Katalase (EC 1.11.1.6) menguraikan hidrogen peroksida menjadi air dan oksigen.

Reaksi katalitik berlangsung dalam dua langkah. Molekul hidrogen peroksida pertama
mengoksidasi heme menjadi spesies oxyferryl di mana satu ekuivalen oksidasi
dihilangkan dari besi dan satu dari cincin porfirin untuk menghasilkan radikal kation
porfirin (reaksi 2a). Hidrogen peroksida kedua kemudian digunakan sebagai reagen
dengan senyawa I - Enz (Por + • - FeIV = 0) untuk meregenerasi enzim keadaan
istirahat, air, dan oksigen - reaksi 2b (Switala dan Loewen, 2002) (Miłek, 2018).
Katalase juga digunakan untuk menghilangkan hidrogen peroksida dari limbah
pemutihan industri tekstil karena dampak lingkungan yang ketat dari spesies oksigen
reaktif ini. Selanjutnya, katalase telah digunakan dalam proses bioremediasi dimana
hidrogen peroksida (H2O2) digunakan sebagai sumber oksigen dalam kondisi aerobik
karena menyebabkan pemecahan H2O2 menjadi air dan oksigen. Limbah cair dari
industri tekstil mengandung hidrogen peroksida dalam jumlah besar untuk proses
pemutihan yang digunakan dalam industri ini. Khususnya, tekstil pemutihan adalah
proses yang intensif air dan dengan demikian, beberapa metode telah disarankan untuk
menurunkan hidrogen peroksida, yang akan memungkinkan daur ulang limbah
pemutihan dalam proses pewarnaan. Penggunaan air untuk pengolahan bahan baku
tekstil bervariasi dengan berbagai tekstil seperti serat Lyocell dan kapas (Chico et al.,
2013; Amorim et al., 2002) (Kaushal dkk, 2018).
Katalase dikenal sebagai antioksidan yang menguraikan H2O2 menjadi O2 dan
H2O. Namun, katalase berevolusi ketika metabolisme sebagian besar berbasis sulfur,
jauh sebelum O2 dan spesies oksigen reaktif (ROS) menjadi melimpah, katalase
memetabolisme spesies sulfat reaktif (RSS). Di sini kita menguji metabolisme katalase
H2Sn, analog sulfur H2O2, hidrogen sulfida (H2S) dan molekul-molekul lain yang
mengandung sulfur menggunakan elektroda amperometrik spesifik H2S dan fluorofor
untuk mengukur polisulfida (H2Sn; SSP4) dan ROS (dichloro fl uorescein, DCF).
Katalase menghilangkan H2Sn, tetapi tidak secara anaerob katalase menghasilkan
H2S, produk yang dihasilkan dari pemecahan. Sebaliknya, konsentrasi katalase dan
oksigen secara dependen memetabolisme H2S dan dengan demikian bertindak sebagai
sulfidase oksidase dengan P50 20 mmHg. H2O2 sedikit berefek pada metabolisme H2S
yang dimediasi-katalase, tetapi saat bertemu katalase inhibitor, natrium azida (Az),
H2O2 dengan cepat dan efisien dipercepat metabolisme H2S di kedua normoxia dan
hipoksia menunjukkan H2O2 adalah akseptor elektron yang efektif dalam reaksi ini.
Tanpa diduga, H2S konsentrasi-dependen yang dihasilkan secara dependen dari
dithiothreitol (DTT) baik dalam normoksia maupun hipoksia, secara bersamaan
mengoksidasi H2S di hadapan produksi O2.H 2S dari DTT dihambat oleh karbon
monoksida dan ditambah oleh NADPH yang menunjukkan bahwa katalase heme-besi
adalah situs katalitik dan NADPH menunjukkan pengurangan setara. Katalase juga
menghasilkan H2S dari minyak bawang putih, diallyltrisulf de, thioredoxin, dan sulfur
dioksida, tetapi bukan dari sulfida, metabisulfida, karbonil sulfida, sistein, sistin,
glutathione atau glutathione teroksidasi. Aktivitas oksidase juga hadir dalam katalase
dari Aspergillus niger. Hasil ini menunjukkan bahwa katalase dapat bertindak sebagai
sulfidase oksidase atau reduktase belerang dan mereka menunjukkan bahwa kegiatan
ini kemungkinan memainkan peran penting dalam metabolisme belerang selama
evolusi dan dapat terus melakukannya dalam sel-sel modern juga. Ini juga tampaknya
menjadi pengamatan pertama aktivitas katalase reduktase yang terlepas dari
pemindahan peroksida (Olson, 2017).
