Jurnal Kromatografi A, 1378 (2015) 74–87

Daftar isi tersedia di ScienceDirect

Jurnal Kromatografi A

beranda jurnal: www.el sevier. com / cari / chroma

Asam naftenat bisiklik dalam air proses pasir minyak: Identifikasi dengan kromatografi gas
multidimensi komprehensif – spektrometri massa

Michael J. Wilde Sebuah , Charles E. West Sebuah , 1 , Alan G. Scarlett Sebuah , David Jones Sebuah , Richard A. Frank b ,
L. Mark Hewitt b , Steven J. Rowland Sebuah , ∗
Sebuah Petroleum and Environmental Geochemistry Group, Biogeochemistry Research Center, University of Plymouth, Drake Circus, Plymouth PL4 8AA, UK
b Direktorat Ilmu dan Teknologi Perairan, Lingkungan Kanada, 867 Lakeshore Road, Burlington, ON, Kanada L7R 4A6

articleinfo abstrak

Sejarah artikel: Meskipun asam bisiklik telah dilaporkan menjadi asam naftenat utama dalam air yang dipengaruhi proses pasir minyak (OSPW) dan uji skrining
Diterima 20 Oktober 2014 Diterima yang diterima dengan baik menunjukkan bahwa beberapa asam sepeda adalah asam yang paling toksik akut yang diuji, namun belum ada
dalam bentuk revisi 30 November
yang teridentifikasi. Di sini kami tunjukkan oleh multidi-
2014
kromatografi gas dimensi-spektrometri massa (GC × GC – MS), bahwa> 100 C 8–15 asam bisiklik biasanya ada di OSPW. Sintesis atau pembelian
Diterima 3 Desember 2014
memungkinkan kami membentuk GC × Waktu retensi GC
Tersedia online 12 Desember 2014
metil ester dari banyak ini dan spektrum massa dan spektrum yang diterbitkan dari beberapa jenis tambahan, memungkinkan kami untuk
mengidentifikasi bicyclo [2.2.1] heptana, bicyclo [3.2.1] oktan, bicyclo [4.3.0] nonane, bicyclo [3.3 .1] asam nonana dan bicyclo [4.4.0] decane
Kata kunci:
dalam OSPW dan asam bicyclo [2.2.2] oktan dalam campuran asam komersial. Posisi retensi autentik bicyclo [3.3.0] oktan dan bicyclo [4.2.0]
Asam naftenat
Sepeda metil ester asam karboksilat oktan dan indeks retensi yang dipublikasikan, menunjukkan ini juga kemungkinan, seperti halnya asam bicyclo
GC × GC – MS [3.1.1] heptana. Bicyclo [5.3.0] decane dan cyclopentylcyclopentane karboksilat asam dikesampingkan dalam sampel dianalisis, atas dasar
bahwa alkana yang sesuai dielusi dengan baik setelah bicyclo [4.4.0] decane (asam elusi terbaru). Bicyclo [4.2.1] nonane, bicyclo [3.2.2]
nonane, bicyclo [3.3.2] decane, bicyclo [4.2.2] decane dan spiro [4.

senyawa atau data literatur tersedia Spektrum massa dari metil ester dari bisiklik yang lebih tinggi C 12–15
asam menunjukkan bahwa banyak yang hanyalah analog dari asam yang disebutkan di atas, dengan alkanoat yang lebih panjang
rantai dan / atau substituen alkil. Hipotesis kami adalah bahwa asam-asam ini mewakili produk biotransformasi dari bicyclane minyak bumi
yang pada awalnya agak lebih tahan-bio. Meskipun studi remediasi menunjukkan bahwa banyak asam bisiklik dapat secara relatif cepat
dihilangkan dari OSPW yang dirawat dengan tepat, pemeriksaan oleh GC × GC-MS mungkin menunjukkan isomer mana yang paling
terpengaruh. Pengetahuan tentang struktur akan memungkinkan toksisitas isomer sisa dihitung dan diukur.

© 2014 Elsevier BV Semua hak dilindungi undang-undang.

1. Perkenalan
'Asam naftenat' yang terjadi secara alami di pasir minyak di Alberta, Kanada terkonsentrasi
melalui pemrosesan, menghasilkan air yang terpengaruh proses pasir minyak (OSPW) yang, setelah
banyak digunakan kembali, disimpan di kolam tailing besar atau laguna, menunggu reklamasi akhir [1]
. OSP yang tidak diencerkan telah terbukti agak beracun dalam berbagai uji biologis, tetapi dengan
waktu penyimpanan, komposisi dan
toksisitas berubah, yang terakhir biasanya berkurang [2] . Meskipun demikian, toksisitas sisa tetap ada
dan ini telah mendorong banyak penelitian tentang metode pengobatan dengan oksidan atau ozon,
atau dengan fotokatalisis atau bioremediasi. [3] .
Sejumlah penelitian telah menunjukkan bahwa asam utama dalam sampel OSPW yang berbeda
terdiri, sebagai kelompok, senyawa siklik alisiklik yang tidak diketahui. [2,4–7] dan uji skrining yang
diterima dengan baik menunjukkan bahwa beberapa sepeda alisiklik sintetis adalah asam yang paling
toksik paling akut yang diuji [8] . Namun, hampir tidak ada yang diketahui tentang identitas, atau
bahkan jumlah, asam bisiklik yang ada di OSPW.

∗ Penulis yang sesuai. Telp .: +44 01752 584557; faks: +44 01752 584710.
Alamat email: srowland@plym.ac.uk (SJ Rowland).
1 Alamat sekarang: Pusat Penelitian Lanjutan EXPEC, Saudi Aramco, Dhahran
Cyr dan Strausz [9] mengisolasi sebuah C 16 asam bisiklik dari endapan pasir minyak di spektrum
Albertawhichhadamasssama dengan
mane atau labdane bicyclanes, tetapi ini belum dilaporkan dalam asam OSPW (lih [10–12] ). Bowman

