METODE ANALISIS GSH

1. Pembuatan Homogenat Ginjal Tikus

Untuk pembuatan homogenat ginjal yang akan dipergunakan untuk

pemeriksaan glutathione (GSH) menggunakan jaringan ginjal tikus yang

dicuci dengan saline dalam kondisi dingin kemudian dilumatkan dengan

hand blander. Diambil 500mg ginjal ditambahkan 5 mL larutan 0,15 M

tris-HCl (pH 7,4) kemudian dikocok untuk menghomogenkan sehingga

diperoleh homogenat 10% b/v (Novianto et.al.,2015).

2. Pengukuran Kadar Glutathione (GSH)

Pengukuran kadar GSH mengacu pada metode yang dikembangkan

oleh Ellmanetal.,(1984) dimana 0,75mL supernatan ginjal homogenat yang

telah dibuat ditambahkan dengan 0,75mLTCA 10% yang mengandung 1

mM EDTA lalu disentrifugasi dengan kecepatan 200 rpm selama 10

menit.Selanjutnya diambil 0,2 mL supernatan kemudian ditambahkan

dengan 1,8mL reagen ellman (5,5'-dithiobis-2- nitro benzoic acid) 0,1mM

yang disiapkan dalam buffer fosfat 0,3M dengan 1% larutan natrium sitrat.

Larutan selanjutnya diukur pada panjang gelombang 412 nm yang

dibandingkan dengan blanko. KadarGSH ditentukan dengan menggunakan

koefisien ekstingsi 14,15 mM‐1 cm‐1 (Novianto et.al.,2015).

Absorbansi x Faktor Pengencer 1

Kadar GSH = X
(Tebal Kuvet x 14,15 mM cm )
-1 -1
Berat Ginjal
 A. Analisis Data
Data kadar GSH dianalisis secara statistik dengan menggunakan

software IBM SPSS statistic 21. Data yang diperoleh diuji normalitas dan

homogenitasnya dengan metode shapiro wilk dan levene’s test. Apabila

data terdistribusi normal dan homogen maka dilanjutkan dengan

ujioneway ANOVA dan posthoc berupa Least Significant Difference

(LSD). Apabila data tidak terdistri busi normal dan homogen maka

dilakukan uji kruskal wallis dilanjutkan dengan post hoc berupa uji man n

whitney.

DAFTAR PUSTAKA

Novianto,A., Arief,N., Ika,P.S., dan Puji,A. 2015. Hepatoprotective Effect Of

Combination of Curcuma domestica Valand Phyllanthus Niruri Linn
Against Paracetamol Induced Liver Damagein Wistar Rats. International
Journal of Pharmaceutical and Clinical Research.7(6):450-457.