Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

2308

Jurnal Perlindungan Pangan, Vol. 72, No. 11, 2009, Halaman 2308–2312
hak ciptaG,Asosiasi Internasional untuk Perlindungan Pangan

transfer dariEscherichia coliO157:H7 dari Tanah, Air, dan Pupuk

Kandang yang Terkontaminasi Patogen Dalam Jumlah Rendah untuk
Tanaman Selada
GABRIEL MOOTIAN, WEN-HSUAN WU,DANKARL R. MATTEWS*

Departemen Ilmu Pangan, Sekolah Ilmu Lingkungan dan Biologi, Rutgers, Universitas Negeri New Jersey, 65 Dudley Road,
New Brunswick, New Jersey 08901-8520, AS

Diunduh dari http://meridian.allenpress.com/jfp/article-pdf/72/11/2308/1680125/0362-028x-72_11_2308.pdf oleh pengguna Indonesia pada 12 Oktober 2022

MS 09-004: Diterima 7 Januari 2009/Diterima 10 April 2009

ABSTRAK
Sumber kontaminasi sayuran hijau masih belum jelas, tetapi jelas bahwa air yang terkontaminasi, perubahan tanah, dan satwa liar
kemungkinan berkontribusi. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan transfer sejumlah kecilEscherichia coli O157:H7 dari tanah,
tanah yang diubah pupuk kandang, dan air untuk menanam tanaman selada. Tanaman selada, muda (umur 12 hari) atau dewasa (umur 30
hari), ditanam di tanah, tanah yang diberi pupuk kandang, atau diairi dengan air yang mengandung 101, 102, 103, atau 104CFUE. coli
O157:H7 per g atau ml. Tanaman yang dipanen diproses untuk menentukan apakahE. coliO157:H7 dikaitkan dengan seluruh pabrik atau di
dalam lokasi internal. Tanaman muda (12 hari) dipanen pada 1, 10, 20, dan 30 hari pasca pajanan. Tidak ada sampel yang positif untukE. coli
O157:H7 setelah pelapisan langsung pengenceran serial. Pengayaan semua sampel dari tanaman muda yang terpapar tanah yang
terkontaminasi, tanah yang diubah pupuk kandang, dan air irigasi menunjukkan bahwa sekitar 21% (113 dari 552) tanaman positif untukE.
coliO157:H7. Sekitar 30% (36 dari 120) tanaman dewasa yang awalnya diairi dengan atau ditanam di tanah yang terkontaminasi (termasuk
tanah yang diubah pupuknya) selama 15 hari positif untukE. coliO157:H7. Berdasarkan sterilisasi jaringan permukaan,E. coliO157:H7 berada
di lokasi terlindung jaringan selada. Hasilnya menunjukkan bahwa selada terkena, dan tumbuh di hadapan, jumlah yang rendah dariE. coli
O157:H7 dapat terkontaminasi dan dengan demikian menimbulkan risiko kesehatan manusia.

Wabah penyakit bawaan makanan yang terkait dengan
konsumsi sayuran hijau yang terkontaminasi terus berlanjut
tidak hanya di Amerika Serikat, tetapi juga di seluruh dunia (
8).Agen etiologi yang paling umum yang terkait dengan
wabah ini adalahEscherichia coliO157:H7 danSalmonella.
Banyak dari wabah ini telah dikaitkan dengan selada.
Misalnya, di Swedia, total 135 kasus, termasuk 11 kasus
sindrom uremik hemolitik, terkait dengan konsumsi selada
yang diproduksi secara lokal yang terkontaminasi dengan
E. coliO157. Sampel air dari sungai yang digunakan untuk irigasi
positif untuk strain wabah, seperti halnya ternak di sebuah
peternakan di hulu titik irigasi (12).Air yang terkontaminasi,
perubahan tanah, banjir ladang, dan satwa liar kemungkinan
merupakan sumber kontaminasi selada (3).Sejumlah penelitian
terbatas telah membahas interaksiE. coli O157:H7 (atau dalam hal
ini, patogen enterik lainnya) dengan tanaman selada yang sedang
tumbuh; kebanyakan penelitian telah menggunakan bibit (yang
mungkin tidak mewakili tanaman dewasa) atau tanaman dewasa (
lokasi dan rute kontaminasi melalui pelacakan
mikroba di rizosfer dan filosfer (13).
Kemampuan dariE. coliO157:H7 untuk menyerang jaringan
internal tanaman selada telah dilaporkan (13, 15, 16). Para peneliti
telah menyarankan bahwaE. coliO157:H7 dapat diambil oleh akar
dan diangkut ke bagian tanaman selada yang dapat dimakan (7, 15,
16).Salomo dkk. (15)melaporkan internalisasiE. coliO157:H7 ke
dalam jaringan selada yang dapat dimakan, dideteksi dengan
pemindaian laser mikroskop confocal, melalui penyerapan patogen
terkait akar. Setelah pembersihan permukaan selama 10 menit, sel-
sel yang terinternalisasi terdeteksi pada tanaman yang terpapar 108
CFUE. coliO157:H7, tapi tidak sampai 104CFUE. coliO157:H7. Peneliti
lain melaporkan hasil yang kontradiktif seperti asosiasi dengan
jaringan akar, tetapi tidak dalam jaringan yang dapat dimakan (9,
10).Sejumlah variabel termasuk umur tanaman, jenis tanah, kondisi
pertumbuhan (misalnya, hidroponik versus tanah), metode
pemaparan (benih atau tanaman), dan varietas selada dapat
mempengaruhi apakah patogen enterik akan memasuki tanaman