31311, Arab Saudi. dkk. [13] baru-baru ini diidentifikasi

http://dx.doi.org/10.1016/j.chroma.2014.12.008
0021-9673 / © 2014 Elsevier BV Semua hak dilindungi undang-undang.
 MJ Wilde dkk. / J. Kromatogr. A 1378 (2015) 74–87
asam bicyclic monoaromatic, indane dan tetralin dalam sampel air pori dari endapan tailing komposit,
yang menggabungkan tailing fluida halus dari pengolahan pasir minyak dengan gypsum untuk
membentuk endapan nonregregasi, tetapi tidak ada sikliklik siklik yang teridentifikasi.
Penjelasan struktur asam juga memiliki arti geokimia, memberikan wawasan tentang mekanisme
degradasi mikroba minyak bumi [14] . Beberapa asam bisiklik alisiklik dalam minyak mentah dan
sediaan asam naftenat komersial yang berasal dari penyulingan minyak bumi, telah diidentifikasi [14–16]
, tetapi beberapa penelitian telah mencatat perbedaan antara asam OSPW dan asam OSPW, jadi
mungkin tidak ada yang dapat disimpulkan secara langsung dari
[17] . Selain itu, beberapa asam bisiklik yang teridentifikasi dalam asam naftenat komersial sampai
saat ini hanya mewakili sebagian kecil dari yang benar-benar ada, karena> 100 senyawa yang
diungkapkan oleh kromatografi gas multidimensi komprehensif-spektrometri massa metil ester (GC × GC-MS)sebelumnya [23,24] . Singkatnya, konsentrasi garam natrium dari # 1 dan # 2 diasamkan sampai pH <2
dari dua campuran asam naftenat komersial membuktikan [18] .
Untungnya asam bisiklik di OSPW tampaknya cukup rentan untuk dihilangkan dengan
pengobatan ozon dan aksi bakteri [3] . Meskipun demikian, penting untuk menetapkan identitas
asam-asam ini sehingga toksisitas isomer yang relevan dapat diukur, mekanisme perawatan
remediasi lebih dipahami dan produk perawatan remediasi dapat diprediksi.
Dalam penelitian ini kami memeriksa beberapa ekstrak asam OSPW termetilasi dan campuran
asam komersial, oleh GC × GC-MS dan mengidentifikasi beberapa asam bisiklik yang ada. Beberapa
jenis sepeda yang sebelumnya dianggap mewakili konstituen OSPW ternyata tidak umum.
2. Bahan-bahan dan metode-metode
Penamaan senyawa bisiklik sangat bervariasi di seluruh literatur. Sebagai upaya untuk menjaga
konsistensi penamaan senyawa yang dibahas, aturan nomenclature IUPAC untuk senyawa polisiklik
berdasarkan sistem Von Baeyer. [19] telah digunakan, dengan penomoran karbon dalam inti bisiklik
dimulai dari karbon jembatan ( Gambar 1 A dan B). Nama alternatif untuk senyawa yang biasa
digunakan oleh pemasok bahan kimia dan mesin pencari (misalnya decalin atau oktahidro-pentalena)
diberikan di samping nama sistematis.
Bicyclo otentik [2.2.1] asam heptana-2-etanoat ( Gambar 1 SEBUAH; Struktur Ib), 2,6,6-trimethylbicyclo
[3.1.1] asam heptana-3-karboksilat ((+) - asam 3-pinanekarboksilat) ( IIa), bicyclo [2.2.2] asam oktan-2
karboksilat ( IVa), 4-pentylbicyclo [2.2.2] asam oktan-1-karboksilat ( IVc), asam bicyclo [3.3.0]
oktan-2-karboksilat ( Melalui), 4-methylbicyclo [3.3.0] oktan-2-karboksilat
asam (3-metil-oktahidro-
asam pentalene-1-karboksilat) ( VIb) dan bicyclo [3.3.1] nonane-
Asam 1-karboksilat ( VIIIa) dibeli dari Sigma (Poole, UK). Otentik bicyclo [2.2.1] asam
heptana-1-karboksilat (Ia), asam bicyclo [2.2.2] oktan-1-karboksilat ( IVb) dan 5-metil-
bicyclo [3.3.1] asam nonana-1-karboksilat ( VIIIc) dibeli dari Molport (Riga, Latvia). Bicyclo [3.2.1]
asam oktan-6-karboksilat ( Va) disintesis dari asam 2-hydroxybicyclo [3.2.1] oktan-6 karboksilat
(Sigma) dengan dehidrasi katalis basa diikuti oleh hidrogenasi [20] . Bicyclo [3.3.1] asam
nonana-3-karboksilat ( VIIIb) pada dasarnya disintesis dengan metode Sasaki et al. [21] sebagaimana
dimodifikasi oleh Peters et al. [22] . Jadi, reaksi adamantan-2-one dalam asam methanesulfonat
dengan adanya natrium azida menghasilkan mesilat yang tidak diisolasi tetapi dipanaskan dengan
kalium hidroksida menghasilkan asam bicyclo [3.3.1] non-2-ene-7-karboksilat tak jenuh. , diperoleh
setelah ekstraksi menjadi kloroform diasamkan [21] . Asam bicyclo [3.3.1] nonana-3-karboksilat jenuh
yang sesuai ( VIIIb) dulu
diperoleh dengan hidrogenasi [22] dan metil ester dengan panas-
ing dengan BF 3 / metanol. Bicyclo [4.3.0] nonane-3-carboxylic ( Xa)
75
dan asam 2-methylbicyclo [4.3.0] nonane-3-carboxylic ( Xb) diperoleh dengan hidrogenasi katalitik (lih [15]
) dari asam indana yang sesuai (Sigma). Bicyclo [4.4.0] decane-2-carboxylic ( XIVa),
Asam 3-karboksilat ( XIVb), 2-etanoik ( XIVc), 3-etanoik ( XIVd), dan asam 2-propanoat ( XIVe; angka
mengacu pada posisi substituen alkanoate pada inti bisiklik) yang disintesis seperti yang dijelaskan
sebelumnya
[15] . 7-methylbicyclo [4.2.0] oktan-7-karboksilat
asam ( VIIa) dibuat dengan menghidrogenasi 1-metil-1,2dihidrosiklobutabenzena-1-asam karboksilat
metil ester di atas katalis Raney Nickel pada 100 ◦ C dan 100bar menggunakan H-Cube ®
(ThalesNano Nanotechnology Inc., Budapest).
Empat sampel OSPW berbeda dan campuran asam naftenat komersial dianalisis ( Tabel 1 ).
OSPW memasukkan dua sampel (# 1 dan # 2) dari industri A yang dijelaskan dalam dua studi
dan asam diekstraksi dengan etil asetat.
sebelum derivasi dengan BF 3 / metanol [24] . OSPW lainnya (# 3) disediakan dari industri B ( Tabel 1 ) di
situs dengan kepercayaan tinggi
konsentrasi materi partikulat. Sampel air ini disaring, diasamkan dan kemudian dielusi melalui kartrid
ENV + SPE 200mg
dengan asetonitril sebelum dikeringkan di bawah N 2 dan diturunkan dengan
BF 3 / metanol. Ekstrak asam OSPW keempat (# 4) dari industri A diperoleh dengan mengekstraksi
sampel OSPW mentah, yang dikumpulkan dari
kolam tailing yang berbeda dengan menggunakan metode yang dijelaskan sebelumnya
[24] . Sampel terakhir tidak menjalani pra-perawatan / pembersihan sebelum ekstraksi dan
derivatisasi.
Selain contoh di atas, campuran asam naftenat komersial (# 5) diperoleh dari Merichem Co.
untuk perbandingan ( Tabel 1 ) dan difraksinasi berdasarkan metode yang digunakan sebelumnya
[24–26] . Derivatisasi asam dengan BF 3 / metanol diikuti dengan ekstraksi fase padat ion perak (Ag +
SPE). Analisis di sini
difokuskan pada fraksi 3 yang diperoleh dengan elusi melalui kolom ekstraksi fase padat argentasi
dengan heksana, karena mengandung asam bisiklik (metil ester).
Pengukuran massa yang akurat dilakukan dengan menggunakan spektrometer massa resolusi
tinggi Thermo fi sher LTQ Orbitrap XL dengan ionisasi elektrospray. Jarak jauh mereka m / z 120–2000;
akurasi massa <3ppm RMS dengan kalibrasi eksternal. Untuk ionisasi negatif, instrumen dikalibrasi
secara eksternal menggunakan natrium dodesil sulfat dan natrium taurocholate di atas. Untuk
loop-injeksi, MicroLC Surveyor Thermo Scientifc digunakan untuk memberikan aliran pelarut pada 20
Lmin - 1., melalui loop sampel 2 L. Pelarut digunakan
adalah H 2 O: MeOH (1: 1). Untuk nano-electrospray, Advion Triversa NanoMate digunakan untuk
mengirimkan sampel yang diencerkan ke dalam MeOH ± 10%
NH 4 OAc pada aliran kira-kira 0,25 Lmin - 1. Pengaturan sumber API: Suhu sumber infus NanoMate 275
◦ C atau 200 ◦ C,
aliran gas selubung 3–7 (unit arb.) 2 (unit arb.), gas aux fl owwtidak menggunakan ionisasi positif
tegangan kapiler (pengion): +3,2 hingga 3,7kV ionisasi negatif: - 3.5 sampai - 4.0kV. Spektrum massa
diperoleh dengan resolusi minimal 30.000 (pada m / z 400). Massa teoritis dan akurasi massa dihitung
menggunakan alat kalkulator online
[27] .
Kromatografi gas multidimensi komprehensif-spektrometri massa (GC × Analisis GC-MS)
dilakukan seperti yang dijelaskan sebelumnya [23,28] , menggunakan Agilent 7890 Gas
chromatograph (Agilent Technologies, Wilmington, DE) yang dilengkapi dengan Zoex ZX2 GC × GC
cryogenicmodulator (Houston, TX, USA) dihubungkan dengan anAlmsco BenchTOFdx TM spektrometer
massa waktu penerbangan (Almsco International, Llantrisant, Wales, UK). Kolom dimensi pertama
adalah 100% dimetil polisiloksan 60m × 0,25 mm × 0,25 m Rxi ®- 1ms (Restek, Bellefonte, USA), dan
kolom dimensi kedua adalah 50% fenil polisilfenilena siloksan 2.5m × 0,1 mm × 0,1 m BPX50 (SGE,
Melbourne, Australia). Helium digunakan sebagai gas pembawa dan aliran dijaga konstan pada
1.0mLmin - 1. Sampel (1 L) diinjeksikan pada 300 ◦ C tidak terbelah. Oven diprogram dari 40 ◦ C (tahan
selama 1 menit), lalu dipanaskan hingga 130 ◦ C pada 10 ◦ Cmin - 1 lalu pada
76 MJ Wilde dkk. / J. Kromatogr. A 1378 (2015) 74–87

