IDENTIFIKASI DAN ELUSIDA STRUKTUR DARI SPEKTROSKOPI NMR

OLEH:

SITTI HADIJAH

F1C1 16 040

JURUSAN KIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS HALU OLEO

KENDARI

2019
 KATA PENGANTAR

Puji syukur kehadirat ALLAH SWT, karena atas berkah dan rahmat-Nya

penulis dapat menyusun makalah tentang “Identifikasi dan Elusida Struktur dari

Spektroskopi NMR” ini dengan baik dan tepat pada waktu yang telah ditentukan.

Shalawat serta salam semoga tetap tercurahkan kepada Rasulullah Muhammad Saw.

yang telah membimbing umatnya dari zaman jahiliyah menuju zaman yang penuh

dengan nuansa pendidikan seperti yang kita rasakan saat ini.

Penghargaan yang tulus dan ucapan terima kasih yang sebesar-besarnya tak

lupa penulis sampaikan kepada seluruh pihak, khususnya kepada dosen mata kuliah

atas kesediaannya dalam membimbing dan mengarahkan selama perkuliahan. Penulis

berharap semoga makalah ini dapat memberi manfaat bagi kita semua. Namun

demikian layaknya pepatah berkata ”Tiada Gading yang Tak Retak”. Penulis

menyadari bahwa dalam makalah ini masih terdapat banyak kekurangan dan jauh dari

kesempurnaan. Dengan selesainya makalah ini, akhirnya saya sebagai penulis tetap

mengharapkan kritik dan saran yang membangun dari semua pihak terutama pembaca

sebagai masukan untuk perbaikan.

Kendari, 14 Mei 2019

ii
 DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR .................................................................................................. ii

DAFTAR ISI ................................................................................................................ iii
BAB I PENDAHULUAN ............................................................................................. 1
A. Latar Belakang ................................................................................................... 1
B. Rumusan Masalah .............................................................................................. 3
C. Tujuan ................................................................................................................ 3
D. Manfaat .............................................................................................................. 3
BAB II HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................................ 4
A. Perangkat percobaan 1D dan 2D NMR yang umum .......................................... 4
B. Pengembangan percobaan dan instrumentasi NMR .......................................... 4
C. Sistem pakar CASE .......................................................................................... 13
D. NMR prediksi pergerakan kimia ...................................................................... 13
E. Verifikasi struktur ............................................................................................ 15
F. Identifikasi struktur dan ddereplikasi dalam campuran ................................... 16
G. Apakah mungkin untuk menghindari penjelasan struktur yang salah ................ 18
BAB III KESIMPULAN ............................................................................................. 19
DAFTAR PUSTAKA ................................................. Error! Bookmark not defined.

iii
 BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Penentuan struktur molekul adalah tema sentral dari kimia organik dan analitik.

Spektroskopi resonansi magnetik nuklir (NMR) dalam kombinasi dengan

spektrometri massa (HRMS) resolusi tinggi membentuk seperangkat metode dasar

untuk menyelesaikan masalah ini. Mengingat rumus molekul molekul organik

kompleks yang telah ditentukan menggunakan HRMS, dua dimensi (2D) -NMR

memainkan peran penting dalam penjelasan struktur. Dalam ulasan ini, kami

mempertimbangkan aplikasi NMR untuk menentukan struktur molekul organik kecil.

Hasil yang dicapai dalam bidang ini dibahas dalam monograf dan ulasan termasuk

dua ulasan komprehensif yang diterbitkan baru-baru ini.

Untuk memperjelas masalah yang dibahas dalam tinjauan ini, perlu untuk

mempertimbangkan beberapa konsep dasar. Langkah pertama dalam penentuan

struktur yang tidak diketahui adalah pencarian spektral terhadap database yang

tersedia yang relevan menggunakan spektrum MS dan NMR. Jika spektrum yang

tidak diketahui sepenuhnya bertepatan dengan spektrum referensi, itu berarti bahwa

rumus struktural yang tidak diketahui identik dengan rumus referensi. Ini disebut

sebagai identifikasi struktur. Jika tidak, masalah penjelasan struktur muncul.