10, 15, 16).Kritik utama terhadap studi yang membahas melalui sistem akar dan bermigrasi ke akar. filosfer (6, 13).

E. coliInteraksi O157:H7 (eksternal dan internal) dengan

tanaman selada dan jaringan merupakan penggunaan populasi
tantang yang sangat tinggi. Populasi dariE. coli O157:H7, jika
ada di lingkungan, kemungkinan sangat rendah (5, 11).Inokula
tantangan tinggi dariE. coliO157:H7 digunakan dalam banyak
penelitian, karena tujuannya adalah untuk menentukan
* Penulis untuk korespondensi. Telp: 732-932-9611; Faks: 732-932-6776; Email:
matthews@aesop.rutgers.edu.
Mengingat kurangnya data konklusif mengenai
internalisasi patogen bawaan makanan enterik, baik melalui
akar, stomata, atau luka di jaringan tanaman yang dapat
dimakan, budidaya tanaman di tanah yang mengandung
populasi rendahE. coliO157:H7 harus dianggap sebagai
potensi risiko kesehatan manusia Memang, sejumlah kecil
bakteri yang terkait dengan filosfer mampu bertahan untuk
waktu yang lama, dan dosis infeksius untukE. coli O157:H7
mungkin kurang dari 100 sel; Oleh karena itu, paparan
J. Food Prot., Vol. 72, No. 11
menanam tanaman ke tingkat patogen apa pun tidak dapat
diterima. Salomo dkk. (14)menunjukkan kegigihanE. coli
O157:H7 pada selada selama lebih dari 20 hari dalam kondisi
laboratorium. Tanaman selada berumur 30 hari saat pertama
kali terpaparE. coliO157:H7–air irigasi yang terkontaminasi.
interaksi dariE. coliO157:H7 dengan tanaman dapat
dipengaruhi oleh umur tanaman. Sebuah studi baru-baru ini
menunjukkan bahwa populasiE. coliO157:H7 secara konsisten
lebih besar pada daun muda (bagian dalam) dibandingkan
dengan daun selada tua dan tengah (4).
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui apakah paparan
rizosfer dan filosfer tanaman selada terhadap populasi rendah
selada.E. coliO157:H7 akan menghasilkan tingkat patogen yang
dapat dideteksi yang terkait dengan filosfer. Dalam penelitian ini,
tanaman ditanam baik di tanah atau tanah yang diubah pupuk
kandang yang mengandung 101, 102, 103, atau 104CFUE. coli
O157:H7/g, atau permukaannya diairi sekali dengan air yang
mengandung 101, 102, 103, atau 104CFUE. coliO157:H7 per ml. Dua
kelompok tanaman digunakan: tanaman berumur 12 hari (muda)
dan tanaman berumur 30 hari (tua) diikuti masing-masing selama
30 dan 15 hari setelah pajanan.
BAHAN DAN METODE
Bakteri.E. coliO157:H7 strain ATCC 43895 (terisolasi dari daging sapi
giling) digunakan dalam penelitian ini. Isolasi digunakan dalam
penelitian sebelumnya (14, 15).Strain diubah untuk mengekspresikan
protein fluoresen hijau (GFP) dengan menggunakan plasmid pGFP
(Clontech, Inc., Palo Alto, CA), seperti yang dijelaskan sebelumnya (15).
Budaya kerja dipertahankan pada 4kamuC pada pelat tryptic soy agar
(TSA; Difco, Becton Dickinson, Sparks, MD) yang berisi 100mg/ml
ampisilin (Amp; Sigma, St. Louis, MO) (TSA-Amp).
Budidaya tanaman selada.Biji selada daun es hijau (Lactuca sativaL.)
dibeli dari W. Atlee Burpee Co. (Warminster, PA). Tanaman ditumbuhkan
hingga berumur 12 hari dalam colokan, dan kemudian ditransplantasikan ke
pot yang lebih besar sesuai kebutuhan. Untuk eksperimen yang
membutuhkan tanaman berumur 30 hari atau lebih, tanaman ditanam dalam
pot berdiameter 3 inci yang berisi campuran lumut gambut Kanada dan
vermikulit tingkat pertanian 1:1. Tanaman disiram setiap hari dan dipupuk
sesuai kebutuhan dengan pupuk Pete's General Purpose 15-15-15 (Peter's
Professional, Allentown, PA) di rumah kaca florikultura Universitas Rutgers.
Tanaman ditanam dalam fotoperiode 12 jam pada 21kamuC pada siang hari
dan 15kamuC di malam hari. Tanaman disiram saat permukaan tanah mulai
mengering. Air diterapkan langsung ke tanah dengan menggunakan pipet 25
ml. Selada es hijau mencapai kematangan antara 40 dan 50 hari
pertumbuhan. Umur tanaman dalam penelitian ini mengacu pada waktu
setelah munculnya. Tanaman berumur dua belas hari biasanya memiliki
empat sampai lima daun.
Persiapan inokulum dan tantangan tanaman selada umur 12
hari.E. coliO157:H7 dikultur dalam kaldu kedelai tryptic (TSB; Difco,
Becton Dickinson) dan Amp (TSB-Amp) pada suhu 37kamuC selama
24 jam. Untuk menyiapkan inokulum, sel dipanen dengan
sentrifugasi (3.500 |gselama 10 menit) dan disuspensikan kembali
dalam air suling untuk mencapai sekitar 109CFU/ml. Tanah, air
irigasi, dan pupuk kandang tercemarE. coliO157:H7. Singkatnya,
untuk tanah,E. coliO157:H7 ditambahkan untuk mencapai level
sekitar 101, 102, 103, dan 104CFU/g. Kotoran sapi yang diperoleh dari
peternakan Universitas Rutgers diinokulasi untuk mencapaiE. coli
