Latar belakang.

Kisspeptin adalah neuropeptida yang meningkatkan sekresi hormon

pelepas gonadotropin (GnRH). Ini adalah elemen penting untuk lonjakan hormon
luteinizing (LH) dan ovulasi. Wanita dengan sindrom ovarium polikistik (PCOS)
mengekspos perubahan pada tingkat sekresi GnRH dan LH. Objektif. Makalah ini
bertujuan untuk mengevaluasi kadar serum kisspeptin pada wanita yang sehat dan
sindrom ovarium polikistik. Lebih lanjut, penelitian ini meneliti efek obesitas dan
usia pada kadar kisspeptin yang bersirkulasi pada wanita normal dan PCOS. Selain
itu, ini menunjukkan korelasi antara kisspeptin dan parameter hormonal lainnya.
Metode dan Pasien. Seratus perempuan (60 dengan PCOS dan 40 normal) terdaftar
dalam penelitian ini. Lima miiiter sampel darah mililiter semua pasien dan wanita
kontrol diperoleh dua kali selama siklus menstruasi. Semua sampel penelitian
diklasifikasikan tergantung pada faktor usia untuk beberapa subkelompok. Hasil.
Kadar kisspeptin lebih tinggi pada pasien PCOS dibandingkan pada kelompok
normal. Kisspeptin berkorelasi dengan kadar testosteron bebas serum (r = 0,26). Pada
wanita sehat, tingkat kisspeptin preovulasi lebih tinggi daripada tingkat kisspeptin
folikular (P <0,05), sedangkan perbedaan ini tidak signifikan pada pasien PCOS.
Variasi dalam kadar serum kisspeptin antara wanita yang kelebihan berat badan /
obesitas dan wanita dengan berat normal tidak signifikan. Pada wanita normal, kadar
serum kisspeptin lebih tinggi pada wanita> 35 tahun daripada mereka yang <24 tahun
pada (P=0,03). Kesimpulan. Tingkat serum kisspeptin lebih tinggi pada wanita
PCOS. Levelnya berfluktuasi selama siklus menstruasi, tetapi fluktuasi ini terganggu
pada wanita PCOS. Efek BMI pada kadar serum kisspeptin tidak signifikan, dan
kadar serum kisspeptin meningkat dengan bertambahnya usia.
1. Pendahuluan
Baru-baru ini, telah didokumentasikan bahwa kisspeptin hipotalamus bertindak
sebagai stimulator GnRH dan memediasi umpan balik hormon seks. Neuropeptida ini
sangat penting pada permulaan pubertas dan pemeliharaan fungsi reproduksi normal
[1]. Kisspeptin terdiri dari beberapa peptida tengah yang terbentuk karena proses
proteolitik diferensial yang berasal dari (145) asam amino dan dikodekan oleh gen
kisspeptin (gen KISS1) [2]. Fragmen peptida lain dari prekursor kisspeptin, seperti
kisspeptin-14, kisspeptin-13, dan kisspeptin-10, memiliki wilayah terminal COOH
yang sama dengan kisspeptin. Perlu disebutkan bahwa semua jenis kisspeptin bekerja
bersama melalui reseptor G-protein GPR54 [3]. Gen kiss1 yang terletak di kromosom
1q32 terdiri dari tiga ekson, di mana hanya sebagian ekson kedua dan ketiga akhirnya
diterjemahkan ke dalam prekursor 145 asam amino peptida, yang dipecah menjadi
tiga bentuk kisspeptin yang disebutkan [4].
Diketahui bahwa lokasi kisspeptin bervariasi sesuai dengan jenis spesies. Pada
manusia, ligan reseptor (KISS1 mRNA) telah ditemukan di plasenta, testis, pankreas,