Hidrogen peroksida (H2O2) adalah ROS yang biasanya terlibat dalam respons
tanaman, dan katalase (CAT) adalah salah satu enzim penangkap ROS yang paling
penting dari tanaman, mengingat hal itu, karena aksi katalase dan peroksidase yang
menguraikan zat ini, masa hidup H2O2 dalam jaringan hidup tidak terlalu lama (<1
detik) [2,3]. Catalase adalah enzim antioksidan pertama yang ditemukan dan
dikarakterisasi [2] dan menampilkan distribusi spasial dan temporal dalam jaringan
tanaman [4]. Yang sebenarnya (monofungsional) mengkatalisis reaksi dismutasi di
mana molekul H2O2 awal direduksi menjadi H2O dan H2O2, kemudian dioksidasi
menjadi O2 [5]. dibedakan dari yang monofungsional oleh ketidakpekaan relatifnya
terhadap inhibitor 3-AT [2]. Enzim bifungsional, melalui aktivitas peroksidasi mereka,
dapat mengubah H2O2 menjadi H2O dengan bantuan substrat pereduksi [5] (Chioti
dan Zervoudakis, 2017).
Hidrogen peroksida didapatkan dengan teknik in vivo atau mengacu pada
eksperimen menggunakan keseluruhan organisme hidup, terutama di mitokondria,
tetapi juga di kompartemen sel eukariotik lainnya, misalnya peroksisom dan retikulum
endoplasma. Konsentrasinya diatur secara ketat melalui aksi, tidak hanya katalase
tetapi juga beberapa isoform glutathione peroksidase (GPXs) dan peroxiredoxins
(PRXs). Sementara katalase menggunakan gugus heme untuk mengurangi /
mengoksidasi H2O2, GPXs dan PRXs bertindak melalui residu selenosistein atau
sistein dan masing-masing memerlukan glutathione (GSH) dan thioredoksin, untuk
menyelesaikan siklus katalitik, dan NADPH untuk mengurangi kofaktor teroksidasi.
Katalase dalam sel eukariotik terutama menghilangkan H2O2 yang dihasilkan oleh
peroksisomal oksidase [3] tetapi juga dapat memecah H2O2 yang berdifusi menjadi
peroksisom [4]. Catalase memainkan peran penting dalam menghilangkan H2O2
dalam eritrosit [5]. Beberapa jumlah katalase juga telah terdeteksi dalam mitokondria
jantung tikus dan tikus [6], dalam sitoplasma [7], serta pada membran sitoplasma sel
kanker manusia [8]. GPXs dan PRXs lebih banyak didistribusikan melalui sel. Karena
adanya enzim ini, konsentrasi H2O2 intraseluler pada kondisi fisiologis dijaga dalam
kisaran 1–10 nM. Konsentrasi normal H2O2 dalam plasma darah tampaknya 2-3 kali
lipat lebih tinggi dari yang diperkirakan dalam sel ([9] dan referensi ada di sana). H2O2
dapat meninggalkan dan memasuki sel melalui aquaporin (Gebicka dan Krych-Madej,
2019).
Protein hidrogen peroxida telah ditemukan pada jamur, archeobacteria dan
bakteri. Berat molekul mereka bervariasi, antara 120 dan 340 kDa dan mereka
umumnya homodimer. Aktivitas katalase (mendegradasi hidrogen peroksida) kurang
efisien daripada katalase khas, tetapi catalaseperoxidases memiliki afinitas yang lebih
baik untuk substrat H2O2 mereka. Katalase-peroksidase juga secara signifikan lebih
sensitif daripada katalase khas terhadap inaktivasi oleh pH dan suhu. Peroksidase lobak
terkenal yang saat ini digunakan dalam eksperimen imunoblotting, yang merupakan
salah satu contoh katalase-peroksidase (Glorieux dan Calderon, 2017).