O157:H7 kadar sekitar 5 | 101, 5 | 102, 5 | 103, dan 5 | 104CFU/g.
Sampel yang diinokulasi (tanah atau pupuk kandang) dicampur
dengan kuat untuk memastikan penyebaran patogen yang merata.
TRANSFERE. COLIO157:H7 UNTUK TANAMAN SELATAN 2309
Air untuk irigasi disiapkan dengan menambahkanE. coliO157:H7 untuk
mencapai level 101, 102, 103, dan 104CFU/ml. Tingkat bakteri di tanah,
pupuk kandang, dan air dikonfirmasi dengan pengenceran plating pada
TSA-Amp. Pada hari tantangan, tanaman dipindahkan dari rumah kaca
ke laboratorium kami. Setiap percobaan termasuk tanaman berumur 12
hari yang dipisahkan menjadi empat kelompok enam tanaman per
kelompok. Percobaan menggunakan tanah, pupuk kandang, dan air
irigasi yang terkontaminasi dilakukan secara mandiri. Kelompok kontrol
yang tidak diinokulasi dimasukkan.
Tusuk yang berisi satu tanaman berumur 12 hari ditanam dalam
pot berukuran 3 inci yang berisi tanah atau tanah yang telah diubah
pupuknya (1 bagian pupuk kandang menjadi 4 bagian tanah) yang
memilikiE. coliO157:H7 pada level 101, 102, 103, dan 104CFU/g. Dalam
Diunduh dari http://meridian.allenpress.com/jfp/article-pdf/72/11/2308/1680125/0362-028x-72_11_2308.pdf oleh pengguna Indonesia pada 12 Oktober 2022
percobaan denganE. coliO157:H7–air yang terkontaminasi; volume 20 ml
air diterapkan langsung ke tanah tanaman di 3-in. pot. Tanah diairi
hanya sekali dengan air yang terkontaminasi. Untuk semua percobaan,
daun terluar tidak dicegah menyentuh tanah, untuk memodelkan kondisi
di lapangan secara dekat. Percobaan dilakukan dua kali.
Tantangan tanaman berumur 30 hari.Tanaman selada berumur tiga puluh hari
yang ditanam seperti dijelaskan di atas ditransplantasikan ke tanah, tanah yang
diubah pupuk kandang, atau diairi dengan air yang terkontaminasi dengan
E. coliO157:H7.E. coliO157:H7 berada di level 101, 102, 103, dan 104CFU/g
atau ml. Pada percobaan irigasi permukaan, tanah di setiap pot diairi
dengan 200 ml air yang mengandungE. coli O157:H7 pada kadar yang
disebutkan sebelumnya. Inokulum diterapkan dengan hati-hati untuk
mencegah percikan inokulum ke bagian yang dapat dimakan dari
tanaman selada. Tanah diairi hanya sekali dengan air yang
terkontaminasi. Ketika permukaan tanah mulai mengering, tanaman
disiram seperti air bebas patogen. Setiap kelompok berisi enam
tanaman. Sebuah kelompok kontrol yang tidak diobati dimasukkan.
Percobaan dilakukan dua kali.
Analisis mikrobiologi.Tanaman berumur 12 hari pada awal penelitian
dipanen 1, 10, 20, dan 30 hari pascatantangan. Tanaman berumur 30 hari
pada saat inisiasi penelitian dipanen 1 dan 15 hari pascatantangan. Tanaman
dipotong dari sistem akar kira-kira 1 cm di atas permukaan tanah untuk
meminimalkan kontaminasi permukaan bagian tanaman yang dapat dimakan
melalui kontak dengan campuran tanaman. Enam tanaman per perlakuan
dikumpulkan dan dibagi menjadi dua set yang terdiri dari tiga tanaman. Satu
set tiga tanaman dari setiap kelompok perlakuan didesinfeksi permukaan
seperti yang dijelaskan sebelumnya (15).Singkatnya, tanaman dicelupkan ke
dalam etanol 80% selama 5 detik, yang diikuti dengan perendaman dalam
0,1% HgCl2
(berat/vol) selama 5 menit. Tanaman atau daun selada dicuci dua kali
dalam air steril dan dikocok untuk menghilangkan kelebihan air. Tiga set
tanaman yang tersisa direndam dalam air steril selama 5 menit, dicuci
dua kali dalam air steril, dan kemudian dikocok untuk menghilangkan
kelebihan air. Ini dilakukan untuk mencerminkan prosedur yang
digunakan untuk sanitasi permukaan. Metode di atas dilakukan dalam
lemari Biosafety Level 2. Semua daun pada tanaman diangkat secara
aseptik, ditimbang, dan dimasukkan ke dalam kantong Whirl-Pak steril
(Nasco, Fort Atkinson, WI) yang mengandung TSB-Amp dengan volume
dua kali lipat lebih besar dari berat selada. Sampel dihomogenkan baik
dengan tangan atau di perut. Sebuah 100-ml volume dilapisi permukaan
pada TSA-Amp. Pelat diinkubasi pada suhu 37kamuC selama 24 jam, dan
kemudian diterangi dengan sinar UV, dan koloni yang mengekspresikan
GFP dihitung. Homogenat sampel yang tersisa juga diinkubasi pada suhu
37kamuC selama 24 jam, dan 100-ml sampel yang diperkaya yang
disebar pada TSA-Amp hanya jika tidak adaE. coliKoloni O157:H7 muncul
setelah pelapisan langsung homogenat. Pelat disinari dengan sinar UV,
dan koloni yang mengekspresikan GFP diidentifikasi.
Sampel tanah komposit (10 g) dikumpulkan pada setiap hari sampel
untuk semua perlakuan. Sampel tanah dimasukkan ke dalam steril
2310 MOOTIAN ET AL. J. Food Prot., Vol. 72, No. 11