hati, dan usus kecil [5]. Neuron hipotalamus dan KISS1 hadir secara dominan di
nukleus infundibular (yang merupakan homolog arkuata (ARC) pada tikus dan
beberapa hewan lainnya) dan dalam fokus terpisah di daerah preoptik medial [5, 6].
Pada tikus dan tikus, ada dua area utama dalam hipotalamus yang mengandung
neuron kisspeptin, yang merupakan inti anteroventral periventricular (AVPV) (yang
rostral) dan ARC (yang ekor), yang mengandung lebih banyak neuron kisspeptin [7,
8].
Pada tikus normal, umpan balik negatif estradiol meningkatkan transmisi
glutamatergik ke ARC kisspeptin neuron dan menguranginya menjadi neuron AVPV,
sementara umpan balik positif estradiol memiliki efek antipode [9]. Elevasi Estradiol
keluar dari AVPV kisspeptin neuron dengan meningkatkan jumlah semburan yang
diinduksi depolarisasi dan semburan rebound [10]. Knocked alpha estradiol receptor
di ARC kisspeptin neuron cenderung berhubungan dengan gangguan siklus, di mana,
mengetuk ERα di AVPV kisspeptin neuron cenderung berhubungan dengan siklus
normal, tetapi menumpulkan lonjakan LH [8]. Pada manusia, umpan balik kisspeptin
negatif dan positif terjadi pada nukleus infundibular. Namun, ekspresi KISS1 dalam
nukleus infundibular telah terbukti meningkat setelah menopause [8, 11]. Bukti ini
sangat mendukung peran kisspeptin dalam fisiologi reproduksi.
Penyebab umum subfertilitas ovulasi adalah sindrom ovarium polikistik. Wanita
dengan sindrom ini juga menunjukkan ketidakteraturan menstruasi, pertumbuhan
rambut, jerawat, dan kelebihan berat badan. Namun, ini sering terlihat pada wanita
dengan berat badan normal. Perubahan dalam sekresi GnRH adalah fitur PCOS.
GnRH mengekspresikan generasi pulsa lambat dan cepat untuk stimulasi FSH dan
LH, masing-masing. Pada wanita PCOS, LH umumnya meningkat. FSH biasanya
dalam kisaran yang lebih rendah. Ini mungkin terkait dengan penurunan sensitivitas
generator pulsa GnRH terhadap umpan balik steroid dan meningkatkan sekresi LH
[12]. Peningkatan level GnRH dan LH pada wanita PCOS mungkin berhubungan
dengan efek kumulatif dari stimulasi neurotransmitter GnRH stimulan dan
penghambat di pusat hipotalamus-hipofisis [13]. Mekanisme terperinci untuk
bagaimana kisspeptin terlibat dalam patogenesis PCOS masih belum diketahui.
Namun, baru-baru ini telah terbukti bahwa gangguan metabolisme pada wanita PCOS
dapat berkontribusi pada perubahan tingkat kisspeptin [14-16].
Peran kisspeptin dalam menyampaikan sinyal metabolisme ke pusat otak telah
menjadi sorotan. Kurangnya pensinyalan kisspeptin pada tikus betina menyebabkan
peningkatan berat badan, adipositas, dan intoleransi glukosa [17]. Pada wanita,
korelasi positif antara ekspresi BMI dan KISS1 ditemukan pada jaringan adiposa
omental [18].
Penelitian ini bertujuan untuk menyelidiki pengaruh usia dan obesitas pada
sirkulasi tingkat kisspeptin pada wanita subur dan PCOS yang tidak subur. Selain itu,
ia meneliti korelasi antara serum kisspeptin dan penanda biokimia lainnya.