Gambar 1. ( A) Struktur asam bisiklik otentik yang disintesis atau dibeli dan (B) contoh struktur umum dan nama kemungkinan C 11 asam bisiklik.
 MJ Wilde dkk. / J. Kromatogr. A 1378 (2015) 74–87
Tabel 1
Rincian sampel dipelajari dengan nomor sampel yang ditetapkan.
Sampel No. # Jenis sampel
1 OSPW
2 OSPW
3 OSPW
4 OSPW
5 Asam naftenat komersial
2 ◦ Cmin - 1 hingga 320 ◦ C (ditahan selama 15 menit). Periode modulasi adalah 6 detik. Suhu jalur
transfer MS adalah 290 ◦ C dan sumber ion 300 ◦ C. Pengolahan data dilakukan dengan GC Image TM v2.1 bersamaan [20,23,32] dan apa yang diketahui tentang proses biodegradasi dari mana asam tersebut
(Zoex, Houston, TX, AS).
3. Hasil dan Pembahasan
Ketika diperiksa dengan spektrometri massa resolusi tinggi ESI Orbitrap dengan ionisasi
elektrospray ion negatif, asam bisiklik dari ekstrak OSPW menghasilkan ion yang kami kaitkan
ke mereka - H] - ion, terutama dari C 12–16 asam ( m / z 195–251; ESI Orbitrap), meskipun beberapa
sampel memiliki jumlah yang sedikit lebih rendah
spesies nomor karbon. Meskipun OSPW dikenal sebagai substrat yang heterogen, hal ini konsisten
dengan data yang disajikan dalam berbagai studi tentang sampel OSPW yang berbeda. [2,4–7] .
Massa akurat dari beberapa asam yang lebih melimpah di salah satu OSPW
sampel (# 1), misalnya: 209.1544 (C 13 H. 21 HAI 2 membutuhkan
tipe struktural (contoh diberikan
209.1547, akurasi massa 1.4ppm; C 13 H. 21 S membutuhkan 209.1369 dan C. 11 H. 13 BEGITU 2 membutuhkan
209.0642), 223.1699 (C 14 H. 23 HAI 2 membutuhkan
223.1704, akurasi massa 2.2ppm; C 14 H. 23 S membutuhkan 223.1526 dan C. 12 H. 15 BEGITU 2 membutuhkan
dengan C 9 inti, tujuh (mis Gambar 1 B; VIII – XI) dan untuk
223.0798) dan 237.1855 (C 15 H. 25 HAI 2 membutuhkan
237.1860, akurasi massa 2.1ppm; C 15 H. 25 S membutuhkan 237.1682 dan C. 13 H. 17 BEGITU 2 membutuhkankarbon, misalnya Gambar 1 B; XII – XVI). Spiro- dan non-
237.0955), yang menunjukkan bahwa mayor terionisasi
spesies bisiklik adalah asam yang cocok dengan rumus C. n H. 2 n - 4 HAI 2 dan bukan, misalnya, sepeda
keto isobarik atau hidroksi trisiklik
asam atau senyawa sulfur (setidaknya dalam sampel OSPW ini).
Saat diperiksa oleh GC × GC-MS sebagai metil ester, kromatografi massa ion yang dipilih dari ion
molekuler yang dihasilkan oleh elec-
ionisasi tron mengkonfirmasi keberadaan C 8–15 asam bisiklik dalam
sampel # 3 dan # 4, dengan setidaknya C 11–15 sepeda di semua sampel (# 1– # 5; mis Gambar 2 ).
Apalagi GC × GC – MS mengungkapkan kom-
kerumitan campuran OSPW. Rentang yang tepat bervariasi antar sampel. Misalnya, satu ekstrak
asam OSPW (# 3) yang terkandung di
setidaknya sembilan belas C. 9, dua puluh tujuh C 10, empat puluh C 11 dan banyak puncak C + dalam
11
kromatogram ( Gambar 2 B), sedangkan ekstrak dari
kolam tailing OSPW lainnya (# 4) tampak lebih kompleks ( Gambar 2 C), mungkin karena kurangnya
pra-perawatan atau pembersihan, yang mungkin telah menghilangkan beberapa senyawa dengan
berat molekul yang lebih rendah dalam sampel yang lebih dirawat (misalnya # 1 dan # 2, Gambar. 2A dan
S1).
Baru-baru ini Damasceno et al. [18] menganalisis dua campuran asam komersial dengan GC × GC-MS,
mencirikan kelompok asam naftenat berdasarkan ' z 'nilai (yaitu, defisiensi hidrogen dikaitkan dengan
jumlah cincin). Mereka mendeteksi 124 dan 132 asam bisiklik individu ( z = - 4) dalam dua sampel
(Sigma Aldrich dan Miracema-Nuodex
asam naftenat) dengan nomor karbon mulai dari C. 9–16 [ 18] . Nomor serupa terdeteksi dalam sampel
komersial Merichem-
asam cial disini (# 5, Gambar 2 D), sehingga jumlah sepeda yang serupa tampaknya hadir dalam
asam naftenat komersial OSPWand. Jumlah yang begitu besar harus mewakili banyak tipe struktur
asam bisiklik yang berbeda, tidak hanya yang secara rutin dikutip sebagai contoh [29–31] .
Kami mencoba menghitung kemungkinan jumlah maksimum yang mungkin
ber hadir untuk yang paling sederhana (C 8–11) asam. Kami berasumsi bahwa setidaknya satu (harus),
dan terkadang dua, atom karbon akan melakukannya
dikaitkan dengan rantai karboksilat / alkanoat. Yang terakhir adalah
77
Pencipta Detail
Industri A Dikumpulkan 2004
Industri A Dikumpulkan 2009, naphthenates terkonsentrasi terisolasi 2011 Dikumpulkan 2011
Industri B
Industri A Dikumpulkan 2013
Merichem Nomor batch. CN / 138 CAS # 1338-24-5
wajar berdasarkan identifikasi rantai samping etanoat dari asam trisiklik dan pentasiklik yang terjadi
berasal [33–35] .
Jadi, untuk C 11 asam, misalnya, paling banyak sepuluh karbon yang tersisa untuk pembentukan
'inti' bisiklik asam. Jika ada substituen alkil
saat ini, jumlah atom karbon di 'inti' akan kurang dari sepuluh dan lebih banyak alkilasi akan hadir.
Karena gugus alkil yang diidentifikasi atau secara tentatif dibentuk dalam asam OSPW hingga saat ini
belum melebihi total gugus yang terdiri dari empat atom karbon (misalnya kombinasi gugus etil dan
metil), maka masuk akal untuk mengasumsikan bahwa jumlah atom terkecil dalam 'inti' bisiklik
mungkin enam tahun. Kami menghitung tiga tipe struktural
ada untuk asam dengan C 6 inti. Ini memiliki cincin siklopropil atau siklobutil; yang pertama hadir dalam
kompromi tipe carane dan thujane
pound dan yang terakhir hadir dalam bicyclo [3.1.1] heptane (pinanes), bicyclo [4.2.0] octanes dan
bicyclo [2.2.0] hexanes, yang dikenal
dalam asam ladderane [36] . Untuk asam dengan C 7 inti dan substituen yang diperlukan, ada empat
di Gambar 1 B; AKU AKU AKU AKU), untuk C 8 asam inti, enam (mis Gambar 1 B; IV – VII), untuk asam
asam dengan C 10 inti, sembilan kemungkinan struktur (di mana cincin menyatu pada dua atom
struktur yang menyatu juga dipertimbangkan, seperti spiro [4,5] decane carboxylicacid ( Gambar 1 B; XVII),
fusedat onecarbonatomand kemudian bingungcyclopentylcyclopentane carboxylic acid ( Gambar 1 B; XVIII).
Dengan demikian, kalkulasi kami menunjukkan bahwa asam yang paling sederhana dalam sampel
OSPW dapat terdiri dari lebih dari 30 tipe struktural dan untuk masing-masing, terdapat banyak
stereoisomer. Contoh dari beberapa jenis struktur bisiklik diberikan Gambar 1 B; sebagian besar jenis
cincin telah diidentifikasi dalam produk alami. Jadi, secara teori, mudah untuk menghitung> 100 asam
bisiklik yang kami amati dalam OSPW dan asam komersial. Tantangan analitis yang tersisa adalah
mengidentifikasi apa yang setidaknya beberapa dari ini sebenarnya.
Pemeriksaan oleh GC × GC-MS, dari metil ester dari asam asli yang dibeli atau yang disintesis di
sini, memungkinkan kami untuk menetapkan daerah retensi GC dari sembilan tipe struktural (Gbr.
S1).
Jelas dari posisi retensi GC1 pseudohomolog dalam tipe struktural tertentu (misalnya asam
karboksilat, etanoat dan propanoat bicyclo [4.4.0] decane (decalin); Gambar. S1) bahwa peningkatan
berat molekul dalam kelas struktural meningkatkan GC1 waktu retensi secara kira-kira linier, seperti
yang diharapkan. Juga, seperti yang diharapkan, homolog serupa
(misalnya C 10) dari tipe struktur yang berbeda, umumnya terpisah cukup baik dalam dimensi GC1 dan
GC2. Sebagai contoh,
tematil ester dari asam 4-metilbisiklo [3.3.0] oktan-2-karboksilat
(Gambar S1; C 10 asam VIb) dipisahkan dengan baik (GC1) dari yang ada di
bicyclo [3.3.1] asam nonana-1- dan 3-karboksilat (Gambar S1; C 10 asam
VIIIa dan b). Dalam grup stereoisomer terkait (mis cis / trans,
atau isomer posisi) dari asam tertentu (misalnya isomer asam bisiklo [4.4.0] dekana) posisi retensi
relatif menghasilkan apa yang disebut efek pengelompokan atau 'ubin', dengan posisi retensi GC1
dan GC2 yang berbeda (hingga sekitar 50 unit indeks retensi di GC1) antara isomer (Gambar S1).
Efek gabungan menghasilkan kromatogram di mana profil distribusi kompleks
asam bisiklik OSPW individu dari bilangan karbon C 8–15 itu
78 MJ Wilde dkk. / J. Kromatogr. A 1378 (2015) 74–87
Gambar 2. Kromatogram ion yang diekstraksi untuk ion molekuler C 8–15 ester metil asam bisiklik ( m / z 154, 168, 182, 196, 210, 224, 238 dan 252) dalam (A) ekstrak asam OSPW dari industri A dikumpulkan 2009, # 2, (B) ekstrak asam OSPW
dari industri B, # 3, (C) ekstrak asam OSPW dari industri A yang dikumpulkan dari kolam tailing yang berbeda pada tahun 2013, # 4
dan (D) fraksi ekstrak asam Merichem, # 5.
elas ( Gambar. 2 dan S1). Secara umum, posisi retensi GC2 tampaknya memberikan pemisahan yang
baik dari kelas struktural asam yang berbeda (Gbr. S1) tetapi juga jelas bahwa perbedaan dalam
substitusi posisi (misalnya pada bicyclo [3.3.1] nonane-3- dan 1 -asam karboksilat dan asam
dekalin-1- dan 2-karboksilat) dapat menghasilkan perbedaan sekitar 0,25 detik dalam dimensiGC2.
Asam tersubstitusi kuaterner ( VIIIa) dielusi sebelumnya dalam dimensi GC2, seperti halnya asam
dekalin tersubstitusi-3 (Gbr. S1).
Kami selanjutnya melakukan pemeriksaan sistematis dari posisi retensi dan spektrum massa
dari> 100 GC individu × GC memuncak dan membandingkannya dengan senyawa referensi. Karena
nterpretasi data untuk homolog yang lebih rendah kemungkinan besar paling sederhana dan mungkin
memberikan petunjuk pada identitas
ebih banyak homolog teralkilasi lebih tinggi, kita mulai dengan C 8–10 asam.
3.1. C 8 asam bisiklik
C 8 asam hadir dalam ekstrak asam OSPW # 3 dan # 4.
Gambar 3 menunjukkan GC × Posisi retensi GC dari serangkaian puncak
dalam # 3 dan # 4, dengan posisi retensi yang diharapkan dan molekul
on ular ( m / z 154) dari C 8 metil ester asam bisiklik diindikasikan. Satu puncak yang hadir dalam
ekstrak asam OSPW, # 3 dan
# 4 ( Gambar 3 A dan B, puncak 1a) diidentifikasi sebagai asam bisiklo [2.2.1] asam metil ester
heptana2-karboksilat setelah dibandingkan dengan spektrum perpustakaan NIST (exo-bicyclo [2.2.1]
asam heptana-2-karboksilat bila dibandingkan dengan spektrum massa yang dilaporkan oleh
Curcuruto et. Al. [37] ) ( Gambar 3 C dan D). Interpretasi spektrum massa puncak kedua ( Gambar 3 A
dan B, puncak 1b) menghasilkan identifikasi
bicyclo [2.2.1] heptane-1-carboxylicacidmethyl ester, dikonfirmasi dengan mencocokkan GC × Waktu
retensi GC dan spektrum massa dengan standar otentik ( Gambar 3 E dan F). Puncak lainnya dalam
seri ini ( Gambar 3 A dan B, puncak 1c dan d) diyakini sebagai isomer yang memiliki inti heptana
bicyclo [2.2.1] yang sama; baik isomer endo / exo, atau isomer dengan gugus metil karboksilat
tersubstitusi di tempat lain pada cincin (spektrum massa dirinci dalam informasi tambahan Gambar
S2). Pemeriksaan perilaku retensi dari bicyclo yang dibeli [2.2.1] asam etanoat heptana ( Gambar 1 SEBUAH;
Ib) dibandingkan
dengan ekstrak asam OSPW yang tidak mengandung C. 8 asam (misalnya # 1 dan # 2), juga
menunjukkan bahwa bicyclo [2.2.1] heptane lebih teralkilasi
yang hadir (Gbr. S1) dan data literatur juga tersedia untuk
indeks retensi dari beberapa C 8–11 isomer yang terakhir pada fase apolar dan polar [38] . Ini juga
menyarankan bahwa banyak bicyclohep-
asam tane adalah kemungkinan untuk hal yang tidak diketahui (Gbr. S1).
Senyawa dengan kerangka heptana bicyclo [2.2.1] ( Gambar 1 B;
SAYA, misalnya norbornane dan bornane), terkenal di alam dan paling sering dijumpai sebagai
turunan dari kamper. Dengan demikian, ada prioritas untuk biosintesis senyawa dengan kerangka ini
dan banyak analoginya telah dipelajari. Seifert dan Teeter
[39] menyarankan bahwa asam naftenat dari minyak bumi California mungkin termasuk jenis
struktural tersebut. Indeks retensi GC pada fasa apolar dan polar dan spektra massa atau spektrum
parsial metil
ester dari isomer C 8–11 asam telah diterbitkan [37,38,40]
dan kami memperoleh spektrum massa metil ester dari C 9
bicyclo [2.2.1] asam etanoat heptana ( Gambar. 1A; Ib dan S3). Umum
fitur spektral tampaknya ion molekul kecil (<10% melimpah) dan ion melimpah (sering puncak basa)
di m / z 95 (Gambar S2C dan D). Itu
 MJ Wilde dkk. / J. Kromatogr. A 1378 (2015) 74–87 79