Mengingat struktur dijelaskan, perlu untuk menentukan apakah senyawa tersebut

baru. Pencarian struktural terhadap database yang sesuai untuk menjawab pertanyaan

ini disebut dereplikasi. Prosedur ini juga ditafsirkan dalam literatur sebagai

1
identifikasi struktural dari entitas kimia yang dikenal berdasarkan informasi analitis

dan spektroskopi yang dilaporkan sebelumnya.

Penjelasan struktur jelas merupakan tugas yang paling rumit. Ini terkait

dengan kelas masalah terbalik yang ambiguitas solusinya adalah kekhasan tersendiri.

Solusi tunggal dipilih dengan memaksakan kendala tambahan. Secara keseluruhan,

masalah penjelasan struktur dari data 2D-NMR dapat disajikan sebagai kombinasi

dari dua masalah terbalik, yang harus diselesaikan secara berurutan. Masalah pertama

adalah untuk menentukan semua (jika mungkin) pasangan atom (nuklei) dalam

molekul yang ada korelasi diamati dalam 1D dan tersedia spektrum 2D-NMR. Tujuan

ini dicapai sebagai hasil dari interpretasi spektrum 1D- dan 2D-NMR, yang dapat

menerima solusi alternatif karena resonansi tumpang tindih dan alasan lainnya.

Masalah kedua adalah menentukan semua struktur yang memenuhi set inti kopling

yang terungkap dan kemudian memilih struktur yang paling memungkinkan dengan

memaksakan kendala tambahan yang berasal dari fitur spektral karakteristik, prediksi

perpindahan kimia NMR, dan pengetahuan kimia. Jelaslah bahwa solusi dari masalah

kedua, utama, sangat tergantung pada solusi dari masalah pertama. Jika kopling spin

yang salah bocor ke dalam solusi dari masalah pertama, kemungkinan struktur yang

benar menjadi bermasalah.

Analisis penalaran spektroskopi selama penjelasan struktur menyebabkan

kesimpulan bahwa informasi berbasis NMR awal yang digunakan untuk tujuan ini

dapat direpresentasikan sebagai seperangkat "aksioma", yang membentuk teori

aksiomatik parsial yang diformulasikan khusus untuk masalah yang diberikan. Oleh

2
karena itu, masalah berkurang untuk menyimpulkan semua struktur yang masuk akal

dari set aksioma. Aksioma dapat segera diformalkan, dan memberikan dasar teoritis

untuk pembuatan algoritma untuk penjelasan struktur berbantuan komputer (CASE)

Secara umum, kemajuan di area yang ditinjau sedang berlangsung dalam dua

arah berikut:

• saran eksperimen NMR baru dan instrumentasi untuk memperoleh sebanyak

mungkin informasi struktural dari jumlah sampel terkecil dalam waktu singkat

(memberikan solusi untuk masalah inversi pertama); dan,

• meningkatkan kinerja program CASE yang ada dan membuat yang baru

(memberikan solusi untuk masalah invers kedua).

B. Rumusan Masalah

Rumusan masalah yang dikaji dalam makalah ini adalah bagaimana

identifikasi dan elusidasi struktur spektoskopi NMR?

C. Tujuan

Tujuan yang ingin dicapai pada makalah ini adalah untuk mengetahui cara

indentifikasi dan elusidasi struktur spektoskopi NMR.

D. Manfaat

Manfaat yang dicapai pada makalah ini adalah dapat mengidentikasi dan

elusidasi struktur dari spektoskopi NMR.

3
 BAB II PEMBAHASAN

A. Perangkat Percobaan 1D- Dan 2D-NMR Yang Umum

Spektra 1H- dan 13C-NMR membawa informasi tentang komposisi kualitatif

dan kuantitatif dari yang tidak diketahui dan mereka digunakan pertama kali untuk

penentuan rumus molekul. Seiring dengan 1D 1H- dan 13C (15N jika tersedia) -NMR

spektrum, banyak percobaan NMR dua dimensi dikembangkan untuk penjelasan

struktur. Untuk molekul yang mengandung atom nitrogen, resonansi inti 15N

ditentukan dari 1H-15N heteronuklear-tunggal kuantum korelasi (HSQC) dan 1H-

15N heteronuklear multi-ikatan korelasi (HMBC) spektrum 2D (lihat di bawah). Set

percobaan 2DRMR yang paling sering digunakan disajikan pada Tabel 1.

