Diterjemahkan dari bahasa "?" ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Akses Publik HHS

Naskah penulis
Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.
Naskah Penulis

Diterbitkan dalam bentuk akhir yang diedit sebagai:

Obat Ultrasound Biol. 2018 Februari ; 44(2): 434–446. doi:10.1016/j.ultrasmedbio.2017.09.021.

Pengaruh suhu pada distribusi ukuran, sifat cangkang, dan

stabilitas Definity®

Himanshu Shekhar1,Nathaniel J. Smith1,Jason L. Raymond2, danChristy K. Holland1,3

1Departemen Penyakit Dalam, Divisi Kesehatan dan Penyakit Kardiovaskular, University of
Cincinnati, Cincinnati, OH, USA

2Departemen Ilmu Teknik, Universitas Oxford, Oxford, Inggris

Naskah Penulis

3Departemen Teknik Biomedis, Universitas Cincinnati, Cincinnati, OH, AS

Abstrak
Karakterisasi fisik agen kontras ultrasound (UCA) membantu penggunaan yang aman dan efektif
dalam aplikasi diagnostik dan terapeutik. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menyelidiki
dampak suhu pada distribusi ukuran, sifat cangkang, dan stabilitas Definity®, UCA yang disetujui
FDA yang digunakan untuk kekeruhan ventrikel kiri. Penghitung Coulter dimodifikasi untuk
memungkinkan pengukuran ukuran partikel pada suhu fisiologis. Spektrum atenuasi akustik
broadband dan distribusi ukuran Definity®diukur pada suhu kamar (25 ° C) dan suhu fisiologis (37 °
C), dan digunakan untuk memperkirakan sifat cangkang viskoelastik agen pada kedua suhu.
Atenuasi dan distribusi ukuran diukur dari waktu ke waktu untuk menilai pengaruh suhu pada
Naskah Penulis

stabilitas temporal Definity®. Koefisien atenuasi Definity®pada 37 °C sebanyak 5 dB lebih tinggi dari
koefisien atenuasi yang diukur pada 25 °C. Namun, distribusi ukuran Definity®pada 25 ° C dan 37 °
C adalah serupa. Perkiraan kekakuan dan viskositas cangkang menurun dari 1,76 ± 0,18 N/m dan
0,21 × 106± 0,07 × 106kg/s pada 25 °C hingga 1,01 ± 0,07 N/m dan 0,04 × 106± 0,04 × 106kg/s pada
37 °C, masing-masing. Perbedaan tergantung ukuran dalam laju disolusi diamati dalam populasi
UCA baik pada 25 °C dan 37 °C. Selain itu, mendinginkan suspensi UCA yang diencerkan dari 37 °C
menjadi 25 °C mempercepat laju disolusi. Hasil ini menunjukkan bahwa meskipun suhu
mempengaruhi sifat shell Definity®dan dapat memengaruhi stabilitas Definity®, distribusi ukuran
zat ini tidak terpengaruh oleh kenaikan suhu dari 25 menjadi 37 °C.

Kata kunci
Naskah Penulis

agen kontras ultrasound; spektroskopi redaman akustik; gelembung mikro; suhu;

stabilitas; fosfolipid; definisi®

Penulis koresponden: Himanshu Shekhar, Ph.D., himanshu.shekhar@uc.edu , Telepon: 513.558.8990, Pusat Kardiovaskular
Universitas Cincinnati, Ruang 3933, 231 Albert Sabin Way, Cincinnati, OH 45267-0586, AS.
Penafian Penerbit:Ini adalah file PDF dari manuskrip yang belum diedit yang telah diterima untuk diterbitkan. Sebagai layanan kepada pelanggan
kami, kami menyediakan versi awal naskah ini. Naskah akan menjalani copyediting, typesetting, dan review dari bukti yang dihasilkan sebelum
diterbitkan dalam bentuk kutipan akhir. Harap dicatat bahwa selama proses produksi kesalahan dapat ditemukan yang dapat mempengaruhi konten,
dan semua penolakan hukum yang berlaku untuk jurnal tersebut.
 Shekhar dkk. Halaman 2

pengantar
Naskah Penulis

Agen kontras ultrasound (UCA) terdiri dari gelembung mikro dengan inti gas yang dienkapsulasi
oleh cangkang penstabil (Cosgrove 2006). UCA bercangkang fosfolipid seperti Definity®(Pencitraan
Medis Lantheus, Bellerica Utara, MA, AS) dan SonoVue®(Bracco, Monroe Township, NJ, USA)
digunakan secara klinis di Amerika Serikat dan Eropa, masing-masing (Claudon et al. 2013).
SonoVue baru-baru ini tersedia di AS dengan nama dagang Lumason®
(Bracco, Monroe Township, NJ, USA) Agen kontras ultrasound disetujui untuk kekeruhan
ventrikel kiri (LVO) dan pencitraan yang ditingkatkan kontras dari lesi hati fokal di Amerika
Serikat, dan untuk pencitraan LVO, hati, ginjal, pankreas, otak, dan perut di Eropa dan Asia
(Claudon et al. 2013). Penelitian terbaru tentang penggunaan diagnostik UCA telah
difokuskan pada pencitraan fungsional (Errico et al. 2015; Shelton et al. 2015), pencitraan
molekuler (Deshpande et al. 2010; Unnikrishnan dan Klibanov 2012), dan penginderaan
kuantitatif (Dave et al. 2012; Nakatsuka dkk. 2012). Lebih lanjut, aplikasi terapeutik yang
Naskah Penulis

dimediasi microbubble seperti sonothrombolysis (Bader et al. 2015; Lu et al. 2016; Shekhar et
al. 2016a), pembukaan sawar darah-otak (Hynynen et al. 2006; McDannold et al. 2008), dan
obat dan pengiriman gen (Bekeredjian et al. 2005; Kooiman et al.

Aplikasi UCA yang aman dan efektif dalam pencitraan dan terapi ultrasound memerlukan
karakterisasi yang akurat dari perilaku fisik dan akustik UCA (Mulvana et al. 2016). Studi
sebelumnya telah menunjukkan bahwa respons akustik dan stabilitas UCA dipengaruhi oleh
tekanan akustik (Shi et al. 1999; Yeh dan Su 2008), viskositas fluida (Helfield et al. 2016),
tekanan ambien (Forsberg et al. 2005). ; Kumar dan Sarkar 2015), pertukaran gas (Kabalnov
et al. 1998; Kanbar et al. 2017; Shekhar et al. 2014), distribusi ukuran (Gorce et al. 2000;
Shekhar et al. 2013), suhu (Guiot et al. 2006; Mulvana dkk. 2010), dan sifat cangkang
(Borden dkk. 2005; van Rooij dkk. 2015).
Naskah Penulis

Sejumlah penelitian telah mengevaluasi pengaruh suhu pada respon fisik dan akustik UCA.
Misalnya, struktur cangkang lipid UCA (Borden et al. 2004), dan distribusi ukuran (Helfield
et al. 2012) dapat dipengaruhi oleh suhu selama proses pembentukan gelembung. Suhu
cairan ambien juga dapat mempengaruhi stabilitas UCA. Menggunakan mikroskop optik
dan teknik analisis gambar, Mulvana dan rekan melaporkan bahwa SonoVue®lebih stabil
pada 20 °C daripada pada 40 °C (Mulvana et al. 2010).

Vos dkk. (2008) menyelidiki ansambel Definity®dan SonoVue®UCA menggunakan pencitraan kecepatan
tinggi pada 21 °C dan 37 °C. Para peneliti ini melaporkan penurunan ambang batas untuk aktivitas
microbubble, dan osilasi microbubble yang lebih kuat pada 37 °C relatif terhadap 21 °C. Mulvana dkk.
(2011) melakukan pencitraan kecepatan tinggi SonoVue®terkena ultrasound, dan mengamati ekskursi
radial yang lebih kuat, fragmentasi cangkang, dan pembentukan jet pada suhu tubuh daripada pada
Naskah Penulis

suhu kamar. Meral dkk. (2014) menyelidiki dampak suhu pada aktivitas kavitasi yang stabil dari UCA
bercangkang lipid. Peningkatan suhu dari 25 °C ke 40 °C dilaporkan meningkatkan hamburan
subharmonik relatif terhadap hamburan harmonik sebesar 10 dB.

Beberapa penelitian telah mendokumentasikan peningkatan redaman akustik UCA di fisiologis

melawansuhu kamar, baik pada diagnostik konvensional dan intravaskular

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 3

frekuensi ultrasound (Meral 2014; Mulvana dkk. 2010; Raymond dkk. 2014; Sun dkk. 2016).
Grup kami sebelumnya telah melaporkan pengukuran atenuasi broadband (2 MHz – 25
Naskah Penulis

MHz) dari UCA yang dikupas fosfolipid seperti Definity®, Penanda Mikro®(Bracco, Jenewa,
Swiss dan VisualSonics, Toronto, Kanada), dan liposom ekogenik (Raymond et al. 2014). Itu
menunjukkan bahwa redaman lebih tinggi pada 37 ° C daripada pada 25 ° C untuk setiap
UCA, menggarisbawahi pentingnya melakukan studi karakterisasi pada suhu fisiologis.
Namun, penelitian ini tidak fokus pada dampak suhu pada distribusi ukuran UCA dan sifat
cangkang dihitung menggunakan distribusi ukuran yang diukur pada 25 °C.