Gambar 3. Kromatogram ion yang diekstraksi ( m / z 154, 125, 95 dan 87) dari (A dan B) dua ekstrak asam OSPW dari industri A dan B (# 3 dan # 4), dianalisis dengan GC × GC-MS dan spektrum massa (C dan E) puncak yang tidak diketahui 1a
dan 1b, diidentifikasi dengan perbandingan dengan (D) spektrum perpustakaan NIST dari bicyclo [2.2.1] heptana-2-karboksilat asam metil ester dan (F) yang dibeli standar referensi dari bicyclo [2.2.1] metil ester asam heptana-1-karboksilat.
Puncak yang tidak diketahui berlabel 1c dan 1d berspekulasi menjadi isomer metil ester asam karboksilat bikiklo [2.2.1] heptana karboksilat berdasarkan interpretasi spektral massa (spektrum massa diberikan dalam informasi tambahan, Gambar
S2).

kelimpahan ion molekuler dapat bervariasi secara dramatis, namun, pada stereoisomer berbeda dari
jenis asam yang sama (vide infra).
Posisi retensi 2,6,6-trimethylbicyclo [3.1.1] heptana-
Metil ester asam karboksilat berarti C. 8, serta asam bicyclo [3.1.1] heptana yang lebih tinggi (Gbr. S1),
juga merupakan kemungkinan
ity untuk identitas beberapa yang tidak diketahui, tetapi tidak ada kecocokan pasti yang ditemukan
dalam spektrum asam OSPW (metil ester). Senyawa yang paling umum ditemukan dengan bicyclo
[3.1.1] heptana ( Gambar 1 B; II) kerangka adalah pinena; trimethylmonterpenes dihasilkan oleh
tanaman, terutama yang berlimpah dalam resin dari pohon pinus (yaitu minyak terpentin). Spektrum
massa
2,6,6-trimethylbicyclo [3.1.1] heptane-3-carboxylic acid methyl ester (3-pinanecarboxylic acid methyl
ester) adalah kompleks (Gambar S4), mungkin sebagai hasil dari struktur jembatan yang
mengandung cincin cyclobutane di dalam inti. Cincin cyclobutane membuat asam bisiklik bertanggung
jawab terhadap pembukaan cincin dan penyusunan ulang selanjutnya. Hal ini didukung oleh
kelimpahan ion molekul yang sangat rendah (<2%) pada
m / z 196 (Gambar S4). Fitur yang dapat dibedakan dari spektrum massa termasuk ion M-60 yang
kuat (95%) ( m / z 136) sesuai dengan hilangnya bagian metil karboksilat dengan transfer hidrogen
dan puncak basa pada m / z 81, serta ion intens di m / z 83 konsisten
dengan siklik C 6 H + 9 dan C6 H + 11 ion masing-masing (Gambar S4).
80 MJ Wilde dkk. / J. Kromatogr. A 1378 (2015) 74–87
3.2. C 9 asam bisiklik
Selanjutnya, kami memeriksa posisi retensi GC dari perusahaan
ersedia secara resmi C 9 ( dan C 14) asam bicyclo [2.2.2] oktan ( Gambar 1 SEBUAH; IVa
dan c). Jika dibandingkan dengan posisi retensi yang tidak diketahui
asam bisiklik dalam ekstrak asam OSPW # 1 dan # 2 (Gambar S1 dan S2) kedua asam referensi
memiliki waktu retensi GC2 yang relatif lama tetapi meskipun tidak identik dengan beberapa yang
tidak diketahui, asam bisiklo [2.2.2] oktan dianggap mungkin. identitas. Selanjutnya, metil ester asam
bisiklo [2.2.2] oktan-1-karboksilat ( Gambar 1 SEBUAH; IVb) diidentifikasi dalam ekstrak asam erikem
(# 5); anunknownpeakhadamatching retentionpositiondan spektrum massa dengan yang dari
senyawa referensi otentik ( Gambar 4 B dan C, puncak 2a). Interpretasi spektral massa dari puncak
ain dalam rangkaian menunjukkan isomer lain juga hadir.
Senyawa dengan oktan bicyclo [2.2.2] ( Gambar 1 B; IV) kerangka ditemukan sebagai kerangka
yang stabil, seperti sangkar dalam produk alami seperti eremolakton [41,42] diisolasi dari Eremophila
fraseri dan ( -) - seychellene [43] ditemukan dalam minyak nilam, diekstrak dari Cablin Pogostemon. Selain
asam bicyclo [2.2.2] oktan-1-karboksilat ( Gambar 1 SEBUAH; IVb) kami dapat membeli asam bicyclo
[2.2.2] oktan-2 karboksilat ( Gambar 1 SEBUAH; IVa) dan asam 4-pentylbicyclo [2.2.2]
oktan1-karboksilat ( Gambar 1 SEBUAH; IVc) dan mendapatkan spektrum metil ester (Gbr. S5A dan
B). Sedangkan spektrum massa bicyclo [2.2.2] asam oktan-2-karboksilat metil ester ( Gambar 1 SEBUAH;
IVa)
dicirikan oleh ion molekuler kecil ( m / z 168) dan ion puncak basa ( m / z 136) karena hilangnya
metanol dari yang terakhir (Gbr. S5A), spektrum massa bicyclo [2.2.2] metil ester asam
oktan-1-karboksilat ( Gambar 4 C) mengandung ion molekuler dan M-29 yang diucapkan, mirip dengan
beberapa yang tidak diketahui, seperti spektrum massa isomer asam 4-metil-1-karboksilat (asam
bebas, NIST
perpustakaan) mungkin karena hilangnya C 2 H. 5. Spektrum massa
dari C 14 4-pentylbicyclo [2.2.2] oktan-1-karboksilat metil ester asam (Gbr. S5B) juga menunjukkan ion
molekul yang cukup melimpah ( m / z
238) dan hilangnya M-29 dan M-28 ( m / z 209 dan 210). Denisov dkk. [44] melaporkan spektrum
massa dari berbagai sepeda motor tersubstitusi
clo [2.2.2] oktan dengan banyak yang menunjukkan hilangnya gugus etil (C 2 H. 5,
29Da) dari ion molekul. Mereka mengusulkan mekanisme untuk
hilangnya etil dari zat antara monosiklik yang disebabkan oleh pecahnya ikatan pada karbon
embatan ditambah dengan transfer hidrogen [44] .
Saat diperiksa oleh GC × GC-MS, bicyclo [3.2.1] oktan-6 asam karboksilat metil ester diidentifikasi
dalam # 3 dan # 4. Posisi retensi dan spektrum massa senyawa referensi otentik ( Gambar 1 SEBUAH;
Va) cocok dengan puncak yang tidak diketahui yang ada di kedua sampel ( Gambar 5 C – E, puncak
3a).
Senyawa dengan kerangka tipe oktan bicyclo [3.2.1] adalah umum di beberapa produk alami [45] .
Namun homolog tersubstitusi hidrokarbon, bicyclo [3.2.1] dan alkil juga telah lama dikenal dalam
minyak bumi. [46,47] . Spektrum massa asam bicyclo [3.2.1] oktan-6-karboksilat ( Gambar 5 E)
mengandung ion molekuler kecil ( m / z 168), ion yang dikaitkan dengan hilangnya metanol ( m / z 136)
dan ion puncak basa khas metil ester ( m / z 87). Demikian pula, cis- bicyclo [3.3.0] oktan diidentifikasi
dalam minyak bumi lebih dari 50 tahun yang lalu [47] . Sebelumnya kami mengidentifikasi asam
4-methylbicyclo [3.3.0] oktan-2-karboksilat dalam sampel komersial asam naftenat [15] dengan
perbandingan spektrum massa dengan sampel referensi yang dibeli. Sejak itu kami dapat membeli
C 9 asam induk, asam bicyclo [3.3.0] oktan-2-karboksilat (dua isomer) dan perbandingan spektrum
massa dan GC × Retensi GC
kali sekarang telah mengarah pada identifikasi metil ester yang sesuai dalam fraksi ekstrak asam
Merichem (# 5, Gambar S6B – E). Senyawa lain yang tidak diketahui dalam ekstrak asam Merichem,
uga dalam ekstrak asam OSPW dari industri B (# 3) dan tailing yang berbeda dari industri A (# 4),
memiliki spektrum massa yang sangat mirip dengan yang ada pada bicyclo minor [3.3.0 ] metil asam
oktan-2-karboksilat
isomer ester (Gbr. S7, puncak 7c). Namun, waktu retensi yang tidak diketahui berbeda dari ester
asam otentik dan dengan demikian yang tidak diketahui didalilkan menjadi isomer yang berbeda.
Spektrum massa mengandung ion di m / z 150, dikaitkan dengan hilangnya air (M + -18; Gbr. S7).
Hilangnya air sering terlihat pada spektrum massa asam non-derivatisasi, asam keto- atau asam
hidroksi, tetapi jarang ditemukan pada spektrum metil ester. Namun, kehilangan air (M + -
18) diamati dalam spektrum massa beberapa metil ester asam bisiklo [4.4.0] dekana dan sekali lagi
tampak spesifik untuk isomer tertentu [15] . Spektrum massa yang tidak diketahui menampilkan ion di
m / z 74 (Gbr. S7), juga ion karakteristik metil ester menyarankan-
ing, itu bukan C non-termetilasi 10 asam. Ion molekuler tidak menunjukkan beberapa puncak isotop
yang menunjukkan bahwa senyawa tersebut tidak
mengandung sulfur dan kurangnya tailing dalam kromatogram sering diamati untuk senyawa