Spektroskopi korelasi (COZY) dan korelasi HMBC yang panjangnya paling

sering tidak melebihi tiga ikatan disebut sebagai korelasi standar. Namun, tergantung

pada konfigurasi spasial suatu molekul, korelasi yang lebih lama dari korelasi standar

juga dapat diamati. Korelasi ini disebut sebagai korelasi non-standar (NSCs).

Kehadiran NSC, jumlah dan panjangnya dalam spektrum HMBC dan COZY sulit

dideteksi, dan masalah ini dapat membuat informasi awal tidak hanya kabur tetapi

juga kontradiktif.

B. Pengembangan Percobaan Dan Instrumentasi NMR

Kemajuan terbaru dalam pengembangan dan peningkatan eksperimen NMR 2D

dipertimbangkan secara luas dalam ulasan yang baru-baru ini dipublikasikan. Upaya

signifikan para peneliti difokuskan pada pembuatan metode untuk mendeteksi

4
korelasi yang panjangnya (setidaknya pada prinsipnya) dapat ditentukan secara jelas.

Misalnya, membedakan antara korelasi konstanta kopling 2JCH dan 3JCH dalam

spektrum HMBC mengarah pada memperoleh informasi struktural 2D-NMR yang

lebih tajam. Metode yang berbeda disarankan untuk mengurangi waktu untuk akuisisi

spektral, untuk meningkatkan sensitivitas dan untuk menyederhanakan proses pasca-

akuisisi data 2D-NMR.

Dari sudut pandang protokol untuk menjelaskan struktur kimia, spektrum 1H

hampir selalu direkam terlebih dahulu. Langkah selanjutnya adalah akuisisi data 2D-

NMR, dan direkomendasikan untuk memulai dengan spektrum HSQC (ME-HSQC)

yang diedit multiplisitas. Data HSQC dapat memberikan beberapa wawasan tentang

jumlah heteroatom yang mungkin, serta jumlah karbon parsial. Langkah selanjutnya

adalah mendapatkan spektrum COZY. Dengan memiliki 1H, COZY dan ME-HSQC,

dimungkinkan untuk mulai merakit fragmen struktural yang terdiri dari resonansi

karbon terprotonasi yang bersebelahan.

Memiliki rumus molekul dari HRMS dan HSQC, dimungkinkan untuk

menetapkan jumlah sinyal karbon kuartener yang diharapkan dalam spektrum 13C-

NMR dan jumlah minimum heteroatom. Kemudian, spektrum HMBC diperoleh, dan

pada prinsipnya, memungkinkan seseorang untuk melengkapi perakitan struktur.

Jika molekul mengandung atom nitrogen, menggunakan spektrum HMBC

1H-15N memberikan informasi berharga yang sangat penting untuk penjelasan

struktur dalam banyak kasus. Sensitivitas rendah dari percobaan HMH 1H-15N

diatasi dengan menggunakan probe invers volume kecil dan / atau probe NMR

5
kriogenik, yang memungkinkan akuisisi spektrum pada jumlah sampel sub-mikromol.

Jumlah publikasi dimana HMH 1H-15N digunakan terus meningkat. Eksperimen

baru-baru ini yang dilaporkan baru-baru ini pada longrange heteronuklear tunggal

ikatan korelasi kuantum tunggal (LR-HSQMBC) dioptimalkan untuk 1H-15N

kopling heteronuklear jangka panjang [36] dan korelasi banyak ikatan HCN

(HCNMBC) menghasilkan data yang melengkapi data 1H -15N korelasi tipe HMBC.

Diharapkan bahwa percobaan tersebut dapat memfasilitasi struktur penjelasan

molekul yang mengandung nitrogen, terutama yang termasuk senyawa heterosiklik

dan alkaloid.

Dibandingkan dengan MS dan spektroskopi optik, NMR memiliki sensitivitas

kurang signifikan, yang menjadi sangat penting mengenai ukuran sampel dan waktu

akuisisi 2D-NMR. Sebagai hasil dari kemajuan teknis, microprobe yang didinginkan

menjadi tersedia.