2. Material dan Metode

 2.1. Subjek. Sampel penelitian dikumpulkan dari pusat keluarga berencana (Klinik
Infertilitas), selama periode dari April 2018 hingga Maret 2019. Studi ini memilih
100 wanita (usia 20 hingga 40) dan mengklasifikasikan mereka ke dalam dua
kelompok. Pertama, 60 pasien yang tidak subur dan tidak dapat hamil setelah satu
tahun dan enam bulan melakukan hubungan seks tanpa kondom secara berturut-turut
untuk mereka yang berusia (<35) dan (> 35). Kedua, 40 pasien subur dengan siklus
menstruasi yang teratur. 60 pasien infertil didiagnosis sebagai sindrom ovarium
polikistik. Diagnosis didasarkan pada pertemuan konsensus Rotterdam pada PCOS
pada tahun 2003 [19]. Gangguan menstruasi melibatkan amenore yang ditandai
dengan tidak adanya siklus menstruasi selama lebih dari 6 bulan dan oligomenorea
ditandai oleh keterlambatan menstruasi> 35 hari selama 6 bulan. Skrining ultrasonik
transvaginal dilakukan dua kali untuk semua wanita infertil. Ovarium digambarkan
sebagai ovarium polikistik dengan 12 atau lebih folikel (2-9) mm dalam satu atau
kedua ovarium. Ultrasonografi transvaginal kedua dilakukan pada hari ke 12, 13, dan
14 siklus untuk mendeteksi folikel dewasa (lebih dari 16 mm) dan ovulasi.
Hysterosalpingography, analisis cairan mani, laparoskopi, dan tes postcoital
dilakukan untuk semua wanita infertil. Pasien dengan penilaian ovulasi abnormal
dikeluarkan dari penelitian. Kriteria pengecualian adalah sebagai berikut:
(1) Tidak ada pasien yang minum obat untuk setidaknya (3) bulan sebelum
berpartisipasi dalam penelitian ini.
(2) Uji fungsi tiroid abnormal, peningkatan kadar prolaktin, sindrom Cushing, dan
ketidakmampuan untuk menindaklanjuti. Sebelum memulai penelitian, izin etis
diperoleh. Lima mililiter darah diambil dari para peserta (yang mengunjungi klinik
untuk konsultasi) setelah persetujuan mereka untuk berpartisipasi dalam penelitian
ini.
Pasien PCOS dibagi lagi menjadi empat subkelompok (sesuai dengan penanda
klinis dan biokimiawi) sebagai berikut:
Kelompok A: disfungsi ovulasi + hirsutisme atau hiperandrogenisme + fitur PCO
Kelompok B: disfungsi ovulasi + hirsutisme atau hiperandrogenisme
Kelompok C: disfungsi ovulasi + PCOS (tidak ada hirsutisme dan androgen normal)
Kelompok D: hirsutisme atau hiperandrogenisme + PCOS dengan siklus menstruasi
normal
Wanita-wanita PCOS yang subur dan tidak subur dibagi lagi menjadi empat
subkelompok sesuai usia mereka:
(1) 20-24 tahun
(2) 25-29 tahun
(3) 30–33 tahun
(4) 35–40 tahun

2.2.Protokol Test. Lima mililiter darah diperoleh dua kali dari semua pasien dan
kelompok studi dengan pengambilan darah vena. Sampel pertama diambil pada hari
ke 2 siklus. Sampel kedua (pada wanita subur) diperoleh pada fase praovulasi pada
hari-hari (12, 13, dan 14) periode tergantung pada pendeteksian folikel prematur.
Namun, pada pasien PCOS, sampel kedua diperoleh pada hari ke 13 dari siklus yang
sama. Setelah itu, semua sampel diinkubasi pada suhu kamar selama dua jam untuk
menyelesaikan proses pembekuan. Selanjutnya, serum dipisahkan dengan sentrifugasi
selama 20 menit pada 3000 rpm. Kemudian, dipindahkan ke tabung polos dan
disimpan pada suhu 20 ° C sampai proses pengujian. Akhirnya, semua parameter
diukur dengan enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).

