol (2008) 35:875–887.
M.E. de Swaaf, G.J. Grobben, G. Eggink, T.C. de Rijk, P. van der Meer & L.
Sijtsma. 2001. Characterisation of Extracellular Polysaccharides Produced
by Crypthecodinium cohnii. Appl Microbiol Biotechnol (2001) 57:395–
400.
Mendes. A, Alberto Reis, Rita Vasconcelos, Pedro Guerra & Teresa Lopes da
Silva. 2008. Crypthecodinium cohnii With Emphasis on DHA Production:
A Review. J Appl Phycol 21:199–214.
Munifah Ifah. 2008. Prospek Pemanfaatan Alga Laut Untuk Industri. Squalen Vol.
3 No. 2.
Pei Guangsheng, Xingrui Li, Liangsen Liu, Jing Liu, Fangzhong Wang, Lei Chen
& Weiwen Zhang. 2017. De Novo Transcriptomic and Metabolomic
Analysis of Docosahexaenoic Acid (DHA)-Producing Crypthecodinium
cohnii During Fed-Batch Fermentation. Algal Research xxx (xxxx) xxx–
xxx.
Raymond M. Gladue & Paul W. Behrens. 2002. DHA-Containing Nutritional
Compositions And Methods For Their Production. US 6,372.460 B1.
Robert J. Winwood. 2013. Micro-Organismes Producteurs de Lipides ; Recent
Developments in the Commercial Production of DHA and EPA Rich Oils
From Micro-algae. OCL 2013, 20(6) D604.