Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Artikel

Kutip Ini: Mengepung. Sci. teknologi.2018, 52, 1506−1513 pubs.acs.org/est

Pengaruh Paparan 4‑Hydroxyphenyl 4‑Isoprooxyphenylsulfone

(BPSIP) Terhadap Reproduksi dan Sistem Endokrin Ikan Zebra
Jiyun Lee,kan Taman Na-Youn,kan Younglim Kho,kan dan Kyunghee Ji*, ,kan

Departemen Kesehatan Lingkungan, Sekolah Pascasarjana Universitas Yongin, Yongin, 17092, Republik Korea
kan

kanDepartemen Kesehatan, Lingkungan dan Keselamatan, Universitas Eulji, Seongnam, Gyeonggi, 13135, Republik Korea
kanDepartemen Kesehatan Kerja dan Lingkungan, Universitas Yongin, Yongin, 17092, Republik Korea

*S informasi pendukung

ABSTRAK: Senyawa 4-hidroksifenil 4-isoprooksifenilsulfon

Diunduh melalui HELMHOLTZ-ZENTRUM HEREON pada 28 Oktober 2021 pukul 12:52:36 (UTC). Lihat https://

(BPSIP), turunan dari bisfenol S (BPS), telah terdeteksi dalam

pubs.acs.org/sharingguidelines untuk opsi tentang cara membagikan artikel yang diterbitkan secara sah.

kertas termal dan sampel urin manusia; namun, efek

potensialnya pada sistem endokrin sebagian besar tidak
diketahui. Penelitian ini dilakukan untuk menentukan efek
samping BPSIP pada produksi telur, bobot organ relatif, kadar
hormon seks plasma, dan transkripsi gen yang terkait dengan
sumbu hipotalamus-pituitarygonad (HPG) pada ikan zebra (
Danio rerio). Pada ikan jantan, indeks gonadosomatik menurun
secara signifikan pada konsentrasi 5 dan 50 g/L BPSIP. Efek
estrogenik (peningkatan 17β-estradiol/testosteron [E2/T]) dan
antiandrogenik (penurunan T) diamati pada ikan yang terpapar
BPSIP dan jantan lebih sensitif terhadap efek samping.

daripada perempuan. Perubahan hormon seks didukung oleh regulasi gen di sepanjang sumbu HPG, seperti:cyp19,
17βhsd,dan sip17 transkrip. Meskipun konsentrasi efektif untuk gangguan endokrin lebih besar daripada BPS, tindakan
BPSIP pada jalur steroidogenik mirip dengan efek paparan BPS.

■ PENGANTAR
Bisphenol A (BPA) telah banyak digunakan dalam pembuatan
lebih sering daripada BPA dan BPS, menunjukkan bahwa itu mungkin lebih
persisten dengan paparan yang lebih luas daripada yang diasumsikan
sebelumnya.9
plastik polikarbonat dan resin epoksi dalam wadah kemasan
Senyawa alternatif yang digunakan untuk menggantikan bahan kimia
makanan, plastik, dan produk kertas termal.1 Banyak ilmuwan
yang menjadi perhatian harus jauh lebih tidak beracun daripada bahan
telah menyuarakan keprihatinan atas penggunaan BPA karena
kimia asli. Sayangnya, banyak alternatif bahan kimia tidak sepenuhnya
berbagai aplikasi dan penemuan terkait efek kesehatan yang
diuji sebelum dipasarkan, dan terkadang sama beracunnya dengan
merugikan, khususnya, gangguan endokrin pada hewan.1 dan
bahan kimia aslinya.12 Misalnya, BPS memiliki gugus para hidroksil pada
studi manusia.2,3 Mengikuti prinsip kehati-hatian, BPA dilarang
setiap cincin fenol, mirip dengan BPA, dan potensi kimianya serupa atau
dalam botol plastik bayi di Kanada, Prancis, dan Uni Eropa.4
sedikit lebih rendah daripada BPA. Penelitian sebelumnya telah
Pada tahun 2014, Prancis mengajukan proposal untuk
melaporkan bahwa BPS memiliki estrogenic13 dan aktivitas
membatasi konsentrasi BPA yang digunakan dalam pembuatan
antiandrogenik14 mirip dengan BPA, dan beracun bagi organisme
kertas termal.5 Karena peraturan BPA telah diperketat,
akuatik.15,16
produsen mulai menghilangkan BPA dari produk mereka dan
Studi kami sebelumnya melaporkan bahwa paparan ikan zebra ke
secara bertahap beralih menggunakan analog BPA sebagai
konsentrasi rendah BPS mengganggu kadar hormon 17β-estradiol
alternatif.
(E2) dan testosteron (T), dan transkripsi gen sumbu hipotalamus-
Bisphenol S (BPS) dan 4-hydroxyphenyl 4-isoprooxyphenylsulfone
hipofisis-gonad (HPG), akibatnya menyebabkan penurunan produksi
(BPSIP, juga dikenal sebagai D-8 dan WinCon-8), telah diperkenalkan
sebagai senyawa alternatif untuk pengembangan pewarna.6 BPS telur .17 Studi lain pada ikan zebra menunjukkan bahwa paparan BPS
telah terdeteksi di berbagai produk, biota, dan sampel lingkungan menurunkan berat badan, mengubah kadar hormon seks,
(misalnya, perawatan pribadi7 dan produk kertas,8 meningkatkan rasio jenis kelamin betina dan jantan, dan
urin dan darah manusia,9 dan air permukaan10). Namun, informasi mengganggu reproduksi.18 Namun, informasi tentang
mengenai data pemantauan untuk BPSIP masih terbatas. Dalam
penerimaan kertas termal yang digunakan di pasar Swiss, BPSIP Diterima: 26 Januari 2017
terdeteksi dalam kisaran 3,4-13,2 mg/g.11 Tingkat BPS dan BPSIP Diperbaiki: 12 April 2017
lebih tinggi di kasir setelah bekerja, dan juga terdeteksi di Diterima: 17 April 2017
noncashiers.9 BPSIP dalam darah kasir terdeteksi Diterbitkan: 26 Januari 2018