Hilton dan Martin menyelidiki batas kinerja eksperimental untuk ansambel

eksperimen 2D-NMR menggunakan spektrometer 600 MHz dengan 1,7 mm Bruker

TCI MicroCryoProbe. Suatu larutan yang mengandung 870 μg (2,6 μmol) dari

senyawa model - strychnine dalam 30 μL CDCl3 - digunakan. Waktu akuisisi berikut

untuk mendapatkan rasio signal-to-noise yang memadai telah ditentukan: COZY - 7

min; rotating-frame Overhauser-effect spectroscopy (ROESY) - 1 jam 11 menit;

Referensi 13C - 25 mnt; ME-HSQC - 7 mnt; 1H-13C HMBC - 33 mnt; 1H-13C

korelasi 2-ikatan heteronuklear (H2BC) - 3 jam 11 menit; 1H-15N HMBC - 1 jam 22

menit; sensitivitas yang cukup spektroskopi kuantum ganda (1,1-ADEQUATE) - 14

6
jam 40 menit. Pengenceran lebih lanjut menunjukkan bahwa, dengan sampel 45 μg

(150 nmol) bahkan 1H-15N HMBC tetap dapat diakses secara eksperimental selama

akhir pekan. Para penulis menyimpulkan bahwa, dengan sampel 1 mg strychnine (~ 3

μmol), sekarang dimungkinkan untuk memperoleh set lengkap eksperimen 2D-NMR

homonuklear dan heteronuklear dalam 4 jam (termasuk 1H -15N HMBC tetapi tidak

1 , 1-ADEQUATE) yang pada prinsipnya dapat digunakan untuk membangun

struktur kimia penuh dan stereokimia. Menggunakan peralatan yang sama seperti

pada, pergeseran murni sinyal ke noise tinggi (lihat di bawah) data HSQC dari sampel

metabolit 7,4 μg diperoleh hanya dalam waktu lebih dari 30 menit

Penjelasan struktur menjadi sangat menantang untuk molekul yang memiliki

defisit proton yang parah. Molekul-molekul ini mengandung fragmen "diam"

(kekurangan hidrogen), yang mencegah perakitan struktur menggunakan korelasi

HMBC. Jika rasio jumlah proton dalam molekul dengan jumlah atom berat

(misalnya, C, N, O, dan S) adalah <2, mungkin sulit dan, dalam beberapa kasus,

mustahil untuk menjelaskan struktur secara tegas. hanya berdasarkan pada data NMR

dan informasi rumus molekul. Pernyataan ini dikenal sebagai "Aturan kru". Untuk

menghindari masalah ini, beberapa pendekatan baru disarankan.

Pekerja kasar dan rekan adalah yang pertama menggunakan mikroskop

kekuatan atom (AFM) untuk menentukan struktur yang menantang dari molekul kecil

dengan membuat gambar kerangka terlihat. Kemudian, AFM dikombinasikan dengan

1D- dan 2D-NMR, teori fungsi kepadatan (DFT) dan sistem CASE ACD / Structure

7
Elucidator untuk menentukan struktur produk alami breitfussin A, Struktur 1

(fragmen "diam" disorot dengan huruf tebal)..

Eksperimen baru, sensitivitas tinggi yang melengkapi HMBC, LRHSQMBC

memperluas pengamatan data korelasi jarak jauh menjadi 4-, 5-, dan bahkan 6-ikatan

kopling heteronuklear jarak jauh nJCH. Panjang korelasi dapat diperkirakan dari

nJCH, yang percobaannya dioptimalkan. Korelasi ini dapat mencapai karbon

kuartener dari fragmen "diam", memungkinkan penjelasan struktur. Model proton-

defisien cervinomycin A2, Structure 2, C29H21NO9, digunakan untuk menilai manfaat

termasuk data LRHSQMBC sebagai input untuk ACD / Structure Elucidator.

Gambar. 1 menunjukkan korelasi LR-HSQMBC yang diamati (dioptimalkan pada 2

Hz).

Structure 2. Proton-deficient model compound cervinomycin A2.

Structure 1. Natural product breitfussin A.

