MONSUR AGAR

Monsur agar (TTGA) adalah agar selektif dan diferensial yang dirancang
khusus untuk isolasi V. cholerae. Kerugian dari media ini adalah bahwa itu tidak
tersedia secara komersial, dan koloni V. cholerae dalam semalam di TTGA
cenderung tersedia lebih kecil (1 sampai 2 mm) dibandingkan yang dari agar
TCBS (Colwell et al, 1992).
Media Taurocholatetellurite-gelatin agar (TTGA), dibuat oleh Monsur dan
direkomendasikan oleh Organisasi Kesehatan Dunia (WHO), memiliki beberapa
keunggulan berbeda dibandingkan agar TCBS. TTGA relatif murah dan mudah
untuk disiapkan dan tidak ada masalah dalam tes serologis tindak lanjut.
Selanjutnya, oksidase aktivitas dapat ditentukan langsung dari piring (O’Brien dan
Colwell, 1985).
V. cholerae yang tumbuh dalam semalam pada agar TTGA tampak sebagai
koloni kecil yang buram dengan sedikit pusat gelap. Setelah 24 jam, pusat koloni
menjadi lebih gelap, dan akhirnya seluruh koloni menjadi berwarna abu-abu
"gunmetal". Selain pewarnaan gelap, yang disebabkan oleh reduksi telurit, ada
juga zona buram di sekitar koloni yang menyerupai lingkaran cahaya. Efek halo,
yang disebabkan oleh produksi enzim gelatinase, bisa diintensifkan dengan
pendinginan piring yang singkat (15 hingga 30 menit). Karena banyak anggota
genus Vibrio memiliki karakteristik yang mirip pada TTGA, tes tambahan
(antiserum dan / atau biokimia) diperlukan untuk menyaring isolat dari media ini
(Colwell et al. 1992).

Metode
Bahan untuk membuat media TTGA sendiri yaitu trypticase 10 gram,
sodium klorida 10 gram, sodium taurocholate 5 gram, sodium karbonat 1 gram,
gelatin (difco) 30 gram, agar-agar 15 gram, dan air terdistilasi 1 liter. Metode
yang dilakukan yaitu dengan mensterilkan media dengan autoklaf pada tekanan 20
lb selama 20 menit, dan menambahkan kalium telurit ke konsentrasi akhir 1:
200.000 sebelum dituangkan ke piring. Dengan memvariasikan konsentrasi
natrium karbonat dari 0,0 persen menjadi 0,2 persen dengan langkah 0,02 persen
diketahui bahwa hasil terbaik diperoleh dengan konsentrasi natrium karbonat
sekitar 0,08 hingga 0,1 persen yang memberi pH di sekitar 8,5. Setelah itu,
sekumpulan media rutin disiapkan dengan 0,1 persen sodium karbonat dan tidak
ada upaya sengaja dilakukan untuk menyesuaikan pH. Variasi konsentrasi kalium
telurit pada rentang 1 : 50.000 sampai 1 : 300.000 tidak memiliki perbedaan besar
dalam pertumbuhannya karakteristik V. cholerae. Namun, pada semua medium
rutin digunakan kalium telurit pada konsentrasi 1: 200.000. Semua kultur
diinkubasi pada suhu antara 31 ° - 33 ° C (Monsur, 1961).

Prinsip Uji Biokimia Monsur Agar

Prinsip dari metode ini yaitu didasari oleh pencernaan enzimatis kasein
menyediakan karbon, nitrogen, asam amino, vitamin dan mineral untuk
pertumbuhan organisme. Sodium klorida mempertahankan osmotik keseimbangan
medium. Sodium taurocholate menghambat bakteri Gram-positif yang
mengkontaminasi. Natrium karbonat berfungsi untuk membuat dan menjaga basa
kondisi di medium. Gelatin bertindak sebagai karbon tambahan dan sumber energi
yang menunjukkan aktivitas gelatinase. Agar-agar adalah zat penguat. Kalium
telurit ditambahkan untuk meningkatkan selektivitas dan sebagai agen diferensial.
Casein Peptone Plus dan gelatin menyediakan asam amino dan protein untuk
pertumbuhan mikroorganisme (Monsur, 1961).

Kegunaan
TTGA memiliki umur simpan yang relatif lama setelah persiapan, dan
pertumbuhan langsung dari medium mungkin digunakan untuk uji oksidase dan
aglutinasi. Potasium telurit, yang ditambahkan ke media untuk meningkatkan
selektivitas, juga bervariasi dalam kualitasnya, dan setiap lot harus dititrasi
tentukan konsentrasi optimal untuk digunakan dalam media TTGA (De et al,
1977).

DAFTAR PUSTAKA
Colwell RR., Hasan JAK., Huq A., et al. 1992. Development and evaluation of a
rapid, simple, sensitive, monoclonal antibody-based co-agglutination test
for direct detection of Vibrio cholerae 01. FEMS Microbiol Lett. Vol.
97:215-20.
De SP., Sen D., De PC., Ghosh A., Pal SC. 1977. A Simple Selective Medium for
Isolation of Vibrios with Particular Reference to Vibrio parahaemolyticus.
Indian J. Med Res. Vol. 66(3):398–399.

Monsur, K. A. 1961. A Highly Selective Gelatin-Taurocholate-Tellurite Medium

for The Isolation of Vibrio Cholerae. Transactions of The Royal Society of
Tropical Medicine and Hygiene. Vol. 5(5): 440-442.

O'Brien, M., Colwell, R. 1985. Modified Taurocholate-Tellurite-Gelatin Agar for

Improved Differentiation of Vibrio Species. Journal of Clinical
Microbiology. Vol. 22(6): 1011-1013.