© 2018 American Chemical Society 1506 DOI: 10.1021/acs.est.7b00498

Mengepung. Sci. teknologi.2018, 52, 1506−1513
Ilmu & Teknologi Lingkungan Artikel

Tabel 1. Urutan Primer untuk Gen yang DiukurA

nama gen aksesi no. keterangan urutan (5'-3)
-aktin NM_131031 maju TGCTGTTTTCCCCTCCATTG
membalikkan TCCCATGCCAACCATCACT
18s rRNA BX296557 maju TCGCTAGTTGGGCATCGTTTATG
membalikkan CGGAGGTTCGAAGACGATCA
gnrh2 AY657018 maju CTGAGACCGCGGGAAGAAA
membalikkan TCACGAATGAGGGCATCCA
gnrh3 NM_182887 maju TTGCCAGCACTGGTCATACG
membalikkan TCCATTTCACCAACGCTTCTT
gnrhr2 NM_001144979 maju CAACCTGGCCGTGCTTTACT
membalikkan GGACGTGGGAGCGTTTTCT
gnrhr4 NM_001098193 maju CACCCAACAACAAGCGCAAGT
membalikkan GGCAACGGTGAGGTTCATG
fshβ NM_205624 maju GCTGTCGACTCACCAACATCTC
membalikkan GTGACGCAGCTCCCCATT
lhβ NM_205622 maju GGCTGCTCAGAGCTTGGTTT
membalikkan TCCACCGATACCGTCTCATTTA
sip19b AF183908 maju GTCGTTACTTCCAGCCATTCG
membalikkan GCAATGTGCTTCCCAACACA
erα NM_152959 maju GAAGCATTCAAGGTCACAATGACT
membalikkan GCATGCTTGGCAGCTCTTTC
er2β NM_174862 maju TTCAACCACGGAGCCCTAAC
membalikkan TTCGGACACAGGAGGACGAT
ar NM_001083123 maju TCTGGGTTGGGAGGTCCTACAA
membalikkan GGTCTGGAGCGAAGTACAGCAT
fshr NM_001001812 maju CGTAATCCCGCTTTTGTTCCT
membalikkan CCATGCGCTTGGCGATA
lhr AY424302 maju GGCCATCGCCGGAAA
membalikkan GGTTATTTGCAGCGGCTAGTG
hmgra BC155135 maju GAATCCACGGCCTCTTCGT
membalikkan GGGTTACGGTAGCCCAATGA
hmgrb NM_001014292 maju TGGCCGGACCGCTTCTA
membalikkan GTTGTTGCCATAGGAACATGGA
bintang NM_131663 membalikkan GGTCTGAGGAAAGAATGCAATGAT
membalikkan CCAGGTCCGGAGAGCTTGT
cyp11a NM_152953 maju GGCAGAGCACCGCAAAA
membalikkan CCATCGTCCAGGGATCTTATTG
sip17 AY281362 maju TCTTTGACCCAGGACGCTTT
membalikkan CCGACGGGCAGCACAA
17βhsd AY306005 maju TGCATCTCGCATCAAATCCA
membalikkan GTCCAAGTTCCGCATAGTAGCA
sip19a AF226620 maju GCTGACGGATGCTCAAGGA
membalikkan CCACGATGCACCGCAGTA
ASingkatan: -aktin, beta aktin; rRNA 18s, RNA ribosom 18s; gnrh, hormon pelepas gonadotropin; gnrhr, reseptor hormon pelepas gonadotropin; fshβ,

hormon perangsang folikel ; lhβ, hormon luteinizing ; sip, sitokrom; eh, reseptor estrogen; ar, reseptor androgen; fshr, reseptor hormon perangsang
folikel; lhr, reseptor hormon luteinizing; hmgr, hidroksimetilglutaril CoA reduktase; bintang, protein pengatur akut steroidogenik; 17βhsd, 17β-

■
hidroksisteroid dehidrogenase.

gangguan endokrin oleh BPSIP sangat terbatas. Aktivitas estrogenik
tidak diamati dalam uji pengikatan reseptor estrogen (ER),19
sedangkan aktivitas antiestrogenik diamati dalam uji pengikatan ER
kompetitif dengan adanya E2.20 Meskipun BPSIP secara struktural
terkait dengan BPS, tidak ada efek yang diamati pada konsentrasi E2
atau T bebas dalam sel H295R.21
Dalam penelitian ini, potensi gangguan endokrin BPSIP
diselidiki dengan hipotesis bahwa hal itu merusak
reproduksi dan biomarker molekuler dari sumbu HPG pada
ikan zebra. Temuan penelitian ini akan meningkatkan
pemahaman tentang gangguan endokrin reproduksi pada
ikan yang terpapar BPSIP.
BAHAN DAN METODE
Uji Kimia dan Analisis Kimia. BPSIP (CAS No.
95235-30-6, 98%) dibeli dari AK Scientific, Inc., (Union
City, CA, USA). Tidak ada pelarut yang digunakan dalam
air yang terkena ikan.
Selama pemaparan, media uji dikumpulkan dari setiap
akuarium. Konsentrasi BPSIP sebenarnya diukur mengikuti
metode yang dijelaskan sebelumnya untuk BPS17
dengan modifikasi kecil. BPSIP dianalisis menggunakan sistem
kromatografi cair kinerja tinggi (Agilent Technologies, Palo Alto,
CA, USA). Setelah mencampur sampel air (200 L) dan standar
internal (BPS, 20 L), BPSIP dipisahkan menggunakan kolom
Cadenza C18 (Imtakt Co., Kyoto, Jepang). NS

1507 DOI: 10.1021/acs.est.7b00498

Mengepung. Sci. teknologi.2018, 52, 1506−1513
Ilmu & Teknologi Lingkungan Artikel