Blinov et al. melakukan eksperimen komputasi analog menggunakan

staurosporine, C28H26N4O3, ("struktur Ulir"), sebagai senyawa model. Dalam hal

ini, serangkaian percobaan dilengkapi dengan spektroskopi korelasi total-IDR-HSQC

8
(TOCSY), 1H-15N HMBC, 1,1-ADEQUATE dan 1, -n-ADEQUATE. Hasil yang

diperoleh sangat menarik dan menyoroti kontribusi kombinasi LR-HSQMBC dan 1, -

n-ADEQUATE.

Seharusnya diharapkan bahwa penerapan kombinasi yang dijelaskan dari

eksperimen 2D-NMR dalam sistem CASE akan memungkinkan masalah “fragmen

diam” diatasi hingga tingkat yang cukup besar. Metodologi pendekatan yang

diuraikan harus dikembangkan lebih lanjut berdasarkan penjelasan struktur molekul

lain yang tunduk pada aturan Crews.

Structure 3. An unusual proton-deficient molecule.

9
Fig. 1. Long-range heteronuclear single quantum multiple bond correlations
(LRHSQMBCs) observed for cervinomycin A 2. Note that numerous long-range
correlations reach carbon atoms of the “silent fragment” .
Kummerlöwe et al. menyimpulkan bahwa data 2D-NMR, termasuk 1H -15N

HMBC dan 1,1-ADEQUATE, tidak cukup untuk menjelaskan struktur molekul

kekurangan proton yang tidak biasa secara manual, karena data HMH 1H-13C yang

sangat kontradiktif ( Kehadiran sembilan NSC, dua di antaranya memiliki panjang

ikatan lima dan agak kuat).

Zangger dan Sterk mengembangkan pendekatan "pergeseran murni",

menyediakan spektrum proton 1H-decoupled (mis., Semua multiplets diubah menjadi

singlet). Dalam beberapa tahun terakhir, upaya para peneliti diarahkan untuk

mengatasi kelemahan utama dari pendekatan ini - rendahnya sensitivitasnya. Sebagai

hasilnya, baru-baru ini, metode shift murni yang baru dan sangat umum, Pure Shift

Yielded by Chirp Excitation (PSYCHE), diperkenalkan oleh Morris dan rekan kerja.

PSYCHE memiliki sensitivitas sekitar 10 kali lipat lebih baik daripada metode

"pergeseran murni". Spektrum normal dan PSYCHE dari estradiol dalam DMSO-d6

ditunjukkan pada Gambar. 2 sebagai contoh.

Kelompok yang sama menerapkan PSYCHE pada eksperimen TOCSY.

Dalam kombinasi dengan pemrosesan kovarians (lihat di bawah), hasilnya adalah

spektrum TOCSY resolusi tinggi dengan resolusi tinggi dengan singlet di kedua

dimensi (lihat Gambar 3). Jelas bahwa pendekatan yang disarankan secara dramatis

10
memfasilitasi interpretasi spektrum 1D- dan 2D-NMR dan secara signifikan akan

menyederhanakan input data spektroskopi ke dalam program CASE.

Aplikasi analitis dari teknik ultra-cepat (UF) 2D-NMR, teknik ini memperoleh

spektrum 2D dalam beberapa detik, tetapi memiliki sensitivitas rendah. Misalnya,

untuk menggunakan spektra HSQC scan tunggal untuk pemantauan reaksi, solusi

0,44 M diperlukan. Kemungkinan lain untuk mempercepat perolehan spektrum

muncul ketika spektrometer NMR yang dilengkapi dengan dua atau lebih penerima

independen tersedia, yang memungkinkan berbagai jenis spektrum 2D diperoleh

secara bersamaan [60]. Misalnya, kombinasi paralel-akuisisi NMR semua-dalam-satu

aplikasi eksperimental (PANACEA)

Fig. 2. Spectra of estradiol obtained by (a) normal proton nuclear magnetic

resonance ( 1 H-NMR) spectroscopy and (b)Pure Shift Yielded by CHirp
Excitation (PSYCHE)

11
 Teknik pada prinsipnya dapat memperoleh semua data [termasuk

ADEQUATE tidak langsung (INADEQUATE)] yang diperlukan untuk penjelasan

struktur molekul kecil dalam satu percobaan, tetapi sensitivitas yang rendah

mencegah aplikasi yang luas. Versi timeshared (TS) yang lebih sensitif dari

eksperimen 2D-NMR (TS-HMBC, TS-HSQC, TS-HSQC-TOCSY, dan TS-

HSQMBC) disarankan oleh Parella dan Nollis [62] yang menunjukkan pemanfaatan

pendekatan ini untuk akuisisi simultan. dari spektrum 1H / 13C dan 1H / 15N-NMR.