TABEL 1.Kontaminasi tanaman selada berumur 12 hari, berdasarkan pengayaan sampel setelah terpapar tanah atau tanah yang diubah pupuk kandang yang
terkontaminasi denganEscherichia coliO157:H7

tingkatEscherichia coliO157:H7sebuah:
Hari
Perlakuan Permukaan diperiksa pasca pajanan 101CFU/g 102CFU/g 103CFU/g 104CFU/g

Tanah Total 1 NDb 0/6 3/6 6/6

10 ND 4/6 5/6 6/6
20 ND 1/6 0/6 1/6
30 ND 1/6 0/6 1/6
Intern 1 0/6 0/6 4/6 3/6
10 0/6 0/6 0/6 0/6
20 0/6 0/6 0/6 0/6

Diunduh dari http://meridian.allenpress.com/jfp/article-pdf/72/11/2308/1680125/0362-028x-72_11_2308.pdf oleh pengguna Indonesia pada 12 Oktober 2022

30 0/6 0/6 0/6 0/6
Pupuk Total 1 4/6 4/6 4/6 4/6
10 0/6 4/6 5/6 0/6
20 1/6 1/6 0/6 4/6
30 0/6 0/6 0/6 0/6
Intern 1 2/6 2/6 3/6 6/6
10 0/6 0/6 0/6 0/6
20 0/6 0/6 0/6 0/6
30 0/6 0/6 0/6 0/6

sebuahSampel diuji positif dengan pengayaan di TSB-Amp, sebagaimana ditentukan oleh pelapisan permukaan pada TSA-Amp. Nilai adalah bilangan positif
tanaman/jumlah tanaman yang diuji.
bND, tidak ditentukan.

