Aster yellow phytoplasmas (AYPs) adalah patogen serius dari sejumlah besar tanaman penting yang

ekonomis dan tanaman hias. Akibatnya, AYP telah menjadi fokus dari banyak penelitian. Banyak AYP
ditransmisikan oleh wereng daun polifag, termasuk untuk contoh belalang aster Macrosteles
quadrilineatus (Forbes). Leafhopper ini memiliki kisaran inang lebih dari 300 spesies tanaman. Yang
menarik adalah fenomena peningkatan fekunditas dan preferensi inang tanaman vektor in-sectional
sehubungan dengan tanaman yang terinfeksi AYP. M. quad-rilineatus memiliki peningkatan fekunditas
pada beberapa spesies tanaman inang ketika mereka terinfeksi AYP (Peterson, 1973; Beanland et al.,
2000). Daun-hopper monophagous, Dalbulus maidis (Delong dan Wolcott) secara normal diadaptasi
untuk jagung (Zea mays L.) untuk oviposisi dan pemberian makan (Barnes, 1954). Namun, D. maidis akan
bertahan lebih lama secara signifikan di China yang terinfeksi AYP (Callistephus chinensis Nees) dan
selada (Lactuca sativa L.) dibandingkan dengan tanaman sehat (Purcell, 1987).

Genom dari satu galur AYP, sapu penyihir kuning aster (AY-WB), telah diurutkan untuk diselesaikan (Bai et
al., 2006). Ini akan memungkinkan investigasi efek preferensi inang pada tingkat molekuler. Penelitian ini
bertujuan untuk menguji perubahan preferensi inang tanaman serangga dalam kaitannya dengan
tanaman yang terinfeksi AY-WB. Dibandingkan di sini adalah kelangsungan hidup M. quadrilineatus
polyphagous dan D. maidis monophagous pada lima spesies tanaman, baik yang sehat dan yang
terpengaruh dengan AY-WB. Selanjutnya, kami mulai dengan pengembangan uji makan pada Arabidopsis
thaliana (L.) Heynhold, untuk memantau perbedaan perilaku makan M. quadrilineatus dan D. maidis.
Kami akan menggunakan uji makan ini untuk mengukur perubahan dalam perilaku makan yang terkait
dengan tanaman yang terinfeksi AY-WB.

Material dan Metode

M. quadrilineatus adalah vektor efektif dari phyto-plasma AY-WB untuk berbagai spesies tanaman
(Shultz, 1973). Leafhopper ini digunakan untuk inokulasi AY-WB dari semua tanaman yang digunakan
dalam percobaan. Spesies tanaman yang digunakan dalam penelitian ini adalah A. thaliana, Nico-tiana
benthamiana L., selada (L. sativa), aster Cina (C. chinensis) dan jagung (Z. mays). Semua tanaman terkena
10 AY-WB M.quadrilineatus yang terinfeksi pada tahap pertumbuhan yang seragam selama 7 hari.
Jumlah tanaman yang sama memiliki perlakuan yang sama dengan serangga sehat. Serangga kemudian
dipindahkan dan tanaman diamati untuk pengembangan gejala yang terjadi pada ~ 18 hari setelah hari
pertama paparan serangga. Semua tanaman disimpan secara terpisah di kandang tabung tanaman
plastik individu. Untuk memantau kelangsungan hidup serangga pada tanaman yang terinfeksi AY-WB
dan sehat, 10 wereng dewasa dewasa sekitar usia yang sama dari M. quadrilineatus atau D. maidis
ditambahkan ke masing-masing kandang tabung. Pemantauan kelangsungan hidup dilakukan selama 10
hari. Untuk uji makan pada A. thaliana, 5 serangga e-ther M. quadrilineatus atau D. maidis terbatas pada
daun tunggal menggunakan kandang daun. Serangga diamati selama 5 hari. Daun dipanen untuk
pewarnaan trypan blue, DAB dan anilin blue. Kerusakan diukur dengan menghitung luas sel yang terlihat
rusak per satuan luas permukaan daun.