12
C. Sistem Pakar CASE

Sistem pakar CASE meniru penalaran seorang pakar manusia selama proses

penjelasan struktur. Keuntungan utama sistem CASE berikut harus:

1. Semua pernyataan tentang keterkaitan antara spektrum dan struktur

("aksioma") diekspresikan secara eksplisit;

2. Semua konsekuensi logis (struktur) yang mengikuti sistem “aksioma”

disimpulkan sepenuhnya, tanpa pengecualian;

3. Jika data awal lengkap dan konsisten, proses penjelasan struktur berbasis

komputer biasanya cepat, secara signifikan menghemat waktu dan tenaga

ilmuwan; dan,

4. Jika ahli kimia memiliki beberapa set aksioma terkait dengan masalah

struktural yang diberikan, sistem pakar memungkinkan generasi cepat dari

semua konsekuensi dari masing-masing set dan mengidentifikasi struktur

yang paling mungkin dengan membandingkan solusi yang diperoleh.

D. NMR Prediksi Pergeseran Kimia

Seperti disebutkan di atas, prediksi pergeseran kimia NMR memainkan peran

yang tak ternilai dalam estimasi struktur yang disarankan. Pergeseran kimia dari inti

13C, 1H, 15N, 19F dan 31P dapat dihitung dengan menggunakan metode empiris dan

kuantum-mekanis (QM). Prediktor spektrum NMR berdasarkan kode HOSE, jaring

saraf, dan pendekatan inkremental paling sering digunakan dan ditinjau. Prediktor

13
dapat dimasukkan dalam sistem pakar (seperti yang dijelaskan untuk ACD / Structure

Elucidator dan LSD) atau digunakan secara terpisah sebagai program komersial atau

gratis. Program ini memberikan akurasi prediksi pergeseran kimia 13C sekitar 1,5-1,8

ppm, yang hampir selalu memungkinkan untuk memilih struktur yang paling

mungkin di antara kandidat. Prediksi ini sangat cepat. Sebagai contoh, program

tambahan yang dimasukkan ke dalam ACD / Structure Elucidator menghitung ~

10.000 shift per detik pada PC standar.

Sebuah program baru, NMRscape untuk perhitungan pergeseran kimia 13C

berdasarkan prinsip-prinsip baru {teori OptiChem } baru-baru ini dikembangkan dan

diuji pada beberapa keluarga struktur. Hasilnya tampak agak menjanjikan, karena

akurasi yang diberikan oleh pendekatan ini diharapkan lebih tinggi daripada yang

melekat pada metode empiris yang ada.

Kelemahan umum dari semua metode empiris adalah bahwa akurasi prediksi

tergantung pada komposisi database yang digunakan untuk pelatihan program.

Sebaliknya, metode kimia-kuantum DFT GIAO tidak menderita dari keterbatasan ini,

tetapi sangat memakan waktu dan ada masalah dalam memilih set fungsional dan

dasar yang tepat untuk perhitungan. Strategi optimal berikut yang secara bersama-

sama memanfaatkan metode empiris dan QM untuk penjelasan struktur disarankan

semua struktur kandidat harus diberi peringkat pertama oleh prediksi spektrum 13C

empiris, dan, jika penyimpangan rata-rata antara spektrum eksperimental dan prediksi

dihitung untuk dua hingga tiga struktur peringkat atas adalah besar atau sangat dekat,

hanya kemudian prediksi QM harus dilakukan untuk struktur yang dipertanyakan.

14
Kemungkinan ditunjukkan dari penerapan sukses perhitungan JHH, JHC, dan JCC

couplingconstant dengan metode QM untuk membedakan isomer yang memiliki

struktur yang sangat mirip.