Kantong Whirl-Pak berisi 10 ml TSB-Amp. Sampel
dihomogenkan dengan perut, dan 100-ml volume dilapisi
permukaan pada TSA-Amp. Pelat dan sampel homogenat yang
tersisa diinkubasi pada suhu 37kamuC selama 24 jam. Pelat
disinari dengan sinar UV, dan koloni yang mengekspresikan
GFP dihitung. Pelapisan dari kultur pengayaan, inkubasi pelat,
dan jumlah pelat dilakukan seperti dijelaskan di atas.
HASIL DAN DISKUSI
Hasil penelitian yang membahas persistensi prapanen
dan lokasi (internal atau eksternal) patogen manusia pada
sayuran berdaun hijau dan tanaman lainnya seringkali
bertentangan. Kesulitan dalam mendeteksiE. coliO157:H7 di
lingkungan menunjukkan bahwa jika ada, populasinya
sangat rendah (5, 11).Peneliti menyelidiki interaksi antara
tanaman pangan dan patogen bawaan makanan enterik
menggunakan tingkat patogen target yang urutan besarnya
lebih besar dari apa yang diharapkan di lingkungan. Kami
menggunakan level rendah (101, 102, 103, dan 104CFU) dariE.
coliO157:H7 untuk menyelidiki kontaminasi selama
pertumbuhan ca. 800 tanaman selada muda dan dewasa.
Tabel 1 merangkum jumlah tanaman selada muda yang
positifE. coliO157:H7 setelah ditransplantasikan pada umur
12 hari ke dalam tanah atau tanah yang telah diolah yang
terkontaminasi patogen tingkat rendah. Hasil menunjukkan
bahwa sekitar 22% tanaman positif untukE. coliO157:H7.
Sekitar 7% dari tanaman yang disterilisasi permukaan
positif untuk patogen, menunjukkan sel-sel dilindungi di
lokasi permukaan atau bawah permukaan. Ada juga
kemungkinan bahwa sel-sel berada di lokasi yang dilindungi
pada permukaan daun dan dengan demikian, bertahan dari
perlakuan sanitasi permukaan. Hasil serupa terjadi pada
tanaman yang diairi dengan air yang terkontaminasi (Tabel
2). Semua tanaman kontrol negatif untukE. coliO157:H7.
Kemampuan patogen bawaan makanan enterik seperti:E. coliO157:H7
untuk bertahan hidup di bawah kondisi lingkungan sebagian besar tidak
diketahui. Penelitian menunjukkan bahwaE. coliO157:H7 dapat bertahan hidup
di tanah, pupuk kandang, dan air untuk waktu yang lama
(1).Dalam studi yang menyelidiki hubungan patogen manusia
dengan tanaman pangan, tanaman ditanam di tanah, sistem
hidroponik, atau sistem gnotobiotik yang mengandung hingga 108
CFU/g patogen target—tingkat yang jauh melebihi yang dilaporkan
ditemukan di alam (2, 7, 10, 15, 16, 18).Kultivar yang digunakan dan
umur tanaman yang diuji seringkali berbeda sehingga tidak dapat
dibandingkan secara langsung. Namun, kesimpulan yang diambil
dari studi tersebut adalah bahwaE. coliO157:H7 pada kepadatan
tinggi (108CFU/g) terbentuk pada akar dan jaringan tanaman yang
dapat dimakan, sedangkan pada kepadatan rendah (102ke 104CFU/
g), kolonisasi relatif rendah.E. colijumlah dalam penelitian ini tetap
di bawah tingkat deteksi bahkan pada bibit yang ditransplantasikan
ke tanah yang mengandung 104CFUE. coliO157:H7/g (Tabel 1). Pada
akhir periode budidaya, 30 hari pasca pajanan, hanya 2 dari 42
sampel non-sterilisasi permukaan yang positif, berdasarkan
pengayaan mikrobiologi (Tabel 1).E. coli O157:H7 tidak diperoleh
kembali dari jaringan daun yang disterilkan permukaan. Tanaman
dewasa, seperti tanaman berumur 42 hari, memiliki sistem akar
sekunder yang berkembang dengan baik, yang dapat
meningkatkan kemungkinan interaksi dengan bakteri di dalam
tanah.
Kemampuan mikroba untuk berinteraksi dengan sistem akar
tanaman kemungkinan besar dipengaruhi oleh banyak variabel.
Patogen enterik dapat memasuki tanaman melalui sambungan akar
cabang dan ujung akar (13).Namun, kemampuan bakteri yang
terkait dengan partikel tanah atau komponen pupuk kandang untuk
berinteraksi dengan sistem akar tanaman mungkin terbatas. Pada
penelitian ini tidak dilakukan analisis mikrobiologi pada jaringan
akar.E. coliditemukan dari jaringan akar yang disterilkan
permukaan, tetapi tidak dari dalam daun, yang berumur 62 hari
J. Food Prot., Vol. 72, No. 11 TRANSFERE. COLIO157:H7 UNTUK TANAMAN SELATAN 2311

