UJI KANDUNGAN PROTEIN TERLARUT PADA TANAMAN

Alat:
1. Mortar dan Pestle 6. Micro pipet dan tip
2. Tabung reaksi 7. Spektrofotometer
3. Rak tabung reaksi 8. Botol Semprot
4. Microcentrifuge tube (1,5 ml)
5. Spatula

Bahan:
1. Sampel tanaman 4. Akuades
2. 0,1M Phosphat Buffer (pH 7,0) 5. Bovine Serume Albumin (BSA)
3. Regen Bradford

Langkah Kerja
A. Ekstraksi Sampel
1. Siapkan alat dan bahan
2. Timbang sampel tanaman (0,5 gr)
3. Gerus sampel denan menggunakan mortar dan stampler disertai dengan penambahan
phosphate buffer sampai total volume 2ml (diberikan secara bertahap), homogenkan lalu
masukkan ke dalam microcentrifuge tube
4. Lakukan sentrifukasi dengan kecepatan 10.000 rpm selama 10 menit
5. Pindahkan supernatant yang didapat ke microcentrifuge tube yang baru, gunakan untuk
uji kandungan protein terlarut

B. Uji kandungan Protein Terlarut

1. Siapkan tabung reaksi dan beri label: blanko dan sampel (disertai dengan ulangan)
2. Pada tabung reaksi blanko, masukkan 50 ul akuades dan tambahkan 950 ul reagen
Bradford
3. Pada tabung reaksi sampel, masukkan 45 ul akuades, tambahkan 950 ul reagen Bradford,
dan tambahkan 5ul supernatant dari masing-masing sampel
4. Ukur absorbansi menggunakan spektofotometer dengan panjang gelombang 595 nm
5. Lakkang perhitungan kandungan protein menggunakan kurva standar dari BSA

C. Standar Kurva BSA

Y = 0,4976x + 0,2058
0,479 = 0,4976x + 0,2058
0,4976x = 0,479 - 0,2058
x = 0,549