Sejauh ini kami telah mengamati peningkatan kelangsungan hidup M. quadrilineatus dan D. maidis pada
tanaman yang terinfeksi AY-WB dibandingkan tanaman sehat dari kelima spesies tanaman yang
digunakan dalam percobaan. D. maidis pada N. benthamiana, selada dan aster Cina memiliki
peningkatan yang paling nyata dalam kelangsungan hidup pada tanaman yang terinfeksi AY-WB daripada
pada tanaman sehat. Tiga replikasi dari setiap percobaan sejauh ini telah selesai dan tiga replikasi lebih
lanjut untuk setiap percobaan saat ini sedang dilakukan. Uji makan pada daun A. thaliana yang sehat
telah menunjukkan perbedaan perilaku makan antara M.quadrilineatus dan D. maidis. Lokasi makan M.
quadrilineatus terutama terletak di vena primer dan sekunder di pusat daun, sedangkan kerusakan
makan D. maidis jelas lebih banyak di pinggiran daun. M. quadrilineatus juga menghasilkan lebih banyak
tempat makan dibandingkan dengan D. maidis. Akhirnya, mayoritas M. quadrilineatus masih hidup
dalam 5 hari, sedangkan semua wereng D. maidis telah mati.
(a) China aster sehat. (B) aster China yang terinfeksi AY-WB. Perhatikan gejala sapu penyihir. (c)
Macrosteles quadrilineatus, vektor wereng AY-WB. (Foto dalam A dan B dicetak ulang dari Zhang J.,
Hogenhout SA, Nault LR, Hoy CW dan Miller SA (2004). Analisis molekuler dan gejala dari strain
phytoplasma dari selada mengungkapkan populasi yang beragam. Fitopatologi, 94, 842-849. dengan izin
jurnal.)

Gejala penyakit:

Pada tanaman, fitoplasma menginduksi gejala yang menunjukkan gangguan pada perkembangan
tanaman. Gejala khas meliputi: sapu penyihir (pengelompokan cabang) dari jaringan yang sedang
berkembang; phyllody (metamorfosis retrograde dari organ bunga dengan kondisi daun); virescence
(warna hijau dari bagian bunga non-hijau); lari (pertumbuhan batang memanjang); pembentukan akar
sekunder berserat banyak; memerahnya daun dan batang; kekuningan umum, penurunan dan
pengerdilan tanaman; dan nekrosis floem. Fitoplasma dapat bersifat patogen pada beberapa inang
serangga, tetapi umumnya tidak secara negatif mempengaruhi kesesuaian vektor serangga utama
mereka. Bahkan, fitoplasma dapat meningkatkan fekunditas dan kelangsungan hidup vektor serangga,
dan dapat mempengaruhi perilaku terbang dan preferensi inang tanaman inang serangga mereka.
Siklus hidup fitoplasma melibatkan replikasi pada tanaman dan serangga.
(a) Ilustrasi skematis dari berbagai tahapan gerakan fitoplasma melalui tanaman dan inang
wereng. Fitoplasma diindikasikan sebagai titik merah gelap dan gerakan fitoplasma ditandai
dengan panah merah gelap. Leafhoppers memperoleh phytoplasma dari phloem tanaman (ph).
Fitoplasma yang dicerna dengan getah tanaman bergerak melalui saluran makanan stylet dan
saluran usus, dan menyerang sel-sel epitel dan otot esofagus (Es), midgut anterior (Amg), mid
midgut (Mmg), mid midgut (Mmg), ruang filter (Fc), Malpighian tubulus (Mt) dan hindgut (Hg).
Sama halnya dengan spiroplasmas (Özbek et al., 2003), phytoplasma mungkin melewati lamina
basal untuk memasuki hemolimf (He), dari mana mereka dapat pindah ke kelenjar ludah (Sg).
Mereka berkembang biak di sel kelenjar ludah sekretori dan kemudian diangkut bersama dengan
air liur ke saluran saliva (Sd). Fitoplasma dimasukkan kembali ke jaringan floem tanaman inang
selama pemberian makan dan air liur wereng. (b – e) Elektron mikrograf fitoplasma (panah) di
floem tanaman dan di berbagai jaringan wereng seperti yang ditunjukkan dalam (a).
(b) AY-WB dalam elemen saringan yang berdekatan (se1) dekat dengan nukleus (n) daun aster;
panah menunjukkan pori saringan antara pelat saringan (sp), dan tanda bintang menunjukkan
kemungkinan membagi sel-sel phytoplasma.
(c) AY-WB (panah) dalam sel epitel midgut dari vektor wereng M. quadrilineatus; tanda bintang
menunjukkan area sitoplasma yang kurang padat.
(d) Akumulasi phytoplasma aksi lebat jagung (MBSP, panah) dalam sitoplasma sel dalam lapisan
otot di sekitar midgut vektor wereng D. maidis; perhatikan bahwa fitoplasma terletak dekat
dengan nukleus (n).
(e) MBSP (panah) di sitoplasma sel sekresi kelenjar ludah di D. maidis; panah menunjukkan
fitoplasma yang dekat dengan vesikel sekretori (sv). Singkatan lainnya: bl, basal lamina; Br,
otak; Cng, ganglion saraf majemuk; mv, mikrovili; pm, membran plasma; sm, bahan sekretori;
Sp, pompa saliva; St, stilet; Xy, xilem. Skala bar, 1 μm.