Meskipun pemahaman yang lebih baik tentang efek suhu pada UCA, mekanisme
bagaimana suhu mempengaruhi perilaku fisik dan akustik agen kontras ultrasound belum
dijelaskan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menilai dampak suhu pada ukuran, sifat
cangkang, dan stabilitas Definity®, yang mengandung gelembung octafluoropropane
Naskah Penulis

berukuran mikron dan submikron (Goertz et al. 2007) di dalam cangkang fosfolipid.
Kurangnya metode yang sesuai untuk pengukuran distribusi ukuran skala populasi pada
suhu fisiologis membuat sulit untuk menilai kontribusi distribusi ukuran terhadap
perubahan yang bergantung pada suhu dalam perilaku akustik UCA. Penginderaan
impedansi elektro, yang bergantung pada prinsip Coulter, adalah metode yang paling
banyak digunakan untuk mengukur konsentrasi dan distribusi ukuran UCA (Sennoga et al.
2012). Namun, instrumen Coulter yang tersedia secara komersial dirancang untuk
mengukur ukuran hanya pada suhu kamar. Baru-baru ini, sebuah teknik dilaporkan untuk
memodifikasi Coulter untuk pengukuran volume sel dari waktu ke waktu pada suhu
fisiologis (Bryan et al. 2012). Dalam studi ini, penghitung Coulter dimodifikasi untuk
memungkinkan pengukuran distribusi ukuran partikel dan UCA pada suhu tinggi dalam
kisaran fisiologis. Selanjutnya, koefisien atenuasi Definity®dinilai pada suhu fisiologis dan
Naskah Penulis

kamar, dan sifat cangkang agen dihitung pada kedua suhu. Dampak suhu pada perubahan
temporal dalam distribusi ukuran dan spektrum atenuasi Definity®juga dievaluasi.

Bahan dan metode

Penanganan dan persiapan agen

definisi®botol disimpan pada 3 ° C sebelum aktivasi. Setiap botol dibiarkan hangat sampai suhu
kamar sebelum aktivasi dengan mengaduk selama 45 detik menggunakan Vial-Mix (Lantheus
Medical Imaging) sesuai instruksi pabrik. definisi®partikel disuspensikan kembali dengan
membalik botol berulang kali selama 10 detik sebelum menarik agen. Jarum suntik kaca 100 μL
(Model # 100F-LL-GT, SGE Analytical science, Austin, TX, USA) yang dilengkapi dengan jarum ukuran
Naskah Penulis

22 digunakan untuk menarik agen dari tengah vial. Jarum ventilasi 22-gauge lainnya dihubungkan
ke kantong sampel gas tedlar (volume 0,5 liter, EcnoGrab, Zefon International Inc. Ocala, FL USA)
yang diisi dengan octafluoropropane untuk mengisi volume yang ditarik dengan gas
octafluoropropane. Protokol ini memastikan stabilitas Definity®dalam botol selama beberapa jam
tanpa perubahan terukur dalam distribusi ukuran dan konsentrasi (Raymond et al. 2014). Kecuali
dinyatakan lain, semua pengukuran dilakukan dalam waktu 6 jam setelah aktivasi botol, yaitu
dalam waktu 12 jam

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 4

jangka waktu yang direkomendasikan oleh pabrikan (Definity® [sisipan paket]. N. Billerica, MA, AS:
Lantheus Medical Imaging, Inc. 2013).
Naskah Penulis

Memodifikasi Penghitung Coulter untuk pengukuran distribusi ukuran yang dikontrol suhu
Penghitung Coulter (Multisizer 4, Beckman Coulter, Brea, CA, USA) telah dimodifikasi untuk
memungkinkan pengukuran pada 37 °C menggunakan sistem sirkulasi yang dibuat khusus dan
sistem pemanas yang diaktifkan dengan umpan balik suhu (Gambar 1). Gelas kaca 200 mL
digunakan sebagai tempat sampel untuk menangguhkan sampel Definity yang diencerkan®. Gelas
gelas 200 mL ditempatkan dalam ruang cetak 3-D yang dirancang menggunakan Autodesk
TinkerCAD (Autodesk Inc., San Rafael, CA, USA) (file stereolitografi terlampir sebagai suplemen).
Ruang cetak 3-D terdiri dari wadah 155 mm × 85 mm × 75 mm (panjang × lebar × tinggi) yang
dibuat dengan polilaktida suhu tinggi dengan ketebalan dinding 3 – 5 mm dan dirancang agar pas
dengan mulus pada tahap pengukuran dari penghitung Coulter. Ruangan itu memiliki port saluran
Naskah Penulis

masuk dan keluar air yang terhubung ke tabung lateks (0,5kandiameter). Sistem aliran berjaket air
loop tertutup digunakan untuk menghangatkan gelas kimia 200 mL di ruang cetak 3-D. Mandi
resirkulasi diisi dengan air reverse-osmosis nonkonduktif (NANOPure D4751, Barnstead
International, Dubuque, IA, USA) untuk melindungi instrumen dari kebisingan listrik bencana
seperti yang dijelaskan sebelumnya (Bryan et al. 2012). Sirkulasi air dipertahankan melalui pompa
diafragma yang digerakkan oleh udara (Model #166-200-46 BX, SHURflo, Costa Mesa, CA, USA)
yang disetel pada kira-kira satu langkah per detik. Outlet pompa udara terhubung ke tabung
tembaga melingkar (3 m) yang terendam dalam penangas air yang dikontrol suhu (Isotemp 2100,
Fisher Scientific, Hampton, NH, USA). Termometer digital (Model #HH506, Omega, Stamford, CT,
USA) yang dilengkapi dengan termokopel Tipe-T digunakan untuk memantau suhu di ruang
sampel selama pengukuran distribusi ukuran. Untuk menghindari gradien konduktivitas termal
dan listrik di seluruh zona aperture-sensing, baik ruang elektrolit dan gelas sampel diisi dengan
saline buffer fosfat (PBS, 0,01 M; Sigma Chemical, St. Louis, MO, USA) dan dipertahankan pada
Naskah Penulis

suhu yang sama. suhu. Ruang elektrolit penghitung Coulter dipanaskan menggunakan pita
pemanas laboratorium yang dikontrol suhu (24kanpanjang, Model #BIH051020L, BriskHeat,
Columbus, OH, USA) dioperasikan pada 8,3 watt per inci persegi. Ruang elektrolit ditempatkan
pada pelat pengaduk magnet (Model
#215, Arthur Thomas Co. Philadelphia, PA, USA) dan diaduk terus menerus untuk
menjaga keseragaman suhu dalam ruang elektrolit. Pengontrol proporsional-
integral-derivatif (PID) benchtop (BriskHeat #X2-120KT, Columbus, OH, USA) yang
dilengkapi dengan termokopel Tipe-K digunakan untuk mempertahankan suhu PBS
di ruang elektrolit dalam ± 0,2 °C dari suhu di ruang sampel. Pengaduk aksesori
yang dilengkapi dengan penghitung Coulter digunakan untuk mempertahankan
suspensi sampel yang homogen dalam gelas kimia 200 mL. Untuk memverifikasi
keakuratan teknik pada 37 °C, penghitung Coulter juga digunakan untuk mengukur
Naskah Penulis

distribusi ukuran dan konsentrasi campuran manik-manik ukuran lateks standar

dengan diameter 2 m dan 5 μm (Ukuran Coulter CC standar L2 dan L5, Beckman
Coulter, Brea, CA, USA) pada 25 °C dan 37 °C (Gambar 2(a)).

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 5

Pengukuran distribusi ukuran Definity®pada 25 °C dan 37 °C

Naskah Penulis

Distribusi ukuran Definity®diukur menggunakan penghitung Coulter yang dilengkapi dengan

bukaan 30 m. Untuk setiap pengukuran, Definity®diencerkan secara serial (1:10000) dalam 200
ml PBS jenuh udara (0,01 M) dalam gelas sampel. Pertama, solusi stok 1:10 dari Definity®
disiapkan dengan menambahkan 50 L Definity®ke dalam 450 L PBS pada suhu kamar. Selanjutnya,
150 L larutan stok ini ditambahkan ke 150 ml PBS yang dipertahankan pada suhu 25 °C atau 37 °C.
Selama setiap percobaan, 100 L sampel yang diencerkan diukur selama 30 detik. Histogram
densitas angka dengan 200 bin dengan spasi linier antara 0,6 m – 18 m dikalikan dengan faktor 5
untuk memberikan perbandingan yang konsisten dengan pengenceran yang digunakan untuk
pengukuran redaman yang dijelaskan di bagian berikutnya. Histogram pembobotan angka diubah
menjadi distribusi pembobotan volume untuk analisis dan interpretasi lebih lanjut. Hasil dari
setidaknya tiga pengukuran, masing-masing dari penarikan baru gelembung mikro dari Definity
yang diaktifkan®botol, dirata-rata. Rata-rata dan standar deviasi dari distribusi ukuran tertimbang
Naskah Penulis

jumlah dan tertimbang volume dilaporkan.