non-derivatisasi atau lebih polar menunjukkan itu bukan keto- atau asam hidroksi dan kemungkinan
besar isomer yang berbeda dari asam bicyclo [3.3.0] oktan-2-karboksilat .
3.3. C 10 asam bisiklik
Posisi retensi metil ester asam bisiklo [3.3.1] nonana1 dan 3-karboksilat ( Gambar 1 SEBUAH; VIIIa
dan b)
menunjukkan bahwa asam ini tidak ada dari beberapa sampel OSPW (Gambar S1). Namun dua
asam yang tidak diketahui di # 5 ( Gambar 6 ; puncak 4a dan c) memiliki posisi retensi dan spektrum
massa yang cocok dengan bicyclo [3.3.1] nonane-3-carboxylic acid methyl ester dan bicyclo [3.3.1]
nonane-1-carboxylic acid methyl ester ( Gambar 6 B, C, F dan G). Satu tidak diketahui ( Gambar 6 ;
puncak 4b) memiliki posisi retensi yang sama dan spektrum massa yang mengandung ion serupa
tetapi dengan intensitas yang berbeda dengan a
C 11 homolog, 5-methylbicyclo [3.3.1] asam nonana-1-karboksilat metil ester ( Gambar 6 D dan E). GC × Posisi
retensi GC
dan spektrum massa dari 5-methylbicyclo asli [3.3.1] nonane-1carboxylic acid methyl ester adalah
serupa dengan yang tidak diketahui dalam ekstrak asam OSPW dari industri B, # 3 (Gbr. S8).
Sebelumnya telah ada spekulasi bahwa biodegradasi adamantanes dapat menghasilkan asam cincin
terbuka dengan kerangka nonana bicyclo [3.3.1], karena ini terjadi pada biodegradasi
adamantan-2-one. [23,48] . Memang ini tampaknya mungkin, setidaknya untuk beberapa contoh yang
ada (yaitu: # 3 dan # 5). Data menunjukkan asam dalam ekstrak OSPW (dan beberapa asam
komersial) terkadang termasuk asam karboksilat nonana bisiklo [3.3.1].
Bicyclo [4.3.0] asam karboksilat nonana (mis Gambar 1 B; X) juga diidentifikasi sebelumnya
dalam campuran asam naftenat komersial dengan perbandingan spektrum massa dengan spektrum
massa literatur dari metil ester dari isomer asam 2-karboksilat sintetis [15] . Dalam penelitian ini, kami
mampu mensintesis 3 asam karboksilat yang sesuai ( Gambar. 1A; Xa dan S9) dan isomer asam
2-metil-3-karboksilat ( Gambar. 1A; Xb dan S10). Waktu retensi GC2 dari standar asam bicyclo [4.3.0]
nonane umumnya lebih besar daripada kebanyakan yang tidak diketahui (Gambar S1). Namun,
beberapa hal yang tidak diketahui dalam ekstrak asam OSPW (# 3) dimiliki
spektrum massa sangat mirip dengan yang sebelumnya diidentifikasi sebagai C 9 bicyclo [4.3.0] asam
karboksilat nonana (metil ester) dalam komersial
campuran asam [15,37] ( Gambar 7 C dan D) serta standar yang disintesis ( Gambar. 7 (A, B dan E, F)
dan S9 ). Bahkan lebih mungkin begitu
anggota C 12–15 asam termasuk tipe struktural ini, karena ada beberapa puncak elusi yang lebih lambat
di kelas-kelas ini ( Gambar. 2 dan
S1). Data ini menunjukkan bahwa asam dalam ekstrak OSPW terkadang termasuk asam karboksilat
nonana bisiklo [4.3.0].
Spektrum asam bicyclo [4.3.0] nonana dalam campuran asam komersial dikarakterisasi dengan
jumlah medium.
ion molekul tari (ca 20%) dan di C 10 asam induk,
bicyclo [4.3.0] nonane-2-carboxylic acidmethyl ester, oleh ion karena
kehilangan metanol ( m / z 150) dan m / z 87 [15,49] . Spektrum massa isomer dari bicyclo yang
disintesis [4.3.0] nonane-3-carboxylic
 MJ Wilde dkk. / J. Kromatogr. A 1378 (2015) 74–87
Gambar 4. Kromatogram ion terekstraksi ( m / z 168) dari (A) fraksi ekstrak asam Merichemacid (# 5) dianalisis dengan GC × GC-MS dan spektrum massa (B) puncak yang tidak diketahui 2a, diidentifikasi dengan perbandingan dengan (C) dari metil
ester asam bisiklo [2.2.2] asam karboksilat oktan-1-karboksilat asli dengan GC yang sama × Posisi retensi GC.
asam metil ester sangat bervariasi (Gbr. S9). Jadi dalam isomer mayor (69% dari total puncak
terselesaikan) ion molekuler berlimpah (80%; Gambar. S9), sedangkan pada isomer yang lebih kecil,
ion molekuler hanya <5% melimpah (Gbr. S9). Spektrum massa mudah dibedakan dari spektrum
2-isomer dan sekarang kita dapat menetapkan isomer yang ada dalam asam komersial yang
dipelajari di sini (# 5) dan sebelumnya. [15] , untuk 3-isomer dan hampir pasti 2-isomer, mengingat
spektrum massa ( Gambar 7 ). Itu
GC × GC penyimpanan posisi dari
methylbicyclo [3.3.0] asam oktan-2-karboksilat (Gambar S1 dan Gambar 1 SEBUAH;
VIb) dekat dengan beberapa hal yang tidak diketahui dalam ekstrak asam OSPW (# 1; Gambar S1).
Namun, tidak ada waktu retensi yang tepat atau kecocokan spektral massa. Spektrum massa file
C 10 4-methylbicyclo [3.3.0] oktan-2-karboksilat asam metil ester (Gambar S11) ditandai dengan
molekul yang cukup kuat (30%)
ion dan ion fragmen karakteristik, terutama pada m / z 140 (70%) diasumsikan karena hilangnya
sebagian propena, kemungkinan melalui penataan ulang cycloreversion / retro-Diels – Alder, tipikal
dari
hidrokarbon siklik [50,51] . Posisi retensi GC2 dari C 10
asam metil ester otentik (Gbr. S1) dan identifikasi tentatif
dari C 9 asam induk (Gambar S7) menunjukkan bahwa beberapa C + 11 asam
hadir di OSPWmungkin memiliki kerangka ini.
Metil ester asam 7-methylbicyclo [4.2.0] oktan-7-karboksilat dielusi sangat dekat dengan asam
bisiklik yang tidak diketahui dalam ekstrak asam OSPW (# 1, Gambar S1) tetapi tidak ada yang
benar-benar cocok dengan isomer tertentu yang ada. Bicyclo [4.2.0] asam karboksilat oktan
mengandung cincin siklobutan yang menyatu ( Gambar 1 B; VII), mirip strukturnya dengan asam lemak
tangga rantai pendek yang sebelumnya diidentifikasikan sebagai produk degradasi
81
dari lipid tangga [36] . Lipid tangga spesifik untuk bakteri yang mampu melakukan oksidasi amonium
anaerobik (anamoks) dan oleh karena itu asam dapat digunakan sebagai penanda biologis untuk
bakteri anamoks.
[52] . Spektrum massa dari kedua isomer metil ester asam 7-methylbicyclo [4.2.0] oktan-7 karboksilat
(Gambar S12) menunjukkan ion molekul lemah ( m / z 182) seperti yang diharapkan untuk asam
alisiklik yang mengandung cincin cyclobutane yang sangat tegang dan menyatu. Puncak dasar di m / z
101 dikaitkan dengan fragmentasi di cincin cyclobutane.
4-
3.4. C + 11 asam bisiklik
Asam bisikliknaftenik, diyakini sebagai produk biodegradasi, sering dianggap memiliki struktur
dekana bicyclo [4.4.0] (mis. [29–31] ) dan ini telah didukung oleh terjadinya asam seperti itu yang
diidentifikasi dalam setidaknya satu campuran asam komersial [15] .
Posisi retensi dari bicyclo sintetik [4.4.0] decane (decalin) karboksilat, etanoat dan asam
propanoat metil ester tersubstitusi baik dalam posisi 2 atau 3 pada inti dekalin menunjukkan bahwa
asam ini tidak ada atau memiliki kelimpahan yang sangat rendah dalam beberapa sampel asam
OSPW yang kami periksa (# 1 dan # 2), seperti yang ditunjukkan oleh elusi asam ini di akhir jendela
retensi GC2 (# 1, Gambar S1). Sejumlah kecil asam bicyclo [4.4.0] decane sementara diidentifikasi
dalam OSPW lain (# 3), berdasarkan perbandingan spektral massa dengan yang sebelumnya
dilaporkan dalam campuran asam komersial [15] , seperti isomer dari bicyclo [4.4.0]
decane-3-carboxylic acid methyl ester, sebagai
82 MJ Wilde dkk. / J. Kromatogr. A 1378 (2015) 74–87

Gambar 5. Kromatogram massa ion yang diekstraksi ( m / z 168 dan 87) dari (A dan B) ekstrak asam OSPW dari Industri A dan B (# 3 dan # 4) dianalisis dengan GC × GC-MS dan spektrum massa (C dan D) dari yang tidak diketahui yang sama
(3a) hadir dalam kedua sampel yang diidentifikasi oleh perbandingan dengan (E) spektrum massa dan posisi retensi asam bisiklo [3.2.1] asam oktan6-karboksilat metil ester otentik.