Gambar 1. Efek pada penampilan reproduksi dan hormon steroid seks pada ikan zebra yang terpapar BPSIP selama 21 d. (A) rata-rata jumlah telur/tangki
pembibitan/hari, (B) konsentrasi 17β-estradiol (E2), (C) konsentrasi testosteron (T), dan (D) rasio E2/T. Untuk produksi telur, total 63 pengukuran per
kontrol atau perlakuan (3 repetisi× 21 d = 63) digunakan untuk perbandingan statistik. Hasilnya ditampilkan sebagai mean±standar deviasi (untuk analisis
hormon, n = 4 pada pria dan n = 6 pada wanita). Asterisk menunjukkan perbedaan yang signifikan antara kelompok eksposur dan kelompok kontrol (p <
0,05).

analit diidentifikasi dan diukur menggunakan sistem
spektrometri massa triple quadrupole API 4500 (Applied
Biosystems, Foster City, CA, USA). Kondisi ionisasi
elektrospray untuk analisis, pemulihan, presisi, dan
linearitas kurva kalibrasi dijelaskan dalam:Tabel S1−S3 dan
Gambar S1. Batas deteksi adalah 0,260 ng/mL. Konsentrasi
nominal dan terukur menunjukkan kesepakatan yang baik (
Tabel S4), dan oleh karena itu konsentrasi nominal
digunakan selama penelitian.
Paparan dan Pengambilan Sampel Ikan Zebra. Ikan zebra dewasa
dipelihara dalam tangki yang diisi dengan air keran yang
dideklorinasi pada suhu 26 ±2 °C di bawah 14:10 jam terang:
fotoperiode gelap. Pasangan ikan zebra diberi kontrol, 0,5, 5, atau
50 g/L BPSIP selama 21 hari. Konsentrasi uji dipilih berdasarkan
konsentrasi BPS yang dilaporkan di tempat lain17 dan percobaan
pendahuluan. Tiga puluh ikan (enam betina dan empat jantan/ikan
dengan tiga ulangan) dialokasikan untuk setiap kelompok paparan
atau kontrol. Jumlah telur yang dihasilkan dan mortalitasnya
dipantau setiap hari. Ikan diberi makan dengan udang air asin yang
baru menetas (Artemia nauplii) dan jentik nyamuk dua kali sehari.
Media pemaparan diganti dengan hati-hati dengan media yang baru
disiapkan lebih dari lima kali per minggu untuk mempertahankan
kualitas yang konstan selama periode pengujian. Media paparan
secara rutin dipantau untuk suhu, pH, oksigen terlarut, dan
konduktivitas.
Setelah paparan, semua ikan yang masih hidup di-eutanasia
dengan menempatkannya di penangas es. Total panjang, berat,
dan berat organ (gonad dan hati) dicatat, dan indeks
gonadosomatik (GSI) dan indeks hepatosomatik (HSI) dihitung.
Untuk pengukuran transkripsi hormon dan gen, empat laki-laki
dan enam perempuan dikumpulkan secara acak dari
setiap kelompok paparan. Jumlah sampel ikan diperoleh dengan
analisis kekuatan data yang diperoleh dari studi BPS sebelumnya17
dan percobaan pendahuluan.
Pengukuran Hormon. Tingkat E2 dan T diukur
menggunakan enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)
mengikuti metode yang dijelaskan sebelumnya.22 Secara
singkat, sampel darah yang dikumpulkan dari masing-
masing ikan disentrifugasi pada 2000 × G selama 15 menit,
dan 400 L air UltraPure ditambahkan. Sampel plasma yang
diencerkan kemudian diekstraksi dua kali dengan dietil eter.
Pelarut diuapkan, kemudian residu dilarutkan dalam buffer
ELISA. Kit ELISA (Kucing No. 582251 dan 582701 untuk E2
dan T, masing-masing) dibeli dari Cayman Chemical Co. (Ann
Arbor, MI, USA), dan hormon steroid seks diukur mengikuti
instruksi pabrik.
Uji Reaksi Rantai Polimerase (PCR) Real-Time.Tingkat
transkripsi relatif dari gen terkait sumbu HPG ditentukan
menggunakan metode yang dijelaskan sebelumnya.22
Transkripsi sepuluh dan sembilan gen dalam sampel otak dan
gonad, masing-masing, dan dua gen rumah tangga (beta-aktin
[β-aktin]dan RNA ribosom 18s [18s rRNA]) diukur. Nama
lengkap gen dan sekuens primer ditunjukkan pada:Tabel 1.
MRNA diekstraksi dari setiap sampel jaringan menggunakan
RNeasy mini-kit (QIAGEN). Kualitas dan konsentrasi RNA
diverifikasi menggunakan spektrofotometer lempeng mikro
Epoch Take3 (BioTek Instruments Inc., Winooski, VT, USA).
Sampel RNA kemudian disintesis menjadi DNA komplementer
(cDNA) menggunakan kit Sintesis cDNA iScript (BIORAD,
Hercules, CA, USA). Untuk PCR waktu-nyata kuantitatif, Sistem
PCR Waktu-Nyata Cepat ABI 7500 (Applied Biosystems, Foster
City, CA, USA) digunakan. Siklus ambang (CT)

1508 DOI: 10.1021/acs.est.7b00498

Mengepung. Sci. teknologi.2018, 52, 1506−1513
Ilmu & Teknologi Lingkungan Artikel

nilai untuk setiap gen target dinormalisasi ke tingkat gen

endogen yang sesuai (β-bertindak dan 18s rRNA) menggunakan
ΔΔCT metode.