Pengukuran redaman akustik pita lebar pada 25 °C dan 37 °C

Koefisien atenuasi yang bergantung pada frekuensi diukur menggunakan spektroskopi atenuasi
transmisi-transmisi pada 25 ± 0,5 °C dan 37 ± 0,5 °C, seperti yang dijelaskan sebelumnya (Raymond et al.
2014). Untuk pengukuran pada kedua suhu, larutan stok diencerkan 1:10 dari Definity®diencerkan lebih
lanjut menjadi 1:2000 (v/v) dalam PBS jenuh udara (100 ± 1% saturasi oksigen) yang mengandung 0,5%
(b/v) bovine serum albumin (BSA) yang dipertahankan pada suhu 25 °C atau 37 °C. Pengukur oksigen
terlarut (Model DO6+, Instrumen Oakton, Vernon Hills, IL, USA) digunakan untuk mengukur saturasi
oksigen larutan BSA. Spektrum redaman Definity®dalam PBS dengan larutan BSA 0,5% sangat mirip
dengan spektrum redaman Definity®dalam darah utuh (Raymond et al. 2014). Sampel disuspensikan
dalam ruang persegi panjang yang memiliki jendela film polikarbonat transparan akustik (CLINIcell 25,
Naskah Penulis

Mabio, Tourcoing, Prancis). Reservoir, ruang sampel, dan transduser dipasang dalam tangki akrilik yang
diisi dengan air deionisasi yang dipertahankan pada suhu konstan menggunakan penangas air yang
bersirkulasi (Neslab EX, Newington, NH, USA). Dua transduser broadband (PI-20, Olympus NDT, Waltham,
MA, USA) digunakan untuk mengukur spektrum redaman. Frekuensi tengah pulsa yang digunakan untuk
pengukuran redaman adalah 15,7 MHz dan lebar penuh setengah bandwidth maksimumnya adalah 21
MHz (3,3 MHz – 24,3 MHz). Pengukuran redaman dilakukan pada rentang frekuensi 2 – 25 MHz, yang
mencakup rentang frekuensi yang digunakan dalam ultrasonografi diagnostik dan frekuensi yang lebih
rendah yang digunakan dalam ultrasonografi intravaskular. Eksperimen awal dilakukan dengan Definity®
untuk membandingkan spektrum redaman pada rentang tekanan keluaran (30 – 250 kPa), dan untuk
membandingkan pengukuran redaman pita sempit dan pita lebar pada rentang frekuensi (2 – 25 MHz)
(Gambar 2(b) dan (c)). Ditunjukkan pada gambar 2(b) adalah spektrum redaman yang diukur dengan
pulsa pita lebar dari 30 hingga 250 kPa menggunakan Definity®dengan pengenceran 1:2000. Pada
Naskah Penulis

Gambar 2(c), eksitasi pita sempit (semburan nada berjendela kosinus 30 siklus dengan tekanan negatif
puncak 30 kPa (± 12% ketidakpastian) menyapu 2 – 25 MHz untuk pengukuran redaman pita sempit.®
diencerkan menjadi 1:2000 untuk pengukuran ini. Perhatikan bahwa gambar 2(c) diperoleh dengan
menggunakan botol Definity®yang telah melewati periode penggunaan 12 jam yang direkomendasikan
setelah pemulihan. Botol baru Definity®tidak dikeluarkan karena tujuan kami hanya untuk
membandingkan redaman pita lebar dan pita sempit

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 6

pengukuran. Berdasarkan hasil eksperimen ini, semua eksperimen selanjutnya dilakukan

menggunakan spektroskopi atenuasi broadband, dan tekanan negatif puncak 30 kPa digunakan
Naskah Penulis

untuk menghindari efek atenuasi yang bergantung pada tekanan (Chatterjee et al. 2005; Xia et al.
2015).

Estimasi sifat cangkang viskoelastik dari Definity®pada 25 °C dan 37 °C

Sifat kulit viskoelastik dari Definity®diperkirakan menggunakan model akustik linier yang
dilaporkan oleh de Jong dan rekan (de Jong et al. 1992). Dalam model ini, shell UCA dicirikan
olehuntuk iniparameter elastisitas kulit (SP) dan gesekan (SF). Dalam rezim linier,
parameternya setara (Sp=2XdanSF= 16πXS) dengan yang digunakan dalam model
Marmottant (Marmottant et al. 2005). Dengan asumsi hamburan linier, dan mengabaikan
hamburan ganda untuk suspensi encer, parameter cangkang viskoelastik dihitung dengan
meminimalkan perbedaan jumlah kuadrat dalam kesalahan antara koefisien atenuasi yang
Naskah Penulis

diukur dan diperkirakan (Raymond et al. 2014). Nilai yang diukur dari kecepatan suara,
kepadatan, dan viskositas dinamis dari cairan yang dilaporkan sebelumnya (Raymond et al.
2014) digunakan dalam perhitungan ini. Koefisien determinasi (R2) dihitung untuk
menunjukkan kesesuaian antara koefisien atenuasi yang diukur dan yang diperkirakan. Nilai
parameter shell yang menghasilkan penggandaan fungsi kesalahan dipilih sebagai batas
untuk interval kepercayaan 95% (Hoff 2001).

Stabilitas Definisi®pada 25 °C dan 37 °C

Untuk menguji stabilitas Definity®, koefisien atenuasi diukur pada kedua suhu selama lebih dari
60 menit dengan interval 10 menit. Batang pengaduk magnet (panjang ~ 5 mm) ditempatkan di
dalam ruang sampel untuk menjaga UCA dalam suspensi selama pengukuran. Batang pengaduk
secara magnetis digabungkan menggunakan magnet cakram tanah jarang neodymium (0,38kan
Naskah Penulis

OD, 0,25kanID, 0,06kantebal, K&J Magnetics, Pipersville, PA, USA) terhubung ke ujung 3/8kan
batang poli vinil klorida dan diputar menggunakan motor DC (model 9 – 18V #273-256; Radio
Shack, Fort Worth, TX, USA). Magnet cakram menahan batang pengaduk dan berputar dengan
lancar (~200 – 600 rpm) di ruang sampel. Lokasi magnet piringan diatur relatif terhadap medan
akustik sedemikian rupa sehingga keberadaannya tidak mempengaruhi pengukuran redaman.
Pengadukan dihidupkan sebelum akuisisi pertama dan tetap menyala selama pengukuran.
Meskipun pengukuran dilakukan pada interval 10 menit, hasil ditampilkan pada interval 20 menit
dalam beberapa kasus untuk kejelasan visual.

Pengaruh transisi suhu pada stabilitas

Stabilitas Definity®dalam menanggapi perubahan suhu yang cepat dinilai untuk dua kondisi
Naskah Penulis

dengan mengukur redaman selama periode 60 menit. Untuk tes pertama, Definity®
diencerkan dalam PBS dengan 0,5% BSA (1:2000) ditahan pada 25 °C dan selanjutnya dimasukkan ke
dalam sistem pengukuran redaman yang dipertahankan pada 37 °C. Untuk tes kedua, Definity®
diencerkan dalam PBS (1:2000) dengan 0,5% BSA dipertahankan pada 37 °C dan kemudian dimasukkan
ke dalam sistem pengukuran redaman yang dipertahankan pada 25 °C. Kedua protokol menyebabkan
perubahan suhu pengencer 12 °C dalam waktu 100 detik. Spektrum atenuasi diukur pada interval 10
menit selama 60 menit untuk kedua protokol.

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 7

Transisi fase lipid dalam cangkang Definity®

Naskah Penulis

Perubahan tajam dalam respons akustik merupakan indikasi transisi fase fosfolipid
dalam cangkang UCA dari gel ke keadaan kristal cair (Guiot 2006). Untuk menguji suhu
transisi fase lipid di Definity®, pengukuran redaman dilakukan sebagai fungsi suhu.
Untuk tes ini, Definity®diencerkan dalam PBS dengan 0,5% BSA (1:2000) pada suhu 39
°C, 41 °C, dan 43 °C dan pengukuran redaman dilakukan.

Hasil
Perbedaan yang bergantung pada suhu dalam redaman dan distribusi ukuran

Koefisien atenuasi Definity®diukur dengan tekanan akustik yang berbeda ditunjukkan pada
Gambar 2 (b). Spektrum redaman berbeda kurang dari 5% ketika tekanan kurang dari 250
Naskah Penulis

kPa. Perbandingan antara spektrum redaman pita sempit dan pita lebar Definity®diukur
pada 37 °C ditunjukkan adalah Gambar 2(c). Dapat diamati bahwa spektrum redaman pita
sempit dan pita lebar serupa.

Koefisien atenuasi Definity®diukur pada 25 °C dan 37 °C ditunjukkan pada Gambar 3.

Koefisien redaman Definity®pada 37 °C adalah sebanyak 5 dB lebih tinggi dari pada 25 °C.
Perbedaan atenuasi tertinggi diamati pada 10 MHz, frekuensi resonansi Definity®(Faez dkk.
2011; Goertz dkk. 2007; Raymond dkk. 2014). Koefisien atenuasi yang diukur pada 25 °C
dan 37 °C memiliki bilah kesalahan yang tidak tumpang tindih untuk frekuensi antara 5,5
MHz – 13,5 MHz. Uji-t tidak berpasangan mengungkapkan bahwa perbedaan rata-rata
redaman Definity®pada 37 °C (13,1 ±1,1 dB/cm) dan 25 °C (11,1 ± 0,8 dB/cm) signifikan
secara statistik (p = 0,023).
Naskah Penulis

Gambar 4 menunjukkan (a) distribusi ukuran berbobot angka, dan (b) berbobot volume dari
Definity®pada suhu 25 °C dan 37 °C. Distribusi ukuran dan konsentrasi zat pada suhu kamar
dan suhu fisiologis berada dalam satu standar deviasi satu sama lain. Distribusi ukuran juga
diplot sebagai persentase angka, dinormalisasi ke jumlah total partikel yang diukur (Gambar
4(c)) dan persentase volume, dinormalisasi ke total volume partikel yang diukur (Gambar
4(d)). Tidak ada bukti peningkatan ukuran yang dimediasi suhu yang diamati.

Dampak suhu pada sifat cangkang

Gambar 5 mengilustrasikan model yang sesuai dengan koefisien atenuasi yang diukur pada suhu
kamar dan suhu fisiologis. Kesepakatan yang sangat baik diamati antara model dan koefisien
atenuasi yang diukur (R20.9). Parameter cangkang "paling sesuai" yang diperoleh dari model
Naskah Penulis

dilaporkan pada Tabel 1 bersama dengan perkiraan dari penelitian sebelumnya (Faez et al. 2011;
Goertz et al. 2007; Raymond et al. 2014). Kekakuan cangkang,SP, dan gesekan kulit, SF, menurun
dengan meningkatnya suhu dari 25 ° C menjadi 37 ° C.