2.3. Analisis statistik. Dalam penelitian ini, nilai-nilai disajikan sebagai mean ± SD
dan tes Kolmogorov-Smirnov digunakan untuk menguji normalitas distribusi. Uji t-
test digunakan untuk membandingkan rata-rata dua kelompok. Analisis varian satu
arah (ANOVA) dilakukan untuk memperkirakan perbedaan antara kelompok. + id,
tes posthoc Tukey digunakan untuk mengevaluasi hubungan antara kedua kelompok.
Terakhir, perhitungan korelasi dan korelasi Pearson dilakukan untuk menguji korelasi
antara kisspeptin dan penanda biokimia lainnya pada wanita yang sakit dan sehat.
3. Hasil
Seperti yang tercantum dalam Tabel 1, ada perbedaan yang signifikan dalam
kisspeptin, estradiol, testosteron bebas, dan kadar FSH dan LH antara PCOS (tidak
subur) dan wanita kontrol (P ≤ 0,05).
Seperti yang tercantum dalam Tabel 3, ada korelasi positif antara kadar kisspeptin
serum dan testosteron bebas serum (r 0,26; P 0,04). Selain itu, hasilnya
menunjukkan tidak ada korelasi antara kisspeptin dan parameter hormonal lainnya.
Temuan ini ditunjukkan pada Tabel 3 dan Gambar 1.
Seperti diuraikan dalam Tabel 4, pada wanita infertil PCOS, perbedaan antara
kadar serum kisspeptin pada dua fase yang berbeda tidak sama. Di sisi lain, pada
wanita normal, tingkat kisspeptin dalam fase praovulasi secara signifikan lebih tinggi
daripada apa yang ada di fase folikuler.
Tidak ada perbedaan yang signifikan dalam kadar serum kisspeptin antara pasien
kelebihan berat badan / obesitas dan pasien PCOS yang tidak obesitas (lihat Tabel 5-
7). Lebih lanjut, diperoleh perbedaan yang tidak signifikan antara wanita yang
kelebihan berat badan / obesitas dan wanita yang tidak obesitas. Di sisi lain, level
mereka pada pasien PCOS nonobese lebih tinggi dibandingkan pada wanita subur
nonobese.
Sebagaimana diuraikan dalam Tabel 8, wanita-wanita PCOS yang tidak subur
dibagi lagi menjadi empat subkelompok sesuai usia mereka. Tidak ada variasi yang
signifikan dalam kadar kisspeptin dalam serum di antara subkelompok usia (F =
0,128; P = 0,924). Selain itu, tidak ada perubahan signifikan dalam kisspeptin antara
subkelompok usia.
Tidak seperti wanita PCOS infertil, tingkat kisspeptin menunjukkan variasi yang
signifikan di antara subkelompok usia pada wanita subur (F 3,2; P 0,03). Selain itu,
tingkat kisspeptin secara signifikan lebih tinggi pada kelompok pertama dibandingkan
dengan kelompok 4 (P 0,0166) (lihat Tabel 9).

4. Diskusi
 Dalam penelitian ini, tingkat fase folikel serum kisspeptin secara signifikan lebih
tinggi pada wanita PCOS infertil dibandingkan dengan wanita normal (Tabel 1).
Dalam perjanjian dengan hasil kami, peningkatan kadar serum kisspeptin pada pasien
PCOS diamati dalam banyak penelitian, seperti [14-21].
 Studi lain tidak mendapatkan variasi ini [22-25]. Panidis et al [22, 25]
menggunakan kriteria diagnostik PCOS yang berbeda. Ada variasi yang signifikan
dalam usia dan BMI dalam studi Albalawi Panidis et al. Studi Panidis Panidis et al
dilakukan pada ukuran sampel kecil dan menjelaskan mengapa variasi yang tidak
signifikan diperoleh. Baru-baru ini, penemuan kisspeptin dan reseptornya membuka
jalan untuk penyelidikan tentang perannya dalam patogenesis PCOS. Telah diketahui
bahwa kisspeptin menyebabkan peningkatan regulasi GnRH. Juga, ada di ovarium
dan terlibat dalam regulasi ovulasi dan hormon seks.