Analisis statistik. Data dianalisis menggunakan analisis

varians satu arah (ANOVA) untuk mengetahui perbedaan
antara kelompok kontrol dan perlakuan. Analisis korelasi
Spearman dilakukan untuk mengetahui korelasi antara 19
transkrip gen pada sumbu HPG. Analisis komponen utama
(PCA) dilakukan untuk menentukan komponen utama (PC)
dari satu set transkrip gen. Untuk mengevaluasi korelasi
antara transkripsi gen dan produksi hormon, dua PC
pertama (PC1 dan PC2) digunakan dalam analisis regresi.
Untuk semua hasil statistik,p < 0,05 dianggap signifikan.
Analisis statistik dilakukan dengan menggunakan paket
statistik IBM untuk ilmu sosial (SPSS) versi 19 (IBM Corp.,
New York, NY, USA) dan program perangkat lunak analisis
statistik (SAS) (versi 9.2, SAS Institute, Cary, NC, AMERIKA
SERIKAT).

■ HASIL
Kinerja Reproduksi dan Tingkat Hormon. Rata-rata jumlah
telur tidak berubah secara signifikan bahkan pada
konsentrasi percobaan tertinggi 50 g/L BPSIP (Gambar 1A).
Pada ikan jantan, konsentrasi plasma E2 dan T berkurang
secara signifikan setelah terpapar 50 dan≥5 g/L BPSIP,
masing-masing (Gambar 1B−C). Pada ikan betina,
konsentrasi plasma E2 dan T meningkat secara signifikan
pada 50 g/L BPSIP (Gambar 1B−C). Rasio E2/T meningkat
secara signifikan setelah pengobatan dengan≥5 g/L BPSIP
pada ikan jantan, sedangkan pada ikan betina, rasio E2/T
menurun secara signifikan pada 50 g/L BPSIP (Gambar 1D).
Perubahan Berat Jaringan Relatif. Efek BPSIP pada GSI
dan HSI ikan zebra dewasa dirangkum dalam: Gambar 2.
Pada ikan jantan, GSI dan HSI menurun secara signifikan
setelah terpapar≥5 dan ≥0,5 g/L BPSIP, masing-masing.
Perubahan Transkripsi Gen. Transkripsi gen terkait sumbu
HPG dipengaruhi oleh paparan BPSIP (Gambar 3). Pada laki-laki,
transkrip darigonadotropin-releasing hormone 2 (gnrh2),
reseptor gnrh 2 (gnrhr2), gnrhr4, dan erαgen di otak secara
signifikan diatur oleh paparan BPSIP (Gambar 3A). Transkrip
darihormon perangsang folikel beta (fshβ) dan sitokrom P450
aromatase b (cyp19b) di otak (Gambar 3A), dan reseptor fsh
(fshr), cyp17, 17β- hydroxysteroid dehydrogenase (17βhsd), dan
sip19a gen dalam testis (Gambar 3B) secara signifikan diatur ke
bawah pada ikan zebra jantan. Paparan BPSIP juga meningkat
secara signifikangnrh2, gnrhr2, gnrhr4, fsh, cyp19b, erα, dan
er2β di otak (Gambar 3C), dan sip17 dan sip19a dalam ovarium (
Gambar 3D) pada ikan betina.
Hubungan antara transkripsi gen dan hormon steroid seks
pada ikan zebra diselidiki. PCA digunakan untuk menutupi
sejumlah gen yang berpotensi berkorelasi (Tabel S5) untuk
faktor yang lebih sedikit. PC1 dan PC2 masing-masing
menjelaskan 59% dan 57% dari total variasi ikan jantan dan
betina (Tabel S6). Pada ikan jantan, konsentrasi T (β = 0,273,p <
0,01) dan E2(β = 0,267, p < 0,01) secara signifikan berkorelasi
dengan PC1(gnrh2, gnrhr2, gnrhr4, fsh, erα, fshr, cyp17,
17βhsd, dansip19a). Pada wanita, PC1 (gnrh2, gnrhr2, cyp19b,
erα, er2β, cyp17, dan sip19a) berkorelasi signifikan dengan T (β
= 0,240, p < 0,01).
Gambar 2. Efek pada indeks somatik ikan zebra yang terpapar BPSIP
selama 21 d. Indeks gonadosomatik = berat gonad/berat badan×100,
indeks hepatosomatik = berat hati/berat badan ×100. Nilainya berarti ±
standar deviasi. Asterisk menunjukkan perbedaan yang signifikan antara
kelompok eksposur dan kelompok kontrol (p < 0,05).
■ DISKUSI
Hasil penelitian kami menunjukkan bahwa BPSIP mengubah
bobot organ relatif, kadar hormon seks, dan transkripsi gen
yang diatur oleh sumbu HPG pada ikan zebra. Seperti yang
diharapkan, efek pengganggu endokrin BPSIP seperti
estrogenisitas dan antiandrogenisitas, serupa dengan efek
BPS. Misalnya, estrogenik (peningkatan rasio E2/T) dan
antiandrogenik (penurunan regulasi17βhsd dan sip17gen
dan penurunan konsentrasi T) karakteristik diamati pada
ikan jantan yang terpapar BPS17 atau BPSIP. Namun, BPSIP
kurang poten dalam gangguan keseimbangan hormonal
dan transkripsi gen dibandingkan BPS atau BPA. Secara
khusus, konsentrasi efektif terendah yang diamati berada di
kisaran 0,5−1 g/L BPS17,18 dan 0,228 g/L BPA,23 sedangkan
sekitar 5 g/L untuk BPSIP.
Hormon steroid seks (T dan E2) dan keseimbangannya
memainkan peran penting dalam maskulinisasi atau feminisasi ikan.
24 Peningkatan signifikan dalam rasio E2/T setelah paparan BPSIP
menunjukkan bahwa keseimbangan hormon steroid seks pada ikan
zebra jantan terganggu. Menariknya, laki-laki lebih sensitif
dibandingkan perempuan terhadap efek samping BPSIP; efek
samping yang lebih besar pada tingkat hormonal diamati pada ikan
zebra jantan. Laki-laki juga lebih sensitif terhadap paparan BPS.17,18
GSI adalah indikator umum paparan kontaminan lingkungan,
dan secara luas digunakan sebagai biomarker tidak spesifik
untuk menyelidiki efek bahan kimia pengganggu endokrin
selain penentuan biomarker lain yang lebih spesifik.25 Dalam
penelitian terbaru pada ikan zebra, nilai GSI berkurang secara
signifikan setelah paparan BPS 21 hari.17
Sebelumnya, telah didokumentasikan bahwa bahan kimia estrogenik menyebabkan