serta bicyclo [4.4.0] decane-1-carboxylic acid methyl ester yang dibandingkan dengan spektrum
massa perpustakaan NIST ( Gambar 8 ). Hidrokarbon minyak bumi dan senyawa terkait yang memiliki
inti decane bicyclo [4.4.0] seperti driman, cadinanes dan eudesmanes telah dipelajari dengan baik. [12,53,54]
sama dan asam bisiklo [4.4.0] dekana, jika ada, merupakan asam elusi terbaru; kami cukup yakin
. Cincin sikloheksil yang menyatu sering ditemukan pada senyawa yang diturunkan secara biologis,
misalnya hopan. Oleh karena itu, seskuiterpen bisiklik dapat secara masuk akal didalilkan menjadi
produk biodegradasi dari terpene yang lebih tinggi [53] .
Meskipun kami tidak bisa mendapatkan sampel bicyclo [3.2.2] nonane ( Gambar 1 SEBUAH; IX), bicyclo
[4.2.1] nonana ( XI), bicyclo [4.2.2] decane
( XII), bicyclo [5.3.0] decane ( XIII), bicyclo [5.2.1] decane ( XV),
bicyclo [3.3.2] decane ( XVI), spiro [4,5] decane ( XVII) atau cyclopentylcyclopentane ( XVIII) asam
karboksilat, ketika kami memeriksa indeks retensi NIST GC yang dilaporkan dari hidrokarbon
bicyclo [5.3.0] decane dan cyclopentylcyclopentane, jelas bahwa ini terelusi dengan baik setelah
decalin (bicyclo [4.4.0] decane). Karena asam metil ester diharapkan memiliki orde retensi relatif yang
menyingkirkan asam-asam ini dalam sampel OSPW ini. Karena kita tidak dapat menemukan sumber
asam bisiklo [4.2.1] nonana, bisiklo [3.2.2] nonana, bisiklo [4.2.2] dekan, bisiklo [3.3.2] dekan atau
spiro [4.5] dekan karboksilat untuk memungkinkan kita mempelajari spektrum massa atau perilaku
retensi GC, dan indeks retensi alkana tampaknya belum dipublikasikan, kami tidak dapat
mengesampingkan ini sebagai kemungkinan.
Pemeriksaan fitur spektral massa yang diamati untuk senyawa referensi otentik ( Gambar 1 A)
digunakan untuk mendalilkan
 MJ Wilde dkk. / J. Kromatogr. A 1378 (2015) 74–87 83

Gambar 6. Kromatogram ion terekstraksi ( m / z 196, 182, 151, 137 dan 123) dari (A) sebagian dari ekstrak asam Merichem (# 5) dianalisis dengan GC × GC-MS dan spektrum massa (B, D
dan F) dua puncak yang tidak diketahui (4a dan c) teridentifikasi dan satu C 11 puncak yang tidak diketahui (4b) sementara diidentifikasi dengan perbandingan dengan spektrum massa dan posisi retensi (C) yang dibeli bicyclo [3.3.1]
nonane-1-carboxylic acidmethyl ester, (E) 5-methylbicyclo [3.3.1] nonane-1- karboksilat acidmethyl ester dan (G) bicyclo [3.3.1] nonane-3-carboxylic
asam metil ester.
84 MJ Wilde dkk. / J. Kromatogr. A 1378 (2015) 74–87

Gambar 7. Spektrum massa ionisasi elektron dari (A, C dan E) puncak yang tidak diketahui (5a-c) dalam ekstrak asam OSPW (# 3), sementara diidentifikasi dengan perbandingan dengan spektrum massa (B dan F) dua isomer dari bisiklo yang
disintesis [4.3 .0] metil ester asam nonana-3-karboksilat dan (D) yang tidak diketahui dalam fraksi ekstrak asam Merichem (# 5) yang sebelumnya diidentifikasi sebagai isomer bicyclo [4.3.0] metil ester asam karboksilat nonana [15] (kemungkinan
besar 2-isomer, mirip dengan spektrum massa yang dilaporkan oleh Curcuruto et al. [37] ).

fitur struktural dari asam yang tidak diketahui. Misalnya, metil ester dari asam di mana gugus
karboksilat termetilasi diganti ke cincin, menciptakan atom karbon tersier, misalnya dalam spektrum
massa. [15] ester dari bicyclo [4.4.0] decane-2- atau 3-carboxylic acid ( Gambar. 1A ( XIVa dan b) dan 8 )
atau bicyclo [4.3.0] nonane-2 [15] atau asam 3-karboksilat ( Gambar. 1A ( Xa), 7 dan S9) , umumnya
kehilangan molekul metanol netral, atau radikal metoksi (M-31/32) (meskipun spektrum stereoisomer
bervariasi; Gambar S9).
Sebaliknya, metil ester asam di mana gugus karboksilat termetilasi disubstitusi ke cincin melalui
rantai alkanoat yang lebih panjang (misalnya dalam spektrum massa [15] dari ester asam bicyclo
[4.4.0] decane-2- atau 3-etanoic atau propanoic ( Gambar 1 SEBUAH; XIVc-e) atau bicyclo [2.2.1]
asam heptana-2-etanoat
( Gambar. 1A; Ia dan S3 )), biasanya kalah a · CH 2 BERSAMA 2 CH 3 radikal (massa 73 dan massa 74
dengan terjadinya transfer hidrogen).
Metil ester asam di mana gugus karboksilat termetilasi disubstitusi ke karbon jembatan,
menciptakan atom karbon kuaterner (misalnya dalam spektrum massa NIST dari ester asam bicyclo
[4.4.0] decane-4a-carboxylic acid atau spektrum massa bicyclo [3.3.1] asam nonana-1-karboksilat ( Gambar.
1A; VIIIa, dan 6C )),
biasanya kehilangan radikal karboksi ametilasi · BERSAMA 2 CH 3 radikal (massa 59 dan terkadang
massa 60dengan terjadinya hidrogen trans-
fer).
Ion fragmen bermassa rendah yang melimpah seperti m / z 55, 67, 79
dan 81 yang terdapat di banyak spektrum massa senyawa acuan adalah ion-ion umum yang diamati
dalam spektrum massa sikloalkana / polikloalkana, terutama yang mengandung cincin sikloheksil dan
siklopentil tersubstitusi. [55] . Oleh karena itu ion-ion ini didalilkan berasal dari fragmentasi dalam inti
bisiklik melalui mekanisme dan penataan ulang yang lebih kompleks yaitu
 MJ Wilde dkk. / J. Kromatogr. A 1378 (2015) 74–87 85

Gambar 8. Spektrum massa ionisasi elektron dari (A, C, D dan E) puncak yang tidak diketahui dalam ekstrak asam OSPW (# 3), sementara diidentifikasi dengan perbandingan dengan spektrum massa metil ester asam bisiklo [4.4.0] dekana yang
telah diidentifikasi sebelumnya [15] misalnya (B) bicyclo [4.4.0] decane-3-carboxylic acid methyl ester dan (F) NIST library spectrum dari bicyclo [4.4.0] decane-1-carboxylic acid methyl ester.