E. Verifikasi Struktur

Verifikasi struktur berdasarkan prediksi pergeseran kimia 13C

memungkinkan pemilihan struktur yang benar di antara ribuan hipotesis masuk akal

yang dihasilkan oleh sistem CASE. Untuk verifikasi struktur yang disarankan untuk

set besar molekul disintesis, prediksi pergeseran kimia 1H sering digunakan karena

kemungkinan cepatnya memperoleh spektrum dengan ukuran sampel yang kecil.

Ketergantungan pergeseran kimia proton pada, misalnya, pelarut, suhu, dan pH,

membatasi kegunaan dari pendekatan ini. Pemanfaatan PSYCHE 1H-NMR

digabungkan dengan shift murni ME-HSQC yang diperoleh menggunakan

MicroCryoProbe 1,7 mm akan membuat pendekatan lebih kuat.

Verifikasi dan identifikasi molekul organik dari basis data struktur

menggunakan spektra 1H dan 13C-NMR yang dilaporkan. Keyes et al. meneliti

metode validasi struktur menggunakan seperangkat 500 senyawa yang dipasok

dengan data 1H, HSQC, LC-MS dan HPLC. Spektra 1H dan HSQC diprediksi

menggunakan ACD / NMR Predictor dan dibandingkan dengan spektra

eksperimental. Disimpulkan bahwa pendekatan ini sangat praktis untuk diterapkan di

perusahaan farmasi. Karena implementasi saat ini dari sistem verifikasi struktur

otomatis memungkinkan hasil positif palsu, pendekatan berdasarkan spektrum 1H

15
dan HSQC disarankan yang sangat mengurangi kemungkinan sistem validasi

otomatis melewati struktur yang salah (mis., False positive). Metode novel diperiksa

dengan validasi otomatis dari 127 senyawa, yang menunjukkan pengurangan tingkat

positif palsu dari 20% menjadi 5%. Plainchont dan Nuzillard mengusulkan untuk

memverifikasi struktur molekul menggunakan kombinasi 1D dan 2D HSQC, COZY

dan spektrum HMBCNMR. Pendekatan ini tidak cocok untuk verifikasi struktur yang

cepat, tetapi lebih cocok untuk analisis struktur yang diragukan untuk verifikasi.

F. Identifikasi Struktur Dan Dereplikasi Dalam Campuran

Dereplikasi senyawa organik (identifikasi dalam campuran) merupakan

masalah yang menantang untuk spektroskopi NMR. Jika jumlah sampel cukup untuk

pemisahan masing-masing komponen, mereka dapat ditentukan dengan pencarian

spektral terhadap basis data NMR, atau struktur yang tidak diketahui dijelaskan

dengan menggunakan MS dan seperangkat umum spektrum 1D- dan 2D-NMR.

Misalnya, Thummala et almengisolasi pengotor ambroxol yang tidak diketahui

menggunakan HPLC preparatif dan membangun strukturnya dengan aplikasi

gabungan 2D-NMR, FTIR dan LC-MS / MS.

Karena penugasan spektrum 1H manual adalah prosedur yang memakan

waktu, melelahkan dan rawan kesalahan, sistem pakar untuk penugasan atom-ke-

puncak atau multiplet otomatis untuk spektrum 1H-NMR dari molekul kecil telah

dikembangkan. Ditemukan dengan kumpulan uji 90 senyawa yang 94% dari tugas

sudah benar, sehingga mengkonfirmasikan efisiensi program.

16
 Berbagai pendekatan eksperimental NMR dikembangkan untuk analisis

kualitatif campuran tanpa fraksinasi atau pemisahan awal. Eksperimen spektroskopi

dipesan-memesan (DOSY) NMR didasarkan pada molekul dari berbagai ukuran dan

bentuk sering memiliki koefisien difusi yang berbeda. DOSY sangat kuat untuk

mempelajari campuran kompleks, tetapi penerapannya masih terbatas, terutama

ketika sistem dinamis atau tidak stabil dipelajari. Versi UF dari DOSY baru-baru ini

dideskripsikan sebagai cara mengatasi kelemahan ini. Morris dan rekan kerja

mengembangkan percobaan DOSY pergeseran murni, yang sangat memperluas

jangkauan penerapan DOSY. Spektra sederhana (pergeseran murni) PSYCHE 1H-

NMR (lihat Gambar 2) jelas sangat menjanjikan untuk menganalisis campuran

kompleks dengan 1H-NMR. Suatu metode analisis campuran berdasarkan 13CNMR

mungkin dapat diperluas ke spektrum campuran PSYCHE 1H-NMR.