MEJA 2.Kontaminasi tanaman selada umur 12 hari, berdasarkan pengayaan sampel setelah terpapar air irigasi yang terkontaminasi
Escherichia coliO157:H7

tingkatEscherichia coliO157:H7sebuah:
Hari
Perlakuan Permukaan diperiksa pasca pajanan 101CFU/g 102CFU/g 103CFU/g 104CFU/g

Air Total 1 0/6 0/6 1/6 3/6

10 3/6 5/6 4/6 3/6
20 0/6 1/6 0/6 0/6
30 6/6 1/6 0/6 1/6
Intern 1 0/6 0/6 0/6 0/6
10 1/6 1/6 0/6 0/6
20 0/6 4/6 0/6 0/6

Diunduh dari http://meridian.allenpress.com/jfp/article-pdf/72/11/2308/1680125/0362-028x-72_11_2308.pdf oleh pengguna Indonesia pada 12 Oktober 2022

30 0/6 0/6 0/6 0/6

sebuahSampel diuji positif dengan pengayaan di TSB-Amp, sebagaimana ditentukan oleh pelapisan permukaan pada TSA-Amp. Nilai adalah bilangan positif
tanaman/jumlah tanaman yang diuji.

tanaman bayam yang dibudidayakan di tanah yang tercemar
E.coli (18).Namun, pengayaan mikrobiologi sampel
jaringan daun tidak dilakukan; tingkat patogen yang
rendah mungkin ada dan tidak terdeteksi.
Bakteri dalam air irigasi permukaan mungkin pada awalnya
memiliki kesempatan yang lebih besar untuk berinteraksi dengan
sistem akar saat air dan bakteri mengalir melalui lapisan tanah.
Dalam penelitian ini, tanaman berumur 12 hari ditransplantasikan
ke tanah pot segar dan selanjutnya diairi permukaan dengan 20 ml
air yang mengandung 101, 102, 103, atau 104CFUE. coli O157:H7/ml.
Sebanyak delapan sampel (tanaman) non-sterilisasi permukaan
yang dikumpulkan 30 hari setelah pajanan air irigasi yang
terkontaminasi positif untukE. coliO157:H7 (Tabel 2); patogen
terdeteksi di semua sampel tanah setelah pengayaan (data tidak
ditampilkan). Penting untuk ditegaskan kembali bahwa, dalam
penelitian ini, daun tidak dicegah untuk menyentuh tanah, sehingga
menghilangkan serapan akar sebagai satu-satunya cara di mana
jaringan daun dapat terkontaminasi. Korelasi yang jelas antara
tingkat patogen di tanah atau air irigasi dengan kontaminasi
jaringan tanaman tidak terbukti (Tabel 1 sampai 4). Memang, untuk
beberapa titik sampel, lebih banyak tanaman yang terpapar 101
dibandingkan dengan 104E. coliO157:H7 secara mikrobiologis positif
untuk
patogen. Sekitar, 55, 14, dan 9% sampel jaringan yang
disterilisasi permukaan (5 menit) dari tanaman selada muda
yang terpapar 108, 106, dan 104CFUE. coliO157:H7, masing-
masing, positif ketika dipanen 9 hari atau lebih awal pasca
pajanan (15).
Ada perbedaan morfologi, perkembangan, dan anatomi yang
mencolok dalam sistem akar tanaman saat mereka dewasa (17).
Perbedaan ini dapat mempengaruhi kemampuan mikroba enterik untuk
berinteraksi, memasuki akar tanaman, dan melakukan perjalanan ke
jaringan daun. Dalam penelitian ini, tanaman berumur 30 hari
ditransplantasikan ke tanah (tanah sendiri atau tanah yang diubah
pupuk kandang) yang terkontaminasi denganE. coliO157:H7. Selama
transplantasi, perawatan dilakukan untuk mencegah kerusakan pada
sistem akar tanaman. Patogen bertahan di tanah selama periode
percobaan 15 hari.E. coliO157:H7 diperoleh dari 39% dari semua non-
sterilisasi permukaan dan 11% dari semua sampel tanaman yang
disterilkan permukaan yang telah dibudidayakan selama 15 hari
pascatransplantasi (Tabel 3). Hampir 63% tanaman (tidak disterilkan
permukaan) yang telah dibudidayakan selama 15 hari setelah irigasi
dengan air yang terkontaminasi positif untukE. coliO157:H7 (Tabel 4),
sedangkan hanya 13% dari tanaman yang disterilisasi permukaan yang
positif untuk patogen target. Terlepas dari skenario eksposur,E. coli
O157:H7 adalah