Pengaruh suhu pada stabilitas

Gambar 6 menunjukkan spektrum redaman Definity®diukur selama 60 menit pada (a) 25 °C
dan (b) 37 °C. Koefisien atenuasi secara bertahap menurun selama durasi

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 8

pengukuran. Penurunan redaman pada rentang 2 MHz – 4 MHz serupa pada kedua temperatur.
Namun, penurunan redaman yang lebih cepat pada frekuensi tinggi (20 MHz – 25 MHz) terlihat
Naskah Penulis

jelas pada 37 °C. Tingkat rata-rata penurunan koefisien atenuasi lebih tinggi pada 37 °C daripada
pada 25 °C, sebagaimana dibuktikan oleh besarnya kemiringan garis regresi yang lebih besar
pada Gambar 6(c).

Distribusi ukuran tertimbang nomor dari Definity®diukur selama 60 menit pada suhu kamar dan
suhu fisiologis ditunjukkan pada Gambar 7 (a) dan (b), masing-masing. Distribusi ukuran
tertimbang nomor dari Definity®secara bertahap menurun selama periode pengukuran. Pada 37 °
C distribusi ukuran tertimbang jumlah menurun secara substansial untuk gelembung
submikrometer. Misalnya, konsentrasi gelembung mikro dalam wadah 0,65 m menurun 76% pada
37 °C, namun hanya sebesar 49% pada 25 °C selama 60 menit. Hasil ini sesuai dengan data yang
disajikan pada Gambar 6, dimana penurunan redaman tertinggi pada 37 °C terjadi pada rentang
15 MHz – 25 MHz. Distribusi ukuran tertimbang volume dari Definity®diukur dari waktu ke waktu
Naskah Penulis

pada 25 °C dan 37 °C ditunjukkan pada Gambar 7(c) dan (d) secara bertahap menurun selama
periode pengukuran.

Gambar 8(a) menunjukkan variasi temporal dalam spektrum redaman Definity®yang diencerkan
pada 25 ° C dan dengan cepat terpapar ke lingkungan 37 ° C di dalam tangki pengukuran. Tingkat
pembubaran Definity®di bawah kondisi ini tidak jauh berbeda dari pengukuran yang dilaporkan
pada Gambar 6, menunjukkan bahwa cangkang gelembung mikro kuat untuk peningkatan suhu
dari suhu kamar ke suhu tubuh. Di sisi lain, ketika Definity®diencerkan pada 37 ° C dan terkena
suhu sekitar 25 ° C, tingkat pembubaran microbubbles meningkat tajam (Gambar 8 (b)).
Pelemahan rata-rata yang dinormalisasi dari Definity®versus waktu yang ditunjukkan pada
Gambar 8c menurun pada tingkat 2,5 kali lipat untuk sampel Definity yang diencerkan®
didinginkan dari 37 °C hingga 25 °C daripada dipanaskan dari 25 °C hingga 37 °C.
Naskah Penulis

Gambar 9 menunjukkan spektrum redaman Definity®karena suhu meningkat secara

progresif dari 39 °C menjadi 43 °C. Atenuasi turun tajam seiring dengan peningkatan suhu
dari 41 °C menjadi 43 °C. Hasil ini menunjukkan bahwa suhu transisi fase lipid di Definity®
terletak antara 41 °C sampai 43 °C.

Diskusi
Distribusi ukuran Definity®pada suhu tinggi
Distribusi ukuran merupakan penentu utama sifat fisik dan akustik UCA (Gorce et al. 2000).
Namun, hanya sejumlah penelitian yang melaporkan distribusi ukuran dan konsentrasi UCA
pada suhu fisiologis, sebagian karena kurangnya metode penilaian yang andal dan cepat.
Naskah Penulis

Distribusi ukuran SonoVue®dilaporkan sebelumnya menggunakan hamburan cahaya

dinamis (DLS) pada 37 ° C (Yang et al.) dan untuk rentang (37 ° C
– 43 °C) dari suhu tinggi (Guiot et al. 2004). Mulvana dkk. (2010) menggunakan mikroskop
optik yang dikombinasikan dengan analisis gambar, untuk menilai distribusi ukuran dan
konsentrasi SonoVue®pada 40 °C (Mulvana et al. 2010). Namun, DLS dan teknik mikroskop
optik memiliki beberapa keterbatasan penting untuk karakterisasi kuantitatif UCA.
Pengukuran dengan DLS dilakukan dengan asumsi bahwa partikel

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 9

dianalisis memiliki sifat optik yang identik, yang dapat menyebabkan kesalahan besar
saat mengukur UCA polidispersi (Satinover et al. 2014; Sennoga et al. 2012) Selain itu,
Naskah Penulis

pengukuran dengan DLS tidak dapat menilai konsentrasi UCA. Mikroskop optik dan
analisis gambar untuk mengukur konsentrasi dan distribusi ukuran UCA adalah hal
yang membosankan, dan sulit untuk mencapai pengukuran skala populasi tanpa
menganalisis beberapa ribu gelembung mikro (Mulvana et al. 2016). Selain itu,
pengukuran dapat dikacaukan oleh gelembung mikro yang tidak stasioner atau tidak
fokus (Harfield et al. 2016). Penghitung Coulter, yang didasarkan pada penginderaan
impedansi elektro, adalah instrumen yang paling banyak digunakan untuk
mengkarakterisasi UCA (Sennoga et al. 2012). Dalam studi ini,

Hasil yang dilaporkan dalam makalah ini menunjukkan bahwa distribusi ukuran dan konsentrasi Definity
®pada 25 °C dan 37 °C serupa (Gambar 4). Hasil ini konsisten dengan prediksi dari hukum gas ideal
Naskah Penulis

menggunakan hubungan tekanan Laplace (Leighton 1994; Mulvana et al. 2010) untuk gelembung bebas
berukuran mikrometer, yang memprediksi peningkatan ukuran yang dapat diabaikan untuk peningkatan
suhu 12 °C. Mulvana dkk. (2010) melaporkan peningkatan suhu yang signifikan dalam distribusi ukuran
SonoVue®pada 40 °C relatif terhadap 20 °C, yang berbeda dari tren yang dilaporkan dalam makalah ini.
Perbedaan nyata ini dapat dijelaskan dengan mencatat bahwa UCA yang digunakan dalam penelitian ini
berbeda, dan ukurannya dibandingkan pada rentang yang berbeda (20 °C – 40 °C).vs. 25 °C – 37 °C dalam
penelitian ini). Selain itu, bukti dari penelitian sebelumnya (Guiot et al. 2006) menunjukkan bahwa ukuran
SonoVue®
microbubbles pada 40 °C bisa lebih besar dari ukurannya pada 37 °C. Secara khusus, Guiot
et al. (2010) mengamati peningkatan dramatis dalam diameter rata-rata SonoVue®ketika
suhu dinaikkan dari 39 °C menjadi 40 °C. Selanjutnya, ketika suhu dinaikkan menjadi 41 °C,
penurunan tajam dalam intensitas hamburan balik ultrasound diamati, menunjukkan
Naskah Penulis

bahwa suhu ambang batas untuk transisi fase lipid dalam cangkang SonoVue®telah
terlampaui.

Spektrum atenuasi Definity®

Frekuensi resonansi Definity®hampir 10 MHz dalam penelitian kami, yang konsisten dengan
literatur sebelumnya (Goertz et al. 2007). Keterbatasan pengukuran atenuasi broadband adalah
bahwa frekuensi yang berbeda yang terdiri dari pulsa memiliki tekanan akustik yang berbeda.
Namun, kami tidak mengamati perbedaan yang berarti dalam spektrum terukur untuk tekanan
hingga 250 kPa (Gbr. 2.b). Data yang dilaporkan di sini diperoleh dengan tekanan 30 kPa, yang
jauh di bawah 250kPa. Hasil ini konsisten dengan penelitian sebelumnya (Chatterjee et al. 2005)
dengan Definity®, yang melaporkan bahwa pengukuran redaman yang dilakukan dengan tekanan
lebih rendah dari 260 kPa menghasilkan hasil yang serupa. Meskipun demikian, penting untuk
Naskah Penulis

dicatat bahwa efek tekanan pada kurva redaman mungkin tidak sama untuk semua UCA.
Misalnya, Xia et al. (2015) melakukan pengukuran redaman dengan UCA monodisperse dan
menemukan perbedaan kurva redaman yang diperoleh dengan tekanan berkisar antara 4 kPa
hingga 110 kPa. Mereka menyimpulkan bahwa perbedaan ini disebabkan oleh nonlinier
konstitutif karena efek pelunakan noda, dan bukan propagasi nonlinier. Ketika efek tekanan
dimasukkan ke dalam model reologi, redaman

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 10

pengukuran menghasilkan sifat cangkang yang identik meskipun ada perbedaan dalam kurva
Naskah Penulis

atenuasi.

Dampak suhu pada sifat cangkang viskoelastik

Kurva redaman dan kekakuan cangkang yang dilaporkan dalam penelitian ini secara umum sesuai
dengan penelitian sebelumnya yang dilakukan pada suhu kamar (Tabel 1). Gesekan cangkang yang
dilaporkan dalam penelitian sebelumnya (Faez et al. 2011; Goertz et al. 2007; Raymond et al. 2014)
bervariasi menurut urutan besarnya, kemungkinan karena perbedaan dalam distribusi ukuran dan
rentang frekuensi pengukuran (van der meer et al.2007; Helfield dan Goertz 2013). Seiring dengan
perbedaan dalam penanganan Definity®, instrumentasi dan bukaan tertentu yang digunakan dapat
mempengaruhi distribusi ukuran yang diukur. Beberapa perbedaan diamati dalam distribusi ukuran yang
dilaporkan dalam makalah ini dan pekerjaan kami sebelumnya (Raymond et al. 2014), meskipun
instrumentasi yang sama digunakan. Secara khusus, tidak ada puncak sekunder yang diamati dalam
Naskah Penulis

distribusi ukuran tertimbang volume, yang mungkin berkontribusi pada perbedaan dua kali lipat dalam
viskositas cangkang antara penelitian ini dan pekerjaan sebelumnya pada suhu kamar. Perbedaan dalam
distribusi ukuran ini kemungkinan disebabkan oleh variabilitas batch-to-batch dari Definity®botol.