Meskipun sensitivitas NMR secara signifikan lebih rendah dari MS, LC-

NMR sekarang tersedia sebagai metode berpasangan untuk analisis campuran. Hanya

1H spektra yang biasanya dapat diperoleh dalam mode aliran kontinu. Sensitivitas

yang rendah dari pendekatan mencegah aplikasi yang luas. Namun, baru-baru

ini,Foley dan rekannya menggambarkan aplikasi pemantauan reaksi online

menggunakan NMR aliran kontinu. Probe 5 mm NMR standar memungkinkan

peneliti untuk melakukan percobaan pada campuran reaksi mengalir menggunakan

berbagai spektrometer dari berbagai kekuatan medan magnet. Dilaporkan bahwa

spektrum UF COZY digunakan untuk pemantauan reaksi menggunakan pengaturan

HPLCNMR komersial.

17
G. Apakah Mungkin Untuk Menghindari Penjelasan Struktur Yang Salah?

Karena penjelasan struktur spektroskopi adalah proses logiscombinatorial

yang kompleks, tidak mengherankan bahwa ilmuwan yang berbeda dapat datang ke

struktur yang berbeda dari data awal yang sama. Serangkaian ulasan membahas

banyak kesalahan struktural.Alasan paling umum berikut untuk mendapatkan struktur

yang salah dapat dicatat:

a) resonansi parah tumpang tindih dalam spektrum NMR;

b) saran pengguna yang salah ("aksioma");

c) kesimpulan logis yang keliru disimpulkan dari ada atau tidak adanya fitur

spektral karakteristik dalam spektrum 1D-NMR dan 2D-NMR;

d) kompleksitas, ketidakkonsistenan, dan keterikatan informasi awal.

Analisis berbasis sistem COSY dari banyak kasus, ketika struktur yang salah

disimpulkan, menunjukkan [1,13,75,113] bahwa penerapan CASE memungkinkan

penentuan struktur yang benar dan penyebab kesalahan manusia terdeteksi. Secara

kiasan, sistem CASE dapat digunakan sebagai "detektor poligraf". Untuk

menghindari kesalahan yang menjengkelkan, disarankan untuk memprediksi

perubahan kimia 13C-NMR dan 1H-NMR untuk setiap hipotesis struktural dalam

proses penelitian kimia.

18
 BAB III KESIMPULAN

Spektroskopi NMR kontemporer adalah rutinitas yang paling kuat

alat analisis untuk penjelasan dan identifikasi struktur molekul,

mengingat bahwa rumus molekul ditentukan menggunakan HRMS dan semua data

spektroskopi yang tersedia. 2D-NMR memainkan peran penting dalam membangun

struktur molekul organik baru, dan, sampai saat ini, berbagai jenis eksperimen 2D-

NMR telah diuraikan. Metode ini dikembangkan secara ekstensif untuk menyediakan

kemungkinan memperoleh sebanyak mungkin informasi struktural dari jumlah

sampel minimum (<10 μg) dalam waktu terpendek waktu instrumen. NMR berhasil

digunakan untuk dereplikasi struktur dan analisis campuran, termasuk penggunaan

LC-NMR. Banyak penelitian telah menunjukkan bahwa CASE adalah penguat

kecerdasan manusia yang kuat. Seharusnya diharapkan bahwa penerapan spektrum

pergeseran murni sebagai input untuk program kecerdasan buatan dikembangkan

secara ad hoc untuk data impor ke sistem CASE akan mengotomatisasi prosedur ini

secara signifikan, jadi memfasilitasi dan mempercepat tahap persiapan data.

19
 DAFTAR PUSTAKA

Elyashberg, M., 2015, Identification and Structure Elucidation by NMR

Spectroscopy, Trends in Analytical Chemistry, 89:88-97.

20