TABEL 3.Kontaminasi tanaman selada berumur 30 hari, berdasarkan pengayaan sampel setelah terpapar tanah atau tanah yang diubah pupuk kandang yang
terkontaminasi denganEscherichia coliO157:H7

tingkatEscherichia coliO157:H7sebuah:
Hari
Perlakuan Permukaan diperiksa pasca pajanan 101CFU/g 102CFU/g 103CFU/g 104CFU/g

Tanah Total 1 0/6 3/6 5/6 5/6

15 1/6 2/6 1/6 2/6
Intern 1 0/6 0/6 0/6 0/6
15 2/6 2/6 0/6 0/6
Pupuk Total 1 NDb ND 1/6 1/6
15 ND ND 4/6 4/6
Intern 1 ND ND 0/6 0/6
15 ND ND 0/6 0/6

sebuahSampel diuji positif dengan pengayaan di TSB-Amp, sebagaimana ditentukan oleh pelapisan permukaan pada TSA-Amp. Nilai adalah bilangan positif
tanaman/jumlah tanaman yang diuji.
bND, tidak ditentukan.
2312 MOOTIAN ET AL.
TABEL 4.Kontaminasi tanaman selada berumur 30 hari, berdasarkan pengayaan sampel setelah terpapar air irigasi yang terkontaminasi
Escherichia coliO157:H7
Hari
Perlakuan Permukaan diperiksa pasca pajanan 101CFU/g
Air Total 1 1/6
15 5/6
Intern 1 0/6
15 1/6
sebuahSampel diuji positif dengan pengayaan di TSB-Amp, sebagaimana ditentukan oleh pelapisan permukaan pada TSA-Amp. Nilai adalah bilangan positif
tanaman/jumlah tanaman yang diuji.
terkait dengan jaringan daun sedemikian rupa sehingga dilindungi dari
tindakan rezim sanitasi permukaan yang ketat. Penelitian diperlukan
untuk menentukan apakah sejumlah kecil bakteri yang bertahan hidup
yang terkait dengan jaringan selada mungkin mampu tumbuh selama
transportasi dan penyimpanan, dan dengan demikian menghadirkan
risiko kesehatan manusia.
Dalam studi ini,E. coliO157:H7 hanya terdeteksi setelah
pengayaan sampel, menunjukkan bahwa tingkat kontaminasi
jaringan selada sangat rendah meskipun patogen bertahan di
tanah selama periode pertumbuhan. Persentase yang lebih
besar (termasuk sampel total dan permukaan yang disanitasi)
dari tanaman dewasa dibandingkan dengan tanaman muda
adalah positif pada saat panen, meskipun semua tanaman
berumur ca. umur 45 hari saat panen. Hasil ini menunjukkan
bahwa kontaminasi selada pada waktu mendekati panen dapat
meningkatkan risiko patogen hadir pada tanaman saat panen.
Upaya masa depan harus berpusat pada menghindari
kontaminasi patogen manusia dari produk daripada berfokus
pada teknologi desinfeksi dengan kemanjuran terbatas.
PENGAKUAN
Pekerjaan ini didukung dengan dana dari Western Institute for
Food Safety and Security.
REFERENSI
1. Avery, SM, A. Moore, dan ML Hutchison. 2004. Nasib Escherichia coli
berasal dari kotoran ternak yang diendapkan langsung ke padang
rumput.Lett. aplikasi Mikrobiol.38:355–359.
2. Berstein, N., S. Sela, R. Pinto, dan M. Ioffe. 2007. Bukti
internalisasiEscherichia colike bagian udara jagung melalui
sistem akar.J. Makanan Prot.70:471–475.
3. Bihn, EA, dan RB Gravani. 2006. Peran praktik pertanian yang baik
dalam keamanan buah dan sayuran, hal. 21–53.DiKR Matthews
(ed.), Mikrobiologi produk segar. ASM Press, Washington, DC.
4. Brandl, MT, dan R. Amundson. 2008. Umur daun sebagai faktor risiko
kontaminasi selada denganEscherichia coliO157:H7 dan Salmonella
enterica. aplikasi Mengepung. Mikrobiol.74:2298–2306.
5. Cooley, M., D. Carychao, L. Crawford-Miksza, MT Jay, C. Myers,
C. Rose, C. Keys, J. Farrar, dan B. Mandrell. 2007. Insiden dan