Telah disarankan sebelumnya bahwa sifat cangkang viskoelastik dan difusivitas cangkang lipid UCA
dapat berubah di bawah, pada, atau di atas suhu transisi (Zook dan Vreeland 2010). Juga telah diusulkan
bahwa penipisan lipid karena ekspansi UCA yang dimediasi suhu dapat mengurangi modulus elastisitas
cangkang, tidak ada pertumbuhan dalam distribusi ukuran UCA yang diamati dalam penelitian ini, tetapi
perubahan signifikan dalam sifat cangkang viskoelastik diamati (Tabel 1 ). Oleh karena itu perubahan
struktural lipid, daripada penipisan karena ekspansi, tampaknya menjadi mekanisme utama yang
menjelaskan pengurangan kekakuan cangkang dan gesekan cangkang Definity®pada 37 °C relatif
terhadap 25 °C. Penurunan kekakuan cangkang dan gesekan cangkang dapat menjelaskan ambang
Naskah Penulis

batas yang lebih rendah yang diamati untuk kavitasi yang stabil dan timbulnya getaran gelembung
mikro yang dilaporkan oleh Vos et al. (2008), serta osilasi microbubble amplitudo yang lebih tinggi pada
37 °C daripada 25 °C yang diamati oleh Mulvana et al. (2011). Peningkatan yang bergantung pada suhu
dalam atenuasi Definity®
paling menonjol pada resonansi (Gambar 3). Ketika redaman sistem resonansi berkurang, faktor kualitas
sistem meningkat, yang mempertajam puncak resonansi (Leighton 2012). Dalam penelitian ini, kami
mengamati pengurangan hampir lima kali lipat dalam viskositas shell Definity®pada 37 °C relatif
terhadap 25 °C. Oleh karena itu tidak mengherankan bahwa perbedaan yang paling menonjol dalam
spektrum redaman yang diukur pada 25 °C dan 37 °C diamati pada frekuensi resonansi. Karena
eksperimen ini dilakukan menggunakan suspensi massal Definity®, puncak dalam spektrum redaman
mewakili rata-rata tertimbang dari seluruh populasi gelembung mikro. Kemungkinan suhu
mempengaruhi resonansi gelembung mikro individu dari semua ukuran. Namun, efeknya diucapkan
Naskah Penulis

pada 10 MHz, frekuensi resonansi rata-rata tertimbang dari populasi. Dalam studi yang dilakukan dengan
menggunakan gelembung mikro tunggal, Vos et al. (2008) dan Mulvana et al. (2011) juga melaporkan
bahwa perbedaan suhu yang dimediasi dalam perjalanan radial dan timbulnya osilasi microbubble paling
menonjol pada frekuensi resonansi.

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 11

Dampak suhu pada stabilitas Definity®

Naskah Penulis

Dalam penelitian ini, Definity®ditemukan kurang stabil pada suhu 37 °C dibandingkan pada suhu 25 °C.
Studi sebelumnya menunjukkan bahwa perubahan sifat cair dan tegangan permukaan akan diabaikan
pada kisaran suhu 25 °C hingga 37 °C (Adam 1941; Mulvana et al. 2010). Namun, saturasi gas dari
lingkungan pengujian mungkin memiliki pengaruh yang signifikan terhadap stabilitas agen (Mulvana et
al. 2012). Pada suhu 37 °C, jumlah gas terlarut dalam cairan ambien lebih rendah, yang dapat
mempercepat difusi. Diamati bahwa gelembung submikron paling rentan terhadap pembubaran yang
dipercepat pada 37 ° C, yang dapat disebabkan oleh tekanan Laplace yang lebih tinggi untuk gelembung-
gelembung ini (Leighton 2012). Selain itu, pengurangan kekakuan cangkang (Katiyar et al. 2009) dan
viskositas cangkang (Mahalingam et al. 2014) dapat berkontribusi pada penurunan stabilitas Definity®
pada 37 °C. Mulvana dkk. (2010) melaporkan pengurangan dramatis dalam diameter SonoVue®selama
10 menit pada suhu 40 °C. Namun, penelitian mereka dilakukan dengan menggunakan air yang
dihilangkan gasnya dengan pemanasan hingga titik didih dan kemudian didinginkan hingga suhu kamar
Naskah Penulis

(saturasi gas tidak tersedia), yang dapat mempercepat difusi gas dari SonoVue®ke dalam air. Selain itu,
perbedaan suhu yang digunakan oleh para peneliti ini (20 °C vs 40 °C) lebih besar daripada perbedaan
suhu yang diselidiki dalam penelitian ini (25 °C vs 37 °C). Gas yang dienkapsulasi oleh SonoVue®dan
definisi®(masing-masing sulfur heksafluorida dan oktafluoropropana) berbeda, yang juga dapat
berkontribusi pada perbedaan stabilitasnya pada 25 °C dan 37 °C. Selanjutnya, bukti dari penelitian
sebelumnya menunjukkan bahwa SonoVue®mungkin lebih rentan terhadap pembubaran pada 40 °C
daripada 37 °C, karena transisi fase potensial lipid dalam cangkangnya (Guiot et al. 2006).

Dalam aplikasi klinis tertentu, cairan seperti saline dapat dihangatkan hingga 37 °C (Faries et al. 1991)
atau didinginkan (Herold et al. 2015) sebelum pemberian sistemik. Radharkrishnan dan rekan
menunjukkan bahwa liposom ekogenik berisi udara kehilangan ekogenisitasnya dalam waktu 15 detik
ketika didinginkan dari suhu fisiologis ke suhu kamar (Radhakrishnan et al. 2012). Dalam penelitian ini,
Naskah Penulis

pendinginan Definity yang diencerkan®dari 37 °C hingga 25 °C menghasilkan peningkatan yang nyata

dalam laju disolusi (Gambar 8). Pembubaran terjadi selama puluhan menit, kemungkinan sebagian
karena inti gas perfluorokarbon dari Definity®, yang dapat meningkatkan stabilitas (Kabalnov et al.
1998; Sarkar et al. 2009) relatif terhadap inti udara liposom ekogenik. Meskipun demikian, peneliti dan
dokter harus memperhatikan peningkatan kecenderungan Definity®larut dengan cepat setelah
pendinginan dari 37 °C hingga 25 °C. Perubahan tingkat saturasi gas dari larutan berair, dikombinasikan
dengan perubahan sifat cangkang (Katiyar et al. 2009) yang disebabkan oleh penataan ulang lipid, bisa
menjadi mekanisme untuk percepatan pembubaran Definity®ketika didinginkan dari 37 ° C menjadi 25 °
C. Mulvana dkk. (2011) menyarankan bahwa pada suhu fisiologis, ekspansi gas dapat meningkatkan
ukuran UCA dan menurunkan konsentrasi lipid permukaan, yang menyebabkan peningkatan difusivitas
dan pengurangan waktu disolusi. Namun, temuan penelitian ini menunjukkan bahwa perubahan
struktur lipid dan difusivitas dapat terjadi bahkan tanpa adanya peningkatan ukuran UCA yang
Naskah Penulis

signifikan.

Dalam penelitian ini, transisi fase lipid di Definity®ditemukan terjadi antara 41 °C

dan 43 °C. 1,2-Dipalmitoil-sn-glisero-3-fosfokolin (DPPC) adalah komponen utama
dari cangkang Definity®. Selain itu, cangkang Definity®juga mengandung 1,2-
Dipalmitoil-sn-glisero-3-fosfat (DPPA) dan MPEG5000 DPPE. Hasil ini konsisten
dengan studi fase massal sebelumnya di mana transisi fase DPPC,

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 12

komponen lipid utama dari cangkang lipid diukur sebagai 41 ° C (Tamm dan McConnell 1985).
Studi sebelumnya telah menunjukkan bahwa stabilitas Definity®berkurang setelah transisi fase
Naskah Penulis

tercapai. Hasil ini harus dipertimbangkan jika Definity®digunakan untuk studi pemanasan
hipertermia atau UCA yang ditingkatkan (Guiot 2004; Guiot 2006; Meral 2014).

Signifikansi klinis
Temuan penelitian ini menunjukkan bahwa sifat cangkang dan stabilitas UCA bergantung pada
suhu. Temuan ini memiliki implikasi untuk USG diagnostik dan terapeutik. Sifat cangkang
mempengaruhi ambang batas untuk menghasilkan aktivitas gelembung nonlinier. Teknik
pencitraan berdasarkan respons nonlinier UCA sedang dikembangkan untuk memvisualisasikan
pembuluh darah (Maresca et al. 2013; Shekhar et al. 2016b) dan untuk penginderaan tekanan
(Gupta et al. 2017). Eksperimen ini sering dilaporkan pada suhu kamar, yang dapat mempengaruhi
interpretasi data ini untuk terjemahan klinis. Selanjutnya, kavitasi yang stabil telah diidentifikasi
Naskah Penulis

sebagai mekanisme dominan untuk penghantaran obat (Haworth et al. 2016) dan
sonothrombolysis (Bader et al. 2015). Tujuan skema paparan ultrasound yang dirancang untuk
aplikasi tersebut adalah untuk mempromosikan kavitasi stabil berkelanjutan yang bergantung
pada stabilitas UCA (Bader dan Holland 2013). Ambang kavitasi dan ambang kehancuran UCA
terkait erat dengan properti cangkang (Bader dan Holland 2013). Oleh karena itu, ketergantungan
suhu dari sifat dan stabilitas cangkang UCA harus dipertimbangkan ketika memilih skema paparan
ultrasound terapeutik yang sesuai untuk aplikasi seperti penghantaran obat dan
sonothrombolysis.

