Diagram Alir

ddH2O 10 µl
Template DNA (pRY121 DNA, 2 µg/ml) atau coloni Lactobacillus plantarum 3,0 µl
Forward primer,10 µM, 1,0 µl
Reverse primer,10 µM, 1,0 µl
PCR Mix 10 µl (Taq polymerase, MgCl2, dNTPs dan Buffer PCR)

Diambil menggunakan mikropipet

Dimasukkan ke mikro tube 0,5 ml steril yang di tempatkan di atas es serut

Dihomogenkan dengan vortex
Mikrotube berisi larutan dispindown 3 detik
Mikrotube diletakkan di mesin PCR dan proses amplifikasi
dilakukan sesuai dengan PCR Setting
PCR Setting
Initial denaturation 94oC, 2
menit
Denaturasi 94oC, 30 detik
Annealing 53-60oC, 45 detik
Extension 72oC, 2 menit
Dilakukan 30-35 cycle
Final extension 72oC, 5 menit
Cooling 4oC, 5 menit

Microtube dikeluarkan dari mesin PCR

Disimpan dalam lemari es 4oC untuk

segera dilakukan analisa dan
Produk PCR/Amplikon konfirmasi elektroforesis DNA atau
-20oC untuk penyimpanan beberapa
hari