pelacakanEscherichia coliO157:H7 di wilayah produksi produk
utama di California.PLOS SATU.DOI: 10.1371/journal.pone.0001159.
6. Delaquis, P., S. Bach, dan L.-D. Dinu. 2007. PerilakuEscherichia coliO157:H7
dalam sayuran berdaun.J. Makanan Prot.70:1966–1974.
J. Food Prot., Vol. 72, No. 11
tingkatEscherichia coliO157:H7sebuah:
102CFU/g 103CFU/g 104CFU/g
3/6 5/6 3/6
6/6 3/6 1/6
2/6 0/6 0/6
0/6 1/6 1/6
Diunduh dari http://meridian.allenpress.com/jfp/article-pdf/72/11/2308/1680125/0362-028x-72_11_2308.pdf oleh pengguna Indonesia pada 12 Oktober 2022
7. Franz, E., AA Visser, AD van Diepeningen, MM Klerks, AJ
Termoshuizen, dan AHC van Bruggen. 2007. Kuantifikasi
kontaminasi selada dengan ekspresi GFPEscherichia coli
O157:H7 danSalmonella entericaserovar Typhimurium.
Mikrobiol Makanan.24:106-112.
8. Heaton, JC, dan K. Jones. 2008. Kontaminasi mikroba buah dan
sayuran dan perilaku enteropatogen di filosfer: tinjauan.J.
Aplikasi Mikrobiol.104:613–626.
9. Hora, R., K. Warrnier, BJ Shelp, dan MW Griffiths. 2005.
InternalisasiEscherichia coliO157:H7 berikut gangguan
biologis dan mekanis pertumbuhan tanaman bayam.J.
Makanan Prot.68: 2506–2509.
10. Jablastone, J., K. Warrnier, dan MW Griffiths. 2005. Interaksi Escherichia coli
O157:H7,SalmonellaTyphimurium, danListeria monocytogenesdengan
tanaman yang dibudidayakan dalam sistem gnotobiotik.Int. J. Mikrobiol
Pangan.99:7–18.
11. Jay, MT, M. Cooley, D. Carychao, GW Wiscomb, RA Sweitzer,
L. Crawford-Miksza, JA Farrar, D. Lau, J. O'Connell, A. Millington, RV
Asmundson, ER Atwill, dan RE Mandrell. 2007.Escherichia coli
O157:H7 pada babi liar di dekat ladang bayam dan ternak, pantai
California tengah.muncul. Menulari. Dis.13:1908–1911.
12. Soderstrom, A., P. Osterberg, A. Linquist, B. Johnson, A. Lindberg,
S. Blide Ulander, C. Welinder-Olsson, S. Lofdahl, B. Kaijser, B. De Jong, S.
Kuhlmann-Berenzon, S. Boqvist, E. Eriksson, E. Szanto, S. Andersson, G.
Allestam, I. Hedenstrom, L. Ledet Muller, dan Y. Andersson. 2008. Besar
Escherichia coliWabah O157 di Swedia terkait dengan selada yang
diproduksi secara lokal.Patogen bawaan makanan. Dis.5: 339–349.
13. Solomon, EB, MT Brandl, dan RE Mandrell. 2006. Biologi patogen
bawaan makanan pada produk, hal. 55–83.DiKR Matthews (ed.),
Mikrobiologi produk segar. ASM Press, Washington, DC.
14. Salomo, EB, H.-J. Pang, dan KR Matthews. 2003. Kegigihan
Escherichia coliO157:H7 pada selada setelah irigasi semprot
dengan air yang terkontaminasi.J. Makanan Prot.66:2198–2202.
15. Solomon, EB, S. Yaron, dan KR Matthews. 2002. Transmisi dari
Escherichia coliO157:H7 dari kotoran yang terkontaminasi dan air
irigasi ke jaringan tanaman selada dan internalisasi selanjutnya.
aplikasi Mengepung. Mikrobiol.68:397–400.
16. Wachtel, MR, LC Whitehand, dan RE Mandrell. 2002. Prevalensi
Escherichia coliterkait dengan tanaman kubis yang secara tidak
sengaja diairi dengan air limbah yang diolah sebagian.J. Makanan
Prot.65:471–475.
17. Waisel, Y., A. Eschel, dan U. Kafkafi. 1996. Akar tanaman: bagian yang
tersembunyi, edisi ke-2. Marcel Dekker, Inc., New York.
18. Warriner, K., F. Ibrahim, M. Dickson, C. Wright, dan WM Waites. 2003.
InteraksiEscherichia colidengan menanam tanaman salad bayam.J.
Makanan Prot.66:1790–1797.