+ + +
sesuai dengan C 4 H. 7 , C 5 H +7, C 6 H. 7 dan C 6 H. 9 ion fragmen
masing-masing. Fragmentasi dalam inti bisiklik membutuhkan pembelahan
dari setidaknya dua obligasi. Studi spektral massa sikloalkana, khususnya hidrokarbon bisiklik,
menunjukkan bahwa ionisasi elektron menghasilkan salah satu ikatan di ujung jembatan karbon
tersier, diikuti dengan penataan ulang dan fragmentasi berikutnya. [44,56,57] .
Spektrum massa C 11 yang tidak diketahui dalam sampel OSPW memamerkan beberapa fitur di
atas. Secara umum memang begitu
juga dicirikan oleh ion molekuler yang melimpah ( m / z 196) dan ion pada m / z 81, 95 dan 107
seringkali dominan (Gambar S13). Dalam beberapa spektrum, ion yang mungkin menunjukkan
hilangnya substituen etil (M-29) dan alkil lainnya (misalnya M-57, butil), ada. Untuk
mengandung gugus substituen alkil dengan ukuran ini (misalnya C 4), a C 11 asam akan membutuhkan
inti bisiklik yang hanya mengandung enam karbon (mis
C 4- bicyclo [2.2.0] asam karboksilat heksana). Spektrum metil ester dari asam tersebut berbeda dan
tidak cocok dengan itu
diamati di sini [36] . Jadi, kami menyimpulkan bahwa C semu 3 / C 4
kerugian dari yang tidak diketahui merupakan kerugian dari cincin, sebagai
diamati dalam spektrum metil ester asam 4methylbicyclo [3.3.0] oktan-2-karboksilat otentik, yang
menunjukkan ion karena hilangnya propena ( Gambar. 1A; VIb dan S11).
Meskipun sejumlah fitur struktural dapat diamati
spektrum massa metil ester dari C 12–16 asam, termasuk ion molekuler, ion karena kehilangan metanol
(M-32) dan
kehilangan gugus alkil atau gugus alkena (misalnya M-15, M-28 dan
29) dari ion molekuler dan ion karena hilangnya rantai samping etanoat (M-73) dan propanoat (M-87),
tidak ada penetapan yang lebih ketat dari jenis struktur yang dapat dibuat selain untuk
86 MJ Wilde dkk. / J. Kromatogr. A 1378 (2015) 74–87
C 11 asam. Jadi kami berasumsi bahwa ini sebagian besar adalah homolog yang lebih tinggi dari
bicyclo [2.2.1] heptane, bicyclo [2.2.2], [3.2.1], [3.3.0] octane,
bicyclo [3.3.1] dan [4.3.0] nonane dan beberapa bicyclo [4.4.0] decane skeletal, dengan kemungkinan
bicyclo [4.2.1] nonane, bicyclo [3.2.2] nonane, bicyclo [3.3.2] decane atau Spiro [4.5] asam karboksilat
dekan juga diwakili. Kami menyertakan spektrum massa dari beberapa metil ester asam bisiklik yang
belum diketahui (Gambar S13) agar di masa mendatang dapat dibandingkan dengan asam yang
disintesis saat ini tersedia.
4. Kesimpulan
Pertimbangan perilaku retensi GC, jumlah jenis struktur dan interpretasi spektrum massa ionisasi
elektron dari ester etil dari sejumlah asam karboksilat bisiklik sintetis dan dibeli memungkinkan
dentifikasi berbagai asam bisiklik dalam OSPW dan asam komersial.
Lebih dari seratus C 8–15 asam bisiklik biasanya ada di OSPW. Sintesis atau pembelian
diperbolehkan kami untuk mengidentifikasi bicy-
clo [2.2.1] heptana, bicyclo [3.2.1] oktan, bicyclo [4.3.0] oktan dan bicyclo [3.3.1] asam oktan dalam
OSPWand asam oktan bicyclo [2.2.2] dalam campuran asam komersial. Posisi retensi autentik bicyclo
[3.3.0] oktan dan bicyclo [4.2.0] metil ester asam karboksilat oktan dan indeks retensi yang
dipublikasikan, menunjukkan ini juga kemungkinan, seperti halnya asam bicyclo [3.1.1] heptana.
Dalam kebanyakan ekstrak asam OSPW yang dianalisis, asam bicyclo [4.4.0] decane carboxylic
(decalin) yang selalu diasumsikan ada dalam OSPW, merupakan komponen yang relatif kecil. Bicyclo
[5.3.0] decane dan cyclopentylcyclopentane karboksilat asam dikesampingkan atas dasar bahwa
alkana yang sesuai dielusi dengan baik setelah bicyclo [4.4.0] decane (asam elusi terbaru). Bicyclo
[4.2.1] nonane, bicyclo [3.2.2] nonane, bicyclo [3.3.2] decane, bicyclo [4.2.2] decane dan spiro [4. 5]
asam karboksilat decane tidak dapat dikesampingkan atau masuk, karena tidak ada senyawa otentik
atau data literatur yang tersedia. Massa
spektrum metil ester dari C bisiklik yang lebih tinggi 12–15 asam menunjukkan bahwa banyak yang
hanyalah analogi di atas, dengan lebih lama
rantai alkanoat dan / atau substituen alkil. Hipotesis kami adalah bahwa asam ini mewakili produk
transformasi biotransformasi dari bicyclanes minyak bumi yang awalnya agak lebih tahan-bio. Studi
remediasi menunjukkan setidaknya beberapa asam bisiklik dapat secara relatif cepat dihilangkan dari
OSPW yang dirawat dengan tepat [3] , tetapi pemeriksaan lebih dekat tentang isomer mana yang
terdegradasi sekarang dapat dilakukan dengan menggunakan metode yang ditunjukkan di sini. Ini
mungkin dianggap penting karena beberapa asam bisiklik lebih beracun dari yang lain [8] . Jelas masih
banyak asam bisiklik yang harus diidentifikasi. Karena literatur yang lebih luas tentang spektrum
massa hidrokarbon bisiklik (mis [44,57–61] ) tersedia daripada yang ada untuk asam, pendekatan yang
berguna mungkin untuk mengubah asam menjadi hidrokarbon (cf [62,63] ). Menggabungkan
pendekatan lama ini dengan metode kromatografi modern (yaitu: GC × GC-MS) yang digunakan di sini,
mungkin terbukti sangat berharga.
Ucapan Terima Kasih
Kami berterima kasih atas beasiswa PhD Universitas Plymouth untuk DJ. Pendanaan penelitian
ni disediakan oleh Advanced Investigators Grant (no. 228149) yang diberikan kepada SJR untuk
proyek OUTREACH, oleh European Research Council, kepada siapa kami juga sangat berterima
kasih. Kami berterima kasih kepada Dr. C. AnthonyLewis atas kontribusinya, khususnya dalam
membatasi jumlah tentang kemungkinan isomer serta semua saran dan masukannya. Ingin memberi
tahu Pusat Layanan Spektrometri Massa Nasional EPSRC di Swansea University, Inggris untuk
mendapatkan data massa yang akurat. Kami berterima kasih kepada Profesor O. Baudoin, Université
Claude Bernard Lyon, Prancis, yang telah menyediakan sampel metil ester asam
1-metil-1,2-dihidrosiklobutabenzena-1-karboksilat.
Lampiran A. Data tambahan
Data tambahan yang terkait dengan artikel ini dapat ditemukan, dalam versi online, di http://dx.doi.org/10.1016/j.chroma.
2014.12.008 .
Referensi
[1] JV Headley, KM Peru, A. Janfada, B. Fahlman, C. Gu, S. Hassan, Karakterisasi asam pasir minyak dalam
jaringan tanaman menggunakan spektrometri massa resolusi sangat tinggi Orbitrap dengan ionisasi
elektrospray, Rapid Commun. Spektrom Massa. 25 (2011) 459–462.
[2] DM Grewer, RF Young, RM Whittal, PM Fedorak, asam naphthenic dan asam-ekstrakabel lainnya dalam sampel
air dari Alberta: apa yang diukur? Sci. Total Lingkungan. 408 (2010) 5997–6010.
[3] JW Martin, T. Barri, X. Han, PM Fedorak, MG El-Din, L. Perez, AC Scott,
JT Jiang, Ozonisasi air yang terpengaruh proses pasir minyak mempercepat bioremediasi mikroba,
Lingkungan. Sci. Technol. 44 (2010) 8350–8356.
[4] S. Mishra, V. Meda, AK Dalai, JV Headley, KM Peru, DW McMartin, Pengobatan microwave asam naftenat dalam
air, J. Environ. Sci. Kesehatan A 45 (2010) 1240–1247.
[5] JV Headley, KM Peru, DWMcMartin, M. Winkler, Penentuan asam naftenat terlarut di perairan alami dengan
menggunakan spektrometri massa penyemprotan elektro ion negatif, J. AOAC Int. 85 (2002) 182–187.
[6] MP Barrow, JV Headley, KM Peru, PJ Derrick, Fourier mengubah spektrometri massa resonansi siklotron ion
komponen utama dalam minyak dan asam naftenat, J. Chromatogr. A 1058 (2004) 51–59.
[7] JW Martin, X. Han, KM Peru, JV Headley, Perbandingan spektrometri massa ionisasi elektrospray resolusi tinggi
dan rendah untuk analisis campuran asam naftenat dalam air proses pasir minyak, Rapid Commun. Spektrom
Massa. 22 (2008) 1919–1924.
[8] D. Jones, AG Scarlett, CE West, SJ Rowland, Toksisitas asam naftenat individu untuk Vibrio fi scheri, Mengepung.
Sci. Technol. 45 (2011) 9776–9782.
[9] TD Cyr, OP Strausz, Asam karboksilat terikat di pasir minyak Alberta, Org. Geochem. 7 (1984) 127–140.
[10] A. Dimmler, TD Cyr, OP Strausz, Identifikasi hidrokarbon terpenoid bisiklik dalam fraksi jenuh bitumen pasir
minyak Athabasca, Org. Geochem. 7 (1984) 231–238.
[11] RP Philp, DT Gilbert, J. Friedrich, seskuiterpenoid bisiklik dan diterpenoid dalam minyak mentah Australia,
Geochim. Cosmochim. Kisah 45 (1981) 1173–1180.
[12] R. Alexander, RI Kagi, R. Noble, JK Volkman, Identifikasi beberapa alkana bisiklik dalam minyak bumi, Org.
Geochem. 6 (1984) 63–72.
[13] DT Bowman, GF Slater, LA Warren, BE McCarry, Identifikasi masing-masing thiophene-, indane-, tetralin-,
cyclohexane-, dan adamantane-type carboxylic acids dalam komposit air pori tailing dari pasir minyak Alberta,
Rapid Commun. Spektrom Massa. 28 (2014) 2075–2083.
[14] CM Aitken, DM Jones, SR Larter, Biodegradasi hidrokarbon anaerobik di reservoir minyak bawah permukaan
dalam, Nature 431 (2004) 291–294.
[15] SJ Rowland, CE West, AG Scarlett, D. Jones, Identifikasi asam individu dalam sampel komersial asam naftenat
dari minyak bumi dengan kromatografi gas komprehensif dua dimensi / spektrometri massa, Rapid Commun.
Spektrom Massa. 25 (2011) 1741–1751.
[16] CEWest, J. Pureveen, AG Scarlett, SK Lengger, MJWilde, F. Korndorffer, EW Tegelaar, SJ Rowland, Dapatkah
identifikasi kromatografi gas dua dimensi / spektrometri massa asam aromatik bikliklik dalam fraksi minyak bumi
membantu mengungkapkan rincian lebih lanjut dari jalur hidrokarbonbiotransformasi aromatik? Komunikasi
