ANALISA YEAST MOLD

A. Alat
1. Tabung Reaksi Berulir
2. Pipet volume 10ml
3. Mikropipet
4. Tips pipet 1ml
5. Autoklaf
6. Laminar Airflow
7. Cawan Petri
8. Botol sample
9. Dispenser Set
10. Wadah tips pipet
11. Inkubator suhu 25o ± 1 C
12. Gelas ukur 100 ml
13. Gelas ukur 500 ml
14. Vorteks
15. Oven suhu 170 oC
16. Timbangan analitik
17. Bunsen
18. Hot Plate stirrer
19. Magnetic stirrer

B. Bahan
1. Contoh Uji
2. Aquadest
3. Media Yeast Glucose Chloramphenicol Agar (YGC)
4. Media Buffered Peptone Water (BPW)

C. Pembuatan Media Yeast Glucose Chloramphenicol Agar (YGC)

1. Timbang YGC sesuai dengan ketentuan yang tertera pada label kemasan. Jumlah media
dapat disesuaikan dengan kebutuhan.
 2. Larutkan dalam botol sample dengan aquadest sesuai jumlah diperlukan dan diaduk
sampai rata.
3. Panaskan pada Hot Plate stirrer dengan menggunakan Magnetic stirrer hingga mendidih
sampai larutan bening dan larut semua.
4. Sterilisasi larutan dengan menggunakan autoklaf selama 15 menit pada suhu 121oC
5. Setelah selesai autoklaf media didinginkan dan simpan pada inkubator/waterbath suhu +
48 oC.

D. Pembuatan Larutan Pengencer BPW

1. Timbang media BPW sesuai takaran dalam kemasan, larutkan dengan aquadest ke dalam
botol sample dan diaduk sampai rata. Jumlah pengencer dapat disesuaikan dengan
kebutuhan.
2. Masukan ke dalam tabung reaksi dengan menggunakan dispenser set sebanyak 9 ml atau
ke dalam botol sample sebanyak 90ml, 225 ml dan 450ml sesuai kebutuhan.
3. Sterilisasi pengencer dengan menggunakan autoklaf selama 15 menit pada suhu 121oC.
4. Setelah selesai autoklaf, larutan pengencer tersebut dapat disimpan pada suhu ruang.

E. Pengujian Yeast & Mold Count Dengan Metode Hitungan Cawan

1. Aduk contoh secara merata sebelum pengambilan contoh uji
2. Pengambilan contoh dapat dilakukan dari yang belum dilakukan pengenceran (10-0 ) atau
dari larutan pengenceran selanjutnya (10-2, 10-3, 10-4, dan seterusnya) sesuai kebutuhan
dengan mengambil 1 ml larutan sebelumnya menggunakan pipet steril ke dalam 9 ml
larutan pengencer.
3. Kocok setiap pengenceran dengan menggunakan vorteks.
4. Pipet 1 ml dari tingkat pengenceran yang diinginkan ke dalam cawan petri steril yang
telah diberi label identitas contoh, lakukan duplo.
5. Tuangkan 12-15 ml agar YGC cair ke dalam cawan petri secara aseptis.
6. Campurkan contoh dan agar dengan menggerakkan cawan petri sedemikian rupa
sehingga campuran tersebar merata. Biarkan agar memadat.
7. Inkubasi pada inkubator suhu 25o ± 1 oC selama 72 ± 2 jam dengan posisi cawan petri
terbalik.
8. Hitung jumlah koloni dan catat hasil pengujian pada kolom YM di Form atau Logbook
pengujian