1509 DOI: 10.1021/acs.est.7b00498

Mengepung. Sci. teknologi.2018, 52, 1506−1513
Ilmu & Teknologi Lingkungan Artikel

Gambar 3. Respon transkripsi gen pada ikan zebra yang terpapar BPSIP selama 21 hari. Tanggapan dalam (A) otak laki-laki, (B) gonad laki-laki, (C) otak perempuan,
dan (D) gonad perempuan diringkas. Nilainya berarti± simpangan baku (n = 4 pada pria dan n = 6 pada wanita). Asterisk menunjukkan perbedaan yang signifikan
antara kelompok eksposur dan kelompok kontrol (p < 0,05).

perubahan GSI ikan zebra dengan mengubah jumlah dan ukuran sel
germinal.18,26,27 Pengamatan kami terhadap penurunan berat gonad yang
signifikan pada ikan yang terpapar BPSIP menunjukkan bahwa
kimia memiliki potensi untuk menginduksi recrudescence gonad.
Pengukuran transkrip gen pada sumbu HPG memiliki
sering digunakan sebagai biomarker fungsional hormonal
perubahan. Pengamatan kami terhadap penurunan konsentrasi E2
dan T yang signifikan didukung oleh penurunan regulasicyp17,
17βhsd, dan sip19 gen pada ikan zebra jantan yang terpapar BPSIP.
Pada ikan betina, peningkatan konsentrasi E2 dan T yang signifikan
disertai dengan peningkatan regulasi yang signifikan darisip17 dan
sip19agen. Cyp17 bertanggung jawab untuk konversi progesteron