Pemisahan membran xilosa dan glukosa dapat dicapai melalui oksidasi glukosa
menjadi asam glukonat dengan katalisis glukosa oksidase enzimatik. Oksigen untuk
reaksi ini dapat disuplai melalui dekomposisi hidrogen peroksida oleh katalase katalitik
enzimatik. Untuk memaksimalkan produktivitas biokatalitik glukosa oksidase dan
katalase (hasil asam glukonat per jumlah total enzim). Imobilisasi enzim yang
diinduksi fouling atau pembentukan lapisan deposit pada permukaan perpindahan
panas dari bahan atau senyawa yang tidak diinginkan, dalam dukungan berpori
membran ultrafiltrasi digunakan sebagai strategi untuk terperangkapnya glukosa
oksidase dan katalase. Produktivitas membran biokatalitik reaktor sangat bergantung
dengan ketersediaan oksigen, yang pada gilirannya tergantung pada konfigurasi
reaktor, konsentrasi hidrogen peroksida, dan asal katalase. Ketika glukosa oksidase dan
katalase (dari Aspergillus niger) bebas dalam bioreaktor membran, total produktivitas
biokatalitik adalah 122 mg asam glukonat/mg enzim yang diperoleh setelah lima siklus
reaksi berurutan. Enzim bebas menunjukkan kinerja yang unggul dibandingkan dengan
sistem amobil sebagai hasil dari substrat terbatas dan difusi produk dalam kasus yang
terakhir (Morthensen dkk, 2016).
KatG adalah enzim bifungsional, bergantung pada heme di garis depan
pertahanan sejumlah bakteri dan jamur patogen terhadap kerusakan oksidatif yang
diinduksi H2O2 dari respon imun inang. Bertentangan dengan perkiraan bahwa
aktivitas katalase dan peroksidase harus saling menolak, donor elektron peroksidatik
(PxED) meningkatkan aktivitas katalase KatG. Di sini, kami membangun mekanisme
kerja sama yang sinergis antara kegiatan-kegiatan ini. Kami menunjukkan bahwa pada
nilai pH rendah KatG dapat sepenuhnya mengubah H2O2 menjadi O2 dan H2O hanya
jika PxED hadir dalam campuran aksi di sana. Hasil spektroskopi aliran-berhenti
menunjukkan tingkat awal yang cepat, dari disproporsi H2O2 melambat bersamaan
dengan akumulasi keadaan heme seperti ferro. Keadaan ini sangat lambat untuk
kembali ke enzim resting (yaitu ferric), menunjukkan bahwa mereka mewakili
intermediet katalase yang tidak aktif. Kami juga menunjukkan bahwa anactive-
sitetryptophan, Trp-321, berpartisipasi dalam transfer elektron jalur keluar. Varian
AW321F, di mana triptofan proksimal digantikan dengan fenilalanin anon-teroksidasi
yang menunjukkan aktivitas katalase yang lebih tinggi dan lebih sedikit akumulasi
intermediet heme off-pathway. Akhirnya, eksperimen EPR pembekuan cepat
menunjukkan bahwa baik WT dan W321F KatG menghasilkan kation metionin-tirosin-
tryptophan (MYW) yang sama atau perantara radikal pada pasir titik waktu reaksi
paling awal dimana Trp-321 adalah tempat yang disukai protein off-katalase oksidasi
pada enzim asli. Dari catatan, PxEDs tidak mempengaruhi pembentukan radikal
kofaktor MYW tetapi dapat mengurangi spesies radikal berbasis protein nonproduktif
yang terakumulasi selama reaksi dengan H2O2. Hasil kami menunjukkan bahwa
intermediet katalase tidak aktif terakumulasi karena oksidasi off-mekanisme, terutama
Trp-321, dan PxED merangsang aktivitas katalase KatG dengan mencegah akumulasi
intermediet tidak aktif (Njuma dkk, 2017).
Untuk menentukan apakah inaktivasi H2S yang dimediasi oleh katalase,
digunakan suatu proses oksidatif yang mengandung katalase dideoksigenasi dengan
melewatkan 100% N2 ke dalam bilik melalui jarum 21 g yang dimasukkan ke dalam
penghenti sampai O2 dilepas seperti ditunjukkan oleh elektroda O2. Ini menurunkan
tingkat konsumsi H2S yang menegaskan bahwa ini adalah proses oksidatif.
Eksperimen awal menunjukkan bahwa oksidasi H2S tidak dipengaruhi oleh campuran
N2 keseimbangan O2 6%. Untuk memeriksa ketegangan O2 di bawah ini, gas 6% O2
/ bal N2 dicampur dengan 100% N2 menggunakan pompa pencampur gas Wöstho ff
Digamix (H. Wöstho ff Messtechnik GmbH, Bochum, Jerman). Sampel diberi gas
seperti di atas dan Po2 terus dipantau. Tekanan parsial O2 di mana oksidasi katalase
dibelah dua (P50) ditentukan dari grafik persen konsumsi H2S vs persen O2 dalam
bilik. Konsentrasi oksigen dalam μM ditentukan dari tekanan barometrik (PB) yang
berlaku yang diukur di laboratorium dengan barometer merkuri, tekanan uap air
(PH2O, 17,5 mmHg pada 20 ° C) dan koefisien kelarutan oksigen (Olson, 2017).