Keterbatasan Studi

Perubahan yang bergantung pada suhu dalam perilaku fisik dan akustik UCA dapat bervariasi
berdasarkan pada gas pengisi, dan sifat-sifat formulasi cangkang. Oleh karena itu, hasil yang
Naskah Penulis

diperoleh dengan Definity®mungkin tidak mewakili UCA lainnya. Properti cangkang UCA yang
diperkirakan menggunakan teknik berbasis model mewakili rata-rata tertimbang dari seluruh
populasi. Namun, sifat cangkang dapat sangat bervariasi di seluruh populasi UCA, bahkan untuk
gelembung mikro individu dengan diameter yang sama (Sijl et al. 2010). Variabilitas vial-ke-vial dan
batch-ke-batch dalam sifat fisik dan akustik Definity®tidak diselidiki dalam penelitian ini. Misalnya,
koefisien atenuasi yang dilaporkan pada Gambar 3 dan Gambar 6 (a) dan (b) (pada t = 0 menit)
berbeda hampir 4 dB, yang kemungkinan karena botol dari dua kelompok berbeda digunakan
untuk pengukuran ini. Berlawanan dengan asumsi model yang digunakan dalam penelitian ini,
permukaan cangkang fosfolipid dapat menjadi tidak homogen (Borden et al. 2004). Selain itu,
penelitian ini menggunakan model statis tanpa perubahan tekanan hemodinamik, danin vivoefek
seperti filtrasi (Jong et al. 1993), pertukaran gas di paru-paru dan fagositosis (Yanagisawa et al.
2007), yang dapat mempengaruhi stabilitas UCA.
Naskah Penulis

Kesimpulan
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa sifat cangkang dan perilaku akustik Definity®
dipengaruhi oleh suhu. Distribusi ukuran Definity® tidak diubah oleh peningkatan suhu
dari 25 menjadi 37 °C. Itu menunjukkan bahwa perubahan perilaku akustik UCA ini
sebagian besar disebabkan oleh perubahan cangkang viskoelastik

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 13

properti. Tingkat pembubaran Definity®ternyata bergantung pada suhu. Gelembung

submikron tampak menyusut lebih cepat pada suhu fisiologis daripada pada suhu kamar.
Naskah Penulis

Selanjutnya, pendinginan Definity®cepat dari suhu fisiologis ke suhu kamar terbukti

menghasilkan pembubaran dipercepat. Temuan ini dapat membantu memandu pilihan
skema paparan ultrasound dan protokol penanganan UCA di laboratorium dan pengaturan
klinis untuk ultrasound diagnostik dan terapeutik.

Materi tambahan
Lihat versi Web di PubMed Central untuk materi tambahan.

ucapan terima kasih

Penelitian ini didanai oleh National Institute of Neurological Diseases and Disorders hibah R01 NS047603. Kami mengakui
dukungan dari FV Hunt Postdoctoral Research Fellowship yang diberikan kepada Dr. Himanshu Shekhar oleh Acoustical Society of
Naskah Penulis

America. Penulis berterima kasih kepada Zhaoyu (Joe) Lou yang telah memberikan bantuan teknis pada tahap awal proyek ini,
dan Drs. Kevin Haworth dan Arunkumar Palaniappan atas diskusi yang bermanfaat.

Referensi
Adam, NK. Fisika dan kimia permukaan. 3. Pers Universitas Oxford; 1941.
Bader KB, Gruber MJ, Holland CK. Diguncang dan Diaduk: Mekanisme Peningkatan Ultrasound
Trombolisis. Ultrasound Med Biol. 2015; 41:187–196. [PubMed: 25438846]
Bader KB, Holland CK. Mengukur kemungkinan kavitasi stabil dari agen kontras ultrasound.
Phys Med Biol. 2013; 58:127–44. [PubMed: 23221109]
Bekeredjian R, Grayburn PA, Shohet RV. Penggunaan agen kontras ultrasound untuk pengiriman gen atau obat dalam
obat kardiovaskular. J Am Coll Kardiol. 2005; 45:329–335. [PubMed: 15680708]
Borden MA, Kruse DE, Caskey CF, Zhao S, Dayton PA, Ferrara KW. Pengaruh cangkang lipid
sifat fisikokimia pada penghancuran gelembung mikro yang diinduksi ultrasound. IEEE Trans Ultrason
Naskah Penulis

Ferroelectr Freq Control. 2005; 52:1992–2005. [PubMed: 16422411]

Borden MA, Pu G, Runner GJ, Longo ML. Perilaku fase permukaan dan struktur mikro lipid/PEG-
microbubbles berlapis monolayer pengemulsi. Koloid Permukaan B Biointerfaces. 2004; 35:09–223.
[PubMed: 15261034]
Bryan AK, Engler A, Gulati A, Manalis SR. Pengukuran volume terus menerus dan jangka panjang dengan a
counter coulter komersial. PLoS Satu. 2012; 7:1–8.
Chatterjee D, Sarkar K, Jain P. Tentang kesesuaian pengukuran redaman broadband untuk
mengkarakterisasi gelembung mikro kontras. Ultrasound Med Biol. 2005; 31:781–786. [PubMed:
15936494]
Claudon M, Dietrich CF, Choi BI, Cosgrove DO, Kudo M, Nolsoe CP, Piscaglia F, Wilson SR, Barr
RG, Chammas MC, Chaubal NG, Chen MH, Clevert DA, Correas JM, Ding H, Forsberg F, Fowlkes JB,
Gibson RN, Goldberg BB, Lassau N, Leen ELS, Mattrey RF, Moriyasu F, Solbiati L, Weskott HP, Xu HX.
Pedoman dan rekomendasi praktik klinis yang baik untuk kontras yang ditingkatkan ultrasound
(CEUS) di hati - Pembaruan 2012. Ultraschall der Medizin. 2013; 34:11–29.
Cosgrove D. Agen kontras ultrasound: Tinjauan. Eur J Radiol. 2006; 60:324–330. [PubMed:
Naskah Penulis

16938418]
Dave JK, Halldorsdottir VG, Eisenbrey JR, Raichlen JS, Bin Liu J, McDonald ME, Dickie K, Wang S,
Leung C, Forsberg F. Estimasi tekanan LV noninvasif menggunakan emisi subharmonik dari
gelembung mikro. Pencitraan Kardiovaskular JACC. 2012:87–92. [PubMed: 22239898]
Definity (perflutren lipid microspheres) untuk informasi peresepan lengkap suspensi injeksi. Utara
Birllica MA: Pencitraan Medis Lantheus; 2013.
de Jong N, Hoff L, Skotland T, Bom N. Penyerapan dan hamburan gas yang dienkapsulasi diisi
mikrosfer: Pertimbangan teoretis dan beberapa pengukuran. ultrasonik. 1992; 30:95-103.
[PubMed: 1557838]

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 14

Deshpande N, Jarum A, Willmann JK. Pencitraan ultrasound molekuler: status saat ini dan masa depan
arah. Klinik Radiol. 2010; 65:567–581. [PubMed: 20541656]
Naskah Penulis

Errico C, Pierre J, Pezet S, Desailly Y, Lenkei Z, Couture O, Tanter M. Ultrafast ultrasound

mikroskop lokalisasi untuk pencitraan vaskular super-resolusi dalam. Grup Penerbitan Alam
Alam. 2015; 527:499–502.
Faez T, Goertz D, De Jong N. Karakterisasi Agen Kontras Ultrasound DefinityTM pada Frekuensi
Rentang 5–15 MHz. Ultrasound Med Biol. 2011; 37:338–342. [PubMed: 21257093]
Faries G, Johnston C, Pruitt KM, Plouff RT. Hubungan suhu dengan jarak dan laju aliran
cairan IV hangat. Ann Emerg Med. 1991; 20:1198–1200. [PubMed: 1952305]
Forsberg F, Liu JB, Shi WT, Furuse J, Shimizu M, Goldberg BB. Estimasi tekanan in vivo menggunakan
sinyal microbubble kontras subharmonik: bukti konsep. IEEE Trans Ultrason Ferroelectr Freq Control.
2005; 52:581–3. [PubMed: 16060506]
Goertz DE, de Jong N, van der Steen AFW. Pengukuran Atenuasi dan Distribusi Ukuran
Definity™ dan Populasi Definity™ yang Dimanipulasi. Ultrasound Med Biol. 2007; 33:1376–1388.
[PubMed: 17521801]
Gorce JM, Arditi M, Schneider M. Pengaruh distribusi ukuran gelembung pada ekogenisitas
Naskah Penulis

agen kontras ultrasound: studi SonoVue. Investasikan Radiol. 2000; 35:661–671. [PubMed:
11110302]
Guiot C, Cavalli R, Gaglioti P, Danelon D, Musacchio C, Trotta M, Todros T. Pemantauan suhu
menggunakan agen kontras ultrasound: Investigasi in vitro pada stabilitas termal. ultrasonik. 2004;
42:927–930. [PubMed: 15047408]
Guiot C, Pastore G, Napoleone M, Gabriele P, Trotta M, Cavalli R. Respon termal agen kontras
microbubbles: hasil awal dari karakterisasi fisiko-kimia dan pencitraan AS.
ultrasonik. 2006; 44(Suppl 1):e127–30. [PubMed: 17056082]
Gupta I, Eisenbrey J, Stanczak M, Sridharan A, Dave JK, Liu JB, Hazard C, Wang X, Wang P, Li H,
Wallace K, Forsberg F. Pengaruh Pulse Shaping pada Estimasi Tekanan Berbantuan
Subharmonik In Vitro dan In Vivo. J USG Med. 2017; 36:3–11. [PubMed: 27943411]
Harfield C, Fury CR, Memoli G, Jones P, Ovenden N, Stride E. Analisis Ketidakpastian dalam
Karakterisasi gelembung mikro. Ultrasound Med Biol. 2016; 42:1412–1418. [PubMed: 26993799]
Haworth KJ, Raymond JL, Radhakrishnan K, Moody MR, Huang SL, Peng T, Shekhar H, Klegerman
SAYA, Kim H, McPherson DD, Holland CK. Ultrasound Trans-Stent B-Mode dan Pencitraan Kavitasi
Naskah Penulis