1510 DOI: 10.1021/acs.est.7b00498

Mengepung. Sci. teknologi.2018, 52, 1506−1513
Ilmu & Teknologi Lingkungan
Gambar 4. Karakteristik struktural bisphenol A, bisphenol S, dan bisphenol SIP yang mungkin memiliki aktivitas mengganggu endokrin.
untuk androstenedion,28 dan 17βhsd adalah enzim utama yang
mengkatalisis reduksi androstenedion menjadi testosteron.29
Cyp19 terlibat dalam langkah terakhir dari konversi T ke E2.30
Sementara gen yang terlibat dalam pengaturan jalur steroidogenik
tidak ditranskripsi pada tingkat yang sama, tingkat protein atau
aktivitas enzim umumnya berkorelasi baik dengan tingkat mRNA
mereka.31 Oleh karena itu, perubahan signifikan dalam cyp17,
17βhsd, dan sip19 kadar transkrip dapat mempengaruhi proses
steroidogenik dan mengubah kadar hormon seks pada ikan zebra
yang terpapar BPSIP.
GnRH memainkan peran penting dalam mengatur reproduksi
melalui sumbu HPG dan mensintesis hormon gonadotropin pada
ikan zebra.17 Up-regulasi gnrh2, gnrhr2, dan gnrhr4gen pada ikan
zebra jantan dapat dijelaskan dengan dua hipotesis. Yang pertama
menunjukkan bahwa tindakan umpan balik negatif di hipotalamus
mengkompensasi penurunan produksi E2, sedangkan yang kedua
mengusulkan tindakan langsung BPSIP pada produksi GnRHs.
Transkripsi yang lebih besar darignrh2, gnrhr2, dan gnrhr4 gen
pada ikan zebra betina menunjukkan bahwa BPSIP dapat mengatur
kadar GnRH, yang selanjutnya dapat mempengaruhi sekresi
hormon gonadotropin.
FSH dan luteinizing hormone (LH) masing-masing bekerja dengan
mengikat FSHR dan LHR, untuk menginduksi gametogenesis.32,33 Sebuah
penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa BPA mengurangi
konsentrasi serum LH dan produksi sperma, menyebabkan keadaan
hipogonadisme hipogonadotropik pada tikus.34 Selain itu, kadar FSH dan
T serum pada tikus jantan yang terpapar BPA lebih rendah daripada tikus
kontrol, dan jumlah sel germinal apoptosis meningkat secara signifikan
pada tikus yang terpapar BPA.35
Dalam penelitian kami, regulasi naik atau turun yang signifikan dari
fshβ dan lhβgen di otak dan fshr dan lhr gen dalam gonad ikan
zebra yang terpapar BPSIP menunjukkan kemungkinan efek pada
gametogenesis.
Hubungan antara konsentrasi hormon steroid seks dan
transkripsi gen pada ikan yang terpapar BPSIP dievaluasi. Kelompok
gen yang membentuk PC1 dan PC2 berbeda antara ikan jantan dan
betina. Kontributor utama untuk PC1 (gnrh2, gnrhr2, gnrhr4, fsh,
erα, fshr, cyp17, 17βhsd,dan sip19a) berkorelasi dengan konsentrasi
E2 dan T pada laki-laki, sedangkan gen utama yang terdiri dari PC1 (
gnrh2, gnrhr2, cyp19b, erα, er2β, cyp17, dan sip19a) berkorelasi
dengan konsentrasi T pada ikan betina. Gen spesifik ini dapat
menjadi biomarker molekuler potensial untuk menyelidiki efek
ketergantungan jenis kelamin dari BPSIP, dan ukuran sampel yang
lebih besar daripada
1511
Artikel
yang digunakan dalam penelitian ini akan meningkatkan
keandalan hasil ini menunjukkan hubungan.
Persamaan dan perbedaan toksisitas BPS dan BPSIP dapat
dijelaskan oleh struktur kimianya (Gambar 4). Penelitian
sebelumnya telah menunjukkan bahwa gugus hidroksil fenolik
adalah komponen struktural utama yang bertanggung jawab
atas aktivitas estrogenik dan antiandrogenik analog bisfenol.14,
36 Selain itu, gugus hidrofobik dari bagian propana dan gugus 4-
hidroksil pada cincin A-fenil disarankan sebagai faktor pengatur
untuk aktivitas ini.14,36 Misalnya, aktivitas estrogenik dan
antiandrogenik BPS telah dijelaskan dengan adanya gugus para
hidroksil pada cincin fenol.36 Salah satu penjelasan untuk
toksisitas diferensial BPS dan BPSIP dapat menjadi tingkat
isopropil eter di ujung cincin fenolik di BPSIP.
BPSIP terbukti menjadi zat antiestrogenik aktif dalam uji
pengikatan ER kompetitif.20 Namun, efek BPSIP pada
steroidogenesis masih belum jelas. BPSIP tidak menunjukkan
efek pada konsentrasi E2 atau T bebas dalam sel H295R.21
Dalam penelitian ini, paparan BPSIP dikaitkan dengan
perubahan hormonal (E2 dan T) dan perubahan transkripsi
gen pada sumbu HPG ikan zebra. Data ini menunjukkan
bahwa efek paparan BPSIP pada kadar hormon steroid seks
berbeda antara sistem in vitro dan in vivo. Produksi hormon
steroid merupakan proses kompleks yang melibatkan
banyak faktor regulasi. Oleh karena itu, pengukuran
hormon steroid lainnya akan meningkatkan pemahaman
tentang efek holistik pada steroidogenesis37 dan perbedaan
antara sistem in vitro dan in vivo.
BPSIP dan BPS saat ini tidak diatur dan digunakan tanpa batasan.
Namun, BPSIP menunjukkan efek seperti BPA (estrogenik,
antiandrogenisitas, dan efek yang lebih besar pada fungsi
reproduksi pria daripada pada reproduksi wanita) karena kedua
senyawa tersebut memiliki struktur kimia yang serupa. Hasil
menunjukkan bahwa BPSIP tampaknya memiliki efek yang lebih
mendalam pada tingkat T daripada pada tingkat E2 pada laki-laki
harus dipertimbangkan dengan hati-hati, karena efek serupa
diamati pada tikus yang terpapar BPA.34 Baru-baru ini, dilaporkan
bahwa tingkat rendah BPA dan BPS yang relevan dengan
lingkungan menyebabkan efek serupa pada sistem neuroendokrin
pada ikan zebra.38 Beberapa penelitian telah menunjukkan bahwa
paparan BPS mengubah perilaku ibu tikus,39 serta spermatogenesis
pada tikus jantan.40 Jika tren saat ini berlanjut, produksi dan
pelepasan alternatif BPA ke lingkungan dapat meningkat. Karena
DOI: 10.1021/acs.est.7b00498
Mengepung. Sci. teknologi.2018, 52, 1506−1513
Ilmu & Teknologi Lingkungan
BPSIP kemungkinan bertahan lebih lama di lingkungan (log K
= 3,36) dari BPS (log Kaduh = 1,65 atau BPA (log Kaduh = 3.32),
aduh
konsekuensi toksikologi dari keberadaannya di ekosistem
■
harus mendapat perhatian lebih.
S KONTEN TERKAIT
*S informasi pendukung
Informasi Pendukung tersedia gratis diSitus web
Publikasi ACS di DOI: 10.1021/acs.est.7b00498.
Informasi detail tentang kondisi analitik
menggunakan LC-MS/MS, parameter untuk analisis
kimia dan batas deteksi metode, pemulihan dan
presisi, linieritas kurva kalibrasi, hasil konsentrasi
nominal dan terukur, koefisien korelasi spearman
antara transkripsi gen di sepanjang sumbu HPG ,
dan analisis komponen utama (PDF)
■
INFORMASI PENULIS
Penulis yang sesuai
* Telp: 82-31-8020-2747. Faks: 82-31-8020-2886. Surel:
kyungheeji@yongin.ac.kr.
ORCID
Kyunghee Ji: 0000-001-8123-7445
Catatan
■
dia penulis menyatakan tidak ada kepentingan keuangan bersaing.