Cepat. Spektrom Massa. 28 (2014) 1023–1032.
[17] SJ Rowland, CE West, D. Jones, AG Scarlett, RA Frank, LM Hewitt, Steroidal Aromatic, 'Naphthenic acid' dalam
air yang dipengaruhi proses pasir minyak: perbandingan struktural dengan estrogen lingkungan, Environ. Sci.
Technol. 45 (2011) 9806–9815.
[18] FC Damasceno, LD Gruber, AM Geller, MCV de Campos, AO Gomes, RC Guimarães, VF Péres, RA Jacques, EB
Caramão, Karakterisasi asam naftenat menggunakan spektroskopi massa dan teknik kromatografi: studi
tentang campuran teknis, Anal. Metode 6 (2014) 807–816.
[19] G. Moss, Perpanjangan dan revisi sistem von Baeyer untuk penamaan senyawa polisiklik (termasuk senyawa
bisiklik), Apel Murni. Chem. 71 (1999) 513–529.
[20] SJ Rowland, R. Clough, CE West, AG Scarlett, D. Jones, S. Thompson, Sintesis dan spektrometri massa dari
beberapa asam naftenat tri-dan tetrasiklik, Rapid Commun. Spektrom Massa. 25 (2011) 2573–2578.
[21] T. Sasaki, S. Eguchi, T. Toru, Sintesis turunan adamantane. VIII. Reaksi substitusi baru adamantanone. Sebuah
sintesis sederhana dari asam bicyclo [3.3.1] non-2-ene-7-karboksilat, J. Am. Chem. Soc. 91 (1969) 3390–3391.
[22] JA Peters, JM Van Der Toorn, H. Van Bekkum, 3,7-disubstituted bicyclo [3.3.1] nonanes — III: sintesis dan
konformasi bicyclo [3.3.1] nonane-3, 7 -dicarboxylic acid, dimetil esternya dan beberapa 3,7 bicyclo
terdisubstitusi lainnya [3.3.1] nonanes; adamantane sebagai sistem holding terintegrasi, Tetrahedron 31 (1975)
2273–2281.
[23] SJ Rowland, AG Scarlett, D. Jones, CE West, RA Frank, Diamonds in the rough: identifikasi asam naftenat
individu dalam air proses pasir minyak, Environ. Sci. Technol. 45 (2011) 3154–3159.
 MJ Wilde dkk. / J. Kromatogr. A 1378 (2015) 74–87
[24] AG Scarlett, HC Reinardy, TB Henry, CE West, RA Frank, LM Hewitt,
SJ Rowland, Toksisitas akut dari fraksi aromatik dan non-aromatik dari asam naftenat yang diekstraksi dari air
yang terkena proses pasir tanah menjadi larva ikan zebra, Chemosphere 93 (2013) 415–420.
[25] HC Reinardy, AG Scarlett, TB Henry, CE West, LM Hewitt, RA Frank,
SJ Rowland, Asam naftenat aromatik dalam air yang terpengaruh proses pasir minyak, diatasi dengan GC × GC-MS,
hanya dengan lemah menginduksi gen untuk produksi vitellogenin pada ikan zebra ( Danio rerio) larva,
Lingkungan. Sci. Technol. 47 (2013) 6614–6620.
[26] D. Jones, CE West, AG Scarlett, RA Frank, SJ Rowland, Isolasi dan estimasi kandungan asam naftenat 'aromatik'
dari ekstrak air yang terpengaruh proses pasir minyak, J. Chromatogr. A 1247 (2012) 171–175.
[27] Akurasi massa dan teoritis m / z perhitungan, tersedia di: http: // beranda.
warwick.ac.uk/staff/MPBarrow/massaccuracy.html (diakses 27/11/14). [28] CE West, AG Scarlett, J. Pureveen,
EW Tegelaar, SJ Rowland, Asam naftenat yang melimpah dalam air yang dipengaruhi proses pasir minyak: studi
melalui sintesis, derivatisasi, dan kromatografi gas dua dimensi / spektrometri massa resolusi tinggi, Rapid
Commun. Spektrom Massa. 27 (2013) 357–365.
[29] FM Holowenko, MD MacKinnon, PM Fedorak, Asam naftenat dan asam naftenat pengganti dalam mikrokosmos
metanogenik, Water Res. 35 (2001) 2595–2606.
[30] JS Clemente, PM Fedorak, Tinjauan tentang kejadian, analisis, toksisitas, dan biodegradasi asam naftenat,
Chemosphere 60 (2005) 585-600.
[31] JV Headley, KM Peru, MP Barrow, Karakterisasi spektrometri massa asam naftenat dalam sampel lingkungan:
tinjauan, Spektrom Massa. Rev. 28 (2009) 121–134.
[32] SJ Rowland, CE West, AG Scarlett, D. Jones, RA Frank, Identifikasi asam naftenat tetra- dan pentasiklik individu
dalam air proses pasir minyak dengan kromatografi gas dua dimensi / spektrometri massa yang komprehensif,
Rapid Commun. Spektrom Massa. 25 (2011) 1198–1204.
[33] BE Smith, CA Lewis, ST Belt, C. Whitby, SJ Rowland, Pengaruh percabangan rantai alkil pada biotransformasi
asam naftenat, Environ. Sci. Technol. 42 (2008) 9323–9328.
[34] SJ Rowland, D. Jones, AG Scarlett, CE West, LP Hin, M. Boberek, A. Tonkin,
BE Smith, C. Whitby, Sintesis dan toksisitas beberapa metabolit degradasi mikroba asam naftenat sintetis, Sci.
Total Lingkungan. 409 (2011) 2936–2941.
[35] RJ Johnson, BE Smith, PA Sutton, TJ McGenity, SJ Rowland, C. Whitby, Biodegradasi mikroba dari asam naftenat
alkanoat aromatik dipengaruhi oleh tingkat percabangan rantai samping alkil, ISME J. 5 (2011) 486-496.
[36] D. Rush, A. Jaeschke, EC Hopmans, JAJ Geenevasen, S. Schouten, JSS Damsté, Tangga rantai pendek: produk
biodegradasi oksik dari lipid anammox, Geochim. Cosmochim. Acta 75 (2011) 1662–1671.
[37] O. Curcuruto, D. Favrctto, P. Traldi, D. Ajo, C. Cativiela, JA Walikota, MP Lorez,
JM Fraile, JI Garcia, Spektrometri massa dalam masalah stereokimia. 6 — Kasus mono dan norbornan
tersubstitusi, Org. Spektrom Massa. 26 (1991) 977–984.
[38] M. Heintz, M. Gruselle, A. Druilhe, D. Lefort, Hubungan antara struktur chimique dan données de rétention en
chromatographie en phase gazeuse VI-Alcools dan esters méthyliques de structure cycliques, Chromatographia
9 (1976) 367-372.
[39] WK Seifert, RM Teeter, Preparatif kromatografi lapis tipis dan spektrometri massa resolusi tinggi asam karboksilat
minyak mentah, Anal. Chem. 41 (1969) 786–795.
[40] S. Manabe, C. Nishino, aktivitas sexpheromonal dari (+) - bornyl asetat dan senyawa terkait dengan kecoa
Amerika, J. Chem. Ecol. 9 (1983) 433–448.
[41] Y.-H. Kuo, C.-H. Chen, S.-L. Huang, Anovel bicyclo [2. 2. 2] kerangka oktanonditerpen, obtunone, dari inti kayu Chamaecyparis
[63] WK Seifert, RM Teeter, WG Howells, MJR Cantow, Analisis asam karboksilat minyak mentah setelah konversi ke
obtusa var. formosana, Chem. Pharm. Banteng. 46 (1998) 181–183.
87
[42] M. Asaoka, K. Ishibashi, N. Yanagida, H. Takei, Total sintesis ( ±) -
eremolactone, Tetrahedron Lett. 24 (1983) 5127–5130.
[43] A. Srikrishna, G. Ravi, sintesis total astereoselektif dari ( -) - seychellene, Tetra-
hedron 64 (2008) 2565–2571.
[44] YV Denisov, NS Vorobeva, IM Sokolova, AA Petrov, Studi spektrometri massa hidrokarbon seri oktan bicyclo
[2.2.2], Neftekhimiya 17 (1977) 186–191 (dalam bahasa Rusia).
[45] M. Presset, Y. Coquerel, J. Rodriguez, Sintesis, Aplikasi oktan bicyclo [3.2.1] yang difungsikan: tiga belas tahun
kemajuan, Chem. Wahyu 113 (2012) 525–595.
[46] IM Sokolova, SS Berman, NN Abryutina, AA Petrov, Konsentrat alami naftena bi- dan trisiklik, Chem. Technol.
Bahan Bakar Minyak 25 (1989) 233–235.
[47] BJ Mair, PE Eberly, K. Li, FD Rossini, Hidrokarbon Polycycloparaffin dalam minyak bumi, Ind. Eng. Chem. 50
(1958) 115–116.
[48] SA Selifonov, Oksidasi mikroba adamantanone oleh Pseudomonas putida
membawa plasmid katabolik kamper, Biochem. Biofis. Res. Komun. 186 (1992) 1429–1436.
[49] VS Ranade, G. Consiglio, R. Prins, Hidrogenasi diastereoselektif yang diarahkan kelompok fungsional dari
senyawa aromatik. 21, J. Org. Chem. 65 (2000) 1132–1138.
[50] C.Dass, Fundamentals of Contemporary Mass Spectrometry, Wiley, Hoboken, New Jersey, USA, 2007.
[51] FW McLafferty, F. Tureček, Interpretation of Mass Spectra, University Science Books, South Orange, New Jersey,
AS, 1993.
[52] JS Sinninghe Damsté, WIC Rijpstra, JAJ Geenevasen, M. Strous, MSM Jetten, Identifikasi struktural ladderane
dan lipid membran lain dari planctomycetes yang mampu melakukan oksidasi amonium anaerobik (anammox),
FEBS
J. 272 (2005) 4270–4283.
[53] R. Alexander, R. Kagi, R. Noble, Identifikasi dari bicyclic sesquiterpenes drimane dan eudesmane dalam
petroleum, Journal of Chemical Society Chem. Komun. (1983) 226–228.
[54] GN Gordadze, TV Okunova, MV Giruts, OG Erdnieva, VN Koshelev, PetroleumC15 polyalkyl mensubstitusi bicyclo
[4.4.0] decanes (sesquiterpanes) sebagai indikator kematangan minyak (diilustrasikan dengan contoh minyak
Jurassic dan Cretaceous dari Kalmykia), Bensin. Chem. 51 (2011) 117–122.
[55] FWMcLafferty, RF Gould, Mass Spectral Correlations: Advances inChemistry, Literary Licensing, LLC, Whitefish,
Montana, AS, 2012.
[56] YV Denisov, IM Sokolova, AA Petrov, Studi spektrometri massa hidrokarbon seri oktan bicyclo [4.3.0],
Neftekhimiya 17 (1977) 491-497 (dalam bahasa Rusia).
[57] YV Denisov, IA Matveyeva, IM Sokolova, AA Petrov, Studi spektrometri massa hidrokarbon seri oktan bicyclo
[3.2.1], Bensin. Chem. Uni Soviet 17 (1977) 85–93.
[58] YV Denisov, NS Vorob'eva, AA Petrov, studi Spektrometri Massa hidrokarbon seri oktan bicyclo [3.3.0],
Neftekhimiya 17 (1977) 656-662 (dalam bahasa Rusia).
[59] YS Brodskii, IM Lukashenko, IA Musayev, EK Kurashova, PI Sanin, Massspectra dari dimethylbicyclo [4.4.0]
decane stereoisomer (2,3-; 2,4-; 2,8- and2,9dimethylbicyclo [4.4.0] decanes) , Bensin. Chem. Uni Soviet 17
(1977) 77–84.
[60] IM Lukashenko, YS Brodskii, IA Musayev, EK Kurashova, VG Lebedevskaya,
PI Sanin, Spektrum massa dari stereoisomer decane [4,4,0] methylbicyclo, Bensin. Chem. Uni Soviet 13 (1973)
38–44.
[61] LS Golovkina, GV Rusinova, AA Petrov, Spektrometri massa hidrokarbon jenuh, Russ. Chem. Wahyu 53 (1984)
870–887.
[62] N. Zelinsky, Über die chemische Natur des Naphthensäuren (I.), Ber. Deutsch. Chem. Gesellsch. (A dan B Ser.)
57 (1924) 42–51.
hidrokarbon yang sesuai, Anal. Chem. 41 (1969) 1638–1647.