Pasif. Ultrasound Med Biol. 2016; 42:518–27. [PubMed: 26547633]

Helfield B, Huo X, Williams R, Goertz DE. Pengaruh suhu botol praaktivasi pada akustik
properti dari Definity™. Ultrasound Med Biol. 2012; 38:1298–1305. [PubMed: 22502892]
Helfield B, Goertz DE. Perilaku resonansi nonlinier dan estimasi cangkang linier untuk DefinityTM dan
MicroMarkerTM dinilai dengan spektroskopi microbubble akustik. J Acoust Soc Am. 2013;
133:1158–1168. [PubMed: 23363132]
Herold IHF, Soliman Hamad MA, Van Assen HC, Bouwman RA, Korsten HHM, Mischi M.
Volume darah paru diukur dengan kontras ultrasound yang ditingkatkan: Perbandingan dengan
termodilusi transpulmoner. Br J Anaesth. 2015; 115:53–60. [PubMed: 25753598]
Hoff, L. Karakterisasi akustik agen kontras untuk pencitraan ultrasound medis. Berlin/
Heidelberg: Pegas; 2001.
Hynynen K, McDannold N, Vykhodtseva N, Raymond S, Weissleder R, Jolesz FA, Sheikov N. Focal
gangguan sawar darah otak karena ledakan ultrasound 260-kHz: sebuah metode untuk pencitraan molekuler
dan pengiriman obat yang ditargetkan. J. Ahli bedah saraf. 2006; 105:445–454. [PubMed: 16961141]
Naskah Penulis

de Jong N, Ten Cate FJ, Vletter WB, Roelandt JRTC. Kuantifikasi ekokontras transpulmoner
efek. Ultrasound Med Biol. 1993; 19:279–288. [PubMed: 8346602]
Kabalnov A, Bradley J, Flaim S, Klein D, Pelura T, Peters B, Otto S, Reynolds J, Schutt E, Weers J.
Pelarutan microbubbles multikomponen dalam aliran darah: 2. Eksperimen Ultrasound Med Biol.
1998; 24:751–760. [PubMed: 9695278]
Kanbar E, Fouan D, Sennoga CA, Doinikov AA, Bouakaz A. Dampak Pengisian Gas pada Subharmonik
Emisi Agen Kontras Ultrasound Fosfolipid. Ultrasound Med Biol. 2017:1–12.
Katiyar A, Sarkar K, Jain P. Pengaruh elastisitas enkapsulasi pada stabilitas enkapsulasi
gelembung mikro. J Koloid Antarmuka Sci. 2009; 336:519–525. [PubMed: 19524251]

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 15

Kooiman K, Vos HJ, Versluis M, De Jong N. Perilaku akustik gelembung mikro dan implikasinya terhadap
pengantar obat. Pengiriman Obat Adv Rev. 2014; 72:28–48. [PubMed: 24667643]
Naskah Penulis

Kumar KN, Sarkar K. Pengaruh tekanan hidrostatik ambien pada sifat material dari
enkapsulasi gelembung mikro kontras ultrasound. J Acoust Soc Am. 2015; 138:624–634.
[PubMed: 26328681]
Leighton, T. Gelembung Akustik. Pers Akademik; 2012. Leighton TG.
Gelembung Akustik. J Acoust Soc Am. 1994; 96:2616.
Lu Y, Wang J, Huang R, Chen G, Zhong L, Shen S, Zhang C, Li X, Cao S, Liao W, Liao Y, Bin J.
Sonothrombolysis yang Dimediasi Microbubble Meningkatkan Hasil Setelah Stroke Iskemik Akut yang
Diinduksi Mikroembolisme Trombotik. Pukulan. 2016; 47:1344–1353. [PubMed: 27048701]
Lumason (mikrosfer sulfur hexafluoridelipid-type A) untuk suspensi injeksi peresepan penuh
informasi. Kotapraja Monroe, NJ: Diagnostik Bracco; 2016.
Mahalingam S, Meinders MBJ, Edirisinghe M. Pembentukan, stabilitas dan sifat mekanik BSA
gelembung udara stabil yang dihasilkan menggunakan atomisasi elektrohidrodinamik. Langmuir. 2014;
30:6694–6703. [PubMed: 24841724]

Maresca D, Renaud G, van Soest G, Li X, Zhou Q, Shung KK, De Jong N, Van der Steen AFW.
Naskah Penulis

Urutan Denyut Ultrasound Intravaskular yang Disempurnakan Kontras untuk Transduser Terbatas
Bandwidth. Ultrasound Med Biol. 2013; 39:706–713. [PubMed: 23384459]
Marmottant P, van der Meer S, Emmer M, Versluis M, de Jong N, Hilgenfeldt S, Lohse D. Model untuk
osilasi amplitudo besar gelembung dilapisi akuntansi untuk tekuk dan pecah. J Acoust Soc
Am. 2005; 118:3499.
McDannold N, Vykhodtseva N, Hynynen K. Efek Parameter Akustik dan Kontras Ultrasound
Dosis Agen pada Gangguan Penghalang Darah-Otak yang Diinduksi Ultrasound Terfokus. Ultrasound
Med Biol. 2008; 34:930–937. [PubMed: 18294757]
Meral FC. Efek suhu pada osilasi nonlinier dari gelembung mikro yang meningkatkan kontras.
Proc Bertemu Acoust. 2014; 21:02001.
Mulvana H, Browning RJ, Luan Y, de Jong N, Tang MX, Eckersley RJ, Stride E. Karakterisasi
Microbubbles Agen Kontras untuk Pencitraan Ultrasound dan Penelitian Terapi. IEEE Trans Ultrason
Ferroelectr Freq Control. 2016; 64:232–251. [PubMed: 27810805]
Mulvana H, Stride E, Hajnal JV, Eckersley RJ. Perilaku kontras ultrasound yang bergantung pada suhu
Naskah Penulis

agen. Ultrasound Med Biol. 2010; 36:925–34. [PubMed: 20447756]

Mulvana H, Stride E, Tang M, Hajnal JV, Eckersley R. Perbedaan Suhu-Tergantung di
Perilaku Akustik Nonlinier dari Agen Kontras Ultrasound Diungkapkan oleh Pencitraan Berkecepatan
Tinggi dan Akustik Massal. Ultrasound Med Biol. 2011; 37:1509–1517. [PubMed: 21741759]
Mulvana H, Stride E, Tang MX, Hajnal JV, Eckersley RJ. Pengaruh Saturasi Gas pada
Stabilitas gelembung mikro. Ultrasound Med Biol. 2012; 38:1097–1100. [PubMed: 22475697]
Nakatsuka MA, Mattrey RF, Esener SC, Cha JN, Goodwin AP. Gelembung mikro dengan ikatan silang Aptamer:
Agen kontras cerdas untuk pencitraan ultrasound yang diaktifkan trombin. Materi Iklan. 2012;
24:6010– 6016. [PubMed: 22941789]
Radhakrishnan K, Haworth KJ, Huang SL, Klegerman ME, McPherson DD, Holland CK. Stabilitas dari
Liposom Echogenic sebagai Agen Kontras Ultrasound Pool Darah dalam Phantom Aliran Fisiologis.
Ultrasound Med Biol. 2012; 38:1970–1981. [PubMed: 22929652]
Raymond JL, Haworth KJ, Bader KB, Radhakrishnan K, Griffin JK, Huang SL, McPherson DD,
Belanda CK. Pengukuran atenuasi broadband dari agen kontras ultrasound bercangkang
fosfolipid. Ultrasound Med Biol. 2014; 40:410–421. [PubMed: 24262056]
Naskah Penulis

Sarkar K, Katiyar A, Jain P. Pertumbuhan dan pembubaran gelembung mikro kontras yang dienkapsulasi: efek
permeabilitas enkapsulasi. Ultrasound Med Biol. 2009; 35:1385–96. [PubMed: 19616160]
Satinover SJ, Dove JD, Borden MA. Ukuran optik partikel tunggal dari gelembung mikro. Obat USG
Biol. 2014; 40:138–147. [PubMed: 24139917]
Sennoga CA, Yeh JSM, Alter J, Stride E, Nihoyannopoulos P, Seddon JM, Haskard DO, Hajnal JV,
Tang MX, Eckersley RJ. Evaluasi Metode untuk Ukuran dan Penghitungan Agen Kontras
Ultrasound. Ultrasound Med Biol. 2012; 38:834–845. [PubMed: 22402020]

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 16

Shekhar H, Awuor I, Thomas K, Rychak JJ, Doyley MM. Onset subharmonik yang tertunda dan
emisi ultraharmonik dari agen kontras gelembung mikro bercangkang fosfolipid. Ultrasound Med
Naskah Penulis

Biol. 2014; 40:727–738. [PubMed: 24582298]