UCAPAN TERIMA KASIH
T zebra (Danio rerio) untuk bisphenol-S merusak potensi reproduksi
Studi ini didukung oleh National Research Foundation of
orea (NRF; Proyek no. 2015R1D1A1A01056628).
■
K REFERENSI
(1) Richter, CA; Birnbaum, LS; Farabollini, F.; Newbold, RR; Rubin,
BS; Talsness, CE; Vandenbergh, JG; Walser-Kuntz, DR; vom Saal, FSin
vivo efek bisphenol a dalam studi hewan pengerat laboratorium.
Reproduksi. racun.2007, 24 (2), 199−224.
(2) Huang, YQ; Wong, CK; Zheng, JS; Bouwman, H.; Barra, R.;
Wahlstrom̈, B.; Neretin, L.; Wong, MH Bisphenol A (BPA) di Cina:
tinjauan sumber, tingkat lingkungan, dan potensi dampak
kesehatan manusia.Mengepung. Int.2012, 42, 91−99.
(3) Rochester, JR Bisphenol a dan kesehatan manusia: tinjauan
literatur. Reproduksi. racun.2013, 42, 132−155.
(4) Eladak, S.; Grisin, T.; Moison, D.; Guerquin, MJ; N'Tumba-Byn, T.;
Pozzi-Gaudin, S.; Benachi, A.; Livera, G.; Rouiller-Fabre, V.; Habert, R.
Sebuah bab baru dalam cerita bisphenol A: bisphenol S dan bisphenol F
bukanlah alternatif yang aman untuk senyawa ini.Subur. steril.2015, 103 (
1), 11−21.
(5) ECHA. Lampiran XV Laporan Pembatasan, Usulan pembatasan.
Nama Zat: 4.4-isopropildenadifenol (bisfenol A; BPA), 2014. https://
echa.europa.eu/documents/10162/c6a8003c-81f3-4df6-
b7e8-15a3a36baf76 (diakses Januari 2017).
(6) Badan Perlindungan Lingkungan AS (EPA). Bisphenol A
Alternatif dalam Kertas Termal. Laporan Akhir, Januari 2014.http://
www.epa.gov/sites/production/files/2015-08/documents/bpa_final.
pdf(diakses Juli 2016).
(7) Liao, C.; Kannan, K. Sebuah survei alkilfenol, bisfenol, dan triclosan
dalam produk perawatan pribadi dari Cina dan Amerika Serikat.
Lengkungan. Mengepung. Konta. racun.2014, 67 (1), 50−59.
(8) Liao, C.; Liu, F.; Kannan, K. Bisphenol S, Sebuah analog bisphenol
baru, dalam produk kertas dan uang kertas dan hubungannya dengan
residu bisphenol A.Mengepung. Sci. teknologi.2012, 46 (12), 6515−6522.
(9) Thayer, KA; Taylor, KW; Garantziotis, S.; Schurman, SH;
Berciuman, GE; Berburu, D.; Herbert, B.; Gereja, R.; Jankowich, R.;
Churchwell, MI; Scheri, RC; Birnbaum, LS; Bucher, JR Bisphenol A,
bisphenol S, dan 4-hydroxyphenyl 4-isoprooxyphenyl-
1512
Artikel
sulfon (BPSIP) dalam urin dan darah kasir. Mengepung. Perspektif
Kesehatan.2016, 124 (4), 437−444.
(10) Yang, Y.; Lu, L.; Zhang, J.; Yang, Y.; Wu, Y.; Shao, B. Penentuan
simultan tujuh bisfenol dalam air lingkungan dan sampel padat
dengan kromatografi cair-elektrospray spektrometri massa tandem.
J. Kromatografi A 2014, 1328, 26−34.
(11) Goldinger, DM; Demierre, AL; Zoller, O.; Rupp, H.;
Reinhard, H.; Magnin, R.; Becker, TW; Bourqui-Pittet, M. Aktivitas
endokrin alternatif BPA ditemukan di kertas termal di Swiss.
Regulasi racun. farmasi.2015, 71 (3), 453−462.
(12) Rochester, JR; Bolden, AL Bisphenol S dan F: tinjauan sistematis
dan perbandingan aktivitas hormonal pengganti bisphenol A.
Mengepung. Perspektif Kesehatan.2015, 123 (7), 643−650.
(13) Grignard, E.; Lapenna, S.; Bremer, S. Aktivitas transkripsi
estrogenik yang lemah dari bisphenol A dan bisphenol S.racun. In
Vitro2012, 26 (5), 727−731.
(14) Kitamura, S.; Suzuki, T.; Sanoh, S.; Kohta, R.; Jinno, N.;
Sugihara, K.; Yoshihara, S.; Fujimoto, N.; Watanabe, H.; Ohta, S.
Studi perbandingan aktivitas gangguan endokrin dari bisphenol A
dan 19 senyawa terkait. racun. Sci.2005, 84 (2), 249−259.
(15) Chen, SAYA; Ike, M.; Fujita, M. Toksisitas akut, mutagenisitas,
dan estrogenisitas bisphenol-A dan bisphenol lainnya.Mengepung.
racun.2002, 17 (1), 80−86.
(16) Tiser, T.; Krel, A.; Gerzělj, U.; Erjavec, B.; Dolenc, MS; Pintar, A.
Identifikasi bahaya dan karakterisasi risiko bisfenol A, F, dan AF
terhadap organisme akuatik.Mengepung. polusi.2016, 212, 472−
479.
(17) Ji, K.; Hong, S.; Kho, Y.; Choi, K. Efek paparan bisphenol S
pada fungsi endokrin dan reproduksi ikan zebra.Mengepung.
Sci. teknologi.2013, 47 (15), 8793−8800.
(18) Naderi, M.; Wong, SAYA; Gholami, F. Paparan perkembangan ikan
berikutnya dan keseimbangan hormonal pada orang dewasa. air. racun.
2014, 148, 195−203.
(19) Terasaki, M.; Shiraishi, F.; Fukazawa, H.; Makino, M.
Kemunculan dan estrogenisitas fenolat dalam air proses daur ulang
kertas: polutan yang berasal dari kertas termal dalam kertas bekas.
Mengepung. racun. Kimia2007, 26 (11), 2356−2366.
(20) Kuruto-Niwa, R.; Nozawa, R.; Miyakoshi, T.; Shiozawa, T.;
Terao, Y. Aktivitas estrogenik alkilfenol, bisfenol S, dan turunan
terklorinasinya menggunakan sistem ekspresi GFP.Mengepung.
racun. farmasi.2005, 19 (1), 121−130.
(21) Goldinger, DM; Demierre, AL; Zoller, O.; Rupp, H.;
Reinhard, H.; Magnin, R.; Becker, TW; Bourqui-Pittet, M. Aktivitas
endokrin alternatif BPA ditemukan di kertas termal di Swiss.
Regulasi racun. farmasi.2015, 71, 453−462.
(22) Kwon, B.; Shin, H.; Bulan, HB; Ji, K.; Kim, KT Efek paparan
tris(2-butoxyethyl) fosfat pada sistem endokrin dan reproduksi
ikan zebra (Danio rerio).Mengepung. polusi.2016, 214,568−574.
(23) Chen, J.; Xiao, Y.; Gai, Z.; Li, R.; Zhu, Z.; Bai, C.; Tanguay, R.
L.; Xu, X.; Huang, C.; Dong, Q. Toksisitas reproduktif dari paparan
bisphenol A tingkat rendah dalam uji ikan zebra dua generasi: bukti
efek spesifik pria.air. racun.2015, 169, 204−214.
(24) Pradhan, A.; Olsson, PE Perilaku seksual ikan zebra: peran hormon
steroid seks dan prostaglandin.Perilaku Fungsi Otak.2015, 11, 23.
(25) Hutchinson, TH; Pergelangan Kaki, GT; Segner, H.; Tyler, CR Penyaringan
dan pengujian gangguan endokrin pada ikan biomarker sebagai "rambu lalu
lintas", bukan "lampu lalu lintas", dalam penilaian risiko.Mengepung.
Perspektif Kesehatan.2006, 114 (1), 106−114.
(26) Sabuk Van den, K.; Verheyen, R.; Witters, H. Efek reproduksi
ethynylestradiol dan 4t-octylphenol pada ikan zebra (Danio rerio).
Lengkungan. Mengepung. Konta. racun.2001, 41 (4), 458−467.
(27) Yang, Valas; Xu, Y.; Hui, Y. Efek reproduksi dari paparan prenatal
terhadap nonilfenol pada ikan zebra (Danio rerio). Komp. Biokimia.
Physiol., Bagian C: Toksikol. farmasi.2006, 142 (1−2), 77−84.
(28) Hinfray, N.; Baudiffier, D.; Leal, MC; Porcher, JM; Aït-Aïssa,
S.; Le Gac, F.; Schulz, RW; Brion, F. Karakterisasi ekspresi testis
dari P450 17α-hidroksilase, 17,20-liase pada ikan zebra dan
DOI: 10.1021/acs.est.7b00498
Mengepung. Sci. teknologi.2018, 52, 1506−1513
Ilmu & Teknologi Lingkungan Artikel