Shekhar H, Bader KB, Huang S, Peng T, Huang S, McPherson DD, Holland CK. Trombolitik in vitro
kemanjuran liposom echogenic sarat dengan aktivator plasminogen jaringan dan gas octafluoropropane.
Phys Med Biol. 2016a; 62:517–538. [PubMed: 28002053]
Shekhar H, Huntzicker S, Awuor I, Doyley MM. Pencitraan Ultraharmonik Berkode Chirp dengan Modifikasi
Sistem Ultrasound Intravaskular Klinis. Pencitraan Ultrasonik. 2016b; 38:403–419. [PubMed:
26634777]
Shekhar H, Rychak JJ, Doyley MM. Memodifikasi distribusi ukuran agen kontras microbubble untuk
pencitraan subharmonik frekuensi tinggi. Kedokteran Fisik. 2013; 40:082903-1–082903-10. [PubMed:
23927358]
Shelton SE, Lee YZ, Lee M, Cherin E, Foster FS, Aylward SR, Dayton PA. Kuantifikasi dari
tortuositas mikrovaskular selama evolusi tumor menggunakan angiografi akustik. Ultrasound Med Biol.
2015; 41:1896–1904. [PubMed: 25858001]
Shi WT, Forsberg F, Raichlen JS, Needleman L, Goldberg BB. Ketergantungan tekanan subharmonic
Naskah Penulis

sinyal dari gelembung mikro kontras. Ultrasound Med Biol. 1999; 25:275–283. [PubMed:
10320317]
Sijl J, Dollet B, Overvelde M, Garbin V, Rozendal T, de Jong N, Lohse D, Versluis M. Subharmonic
perilaku microbubbles agen kontras ultrasound yang dilapisi fosfolipid. J Acoust Soc Am. 2010;
128:3239–52. [PubMed: 21110619]
[ PubMed ] [ Cross Ref ] Sun C, Panagakou I, Sboros V, Butler MB, Kenwright D, Thomson AJW, Moran CM. Pengaruh dari
suhu, pengukur jarum dan laju injeksi pada distribusi ukuran, konsentrasi, dan respons
akustik agen kontras ultrasound pada frekuensi tinggi. ultrasonik. 2016; 70:84–91. [PubMed:
27140502]
Tamm LK, McConnell HM. Lapisan ganda fosfolipid yang didukung. Biophys J. 1985; 47:105-113. [PubMed:
3978184]
Unnikrishnan S, Klibanov AL. Microbubbles sebagai agen kontras ultrasound untuk pencitraan molekuler:
persiapan dan aplikasi. AJR Am J Roentgenol. 2012; 199:292–9. [PubMed: 22826389]
van der Meer SM, Dollet B, Voormolen MM, Chin CT, Bouakaz A, de Jong N, Versluis M, Lohse D.
Spektroskopi microbubble dari agen kontras ultrasound. J Acoust Soc Am. 2007; 121:648–656.
Naskah Penulis

[PubMed: 17297818]
van Rooij T, Luan Y, Renaud G, van der Steen AFW, Versluis M, de Jong N, Kooiman K. Nonlinier
Respon dan Sifat Viskoelastik dari Gelembung Mikro Berlapis Lipid: DSPC versus DPPC.
Ultrasound Med Biol. 2015; 41:1432–1445. [PubMed: 25724308]
Vos HJ, Emmer M, De Jong N. Osilasi gelembung mikro tunggal pada suhu kamar versus suhu tubuh.
IEEE Ultrason Symp. 2008:982–984.
Xia L, Porter TM, Sarkar K. Menafsirkan redaman pada amplitudo eksitasi yang berbeda untuk memperkirakan
sifat reologi antarmuka bergantung regangan dari gelembung mikro monodispersi berlapis lipid. J
Acoust Soc Am. 2015; 138:3994–4003. [PubMed: 26723353]
Yanagisawa K, Moriyasu F, Miyahara T, Yuki M, Iijima H. Agen kontras ultrasonografi fagositosis.
gelembung mikro oleh sel Kupffer. Ultrasound Med Biol. 2007; 33:318–325. [PubMed: 17207907]
Yang X, Li J, He X, Wu K, Yuan Y, Ding M. Hubungan Intensitas Sinyal Ultrasound dengan
Konsentrasi SonoVue pada Suhu Tubuh in Vitro. Pro dari SPIE. 9038:1–8.
Yeh CK, Su SY. Pengaruh Parameter Insonasi Akustik pada Penghancuran Agen Kontras Ultrasound.
Naskah Penulis

Ultrasound Med Biol. 2008; 34:1281–1291. [PubMed: 18343019]

Zook JM, Vreeland WN. Pengaruh suhu, panjang rantai asil, dan rasio laju aliran pada liposom
pembentukan dan ukuran dalam perangkat pemfokusan hidrodinamik mikrofluida. Materi Lembut. 2010; 6:1352– 1360.

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 17
Naskah Penulis
Naskah Penulis

Gambar 1.
Skema peralatan yang digunakan untuk melakukan pengukuran distribusi ukuran Definity®
pada suhu kamar (25 °C) dan fisiologis (37 °C). PID = turunan integral
proporsional, UCA = zat kontras ultrasound.
Naskah Penulis
Naskah Penulis

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 18
Naskah Penulis

Gambar 2.
(a) Distribusi ukuran tertimbang volume dari campuran manik-manik lateks standar 2-μm dan 5-
μm yang diukur pada 25 °C dan 37 °C. (b) Spektrum redaman Definity®pada 25 °C diukur sebagai
tekanan negatif puncak meningkat dari 30 kPa menjadi 250 kPa. (c) Spektrum atenuasi pita sempit
(lingkaran) dan pita lebar (garis padat) dari Definity®diukur pada suhu 37°C.
Naskah Penulis
Naskah Penulis
Naskah Penulis

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 19
Naskah Penulis
Naskah Penulis

Gambar 3.
Koefisien atenuasi yang bergantung pada frekuensi dari Definity®diukur pada 25 °C, dan 37 °C.
Bilah kesalahan mewakili rata-rata ± 1 SD (n = 4).
Naskah Penulis
Naskah Penulis

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 20
Naskah Penulis
Naskah Penulis

Gambar 4.
Distribusi bobot-jumlah (a) dan bobot-volume (b) dari Definity®diukur pada 25 °C
dan 37 °C. Distribusi bobot-jumlah (c) dan bobot-volume (c) dari Definity®
dilaporkan sebagai persentase. Bilah kesalahan mewakili rata-rata ± 1 SD (n = 4).
Naskah Penulis
Naskah Penulis

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 21
Naskah Penulis
Naskah Penulis

Gambar 5.
Koefisien atenuasi (garis padat) yang diukur sebagai fungsi frekuensi, dan kesesuaian teoretis
(garis putus-putus) dengan model de Jong (de Jong et al. 1992) berdasarkan estimasi parameter
cangkang Definity®pada (a) 25 °C, dan (b) 37 °C. Bilah kesalahan mewakili rata-rata ± 1 SD (n = 4),
dan garis putus-putus mewakili interval kepercayaan 95% dari kesesuaian.
Naskah Penulis
Naskah Penulis

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 22
Naskah Penulis

Gambar 6.
Spektrum redaman Definity®diukurmelawanwaktu untuk menilai stabilitasnya pada (a) 25 °C dan
(b) 37 °C. (c) Koefisien atenuasi rata-rata yang dinormalisasi dari Definity®diukur melawanwaktu
pada suhu 25 °C dan 37 °C. Bilah kesalahan mewakili rata-rata ± 1 SD (n = 3).
Naskah Penulis
Naskah Penulis
Naskah Penulis

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 23
Naskah Penulis
Naskah Penulis
Naskah Penulis

Gambar 7.
Distribusi ukuran tertimbang nomor dari Definity®diukurmelawanwaktu pada (a) 25 °C dan (b)
37 °C. Distribusi ukuran tertimbang volume dari Definity®diukurmelawanwaktu pada (c) 25 °C
dan (d) 37 °C. Bilah kesalahan mewakili rata-rata ± 1 SD (n = 3).
Naskah Penulis

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 24
Naskah Penulis

Angka 8.
Pengaruh perubahan suhu dari (a) 25 °C ke 37 °C, dan dari (b) 37 °C ke 25 °C pada spektrum
redaman Definity®diukur selama 60 menit, (c) Koefisien atenuasi rata-rata Definity®
dihangatkan dari 25 °C hingga 37 °C, dan didinginkan dari 37 °C hingga 25 °Cmelawan waktu
Naskah Penulis

(n = 3).
Naskah Penulis
Naskah Penulis

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 25
Naskah Penulis
Naskah Penulis

Gambar 9.
Spektrum redaman Definity®sebagai fungsi suhu dari 39 °C hingga 43 °C (n = 3).
Naskah Penulis
Naskah Penulis

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.

 Shekhar dkk. halaman 26

Tabel 1

Rata-rata interval kepercayaan ± 95% dari sifat cangkang viskoelastik Definity® pada suhu kamar dan suhu
Naskah Penulis

fisiologis diperoleh dengan menggunakan model de Jong (de Jong et al. 1992). Sifat cangkang
dilaporkan untuk Definity®pada suhu kamar oleh peneliti lain (Faez et al. 2011; Goertz et al. 2007; Raymond et al. 2014)
dicantumkan untuk perbandingan bersama dengan suhu dan rentang frekuensi yang digunakan dalam pengukuran.

Suhu Rentang frekuensi (MHz) Sp(T/m) Sf× 106(kg/dtk)

Suhu kamar

Studi saat ini 2 – 25 1,76 ± 0,18 0,21 ± 0,07

Goertz dkk. (2007) 2 – 50 1,71 ± 0,24 0,015 ± 0,015

Faez dkk. (2011) 5 – 15 1,64 ± 0,33 0,15 ± 0,02

Raymond dkk. (2014) 2 – 25 1,76 ± 0,16 0,47 ± 0,05

Naskah Penulis

Suhu fisiologis

Studi saat ini 2 – 25 1,01 ± 0,07 0,04 ± 0,04

Naskah Penulis
Naskah Penulis

Obat Ultrasound Biol. Naskah penulis; tersedia di PMC 2019 01 Februari.