gangguan oleh fungisida farmasi clotrimazole. Jenderal Komp.

Endokrinol.2011, 174 (3), 309−317.
(29) Mindnich, R.; Haller, F.; Halbach, F.; Moeller, G.; Hrabéde
Angelis, M.; Adamski, J. Metabolisme androgen melalui 17beta-
hidroksisteroid dehidrogenase tipe 3 pada vertebrata mamalia dan
non-mamalia: perbandingan enzim manusia dan ikan zebra.J. Mol.
Endokrinol.2005, 35 (2), 305−316.
(30) Kalivretaki, E.; Eggen, R.; Neuhaus, S.; Alberti, M.; Kausch, U.;
Segner, H. Aromatase pada ikan zebra: target potensial untuk bahan
kimia pengganggu endokrin.Lingkungan Mar. Res.2006, 62, S187−S190.
(31) Trant, JM; Gavasso, S.; Ackers, J.; Chung, SM; Tempat, AR
Ekspresi perkembangan gen sitokrom P450 aromatase (CYP19a
dan CYP19b) pada benih ikan zebra (Danio rerio). J. Eks. Zool.
2001, 290, 475−483.
(32) Schulz, RW; de Franca̧, LR; Lareyre, J.; LeGac, F.; Chiarini-Garcia,
H.; Nobrega, RH; Miura, T. Spermatogenesis pada ikan.Jenderal
Komp. Endokrinol.2010, 165 (3), 390−411.
(33) Ohta, T.; Miyake, H.; Miura, C.; Kamei, H.; Aida, K.; Miura, T. Follicle-
stimulating hormone menginduksi spermatogenesis yang dimediasi oleh
produksi androgen pada belut Jepang.Biol. Reproduksi.2007, 77 (6), 970− 977.

(34) Wisniewski, P.; Romano, RM; Kizys, MML; Oliveira, KC; Kasamatsu,
T.; Giannocco, G.; Chiamolera, MI; Dias-da-Silva, MR; Romano, MA
Paparan orang dewasa terhadap bisphenol A (BPA) pada tikus Wistar
mengurangi kualitas sperma dengan terganggunya aksis hipotalamus-
hipofisis testis.Toksikologi 2015, 329, 1−9.
(35) Jin, P.; Wang, X.; Chang, F.; Bai, Y.; Li, Y.; Zhou, R.; Chen, L. Bisphenol
A dosis rendah merusak spermatogenesis dengan menekan produksi
hormon reproduksi dan mempromosikan apoptosis sel germinal pada
tikus dewasa.J. Biomed Res. 2013, 27 (2), 135−144.
(36) Ji, K.; Choi, K. Potensi gangguan endokrin dari alternatif
bisphenol A apakah alternatif bisphenol A aman dari gangguan
endokrin?Hangug Hwangyeong Bogeon Haghoeji 2013, 39 (1), 1−18.
(37) Ma, Y.; Han, J.; Gu, Y.; Lam, PKS; Wu, RSS; Giesy, JP;
Zhang, X.; Zhou, B. Gangguan fungsi endokrin in vitro
berbasis sel H295R dan in vivo assay pada ikan zebra oleh
2,4- diklorofenol.air. racun.2012, 106−107, 173−181.
(38) Qiu, W.; Zhao, Y.; Yang, M.; Farajzadeh, M.; Pan, C.; Wayne, N
L. Tindakan bisphenol A dan bisphenol S pada sistem
neuroendokrin reproduksi selama perkembangan awal di ikan
zebra.Endokrinologi 2016, 157 (2), 636−647.
(39) Catanese, MC; Vandenberg, LN Bisphenol S (BPS) mengubah
perilaku ibu dan otak pada tikus yang terpapar selama kehamilan/
menyusui dan anak perempuannya.Endokrinologi 2017, 158 (3), 516−530.
(40) Allah, H.; Jahan, S.; Ain, QU; Shaheen, G.; Ahsan, N. Pengaruh
paparan bisphenol S pada sistem reproduksi laki-laki tikus: studi
histologis dan biokimia.kemosfer 2016, 152, 383−391.

1513 DOI: 10.1021/acs.est.7b00498

Mengepung. Sci. teknologi.2018, 52, 1506−1513